JPH1062423A - 黄色ブドウ球菌感染の検査方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 短時間でかつ正確にその測定結果が得られ
て、その結果を利用しうるものであり、かつ外部からの
微量の汚染さえもない高感度の黄色ブドウ球菌感染の検
査方法を提供する。 【解決手段】 黄色ブドウ球菌外毒素を用いて、検体中
の黄色ブドウ球菌外毒素に対する抗体を酵素免疫学的方
法により検出および／または定量することからなる黄色
ブドウ球菌感染の検査方法、並びにその検査方法に用い
る黄色ブドウ球菌感染の検査用キット。 【効果】 従来法、例えば血液培養法と異なり短時間で
かつ正確にその測定結果が得られて、その結果を利用し
うるものであり、かつ測定されるべき血液検体が多量の
抗生物質剤を投与している患者由来のものといったこと
の影響も受けることのない、そして例えば遺伝子増幅法
と異なり外部からの微量の汚染さえもなく、高感度に黄
色ブドウ球菌感染を検査できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、黄色ブドウ球菌感
染の有無を、血液中に放出された黄色ブドウ球菌の産生
する外毒素を患者血液中より直接検出および／または定
量することにより検査する手段、さらに血液中に放出さ
れた黄色ブドウ球菌の産生する外毒素に対する抗体を患
者血液中より直接検出および／または定量することによ
り黄色ブドウ球菌感染の有無を判定する手段を提供する
ものである。さらに詳しくは、黄色ブドウ球菌外毒素に
対する抗体を用いたまたは黄色ブドウ球菌外毒素を用い
た免疫学的測定、特には酵素免疫学的測定方法、並びに
その方法のための試薬キットに関する。

【０００２】

【従来の技術】黄色ブドウ球菌感染症は発熱、嘔吐、血
圧低下、高度の下痢、多臓器障害等の症状を呈し、重症
化すれば死に至る病気である。近年になって、多くの抗
生物質剤に耐性を示すメチシリン耐性の黄色ブドウ球菌
が登場し、黄色ブドウ球菌感染症はより深刻な問題とな
っている。感染症の重症化を防ぐためには、感染の有無
の迅速な判定と、感染患者の重症度の正確な判定が必要
である。

【０００３】現在、黄色ブドウ球菌を含む細菌の感染の
有無は血液培養法（坂崎利一編集、細菌・真菌・原虫用
培地マニュアル、日水製薬）を用いている。しかし、血
液培養法では培養時間が長く感染の有無を判定するまで
に１〜２日間要するという欠点を有し、細菌の感染が確
認された時点では既に患者の容態が悪化しており、判定
結果が意味をなさないことが多い。また、多量の抗生物
質剤を投与している患者では血液を希釈してからその培
養を行う必要があり、微量の微生物が血液中に存在して
いても検出されえない可能性がある。迅速かつ高感度に
細菌感染を検出する方法として、遺伝子増幅法（加藤郁
之進、蛋白質・核酸・酵素、Ｖｏｌ．３５、ｐ．２９５
７（１９９０）を用いた血液中の細菌遺伝子の検出を用
いる方法が試みられている。しかし、この方法において
も常在菌の一つである黄色ブドウ球菌の場合外部からの
微量の細菌遺伝子の混入により、非感染者においても陽
性判定される恐れが多く、この遺伝子増幅法は常在菌で
ある黄色ブドウ球菌による感染症の判定には問題があ
る。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】従来法、例えば血液培
養法と異なり短時間でかつ正確にその測定結果が得られ
て、その結果を臨床などに利用しうるものであり、かつ
測定されるべき血液検体が多量の抗生物質剤を投与して
いる患者由来のものといったことの影響も受けることが
ない、そして例えば遺伝子増幅法と異なり外部からの微
量の汚染さえもない高感度の黄色ブドウ球菌感染の検査
方法を提供するにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明はトキシックショ
ックシンドロームトキシン−１を用いて、検体中のトキ
シックショックシンドロームトキシン−１に対する抗体
を酵素免疫学的方法により検出および／または定量する
ことを特徴とする黄色ブドウ球菌感染の検査方法に関す
る。また本発明はその検査方法に用いる黄色ブドウ球菌
感染の検査用キットに関する。

【０００６】本発明は、血液、尿、喀痰、髄液、胸水、
腹水、膿等の体液成分からなる検体中の黄色ブドウ球菌
外毒素に対する抗体を免疫学的測定法により、検出およ
び／または定量し、黄色ブドウ球菌感染の有無を迅速に
かつ高感度に判定するものであり、また黄色ブドウ球菌
感染者の重症度を判定する免疫学的測定法を提供してい
る。

【０００７】本発明で利用する黄色ブドウ球菌外毒素
は、外毒素産生菌の培養上清より精製される天然型外毒
素または組換えＤＮＡ技術によって製造される遺伝子組
換え型外毒素あるいはそれらと実質的に同等の活性を持
つもののいずれもが使用できる。特に、黄色ブドウ球菌
外毒素に対する抗体を免疫学的測定法により、検出ある
いは定量するために利用する黄色ブドウ球菌外毒素とし
ては、この様にして得られる黄色ブドウ球菌外毒素を、
イオン交換クロマトグラフィー、クロマトフォーカシン
グ、ゲル濾過、アフィニティークロマトグラフィーなど
あるいはそれらを組合わせて高度に精製して、抗黄色ブ
ドウ球菌外毒素抗体以外の抗体との反応性を低下せしめ
たものが挙げられる。こうして得られた黄色ブドウ球菌
外毒素を用いることにより、人血清あるいは血漿を用い
た場合においても抗黄色ブドウ球菌外毒素抗体の抗体価
を精確でかつ高い感度で検知しうるものが得られる。

【０００８】本発明で利用する黄色ブドウ球菌外毒素に
対する抗体は、黄色ブドウ球菌外毒素により動物を免疫
して得られる抗血清から精製されるポリクローナル抗体
あるいは黄色ブドウ球菌外毒素により免疫された動物か
ら取り出した抗体産生細胞をミエローマ細胞等の増殖細
胞と融合せしめ、得られた融合細胞から産生されるモノ
クローナル抗体のいずれもが使用できる。この様にして
得られる各種抗体のうち、抗原に対する親和性が高く、
血漿による妨害の影響の少ないものを選択することによ
り、人血清あるいは血漿を用いた場合においても黄色ブ
ドウ球菌外毒素を高い感度で検知しうるものが得られ
る。

【０００９】（１）ポリクローナル抗体 黄色ブドウ球菌外毒素に対するポリクローナル抗体は、
人以外の動物、例えばウサギ、ヤギ、ヒツジなどの種々
の動物に抗原となる黄色ブドウ球菌外毒素を感作して得
られる抗血清を材料として塩析、イオン交換クロマトグ
ラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、ゲル濾
過など種々の手段で精製することにより得ることが出来
る。抗原で動物を感作するにあたっては、一定の期間を
置いて複数回感作することをしてもよい。

【００１０】免疫に用いることが出来る抗原としては、
黄色ブドウ球菌由来天然型黄色ブドウ球菌外毒素および
組換えＤＮＡ技術によって製造された遺伝子組換え型黄
色ブドウ球菌外毒素のいずれもが使用できる。

【００１１】（２）モノクローナル抗体 黄色ブドウ球菌外毒素に対するモノクローナル抗体は、
常法に従い抗原として黄色ブドウ球菌外毒素を用いて作
製することが出来る。例えば、マウス等の適当な動物を
黄色ブドウ球菌外毒素で免疫した後、その動物の脾臓細
胞をミエローマ細胞と融合することで得られるハイブリ
ドーマの中から黄色ブドウ球菌外毒素に特異的に結合す
る抗体を産生するクローンをＥＬＩＳＡ等の手法を用い
て選択する。次に、得られたハイブリドーマを培養し、
その培養上清またはハイブリドーマをマウス等の適当な
動物に接種して得られる腹水を材料として、モノクロー
ナル抗体を種々の手段で精製することにより得ることが
出来る。

【００１２】本発明で利用する免疫学的測定方法として
は、サンドイッチ法、競合法等種々の公知の測定原理を
用いることができ、例えば酵素免疫分析法（ＥＩＡ）、
放射能標識免疫分析法（ＲＩＡ）、あるいは蛍光免疫分
析法（ＦＩＡ）等の方法が挙げられる。ここで標識物質
としては、酵素が感度の点で好ましく用いられる。標識
物質を結合せしめるにあたっては、種々の公知の方法を
適用することができ、例えばグルタルアルデヒド、コハ
ク酸イミドエステル誘導体、反応性トリアジン等を結合
剤として利用したものが挙げられる。また、固相担体へ
の抗体あるいは外毒素の固定化にあたっては、同様の種
々の公知の方法を適用することができ、物理的吸着によ
る方法、あるいは例えばグルタルアルデヒド、コハク酸
イミドエステル誘導体、反応性トリアジン等を結合剤と
して利用したものが挙げられる。

【００１３】本発明に従った検体中の黄色ブドウ球菌外
毒素または抗黄色ブドウ球菌外毒素抗体を免疫学的方法
により検出する方法においては、感染後抗体価が上昇す
るまでには時間を要するため、感染の有無を感染初期に
判定する場合は黄色ブドウ球菌の外毒素の検出がより好
ましく、一方局所感染や微量の毒素しか血液中に遊離し
ない場合は毒素に対する抗体の検出が感染の判定にはよ
り好ましい。さらに、患者の重症度を判定する場合に
は、感染した細菌量や細菌の毒素産生量と対応する血液
中の毒素量の定量と、患者側の毒素に対する抵抗力を反
映する１因子である抗毒素抗体価を同時に測定すること
が好ましい。また、本発明では検体は血液などの体液を
そのまま用いることもできるし、ＰＢＳなどの希釈液に
より１〜１０，０００倍、より好ましくは１〜１００倍
に希釈して用いることもできる。また、細菌毒素の定量
により細菌感染や患者の重症度を判定する際には、毒素
の定量感度としては１０ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましく
は１ｎｇ／ｍｌ以下の毒素濃度が定量可能であることが
必要である。

【００１４】本発明に従った免疫学的測定方法として、
サンドイッチ法を用いた場合、固相化された抗体あるい
は外毒素に検体中の黄色ブドウ球菌外毒素または抗黄色
ブドウ球菌外毒素抗体を結合させ、更に標識抗体を反応
させることにより、固相上に３〜４分子のサンドイッチ
複合体を形成させる。最後に、酵素基質を加え固相上の
酵素活性を測定することにより、検体中の黄色ブドウ球
菌外毒素濃度を定量する。固相担体としては、マイクロ
プレート、ビーズ、チューブ等が使用可能である。

【００１５】競合法を用いた場合には、固相化された抗
体あるいは外毒素に検体中の黄色ブドウ球菌外毒素また
は抗黄色ブドウ球菌外毒素抗体を結合させる際に、標識
した黄色ブドウ球菌外毒素あるいは標識した抗黄色ブド
ウ球菌外毒素抗体を競合的に結合させる。最後に、酵素
基質を加え固相上の酵素活性を測定することにより、検
体中の黄色ブドウ球菌外毒素あるいは抗黄色ブドウ球菌
外毒素抗体濃度を定量する。固相担体としては、マイク
ロプレート、ビーズ、チューブ等が使用可能である。

【００１６】凝集法を用いた場合には、ラテックス、ビ
ーズ等のマイクロビーズ上に固相化された抗体あるいは
外毒素に検体中の黄色ブドウ球菌外毒素または抗黄色ブ
ドウ球菌外毒素抗体を結合させ、マイクロビーズの凝集
反応の程度により、検体中の黄色ブドウ球菌外毒素ある
いは抗黄色ブドウ球菌外毒素抗体の濃度を定量する。上
記免疫学的測定方法の中でも、感度の点で特にサンドイ
ッチ法が好ましく用いられる。

【００１７】また、マイクロプレートやマイクロビーズ
などの適当な担体に固相化した抗体または毒素、標識し
た抗体または毒素や毒素、酵素基質および標準物質とな
る既知濃度の黄色ブドウ球菌外毒素または抗黄色ブドウ
球菌外毒素抗体等を適宜組み合わせて、感染の判定に用
いるキットが構成される。

【００１８】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に
説明する。

【００１９】実施例１ （１）抗黄色ブドウ球菌外毒素モノクローナル抗体の作
製 黄色ブドウ球菌外毒素の一つであるトキシックショック
シンドロームトキシン−１（以下ＴＳＳＴ−１と略す）
に対するモノクローナル抗体の作製法を以下に示す。

【００２０】黄色ブドウ球菌培養上清２０００ｍｌより
ジエチルアミノエチル−トヨパ−ルを用いたイオン交換
クロマトグラフおよびポリバッファー交換体ＰＢＥ９４
を用いたクロマトフォーカスカラムで精製したＴＳＳＴ
−１、５μｇをフロイント完全アジュバントと共に雌Ｂ
ＡＬＢ／ｃマウスの腹腔内に注射し、さらに、２週間
後、フロイント不完全アジュバントを腹腔内注射し、さ
らに、３０日後に上記精製ＴＳＳＴ−１、５０μｇをフ
ロイント不完全アジュバントと共に腹腔内注射すること
により免疫した。その後、常法により免疫したマウスの
脾細胞をミエローマ細胞とポリエチレングリコ−ルを用
いて融合させた。

【００２１】このようにして作製したハイブリドマーよ
り抗ＴＳＳＴ−１抗体産生細胞を限界希釈法（安東民衛
編集、単クローン抗体実験マニュアル、講談社サイエン
ティフィック）とＴＳＳＴ−１を用いたＥＬＩＳＡによ
り２回スクリーニングし、モノクローナルなクローンと
した。このクローンの培養上清よりプロティンＧカラム
を用いてモノクローナル抗体を精製した。

【００２２】（２）抗黄色ブドウ球菌外毒素ポリクロー
ナル抗体の作製 （１）で用いた精製ＴＳＳＴ−１を用いて抗ＴＳＳＴ−
１ポリクローナル抗体を以下の方法に従って作製した。

【００２３】ニュージーランド白色兎を精製ＴＳＳＴ−
１・フロイント完全アジュバント混合物で免役した。免
疫量（精製ＴＳＳＴ−１量）および免疫の間隔は、１回
目２５μｇ、１週間後５０μｇ、２週間後１００μｇ、
３週間後１００μｇ、５週間後１００μｇで行い、７週
間後に心臓から採血を行った。抗体の精製は、抗血清中
よりＴＳＳＴ−１固定化カラム（本カラムは上記（１）
で得られた精製ＴＳＳＴ−１を常法に従ってシアノゲン
ブロマイド活性化セルロースビーズに固定化して得られ
る担体）を用いたアフィニティーカラムにより行った。

【００２４】（３）酵素免疫法（競合法）による人血漿
中の黄色ブドウ球菌外毒素の定量 酵素免疫法（競合法）による人血漿中のＴＳＳＴ−１の
濃度の定量法について下記に示す。

【００２５】９６穴マイクロプレートの各ウェルに０．
７μｇ／ｍｌのウサギ抗ＴＳＳＴ−１ポリクローナル抗
体を含むＰＢＳ溶液１００μｌを入れ、４℃で１晩放置
し抗体の固相化を行った。０．５％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液
でブロッキングを行い、その後各ウェルを洗浄液（０．
０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）で洗浄し、適当量
のＴＳＳＴ−１およびビオチン標識したＴＳＳＴ−１
（１００ｐｇ／ｍｌ）を含む反応緩衝液（０．５％ＢＳ
Ａ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、３３％ヒト血漿）１０
０μｌを入れ、２５℃で１時間反応を行った。洗浄後さ
らに０．６μｇ／ｍｌアビジン化ＨＲＰ、０．５％ＢＳ
Ａ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳを１００μ
ｌを入れ、２５℃１５分間反応を行った。洗浄後、基質
液（０．２ｍｇ／ｍｌＴＭＢ、０．００６％過酸化水素
を含む０．１Ｍクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５）
１００μｌを用い発色反応を、２５℃３０分間行った。
上記反応は全て振盪して行った。最後に、１００μｌの
１Ｎ硫酸を添加し反応を停止し、発色を４５０ｎｍ（対
照波長５９５ｎｍ）の吸光度で測定した。この方法に従
って測定を行い、得られた標準曲線および最低検出感度
の算出結果を図１に示す。標準曲線は、０．１〜１ｎｇ
／ｍｌの範囲で良好な直線性を示し、良好な結果であっ
た。

【００２６】なお、上記で用いたビオチン標識したＴＳ
ＳＴ−１は、実施例１で示した方法により得た精製ＴＳ
ＳＴ−１にスルホスクシンイミジル−６−（ビオチンア
ミド）を反応させて、ビオチンを結合させることにより
得られた。他の黄色ブドウ球菌外毒素に付いても、抗体
を該当する外毒素に対する抗体に置き換えることによ
り、同様の測定系で検出定量することが可能である。

【００２７】実施例 ２ 酵素免疫法（サンドイッチ法）による人血漿中の黄色ブ
ドウ球菌外毒素の定量 酵素免疫法（サンドイッチ法）による人血漿中の黄色ブ
ドウ球菌外毒素の一つであるＴＳＳＴ−１の濃度の定量
法に付いて下記に示す。

【００２８】９６穴マイクロプレートの各ウェルに０．
７μｇ／ｍｌの実施例１で用いたウサギ抗ＴＳＳＴ−１
ポリクローナル抗体を含むＰＢＳ溶液１００μｌを入
れ、４℃で１晩放置し抗体の固相化を行った。０．５％
ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液でブロッキングを行い、その後各ウ
ェルを洗浄液（０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢ
Ｓ）で洗浄し、適当量のＴＳＳＴ−１を含む反応緩衝液
（０．５％ＢＳＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、３３％
ヒト血漿）１００μｌを入れ、２５℃で１時間反応を行
った。各ウェルを洗浄後、０．１μｇ／ｍｌの実施例１
で用いたビオチン標識モノクローナル抗体液を１００μ
ｌを入れ、２５℃で１時間反応を行い、洗浄後さらに
０．６μｇ／ｍｌアビジン化ＨＲＰ、０．５％ＢＳＡ、
０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳを１００μｌを
入れ、２５℃１５分間反応を行った。洗浄後、基質液
（０．２ｍｇ／ｍｌＴＭＢ、０．００６％過酸化水素を
含む０．１Ｍクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５）１
００μｌを用い発色反応を、２５℃３０分間行った。上
記反応は全て振盪して行った。最後に、１００μｌの１
Ｎ硫酸を添加し反応を停止し、発色を４５０ｎｍ（対照
波長５９５ｎｍ）の吸光度で測定した。

【００２９】この方法に従って測定を行い、得られた標
準曲線および最低検出感度の算出結果を図２に示す。標
準曲線は、０−１０００ｐｇ／ｍｌの範囲で良好な直線
性を示し、また、バックグラウンドレベル（０ｐｇ／ｍ
ｌでの発色）も０．０２７と低く良好な結果であった。
０ｐｇ／ｍｌの吸光度の平均値＋２ＳＤより算出した最
低検出感度は血漿の有無に関わらず、１５ｐｇ／ｍｌと
なった。他の黄色ブドウ球菌外毒素に付いても、抗体を
該当する外毒素に対する抗体に置き換えることにより、
同様の測定系で検出定量することが可能である。

【００３０】実施例３ 黄色ブドウ球菌感染患者血液中の外毒素濃度と血液培養
結果との対応 臨床症状より黄色ブドウ球菌感染を疑われた患者および
健常者の血清中の実施例２に示した方法を用いて測定し
たＴＳＳＴ−１の濃度と常法による血液培養の結果を図
３に示した。図３は縦軸には実施例２の方法により測定
したＴＳＳＴ−１の濃度を、横軸には健常者あるいは患
者の血液培養による黄色ブドウ球菌の陽陰性を示した。
血液培養において黄色ブドウ球菌陽性の患者における血
液中のＴＳＳＴ−１の濃度は健常者と比較して明らかに
高値を示し、ＴＳＳＴ−１の濃度と細菌感染の相関が示
された。さらに、症状的には黄色ブドウ球菌感染が疑わ
れた症例において、血液培養は陰性でも、血液中のＴＳ
ＳＴ−１の濃度は健常値よりも高く、抗生剤等の影響に
より血液培養では確認されなかった黄色ブドウ球菌の感
染が毒素検出により可能になったことが示された。

【００３１】実施例４ 抗黄色ブドウ球菌外毒素抗体の血液濃度と血液培養結果
との対応 酵素免疫法による人血漿中の黄色ブドウ球菌外毒素の一
つであるＴＳＳＴ−１対する抗体の濃度の定量法に付い
て下記に示す。

【００３２】９６穴マイクロプレートの各ウェルに０．
５μｇ／ｍｌの実施例１で精製したＴＳＳＴ−１を含む
ＰＢＳ溶液１００μｌを入れ、４℃で１晩放置し抗原の
固相化を行った。０．５％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液でブロッ
キングを行い、その後各ウェルを洗浄液（０．０５％Ｔ
ｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）で洗浄し、適当量の患者血
漿を１００倍、希釈液（０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、Ｐ
ＢＳ）で希釈した溶液１００μｌを入れ、２５℃で１時
間反応を行った。各ウェルを洗浄後、０．１μｇ／ｍｌ
のビオチン標識抗ヒトイムノグロブリン抗体液を１００
μｌを入れ、２５℃で１時間反応を行い、洗浄後さらに
０．６μｇ／ｍｌアビジン化ＨＲＰ、０．５％ＢＳＡお
よび０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ１００μｌ
を入れ、２５℃１５分間反応を行った。洗浄後、基質液
（０．２ｍｇ／ｍｌＴＭＢ、０．００６％過酸化水素を
含む０．１Ｍクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５）１
００μｌを用い発色反応を、２５℃３０分間行った。上
記反応は全て振盪して行った。最後に、１００μｌの１
Ｎ硫酸を添加し反応を停止し、発色を４５０ｎｍ（対照
波長５９５ｎｍ）の吸光度で測定した。

【００３３】この方法に従って測定を行い、得られた吸
光度をそのまま血液中のＴＳＳＴ−１の力価として試料
溶液中の濃度を算出する。この方法に従って測定を行
い、血液中の抗ＴＳＳＴ−１抗体の力価を求めた。また
同時に、検体に対して従来法である血液培養（坂崎利一
編集、細菌・真菌・原虫用培地マニュアル、日水製薬）
を行い、その結果を比較して図４に示した。図４は縦軸
には検体中の抗ＴＳＳＴ−１抗体価を、横軸には健常者
あるいは患者の血液培養による黄色ブドウ球菌の陽陰性
を示した。黄色ブドウ球菌感染者においては明らかに抗
ＴＳＳＴ−１抗体価が非感染者に比較して高値を示して
おり、外毒素に対する抗体価が細菌感染と相関している
ことが示される。

【００３４】実施例５ 黄色ブドウ球菌外毒素の濃度と患者の転帰との対応 実施例２の方法に従って測定したＴＳＳＴ−１濃度と黄
色ブドウ球菌感染患者の転帰の関係を図５に示した。回
復した患者に比較して、死亡した患者では血液中のＴＳ
ＳＴ−１濃度が明らかに高値を示していることが示さ
れ、血液中のＴＳＳＴ−１濃度と患者の重症度の間の相
関が示された。

【００３５】

【発明の効果】本発明により、黄色ブドウ球菌感染症に
おいて、患者血液中の黄色ブドウ球菌外毒素を１ｎｇ／
ｍｌ以下の濃度において検出または／および定量するこ
とにより、血液培養法よりも迅速に、ＤＮＡ増幅法を利
用した診断法よりも外来汚染の影響が少なく、かつ感染
菌の産生毒素型も同時に測定できるところの黄色ブドウ
球菌感染の判定が可能になり、同時に、黄色ブドウ球菌
感染症患者の重症度の判定の１手段を提供できるように
なった。

【図面の簡単な説明】

【図１】競合法による黄色ブドウ球菌外毒素ＴＳＳＴ−
１定量ＥＬＩＳＡの評価 ＴＳＳＴ−１濃度０．１〜１ｎｇ／ｍｌの範囲でＥＬＩ
ＳＡの発色とＴＳＳＴ−１濃度間には良好な相関が得ら
れた。

【図２】サンドイッチ法による黄色ブドウ球菌外毒素Ｔ
ＳＳＴ−１定量ＥＬＩＳＡの評価 ＴＳＳＴ−１濃度０〜１ｎｇ／ｍｌの範囲でＥＬＩＳＡ
の発色とＴＳＳＴ−１濃度間には良好な相関が見られ、
最低検出感度は１５．５ｐｇ／ｍｌと算出された。

【図３】血液中のＴＳＳＴ−１濃度と血液培養結果との
比較 縦軸には実施例４の方法により測定したＴＳＳＴ−１の
濃度を、横軸には健常者あるいは患者の血液培養による
黄色ブドウ球菌の陽陰性を示した。

【図４】血液中の抗ＴＳＳＴ−１抗体価と血液培養結果
との比較 縦軸には検体中の抗ＴＳＳＴ−１抗体価を、横軸には健
常者あるいは患者の血液培養による黄色ブドウ球菌の陽
陰性を示した。

【図５】ＴＳＳＴ−１濃度と患者の転帰との関係 縦軸に抗ＴＳＳＴ−１抗体濃度を横軸にＴＳＳＴ−１濃
度を示した。また○は死亡例、●は転帰が良好な例であ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 福山 真弓 神奈川県鎌倉市手広1111番地 東レ株式会 社基礎研究所内

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 トキシックショックシンドロームトキシ
   ン−１を用いて、検体中のトキシックショックシンドロ
   ームトキシン−１に対する抗体を酵素免疫学的方法によ
   り検出および／または定量することを特徴とする黄色ブ
   ドウ球菌感染の検査方法。
2. 【請求項２】 請求項１記載の検査方法に用いる黄色ブ
   ドウ球菌感染の検査用キット。