JPH10510363A - 電気泳動のための新しい緩衝系およびその使用 - Google Patents
電気泳動のための新しい緩衝系およびその使用Info
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Abstract
Description
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- 【特許請求の範囲】 1.分離ゲル緩衝液が8.8またはそれ以上のpKを有する塩基およびゲル緩 衝液のpHを8より低いpH値に滴定する酸を含み、陰極溶液がpK値が9.4 またはそれ以上の両性電解質または弱酸を含むことを特徴とする、不連続ポリア クリルアミドゲル電気泳動を行うための緩衝系。 2.分離ゲル緩衝液のpH値が、該塩基のpK値より少なくとも1のpH単位 、好ましくは少なくとも1.5pH単位低い値である請求項1記載の緩衝系。 3.分離ゲル緩衝液のpH値が7.5以下である請求項1または2記載の緩衝 系。 4.陽極溶液が、8.8またはそれ以上のpK値の該塩基を含む請求項1、2 または3記載の緩衝系。 5.陽極溶液が、さらに、存在する塩基が緩衝能に貢献するpH値に、または 、約5ないし約7の範囲のpH値に滴定する成分を含む請求項4記載の緩衝系。 6.陰極溶液が7またはそれ以上のpK値を有する塩基を含む請求項1ないし 5のいずれか一項記載の緩衝系。 7.分離ゲル緩衝液に、陰極溶液に存在する弱酸または両性電解質を含めた請 求項1ないし6いずれか一項記載の緩衝系。 8.陰極の該弱酸または両性電解質が、分離ゲル緩衝液の該塩基のpK値より 低いか、またはほぼ等しいpK値を有する、分子量が10,000ダルトンより 少ない蛋白質およびペプチドの分離のための請求項1ないし7いずれか一項記載 の緩衝系。 9.陰極溶液の該弱酸または両性電解質が、分離ゲル緩衝液における該塩基の pK値よりも約0.4ないし約1.7pH単位高いpK値を有する、約10,00 0ないし約300,000ダルトンの範囲の分子量の蛋白質およびペプチドの分 離のための請求項1ないし7いずれか一項記載の緩衝系。 10.該電気泳動がドデシル硫酸ナトリウム(SDS)電気泳動である請求項 1ないし9いずれか一項記載の緩衝系。 11.陰極溶液の該弱酸または両性電解質のpK値が、分離ゲル緩衝液の該塩 基のpK値より約1ないし約2pH単位高い、天然の蛋白質およびペプチドの分 離のための請求項1ないし9のいずれか一項記載の緩衝系。 12.分離ゲル緩衝液中の該塩基が、アンモニア、所望によりアルキル基で置 換された第一級、第二級および第三級アミン、1または2のヒドロキシル基を含 むアミン、およびアミド基を含むアミンより選択される、請求項1ないし11の いずれか一項記載の緩衝系。 13.分離ゲル緩衝液における該塩基が、ジエタノールアミン、エチルジエタ ノールアミン、N,N−ジメチルエタノールアミン、N,N−ジエチルエタノール アミン、2−アミノ−2−メチル−1,3−プロパンジオール、N,N−ジエチ ルアミノ−2,3−プロパンジオール、2−アミノ−2−メチルプロパノール、 N−ピペリジノプロピオンアミド、N−ピロリジノプロピオンアミドおよびN, N−ジエチルアミノプロピオンアミドから選択される請求項12記載の緩衝系。 14.陰極溶液の該両性電解質が、グリシン、アラニン、プロリン、バリン、 ヒスチジン、リジン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸およびε−アミノカプロン 酸から選択される請求項1ないし13のいずれか一項記載の緩衝系。 15.陰極溶液の該酸が、塩酸、リン酸、硫酸、ギ酸および酢酸から選択され る請求項1ないし13いずれか1項記載の緩衝系。 16.請求項1ないし15のいずれか一項の緩衝系を用いることからなる、不 連続ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行う方法。
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