JPH10502655A

JPH10502655A - ジヌクレオシド−５’，５’−ピロリン酸

Info

Publication number: JPH10502655A
Application number: JP8504666A
Authority: JP
Inventors: アントニオデ・フローラ，; ウンベルトベナツテイ，; マルコジヨビネ，
Original assignee: グルポ・レペチツト・エス・ピー・エイ; ウニベルシタ・デグリ・ストウデイ・デイ・ジエノバ
Priority date: 1994-07-15
Filing date: 1995-07-10
Publication date: 1998-03-10
Also published as: US6040297A; EP0773951B1; AU3076695A; ES2129893T3; FI970081A; IL114520A0; ZA955826B; AU688552B2; DE69508255D1; WO1996002554A1; ATE177431T1; NO965483L; US6080731A; EP0773951A1; FI970081A0; NZ290127A; HU9700118D0; DE69508255T2; CA2195091A1; HUT76331A

Abstract

(57)【要約】チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドから選択される非天然のヌクレオシドの５’，５’−ピロリン酸、ならびに腫瘍およびレトロウイルス感染（これにはＨＩＶ感染が含まれる）に対する治療剤としてのそれらの製造法および使用が開示される。これらの化合物は、病理学的障害の発症の原因となる特異的細胞集団に対する標的化のために、薬剤学的組成物の活性成分としてか、あるいは生物学的担体（例えば、形質転換された赤血球）内に被包化されるプロドラッグとして投与されることがある。

Description

【発明の詳細な説明】ジヌクレオシド−５’，５’−ピロリン酸本発明は、式（Ｉ）：［式中、記号ＡおよびＢは各々独立に、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドから選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘは各々独立に、酸素もしくは硫黄を表し；記号ＲおよびＲ₁は各々独立に、水素もしくは１〜１０の炭素原子のアルキル基を表す］のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸、ならびに式（Ｉ）で示され、かつ式中、Ｒおよび／またはＲ₁は生物学的に許容されるカチオンを提供する塩基を有する水素を表す、の化合物の付加塩に関する。本発明は、式（Ｉ）のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の製造のための方法、病理学的障害（例えば腫瘍もしくはウイルス感染）の発症および原因に関わる特異的部位もしくは細胞集団に標的化する目的での生物学的担体、特に赤血球内へのそれらの被包化のための方法、ならびに式（Ｉ）のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を被包化している前記生物学的担体、特に赤血球を含有する組成物も包含する。生物学的活性分子を被包化するための赤血球膜の化学修飾は、標的細胞にその被包化分子を生物学的活性形態で送達するための有力な方法である。例えば： − ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ． ”Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓａｓｃａｒｒｉｒｅｓａｎｄｂｉｏｒｅａｃｔｏｒｓ”．ＴｈｅＹｅａｒｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｂａｓｅｌ、Ｋａｒｇｅｒ、（１９９３）、Ｖｏｌ．７、１６８−１７４． − ＴｏｎｅｔｔｉＭ．ｅｔａｌ．”Ｌｉｖｅｒｔａｒｇｅｔｅｉｎｇｏｆａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓｌｏａｄｅｄｗｉｔｈｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ”．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、（１９９１）、Ｖｏｌ．２７、Ｎｏ．７、９４７−９４８． − ＺｏｃｃｈｉＥ．ｅｔａｌ．”Ｈｕｍａｎａｎｄｍｕｒｉｎｅｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓａｓｂｉｏｒｅａｃｔｏｒｓｒｅｌｅａｓｉｎｇｔｈｅａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｄｒｕｇ５−ｆｌｕｏｒｏ−２’−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ”．ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、（１９９１）、Ｖｏｌ．８１、ＰｅｒｇａｍｏｎＰｒｅｓｓｐｌｃ．５１−５７． − ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ．”Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｏｆｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ５−ｆｌｕｏｒｏ−２’−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ−５’−ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｏｔｈｅａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｄｒｕｇ５−ｆｌｕｏｒｏ−２’−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅｉｎｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ”．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、（１９８８）、Ｖｏｌ．８５、３１４５−３１４９． −ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ．”Ｔｈｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｃａｒｒｉｅｒｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ：ａｖｅｒｓａｔｉｌｅｔｏｏｌｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｒａｐｙ”．ＢｉｏｔｈｅｃｈｎｏｌｏｇｙｉｎＤｉａｇｏｎｏｓｔｉｃｓ、ＥｌｓｅｖｉｅｒＳｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓＢ．Ｖ．、（１９８５）、２２３− ２３６．を参照されたい。当該技術分野の更に別の文献が上記論文および刊行物中に引用されている。生物学的に活性な物質、特にリン酸化された化合物の、形質転換された赤血球内への被包化の方法、およびそれらの使用のための組成物、ならびに動物に由来する細胞、具体的には赤血球を誘導化させて他の細胞を探索し出しかつその細胞と融合させるための方法も特許文献：国際公開第９２／２２３０６号、米国特許第４，９３１，２７６号、米国特許第４，６５２，４４９号、および欧州特許出願公開第２９８２８０号に既に開示されている。本明細書および請求の範囲では、「非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基」の表現は、ペントース部分の５’位のヒドロキシ基の除去により非天然のヌクレオシドから生ずる残基と同一視している。表現「記号Ｘは各々独立に、酸素もしくは硫黄を表す」は、記号Ｘの各々が他のものによって想定される意味とは無関係に酸素もしくは硫黄原子を表しうることを意味する。本発明の好ましい態様に従うと、記号Ｘの全てが酸素を表すか、あるいはそれらの内の一つのみもしくは二つが硫黄を表し、かつ他のものが酸素を表すかのいずれかである。この後者の場合には式（Ｉ）の最も好ましい化合物は、硫黄を表す記号Ｘ（一つもしくは複数）が、二重結合を介して直接その（それらの）硫黄原子（一つもしくは複数）に連結されるか、あるいはＸＲもしくは（および）ＸＲ₁の部分でとなる化合物である。用語「生物学的に許容されるカチオン」は、薬剤学的実施法における使用に適するカチオンを意味し、そして式（Ｉ）の化合物の生物学的担体には毒性を示さず、かつ前記担体内へのそれらの被包化のための方法に適合するカチオンを包含する。記号Ｒおよび／またはＲ₁が独立に水素を表す場合には、式（Ｉ）の化合物は生物学的に許容されるカチオンを提供する塩基と付加塩を形成することがある。このような塩は、式（Ｉ）の化合物であって、式中、部分ＸＲおよび／またはＸＲ₁の内の記号Ｘはアニオン形態（すなわち、Ｏ^-および／またはＳ^-）の酸素および／または硫黄原子を表し、かつ記号Ｒおよび／またはＲ₁は生物学的に許容されるカチオンを表す、化合物により表すこともできる。薬剤学的実施法における使用について許容されるカチオンは、アリカリ金属もしくはアルカリ土類金属（例えば、ナトリウム、カリウム、およびマグネシウム）、アンモニア、ならびに脂肪族性、脂環式および芳香族アミン（例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリエタノールアミン、ピペリジン、ピペラジン、ｎ−メチルピペリジン、ｎ−メチルピペラジン、モルホリン、およびピコリン）に由来するものである。薬剤学的実施法および被包化方法の両方に適する生物学的に許容されるカチオンは例えば、Ｎａ⁺およびＫ⁺である。用語「１〜１０の炭素原子のアルキル基」は、場合によっては一つの不飽和結合、および／またはヒドロキシ、メルカプト、クロロ、ヨード、フルオロ、ブロモ、アミノ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルアミノ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルコキシ、および（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルチオから選択される一つもしくは二つの置換基を含んでもよい直鎖状もしくは分岐状のアルキル残基と同一視している。好ましくは、先の用語は、場合によっては、上記のような一つもしくは二つの置換基を含んでもよい１〜４の炭素原子のアルキル残基（例えば、メチル、エチル、プロピル、１−メチルエチル、ブチル、１−メチルプロピル、１，１−ジメチルエチル、および２−メチルプロピル）と同一視している。本発明の更に好ましい化合物群は、式（Ｉ）の化合物であって、式中、記号Ａ、Ｂ、およびＸが先に特定されるものであり、かつ記号ＲおよびＲ₁が各々独立に、水素、あるいは先に特定されるような（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルを表す、化合物を包含する。この好ましい化合物の群は更に、式（Ｉ）の化合物であって、式中、Ｒおよび／またはＲ₁が生物学的に許容されるカチオン（例えば、Ｎａ⁺、Ｋ⁺）および先に記載される他のカチオンを提供する塩基を有する水素を表す、化合物の付加塩をも包含する。本発明の最も好ましい化合物群は、式（Ｉ）［式中、記号ＡおよびＢが先に特定されるものであり、全ての記号Ｘが酸素を表し、かつＲおよびＲ₁の両方が水素を表す］の誘導体、ならびに生物学的に許容されるカチオン（例えば、Ｎａ⁺ もしくはＫ⁺）とのそれらの塩により特記される。本発明を具体的に説明することができる式（Ｉ）のジヌクレオシド−５’，５ ’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の内の幾つかの特定の例は以下の表Ｉに示されている。先の式（Ｉ）［式中、ＡおよびＢの内の少なくとも一つが５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドに由来する５’−Ｃ’残基を表す］のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸は抗腫瘍療法剤として有用である一方で、先の式（Ｉ）［式中、ＡおよびＢの内の少なくとも一つが、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシド−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドから選択される非天然ヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表す］のジヌクレオシド −５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸は抗ウイルス性療法剤、特にレトロウイルス感染（例えば、ＨＩＶ感染）に対して有用である。上述の特徴に従うと、先に特定される両タイプの５’−Ｃ’残基を含むジヌクレオシドは抗腫瘍剤および抗ウイルス剤の両方として有用であるかもしれない。ジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を製造するための方法は当該技術分野に既に記載される方法に従って実施される。例えば：Ａ．Ｍ．Ｍｉｃｈｅｌｓｏｎ、”Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅａｎｈｙｄｒｉｄｅｓｂｙａｎｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅ”，ｉｎＢｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、（１９６４）、９１、１−１３、を参照されたい。この方法に従うと、式（ＩＩ）：［式中、Ａ、Ｘ、およびＲは上記と同一の意味を有する］のヌクレオシドリン酸は、リン酸部分のＸＨ基上で活性化剤（例えば、テトラフェニルピロリン酸もしくはジフェニルホスホクロリデート）との反応により活性化されて先のリン酸ヌクレオシドの活性化されたホスホエステルを形成する。その後にこの活性化されたホスホエステルを式（ＩＩＩ）：［式中、Ｂ、Ｘ、およびＲ₁は先と同一の意味を有する］のリン酸ヌクレオシドと反応させて、その活性化されたホスホエステルからの活性化されたリン酸ジフェニル部分の置換により式（Ｉ）の化合物を形成する。本発明のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を製造するのに有用な方法の他の例は、植物ウイルスの複製を阻害するのに有用な幾つかのジヌクレオシドピロリン酸およびピロリン酸同族体を開示する米国特許第４８５５３０４号に引用される文献から誘導することができる。国際公開第９１／００８６７号は、抗ウイルス活性を初めとする生物学的活性を有する５’−ジホスホヘキソースヌクレオシドを開示している。本発明の代表的態様では上述の反応経路は本質的にはＡ．Ｍ．Ｍｉｃｈｅｌｓｏｎにより記載される条件下で実施され、これはすなわち式（ＩＩ）のヌクレオシドリン酸もしくはそれらの塩（例えば、ナトリウム、リチウム、もしくはバリウム塩）を最初に、ヒンダード第三級アミン塩基（例えば、トリ−ｎ−ブチルアミンもしくはトリ−ｎ−オクチルアミン）あるいはヒンダード第四級アンモニウム塩基（例えば、メチル−トリ−ｎ−オクチルアンモニウム水酸化物）で対応する塩に変換させることである。一般的には、この変換は、ピリジニウム型のイオン交換（強カチオン性）樹脂を通すリン酸ヌクレオシドもしくはそれらの塩（好ましくはナトリウム塩）の溶離によるピリジニウム塩の中間体形成を介して実施される。この段階は主に、ナトリウムもしくは他の鉱物質カチオンを除去する目的を有する。その後にピリジニウム塩を等モル量のヒンダード第三級アミン塩基を含むメタノール溶液と共にインキュベートし、そしてその後に減圧乾燥させてヒンダード第三級アミン塩基を有するその塩を取得する。その後に式（ＩＩ）のヌクレオシドリン酸の塩を過剰量（ヌクレオシドリン酸のモル当たり１．５〜２．５モル）の活性化剤（例えば、クロロリン酸ジエチルもしくはピロリン酸テトラフェニル）と、反応体（例えば、第三級脂肪族アミン（例えば、トリ−ｎ−ブチルアミン）もしくは第三級複素環式アミン（例えば、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルピロリジン）を妨害しない過剰量の酸受容体（活性化剤のモル当たり１．２〜２モル）の存在下で接触させる。この活性化反応は一般的には室温下および無水条件下で、溶媒として不活性非プロトン性有機溶媒（例えば、環式エーテル（例えば、ジオキサン）もしくはそれらの混合物）を利用することにより実施される。幾つかの事例では、反応物濃度、およびそのため反応速度を増加させるには溶解度の高い別の不活性有機溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）の添加が推奨される。先の条件下では、活性化されたリン酸エステルの形成は一般的には２〜５時間以内に完了する。その後にその活性化されたリン酸エステルを、ヒンダード第三級アミン塩基もしくは第四級アンモニウム水酸化物（例えば先に例示されるようなもの）をヌクレオシドリン酸（ＩＩＩ）の塩と、不活性有機非プロトン性溶媒（例えば、ピリジン、ヘキサメチルホスホルアミド、ジメチルホルムアミド、もしくはそれらの混合物）の存在下で反応させる。この反応は通常は、２０℃と３５℃との間にまたがる温度で実施され、そして１５〜３０時間の期間で完了する。この粗反応生成物は、一般的には減圧下での溶媒の蒸発により回収され、次いでクロマトグラフィー法を初めとする、通常の精製方法に供される。例えば、式（Ｉ）［式中、Ｒおよび／またはＲ₁が水素である］の化合物の精製方法のためには、その粗生成物をその後に水に懸濁させ、そして水酸化アルカリ金属水溶液でｐＨの値を８に調節した後に、その溶液を水と非混和性の非プロトン性有機溶媒（例えば、ジエチルエーテル）で抽出する。ピロリン酸ジヌクレオシドを含む水相を、カラムクロマトグラフィー法（例えば、ゲル濾過カラムおよび溶離液としての水を用いることによるもの）およびＨＰＬＣ法（例えば、直鎖状炭化水素で機能化させたシリカゲル逆相カラムを用い、かつ水中メタノールの直線濃度勾配液で溶出するか、あるいは強アニオン交換樹脂を用い、かつ水中塩化リチウムの直線濃度勾配液で溶離することによるもの）を組み合わせることによりさらなる精製に供する。本発明の式（Ｉ）のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸は一般的には安定な化合物であり、特に生物学的に許容されるカチオン（例えば、ナトリウムもしくはカリウム塩）との塩の形態で単離される際に安定である。従って、Ｒおよび／またはＲ₁が水素を表す場合には、それらは遊離酸の形態で単離および特徴決定してもよいが（例えば、Ｈ⁺形態をとるイオン交換樹脂にその塩の水溶液をかけ、そしてその樹脂を水もしくはメタノールと水との混合物で溶出することによる）、それらを塩の形態で保存もしくは利用することが好ましく、生物学的に許容されるカチオンとの塩として保存もしくは利用することが最も好ましい。非天然のヌクレオシドリン酸出発物質は、対応する非リン酸化ヌクレオシドから標準的方法に従って製造することができる。そのような非リン酸化前駆体（これは当該技術分野において記載がなされている）は以下のとうりである：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＡＺＴ）、アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＡ）、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド（ＦＤＵ）、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＣ）、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＡＺＤＤＵ）、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＧ）およびグアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＧ）。以下の引用文献を参照されたい：ＬｅｖｅｎｅＰ．Ａ．、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、（１９２９）、Ｖｏｌ．８３、７９３；ＤａｖｏｌｉＪ．ｅｔａｌ．、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９４８）、９６７；ＨｏｗａｒｄＧ．Ａ．ｅｔａｌ．、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９４７）、１０５２；ＲｏｂｉｎｓＭ．Ｊ．ｅｔａｌ．、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９７１）、９３：２０、５２７７；ＣｈｕＣ．Ｋ．ｅｔａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（１９８９）、５４、２２１７；ＣｏｌｌａＬ．ｅｔａｌ．、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｃｈｉｍ．Ｔｈｅｒ．、（１９８５）、Ｎｏ．４、２９５。多くの事例では先の前駆体を市場で入手することも可能である（例えば、ＳＩＧＭＡＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．社、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）。非リン酸化前駆体を対応するリン酸化化合物に変換させるための方法も当該技術分野より知られている。ヌクレオシドの一リン酸の製造のための典型的方法は、そのヌクレオシドを無水ピリジン中のリン酸シアノエチルの溶液と、縮合剤（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド）の存在下、室温で接触させることよりなる。最終生成物は、アルカリ金属およびアルカリ土類金属との塩（例えば、ナトリウム、リチウム、もしくはバリウム塩）の形態として容易に回収および精製されることがある。幾つかの事例では、ヌクレオシド一リン酸は市場で入手することも可能である（例えば、５−フルオロ−２’−デオキシウリジン−５’−一リン酸、ＳＩＧＭＡＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．社、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）。式（Ｉ）の化合物は抗ウイルス活性（これには抗ＨＩＶ活性が含まれる）および／または抗腫瘍活性を有し、そして薬剤学的組成物の活性成分として有用である。本発明を代表する幾つかのジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の抗ＨＩＶ活性を確認するために、インビトロテストをＨＴＬＶ−１形質転換細胞株ＭＴ−４（これは、ＨＩＶ感染についての高い感受性および許容性を示す）について実施した。ＨＩＶにより誘導される細胞変性効果の阻害を終点として使用した。この検査の方法は本質的にはＲ．Ｐａｕｗｅｌｓｅｔａｌ．「Ｒａｐｉｄａｎｄａｕｔｏｍａｔｅｄｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ−ｂａｓｅｄｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃａｓｓａｙｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ−ＨＩＶｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＶｉｒｏｌｏｇｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓ、２０、（１９８８）、３０９−３２１、により記載されるものである。以下の表ＩＩは、ジ−（チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ −リボシド）−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸（ジ−ＡＺＴ−５’，５’− Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸）についての５０％有効濃度（ＩＣ５０）および５０％細胞障害性濃度（ＣＣ５０）を示す。チミン−３ ’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＡＺＴ）を対照化合物として採用した。本発明の化合物は、特定の細胞集団に赤血球により運搬されるべきプロドラッグとして特に有用であり、その特定の細胞集団中ではそれらの化合物はインビボで迅速に活性形態に変換され得る。赤血球は薬剤もしくはプロドラッグの生物学的担体として独特な機会を提供するが、それは：（ａ）それらがむしろ単純な代謝、およびそのため被包化された薬剤もしくはプロドラッグと相互作用を行うことがある比較的限定されたセットの酵素を有し、（ｂ）それらが身体の全領域に到達することができ、そしてその被包化された薬剤もしくはプロドラッグの、制御された速度（この速度はその酵素が関与する特性を基にプログラムされることがある）に従う活性形態への変換のための生物反応装置として作用することがあり、そして（ｃ）それらは血液細胞が豊富に存在する組織および器官への部位特異的標的化を付与することがある比較的単純な改変に適合する、ためである。幾つかのヌクレオシド薬剤の活性形態がリン酸化誘導体であることが知られている。特に、三リン酸化された誘導体が抗ＨＩＶ活性を有するデオキシヌクレオシドによるウイルス複製の阻害の原因となる形態であるということが一般的に受け入れられている。しかしながら三リン酸化されたデオキシヌクレオシドは臨床的には有用ではなく、それというのはそれらが細胞膜を通過することができないためである。従って抗ＨＩＶデオキシヌクレオシドの有効性の重要因子はそれらがどの程度容易に標的細胞内に侵入し、そして細胞性酵素によるリン酸化を受け得るかである。いずれにせよ、ヌクレオシドは細胞内リン酸化のみを受けることがあるばかりでなく、そのヌクレオシドを治療的活性がより低いかもしくは全く不活性な化合物に変換させる他の反応も細胞内酵素により亢進されることがある。これらの反応の速度がリン酸化過程のものと同一のオーダーである場合には、そのヌクレオシドの治療的有効性は低下する。これらを考慮することは特に重要であり、それは幾つかの標的細胞（例えば、マクロファージ）が低レベルのリン酸化用酵素を有し、そしてそのためリン酸化形態での抗ウイルス性ヌクレオシドの前記感染細胞への投与は、ウイルス阻害に関しては通常の投与経路よりも顕著な利点を示すことがある。本発明の一つの目的は、ジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸が赤血球細胞内に被包化され、そして標的細胞（その標的細胞内ではそのリン酸結合を開裂して２つのヌクレオチドを生じる酵素経路が利用可能である）に特異的に運搬される可能性を活用することである。リン酸化された部分を既に含む２つのヌクレオチドは、所望される生物学的機能を発揮するか、もしくは実質的に不活化されることなく三リン酸化された誘導体の活性形態に迅速に変換されるための適切な化学形態をとっている。ジヌクレオシドピロリン酸は、それらを一旦赤血球内に取り込ませたら、それらは安定となり、かつ被包化の時間とそのプロドラッグの部位特異的送達の時間のと間には赤血球の膜からの緩慢な分散速度を示すという点で、被包化および標的化技術にとっては対応する一リン酸よりも一層適性が高い。これらの特徴により、ヌクレオシドのその担体からの放出の速度のプログラム化に一層高い可変性が与えられる。ジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の別の利点は、ピロリン酸結合を通して相加的もしくは相乗的作用を示す違うペアのヌクレオシドを連結させ、そしてその両方のヌクレオシドを担体内に導入し、特異的標的細胞に送達し、そして各活性形態を同時にそのような各段階中で放出させることが可能であることである。被包化されるジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸のための典型的標的細胞は、マクロファージか、あるいは身体の領域では肝臓および膵臓である。操作された赤血球を網内細胞系内に標的化するための方法が例えば、ＺｏｃｃｈｉＥ．ｅｔａｌ．により「Ｈｅｐａｔｉｃｏｒｓｐｌｅｎｉｃｔａｒｇｅｔｉｎｇｏｆｃａｒｒｉｅｒｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ：Ａｍｕｒｉｎｅｍｏｄｅｌ」、ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９８７）、９、４２３−４３４においてか、もしくは既述のＴｏｎｅｔｔｉＭ．ｅｔａｌ．による論文内に既に記載されている。これらの方法により標的細胞もしくは身体の領域がその生物学的担体を認識し、かつ部位特異的および薬物動態学的に制御された薬剤放出を引き起こさせる目的でそれらと相互作用を行うことができるようになる。治療学的応答および毒性の両方における正の効果を有する治療用作用物質の放出を減速させる目的で適切な生物学的担体（例えば、赤血球）内への抗腫瘍剤およびプロドラッグの被包化が、選択的器官標的化を達成するための有用な手法として既に提案されている（ＺｏｃｃｈｉＥ．ｅｔａｌ．、ｉｎＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｏｃ．ＵＳＡ（１９８９）Ｖｏｌ．８６、２０４０ −２０４４）。５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド−５’− 一リン酸プロドラッグの赤血球内への被包化の例（ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、（１９８８）、Ｖｏｌ．８５、３１４５−３１４９：を参照されたい）により、活性な非リン酸化薬剤の放出の薬物動態学的に有用な制御を達成するためには、等モル量の他のヌクレオシド三リン酸の同時被包化が必要となることが示される。他のヌクレオシドの同時被包化は生物学的適合性の問題、および選択されたヌクレオシドプロドラッグとそれに随伴するヌクレオシド三リン酸との間の相互作用の問題を伴うことがあるかもしれない。本発明により提供される利点の内の一つは、適切な薬物動態学的制御を達成するために他のヌクレオシド三リン酸の同時被包化を必要としない５−フルオロウラシルプロドラッグを製造することが可能性である。有用な薬物動態学的特性を示す本発明のプロドラッグの代表例は、ピロリン酸結合を介して連結される２単位の５−フルオロウラシル−２’ −デオキシ−Ｄ−リボシドからなるジヌクレオシド−５’，５’−ピロリン酸［ジ−（５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド）−５’，５’− Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸］（これは、各一リン酸について一層緩慢な脱リン酸化速度を示す）である。ヒト赤血球細胞内の本発明の代表的なジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ² −ピロリン酸の被包化の典型例は、ジ−ＡＺＴ−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を用い、低張透析および等張放出法により達成された（ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、（１９８８）、Ｖｏｌ．８５、３１４５−３１４９）。洗浄されかつ充填された赤血球（８０％ヘマトクリット）の７０倍容量の溶血用緩衝液（４ｍＭＭｇＣｌ₂を補足してある５ｍＭＮａ₂ＨＰＯ₄、ｐＨ７．２、２６ｍＯｓｍ）に対する３５分間、４℃下、緩和な回転条件下での第一透析を含んでなる二段階方法が用いられた。この段階の後には、透析バッグ内への１０〜１５ｍＭのジ−ＡＺＴ−５’ ，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の添加、および同一条件下での１５分間の更なる透析が実施された。その後に赤血球を、４０分間４℃下で１０ｍＭのグルコースおよびアデノシンを補足してあるリン酸−食塩水緩衝液、ｐＨ７．０、３１０ｍＯｓｍに対して透析することにより再密封した。充填された赤血球をその後に氷冷ＮａＣｌ水溶液（０．９％ｗ／ｗ）水溶液で徹底的に洗浄し、そして１０％のヘマトクリットで自己血漿中３７℃でインキュベートした。ジヌクレオシドピロリン酸、ならびに血漿および赤血球細胞中でのその代謝産物の濃度を断続的時間間隔で、以下の方法を用いることにより決定した。様々な時期に１ｍｌアリコートのインキュベーション混合物を回収した。血漿からの赤血球の分離後にそれら２つの分画を個別に抽出した。１００マイクロリットルの充填赤血球細胞（ＲＢＣ）を１００マイクロリットルの水に添加し、その後には６８マイクロリットルの３．７Ｍの過塩素酸（ＰＣＡ）を激しい浸透下で添加した。この試料を遠心分離し、そして１４０マイクロリットルの上清を３０マイクロリットルの３Ｍ炭酸カリウムで中和させた。その後に形成された沈殿物を除去するためにこの試料を遠心分離にかけた。１５０マイクロリットルの血漿分画を５０マイクロリットルの３．７ＭＰＣＡで処理し、そして１２０マイクロリットルの上清を２７マイクロリットルの３Ｍ炭酸カリウムで中和させ、そして遠心分離にかけた。５マイクロリットルの各抽出物を、ＨＰＯＤＳＨｙｐｅｒｓｉｌ４．６×６０ｍｍ３ミクロン粒子サイズカラムを装着してあるＨＰ１０９０装置（Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ社、ＰａｌｏＡｌｔｏ、ＣＡ）内に注入した。溶媒プログラムは、１００％の緩衝液Ａ（５ｍＭの第三級−水酸化ブチルアンモニウム（ＴＢＡ）を含む０．１ＭＫＨ₂ＰＯ₄、ｐＨ４．９）で開始し、そして１００％の緩衝液Ｂ( 水中の４０％（ｖ／ｖ）メタノール中、５ｍＭＴＢＡを含む０．１ＭＫＨ₂ ＰＯ₄、ｐＨ４．９)に３０分間で上昇させる直線濃勾配液であり；１００％の緩衝液Ｂを５０分間まで維持させた。流速は０．４ｍｌ／分であり、そして溶出された化合物を２６５ｎｍに設定された分光光度検出機でモニターした。様々な化合物についての保持時間（分で表示）は：ＡＴＺ、１７；ＡＺＴ−一リン酸、２１；ジ−ＡＺＴ−ピロリン酸、３３、であった。以下の表ＩＩＩおよびＩＶは既述の測定の結果を示す。先のデータは、ヒト赤血球細胞内のジ−ＡＺＴ−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸濃度が現行の実施法に従う治療的必須事項に適合する値を達成すること、およびその薬剤が非常に緩慢な速度で赤血球から放出されることを示す。既述の特徴により、ジヌクレオシドリン酸プロドラッグの抗ＨＩＶ有効量を含む工学的に作製された赤血球は治療目的にとっては特に有用となる。ヒト赤血球はヌクレオシド薬剤を被包化するためおよび特異的標的化特性を付与するために適切に改変されることがあること、ならびにそのような改変は選択的標的化特性を別にして赤血球の生理学的動態を変化させることがないことが実際に知られている（国際公開第９２／２２３０６号）。ＨＩＶに感染した細胞（例えば、マクロファージ）に対して標的化される際には治療学的有効性に相当する赤血球内でのジヌクレオシドピロリン酸の濃度の評定は、Ｂ．Ｌ．Ｒｏｂｂｉｎｓｅｔａｌ．、によりＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌＡｇｅｎｔｓａｎｄＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、Ｖｏｌ．３８、Ｎｏ．１、（１９９４）１１５−１２１、内に報告されるデータに基づき実施される。実際のところこれらの著者らは、ＡＺＴでの有効な治療を受けている最中のＨＩＶ感染患者においては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中のＡＺＴ三リン酸の細胞内濃度は、５×１０^-15モル／１０⁶細胞〜９×１０^-14モル／１０⁶細胞の範囲にわたることを示している。これらの値は、表ＩＩＩに示される濃度値（これは、約２×１０^-10モル／１０⁶細胞〜４×１０^-10モル／１０⁶細胞）でのジヌクレオチドピロリン酸を含む少なくとも一つの赤血球がＰＢＭＣ（例えば、単球もしくはマクロファージ）により捕獲される場合には高くなることは自明である。先に記載されるように本発明のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を経口経路もしくは非経口経路の投与のための薬剤学的組成物の活性成分として利用することができるか、あるいは特異的身体領域（例えば、肝臓／脾臓）および／または細胞集団（例えば、単球／マクロファージ）に対して標的化される生物学的担体内に被包化される活性薬剤もしくはプロドラッグとして利用することができる。ジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸が経口もしくは非経口の投与のための薬剤学的組成物の活性成分として利用される場合には、前記組成物は通常は治療学的有効量のジヌクレオシドピロリン酸ならびに不活性担体および／または賦形剤を含む。例えば、経口投与のための液状薬剤学的組成物中には、水、好ましくは滅菌水が担体および／または賦形剤として用いられることがある。経口投与のための固形状薬剤学的組成物は、結合剤、崩壊剤、および滑沢剤を含むことがある。一例としては、ゼラチン、トラガカントゴム、もしくは微結晶性セルロースが結合剤として用いられることがあり、アルギン酸もしくはコーンスターチが崩壊剤として用いられることがあり；ステアリン酸マグネシウムもしくはカルシウムが滑沢剤として用いられることがある。所定の固形形態（例えば、カプセル剤）が液状担体（例えば、脂肪油）を含むことがある。非経口投与形態のためには、好ましい担体および／または賦形剤は生理学的食塩水もしくはリン酸緩衝化された食塩水であることがある。経口投与および非経口投与の両方のための液状薬剤学的組成物は更に他の適合性組成物（例えば、溶媒、保存料、および／またはアジュバント）を含むことがあり、それらは例えば：溶媒としてのポリエチレングリコール、プロピレングリコール、もしくはグリセリン、抗菌剤としてのメチルパラベン、酸化防止剤としてのアスコルビン酸もしくは重炭酸ナトリウム、キレート剤としてのエチレンジアミン四酢酸、緩衝剤としての酢酸塩、クエン酸塩、もしくはリン酸塩、である。それに加え、ジヌクレオシドピロリン酸の所望の効果を妨害することがない他の活性成分がその薬剤学的製剤内に取り込まれることがある。経口用もしくは非経口用の薬剤学的組成物は一般的に、０．１〜３．０μＭの範囲にわたる患者内の血清濃度を提供することが可能であるべきである。いずれにせよ、この範囲以外の用量を適用することが可能であり、日用量は、その疾患のタイプおよび重篤度、治療予定の患者の状態、ならびに利用される特異的ジヌクレオチドピロリン酸に従って調節されなければならないことが理解される。錠剤、ピル剤、カプセル剤、およびトローチ剤などが経口投与用の固形用量形態として用いられることがある一方で、水剤、懸濁液、エレキシル剤、およびシロップ剤が液状用量形態として用いられることが好ましい。非経口用製剤は一般的には皮下注射もしくは静脈内投与のための水剤でできている。単位用量形態は一般的には１０〜５００ｍｇのジヌクレオシド−５’，５’− Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を含むことがあり、この数値は純粋に模範的特徴を有し、かつ決して本発明の範囲を制限することはない。本発明のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸が適切な生物学的担体内に被包化される薬剤もしくはプロドラッグとして利用される場合には、そのようなジヌクレオシドピロリン酸を含む薬剤学的組成物は形質転換させた赤血球を含むことが好ましい。そのような形質転換された赤血球の表面は、そのような赤血球内に含まれるジヌクレオシドピロリン酸を組込ませる予定の生物体の細胞により特異的に認識される目的で改変される。例えば、ヒトもしくは動物の病原性ＲＮＡ−タイプのウイルスを宿す細胞による前記特異的認識を達成するための典型的方法が欧州特許出願公開第５１７９８６号に開示されており、かつこの方法は本質的にはそのジヌクレオシドピロリン酸の被包化の以前もしくは後に、その赤血球細胞をうまく包み込む食細胞（例えば、リンパ球、単球、もしくはマクロファージ）により認識され得る特異的抗体をその赤血球の表面蛋白質および／または貫膜蛋白質に結合させることに基づいている。好ましい態様に従うと、ジヌクレオシド −５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を充填した後の赤血球をまず、表面もしくは貫膜蛋白質の可逆性クラスター形成用作用物質で、次いで共有結合用架橋形成剤で処理し、そして最終的に自己血漿内でインキュベートさせてＩｇＧ分子を結合させる。これらの赤血球はそれらのレセプターを通してヒトマクロファージにより認識され、そしてその後にマクロファージ当たりおおよそ１つの赤血球の割合で貪食される。以下の実験はヒトマクロファージへのジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球の標的化を詳細に記載する。先に記載されるジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填の方法に供されたヒトマクロファージをその後に改変させて、マクロファージによるそれらの認識を増加させた。この方法は欧州特許出願公開第５１７９８６号に詳細に記載されている。ジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球は表Ｖに示されるように、約１，５００ＩｇＧ分子／細胞を示し、かつ非処理赤血球と比較すると一層効率よく貪食されることが見いだされた。ＩｇＧ結合数／細胞は、５０μｌのＲＢＣを，ＰＢＳ中、４％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンおよび０．１ｍＣｉの放射性ヨウ素標識させたプロテインＡ（比活性３０ｍＣｉ／ｍｇ蛋白質）を含む１００μｌの５ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４と共にインキュベートすることにより決定した。この試料を３０分間室温でインキュベートし、そしてその後に４度洗浄し、そしてＢｅｃｋｍａｎ５５００ γ−計測器内で結合放射活性についての計測を実施した。薬剤充填赤血球の貪食作用は、Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉｅｔａｌ．「Ｔａｒｇｅｔｉｎｇａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅａｎａｌｏｇｕｅｓｉｎｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄｆｏｒｍｔｏｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ：ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏｓｔｕｄｉｅｓ」、（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８９：６４７７−６４８１による論文に記載される要領でインビトロで決定した。担体赤血球によりマクロファージに輸送されるジ−ＡＺＴ−ピロリン酸の量およびマクロファージ内でのその安定性も評定した。ヒト赤血球に０．４ μモル／ｍｌＲＢＣの濃度でジ−ＡＺＴ−ピロリン酸を充填し、そしてその後にその赤血球を先の要領で改変してマクロファージによるそれらの認識が増加するようにさせた。改変させた赤血球を、マクロファージ当たり１００のＲＢＣの比率でマクロファージに添加し、そして貪食作用を２４時間実施させた。その後に、摂取されなかったＲＢＣをＲＰＭＩ１６４０培地で徹底的（３回）に洗い落とし、そして０．９％（ｗ／ｖ）塩化アンモニウムで一回洗浄した。マクロファージの過塩素酸抽出物をその後に、ＲＢＣ貪食作用後０および２４、４８、もしくは７２時間目に調製し、そしてＫ₂ＣＯ₃で中和させた。この抽出物をその後に中和し、そしてＩｓｏｌｕｔｅ（商標）Ｃ１８カラム（ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＳｏｒｂｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社からのもの、Ｍｉｄ−Ｇｌａｍｏｒｇａｎ、ＵＫ）を製造業者からの説明書に従い、かつ溶出液としてメタノールを利用してジ−ＡＺＴ−ピロリン酸の固相抽出の処理に付した。この抽出物を既述の要領でＨＰＬＣにより分析した。ヒトマクロファージ内でのジ−ＡＺＴ−ピロリン酸の安定性についての結果が図１に示される。ネコの免疫不全症ウイルス（ＦＩＶ）に感染したネコ単球由来のマクロファージにおけるジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球の抗ウイルス性活性のアッセイも実施した。ネコ単球由来のマクロファージは、Ｍ．Ｍａｇｎａｎｉｅｔａｌ．「Ｔａｒｇｅｔｉｎｇａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅａｎａｌｏｇｕｅｓｉｎｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄｆｏｒｍｔｏｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ：ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏｓｔｕｄｉｅｓ」、（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８９：６４７７−６４８１によりヒト単球由来のマクロファージについて報告された要領で培養した。ジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球をマクロファージ当たり１００のＲＢＣの比率で１５時間添加した。薬剤充填赤血球のジ−ＡＺＴ−ピロリン酸含有量は０．４μモル／ｍｌＲＢＣであった。摂取されなかった赤血球は徹底的な洗浄により除去した。対照として、マクロファージ培養物を「非充填」赤血球（例えば、同一ではあるが、ただしジ −ＡＺＴ−ピロリン酸の追加が行われない方法に供した赤血球）で処理した。ジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填ＲＢＣもしくは「非充填」ＲＢＣを取り込ませたマクロファージ、あるいは無添加のマクロファージを３３０ｉ．ｄ．／ウエルのネコ免疫不全症ウイルス（ＰｉｓａＭ−２）で、Ｍ．Ｂｅｎｄｉｎｅｌｌｉｅｔａｌ．「Ｆｅｌｉｎｅｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ：ａｎｄｉｎｔｅｒｅｓｔｉｎｇｍｏｄｅｌｆｏｒＡＩＤＳｓｔｕｄｉｅｓａｎｄａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｃａｔｐａｔｈｏｇｅｎ」、（１９９５）、Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．、ｒｅｖ．８：８７−１１２による論文内に記載される要領で感染させた。細胞培養物を徹底的に洗浄して（６回）、感染後８時間目にマクロファージに結合しているいずれかのウイルス粒子を除去した。その後に細胞培養物を３７℃、５％ＣＯ₂下で３日間維持し、そしてその後にはそれらの総ＤＮＡを単離した。マクロファージからのＤＮＡ単離物は標準的技術により取得され、その技術は８Ｍ尿素、０．３ＭＮａＣｌ、１０ｍＭＴｒｉｓＨＣｌ、ｐＨ７．５での６０分間、３７℃下での細胞溶解を含む。抽出はフェノール−クロロホルム−イソアミルアルコール（２５：２４：１ｖ／ｖ／ｖ）を用いて実施し、そしてＤＮＡ沈殿はエタノールを用いて実施した。ＦＩＶプロウイルスＤＮＡの分析は、２段階におけるウイルス性ｐ２４ｇａｇ遺伝子の内の４９８塩基対の増幅により実施した。増幅の第一段階のためには以下のプライマーを用いた：5′-GGCATATCCTATTCAAACAG-3′（センス）（配列番号１）（ウイルス配列内のヌクレオシド１０２５−１０４４に相当する）および5′-CCTATATTTTACGTTGAG AA-3′（アンチセンス）（配列番号２）（上記配列の内のヌクレオシド１６８０ −１６９９に相当する）。増幅の第二段階のためには以下のプライマーを用いた：5′-TATGGTTTACTGCCTTCTCT-3′（センス）（配列番号３）（ウイルス配列の内のヌクレオシド１１４１−１１６０に相当する）および5′-GAATTCGGTCTTTCATGG GA-3′（アンチセンス）（配列番号４）（上記配列の内のヌクレオシド１６１９ −１６３８に相当する）。Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒサーモサイクラー（ｔｈｅｒｍｏｃｙｃｌｅｒ）内で実施されたＰＣＲは、１６８ｎｇのゲノムＤＮＡ、５０ｍＭＫＣｌ、１０ｍＭＴｒｉｓＨＣｌ、ｐＨ８．３、１．５ｍＭＭｇＣｌ₂、０．００５％Ｔｗｅｅｎ−２０、０．００５％ＮＰ−４０、０．００１％ゼラチン、１５０ｎＭの各プライマー、および５ＵのＲｅｐｌｉｔｈｅｒｍＤＮＡポリメラーゼ（ＥｐｉｃｅｎｔｒｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社、Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ、Ｕ．Ｓ．Ａ．）を含む５０μｌの最終容量中で実施した。第一ペアのプライマーを含む反応混合物を、９４℃で１分間の変性、５０℃で１分間のアニーリング、および７２℃で２分間の伸長の４０周期分、ならびにその後に７２℃で１５分間の最終伸長に供した。その後、この増幅混合物の内の１０μｌを第二ペアのプライマーで全く同一の条件を用いて再増幅させた。このＰＣＲ産物を１．５％のアガロースゲル上での電気泳動により分析し、ナイロン膜上に転移させ、そしてＴＡ−クローニングプラスミド（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社、ＳａｎＤｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、Ｕ．Ｓ．Ａ．）内にクローン化されたｐ２４ｇａｇ遺伝子プローブの４９８塩基対とハイブリダイズさせた。内部対照としてネコヘキソキナーゼ遺伝子を、以下のプライマー：5′-ACATGGAGTGGGGGGCCTTTGG-3′（センス）（配列番号５）（ヒトヘキソキナーゼタイプＩｃＤＮＡの内のヌクレオシド２１９８−２２１９に相当する）および5′-GTTGCGGACGATTTCACCCAGG-3′（アンチセンス）（配列番号６）（ヌクレオシド２２３８−２３４９に相当する）を用いて増幅した。検出はＦＩＶヘキソキナーゼプローブにより実施した。この結果が図２に示される。ジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球の抗ウイルス活性の別のアッセイを、マウス免疫不全症ウイルスに感染しているマウスマクロファージにおいて実施した。マウスマクロファージはＣ５７ＢＬ／６マウスの腹腔から取得し、そしてＲｏｓｓｉｅｔａｌ．「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｍｕｒｉｎｅｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ−ｉｎｄｕｃｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｄｉｓｅａｓｅｂｙｄｉｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅａｎｄｄｉｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ５’−ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ」、（１９９３）、Ｊ．ＡＩＤＳ、６：１１７９−１１８６による論文に記載される要領で培養した。ジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球および感染はＦＩＶについて記載される要領で実施されたが以下の改変を伴い、その改変とは：マウス免疫不全症ウイルス（ＬＰ−ＢＭ５）を標準方法に従いＳＣ−１細胞からの無細胞上清として調製したことであった（Ｄ．Ｅ．Ｙｅｔｔｅｒｅｔａｌ．「ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＴ−ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓａｒｅｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒａｍｕｒｉｎｅｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｉｎｄｕｃｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｄｉｓｅａｓｅ（ＭＡＩＤＳ）」、（１９８７）、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６５：１７３７−１７４２）。ウイルスＤＮＡのＰＣＲ分析は以下の方法に従って実施した。以下のオリゴヌクレオチドプライマーを欠陥ウイルスゲノム（ＢＭ５ｄ）の増幅のために用いた：５’−プライマー、5′-AACCTTCCTCCTCTGCCA-3′（センス）（ウイルス配列中のヌクレオシド１４５６−１４７３に相当する）および３’− プライマー、5′-ACCACCTCCTGGGCTTTC-3′（アンチセンス）（ＢＭ５ｄゲノムの内のヌクレオシド１５７９−１５９６に相当する）。第二ペアのオリゴヌクレオチドプライマーをマウスＧ６ＰＤ遺伝子の内の２０３ｂｐの増幅のために用いた。この増幅は、マウスゲノム内の相対的ＢＭ５ｄ組込みの評定のための内部対照（内因性標準）として作用する。この増幅のためのヌクレオチドプライマーは、５’−プライマー、5′-TGTTCT TCAACCCCGAGGAT-3′（センス）および３’−プライマー、5′-AAGACGTCCAGGATGA GGTGATC-3′（アンチセンス）であった。本明細書で用いられた４本のプライマーはＧ．Ｂｒａｎｄｉｅｔａｌ．「Ｅｆｆｉｃａｃｙａｎｄｔｘｉｃｉｔｙｏｆｌｏｎｇ−ｔｅｒｍａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆ２’，３’，−ｄｉｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅｉｎｔｈｅＬＰ−ＢＭ５ｍｕｒｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｍｏｄｅｌ」、（１９９５）、ＡｎｔｉｖｉｒａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、６、１５３−１６１、による論文に記載されていいる。Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒサーモサイクラー（ｔｈｅｒｍｏｃｙｃｌｅｒ）内で実施されたＰＣＲは、０．２２９μｇのゲノムＤＮＡ（これは約１１４，０００細胞に相当する）、５０ｍＭＫＣｌ、１０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．３、１ｍＭＭｇＣｌ₂、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０、０．００５％ＮＰ−４０、０．００１％ゼラチン、１５０μＭの４つの各デオキシリボヌクレオシド三リン酸、２０ｐモルの各プライマー、および２．５ＵのＲｅｐｌｉｔｈｅｒｍＤＮＡポリメラーゼ（ＥｐｉｃｅｎｔｒｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社、Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ、Ｕ．Ｓ．Ａ．）を含む２５μｌの最終容量中で実施した。この反応混合物を、９５℃で３０分間の変性、５８℃で３０秒間のアニーリング、および７２℃で３０秒間の伸長の３７周期分、ならびにその後の７２℃で１０分間の最終伸長に供した。このＰＣＲ産物を２．５％アガロースゲル上での電気泳動により分析し、ナイロン膜上に転移させ、そして３２Ｐ−ラベル化させたＤ３０もしくはＧ６ＰＤプローブのいずれかとハイブリダイズさせた。ＤＮＡプローブのラベル化は、Ｂｉｏ−Ｒａｄ社(Ｂｉｏ-ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、Ｕ．Ｓ．Ａ.)からのランダムプライマーＤＮＡ−ラベル化キットにより実施した。この結果が図３に示される。本発明のジヌクレオシドピロリン酸を捕獲する改変赤血球を含む薬剤学的組成物は通常では等張溶液の形態として存在するか（例えば、注入使用のための食塩水もしくはグルコース等張溶液）、あるいは静脈内もしくは腹膜内投与のための注射溶液の即時調製物として用いられる予定の形態で存在する。これらの薬剤学的組成物は通常は、好ましくは２〜８ｍｌに変化する赤血球の量、および約０．５〜約１０ｍＭに変化するジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹ ，Ｐ²−ピロリン酸の総量を含む。本発明の被包化されるジヌクレオシドピロリン酸が投与されることがある用量は、患者の体重のキログラム当たり約０．５〜約８０μｇのジヌクレオシドピロリン酸の範囲にわたり、この値は、本発明の範囲の制約を構成することが意図されるのではない表示として与えられる値であることが理解される。図面の説明 −図１は、ヒトマクロファージ内でのジ−ＡＺＴ−ピロリン酸の安定性を示す。 −図２は、マクロファージ内でのＦＩＶプロウイルス性ＤＮＡの分析により測定されたＦＩＶ（ＰｉｓａＭ−２）に感染したネコ単球−由来のマクロファージに対するジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球の抗ウイルス活性を示す。 −図３は、欠陥ウイルスゲノム（ＢＭ５ｄ）ＤＮＡの分析により測定されるマウス免疫不全症ウイルス（ＬＰ−ＢＭ５）に感染したマウスマクロファージに対するジ−ＡＺＴ−ピロリン酸充填赤血球の抗ウイルス活性を示す。実施例１ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド−５’−一リン酸の製造法１００ｍｇ（０．４ｍモル）のヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ −リボシドを１ｍｌのリン酸トリエチル中の０．１１ｍｌ（１．２ｍモル）のオキシ塩化リンに添加し、そしてこの混合物を２時間、−５℃で撹拌した。この混合物を１０ｍｌの氷冷ジエチルエーテルで４度抽出し、次いでそれを２０００ｒｐｍで５分間、０℃で遠心分離した。ジエチルエーテルの除去後、残渣を５ｍｌの水に０℃で懸濁させ、そしてそれを即座に冷却１ＮＮａＯＨで中和させた。この混合物を氷浴槽上に１０分間保持し、そしてｐＨ値を７に調節した。減圧乾固後に、残渣を２５ｍｌのメタノール中に溶解した。この溶液を、ジエチルエーテル中に懸濁される３５ｇのシリカゲルを含むカラムにかけた。純粋な表題化合物を以下の要領でのカラムの溶出により取得した（流速３ｍｌ／分）：全不純物を洗い落とすための１５０ｍｌジエチルエーテル、ジエチルエーテル：メタノール６０：４０（ｖ／ｖ）の１５０ｍｌの混合物、および最終的には精製された生成物を溶出するための約３００ｍｌのメタノール。全過程の収率は８５％であった。Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ５９８９Ａ装置で記録されたＭＳ−スペクトルは、表題化合物の［Ｍ−１］^-イオンに相当するｍ／ｚ３１５．２での分子イオンを示す。実施例２チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド−５’ −一リン酸の製造２４０ｍｇ（１ｍモル）のチミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ− Ｄ−リボシド（ＡＺＴ）をピリジン中の２ｍｌの１Ｍリン酸シアノエチル溶液中に溶解し、そして３０℃で減圧乾固させた。この残渣を１９ｍｌの無水ピリジン中に懸濁させ、そしてその後に３０℃で２度減圧乾固させた。９．６ｍｌの無水ピリジンおよび１．１５ｇのジシクロヘキシルカルボジイミドの添加後に、この混合物を４８時間、２５℃で撹拌した。その後に２．８ｍｌの水を添加し、そしてこの溶液を更に３０分間、２５℃で撹拌し、そして最終的に３０℃で減圧乾固させた。この残渣を９．６ｍｌの水中に懸濁させ、濾過し、そして濾紙上で９．６ｍｌの水を用い、再度洗浄した。その後、１９．６ｍｌの１ＮＮａＯＨを合わせた濾液に添加し、そしてその混合物を還流下で４０分間加熱した。この溶液を２５℃に冷まし、そしてナトリウムカチオンを除去する目的で１５ｇのＤｏｗｅｘ（商標）５０（Ｈ＋）イオン交換樹脂を充填したカラムに通して溶出させた。リン酸塩アニオンを沈殿させる目的で、この溶出液のｐＨをＢａ (ＯＨ)₂の飽和溶液で７．５に調節した。遠心分離後に、上清を３０℃の減圧下で少量（３０ｍｌ）に減少させ、そして再度遠心分離にかけて残存性無機リン酸塩を除去した。二倍量のエタノールを４℃下でこの混合物に添加して表題化合物のバリウム塩を沈殿させた。最後に、この沈殿物をアセトンおよびジエチルエーテルで洗浄し、そして緩和な窒素気流下で乾燥させた。表題化合物のバリウム塩を５ｍｌの水中に懸濁させ、そして２ｇのＤｏｗｅｘ（商標）５０（Ｈ＋）イオン交換樹脂と混合した。その後にこの混合物を２ｇのＤｏｗｅｘ（商標）５０（Ｈ＋）イオン交換樹脂を含むカラムにかけた。このカラムをメタノール：水１：１（ｖ／ｖ）の３０ｍｌの混合物で溶出させ、そしてこの溶出液を最終的には１ＮＮａＯＨで中和させ、そしてＡＺＴ−５’−一リン酸のナトリウム塩を含むこの溶出液をその後に凍結乾燥させて、表題化合物のナトリウム塩を７０％の収率で取得した。Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ５９８９Ａ装置で記録されたＭＳ−スペクトルは、表題化合物の［Ｍ−１］^-イオンに相当するｍ／ｚ３４６．５０での分子イオンを示す。実施例３チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の製造ａ）ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド−５’−一リン酸の活性化：５０ｍｇ（０．０１６ｍモル）のヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ− Ｄ−リボシド−５’−一リン酸を、２ｍｌの水と１ｍｌのメタノールとの混合物に溶解させ、そしてその後にその溶液を１ｇのＤｏｗｅｘ（商標）５０Ｗ−Ｘ８（ピリジニウム形態）イオン交換樹脂を通して溶出させた。このカラムを２０ｍｌの５０％メタノール水溶液で洗浄し、そしてその溶液を減圧乾固させた。残渣を、１．６ｍｌのメタノール中の０．２２ｍｌのトリス−ｎ−オクチルアミンの溶液中に懸濁させ、そしてその後に３０分間撹拌し、そして最終的に３０℃下で減圧乾固させた。得られる残渣を１ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中に懸濁させ、そして３０℃下で減圧乾固させた。この過程を３回反復させた。得られる生成物を、２．２４ｍｌのジオキサン、０．０９６ｍｌのクロロリン酸ジフェニル、および０．１３７ｍｌのトリス−ブチルアミンの溶液に添加し、そしてこの混合物を３時間、２５℃で撹拌した。その後にこれをロータリーエバポレーター内で乾燥させ、そして１６ｍｌのジエチルエーテルをこの残渣に激しい震盪下で添加した。この混合物を氷上に３０分間維持し、そしてその後に１０００ｒｐｍで５分間遠心分離にかけた。ジエチルエーテルを除去し、そしてその残渣を０．９６ｍｌのジオキサン中に溶解し、そして室温で減圧乾固させ、そしてその生成物を後続段階ｃ）においてそのまま用いた。ｂ）ＡＺＴ−５’−一リン酸のトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩：１２０ｍｇ（０．３５ｍモル）のＡＺＴ−５’−一リン酸のナトリウム塩を２ｍｌの水および２ｍｌのメタノール中に溶解させ、そしてその溶液を１ｇのＤｏｗｅｘ（商標）５０Ｗ−Ｘ８（ピリジニウム形態）イオン交換樹脂を通して２０ｍｌの５０％メタノール水溶液で溶出させ、そしてロータリーエバポレーター中で乾燥させた。その後に０．４９ｍｌのトリ−ｎ−オクチルアミンおよび３．５ｍｌのメタノールをその残存性生成物に添加し、そしてこの混合物を３０分間撹拌し、そして最終的に３０℃下で減圧乾固させた。この残渣を再度１．７５ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中に懸濁させ、そして３０℃下で減圧乾固（５ｍｍＨｇ）させた。この過程を３度反復させて、後続段階ｃ）においてそのまま用いられる生成物を取得した。ｃ）反応：段階ａ）の活性化させたヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ− Ｄ−リボシド−５’−一リン酸を０．９ｍｌの無水ピリジン中に溶解させ、そしてこの混合物を、段階ｂ）のＡＺＴ−５’−一リン酸のトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩に添加した。その後に０．１６ｍｌのヘキサメチルホスホルアミドをこの混合物に添加し、それをその後にロータリーエバポレーター内で乾燥させた。０．２ｍｌの無水ピリジンの添加後にこの混合物を２４時間、２５℃で撹拌させた。この残渣を、１ＮＮａＯＨでｐＨ値を８に調節することにより５ｍｌの水に懸濁させ、そしてこの溶液を５ｍｌのジエチルエーテルで３回抽出した。先の表題生成物を含む水層を分離し、そしてその生成物を以下の段階ｄ）に従って精製した。ｄ）精製：段階ｃ）から取得される水溶液の内の０．５ｍｌのアリコートをＳｅｐｈａｄｅｘ（商標）Ｇ１０カラム（５５×１．３ｃｍ）にかけ、そして０．２５ｍｌ／ｍｌの流速で水で溶出させた。表題化合物を含む分画を、逆相カラム（Ｃ１８ μＢｏｎｄａｐａｃｋ（商標）、１０μｍ粒子サイズ）を装着してあるＨＰＬＣ装置を用いることにより更に精製した。溶媒プログラムは、３０分中、１．５ｍｌ／分の流速での０〜３０％（ｖ／ｖ）の水中のメタノールの直線濃度勾配液であった。これらの条件下では、先の表題化合物は約７分の保持時間（Ｒｔ）を示す。先の値でのＲｔを示す分画を合わせ、２ｇのイオン交換樹脂（Ｄｏｗｅｘ（商標）５０Ｗ−Ｘ８、Ｈ⁺形態）にかけ、そして２０ｍｌの水で溶出させた。この溶出液を凍結乾燥させて、３５％の収率で先の表題生成物を取得した。Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ５９８９Ａ装置で記録されたＭＳ−スペクトルは、表題化合物の［Ｍ−１］^-イオンに相当するｍ／ｚ６４４での分子イオンを示す。リン酸塩緩衝液（ｐＨ４．９）、水中の４０％（ｖ／ｖ）メタノール中での紫外線吸収スペクトルは、２７０ｎｍでのショルダーを伴う２５２ｎｍの最大吸収を示す。実施例４ジ−（チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド）−５ ’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の製造ａ）ＡＺＴ−５’−一リン酸の活性化１００ｍｇ（０．２６ｍモル）のＡＺＴ−５’−一リン酸のナトリウム塩を３０ｍｌの水および２ｍｌのメタノールの混合物中に溶解し、そしてその溶液を１ｇのＤｏｗｅｘ（商標）５０Ｗ−Ｘ８（ピリジニウム形態）イオン交換樹脂を通し、２０ｍｌの５０％メタノール水溶液で溶出させ、そしてその後に室温で減圧乾固させた。この残渣を、０．４５ｍｌのトリ−ｎ−オクチルアミンと３．２ｍｌのメタノールとの混合物中に懸濁させ、そして３０分間、２５℃で撹拌し、その後にそれを室温で減圧乾固させた。その残渣を２ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中に溶解し、そして減圧乾固（５ｍｍＨｇ）させた。この過程を３度反復させた。その後に４．４８ｍｌのジオキサン、０．２ｍｌのクロロリン酸ジフェニル、および０．２７ｍｌのトリ−ｎ−ブチルアミンをその残渣に添加し、そして２５℃下、３時間の撹拌後に、この混合物を３０℃下で減圧乾固（５ｍｍＨｇ）させた。その後に１６ｍｌのヘキサンをその残渣に激しい震盪下で添加し、そしてその混合物を氷上に３０分間保持し、その後に１０００ｒｐｍで５分間の遠心分離に付した。この残渣を２．０ｍｌのジオキサンに溶解し、そして減圧乾固させた。回収された生成物を後続段階ｃ）においてそのまま用いた。ｂ）ＡＺＴ−５’−一リン酸のトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩：１００ｍｇ（０．２６ｍモル）のＡＺＴ−５’−一リン酸のナトリウム塩を、３ｍｌの水と２ｍｌの５０％メタノール水溶液との混合物中に溶解し、そしてその溶液を、１ｇのＤｏｗｅｘ（商標）５０Ｗ−Ｘ８（ピリジニウム形態）イオン交換樹脂を含むカラムにかけ、そして２０ｍｌの５０％メタノール水溶液で溶出した。この溶出液を減圧乾固させた。その後に０．４５ｍｌのトリ−ｎ−オクチルアミンおよび３．２ｍｌのメタノールをこの残渣に添加し、そしてこの混合物を２５℃で３０分間撹拌し、そして最終的には室温で減圧乾固させた。この残渣を２ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中に懸濁させ、そして減圧乾固（５ｍｍＨｇ）させた。この過程を３度反復させて、後続段階ｃ）においてそのまま用いられる生成物を取得した。ｃ）反応：段階ａ）の活性化させたＡＺＴ−５’−一リン酸を１．８ｍｌの無水ピリジン中に溶解させ、そしてその溶液を、段階ｂ）のＡＺＴ−５’−一リン酸のトリ− ｎ−オクチルアンモニウム塩に、０．３２ｍｌのヘキサメチルホストリアミドと共に添加した。室温での減圧乾固後に、０．４ｍｌの無水ピリジンをその残渣に添加し、そしてその混合物を２５℃下で２４時間撹拌した。室温での減圧乾固後に、その残渣を６ｍｌの水中に懸濁させ、１ＮＮａＯＨでｐＨ値を８に調節した後に、その混合物を６ｍｌのジエチルエーテルで３回抽出した。先の表題生成物を含む水層を遠心分離により分離させ、そしてその生成物を段階ｄ）に従って回収および精製した。ｄ）精製：前段階ｃ）から得られる水溶液を、逆相ＨＰＬＣカラムを使用して精製した。その水溶液の１ｍｌのアリコートをＢｉｏ−ｓｉｌ（商標）Ｃ１８ＨＬ９０−１０カラム（Ｂｉｏｒａｄ社）（２５０×１０ｍｍ、１０μｍ粒子サイズ）にかけ、そして以下に記載される要領で水中のエタノールの直線段階的濃度勾配液で溶出させた：先の表題化合物は１１分のＲｔで溶出された。先の値のＲｔを示す分画を合わせ、２ｇのイオン交換樹脂（Ｄｏｗｅｘ（商標）５０Ｗ−Ｘ８、Ｈ⁺形態）にかけ、そしてメタノール：水５０：５０（ｖ／ｖ）の３０ｍｌの混合物で溶出した。この溶出液を凍結乾燥させて３５％の収率で先の表題生成物を取得した。Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ５９８９Ａ装置で記録されたＭＳ−スペクトルは、先の表題化合物の［Ｍ−１］^-イオンに相当するｍ／ｚ６７５．９での分子イオンを示す。リン酸塩緩衝液（ｐＨ４．９）、水中の４０％（ｖ／ｖ）メタノール中での紫外線吸収スペクトルは２６５ｎｍに最大吸収を示す。Ｄ₂Ｏ中、ＶａｒｉａｎＧｅｍｉｎｉ分光光度計内で２０℃〜３０℃の温度範囲において２００ＭＨｚで記録される¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、以下の最も有意な化学シフト（δ ｐｐｍ）：１.６３９（−ＣＨ₃）、２.２２５（−Ｏ− ＣＨ₂）、３.９４３(ブロード１′−ＣＨおよび２′−ＣＨ₂)、４.２７５(３ ′−ＣＨ)、５.９５５(４′−ＣＨ)、７.４３９（芳香族性プロトン６−ＣＨ）を示す。実施例５５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の製造ａ）ＡＺＴ−５’−一リン酸の活性化：７０ｍｇ（０．１８２ｍモル）のＡＺＴ−５’−一リン酸のナトリウム塩を、実施例４、段階ａ）に記載されるのと同一の方法に従うことにより活性化させ、そしてその生成物を以下の段階ｃ）においてそのもの自体を用いた。ｂ）５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド−５’−一リン酸のトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩：１００ｍｇ（０．２７ｍモル）の５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ −リボシド−５’−一リン酸のナトリウム塩を、実施例４、段階ｂ）に記載されるのと同一の方法に従うことにより対応するトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩に変換させ、そしてその生成物を以下の段階ｃ）においてそのまま用いた。ｃ）反応：段階ａ）の活性化させたＡＺＴ−５’−一リン酸を１ｍｌの無水ピリジン中に溶解させ、そしてその溶液を段階ｂ）の５−フルオロウラシル−２’−デオキシ −Ｄ−リボシド−５’−一リン酸のナトリウム塩に、０．２ｍｌのヘキサメチルホスホトリアミドと共に添加した。減圧乾固後に、０．２ｍｌの無水ピリジンをその残渣に添加し、そしてその混合物を室温で２４時間撹拌した。３０℃下でのロータリーエバポレーター内での溶媒の蒸発後に、その残渣を５．３ｍｌの水の懸濁させ、そしてｐＨ値を１ＮＮａＯＨの添加により８に調節した後に、その混合物を５ｍｌのジエチルエーテルで３回抽出した。先の表題生成物を含む水層を分離し、そしてその生成物を以下の段階ｄ）に従って回収および生成した。ｄ）精製：段階ｃ）から得られる水溶液を、２ｇのＤｏｗｅｘ（商標）１−Ｘ８（Ｃｌ^- 形態）イオン交換樹脂（これは予め５ｍＭＨＣｌで調節してある）を含むカラムにかけた。流速は０．４ｍｌ／分であった。このカラムを１０ｍｌの５ｍＭＨＣｌで洗浄し、次いで、０．５ｍｌ／分の流速での５ｍＭＨＣｌ中の０〜６００ｍＭのＬｉＣｌの直線濃度勾配液を適用した。表題生成物を含む分画（複数）を回収し、そしてそれらを合わせ、そしてｐＨの値を１ＭＬｉＣｌの添加により６．５に調節した。その後にこの溶液を、３０℃下、ロータリーエバポレーター内で４ｍｌの容積にまで濃縮した。この濃縮された溶液を、４ｍｌ／分の流速での水での溶出および５００μｌの注入による逆相ＨＰＣＬカラム（μＢｏｎｄａｐａｃｋ（商標）Ｃ１８、２５０×１０ｍｍ、１０μｍの粒子サイズ）を用いるＨＰＬＣによって更に精製した。回収された分画を凍結乾燥させて、リチウム塩としての表題生成物２５ｍｇを取得した。この生成物を、実施例４の段階ｄ）の最終部分に記載されるのと同一の方法に従うことにより実質的に定量的な収率で表題の遊離酸化合物に変換させた。Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ５９８９Ａ装置で記録されたＭＳ−スペクトルは、表題化合物の［Ｍ−１］^-イオンに相当するｍ／ｚ６５３での分子イオンを示す。実施例６ジ−（５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド）−５’，５’ −Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸の製造ａ）５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド−５’−一リン酸の活性化：１００ｍｇ（０．２７ｍモル）の５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ −リボシド−５’−一リン酸のナトリウム塩を、実施例４、段階ａ）に記載されるのと同一方法に従って活性化させた。ｂ）５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド−５’−一リン酸のトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩：１００ｍｇ（０．２７ｍモル）の５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ −リボシド−５’−一リン酸のナトリウム塩を、実施例４、段階ｂ）に記載されるのと同一の方法に従うことにより対応するトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩に変換させ、そしてその生成物を以下の段階ｃ）においてそのまま用いた。ｃ）反応：段階ａ）の活性化させた５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド−５’−一リン酸のナトリウム塩を１ｍｌの無水ピリジン中に溶解させ、そしてその溶液を段階ｂ）の５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド −５’−一リン酸のトリ−ｎ−オクチルアンモニウム塩に、０．２ｍｌのヘキサメチルホスホトリアミドと共に添加した。減圧乾固後に、０．２ｍｌの無水ピリジンをその残渣に添加し、そしてその混合物を室温で２４時間撹拌した。３０℃ 下でのロータリーエバポレーター内での溶媒の蒸発後、その残渣を６ｍｌの水中に懸濁させ、そしてｐＨ値を１ＮＮａＯＨの添加により８に調節した後、その混合物を６ｍｌのジエチルエーテルで３回抽出した。先の表題生成物を含む水層を分離し、そしてその生成物を以下の段階ｄ）に従って回収および精製した。ｄ）精製：段階ｃ）から得られる水溶液を、２ｇのＤｏｗｅｘ（商標）１−Ｘ８（Ｃｌ^- 形態）イオン交換樹脂（これは予め５ｍＭＨＣｌで調節してある）を含むカラムにかけた。流速は０．４ｍｌ／分であった。このカラムを１０ｍｌの５ｍＭＨＣｌで洗浄し、次いで、０．４ｍｌ／分の流速での５ｍＭＨＣｌ中の０〜６００ｍＭのＬｉＣｌの直線濃度勾配液を適用した。先の表題生成物を含む分画（複数）を回収し、そしてそれらを合わせ、そしてｐＨの値を１ＭＬｉＣｌの添加により６．５に調節した。その後にこの溶液を、３０℃下、ロータリーエバポレーター内で２ｍｌの容積にまで濃縮し、その後にこの化合物を氷上で二倍量のエタノール：アセトン１：４（ｖ／ｖ）の混合物を添加することにより沈殿させた。この沈殿させた化合物を最終的にはアセトンおよびエーテルで洗浄し、そして緩和な窒素気流下で乾燥させて、先の表題化合物のリチウム塩を取得し、これを実施例３の段階ｄ）の最終部分に記載されるのと同一方法に従うことにより遊離酸に転化させた。収率は３０％であった。Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋｅｒｄ５９８９Ａ装置で記録されたＭＳ−スペクトルは、表題化合物の［Ｍ−１］^-イオンに相当するｍ／ｚ６３３での分子イオンを示す。リン酸緩衝液（ｐＨ４．９）、水中の４０％（ｖ／ｖ）メタノール中での紫外線吸収スペクトルは２６９ｎｍに最大吸収を示す。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９６年９月３０日【補正内容】生物学的活性分子を被包化するための赤血球膜の化学的改変は、標的細胞にその被包化分子を生物学的活性形態で送達するための有力な手段である。例えば： − ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ． ”Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓａｓｃａｒｒｉｒｅｓａｎｄｂｉｏｒｅａｃｔｏｒｓ”．ＴｈｅＹｅａｒｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｂａｓｅｌ、Ｋａｒｇｅｒ、（１９９３）、Ｖｏｌ．７、１６８−１７４． − ＴｏｎｅｔｔｉＭ．ｅｔａｌ． ”Ｌｉｖｅｒｔａｒｇｅｔｉｎｇｏｆａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓｌｏａｄｅｄｗｉｔｈｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ”．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、（１９９１）、Ｖｏｌ．２７、Ｎｏ．７、９４７−９４８． − ＺｏｃｃｈｉＥ．ｅｔａｌ． ”Ｈｕｍａｎａｎｄｍｕｒｉｎｅｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓａｓｂｉｏｒｅａｃｔｏｒｓｒｅｌｅａｓｉｎｇｔｈｅａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｄｒｕｇ５−ｆｌｕｏｒｏ −２’−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ”．ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、（１９９１）、Ｖｏｌ．８１、ＰｅｒｇａｍｏｎＰｒｅｓｓｐｌｃ．５１−５７． − ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ． ”Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｏｆｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ５−ｆｌｕｏｒｏ−２’−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ−５’−ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｔｏｔｈｅａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｄｒｕｇ５−ｆｌｕｏｒｏ−２’−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅｉｎｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ”．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、（１９８８）、Ｖｏｌ．８５、３１４５−３１４９． −ＤｅＦｌｏｒａＡ．ｅｔａｌ． ”Ｔｈｅｔｅｃｈｎｏｅｒｓａｔｉｌｅｔｏｏｌｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｒａｐｙ”．ＢｉｏｔｈｅｃｈｎｏｌｏｇｙｉｎＤｉａｇｏｎｏｓｔｉｃｓ、ＥｌｓｅｖｉｅｒＳｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓＢ．Ｖ．、（１９８５）、２２３−２３６．を参照されたい。当該技術分野の更に別の文献が上述の論文および刊行物に引用されている。以下の記述および請求の範囲では、化学名と一般的に用いられる頭辞語との間の対応関係は、以下に記載される要領で維持されるであろう：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＡＺＴ）、アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＡ）、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド（ＦＤＵ）、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＣ）、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＡＺＤＤＵ）、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＩ）、およびグアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド（ＤＤＧ）。生物学的に活性な物質、具体的にはリン酸化された化合物の、形質転換させた赤血球内への被包化の方法、およびそれらの使用のための組成物、ならびに動物に由来する細胞、特に赤血球を誘導化させて他の細胞を探索し出し、かつその細胞と融合させるための方法が特許刊行物に既に開示されており、それらは：国際公開第９２／２２３０６号、米国特許第４，９３１，２７６号、米国特許第４，６５２，４４９号、および欧州特許出願公開第２９８２８０号、である。国際公開第９１／００８６７号により、生物学的活性（これには、抗ウイルス活性が含まれる）を有する５’−ジホスホヘキソースヌクレオシドが開示されている。本記述および請求の範囲では「非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基」の表現は、ペントース部分の位置５’内のヒドロキシ基の除去により非天然のヌクレオシドから得られる残基と同一である。表現「記号Ｘは各々独立に、酸素もしくは硫黄を表す」は、記号Ｘの各々が他のものによって仮定される意味とは無関係に酸素もしくは硫黄を表すことがあることを意味する本発明の代表的態様では既述の反応経路は本質的にはＡ．Ｍ．Ｍｉｃｈｅｌｓｏｎにより記載される条件下で実施され、これはすなわち式（ＩＩ）のヌクレオシドリン酸もしくはそれらの塩（例えば、ナトリウム、リチウム、もしくはバリウム塩）を最初に、ヒンダード第三級アミン塩基（例えば、トリ−ｎ−ブチルアミンもしくはトリ−ｎ−オクチルアミン）、あるいはヒンダード第四級アンモニウム塩基（例えば、水酸化メチル−トリ−ｎ−オクチルアンモニウム）を有する対応の塩に変換させることである。この変換作業は通常は、ピリジニウム形態をとるイオン交換（強カチオン性）樹脂を通すリン酸ヌクレオシドもしくはそれらの塩（好ましくはナトリウム塩）の溶離によるピリジニウム塩の中間体形成を介して実施される。この段階は主に、ナトリウムもしくは他の鉱物質カチオンを除去する目的を有する。その後にピリジニウム塩を等モル量のヒンダード第三級アミン塩基を含むメタノール溶液と共にインキュベートし、そしてその後に減圧乾燥させてヒンダード第三級アミン塩基を有するその塩を取得する。その後に式（ＩＩ）のヌクレオシドリン酸の塩を過剰量（リン酸ヌクレオシドのモル当たり１．５〜２．５モル）の活性化剤（例えば、クロロリン酸ジエチルもしくはピロリン酸テトラフェニル）と、反応物（例えば、第三級脂肪族アミン（例えば、トリ −ｎ−ブチルアミン）もしくは第三級複素環式アミン（例えば、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルピロリジン）を妨害することがない、過剰量の酸受容体（活性化剤のモル当たり１．２〜２モル）の存在下で接触させる。この活性化反応は一般的には室温下および無水条件下で、溶媒として不活性非プロトン性有機溶媒（例えば、環式エーテル（例えば、ジオキサン）もしくはそれらの混合物）を利用することにより実施される。請求の範囲１．式（Ｉ）：［式中、記号ＡおよびＢは各々独立に、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘは各々独立に酸素もしくは硫黄を表し；記号ＲおよびＲ₁は各々独立に、水素もしくは１〜１０の炭素原子のアルキル基を表し、このアルキル基は場合によっては、不飽和結合、および／または、ヒドロキシ、メルカプト、クロロ、ヨード、フルオロ、ブロモ、アミノ、（Ｃ₁− Ｃ₄）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルアミノ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルコキシ、および（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルチオから選択される一つもしくは二つの置換基を含むことがある］のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ₁，Ｐ₂−ピロリン酸、ならびに式（Ｉ）［式中、Ｒおよび／またはＲ₁は生物学的に許容されるカチオンを提供する塩基を有する水素を表す］の化合物の付加塩。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 39/44 9455−4ＣＡ６１Ｋ 39/44 47/06 7433−4Ｃ 47/06 Ｂ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ジヨビネ，マルコイタリア・アイ−17024フイナレリグレ・ビアオツドーネパスカレ４／２

Claims

【特許請求の範囲】１．式（Ｉ）：［式中、記号ＡおよびＢは各々独立に、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘは各々独立に酸素もしくは硫黄を表し；記号ＲおよびＲ₁は各々独立に、水素もしくは１〜１０の炭素原子のアルキル基を表す］のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸、ならびに式（Ｉ）［式中、Ｒおよび／またはＲ₁は生物学的に許容されるカチオンを提供する塩基を有する水素を表す］の化合物の付加塩。２．記号Ａが：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびグアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｂが：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびグアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘの内の一つもしくは二つが、二重結合を通してリン原子（一つもしくは複数）に直接連結されかつ部分ＸＲおよびＸＲ₁が酸素もしくは硫黄を表すものから選択され、そして他の記号Ｘの各々が酸素を表し；記号ＲおよびＲ₁の各々は独立に、水素原子もしくは１〜４の炭素原子のアルキル残基を表す］請求の範囲１のジヌクレオシド、ならびに、式中、Ｒおよび／またはＲ₁が生物学的に許容されるカチオン、好ましくはナトリウムおよびカリウムカチオンを提供する塩基を有する水素を表す、化合物の付加塩。３．記号全Ｘが酸素を表し、ＲおよびＲ₁の両方が水素を表す請求の範囲２に記載の化合物、ならびに生物学的に許容されるカチオン、好ましくはＮａ⁺もしくはＫ⁺を有するそれらの塩。４．記号ＡおよびＢの各々が以下の組み合わせ：１）Ａ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド２）Ａ：５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドＢ：アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド３）Ａ：５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドＢ：５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド４）Ａ：５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドＢ：シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド５）Ａ：５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドＢ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド６）Ａ：５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドＢ：ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド７）Ａ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド８）Ａ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド９）Ａ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１０）Ａ：アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１１）Ａ：ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１２）Ａ：ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１３）Ａ：ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１４）Ａ：シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１５）Ａ：アデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１６）Ａ：ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ− リボシド１７）Ａ：グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１８）Ａ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド１９）Ａ：ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド２０）Ａ：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドならびに２１）Ａ：ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドＢ：グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、における非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し、記号Ｘの各々が酸素を表し；記号ＲおよびＲ₁の各々が水素を表す；請求の範囲２の化合物、ならびに生物学的に許容されるカチオン、好ましくはナトリウムもしくはカリウムカチオンを提供する塩基を有するそれらの付加塩。５．ｉ）Ａが、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドである非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し、そしてＢが、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドである非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表すか；あるいはｉｉ）記号ＡおよびＢの各々が、チミン−３'−アジド−２'，３’− ジデオキシ−Ｄ−リボシドである非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表すか；あるいはｉｉｉ）Ａが、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドである非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し、そしてＢが、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ− リボシドである非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表すか；あるいはｉｖ）記号ＡおよびＢの各々が、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシドである非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘの各々が酸素を表し；記号ＲおよびＲ₁の各々が水素を表す；請求の範囲４の化合物、ならびにそれらのナトリウムおよびカリウム塩。６．記号ＡおよびＢが、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシドである非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘの各々が酸素を表し；記号ＲおよびＲ₁の各々が水素を表す；請求の範囲５の化合物、ならびにそれらのナトリウムおよびカリウム塩。７．医療薬としての使用のための、請求の範囲１〜６の内のいずれかの化合物。８．記号ＡおよびＢの内の少なくとも一つが：チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表す、抗ウイルス剤、具体的にはレトロウイルス（例えば、ネコおよびマウスの免疫不全症ウイルス感染、ならびにＨＩＶ感染）に対するものとしての使用のための、請求の範囲１〜４の内のいずれかの化合物。９．抗ウイルス剤、具体的にはレトロウイルス感染（例えば、ネコおよびマウスの免疫不全症ウイルス感染、ならびにＨＩＶ感染）に対するものとしての使用のための、請求の範囲６の化合物。１０．記号ＡおよびＢの内の少なくとも一つが、５−フルオロウラシル−２’ −デオキシ−Ｄ−リボシドである非天然のヌクレオシドの５’ −Ｃ’残基を表す、抗腫瘍剤としての使用のための、請求の範囲１〜４の内のいずれか一つの化合物。１１．抗−ＨＩＶ剤の製造のための、請求の範囲５の項目ｉ）、ii）、およびｉｉｉ）の化合物の内のいずれかの使用。１２．抗−ＨＩＶ剤の製造のための、請求の範囲６の化合物の使用。１３．抗腫瘍剤の製造のための、請求の範囲５の項目ｉｉｉ）およびｉｖ）の化合物の内のいずれかの使用。１４．式（Ｉ）：［式中：記号ＡおよびＢは各々独立に、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘは各々独立に酸素もしくは硫黄を表し；記号ＲおよびＲ₁は各々独立に水素、もしくは１〜１０の炭素原子のアルキル基を表す］のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸、および式（Ｉ）［式中、Ｒおよび／またはＲ₁が生物学的に許容されるカチオンを提供する塩基を有する水素を表す］の化合物の付加塩を含む薬剤学的組成物。１５．腫瘍および／またはウイルス感染に対する治療薬の製造のための、請求の範囲１〜６の内のいずれかの化合物であって、前記化合物が生物学的担体内に被包化されることを特徴とする化合物の使用。１６．生物学的担体が形質転換された赤血球である、請求の範囲１５に記載の使用。１７．式（Ｉ）：［式中：記号ＡおよびＢの各々は独立に、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘは各々独立に酸素もしくは硫黄を表し；記号ＲおよびＲ₁は各々独立に水素、もしくは１〜１０の炭素原子のアルキル基を表す］のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸ならびに式（Ｉ）［式中、Ｒおよび／またはＲ₁が生物学的に許容されるカチオンを提供する塩基を有する水素を表す］の化合物の付加塩を含む形質転換された赤血球を含む組成物。１８．式（Ｉ）：［式中：記号ＡおよびＢの各々は独立に、チミン−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、５−フルオロウラシル−２’−デオキシ−Ｄ−リボシド、ウラシル−３’−アジド−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、グアニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、ヒポキサンチン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、シトシン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、およびアデニン−２’，３’−ジデオキシ−Ｄ−リボシド、から選択される非天然のヌクレオシドの５’−Ｃ’残基を表し；記号Ｘは各々独立に酸素もしくは硫黄を表し；記号ＲおよびＲ₁は各々独立に水素、もしくは１〜１０の炭素原子のアルキル基を表す］のジヌクレオシド−５’，５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸、ならびに式（Ｉ）［式中、Ｒおよび／またはＲ₁が生物学的に許容されるカチオンを提供する塩基を有する水素を表す］の化合物の付加塩を製造するための方法であって、式（ＩＩ）：［式中、Ａ、Ｘ、およびＲは先と同一の意味を有する］のヌクレオシドリン酸のＸＨ基を活性化させて活性化されたホスホ−エステルを形成させ、そしてそのような活性化ホスホ−エステルをヒンダード第三級アミン塩基を有する式（ＩＩＩ）：［式中、Ｂ、Ｘ、およびＲ₁は先と同一の意味を有する］のヌクレオシドリン酸の塩と反応させることを含む、上記方法。１９．式（ＩＩ）のリン酸ヌクレオシドのＸＨ基がピロリン酸テトラフェニルもしくはクロロリン酸ジフェニルとの反応により活性化される、請求の範囲１８に記載の方法。２０．ヒンダード第三級アミン塩基を有する式（ＩＩＩ）のヌクレオシドリン酸の塩が、トリ−ｎ−ブチルアミン、トリ−ｎ−オクチルアミン、もしくは水酸化メチル−トリ−ｎ−オクチルアンモニウムを有する塩である、請求の範囲１８および１９の内のいずれかに記載の方法。２１．式（ＩＩ）の活性化されたヌクレオシドリン酸と、ヒンダード第三級アミンを有する式（ＩＩＩ）のリン酸ヌクレオシドの塩との間の反応が、それらの反応物、好ましくは第三級脂肪族アミンもしくは第三級複素環式アミンを妨害することがない、余剰の酸受容体の存在下で実施される、請求の範囲１８、１９、および２０の内のいずれかに記載の方法。２２．式（ＩＩ）の活性化されたヌクレオシドリン酸と、式（ＩＩＩ）のヌクレオシドリン酸の塩との間の反応が、室温下、不活性有機溶媒、好ましくはジオキサンの存在下、場合によっては高溶解度の別の溶媒、好ましくはジメチルホルムアミドの存在下で実施される、請求の範囲１８、１９、２０、および２１の内のいずれかに記載の方法。２３．請求の範囲１〜６の内のいずれかのジヌクレオシド−５’−５’−Ｐ¹ ，Ｐ²−ピロリン酸を赤血球内に被包化し、その赤血球が：（ｉ）溶血用緩衝液中で透析され、（ｉｉ）同一の透析条件下でジヌクレオシド−５’−５’−Ｐ¹ ，Ｐ²−ピロリン酸と接触され、（ｉｉｉ）前記溶解物に関して高張であるリン酸−食塩水緩衝液に対して透析することにより再密封され、そして（ｉｖ）その再密封された赤血球を徹底的に洗浄すること、を特徴とする方法。２４．請求の範囲１〜６の内のいずれかのジヌクレオシド−５’−５’−Ｐ¹ ，Ｐ²−ピロリン酸を含む形質転換された赤血球であって、そのような形質転換された赤血球の表面が、ヒトもしくは動物の病原性レトロ −ウイルスを宿す細胞により特異的に認識されることを目的に改変されることを特徴とする上記赤血球の組成物。２５．ジヌクレオシド−５’−５’−Ｐ¹，Ｐ²−ピロリン酸を含む赤血球が最初に（ｉ）表面もしくは貫膜蛋白質の可逆性菌株形成性作用物質で、次いで（ｉｉ）共有結合的連結用架橋形成剤で処理され、そして最後には（ｉｉｉ）自己血漿中でインキュベートされてＩｇＧ分子と結合することを特徴とする、請求の範囲２４の組成物を調製する方法。