JPH10218893A - ５−フルオロウラシルを含むオリゴヌクレオチドおよびその製 造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 ５−フルオロウラシルを含有し，抗ガン活性の強いオリ
ゴヌクレオチドを提供する 【目的】 制ガン剤およびその製造 【構成】 ５−フルオロウラシルを含むヌクレオシド
を用いてオリゴヌクレオチドを得る。このオリゴヌクレ
オチドは，抗ガン剤として使用される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は，活性は高く，毒性の低
減された抗ガン剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】抗ガン剤には，アルキル化剤，抗生物
質，代謝拮抗剤等がある。その中でも５−フルオロウラ
ジル（５ＦＵ）およびそのマスク型化合物は数多く研究
されている。１−ヘキシルカルバモイル−５−フルオロ
ウラシル，，１−テトラヒドロフリル−５ＦＵ，５−デ
オキシ−５−フルオロウリジン（ｄＦＵ）が臨床で利用
されている。５−フルオロウリジン（ＦＵ），５−フル
オロ−２’−デオキシウリジン（ｄＦＵ）のアシル基で
マスクされた化合物も研究されているが，今だ臨床には
使用されていない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】５−フルオロウリジ
ン，５−フルオロ−２’−デオキシウリジンは，抗ガン
活性が高いにも係わらず，臨床に使用されない原因は，
毒性が高いことにある。これら化合物は，すぐにＲＮＡ
にとりこまれて蛋白合成を阻害する。又チミジレートミ
ンセターゼを阻害するためである。そこで，５ＦＵより
も５ＦＵのマスク型がより多く使われるように，ＦＵ，
ｄＦＵをマスクすることが望ましい。マスクされた化合
物自体は，抗ガン活性も毒性もない。ところが，マスク
がはずれた物質は抗ガン活性が出る。

【０００４】従来アシル基でマスクされた化合物が数多
く使われてきたが，アシル基は生体内に大量に存在する
リバーゼにより，すぐ加水分解されてその機能を発揮さ
れていない。そこで，本発明者は，リン酸結合でＦＵ，
ないしｄＦＵを結合したオリゴマーを作れば，アシル基
のように容易には切れず，それ自体は毒性がなく，切れ
た後の化合物：５ＦＵ，ｄＦＵＲ，５−フルオロウリジ
ン酸（ＦＵＰ），５−フルオロ−２’−デオキウリジル
酸（ｄＦＵＰ）は，いずれも抗ガン活性は強いので，活
性が強くて毒性の少ない化合物を製造し得ると考えた。
またグアノシンをＦＵ，ｄＦＵと混合して投与すると抗
ガン効果が増強することが知られている。そこで，グア
ノシンを含む５−ＦＵオリゴヌクレオチドも効果があ
る。また２−シアノ−２’−デオキシ−１−β−アラビ
ノフラノシルシトシン（ＣＮＤＡＣ），アラビノフラノ
シルシトシン（ＡｒａＣ），２’−テオキシメチリデン
シチジン（ＤＭＤＣ）を１成分として加えることも効果
がある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明の化合物は，Ｆ
Ｕ，ｄＦＵの水酸基の１個ないし２個とリン酸エステル
結合で結合した化合物を合成すればよい。リン酸結合を
つくる方法は，ジエステル法，トリエステル法，ホスホ
アミダイト法が知られている。実施例１−１４でホスホ
アミダイト法の例をしめす。β−シアノエチル−Ｎ．Ｎ
−ジイソプロピルクロロホスホアミダイトをヌクレオシ
ドの１つの水酸基と反応させておき，他のヌクレオシド
の水酸基と反応させた後，ヨードで酸化後，保護基を脱
離させた。また，実施例１５−１９でトリエステル法の
例を示す。選択的に保護されたヌクレオシドの２−クロ
ロフエニルリン酸エステルと選択的にほごされたヌクレ
オシドを脱水剤，例えばトリイソプロピルベンゼンスル
ホニルクロリドを用いて縮合させた後，保護基を脱離し
て目的物を得る。又，リン酸結合のＰ＝ＯがＰ＝Ｓ結合
になった場合には，３価のリンを酸化する時硫黄で酸化
する方法で合成することができる。又，ピロリン酸結合
をもつ場合には，５−フルオロウリジル酸，５−フルオ
ロテオキウリジル酸類にカルボジイミダゾールを作用さ
せればよい。トリヌクレオチド，テトラヌクレオチドの
場合には，ジヌクレオチドの方法を繰り返すことによっ
て，目的物を得ることができる。 固層法をもちいるこ
とも良い。

【０００６】本発明の方法に得られる化合物は，５−フ
ルオロ−２’−デオオキシウリジニル（５’→５’）−
５−フルオロウリジン，５−フルオロウリジニル（５’
−β−シアノエチル−５’−）−５−フルオロウリジ
ン，５−フルオロウリジニル（５’→５’）−５−フル
オロウリジン，５−フルオロ−２’−デオキシウリジニ
ル（３’−β−シアノエチル−５’）−５−フルオロウ
リジン，５−フルオロ−２’−デオキシウリジニル
（５’→５’），Ｐ＝Ｓ）−５−フルオロウリジンなど
がある。ＦＵ，ｄＦＵとウリジン（Ｕ），グアノシン
（Ｇ），チミン（Ｔ），シトシン（Ｃ），アラビノシル
シトシン（ＡｒａＣ），２’−シアノ−２’−デオキシ
アラビノシルシトシン（ＣＮＤＡＣ），２’−デオキシ
メチリデンシチデン（ＤＭＤＣ）が結合したジヌクレオ
チド，トリヌクレオチドなどがある。又，ＦＵに２つの
ｄＦＵが結合したビス（５−フルオロ−２’−デオキシ
ウリジニル（３’→５’）（５’→５’）−５−フルオ
ロウリジン，１つのｄＦＵに２つのＦＵがついたビス
（５−フルオロウリジニル（３’→５’）（５’→
５’）−５−フルオロ−２’−デオキシウリジン，（Ｆ
Ｕ（３’−５’）ｄＦＵ（３’−５’）ＦＵ），ＦＵ
（５’−５’）ＣＮＤＡＣ（３’−５’），ＣＮＤＡＣ
に２つのＦＵ又はｄＦＵがついたＦＵ−ＣＮＤＡＣ−Ｆ
Ｕ，ｄＦＵ−ＣＮＤＡＣ−ＦＵなどがある。又，ＦＵと
ＦＵ，ＦＵとｄＦＵがピロリン酸結合した化合物，例え
ばＰ’−（グアノシン−５’−）Ｐ^２−（５−フルオロ
ウリジン−５’）ピロホスフェート，Ｐ’−（５−フル
オロウリジン−５’）−Ｐ^２−（５−フルオロ−２−デ
オキシウリジン−３）ピロホスフェート，Ｐ^１−（５−
フルオロウリジン−５’）Ｐ^２（５−フリオロ−２’−
デオキシウリジン−３’）−Ｐ^２−（５−フルオロウリ
ジン−５’）ピロホスフェートがある。

【０００７】

【作用】抗ガン作用がある。人間の胃ガンの培養細胞で
カトウＩＩＩに対して，強い増殖抑制作用がある。又
人間の大腸ガン（ＬＳ１７４Ｔ）に対して，効果をしめ
す。従って，人ガンに対して，効果があることが判明し
た。

【０００８】

【実施例１】２’，３’−０−イソプリピリデン−５−
０−（β−シアノエチル−Ｎ．Ｎ−ジイソプロビルアミ
ノホスフィチル）５−フルオルウリジン（９） ２’，３’−０−イソプロビリデン−５−フルオロウリ
ジン（０．６８ｍｍｏｌ，２０６．６ｍｇ）を無水アセ
ニトリル５ｍ１に溶解させ，エチルジイソプルアミン
（２．７２ｍｍｏｌ，３５１．５６ｍｇ）を加え，０℃
に反応系を保ちながら，β−シアノエチル−Ｎ，Ｎ−ジ
イソプロピルクロロフォスホロアミダイト（１．３６ｍ
ｍｏｌ，３２３．５ｍｇ）を加え窒素雰囲気下，室温で
１時間反応させる。白色アモルファスとして化合物９
（３１４．３ｍｇ，９２％）を得た。 Ｒ_ｆ＝０．７（ＡｃＤＦｔ：ベンゼン１ ：１）

【０００９】

【実施例２】３’−０−アセチル−２’−デオキシウリ
ジニル（５’−β−シアノエチル−５’）−２’，３’
−０−イソプロピリデン−５−フルオロウリジン（１
０） 化合物９（０．６２５ｍｍｏｌ，３１４．３ｍｇ）をＴ
ＨＦ２ｍｌに溶解させ，３’−０−アセチル−２’−デ
オキシウリジン（０．３７５ｍｍｏｌ，１０８，１７ｍ
ｇ）ＩＨ−テトラゾール（２．５ｍｍｏｌ，１７５．１
ｍｇ）を加え，窒素雰囲気下，室温で１０分間反応させ
た。そして０．５Ｍのヨウ素溶液（溶媒：ピリジン：Ｔ
ＨＦ：Ｈ_２Ｏ＝１：１：１）をヨウ素の色が消えてなく
なるまで加え，室温で３０分間撹拌した。白色アモルフ
ァスとして化合物１０（２２９．８ｍｇ，８７％）を得
た。 Ｒ_ｆ＝０．３（ＣＨ_２Ｃｌ_２＝２０：１），ｍｐ・・・
１２５℃，ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ［ＰＰｍ］＝１．３５，２．１２，２．２９〜２．３
５，２．４４〜２．５１，２．８５〜２．８９，３．７
３〜３．７７，４．３１〜４．３９，５．０１〜５．０
５，５．２９，５．６９，６．２４〜６．２９，７．７
０〜７．８０ ＩＲ（ＣＨＣｌ_３．ｃｍ^−１）：３０００，２３５８，
Ｉ７０８，１６６８，１４７１，１３６７，１２４０，
１０２９

【００１０】

【実施例３】３’−０−アセチル−２’−デオキシ−５
−フルオロウリジニル（５’−β−シアノエチル−
５’）−５−フルオロウリジン（１１）化合物 １０
（０．１４６ｍｍｏｌ，１０２．８ｍｇ）を８０％酢酸
１０ｍｌに溶解させ，１時間加熱還流を行った。減圧
下，酢酸を除去後その残渣を少量のメタノールに溶解さ
せ，エーテル中に滴下し再沈殿させることにより，白色
堅いとして化合物１１（９３ｍｇ，９６％）を得た。Ｒ
_ｆ＝０．２（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ＝１０：１）ｍ
ｐ．１３２℃

【００１１】

【実施例４】５−フルオロ−２’−テオキシウリジニル
（５’→５’）−５−フルオロウリジン（１）化合物１
１（０．１１ｍｍｏｌ，７２．９ｍｇ）をメタノール１
ｍｌに溶解させ，１０％水酸化ナトリウム水溶液１５０
μｌ加えて，室温で３０分間撹拌させた。減圧下溶媒を
除去し，その残渣を少量の水に溶解させ，陽性イオン交
換樹脂により精製を行い，メタノール／エーテル系より
再沈殿を行うことにより，白色固体として化合物１ ５
７．７ｍｇ，９２％）を得た。Ｒｆ＝０．５（^ｉＰｒＯ
Ｈ：ＮＨ_３水：Ｈ_２Ｏ＝７：１：２，ｍｐ＝１４３，１
４５℃，ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ［ｐｐｍ］＝２．１１
〜２．２５（２Ｈ，ｍ，ＦＵｄＲ”−Ｈ），４．０１〜
４．２４（８Ｈ，ｍ，ＦＵＲ３，４，５−Ｈ，ＦＵｄＲ
−３，４，５−Ｈ），４．３４〜４．３９（ＩＨ，ｍ，
ＦＵＲ２−Ｈ），５．８１（ＩＨ，ｂｒ，ＦＵＲ１−
Ｈ），６．２０（ＩＨ，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈ_ｚ，ＦＵｄＲ
１−Ｈ），７．８５〜７．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５
Ｈ_Ｚ，ＦＵＲ６−Ｈ，ＦｕｄＲ６−Ｈ），ＩＲ（ＮａＣ
ｌ，ｃｍ^−１）：３５８３，２９２７，１７０８，１２
６５，１１１２，１０５４

【００１２】

【実施例５】２’，３’−０−イソプロピリデン−５−
フルオロウリジニン（５’−β−シアノエチル）−
２’，３’−０−イソプロピリデン−５−フルオロウリ
ジン（１２）化合物５（０．４７ｍｍｏｌ，１４２．０
３ｍｇ）をＴＨＦ３ｍｌに溶解させ，エチルジイソプロ
ピルアミン（１．０３４ｍｍｌ，１３３．６４ｍｇ）を
加え．反応系を−７８℃に保つ。これにβ−シアノエチ
ルホスホロジクロリダイト（０．２５８ｍｍｏｌ，４
４．４ｍｇ）を加え，窒素雰囲気下−７８℃で３０分間
反応させ，次いで０．５Ｍのヨウ素溶液（溶媒・・・ピ
リジン：ＴＨＦ：Ｈ_２Ｏ＝１：１：１）を反応系に黄色
が消えなくなるまで加え，室温で３０分間反応させた。
シリカゲルカラムクロマトグラフィーで単離精製するこ
とにより，白色アモルファスとして化合物１２（１３
１．９ｍｇ，８０％）を得た。 Ｒｆ＝０．２（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ＝２０：１）ｍ
ｐ．１３１〜１３３℃（ＣＨ_２Ｃｌ−Ｅｔ_２Ｏ系より再
沈殿）ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，ＴＭＳ）δ［ｐｐｍ］＝
１．３３，１．５４，２．７８，４．２６〜４．３４，
４．８５，５．０２，５．６３，７．４９〜７．５３，
元素分析：計算値 Ｃ：４５．０７ Ｈ：４．４８
Ｎ：９．７３ 実験値 Ｃ：４５．１４ Ｈ：４．５２
Ｎ：９．４４

【００１３】

【実施例６】５−フルオロウリジニル（５’−β−シア
ノエチル−５’）−５−フルオロウリジン（１３） 化合物（１２）（０．４１ｍｍｏｌ，９９．１ｍｇ）を
８０％酢酸５ｍｌに溶解させ１時間加熱還流を行い，減
圧下加熱乾燥を行うことにより，白色アモルファスとし
て化合物１３（９１ｍｇ，定量的）を得た。 Ｒｆ＝０．５５（ＣＨＣｌ_２：ＭｅＯＨ＝３：１） Ｎ
ＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ） δ［ｐｐｍ］＝２．８４，４．０
７〜４．１７，４．２５〜４．３４，５．６５〜５．６
９，７．７２

【００１４】

【実施例７】５−フルオロウリジニル（５’→５’）−
５−フルオロウリジン（２） 化合物１３（０．１１ｍｍｏｌ，７０．２ｍｇ）をメタ
ノール３ｍｌに溶解させ，１０％水酸化ナトリウム水溶
液を１５０μｌを加え，室温で１時間反応させた後，溶
媒を減圧下，留去して得られた残渣を少量の水に溶解さ
せ陽イオン交換樹脂（アンバーライト）により精製を行
う。溶媒を除去した後，減圧下での加熱乾燥しにより白
色アモルファスとして化合物２（６０．１ｍｇ，９３
％）を得た。 Ｒｆ＝０．３５（^ｉＰｒＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ：Ｈ_２Ｏ＝
７：１：２） ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ） δ［ｐｐｍ］＝
４．１０〜４．１７，４．２２〜４．３１，５．８３，
７．９０

【００１５】

【実施例８】３’−（β−シアノエチル−Ｎ．Ｎ−ジイ
ソプロピルアミノ）−ホスフィチル−５’−０−トリチ
ル−５−フルオロ−２’−デキオキシウリジン（１４） ５’−０−トリチル−５−フルオロ−２’−デオキシウ
リジン（０．６９２ｍｍｏｌ，３３８．１ｍｇ）を無水
アセトニトリル３ｍｌに溶解させ，エチルジイソプロピ
ルアミン（１．６ｍｍｏｌ，２０６．８ｍｇ），β−シ
アノエチル−Ｎ．Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホロア
ミダイト（０．８０１ｍｍｏｌ．１８９．５１ｍｇ）を
加え，室温で３０分間反応させた。シリカゲルカラムク
ロマトグラフィーで単離精製することにより，白色アモ
ルファスとして化合物１４（４０４ｍｇ，８５％）を得
た。Ｒｆ＝０．８（ＡｃＤＥｔ：Ｂｅｎｚｅｎｅ＝１：
１）

【００１６】

【実施例９】５’−０−トリチル−５−フルオロ−２’
−デオキシウリジニル（３’−β−シアノエチル−
５’）−２’，３’−０−イソプロピリテン−５−フル
オロウリジン（１５） 化合物１４（０，５８７ｍｍｏｌ，４０４ｍｇ）を無水
ＴＨＦ５ｍｌに溶解させ，２’，３’−０−イソプロピ
リデン−５−フルオロウリジン（５）（０．４１１ｍｍ
ｏｌ，１２４．１１ｍｇ），ＩＨ−テトロゾール（２．
３４８ｍｍｏｌ，１６４．４８ｍｇ）を加えて，室温で
３０分間反応させた。その後，０．５Ｍのヨウ素溶液
（溶媒・・・プリジン：ＴＨＦ：Ｈ_２Ｏ＝１：１：１）
を反応系が黄色を帯びるまで加え，室温で１時間反応さ
せる。シリカゲルカラムクロカトグラフィーで単離精製
することにより，白色アモルファスとして化合物１５
（３０５．２７ｍｇ，８２％）を得た。 Ｒｆ＝０．５０（ＣＨ_２Ｃｌ_２：：ＭｅＯＨ＝＝１０：
１） ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，ＴＭＳ） δ［ｐｐｍ］＝
１．３０，１．５２，２．３８，２．６３〜２．７５，
３．３４〜３．５１，４．１３〜４．３３，４．８５，
５．０３，５．２１，５．５４，６．２６，７．２１〜
７．４０，７．７０〜７．７３

【００１７】

【実施例１０】５−フルオロ−２’−デオキソウリジニ
ル（３’−β−シアノエチル−５’−）−５−フルオロ
ウリジン（１６）化合物１５（０．１２３ｍｍｏｌ，１
１１．１ｍｇ）を８０％酢酸に溶解させて１時間加熱還
流を行った後，減圧下で酢酸を留去させる。得られた残
渣に水を加え，不溶物をセライトで濾過により除去し，
その濾液を減圧濃縮し得られた残渣をメタノールエーテ
ル系により再沈殿を行うことにより，白色固体として化
合物１６（７２．０３ｍｇ，）＄％）が得られた。Ｒｆ
＝０．０３（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ＝１０：１ ｍ
ｐ．１３９〜１４２℃

【００１８】

【実施例１１】５−フルオロ−２’−テオキシウリジニ
ル（３’→５’）−５−フルオロウリジン（３）化合物
１６（０．１０８ｍｍｏｌ，６７．２ｍｇ）をメタノー
ル２ｍｌに溶解し，１０％水酸化ナトリウム水溶液１５
０μｌを加え，室温３０分反応させた。反応後，減圧下
で溶媒を除去し得られた残渣を少量の水に溶解し，陽イ
オン交換樹脂（アンバーライト）により精製を行い，メ
タノールエーテル系により再沈殿を行うことにより，白
色固体として化合物３（５４．９ｍｇ，８９％）を得
た。 Ｒｆ＝０．４５（^ＩＰｒＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ：Ｈ_２Ｏ＝
７：１：２） ｍｐ １４８〜１５０℃ ＮＭＲ（ＣＤ
_３ＯＤ） δ［ｐｐｍ］＝２．１５〜２．２３，２．４
０〜２．４４，３．５８〜３．６６，３．９７〜４．１
５，５．７５，６．０６，７．８４〜７．９０

【００１９】

【実施例１２】３’−０−アセチル−２’−テオキシ−
５−フルオロウリジニル（５’−β−シアノエチル−
５’，Ｐ＝Ｓ）−２’，３’−０−イソプロプリデン−
５−フルオロウリジン（１７）２’，３’−０−イソプ
ロプリデン−５’−０−（β−シアノエチル−Ｎ．Ｎ−
ジイソプロピルアミノ）−ホスフィチル−５−フルオロ
ウリジン０．９８２ｍｍｏｌ，４９３．６ｍｇ）を無水
ＴＨＦ５ｍｌに溶解させ，３’−０−アセチル−５−フ
ルオロ−２’−デオキシウリジン（０．５８９ｍｍｏ
ｌ，１６９．９ｍｇ），ＩＨ−テトラゾール（３．９２
８ｍｍｏｌ，２７５．１６ｍｇ）を加え，窒素雰囲気
下，室温で２０分間反応させた。そしてさらに，硫黄
（２，９４６ｍｍｏｌ，９４．４５ｍｇ）を加え，室温
で２時間反応させた。シリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーで単離精製することにより，白色アモルファスとし
て化合物１７（３３１．５ｍｇ，７８％）を得た。 Ｒｆ＝０．４０（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ＝１０：１）
ｍｐ．９５〜９７℃ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，ＴＭＳ）
δ［ｐｐｍ］＝１．３５，１．５５，２．１２，２．１
７〜２．２４，２．４５〜２．５３，２．７６〜２．８
１，４．２１〜４．３６，４．８２〜４．８６，５．０
３〜５．０５，５．２８〜５．３０，５．５７〜５．５
９，６．２６〜６．３１

【００２０】

【実施例１３】３’−０−アセチル−５−フルオロ−
２’−デオキシウリジニル（５’−β−アミノエチル−
５’，Ｐ＝Ｓ）−５−フルオロウリジン（１８）化合物
１７（０．１５１ｍｍｏｌ，１０８．９ｍｇ）を８ｏ％
酢酸５ｍｌに溶解させ，加熱還流を１時間行った後，減
圧下で酢酸を除去得られた残渣を少量のメタノールに溶
解し，エーテル中に滴下する。析出した沈殿物を濾取
し，減圧下で加熱乾燥することにより，白色固体として
化合物１８（９２．７ｍｇ，９０％）を得た。 Ｒｆ＝０．２０（ＣＨ_２Ｃｌ：ＭｅＯＨ＝１０：１）
ｍｐ＝１１５〜１２０℃ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ） δ［ｐｐｍ］＝２．１１，２．２８〜２．５１，２．８
９〜２．９３，４．１６，４．２８〜４．４３，．５．
３０，５．８２，６．２３，７．８６

【００２１】

【実施例１４】５−フルオル−２’−デオキシウリジニ
ル（５’→５’，Ｐ＝Ｓ）−フルオロウリジン（４）化
合物１８（０．１２７ｍｍｏｌ，８６．７ｍｇ）をメタ
ノール３ｍｌに溶解させ，１０％水酸化ナトリウム水溶
液を１５０μｌを加え，室温で１時間反応させた。反応
後，減圧下で溶媒を除去し得られた残渣を陽イオン交換
樹脂（アンバーライト）により精製を行い，メタノール
／エーテル系により再沈殿を行うことにより，白色固体
として化合物４（７２．５ｍｇ，９７％）を得た。 Ｒｆ＝０．５（ｉＰｒＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ：Ｈ_２Ｏ＝７：
１：２） ｍｐ．１３５℃ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ） δ［ｐｐｍ］＝２．１０〜２．２４，４．０５〜４．１
４，４．２２〜４．３２，４．４０〜４．４６，５．８
７〜６．２５，７．９４元素分析［％］Ｃ_１８Ｈ_２１Ｏ
_１２Ｎ_４Ｆ_２ＰＳ・Ｈ_２Ｏとしての計算値 Ｃ：３４．
２４，Ｈ：４．１５，Ｎ：８．８７，実験値 Ｃ：３
４．２０，Ｈ：３．９４，Ｎ：８．７５

【００２２】

【実施例１５】チミジリル（３’→５’）−５−フルオ
ロウリジン（１９） ５’−トリチル−（３’−２−クロロフェニル−５’）
−２’，３’−ジアセチル−５−フルオロウリジン
（０．２ｍｍｏｌ，２００ｍｇ）をジオキサンと水の混
合液（７／１，Ｖ／Ｖ：８ｍｌ）に溶解して，Ｓｙｎ−
２−ビリジンアルドキシム（４ｍｍｏｌ，４９０ｍｇ：
８ｍｌ）と１，１，３，３−テトラメチルグアニジン
（４ｍｍｏｌ，０．５ｍｌ）を加え，室温で１日間撹拌
した。溶媒を減圧下留去して得られた残渣を濃アンモニ
ア（２８％）とピリジンの混合液（４／１，Ｖ／Ｖ，２
５ｍｌ）に溶解し，反応容器を密封しと，５０℃で５時
間加熱撹拌した。次に溶媒を減圧下留去し，残渣をエー
テルで３度洗浄した後，８０％酢酸水溶液（１５ｍｌ）
を加え，１００℃で２０分間加熱撹拌した。ピリジン
（３０ｍｌ）を加え，溶媒を減圧下４０℃以下で留去し
て得られる残渣をクロロホルム，エーテルとして酢酸エ
チルでそれぞれ２回ずつ洗浄した。残渣はＤＥＡＥ−セ
ルロースカラムクロマトグラフィー（１．５ｃｍφ×３
０ｃｍ）で単離した。目的物のナトリウム塩（７１ｍ
ｇ，６３％）を得た。

【００２３】

【実施例１６】グアニリル（５’→５’）−５−フルオ
ロウリジン（２０） ２’，３’−ジベンゾイル−０−ジフエニルカルバモイ
ル−Ｎ^２−プロピオニルグアニリル−（５’−２−クロ
ロフェニル−５’−）−２’，３’−ジアセチル−５−
ルオロウリジン（０．１３ｍｍｏｌ，１６０ｍｇ）をジ
オキサンと水の混合液（７／１．Ｖ／Ｖ＝５．２ｍｌ）
に溶解して，ｓｙｎ−２−ピリジンアルドキシム（５．
２ｍｍｏｌ，６４０ｍｇ）を１，１，３，３−テトラメ
チルグアニジン（５．２ｍｍｏｌ，０．６５ｍｌ）を加
えて，室温で４時間撹拌した後，さらにテトラメチルグ
アニジン（０．１３ｍｍｏｌ，０．０３ｍｇ）を加え
て，室温で１日間撹拌した。溶媒を減圧下留去して得ら
れる残渣をエーテルと酢酸エチルでそれぞれ４回ずつ洗
浄した後，再び残渣を濃アンモニア水（２８％）とピリ
ジンの混合液（４／１，Ｖ／Ｖ：２５ｍｌ）に溶解し
て，反応容器を密閉し５０℃で５時間加熱撹拌した。溶
媒を減圧下留去して得られる残渣をＤＥＡＥ−セルロー
ズカラムクロマトグラフィー（２ｃａφ×２５ｃｍ）で
単離した。 Ｒｆ：０．４３（イソプロピルアルコール：濃アンモニ
ア水（２８％）：水＝７：１：２）０．４２（アビセル
ＴＬＣ，イソプロピルアルコール：濃アンモニア水：水
＝７：３：２）ｍｐ：９７℃（発泡） ＮＭＲ：（Ｄ_２
Ｏ），ｄ（ｐｐｍ），３．９３〜４．６６，５．７６，
５．８９，７．５２，８．５３ ＩＲ：（ｎｕｊｏｌ）３３００，１７００，１６３５，
１２５０

【００２４】

【実施例１７】グアニル（３’→５’）−５−フルオロ
ウリジン（２１） ２’−３’−ジベンゾイル−Ｏ^６−ジフェニルカルバモ
イル−Ｎ^２−プロピオニル−グアニリル−（３’−２−
クロロフエニル−５’）−２’（３’−ジアセチル−５
−フロロウリジン（０．２６ｍｍｏｌ，３８０ｍｇ）を
ジオキサンと水の混合液（７／１，Ｖ／Ｖ＝１０．８ｍ
ｌ）に溶解して，ｓｙｎ−２−ピリジンアルドキシム
（１０．４０ｍｍｏｌ，１．２７ｇ）と１，１，３，３
−テトラメチルグアニジン（０．１３ｍｍｏｌ，０．０
３ｍｌ）を加えて室温で１日間撹拌した。溶減圧下留去
してえられる残渣を濃アンモニア水（２８％）とプリジ
ンとの混合液（４／１，Ｖ／Ｖ：３０ｍｌ）に溶解し
て，反応容器を密閉し，５０℃で５時間加熱撹拌した
以下実施例１６と同様にして，目的物のナトリウム塩１
４０ｍｇ（８３％）を得た。 Ｒｆ：０．５２（イソプロピルアルコール：濃アンモニ
ア水（２８％）：水＝７：１：２ ＩＲ：（ｎｕｊｏｌ）３２００（ｗｉｄｅｐｅａｋ Ｏ
−Ｈ，Ｎ−Ｈ），１６８０ ＣＣ＝Ｏ），１２５０（Ｐ
＝０）ａｎｄ １１６０ｃｍ^−１（Ｐ−Ｏ−Ｃ）ＮＭ
Ｒ：（Ｄ_２Ｏ）３．７８〜４．４８，５．８０，７．７
２〜８．０４，分解点：２２１℃

【００２５】

【実施例１８】グアニリル（３’−５’）−５−フルオ
ロ−２’−デオキシウリジン（２２） ２−テトラヒドロプラニル−５−ジメトキシトリチル−
Ｏ^６−ジフエニルカルバモイル−Ｎ^２−プオプロニル−
グアニリル（３’−２−クロロフアニル−５’）−３−
アセチル−５−フルオロ−２−デオキシウリジン（０．
３３ｍｍｏｌ，４５５ｍｇ）をジオキサンと水の混合液
（７／１，Ｖ／Ｖ：１３．７ｍｌ）に溶解して，ｓｙｎ
−２−ピリジンアルドキシム（１３．１８ｍｍｏｌ，
１．６１ｇ）と１，１，３，３−テトラメチルグアニジ
ン（１３．１８ｍｍｏｌ，１．６５ｍｌ）を加え，室温
で１日間撹拌した。溶媒を減圧下留去そて得られる残渣
を濃アンモニア（２８％）とピリジンの混合液（４／
１，Ｖ／Ｖ，４０ｍｌ）に溶解し，反応容器を密閉死と
５０℃で５時間加熱撹拌した。以下実施例１６と同様に
処理して目的物を白色パウダー１６０ｍｇ（７８％）を
得た。 Ｒｆ：０．４２（イソポロピルアルコール：濃アンモニ
ア水（２８％）：水＝７：１：２）

【００２６】

【実施例１９】Ｐ’−（グアノシン−５’−）Ｐ^２−
（５−フルオロウロジン−５’−）ピロホスフィート
（２３） ５−フルオロウリジン−５’−モノホスフェート（０．
２９ｍｍｏｌ，１００ｍｇ）を乾燥ジメチルホルムアミ
ド（１．４５ｍｌ）に懸濁させて，Ｎ．Ｎ−カルボニル
ジイミダゾール（１．４５ｍｍｏｌ，２４ｍｇ）を加え
て，室温で２時間撹拌した。出発減量は，３０分程度で
完全に溶解した。過剰のＮ．Ｎ−カルボニルジイミダゾ
ールを乾燥メタノール（０．１ｍｌ）加えて分解した
後，グアノシン−５’−モノホスフェート（０．４４ｍ
ｍｏｌ，１６０ｍｇ）とトリ−ｎ−ブチルアミン（０．
４４ｍｍｏｌ，０．１１ｍｌ）を乾燥ジメチルホルムア
ミド（５．８０ｍｌ）に溶解させた溶液を反応溶液にゆ
っくりと滴下した。滴下後室温で２日間撹拌した。水
（１４．５ｍｌ）を加えた後，減圧下溶媒を留去して，
残渣を酢酸ナトリウム（８７ｍｇ）の水溶液（５０ｍ
ｌ）に溶解し，クロロホルムとエーテルで水溶液を洗浄
して，次にこの水溶液にトリエチルアミンを加えて，ｐ
Ｈを１０に調整し室温で１日間撹拌した。溶媒を減圧下
留去して得られる残渣を液体クロマトグラフ（ＯＤＮ
０．０２５ＭＮＨ_４Ｈ_２ＰＯ_４水溶液）で単離した。Ｄ
ＥＡＥ−セルローズカラムクロマトグラフィー，ついで
イオン交感樹脂（アンバーライト１２０ＢＮａ^＋型）に
通し，減圧下留去して得られる残渣を少量の水に溶解し
て，エーテルを加えさらに大過剰のエーテルを加え，目
的物白色パウダーを得た。（１４４ｍｇ，６８％） ＲＦ：０．２０（イソプロピルアルコール：濃アンモニ
ア水：水＝７：１：２） 分解点：２１９℃ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ）＝ｄｃｐｐｍ
３．９２〜５．０５，５．７０〜５．９０，７．８１，
８．０２ ＩＲ＝（ｎｕｊｏｌ）３４００，１６９０，１６３０，
１５９０，１２２０，９４０ｃｍ^０１

【００２７】以上の実施例と同様にして以下に示す化合
物を合成した。

【００２８】

【発明の効果】本発明の方法によって得られた化合物
は，強い抗ガン活性を示す。人の胃ガン培養細胞カトー
ＩＩＩに対し，化合物１は，ＩＣ_５０か０．００９μ
Ｍ，化合物２は０．００５μＭであった。ＦＵは，０．
０２１，ｄＦＵは，１．２であるから，これよりも２〜
１３０倍強い抗ガン効果があることがわかった。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ５−フルオロウラシルを１個以上含むオ
   リゴヌクレオチド
2. 【請求項２】 ５−フルオロウリジンないし５−フルオ
   ロ−２’−デオキシウリジンの５−ないし，３−位のシ
   アノエチルホスホアミダイトないし，２−クロロフエニ
   ルホスフェイトとヌクレオシドを結合させる工程を含む
   ５−フルオロウラシル含有オリゴヌクレオチドの製造法