JPH10512886A - 環境エストロゲンを阻害する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 環境エストロゲンの阻害を必要とするヒト又は他の動物に、有効量の式（Ｉ） ［式中、Ｒ¹及びＲ³は、独立に水素、−ＣＨ₃、（ａ）又は（ｂ）（式中、Ａrは置換されていてもよいフェニルである）であり；Ｒ²は、ピロリジン、ヘキサメチレンイミノ、及びピペリジノからなる群から選択される］で示される化合物又はその薬学的に許容し得る塩若しくは溶媒和物を投与することを含んでなる、環境エストロゲンの作用を阻害する方法。

Description

【発明の詳細な説明】 環境エストロゲンを阻害する方法 エストロゲンは、ヒトの生理学において、広い、重要な機能を有する内因性ホ ルモンである。主として、このホルモンは、男性女性両方の生殖系に影響を及ぼ す。例えば、成人女性においては、妊娠及び授乳の過程においてエストロゲンは 欠くことができない。また、心臓発作及び骨粗鬆症の危険性を低減する。さらに 、出産前及び出産後早期におけるアンドロゲンに対するエストロゲンの比率は、 性的分化及び適当な生殖器官の適切な形成を調節する。エストロゲンはまた、乳 房及び子宮細胞の増殖、即ち癌に関連する。男性においては、エストロゲンは、 精子産生を調節し、異常に高い濃度は精子数の減少をもたらす。 近年、ヒト及び野生生物集団の、内因性エストロゲンと似た作用をもたらす、 製造された又は天然に存在する化学物質への暴露に対する関心が増加してきてい る。これらの物質は、殺虫剤、動物の健康製品、プラスチック、燃焼副産物、及 び植物（植物エストロゲン）を含む、様々な源に由来するものである。具体的な 例には、ゼラノール、ゲニステイン、クメストロール、ｏ,ｐ−ＤＤＴ、ケポン 、メトキシクロール、ゼアラレノン、ダイオキシン、ｐ−オクチルフェノール、 及びビスフェノール Ａが含まれる。一般に、この種の化合物は、環境エストロ ゲンと呼ばれており、女性化乳房［DiRaimondoら，N．Engl．J．Med.，302，108 9，（1980）］、性的早熟［Comas，Lancet，1299，（1982）］、低精子数［R．M ．Sharpeら，Lancet，341，1392，（1993）］、子宮内膜炎［S．E．Rierら，Fun dam．Appl．Toxicol.，31，423，（1993）］、及び乳癌［M．S．Wolffら，J．Na tl．Cancer Inst.，85，648，（1993）］を含む様々な病態に関わっている。 本発明は、必要とするヒト又は他の動物に、有効量の式（Ｉ） Ｒ²は、ピロリジン、ヘキサメチレンイミノ、及びピペリジノからなる群から 選択される］ で示される化合物及びその薬学的に許容し得る塩及び溶媒和物を投与することを 含んでなる、環境エストロゲンの作用を阻害する方法を提供する。 本発明は、２−フェニル−３−アロイルベンゾチオフェン（ベンゾチオフェン ）の選択された群、すなわち式（Ｉ）の化合物が、環境エストロゲン作用の阻害 に有用であるという発見に関するものである。特に、本発明の方法は、環境エス トロゲンの生殖系への作用を阻害することを包含する。 本発明により提供される使用の方法は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容 し得る塩若しくは溶媒和物の、環境エストロゲンの作用の阻害に効果的な用量を 、必要とするヒト又は他の動物に投与することによって実践される。「阻害」な る語は、一般に受け入れられている意味を含み、進行、重篤度の禁止（prohibit ing）、予防(preventing)、抑制(restraining)、及び緩和(slowing)、停止(stop ping)、若しくは逆転(reversing)、又は生じた症状若しくは影響の改善を包含す る。したがって、本発明の方法は、医学的治療及び／又は予防的な投与の両方を 適宜包含するものである。 ラロキシフェン、すなわち、Ｒ¹とＲ³が水素であり、Ｒ²が１−ピペリジニル である式（Ｉ）で示される化合物の塩酸塩である本発明の化合物は、中核をなす 調節分子である。ラロキシフェンは、エストロゲンレセプターに結合することが わかり、子宮組織とエストロゲン依存性乳癌を活性化するエストロゲンの能力を 阻止するという点において、その分子の機能と薬理は、抗エストロゲンのそれで あると当初考えられた。確かに、ラロキシフェンは、ある細胞中においては、エ ストロゲンの作用を阻止する。しかしながら、他のタイプの細胞においては、ラ ロキシフェンは、エストロゲンが活性化するのと同し遺伝子を活性化し、例えば 、骨粗鬆症、高脂質血症といった同じ薬理を呈する。その結果、ラロキシフェン は、アゴニスト−アンタゴニスト混在の特性を有する抗エストロゲンであるとい われてきた。ラロキシフェンが示す、エストロゲンとは異なる、この独特のプロ ファイルは、ラロキシフェン−エストロゲンレセプター複合体による様々な遺伝 子機能の独特の活性化及び／又は抑制が、エストロゲン−エストロゲンレセプタ ー複合体による遺伝子の活性化及び／又は抑制とは対照的であることによるもの であると、現在は考えられている。したがって、ラロキシフェンとエストロゲン は、同一のレセプターに作用し、競合するけれども、この両者による遺伝子調節 の結果得られるこの薬理学的な成果は、容易に予想することができないのであり 、各々にとって独特なものなのである。 一般に、本発明の化合物は、慣用の添加剤、希釈剤又は担体と共に調剤され、 そして錠剤に圧縮され、又は経口投与に便利なエリキシル剤又は液剤として調剤 され、あるいは筋肉内若しくは静脈内の経路で投与される。本発明の化合物は、 経皮投与でき、また、徐放性の剤型などに調剤してもよい。 本発明の方法に使用する化合物は、米国特許第４，１３３，８１４号、米国特 許第４，４１８，０６８号、及び米国特許第４，３８０，６３５号に記載のよう な、確立された手順にしたがって製造することができ、これらはすべて本明細書 の一部を構成する。一般に、６−ヒドロキシル基と２−（４−ヒドロキシルフェ ニル）基を有するベンゾ［ｂ］チオフェンで、製造工程を開始する。出発化合物 を、保護し、アシル化し、脱保護して式（Ｉ）の化合物を形成する。このような 化合物の製造例は、上記に述べた米国特許に記載されている。置換されているこ ともあるフェニルには、フェニル、及び１又は２の、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₁− Ｃ₄アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、クロロ、フルオロ、又はトリ（クロロ又 はフルオロ）メチルで置換されたフェニルが含まれる。 本発明の方法に使用される化合物は、広範囲の有機及び無機の酸及び塩基と薬 学上許容し得る酸及び塩基の付加塩を形成し、薬化学においてしばしば使用され る生理学的に許容し得る塩を含む。このような塩もまた、本発明の一部を構成す る。このような塩の形成に使用される典型的な無機の酸には、塩酸、臭化水素酸 、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、次リン酸などが含まれる。脂肪族のモノ 及びジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸及びヒドロ キシアルカン二酸、芳香族の酸、脂肪族及び芳香族のスルホン酸などの有機の酸 から誘導される塩もまた使用し得る。従って、このような薬学的上許容し得る塩 には、酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコル ビン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安 息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩 、ナフタレン−２−安息香酸塩、臭化物、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、β−ヒ ドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，４−二酸塩、カプリ ン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、ケイ皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩 、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸 塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、ニコチ ン酸塩、イソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩 、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、 プロピオル酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、セ バシン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫 酸塩、重亜硫酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−ブロモフェニル スルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロ キシエタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩 、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、キシレンスルホ ン酸塩、 酒石酸塩などが含まれる。好ましい塩は塩酸塩である。 薬学上許容し得る酸付加塩は、典型的には式（Ｉ）の化合物を、等モル又は過 剰量の酸と反応させることによって形成する。反応成分は一般に、ジエチルエー テル又はベンゼンなどの相互溶媒中で混合する。塩は普通、約１時間から１０日 以内に溶液から沈殿し、濾過によって分離するか又は慣用の方法によって溶媒を 除去し得る。 塩の形成に一般的に使用される塩基には、水酸化アンモニウム及びアルカリ及 びアルカリ土類金属の水酸化物、並びに脂肪族の第一級、第二級及び第三級アミ ン、脂肪族のジアミンが含まれる。付加塩の製造に特に有用な塩基には、水酸化 アンモニウム、炭酸カリウム、メチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミ ン及びシクロヘキシルアミンが含まれる。 薬学上許容し得る塩は一般に、それらが由来する化合物と比較すると溶解度が 増大しており、したがって、液体又はエマルジョンとしてより容易に調剤するこ とができる場合が多い。 医薬製剤は当技術分野で知られている手順により製造できる。例えば、化合物 を、慣用の添加剤、希釈剤、又は担体と共に調剤し、錠剤、カプセル剤、懸濁剤 、散剤などに形成することができる。このような製剤に適当な添加剤、希釈剤、 及び担体の例には次のものが含まれる：デンプン、糖類、マンニトール及びケイ 酸誘導体などの賦形剤及び展開剤；カルボキシメチルセルロース及び他のセルロ ース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、及びポリビニル‐ピロリドンなどの結合 剤；グリセリンなどの湿潤剤；炭酸カルシウム及び重炭酸ナトリウムなどの崩壊 剤；パラフィンなどの溶出遅延剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤 ；セチルアルコール、グリセリンモノステアラートなどの界面活性剤；カオリン 及びベントナイトなどの吸着担体；そして、タルク、ステアリン酸カルシウム、 ステアリン酸マグネシウム、及び固体のポリエチルグリコール類などの滑沢剤。 本発明の化合物はまた、便利な経口投与のためのエリキシル剤若しくは液剤、 又は、例えば筋肉、皮下又は静脈経路による非経口投与に適当な液剤として調剤 することができる。さらに本発明の化合物は、徐放性の剤型等としての製剤によ く適合する。この製剤は、腸管の特定の部分においてのみか又はその部分にて好 ましく、できるだけ一定期間活性成分を放出するように構成することができる。 例えばポリマー物質又はワックス類でコーティング、薬袋、及び保護マトリック スを製造し得る。 本発明にしたがって環境エストロゲンの作用を阻害するのに必要な、式（Ｉ） の化合物の具体的な投与量は、状態の重さ、投与経路、及び主治医によって決定 されるであろう関連する因子に依存する。一般に、受け入れられ、効果的である １日の投与量は、約０．１〜約１０００ｍg／日であり、より典型的には約５０ 〜約２００ｍg／日である。このような投与量を、必要とする患者に、１日に１ 回〜３回投与するが、患者の症状、少なくとも１つの症状を効果的に処置するの に必要な場合は、より頻繁に投与する。 ピペリジノ環等の塩基性の基を有する医薬の投与においては慣用であるように 、式（Ｉ）の化合物を酸付加塩の形態として投与することが通常好ましい。経口 投与によってこのような化合物を投与するのも都合良い。このような目的のため に、以下の経口投与剤形が有効である。 以下の製剤中、「活性成分」は式（Ｉ）の化合物を意味する。製剤１ ：ゼラチンカプセル剤 以下の成分を用いて硬質ゼラチンカプセル剤を製造する 成 分 量（ｍg/カプセル） 活性成分 ０.１−１０００ デンプン（ＮＦ） ０− ６５０ デンプン（流動性粉末） ０− ６５０ シリコーン油 ３５０センチストーク ０− １５ 成分を混合し、Ｎo.４５メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、硬質ゼラチンカプセル 中へ充填する。 製造したラロキシフェンのカプセル製剤の具体的な例には、以下に示したもの が含まれる。製剤２ ：ラロキシフェンカプセル剤 成 分 量（ｍg/カプセル） ラロキシフェン １ デンプン（ＮＦ） １１２ デンプン（流動性粉末） ２２５.３ シリコーン油 ３５０センチストーク １.７ 製剤３ ：ラロキシフェンカプセル剤 成 分 量（ｍg/カプセル） ラロキシフェン ５ デンプン（ＮＦ） １０８ デンプン（流動性粉末） ２２５.３ シリコーン油 ３５０センチストーク １.７ 製剤４ ：ラロキシフェンカプセル剤 成 分 量（ｍg/カプセル） ラロキシフェン １０ デンプン（ＮＦ） １０３ デンプン（流動性粉末） ２２５.３ シリコーン油 ３５０センチストーク １.７ 製剤５ ：ラロキシフェンカプセル剤 成 分 量（ｍg/カプセル） ラロキシフェン ５０ デンプン（ＮＦ） １５０ デンプン（流動性粉末） ３９７ シリコーン油３５０センチストーク ３.０ 上記の具体的な製剤は、規定された合理的な変化にしたがって変更してもよい 。 錠剤は、以下の成分を用いて製造する。製剤６ ：錠剤 成 分 量（ｍg／錠剤） 活性成分 ０.１−１０００ セルロース（微結晶） ０− ６５０ 二酸化ケイ素（ヒューム） ０− ６５０ ステアリン酸 ０− １５ 成分を混合して圧縮し、錠剤を形成する。 若しくは、活性成分０．１〜１０００ｍgをそれぞれ含有する錠剤を以下のよ うに製造する。製剤７ ：錠剤 成 分 量（ｍg／錠剤） 活性成分 ０.１−１０００ デンプン ４５ セルロース（微結晶） ３５ ポリビニルピロリドン（１０％水溶液） ４ ナトリウムカルボキシメチルセルロース ４.５ ステアリン酸マグネシウム ０.５ タルク １ 活性成分、デンプン及びセルロースをＮo.４５メッシュＵ．Ｓ.シーブに通し 、十分に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を得られた粉末と混合し、Ｎo. １４メッシュＵ.Ｓ.シーブに通す。得られた顆粒を５０〜６０℃で乾燥し、Ｎo. １８メッシュＵ.Ｓ.シーブに通す。あらかじめＮo.６０メッシュＵ.Ｓ.シーブに 通したナトリウムカルボキシメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、及 びタルクを顆粒に加え、混合した後、打錠機で圧縮して錠剤を得る。 ５ｍL用量あたり、薬物０．１〜１０００ｍgをそれぞれ含有する懸濁剤を以下 のように製造する。製剤８ ：懸濁剤 成 分 量（ｍg／５ｍL） 活性成分 ０.１〜１０００ｍg ナトリウムカルボキシメチルセルロース ５０ｍg シロップ １.２５ｍL 安息香酸溶液 ０.１０ｍL 香料 ｑ.ｖ. 着色料 ｑ.ｖ. 精製水を加えて５ｍLとする 薬物を、Ｎo.４５メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、ナトリウムカルボキシメチル セルロース及びシロップと混合してなめらかなペーストにする。安息香酸溶液、 香料、及び着色料を少量の水で希釈して、撹拌しながら加える。さらに水を加え て所要の容量にする。 試験方法 分析１ 本発明の方法を示す試験例において、循環脂質についての種々の処置の効果の 測定に閉経後モデルを使用した。 ７５日生存の雌性 Sprague Dawley ラット（体重範囲２００〜２２５ｇ）をチ ャールス・リバー・ラボラトリーズ（Charles River Laboratories）（ポーテー ジ（Portage），ミシガン州）から入手した。ラットをチャールス・リバー・ラ ボラトリーズで左右の卵巣摘出（ＯＶＸ）を行い、１週間後に輸送した。到着し たら、ラットを金属製の吊りかご１つにつき、３又は４匹のグループにして入れ 、一週間自由に餌（カルシウム含有量約０．５％）と水を随意に飲食させた。最 小相対湿度４０％、室温２２.２±１．７℃に維持した。室内の光周期は１２時 間明転し、１２時間暗転にした。投与レジメ組織の採集 １週間順化させた後（従って卵巣摘出後２週間である） 、検定化合物ラロキシフェンの毎日の投与を開始した。２０％シクロデキストリ ンビヒクル中の、ゼアラノール及び被検化合物を経口投与した。ラットに４日間 毎日投与した。投与レジメに次いでラットを計量し、ケタミン：キシラジン（２ 体 積：１体積）混合物で麻酔し、血液サンプルを心臓穿刺により採取した。次いで ＣＯ₂で窒息させてラットを屠殺し、子宮を正中切開で切除して子宮の重量を測 定した。コレステロール分析 血液サンプルを室温で２時間凝固させ、３０００ｒｐｍで １０分間遠心分離して血清を得た。血液コレステロールはベーリンガー・マンハ インム・ダイアグノスティックス（Boehringer Mannheim Diagnostics）高性能 コレステロール分析を用いて測定した。簡単に述べると、コレステロールをコレ スト−４−エン−３−オン及び過酸化水素に酸化した。次に過酸化水素をペルオ キシダーゼの存在下でフェノール及び４−アミノフェナゾンと反応させ、ｐ−キ ノンイミン染料を生成させ、これを分光光度計により５００nｍで測定した。次 いで標準曲線からコレステロール濃度を計算した。バイオメック・オートメイテ ッド・ワークステーション（Biomek Automated Workstation）により全分析は自 動化した。子宮好酸球ペルオキシダーゼ（ＥＰＯ）分析 酵素分析の時まで、子宮を４℃に 保った。次いで、０.００５％トリトンＸ−１００を含む５０倍量の５０ｍＭト リス緩衝液（ｐＨ８.０）中で子宮をホモジナイズした。トリス緩衝液中の０.０ １％過酸化水素及び１０ｍＭ（終濃度）ｏ−フェニレンジアミンを加えて、吸光 度の増加を４５０ｎｍで１分間モニターした。子宮中の好酸球の存在は、化合物 のエストロゲン活性の指標である。反応曲線の最初の直線部分から１５秒間隔の 最大速度を測定した。データのまとめ 表１に示されているように、実施例の環境エストロゲン、即ち ゼアラノールは、子宮の湿重量を３倍に増加し、子宮好酸球増加における有意の 増加（ＯＶＸ対照に対するＥＰＯ Ｖ_maxは４ｍＯＤ／分であった）と血清コレス テロールにおける減少をもたらした。これら活性のそれぞれは、この分析系にお いてエストロゲン薬（すなわち、１７α エチニル‐エストラジオール）によっ てもたらされる活性と、質的に同じである。 本試験化合物をゼアラノールと組み合わせて投与すると、試験化合物は、環境 エストロゲンの子宮刺激性とコレステロール低減活性を弱める。１０ｍg／ｋgの 投与量レベルで、両試験化合物は、ゼアラノールで誘発される子宮重量刺激、子 宮ＥＰＯの上昇及び血清コレステロールの減少において、有意の減弱をもたらし た。 分析２ 環境エストロゲンへの暴露が分かっており、症状（即ち、癌、女性化乳房、精 子数減少）を示している、５〜４０の個体を使用する。この個体を式（Ｉ）の化 合物で４〜１２ヵ月処置し、その期間中、環境エストロゲンの作用を退行するか 調べた。 本発明の化合物の有用性は、上記試験の１つにおいて使用したとき、その化合 物が環境エストロゲンに対して有する劇的な効果によって実証される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，Ｕ Ｇ)，ＵＡ(ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ )，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ， ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，Ｋ Ｇ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ， ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，Ｓ Ｉ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．環境エストロゲンの阻害を必要とするヒト又は他の動物に、有効量の式 Ｒ²は、ピロリジン、ヘキサメチレンイミノ、及びピペリジノからなる群から選 択される］ で示される化合物又はその薬学的に許容し得る塩若しくは溶媒和物を投与するこ とを含んでなる、環境エストロゲンの作用を阻害する方法。 ２．前記化合物が塩酸塩である、請求項１の方法。 ３．前記化合物が 又はその塩酸塩である、請求項１の方法。 ４．前記作用が生殖系に影響するものである、請求項１の方法。