JPH10509172A

JPH10509172A - ヒトミエリン塩基性タンパク質のペプチドアナログを用いた多発性硬化症の処置のための方法

Info

Publication number: JPH10509172A
Application number: JP8516911A
Authority: JP
Inventors: ニコラスリン，; アミタブガウアー，; ポールジェイ．コンロン，; ローレンスステインマン，
Original assignee: ニューロクラインバイオサイエンシーズ，インコーポレイテッド
Priority date: 1994-11-18
Filing date: 1995-11-16
Publication date: 1998-09-08
Also published as: PT792287E; NO972264L; DE69532996D1; US6329499B1; AU4405896A; NO972264D0; EP0792287A1; EP0792287B1; EP1440980A2; EP1440980A3; DE69532996T2; MX9703643A; ES2218559T3; US20020086976A1; ATE266043T1; WO1996016086A1; CA2204147A1; DK0792287T3

Abstract

(57)【要約】本発明は、ヒトミエリン塩基性タンパク質のペプチドアナログに関する。このペプチドアナログは、少なくとも７アミノ酸の長さで、ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99由来である。このアナログは、天然の配列の少なくとも91位、95位、または97位で改変される。さらなる改変が他の位置でなされ得る。これらのペプチドアナログを含む薬学的組成物が提供される。このペプチドアナログは、多発性硬化症の処置に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】ヒトミエリン塩基性タンパク質のペプチドアナログを用いた多発性硬化症の処置のための方法技術分野本発明は、一般的にヒトミエリン塩基性タンパク質のペプチドアナログを用いることにより、多発性硬化症を処置するための方法に関する。発明の背景多発性硬化症(MS)は、慢性の、炎症性の疾患であり、米国において約250,000 人が羅患している。臨床経過はかなり多様であり得るが、最も一般的な形態は、神経学的欠損、特に、麻痺、感覚の欠損、および視覚障害を再発することにより明らかにされる。炎症のプロセスは、主に、中枢神経系の白質内で起こり、そしてＴリンパ球、Ｂリンパ球、およびマクロファージによって媒介される。これらの細胞は、軸索の脱髄の原因である。MSの特徴的な病変は、その肉眼で見える様相からプラークと呼ばれる。多発性硬化症は、自己寛容を確立している機構をどうにか避け、そして正常組織を攻撃する病原性Ｔ細胞から発生すると考えられている。ミエリン塩基性タンパク質に対するＴ細胞の反応性は、MSの発達において、重要な構成要素であり得る。病変において見い出される病原性Ｔ細胞は、抗原レセプター（TCR）の異種性を制限している。プラークから単離されたＴ細胞は、制限された数のＶαおよびＶβ遺伝子セグメントの再編成を示す。さらに、TCRは、主要な抗原接触部位である第３相補決定領域(CDR)において、いくつかの支配的なアミノ酸モチーフを示す。３つのCDR3モチーフはすべて一緒に、ミエリン塩基性タンパク質のアミノ酸82〜106内のエピトープを認識することが知られているＴ細胞クローンにおいて同定されている。これらのモチーフは、２人のMSの患者の脳から単離したＴ細胞において再編成した１つの特定のＶβ遺伝子を含む再編成したTCR配列の4 4％で見い出された。 MSのための決定的な処置はまだ確立されていない。歴史的には、コルチコステロイドおよびACTHがMSの処置に用いられてきた。基本的には、これらの薬物は、リンパ球に対する毒性により炎症反応を減少させる。回復は、急性悪化から促進され得るが、これらの薬物は後の発病を妨げも、さらなる疾病の発達またはMSの慢性的進行を妨げもしない(CarterおよびRodriguez、Mayo Clinic Proc.64:664, 1989;WeinerおよびHafler、Ann.Neurol.23:211,1988)。さらに、ステロイド処置の実質的な副作用のため、これらの薬物の長期使用は望ましくない。他の毒性化合物、例えばアザチオプリン、プリンアンタゴニスト、シクロホスファミド、およびシクロスポリンは、MSの症状の処置に用いられてきた。コルチコステロイド処置のように、これらの薬物は、せいぜい短期間で有益であり、そして高い毒性を有する。副作用は、増加した悪性腫瘍、白血球減少、中毒性肝炎、胃腸障害、高血圧、および腎毒性を含む（Mitchell,Cont.Clin.Neurol.77:231 ,1993;WeinerおよびHafler、前出）。Ｔ細胞に向けられた抗体に基づく治療（例えば、抗CD４抗体）は、現在MSの処置について研究中である。しかし、これらの薬剤は、患者を免疫無防備状態にすることによって、有害な副作用を引き起こし得る。より最近、MSの症状を緩和するための試みにおいて、IFN-γおよびIFN-βのようなサイトカインが投与されてきた。しかし、IFN-γに関するパイロット研究は、この薬物で処置した18患者のうちの７患者が、処置開始後１カ月以内に臨床的悪化を経験したために終了した。さらに、MBPに対する特異的応答が増加した（W einerおよびHafler、前出）。 Betaseron（改変されたβインターフェロン）は、近年MS患者に使用することを許可されている。Betaseron処置は悪化速度においていくらか改善も示しているが(Patyら、Neurology 43:662,1993)、処置群とコントロール群との間に臨床的な悪化の速度に違いはなかった（IFNB MS Study Group,Neurology 43:655,199 3;Patyら、前出）。副作用は一般に観察された。最も頻繁なこのような副作用は、発熱（患者の40％〜58％）、インフルエンザ様症状（患者の76％）、悪寒（患者の46％）、筋肉痛（mylagias）（患者の41％）、および発汗（患者の23％）であった。さらに、注入部位反応（85％）（炎症、痛み、過敏症、壊死を含む）が一般的であった（IFNB MS Study Group、前出;Connelly,Annals of Pharm.28:610, 1994)。 MSの現存する処置に関連している問題を考慮して、より効果的であり、このような不都合をともなわない、改善された処置に対するやむにやまれぬ必要性がある。本発明は、MSの処置に効果的なヒトミエリン塩基性タンパク質に対するＴ細胞応答を拮抗するペプチドアナログの使用を開発し、一方、他の関連利点を提供する。本発明の要旨本発明は、91位のＬ-リジン、95位のＬ-スレオニン、または97位のＬ-アルギニンのいずれかが他のアミノ酸に改変されたヒトミエリン塩基性タンパク質の、残基83〜99から選択される少なくとも７アミノ酸からなるペプチドアナログを提供する。１つの実施態様において、このペプチドアナログは、残基86〜99より選択される少なくとも７アミノ酸を含み、91位のＬ-リジンが改変され、そして残基86、87、88、95、98、または99より選択される１〜３のさらなるＬ-アミノ酸が他のアミノ酸に改変される。第２の関連する実施態様において、95位のＬ-スレオニンが改変され、そして残基86、87、88、91、98および99、または86、87、 88、97、98、および99より選択される１〜３のさらなるアミノ酸が他のアミノ酸に改変される。第３の関連する実施態様において、97位のＬ-アルギニンが改変され、そして残基86、87、88、95、98、または99より選択される１〜３のさらなるアミノ酸が他のアミノ酸に改変される。他の一連の実施態様において、ペプチドアナログは、ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99を含み、ここで、このペプチドアナログは、好ましくは２〜５の改変を含む。本発明の好ましい局面において、このペプチドアナログは、アラニンに改変された残基89、91、95、または97を有し、そしてさらなるアミノ酸が、対応するＤ-型アミノ酸に改変される。他の実施態様において、ペプチドアナログは、91位のＬ-リジン、95位のＬ-スレオニン、または97位のＬ-アルギニンのいずれかが他のアミノ酸に改変され、そしてさらに、このペプチドアナログの投与の際、タンパク質分解を低減させるために、Ｎ末端およびＣ末端のアミノ酸が改変されたヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86から99より選択される少なくとも７アミノ酸を含む。好ましい局面において、Ｎ末端アミノ酸および／またはＣ末端アミノ酸はＤ-型である。他の実施態様において、ペプチドアナログは、91位のＬ-リジン、95位のＬ-スレオニン、または97位のＬ-アルギニンのいずれかが他のアミノ酸に改変され、そしてさらに、３つまでの他のアミノ酸の改変が行われたヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99より選択される少なくとも７アミノ酸を含む。残基91が改変されるペプチドアナログにおいて、残基97が置換されない場合があることを除いて、86〜99のいずれのアミノ酸も改変され得る。同様に、残基97が改変されたペプチドアナログにおいて、残基91は改変されない場合がある。他の実施態様は、91位のＬ-リジン、95位のＬ-スレオニン、または97位のＬ- アルギニンのいずれかが他のアミノ酸に改変されたヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99より選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログを提供する。好ましい局面において、残基91、95、または97が、アラニンまたは対応するＤ-型アミノ酸のいずれかに改変される。本発明のさらなる局面は、ペプチドアナログが、生理学的に受容可能なキャリアまたは希釈物中に含まれる上記の実施態様に関するペプチドアナログを含む薬学的組成物を提供する。本発明のなおさらなる局面は、生理学的に受容可能なキャリアまたは希釈物と組み合わせた上記のペプチドアナログを含む、治療的に有効量の薬学的組成物を患者に投与することによって、多発性硬化症を処置する方法を提供する。本発明のこれらおよび他の局面は、以下の詳細な説明および添付される図を参照して明らかとなる。さらに、特定の手順または組成物をより詳細に記載する種々の参考文献が以下に示される。これらの参考文献の各々は、各々が個々に援用のために示されるかのように、全体として本明細書中に参考として援用される。図面の簡単な説明図１は、ヒトミエリン塩基性タンパク質のDNA配列および推定アミノ酸配列を描写する。図２は、９〜10日前にMBP(87-99)で免疫化したLewisラット由来の排出している(draining)リンパ節細胞の、10μＭのMBP(87-99)、培地、無関係のペプチドであるモチリン、および６つの異なるMBPアナログに対する応答を描写する。Ａ，Ｌ-アラニン；ｋ,Ｄ-リジン；ｔ,Ｄ-スレオニン；ｒ,Ｄ-アルギニン。図３は、ヒトミエリン塩基性タンパク質（87-99）の残基91を置換されたアナログに対するＴ細胞株NBIの増殖応答を示すグラフである。10の異なる置換を試験した。０〜150μＭの範囲のペプチドアナログの濃度に応答するラットＴ細胞株の増殖応答を決定した。増殖の程度は、１分あたりのカウントで示される；平均標準誤差は±10％より少なかった。MOT、モチリン、MBPと無関係のペプチド； MBP(87-99)、ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基87〜99；Ｋ、リジン；Ｒ、アルギニン；Ｎ、アスパラギン；Ｈ、ヒスチジン；Ｌ、ロイシン；Ｓ、セリン；Ｇ、グリシン；ｋ、Ｄ-リジン；Ｅ、グルタミン酸；Ｆ、フェニルアラニン；Ａ、アラニン。図４は、ヒトミエリン塩基性タンパク質（87-99）の残基95が置換されたアナログに対するＴ細胞株NBIの増殖応答を示すグラフである。10の異なる置換を試験した。０〜150μＭの範囲のペプチドアナログの濃度に応答するラットＴ細胞株の増殖応答を決定した。増殖の程度は、１分あたりのカウントで示される；平均標準誤差は±10％より少なかった。MOT、モチリン、MBPと無関係のペプチド； MBP(87-99)、ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基87-99；Ｔ、スレオニン；Ａ、アラニン；ｔ、Ｄ-スレオニン；Ｇ、グリシン；Ｉ、イソロイシン；Ｙ、チロシン；Ｑ、グルタミン；Ｓ、セリン；Ｋ、リジン；Ｅ、グルタミン酸；Ｈ、ヒスチジン。図５は、ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基97が置換されたアナログに対するＴ細胞株NBIの増殖応答を示すグラフである。11の異なる置換を試験した。０〜150μＭの範囲のペプチドアナログの濃度に対するＴ細胞の増殖応答を決定した。増殖の程度は、１分あたりのカウントで示される。MBP 87-99、ミエリン塩基性タンパク質(87-99)；Ｒ、アルギニン；ａ、Ｄ-アラニン；ｒ、Ｄ-アルギニン；Ｇ、グリシン；Ｋ、リジン；Ｑ、グルタミン；Ｅ、グルタミン酸；Ｔ、スレオニン；Ｌ、ロイシン；Ｆ、フェニルアラニン；Ｈ、ヒスチジン；Ａ、アラニン。図６は、MBPのペプチドアナログの、ラットＴ細胞（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する能力を示しているグラフである。MBP(87-99)で免疫化したラット由来の排出しているリンパ節細胞の、16.7、50、または150μＭの各アナログに対する、あるいは５μＭのMBP(87-99)に対する増殖応答が示されている。アナログを、５μＭのMBP(87-99)の存在下で添加した。増殖の程度は、１分あたりのカウントで示される。コントロールは、５μＭのMBP(87-99)のみおよび培地のみで構成された。h88/A91は、残基88のＤ-ヒスチジンおよび残基91のアラニンを有するMBP(87-99)の代表的なペプチドアナログをいう；h88/A91/p99は、残基8 8のＤ-ヒスチジン、残基91のアラニン、および残基99のＤ-プロリンを有するMBP (87-99)の別の代表的なペプチドアナログをいう。図７は、MBP(87-99)の注入後のLewisラットにおけるEAE誘導の阻害を示すグラフである。矢印は、PBS（コントロール）またはh88/A91ペプチドアナログのいずれかが投与された日を示す。EAEは、０、徴候なし；１、尾の麻痺；２、後肢虚弱；３、後肢麻痺：４、後肢および前肢の麻痺として記録した。図８は、ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99の１文字コードのアミノ酸配列、ならびに、NBI-5719、NBI-5748、NBI-5765、NBI-5788、およびNBI-5789 のペプチドアナログのアミノ酸配列を示す。ダッシュはアミノ酸の一致を示す。 MBP(83-99)、ミエリン塩基性タンパク質残基83〜99；ａ、Ｄ-アラニン；Ａ、Ｌ- アラニン；Ｋ，Ｌ-リジン；Ｌ、Ｌ-ロイシン。図９は、MBP(83-99)の注入後のLewisラットにおけるEAEの誘導の阻害を示すグラフである。Lewisラットを、０日目にMBP(83-99)を用いて注入した。９日目に、ラットを、コントロールペプチド（マッコウクジラミオグロビン(110-121)）またはペプチドアナログ（NBI-5788）のいずれかを用いて注入した。各データポイントは、６匹の動物の臨床スコアの平均を表す。図10は、MBP(83-99)の注入後のLewisラットにおけるEAEの誘導の阻害を示すグラフである。Lewisラットを、０日目にMBP(83-99)を用いて注入した。９日目に、ラットを、コントロールペプチド（マッコウクジラミオグロビン(110-121)）またはペプチドアナログ（NBI-5788）のいずれかを用いて注入した。各データポイントは、６匹の動物の臨床スコアの平均を表す。図11は、MBP(83-99)の注入後のLewisラットにおけるEAEの誘導の阻害を示すグラフである。Lewisラットを、０日目にMBP(83-99)を用いて注入した。９日目に、ラットを、コントロールペプチド（マッコウクジラミオグロビン(110-121)）またはペプチドアナログ（NBI-5765）のいずれかを用いて注入した。各データポイントは、６匹の動物の臨床スコアの平均を表す。図12は、MBP(87-99)の注入後のSJL/JマウスにおけるEAEの誘導の阻害を示すグラフである。マウスの群を、腹膜内に週１回を基礎として４週間、コントロールペプチドまたはペプチドアナログ（NBI-5719またはNBI-5765）のいずれかを用いて注入した。各データポイントは、10匹のマウスの臨床スコアの平均を表す。図13は、Dr2a拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図14は、Dr2a拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図15は、Dr2a拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図16は、Dr2b拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図17は、Dr2b拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図18は、Dr2b拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図19は、Dr2b拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図20は、Dr2b拘束性ヒトＴ細胞クローン（これはMBPに対して反応する）の増殖を阻害する、MBPのペプチドアナログの能力を示すグラフである。種々の濃度のMBP(83-99)、および50μＭのペプチドアナログまたはマッコウクジラミオグロビン（コントロールペプチド）のいずれかとともにインキュベートしたＴ細胞クローンの増殖応答を示す。図21は、Dr2b拘束性ヒトＴ細胞クローン（5F6）（これはMBPに反応する）によるTNF-αおよびIFN-γの産生を示すグラフである。このＴ細胞クローンを、３μ MのMBP(83-99)の存在下で、10μMのNBI-5788またはマッコウクジラミオグロビンまたは培地のみのいずれかとともにインキュベートした。TNF-αおよびIFN-γの発現レベルは、pg/mlで示される。発明の詳細な説明本発明を説明する前に、本明細書中に今後用いられる特定の用語および略語の定義を説明することは本明細書の理解に役立ち得る。「ヒトミエリン塩基性タンパク質」（「MBP」）は、ヒト乏突起神経膠細胞の細胞質中に見出されるタンパク質をいう。ヒトMBPのヌクレオチド配列および推定のアミノ酸配列を、図１に示す（配列番号および）。図１には示されていないが、異なるスプライシングまたは転写後修飾によって生成される、異なる分子形態のヒトミエリン塩基性タンパク質もまた、本発明の範囲内である。ミエリン塩基性タンパク質の「ペプチドアナログ」は、少なくとも７アミノ酸長であり、そしてそのアナログと天然のヒトミエリン塩基性タンパク質との間のアミノ酸配列において、少なくとも１つの相違（そのうちの１つは残基91、95、または97での相違である）を含む。他に示されない限り、挙げられたアミノ酸は、Ｌ-型をいう。天然ペプチドに由来するＬ-アミノ酸は、タンパク質中に通常見出される20のＬ-アミノ酸のうちの任意の他の１つ、対応するＤ-アミノ酸のうちの任意の１つ、稀なアミノ酸（例えば、4-ヒドロキシプロリンおよびヒドロキシリジン）、または非タンパク質のアミノ酸（例えば、β-アラニンおよびホモセリン）に改変され得る。本発明の範囲には、メチル化（例えば、α-メチルバリン）、アルキルアミン（例えば、エチルアミン、エタノールアミン、およびエチレンジアミン）によるＣ末端アミノ酸のアミド化、ならびにアミノ酸側鎖官能基のアシル化またはメチル化（例えば、リジンのイプシロンアミノ基のアシル化）などの化学的手段によって改変されたアミノ酸も含まれる。「残基83」、「残基89」、「残基911、「残基95」、および「残基97」（それぞれ、83位、89位、91位、95位、97位とも呼ばれる）は、図１に示されたヒトミエリン塩基性タンパク質のアミノ酸83、89、91、95、および97、または比較位置でのアミノ酸をいう。より詳細には、これらの残基に関する番号付けのシステムは、ペプチドの長さまたはそのペプチド内のアミノ酸位置に関わらず、天然のヒトタンパク質内のアミノ酸位置に関連する。アミノ酸は、それらの標準の３文字コードまたは１文字コードによって呼ばれる。特定されない限り、Ｌ-型のアミノ酸が意図される。１文字コードを用いる場合、大文字がＬ-型を示し、そして小文字がＤ-型を示す。１文字コードは以下の通りである：Ａ、アラニン；Ｃ、システイン；Ｄ、アスパラギン酸；Ｅ、グルタミン酸；Ｆ、フェニルアラニン；Ｇ、グリシン；Ｈ、ヒスチジン；Ｉ、イソロイシン；Ｋ、リジン；Ｌ、ロイシン；Ｍ、メチオニン；Ｎ、アスパラギン；Ｐ、プロリン；Ｑ、グルタミン；Ｒ、アルギニン；Ｓ、セリン；Ｔ、スレオニン；Ｖ、バリン；Ｗ、トリプトファン；およびＹ、チロシン。ミエリン塩基性タンパク質のペプチドアナログ上記のように、本発明は、ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含有し、かつ天然に存在する91位でのＬ-リジン、95位でのＬ-スレオニン、または97位でのＬ-アルギニンの、別のアミノ酸への改変を含むペプチドアナログを提供する。１つの局面において、このペプチドアナログは、同じペプチドアナログにおいて、91位および97位の両方が改変されない限り、ヒトミエリン塩基性タンパク質の86位、87位、88位、91位、95位、97 位、98位、および/または99位での１〜３のＬ-アミノ酸のさらなる改変を含む。別の局面では、このペプチドアナログは、患者への投与に際して、これらのさらなる改変を伴わないペプチドアナログと比較して、タンパク質分解が軽減されるようなアミノ酸に改変されたＮ末端残基および/またはＣ末端残基をさらに有する。さらなる局面において、MBPのペプチドアナログは、残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含有し、そして天然のMBPタンパク質に存在しないアミノ酸に改変された91位、95位、または97位での残基の１つを有する。同じペプチドアナログにおいて残基91および97が改変されない限り、このような単一の改変に加えて、残基86〜99のさらなる１〜３の改変を成し得る。なおさらなる局面において、MBPのペプチドアナログは残基83〜99を含有し、91位でのＬ-リジンが別のアミノ酸に改変され、そして残基83〜90、および残基92〜99から選択されるさらなる２〜４アミノ酸が別のアミノ酸に改変される。好ましくは、少なくとも１アミノ酸が荷電されたアミノ酸で置換される。さらに、Ｎ末端アミノ酸および/またはＣ末端アミノ酸は、Ｄ-アミノ酸に改変され得る。ペプチドアナログは、好ましくは７〜17アミノ酸であり、そして通常20アミノ酸を越えない。特に好ましいペプチドアナログは、14〜17アミノ酸長である。残基83、89、91、95および97（これらは天然のヒトタンパク質において、それぞれ、Ｌ-グルタミン酸、Ｌ-フェニルアラニン、Ｌ-リジン、Ｌ-スレオニン、およびＬ -アルギニンである）は、重要な残基である。本発明の中では、アナログは、91 位でＬ-リジン以外のアミノ酸、95位でＬ-スレオニン以外のアミノ酸、または97 位でＬ-アルギニン以外のアミノ酸を有しなければならない。上記のように、91位での任意のアミノ酸の改変は本発明の範囲内である。好ましいペプチドアナログは、Ｌ-リジンの、以下のアミノ酸のうちの任意の１つへの改変を含む：Ｄ-リジン、アラニン、グリシン、グルタミン酸、フェニルアラニン、アルギニン、アスパラギン、ヒスチジン、ロイシン、またはセリン。これらのアミノ酸は、保存アミノ酸（同様の荷電、極性、疎水性、および大きさ（bu lkiness））および非保存アミノ酸の両方を含む。代表的には非保存アミノ酸の改変のみが治療効果を提供することが期待され得るが、意外にも保存的な変化（例えば、アルギニン）でさえ、天然ペプチドと比較した場合、ペプチドアナログの機能に顕著な影響を与える。このような置換の多様性は、上記の好ましいアミノ酸が、疎水性および親水性、荷電性および非荷電性、極性および非極性であるという事実によってさらに説明される。さらに、残基95での任意のアミノ酸の置換もまた、本発明の範囲内である。好ましいペプチドアナログは、Ｌ-スレオニンの、以下のアミノ酸のうちの任意の１つへの改変を含む：Ｄ-スレオニン、アラニン、グリシン、イソロイシン、チロシン、グルタミン、セリン、リジン、グルタミン酸およびヒスチジン。他の好ましい改変は、非保存アミノ酸への改変である。特に好ましい改変は、アラニンまたはＤ-スレオニンへの改変である。同様に、97位での任意のアミノ酸の改変は、本発明の範囲内である。好ましいペプチドアナログには、Ｌ-アルギニンのＤ-アラニン、Ｄ-アルギニン、グリシン、リジン、グルタミン、グルタミン酸、スレオニン、ロイシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、またはアラニンへの改変が含まれる。他の好ましい改変は、非保存アミノ酸への改変である。特に好ましい改変は、アラニンおよびＤ-アルギニンへの改変である。さらに、83位および89位での任意のアミノ酸が本発明の範囲内である。好ましいペプチドアナログには、83位でのＬ-グルタミン酸の、以下のアミノ酸のうちの任意の１つへの改変が含まれる：Ｄ-アラニン、Ｌ-アルギニン、Ｌ-グルタミン酸、および89位でのＬ-フェニルアラニンのアラニン、ロイシン、バリン、イソロイシンへの改変。さらに、特定の実施態様では、残基86、87、88、89、95、98、または99から選択される、少なくとも１つの他のアミノ酸が改変される。このような実施態様において、２つの他のアミノ酸が変化する場合、好ましくは１つは、残基86、87、 88、または89から選択され、そしてもう１つは残基98または99から選択される。あるいは、任意の位置での３つまでの改変がなされ得る。他の実施態様では、少なくとも２〜４のアミノ酸（91位に加えて）が改変される。このような実施態様では、改変されるアミノ酸は、好ましくは、83位、84位、89位、および98位から選択される。これらの一般的な事柄を考慮すると、本発明の範囲内のペプチドアナログは、残基91、残基95、または残基97の改変を有する。好ましいペプチドアナログの１セットは２重の改変を有する。１つの実施態様では、残基91は上記のように改変され、残基87がＤ-バリンに改変され、残基88がＤ-ヒスチジンに、あるいは残基 99がＤ-プロリンに改変される。同様に、別の実施態様では、残基97は上記のように改変され、かつ残基87がＤ-バリンに、残基88がＤ-ヒスチジンに、または残基99がＤ-プロリンに改変される。なお別の実施態様では、残基95は上記のように改変され、かつ残基87がＤ-バリンに、残基88がＤ-ヒスチジンに、または残基 99がＤ-プロリンに改変される。好ましいペプチドアナログの第２のセットは、３つの置換を有する。１つの実施態様では、残基91がアラニンに改変され、残基87がＤ-バリンに、または残基8 8がＤ-ヒスチジンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変される。別の実施態様では、残基97がアラニンに改変され、残基88がＤ-ヒスチジンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変される。なお別の実施態様では、残基95 がアラニンに改変され、残基88がＤ-ヒスチジンに改変され、そして残基99がＤ- プロリンに改変される。さらに別の実施態様では、残基83がＤ-アラニンに改変され、残基89がアラニンに改変され、そして残基91がアラニンに改変される。好ましいペプチドアナログの第３のセットは、４つの置換を有する。１つの実施態様では、残基83がＤ-アラニンに改変され、残基84がリジンに改変され、残基89がロイシンに改変され、そして残基91がアラニンに改変される。別の実施態様では、残基83がＤ-アラニンに改変され、残基84がリジンに改変され、残基89 および残基91がアラニンに改変される。好ましいペプチドアナログの第４のセットは、５つの置換を有する。１つの実施態様では、残基83および残基98がＤ-アラニンに改変され、残基84がリジンに改変され、そして残基89および残基91がアラニンに改変される。別の実施態様では、残基83および残基89がＤ-アラニンに改変され、残基84がリジンに改変され、残基89がロイシンに改変され、そして残基91がアラニンに改変される。ペプチドアナログは、自動化手順による合成を含む、標準的な化学技術により合成され得る。一般的に、ペプチドアナログは、固相ペプチド合成法により調製される。固相ペプチド合成法は、樹脂支持体（好ましくは、4-メチル-ベンズヒドリルアミン樹脂）に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（dicyclohexylcarbod imide）を用いた活性化により各々の保護されたアミノ酸残基を結合し、Ｃ末端アミドを有するペプチドを産生する工程を含む。あるいは、クロロメチル樹脂（メリーフィールド（Merrifield）樹脂）を用いて、Ｃ末端に遊離カルボン酸を有するペプチドを産生し得る。側鎖官能基は、以下のように保護される：セリン、スレオニン、グルタミン酸、およびアスパラギン酸に対してはベンジル基；ヒスチジンおよびアルギニンに対してはトシル基；リジンに対しては2-クロロベンジルオキシカルボニル基、そしてチロシンに対しては2,6-ジクロロベンジル基。結合に続いて、添加されるアミノ酸のαアミノ官能基上のt-ブチルオキシカルボニル保護基が、トリフルオロ酢酸を用いた処理によって除去され、その後、ジイソプロピルエチルアミンを用いて中和される。次いで、次の保護残基が遊離アミノ基上に結合され、ペプチド鎖を伸ばす。最後の残基を結合した後、保護されたペプチド樹脂を、フッ化水素を用いて処理し、樹脂からのペプチドの切断、ならびに側鎖官能基の脱保護を行なう。粗生成物は、ゲル濾過、HPLC、分配クロマトグラフィー、またはイオン交換クロマトグラフィーによりさらに精製され得る。本発明のペプチドアナログは、(a)天然のMBPペプチド（例えば、ラットで87〜 99；ヒトで83〜99）のMHCへの結合に対して競合し；(b)MBP(87-99)反応性のＴ細胞株の増殖を引き起こさず；そして(c)齧歯類において、MBP(87-99)による実験的アレルギー性脳脊髄炎（EAE）の誘導を阻害するはずである。従って、候補となるペプチドアナログは、(1)MHCへの競合的結合を測定するアッセイ、(2)Ｔ細胞増殖を測定するアッセイ、そして(3)EAEの誘導阻害を評価するアッセイによって、それらのMSを処置する能力についてスクリーニングされ得る。天然のペプチドの結合を阻害し、MBP反応性細胞株の増殖を刺激せず、そして天然のヒトMBP(87-99)によるEAEの発症を阻害するこれらのアナログは、治療的に有用である。必須ではないが、さらなる安全性アッセイを行い、このアナログはそれ自体、EAEを誘導しないことを証明し得る。 MHC分子へのペプチドの結合は、全細胞においてアッセイされ得る。簡単に述べれば、Lewisラットの脾臓細胞を、３時間培養して、ポリスチレンペトリディッシュに付着性細胞をくっつける。非付着性細胞を取り除く。MHCクラスII分子を発現する細胞を含む付着性細胞を、ディッシュをかきとることによって回収する。細胞へのペプチドアナログの結合を、蛍光アッセイによって測定する。このアッセイにおいて、脾臓の付着性細胞を、種々の濃度のペプチドアナログと混合し、そしてCO₂インキュベーター内で37℃で１時間インキュベートする。インキュベーション後、ビオチン標識MBP(87-99)を培養ウエルに添加する。細胞をもう１時間インキュベートし、次いで、培地中で３回洗浄する。フィコエリトリン結合ストレプトアビジンまたはフルオレセイン結合ストレプトアビジンを、蛍光色素標識したOX-6またはOX-17モノクローナル抗体（これは、それぞれ、ラットMHC クラスII I-AおよびI-Eと反応する）とともに添加する。フローサイトメトリーによる分析の前に、細胞を２回洗浄する。蛍光強度を、ビオチン標識MBP天然ペプチドおよびフィコエリトリンストレプトアビジンから得られた蛍光値（実験染色）から、フィコエリトリンストレプトアビジン単独で染色した細胞から得られた蛍光値（コントロール染色）を引くことによって計算する。アナログを含まない染色を100％値とする。阻害率を、各アナログについて計算し、そしてIC₅₀値として表す。IC₅₀値が100μMより低いペプチドアナログが、さらなるスクリーニングに適している。候補となるペプチドアナログは、Ｔ細胞株の増殖を引き起こすか、または阻害するその能力についてさらに試験される。２つの異なるアッセイが、代替法として用いられ得る。第１は、Ｔ細胞増殖を引き起こすアナログの能力を直接的な様式で測定する。第２は、天然のMBPペプチドによって誘導されるＴ細胞増殖を阻害するペプチドアナログの能力を測定する。直接的増殖アッセイでは、MBP(87-99)反応性Ｔ細胞株が、標的細胞として用いられ得る。Ｔ細胞株を、MBP(87-99)を注射したラットから採取したリンパ節から樹立する。リンパ節細胞を単離し、そしてＴ細胞増殖因子としてMBP(87-99)およびIL-2とともに５〜８日間培養する。生細胞を回収し、そしてMBP（87-99または 83-99）および照射された脾臓細胞（splenocyte）を増殖因子として、２回目の刺激を行う。この様式で、５〜６回継代した後、細胞株の増殖能力を決定する。 MBP反応性株が増殖アッセイに用いられる。このアッセイでは、Ｔ細胞株を、種々の濃度のペプチドアナログおよび照射された自己脾臓細胞とともに、３日間培養する。３日後、0.5〜1.0μCiの[³H]-チミジンを、12〜16時間添加する。培養物を回収し、そして取り込まれたカウントを決定する。平均CPMおよびその平均の標準誤差を、３連の培養物から計算する。上記のＴ細胞株の使用の代替として、MBP(87-99)を注入したLewisラット由来の排出しているリンパ節細胞が用いられ得る。好ましくは、このアッセイは、Ｔ細胞株を用いた増殖アッセイと組み合わせて用いられる。簡単に述べれば、Lewi sラットを、完全Freundアジュバント中のMBP(87-99)ペプチドを用いて皮下注入する。９〜10日後、排出しているリンパ節細胞を単離し、そして単一細胞懸濁液を調製する。リンパ節細胞を種々の濃度のペプチドアナログと、6.5％CO₂を含む加湿大気チャンバー中で３日間インキュベートする。インキュベーション後、培養物を、１〜２μCiの[³H]-チミジンで12〜18時間パルスする。培養物を、ファイバーガラスフィルター上に回収し、そしてシンチレーションカウンターにおいて計数する。平均CPMおよびその平均の標準誤差を、３連の培養物において決定されたデータから計算する。比較できる濃度のMBP(87-99)からの平均応答が３標準偏差を越えて低い結果を生じるペプチドアナログは、非刺激性と考えられる。 50μMより低いかまたは同等の濃度で増殖を刺激しないペプチドアナログは、さらなるスクリーニングに適している。第２のアッセイまたは代替アッセイは、Ｔ細胞増殖についての競合アッセイである。このアッセイでは、抗原提示の脾臓細胞を最初に照射し、次いで、天然の MBP(87-99)ペプチドとともに２〜４時間インキュベートする。これらの細胞を次いで洗浄し、そしてMBP(87-99)に対して反応性のＴ細胞とともにさらに培養する。種々の濃度の候補ペプチドアナログを、さらなる３日間培養物中に含有させる。このインキュベーション期間の後、各培養物を１μCiの[³H]-チミジンでさらなる12〜18時間パルスする。次いで培養物をファイバーガラスフィルター上に回収し、そして上記のように計数する。平均CPMおよびその平均の標準誤差を、３連の培養物において決定されたデータから計算する。50μM以上の濃度で約25％まで増殖を阻害するペプチドアナログが、さらなるスクリーニングに適している。 MBP(83-99)に反応性のヒトＴ細胞が、天然のMBP(83-99)ペプチドによって誘導されるＴ細胞の増殖を阻害するペプチドアナログの能力を測定するために、代わりに用いられ得る。MBP特異的Ｔ細胞は、Martinら、J．Immunol．148:1359-1366 ，1992に以前に記載されたように得られ得る。簡単に述べれば、Ｔ細胞株を、照射されたDR適合性の末梢血細胞とともに、２mMＬ-グルタミン、50μg/mlゲンタマイシン、ペニシリン、およびストレプトマイシン、100ユニット/ml rlL-2ならびに10％ヒトABネガティブ血清を補充したMEM中でヒトＴ細胞を培養することによって樹立する。これらのＴ細胞株の増殖は、クローンを、種々の濃度（1.1〜3 0μM）の天然MBP(89-99)ペプチド、50μMのペプチドアナログ、またはSWMペプチドとともに、照射されたDR適合性の末梢血細胞の存在下で培養することによって刺激され、約60時間インキュベーションした後、細胞を、³Hチミジンを用いて12 時間パルスし、そして集める。取り込まれた³Hチミジンの量を測定する。下記に詳細に考察するように、サイトカインの産生もまた、評価され得る。詳細には、TNF-αおよびIFN-γの産生が特に興味深い。これらの前炎症性（pro-in flammatory）サイトカインは、疾患の病因において役割を果たすと考えられる。簡単に述べれば、Ｔ細胞クローンを、刺激性MBPおよびペプチドアナログまたはコントロールペプチド（SWM）の存在下、あるいは培地単独でインキュベートする。24時間のインキュベーション後、上清中のTNF-αおよびIFN-γのレベルを、市販のEIAキット（Endogen，Cambridge，MA）を用いて決定する。 MHCへのMBP(87-99)の結合について競合し、かつＴ細胞株の直接的な増殖を引き起こさないか、またはMBP(87-99)による増殖を阻害し得る候補となるペプチドは、MBP(87-99)によるEAEの誘導を阻害するそれらの能力についてさらに試験される。簡単に述べれば、500μgのMBP(87-99)を、熱で死滅させたMycobacterium tuberculosis（H37Ra）を補充した完全Freundアジュバント中のエマルジョンとして注入する。ラットに、このエマルジョン200μlを尾の基部に皮下注入する。ラットを、２つのグループに分ける。疾患誘導の約２日前（通常、MBP(87-99)の注入の10日後）に、ラットを、PBSまたはPBS中のペプチドアナログのいずれかを用いて腹腔内注入する。動物を、処置プロトコルを知らない観察者によって基本的に毎日、臨床徴候についてモニターする。EAEを、０〜４の等級に点数付けする：０、臨床的に正常；１、弛緩した尾の麻痺；２、後肢虚弱；３、後肢麻痺；４、前肢および後肢の罹患。５mg/kgまたはそれ未満（ラットあたり約１mg）で注入されたペプチドアナログは、コントロールグループにおける疾患症状の開始後７日間にわたって、平均の累積スコアにおいて50％減少がある場合、EAEの発症を阻害すると考えられる。さらに、本発明において必須ではないが、安全性の測定として、適切なペプチドアナログを、EAEの直接的な誘導について試験し得る。実施例２に詳細に記載するように、種々の量のペプチドアナログを、ラットの尾の基部に注入し、そしてラットを、EAEの徴候について毎日調べる。EAEを引き起こさないと考えられるペプチドアナログは、完全Freundアジュバント中の１mg（５mg/kg）を注入した場合、７日間にわたって、１より低いかまたは同等の平均の累積スコアを有する。多発性硬化症の処置及び予防上記のように、本発明は、本明細書中に記載されるように、ヒトミエリン塩基性タンパク質のペプチドアナログの治療的に有効な量を、患者に投与することによって、多発性硬化症を処置および予防するための方法を提供する。このような処置に適した患者は、MSの診断についてのワークショップ（Poserら、Ann．Neur ol．13:227，1983）によって定義されたような、臨床的に明確なMSの診断を確立する基準によって同定され得る。簡単に述べれば、臨床的に明確なMSを有する個体は、２回の発作、ならびに２つの病変、または１つの病変の臨床証拠および別の、異なる病変の副次的臨床証拠（paraclinical evidence）のいずれかの臨床証拠を有している。明確なMSはまた、２回の発作の証拠および脳脊髄液中のIgG のオリゴクローナルなバンドによって、または発作、２つの病変の臨床証拠および脳脊髄液中のIgGのオリゴクローナルなバンドの組み合わせによって診断され得る。臨床的に可能性のあるMSの診断については、わずかに低い基準が用いられる。多発性硬化症の効果的な処置は、数種の異なる方法で調べられ得る。以下の基準のいずれかを満たすことが、効果的な処置の証拠となる。３つの主な基準が用いられる：EDSS（長期疾病状態等級（extended disability status scale））、悪化の出現、またはMRI（磁気共鳴画像法）。 EDSSは、MSに起因する臨床的障害を等級付けするための手段である（Kurtzke ，Neurology 33:1444，1983）。８つの機能的な系を、神経学的障害の型および重篤度について評価する。簡単に述べれば、処置の前に、患者を以下の系における障害について評価する：錐体、小脳、脳幹、知覚、腸および膀胱、視覚、大脳など。追跡調査を一定期間で行う。点数は、０（正常）から10（MSによる死亡）までの範囲である。１つの完全な段階の減少は、本発明の文脈において、効果的な処置の特徴である（Kurtzke，Ann．Neurol．36:573-79，1994）。悪化は、MSに起因し得る、特有の新しい神経学的異常（IFNB MS Study Group 、前出）を伴う新しい症状の出現として定義される。さらに、悪化は、少なくとも24時間継続し、そして少なくとも30日間の安定または改善の後に起こらなければならない。簡単に述べれば、患者は、臨床医によって標準的な神経学的試験を受ける。悪化は、神経学的評価等級（Neurological Rating Scale）（Sipeら、N eurology 34:1368，1984）の変化に従って、軽い、普通、または重いのいずれかである。毎年の悪化速度および悪化のない患者の割合を決定する。治療は、このような測定のいずれかについて、処置群とプラセボ群との間の悪化速度および悪化のない患者の割合において、統計学的な有為差がある場合、効果的であると考えられる。さらに、最初の悪化の時期、ならびに悪化の期間および重篤度もまた測定される。この点において治療としての有効性の測定は、コントロール群と比較した処置群において、最初の悪化の時期、ならびに悪化の期間および重篤度における統計学的有為差である。 MRIは、ガドリニウム-DTPA-増強画像法（gadolinium-DTPA-enhanced imaging ）（McDnaldら、Ann．Neurol．36:14，1994）を用いる活発な病変の測定、またはＴ₂加重技術（T₂-weighted techniques）を用いた病変の位置および範囲の測定のために用いられ得る。簡単に述べれば、MRIの基準線を得る。同じ画像平面（imaging plane）および患者の位置を、その後の各研究のために用いる。位置づけおよび画像配列を、病変の検出を最大化し、そして病変の追跡を容易にするために選択する。同じ位置づけおよび画像配列を、その後の研究のために用いる。MSの存在、位置、および範囲は、放射線学者によって決定される。病変の領域を、全ての病変領域について、スライス毎に輪郭を描き、そして合計する。３種の分析を行ない得る：新しい病変の証拠、活発な病変の出現率、病変領域の割合の変化（Patyら、Neurology 43:665，1993）。治療による改善は、基準線に比較して、または処置群対プラセボ群において、個々の患者における統計学的に有為な改善が存在する場合、確立される。予防についての候補となる患者は、遺伝的要素の存在によって同定され得る。例えば、大多数のMS患者は、HLA型DR2aおよびDR2bを有する。処置に適するMSの遺伝的素因を有するMS患者は、２つのグループの中に含まれる。第１は、再発緩解型の初期の疾患患者である。エントリー基準には、１年間を越える疾患期間、 1.0〜3.5のEDSSスコア、１年当たり0.5を越える悪化速度、および研究前の２カ月間臨床的悪化が無いことが含まれる。第２のグループには、過去２年間にわたって１年当たり1.0 EDSSユニットを越える疾患進行を伴う人々が含まれる。本発明の文脈におけるペプチドアナログの効力は、以下の基準に基づいて判定される：限界希釈によって決定されたMBP反応性Ｔ細胞の頻度、MBP反応性Ｔ細胞株およびクローンの増殖応答、患者から樹立されたMBPに対するＴ細胞株およびクローンのサイトカインプロフィール。効力は、反応性細胞の頻度の減少、天然のペプチドと比較した改変ペプチドによるチミジン取り込みの低減、そしてTNF およびIFN-αの低減によって確立される。臨床測定には、１および２年間隔の再発率、およびEDSSの変化（６カ月間持続するEDSSにおける、1.0ユニットの基準線からの進行に対する時間を含む）が含まれる。Kaplan-Meier曲線において、持続した疾病の進行の遅れは、効力を示す。他の基準には、MRIにおけるT2画像の領域および容積の変化、ならびにガドリニウム増強画像により決定される病変の数および容積が含まれる。本発明のペプチドアナログは、単独で、または薬学的組成物としてのいずれかで投与され得る。簡単に述べれば、本発明の薬学的組成物は、本明細書中に記載の１つまたはそれ以上のペプチドアナログを、１つまたはそれ以上の薬学的または生理学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて含有し得る。このような組成物は、緩衝液（例えば、中性緩衝化生理食塩水、リン酸緩衝化生理食塩水など）、炭水化物（例えば、グルコース、マンノース、スクロース、またはデキストラン）、マンニトール、タンパク質、ポリペプチドまたはアミノ酸（例えば、グリシン）、抗酸化剤、キレート剤（例えば、EDTAまたはグルタチオン）、アジュバント（例えば、水酸化アルニミウム）、および保存剤を含有し得る。さらに、本発明の薬学的組成物はまた、１つまたはそれ以上のさらなる有効成分（例えば、β−インターフェロンのようなサイトカイン）を含有し得る。本発明の組成物は、指示された投与様式（例えば、経口、経鼻、静脈内、頭蓋内、腹腔内、皮下、または筋肉内投与を含む）について処方され得る。本発明の別の実施態様の範囲で、本明細書中に記載の組成物は、持続放出インプラントの１部として投与され得る。なお別の実施態様の範囲で、本発明の組成物は、凍結乾燥物（凍結乾燥物としての安定性を提供する適切な賦形剤を用いて）として処方され得、そしてその後再水和される。本発明の薬学的組成物は、処置（または予防）されるべき疾患に対して適切な様式で、投与され得る。投与の量および頻度は、患者の状態、ならびに患者の疾患の型および重篤度のような要因によって決定される。本発明の特に好ましい実施態様の範囲で、本明細書中に記載のペプチドアナログまたは薬学的組成物は、５〜50mg/kgの範囲の投与量で投与され得る。しかし、適切な投与量は、臨床試験によって決定され得る。患者は、上記のように、MRI、EDSS、および臨床的悪化の徴候によって治療的有効性についてモニターされ得る。以下の実施例は、例示のために提供され、限定のためのものではない。実施例１ペプチドの調製ペプチドは、ペプチド合成機（Beckman 990型）での固相方法論により合成した。アミド化されたカルボキシル末端を有するペプチドは、p-メチルベンジドリルアミン樹脂（MBHA樹脂）を用いて調製した；遊離のカルボキシル末端を有するペプチドについては、適切に保護されたアミノ酸と結合したメリーフィールド樹脂を用いた。両方の樹脂は、Bachem Fine Chemicals（Torrance，CA）から得た。合成に用いた誘導アミノ酸（Bachem Fine Chemicals）は、特に明記しない限りＬ型配置であり、そしてＮ-α-アミノ機能をt-ブチルオキシカルボニル基で独占的に保護した。側鎖の官能基は、以下のように保護した：セリン、スレオニン、グルタミン酸、およびアスパラギン酸についてはベンジル基；ヒスチジンおよびアルギニンについてはトシル基；リジンについては2-クロロベンジルオキシカルボニル基、そしてチロシンについては2,6-ジクロロベンジル基。カルボキシル末端のアミノ酸のMBHA樹脂への結合は、Lingら（Proc．Natl．Acad．Sci．USA 8 1:4302，1984）に従って、ジシクロヘキシルカルボジイミドを用いて行い、そして続くアミノ酸を、ジシクロヘキシルカルボジイミドと結合させた。最後のアミノ酸を結合させた後、t-ブチルオキシカルボニル（t-butyoxycarbonyl）保護基を除去し、そしてペプチド樹脂結合物を、樹脂結合物１グラムあたり、14ml フッ化水素酸（HF）、1.4ml アニソール、および0.28ml 硫化メチルエチル（methy lethyl sulfide）の混合物を用いて、−20℃で0.5時間、そして０℃で0.5時間処理した。HFを、０℃での減圧により除去し、そして、得られたペプチドおよび樹脂混合物を、ジエチルエーテルで２回および代わりにクロロホルムおよびジエチルエーテルで２回洗浄した。ペプチドを、２M酢酸で５回抽出し、そして抽出物を凍結乾燥した。凍結乾燥した生成物を、最初に、短縮されたフラグメントおよび無機塩を取り除くために30％酢酸中で処理（develop）したSephadex G-25ファインカラム（Pharmacia-LKB，Piscataway，NJ）で精製した（Lingら、1984）。次に、ペプチドを、CM-32カルボキシメチルセルロース陽イオン交換クロマトグラフィー（Lingら、1984）によりさらに精製した。最後の精製は、Sephadex G-25 ファイン（Lingら、1984）での分配クロマトグラフィーにより達成した。この合成生成物を、アミノ酸分析、マススペクトル分析、および逆相HPLCによって特徴づけた。実施例２免疫化およびEAE誘導 MBPペプチドおよびペプチドアナログを、リン酸緩衝化生理食塩水（PBS）中で溶解し、4mg/mlのオイル中の熱で死滅させたMycobacterium tuberculosis H37Ra （Difco Laboratories，Inc.，Detroit，MI）を補充した等容量の不完全Freund アジュバントを用いて乳状化した。ラットを、エマルジョン中の500μgのペプチドを含む0.1〜0.2mlを用いて尾の基部に皮下免疫し、そして臨床上の徴候について毎日モニターした。EAEは、０〜４のスケールで以下のように評価した：０は、臨床的に正常；１は、弛緩した尾；２は、後肢虚弱；３は、後肢麻痺；４は、前肢および後肢の罹患。実施例３長期Ｔ細胞株抗原特異的長期Ｔ細胞株は、Ben-Nunらにより開発された方法（Eur．J．Immun ol．11:195，1981）を用いて誘導した。Lewisラットを、上記のようにMBP（87-9 9）またはMBP（83-99）で注射した。９日〜10日後、排出しているリンパ節細胞を、刺激培地（5×10^-5M 2-メルカプトエタノール、2mM L-グルタミン、1mMピルビン酸ナトリウム、100μg/ml ペニシリン、100μg/ml ストレプトマイシン、および10％ウシ胎児血清を補充したDulbecco改変Eagle培地(Hyclone Laboratorie s，Logan，UT)）中で、10〜20μMのMBP（87-99）ペプチドおよび15U/mI IL-2と共に、５〜８日間培養（10⁷／ml）した。５〜８日間の培養後、Ficoll-Hypaque 分離後、界面から生存細胞を回収し、そして３回洗浄した。この細胞を、補助細胞としての5×10⁵の照射（3000rad）した自己脾臓、および10〜20μMのMBP（87- 99）を含む培地中で、1×10⁷細胞／mlで再度培養した。５〜６刺激サイクル後、プレートを、MBP（87-99）に応答して増殖する細胞の能力によってスクリーニングした。陽性の株を、24ウェル平底プレートに移し、再刺激した。実施例４ MHC 結合アッセイ MBPペプチドおよびMBPペプチドアナログの、MHCを結合する能力を測定した。抗原提示細胞（APC）上のMHC分子へのペプチドの結合を特徴づけるアッセイを用いた(Mozesら、EMBO J．8:4049，1989; Gautamら、PNAS 91:767，1994)。脾臓細胞を、標準的なポリスチレンペトリディッシュ（100×15mm）において、10％ウシ胎児血清を補充したDulbecco改変Eagle培地（Hyclone Laboratories，Logan， UT）中で、6.5％CO₂を含む37℃のインキュベーターにて３時間培養した。その後、非接着細胞を除去し、そしてプレートをPBSで３回洗浄した。接着細胞を、スクレーパーを用いて回収した。MBP（87-99）アナログの結合を、蛍光アッセイを用いて測定した。簡単には、染色緩衝液（0.1％ウシ血清アルブミンを含むPBS）中の5×10⁵の脾臓接着細胞を、０〜400μMの範囲の異なる濃度のMBPアナログとＵ型96ウェルマイクロ培養プレートの個々のウェル中でそれぞれ混合し、そして 6.5％CO₂インキュベーターで37℃にて１時間インキュベートした。インキュベーション後、ビオチン標識した10μMのMBP天然ペプチドを添加し、１時間培養した。細胞を染色緩衝液で３回洗浄した。フィコエリトリン結合ストレプトアビジンまたはフルオレセイン結合ストレプトアビジン（Becton Dickinson，San Jose， CA）を、第２段階の試薬（１μg／ウェル）として、ラットMHCクラスIII-AまたはI-Eとそれぞれ反応する蛍光色素標識した１μg/ウェルのOX-6またはOX-17モノクローナル抗体（Pharmingen，San Diego，CA）と共に添加した。この細胞を、F ACScan（Becton Dickinson）における細胞蛍光光度分析の前に、２回洗浄した。各試料についての蛍光強度は、ビオチン標識したMBPおよびフィコエリトリン-ストレプトアビジンで染色されたOXポジティブ細胞より得られた蛍光から、フィコエリトリン-ストレプトアビジン単独で染色された（コントロール染色）OXポジティブ細胞より得られた蛍光を、引き算することによって算定した。阻害パーセントを、各アナログについて算定し、IC₅₀値で表した。このペプチドアナログh88/A91は、D-ヒスチジンを88位に、およびアラニンを9 1位に含有し、MBP（87-99）に対するMHCについて、MBP（87-99）と同じ位効果的に競合した。200μMでは、MBP（87-99）は68.4％までの結合を阻害し、そしてh8 8/A91は67.64％の結合を阻害した。100μMでは、MBP（87-99）は、40％の結合を阻害し、a83、A89、A91は、25％の結合を阻害した。実施例５抗原特異的リンパ節細胞増殖アッセイ雌のLewisラット（約６週齢）を、Harlan Sprague，Indianapolis，INより購入した。MBPペプチドをリン酸緩衝化生理食塩水（PBS）に溶解し、そして２mg/m lのオイル中の熱で死滅させたMyobacterium tuberculosis H37Ra（Difco）を補充した等容量の完全Freundアジュバント（Difco Laboratories，Inc.，Detroit ，MI）を用いて乳状化した。ラットを、エマルジョン中の100μgのペプチドを含有する0.1mlを用いて、尾の基部に皮下免疫した。免疫の９〜10日後、ラットを屠殺し、その排出しているリンパ節を取り出し、そして単細胞の懸濁液を作製した。細胞を、2-メルカプトエタノール（5×10^-5M）、L-グルタミン（2mM）、ピルビン酸ナトリウム（1mM）、ペニシリン（100μg/ml）、ストレプトマイシン（ 100μg/ml）、および１％正常ラット血清を補充したDulbecco改変Eagle培地（Gi bco BRL，Gaithersburg，MD）を含有する刺激培地に、１mlあたり5×10⁶細胞に再懸濁した。アッセイのために、100μlのリンパ節細胞懸濁物を、10μMの種々のペプチド（ネガティブコントロールとしてモチリン；MBP87-99；培地のみ、あるいは91、 95または97位で置換されたアラニンまたはD-アミノ酸を含む）を含有する等容量の培地の存在する96ウエル平底ウェルに添加した。次いで培養物を、7.5％CO₂を含む加湿空気中で37℃でインキュベートした。３日間のインキュベーション後、 1.0μCiのトリチウム化されたチミジン（20Ci/mM；New England Nuclear）を各ウェルに添加し、そしてプレートをさらに12〜16時間再度インキュベートした。次いでこのプレートを、Matrix filtermate harvester(Packard)を用いて採集し、そしてAutomatic Direct Beta Counter(Packard)を用いて計数した。平均のcp m および平均の標準誤差は、３連のウェルから算定した。図２に示すように、MBP（87-99）は、ペプチドアナログと対照的にリンパ節細胞を刺激した。95位および97位でのアラニン改変、および残基91，95、および97 でのD-アミノ酸改変は、コントロールペプチドのモチリンよりも高く、細胞を刺激できなかった。実施例６抗原特異的Ｔ細胞株増殖アッセイＴ細胞株の抗原特異的増殖アッセイについてのアッセイを、記載（Zamvilら、 Nature 317:355-358；Offnerら、J．Immunol．148:1706-1711，1992；Goldら、J .Immunol．148:1712-1717，1992；Karinら、J．Exp．Med．180:2227-2237，1994 ）されるように、96ウェル平底マイクロタイタープレートにおいて行った。Ｔ細胞株を、実施例３に記載のように樹立した。最初に、1.5mM MBPストック溶液またはペプチドアナログストック溶液の1:10の希釈物を組織培養培地に添加した。このサンプルを、３倍の連続希釈により希釈した（最終容量100μl）。応答する連続Ｔ細胞株を、１mlあたり4×10⁵細胞に再懸濁し、そして50μlのアリコートを各ウェルに添加した（１ウェルあたり5×10⁴細胞）。1×10⁶の照射された（30 00R）脾臓支持細胞もまた、各ウェルに添加した。次いで培養物を、7.5％CO₂を含む加湿空気中で、37℃で３日間インキュベートした。12〜16時間後、採集前に、0.5μCiから1.0μCiの[³H]-チミジン（20 Ci/mM; New England Nuclear）を各ウェルに添加し、そして培養物を再インキュベートした。次いでプレートを、Ma trix filtermate harvester(Packard)を用いて採集し、そしてAutomatic Direct Beta Counter(Packard)を用いて計数した。平均cpmおよび平均の標準誤差は、３連のウェルから算定した。図３、４、および５に示し得るように、91、95、または97位のいずれかを置換したペプチドアナログは、MBP（87-99）反応性Ｔ細胞株の増殖を刺激できない。この効果は、150μMのペプチドアナログであっても、増殖を引き起こすのに１〜２対数有効ではないので、劇的である。実施例７Ｔ細胞増殖アッセイのアンタゴニズムＴ細胞アンタゴニズムを、De Magistrisらにより記載された（cell 58:625，1 992）ようなあらかじめパルスした（prepulsed）増殖アッセイに少し改変を加えて検出した。抗原提示脾臓細胞を、γ照射（3000rad）し、そして10⁷細胞／ウェルの濃度で0.2〜2.0μMの天然のペプチドMBP（87-99）と共に、10mlの組織培養プレートにおける刺激培地中で、6.5％CO₂を含む加湿空気中、37℃にて２〜４時間振盪しながらインキュベートした。次いで、脾臓細胞を洗浄し、そしてＵ型96 ウェルマイクロ培養プレートにおいて、5×10⁵細胞／ウェル濃度で5×10⁴の休止 MBP（87-99）反応性Ｔ細胞と共に再度培養した。種々の濃度（5〜150μMの範囲）のアンタゴニストペプチドを、さらに72時間添加した。各ウェルを、最後の12 〜16時間、0.5〜１μCiの[³H]-チミジン（特異的活性10Ci/mmol）でパルスした。次いで培養物を、ファイバーガラスフィルター上で採集し、そして増殖応答を CPM±SEMとして表した。図６に示すデータは、二重に改変されたペプチドアナログh88/A91、および三重に改変されたペプチドアナログh88/A91/p99が、MBP反応性Ｔ細胞株の増殖を有意に阻害したことを示す。三重に改変されたアナログは、50μMおよびそれ以上の濃度で阻害を引き起こし、一方二重に改変されたアナログは、150μMで阻害を引き起こした。実施例８ Lewis ラットにおける87-99誘導EAEの処置６〜８週齢の雌Lewisラットに、500μgのMycobacterium tuberculosisを含有するCFA中の500μgのMBP（87-99）500μgを、200μlの容量で尾の基部に接種した。ラットを５つの群に分類した。コントロール群は0.5mlのPBSを受け、および処置群は、h88/A99ペプチドアナログ（1mg/0.5ml PBS）を免疫後２回、９日目および10日目に腹腔内に受けた。動物を、基本的に毎日、疾患の徴候についてモニターした。EAEを、以下のスケールで記録した：０は、徴候なし；１は、尾の麻痺；２は、後肢虚弱；３は、後肢麻痺；４は、前肢および後肢の罹患。２回の異なる実験によるデータを、５つの動物の平均累積スコアとして得た（図７）。未処置のコントロール動物は高いレベルの疾患を発達し続けたが、MBP ペプチド87-99のh88/A91アナログが２回の実験において有意にEAEの発症を予防するのに効果的であった。アナログを明白な徴候の開始の直前に与えても、EAE の発症を阻止し得た。実施例９ペプチドアナログによるEAEの誘導ペプチドアナログがEAEを引き起こす能力は、インビボで評価される。実施例２に記載のように、ラットをMBP（87-99）またはh88/A91ペプチドアナログで注射した。動物を、毎日EAEの形跡についてモニターした。MBP（87-99）を受けたラットは、平均最大臨床スコア2.4±0.2で、100％のEAE発病率（18/18ラット）を有した。対照的に、ペプチドアナログh88/A99を受けた0/12ラットは、EAEを示した。それゆえ、このペプチドアナログは、EAEを誘導しない。実施例10 ペプチドアナログでのEAEの処置 91K＞Aペプチドアナログは、Lewisラット系統において免疫Ｔ細胞による疾患の養子免疫伝達を阻害し得る（Karinら、1994）。免疫系に対するAPLの効果のさらなる特徴づけを、HBPで注射したLewisラットにおいて調査した。この系において、尾の基部での完全Freundアジュバント（CFA）中のMBP（83-9 9）ペプチドの注射により、12匹の雌Lewisラットにおいて、実験的アレルギー性脳脊髄炎（EAE）が誘導された。９日後、６匹の動物を２つの群に分類し、そしてペプチドアナログまたはコントロールペプチドとしてマッコウクジラミオグロビン(SWM)(110-121)のいずれかを13.2mg/kg皮下注射した。動物を、毎日、疾患の徴候についてモニターし、そして増加する麻痺を示す増分を用いて、０〜４の非線形上昇スケールにおいて、盲目的様式（blinded fashion）で計測した。各独立スコアを群集団で平均し、平均臨床スコアを得た。このような実験の１つから得られた結果を図９に示す。図９に示すように、APL NBI-5788（図８）で処置したこれらの動物における疾患の重篤度は、コントロール群と比較して約50％減少した。図10は、３つの別々の治療実験による結果の疾患の平均の重篤度を示す。APL NBI-5788は、このモデル系における疾患の重篤度および継続期間を有意に減少させた。図11は、別のAP L、NBI-5765（図８）を用いた処置による結果を示す。このAPLもまた、処置群における疾患の大きさを、コントロール動物よりも有意に減少させた。これらの結果は、APLがEAEの発症を阻害することを明らかに示すが、EAEのマウス動物モデル系もまた開発された。SJL/J（H-2⁵）マウスは、百日咳ワクチンの存在下、MBP（83-99）ペプチドでの免疫に応答して、EAEの慢性的な再発形態を発生する。ペプチドアナログNBI-5719およびNBI-5765の疾患を阻害する能力を評価した（図12を参照のこと）。 10匹の動物群を、４週間、20mg/kgのコントロールペプチドまたはペプチドアナログのいずれかを毎週、腹腔内注射した。次いで動物を、次の２〜３ヶ月間にわたって、疾患についてモニターした。図12に見られ得るように、コントロール群において、SJL/Jマウスは、開始約20日目にEAEの徴候を生じ、約３週間続いた。開始約70日目に、再発が生じて、約１の平均臨床スコアに達した。しかし、AP L NBI-5765またはNBI-5719での毎週の注射は、第１相における疾患のレベルを軽減しただけでなく、再発の重篤度も軽減した。このことは特に注目すべきである。なぜなら動物をAPLに約１ヶ月間曝さなかったからある。実施例11 ヒトＴ細胞増殖に対するペプチドアナログの効果ペプチドアナログNBI-5719、5748、5765、5788、および5789のヒトＴ細胞増殖を影響する能力をアッセイした。一定量のペプチドアナログまたはコントロールペプチドSWM（50μM）を、種々の濃度の天然のMBP（83-99）ペプチド（1.1〜30 μM）とともに、照射されたDR適合性末梢血細胞および様々なMS患者に由来したＴ細胞クローンの存在下で培養した。ヒトＴ細胞（1×10⁶）を、DR適合性の、照射された末梢血細胞（PBL、5×10⁶）とともに、３μM MBP83-99、２mM L-グルタミン、50μg/ml ゲンタマイシンペニシリン／ストレプトマイシン、100U/ml r IL-2、および10％ヒトABネガティブ血清を補充したIMDM含有培地中で培養した。細胞を、約60時間培養し、トリチウム化したチミジンを12時間パルスし、そして採集した。組み込まれたトリチウム化されたチミジンの量を測定し、そしてデータを、複製サンプルの平均、プラスまたはマイナスの平均標準偏差として表した。代表的な結果を、図13および14に示す。図13に示すように、不適切なペプチド（マッコウクジラミオグロビン、SWM 11 0-121）がＴ細胞の増殖能力に対する影響をほとんど有さなかった場合、MBP(83- 99)に対応するペプチドアナログNBI-5788(83E>a、84N>K、89F>L、および91K>A) は、ヒトDr2a拘束性Ｔ細胞クローンの様々な濃度のMBP（83-99）に応答する能力を阻害した。図14は、全てのペプチドが、Dr2a拘束性Ｔ細胞の濃度依存性の様式で天然のMBPペプチドに応答する能力を阻害したことを示す。次いでNBI-5788の有効性を、様々な量（1.1μMから30μM）の天然のMBP（83-9 9）の存在下で、APL濃度（２μM、10μM、または50μM）を変化することにより決定した。図15に示すように、10μMおよび50μMの両方で、NBI-5788はDr2a Ｔ細胞株のMBP（83-99）に応答する能力を有意に変化させたが、不適切なペプチド SWMを用いると有意な阻害は見られなかった。ペプチドアナログがDr2b（DrB1^*1501）個体から単離されたMBP反応性Ｔ細胞の増殖応答を阻害する能力を、測定した。一定量のNBI-5788（50μM）を、様々な濃度（1.1μM〜30μM）の天然のペプチドを用いて、照射したDR適合性末梢血細胞および様々なMS患者に由来したＴ細胞クローンの存在下で培養した。図16、17、および18は、異なるＴ細胞株を用いた結果を示す。各Ｔ細胞クローンは、MBPペプチドに応答して取り込むチミジンの量を変化する。それにもかかわらず、NBI-5788は、濃度依存性の様式で、Ｔ細胞クローンのMBPペプチドに応答する能力を阻害した。不適切なペプチドSWMは、Ｔ細胞のMBPペプチドに応答する能力にほとんど影響を有さなかった。図19は、NBI-5719、NBI-5748、NBI-5765、NBI-5788、およびNBI-5789の、Dr2b 拘束性ヒトＴ細胞クローン5F6のMBP依存性増殖を阻害する能力を示す。Dr2b拘束性Ｔ細胞について上述したように（図14）、APLは、濃度依存性の様式でMBP依存性増殖を阻害した。しかし、コントロールペプチドSWMは、増殖性応答に対してほとんど影響を有さなかった。図20は、NBI-5719およびNBI-5765の、Dr4 Dw4拘束性ヒトＴ細胞クローンMS-1 のMBP依存性増殖を阻害する能力を示す。Dr2拘束性Ｔ細胞を用いて上述したように、APLは、濃度依存性の様式においてMBP依存性増殖を阻害した。次に、ペプチドアナログリガンドの、サイトカイン生成を影響する能力を測定した。Dr2b拘束性Ｔ細胞クローン5F6を、３μM MBPペプチド存在下で、10μMのN BI-5788またはSWMとともに、あるいは培地のみのいずれかでインキュベートした。コントロールとして、細胞を培地単独の存在下で培養した。24時間後、上清を取り出し、そして腫瘍壊死因子α（TNF-α）およびインターフェロン-γ（IFN- γ）のレベルを市販のEIAキットを用いて測定した。図21で示され得るように、MBPは、TNF-αおよびIFN-γの両方の生成を刺激した（それぞれ、約200pg/mlおよび160pg/ml）。しかし、ペプチドアナログリガンドNBI-5788は、両方の前炎症性サイトカインの生産を、ほぼ培地のみで達成されるレベルにまで劇的に阻害した。不適切なペプチドSWMはサイトカイン生成に対してほとんど効果を有しなかった。ペプチドアナログNBI-5719、NBI-5748、NBI- 5765、NBI-5788、またはNBI-5789のいずれも、50μMの濃度でさえ、バックグラウンドを超えてサイトカイン生成を刺激しなかった（データは示さず）。前述から、本発明の特定の実施態様が、本発明を例示する目的のために本明細書中に記載されているが、種々の改変が、本発明の意図および範囲から逸脱することなくなされ得ることは明らかである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ガウアー，アミタブアメリカ合衆国カリフォルニア 92129, サンディエゴ，ピクラスストリート 12570 (72)発明者コンロン，ポールジェイ. アメリカ合衆国カリフォルニア 92075, ソラナビーチ，サンタドミンガ 450 (72)発明者ステインマン，ローレンスアメリカ合衆国カリフォルニア 94301, パロアルト，リンカーンストリート 877

Claims

【特許請求の範囲】１．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基91を含み、91位のＬ-リジンが他のアミノ酸に改変され、そして86位のバリン、87位のバリン、88位のヒスチジン、95位のスレオニン、98位のスレオニン、および99位のプロリンからなる群より選択される１〜３のＬ-アミノ酸が、天然のタンパク質中でその位置に存在しているアミノ酸以外のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。２．91位のＬ-リジンが非保存アミノ酸に改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。３．残基91がＤ-リジンに改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。４．残基91が、アルギニン、アスパラギン、ヒスチジン、ロイシン、セリン、グリシン、グルタミン酸、フェニルアラニン、アラニン、およびＤ-リジンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。５．残基91がアラニンに改変され、そして残基87がＤ-バリンに改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。６．残基91がアラニンに改変され、そして残基88がＤ-ヒスチジンに改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。７．残基91がアラニンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。８．残基91がアラニンに改変され、残基87がＤ-バリンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。９．残基91がアラニンに改変され、残基88がＤ-ヒスチジンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。１０．残基88が、セリン、グルタミン酸、チロシン、ロイシン、Ｄ-ヒスチジン、グルタミン、フェニルアラニン、およびリジンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項１に記載のペプチドアナログ。１１．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基97を含み、97位のＬ-アルギニンが他のアミノ酸に改変され、そして86位のバリン、87位のバリン、88位のヒスチジン、95位のスレオニン、98位のスレオニン、および99位のプロリンからなる群より選択される１〜３のＬ-アミノ酸が、天然のタンパク質中でその位置に存在しているアミノ酸以外のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。１２．97位のＬ-アルギニンが非保存アミノ酸に改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。１３．残基97がＤ-アルギニンに改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。１４．残基97が、Ｄ-アラニン、Ｄ-アルギニン、グリシン、リジン、グルタミン、グルタミン酸、スレオニン、ロイシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、およびアラニンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。１５．残基97がアラニンに改変され、そして残基87がＤ-バリンに改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。１６．残基97がアラニンに改変され、そして残基88がＤ-ヒスチジンに改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。１７．残基97がアラニンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。１８．残基97がアラニンに改変され、残基87がＤ-バリンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。１９．残基97がアラニンに改変され、残基88がＤ-ヒスチジンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。２０．残基88が、セリン、グルタミン酸、チロシン、ロイシン、Ｄ-ヒスチジン、グルタミン、フェニルアラニン、およびリジンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項１１に記載のペプチドアナログ。２１．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される、少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基95を含み、95位のＬ-スレオニンが他のアミノ酸に改変され、そして86位のバリン、87位のバリン、88位のヒスチジン、98位のスレオニン、および99位のプロリンからなる群より選択される１〜３のＬ-アミノ酸が、天然のタンパク質中でその位置に存在しているアミノ酸以外のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。２２．95位のＬ-スレオニンが非保存アミノ酸に改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。２３．残基95がＤ-スレオニンに改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。２４．残基95が、アラニン、Ｄ-スレオニン、グリシン、イソロイシン、チロシン、グルタミン、セリン、リジン、グルタミン酸、およびヒスチジンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。２５．残基95がアラニンに改変され、そして残基87がＤ-バリンに改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。２６．残基95がアラニンに改変され、そして残基88がＤ-ヒスチジンに改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。２７．残基95がアラニンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。２８．残基95がアラニンに改変され、残基87がＤ-バリンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。２９．残基95がアラニンに改変され、残基88がＤ-ヒスチジンに改変され、そして残基99がＤ-プロリンに改変されている、請求項２１に記載のペプチドアナログ。３０．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基91を含み、91位のＬ-リジンが他のアミノ酸に改変され、そしてインビボのペプチドアナログの投与の際、タンパク質分解を減少させるように、Ｎ末端アミノ酸およびＣ末端アミノ酸が他のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。３１．前記Ｎ末端アミノ酸および／またはＣ末端アミノ酸がＤ-アミノ酸である、請求項３０に記載のペプチドアナログ。３２．91位のＬ-リジンが非保存アミノ酸に改変されている、請求項３０に記載のペプチドアナログ。３３．残基91がＤ-リジンに改変されている、請求項３０に記載のペプチドアナログ。３４．残基91が、アルギニン、アスパラギン、ヒスチジン、ロイシン、セリン、グリシン、グルタミン酸、フェニルアラニン、アラニン、およびＤ-リジンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項３０に記載のペプチドアナログ。３５．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基95を含み、91位のＬ-リジンが他のアミノ酸に改変され、そしてインビボのペプチドアナログの投与の際、タンパク質分解を減少させるように、Ｎ末端アミノ酸およびＣ末端アミノ酸が他のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。３６．前記Ｎ末端アミノ酸および／またはＣ末端アミノ酸がＤ-アミノ酸である、請求項３５に記載のペプチドアナログ。３７．95位のＬ-スレオニンが非保存アミノ酸に改変されている、請求項３５に記載のペプチドアナログ。３８．残基95がＤ-スレオニンに改変されている、請求項３５に記載のペプチドアナログ。３９．残基95が、アラニン、Ｄ-スレオニン、グリシン、イソロイシン、チロシン、グルタミン、セリン、リジン、グルタミン酸、およびヒスチジンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項３５に記載のペプチドアナログ。４０．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基97を含み、91位のＬ-リジンが他のアミノ酸に改変され、そしてインビボのペプチドアナログの投与の際、タンパク質分解を減少させるように、Ｎ末端アミノ酸およびＣ末端アミノ酸が他のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。４１．前記Ｎ末端アミノ酸および／またはＣ末端アミノ酸がＤ-アミノ酸である、請求項４０に記載のペプチドアナログ。４２．97位のＬ-アルギニンが非保存アミノ酸に改変されている、請求項４０に記載のペプチドアナログ。４３．残基97がＤ-アルギニンに改変されている、請求項４０に記載のペプチドアナログ。４４．残基97が、Ｄ-アラニン、Ｄ-アルギニン、グリシン、リジン、グルタミン、グルタミン酸、スレオニン、ロイシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、およびアラニンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項４０に記載のペプチドアナログ。４５．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基91を含み、91位のＬ-リジンが他のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。４６．７〜12のアミノ酸を含む、請求項４５に記載のペプチドアナログ。４７．残基86〜90、92〜96、98、および99から選択される１〜３のさらなる残基を、他のアミノ酸に改変する工程をさらに包含する、請求項４５に記載のペプチドアナログ。４８．91位のＬ-リジンが非保存アミノ酸に改変されている、請求項４５に記載のペプチドアナログ。４９．残基91がＤ-リジンに改変されている、請求項４５に記載のペプチドアナログ。５０．残基91が、アルギニン、アスパラギン、ヒスチジン、ロイシン、セリン、グリシン、グルタミン酸、フェニルアラニン、アラニン、およびＤ-リジンからなる群より選択されるアミノ酸に改変されている、請求項４５に記載のペプチドアナログ。５１．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基95を含み、95位のＬ-スレオニンが他のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。５２．残基86〜90、92〜94、および96〜99から選択される１〜３のさらなる残基を、他のアミノ酸に改変する工程をさらに包含する、請求項４５に記載のペプチドアナログ。５３．残基86〜94、96、98、および99から選択される１〜３のさらなる残基を、他のアミノ酸に改変する工程をさらに包含する、請求項４５に記載のペプチドアナログ。５４．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基86〜99から選択される少なくとも７アミノ酸を含むペプチドアナログであって、残基97を含み、97位のＬ-アルギニンが他のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。５５．残基86〜90、92〜96、98、および99から選択される１〜３のさらなる残基を、他のアミノ酸に改変する工程をさらに包含する、請求項４５に記載のペプチドアナログ。５６．請求項１、１１、２１、３０、３５、４０、４５、５１、および５４のいずれか１つに記載のペプチドアナログを、生理学的に受容可能なキャリアまたは希釈物と組み合わせて含む、薬学的組成物。５７．多発性硬化症の処置方法であって、以下の工程；請求項１、１１、２１、３０、３５、４０、４５、５１、および５４のいずれか１つに記載のペプチドアナログを、生理学的に受容可能なキャリアまたは希釈物と組み合わせて含む、治療的有効量の薬学的組成物を患者に投与する工程を包含する、方法。５８．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基91がアラニンであり、残基88がＤ-ヒスチジンであり、そして残基9 9がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。５９．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基91がアラニンであり、残基87がＤ-バリンであり、そして残基99がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。６０．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基91がアラニンであり、そして残基88がＤ-ヒスチジンである、請求項５７に記載の方法。６１．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基91がアラニンであり、そして残基87がＤ-バリンである、請求項５７に記載の方法。６２．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基91がアラニンであり、そして残基99がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。６３．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基95がアラニンであり、残基87がＤ-バリンであり、そして残基99がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。６４．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基95がアラニンであり、残基88がＤ-ヒスチジンであり、そして残基9 9がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。６５．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基95がアラニンであり、そして残基88がＤ-ヒスチジンである、請求項５７に記載の方法。６６．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基95がアラニンであり、そして残基99がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。６７．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基95がアラニンであり、そして残基87がＤ-ヒスチジンである、請求項５７に記載の方法。６８．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基97がアラニンであり、残基87がＤ-バリンであり、そして残基99がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。６９．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基97がアラニンであり、残基88がＤ-ヒスチジンであり、そして残基9 9がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。７０．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基97がアラニンであり、そして残基87がＤ-バリンである、請求項５７に記載の方法。７１．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基97がアラニンであり、そして残基88がＤ-ヒスチジンである、請求項５７に記載の方法。７２．前記ペプチドアナログが、残基86〜90から選択される14アミノ酸を含み、そして残基97がアラニンであり、そして残基99がＤ-プロリンである、請求項５７に記載の方法。７３．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99を含むペプチドアナログであって、91位のＬ-リジンが他のアミノ酸に改変され、そして残基83〜90および9 2〜99から選択される２〜４のさらなるＬ-アミノ酸が、天然のタンパク質中でその位置に存在しているアミノ酸以外のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。７４．91位のＬ-リジンがアラニンに改変されている、請求項７３に記載のペプチドアナログ。７５．89位のフェニルアラニンの他のアミノ酸への置換を包含する、請求項７３に記載のペプチドアナログ。７６．Ｎ末端アミノ酸および／またはＣ末端アミノ酸が他のアミノ酸に改変されている、請求項７３に記載のペプチドアナログ。７７．Ｎ末端アミノ酸および／またはＣ末端アミノ酸がＤ-アミノ酸に改変されている、請求項７６に記載のペプチドアナログ。７８．Ｎ末端アミノ酸がヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83である、請求項７７に記載のペプチドアナログ。７９．残基83〜90および92〜99から選択される少なくとも１つのさらなるＬ- アミノ酸が、荷電したアミノ酸に置換されている、請求項７３に記載のペプチドアナログ。８０．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99を含むペプチドアナログであって、83位のＬ-グルタミン酸がＤ-アラニンに改変され、84位のＬ-アスパラギンがＬ-リジンに改変され、89位のＬ-フェニルアラニンがＬ-ロイシンに改変され、そして91位のＬ-リジンがＬ-アラニンに改変されている、ペプチドアナログ。８１．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99を含むペプチドアナログであって、83位のＬ-グルタミン酸がＤ-アラニンに改変され、89位のＬ-フェニルアラニンがＬ-アラニンに改変され、そして91位のＬ-リジンがＬ-アラニンに改変されている、ペプチドアナログ。８２．ヒトミエリン塩基性タンパク質の残基83〜99を含むペプチドアナログであって、91位のＬ-リジンおよび89位のＬ-フェニルアラニンが他のアミノ酸に改変されている、ペプチドアナログ。８３．請求項７３〜８２のいずれか１つに記載のペプチドアナログを、生理学的に受容可能なキャリアまたは希釈物と組み合わせて含む、薬学的組成物。８４．多発性硬化症の処置方法であって、以下の工程：請求項８３に記載の治療的有効量の薬学的組成物を患者に投与する工程を包含する、方法。