JPH10306098A

JPH10306098A - 環状リポペプチド化合物の化学合成方法および環状リポペプチド化合物

Info

Publication number: JPH10306098A
Application number: JP11852397A
Authority: JP
Inventors: Tadayuki Imanaka; 忠行今中; Yoshihiko Hirata; 善彦平田; Masaaki Morikawa; 正章森川
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1997-05-08
Filing date: 1997-05-08
Publication date: 1998-11-17

Abstract

(57)【要約】【課題】環状リポペプチド化合物の合成を、微生物を
用いる生産に比べて、より高い生産効率で達成し得、任
意の化合物の設計が可能であり、所望の分子設計を行い
得る化学合成方法を提供する。【解決手段】担体に結合した出発物質においてアミノ
酸逐次延長反応を行い、かつ、担体に結合した状態で環
状化反応を行う工程を利用することにより、効率良く、
任意の環状リポペプチドの合成を可能とした。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、環状リポペプチド
を化学合成する方法および新規な環状リポペプチド化合
物に関する。特に、バイオサーファクタントとして有用
な環状リポペプチド化合物の高効率の合成法に関し、ま
た、バイオサーファクタントとして有用な化合物に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】生物由来の界面活性物質であるバイオサ
ーファクタントは、生分解性が高いことから、地球環境
に優しい界面活性剤として注目されている。また、バイ
オサーファクタントは、合成界面活性剤にはない特異な
化学構造（かさ高く、かつ多様な親油基と親水基の組合
せ、多官能性、立体異性体の存在）、安全性と生分解
性、生物活性を有するものがあるという点で特徴的であ
り、生体内膜物質として生体界面に介在して多様な生体
機能のコントロールや物質受容、変換系などに関与する
ことが可能であり、医薬、化粧品、食品などへの応用技
術が開発されつつあり、最近急速にその消費が拡大し、
需要が増大している。

【０００３】このようなバイオサーファクタントの中で
も、環状リポペプチド系バイオサーファクタントは、非
環状バイオサーファクタントの数倍の界面活性を有する
バイオサーファクタントとして非常に注目されている。
この環状リポペプチド系バイオサーファクタントは、歴
史的に、微生物による生産物として発見、単離されたた
め、その生産も微生物を用いた方法で行われている。例
えば、特開平６−１８４１９４には、アースローバクタ
ー属の細菌による環状リポペプチド系バイオサーファク
タントの生産方法が開示されている。また、細菌により
生産された環状リポペプチド系バイオサーファクタント
としては、アルスロファクチンおよびその同族体、サー
ファクチンおよびその同族体、イチュリン、セラウェッ
チンが知られている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記の
ように微生物を用いて生産を行う方法は、生産の効率が
悪く、すなわち、長時間および多くのコストを必要とす
るという欠点を有する。また、微生物を用いる生産で
は、任意の化合物の設計が困難であり、所望の分子設計
を自由に行うことができないという欠点を有する。

【０００５】本発明は、上記の欠点の解決を意図するも
のであり、低コスト、高効率で生産でき、かつ、任意の
分子設計を行うことが可能な生産方法を提供するもので
ある。また、そのような生産方法に従って入手し得る環
状リポペプチド化合物を提供するものである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明の合成方法は、環
状リポペプチドの化学合成方法であって、（Ａ）アミノ
酸Ａ₁、または脂質成分とアミノ酸Ａ₁とが結合した化合
物であって２以上の官能基を有する化合物のいずれかで
ある出発物質の第１の官能基Ｆ_1aが担体に結合した担体
結合体を調製する工程、（Ｂ）担体に結合した出発物質
の第２の官能基Ｆ_1bの部分においてアミノ酸逐次延長反
応を行う工程、ここで、出発物質が２官能である場合に
は、少なくとも１つの３官能アミノ酸Ａ_xを該アミノ酸
逐次延長反応に参加させる工程、（Ｃ）延長反応生成物
の成長末端アミノ酸Ａ_nの官能基Ｆ_nと、出発物質の第３
の官能基Ｆ_1cまたはペプチド成分中のアミノ酸Ａ_x残基
の第３の官能基Ｆ_xとを結合させて、環状化を行う工
程、および（Ｄ）工程Ｃで得られた環状構造を有する化
合物の担体とＦ_1aとの結合を切り離す工程、を包含し、
ここで、工程Ｃで得られた環状構造に脂質成分が結合し
ていない場合にはさらに、（Ｅ）工程Ｃで得られた環状
構造に脂質成分を結合させる工程を包含することを特徴
とする。

【０００７】本発明の化合物は、１つの実施態様におい
て、化学合成された環状リポペプチド化合物であること
を特徴とする。

【０００８】本発明の化合物は、他の実施態様におい
て、アルスロファクチンおよびその同族体、サーファク
チンおよびその同族体、イチュリン、セラウェッチンを
除く、環状リポペプチド化合物であることを特徴とす
る。

【０００９】

【発明の実施の形態】以下、本発明の合成方法について
説明する。本発明の方法により合成される環状リポペプ
チド化合物は、脂質成分とペプチド成分とを含み、通
常、脂質成分とペプチド成分とからなる。脂質成分およ
びペプチド成分については、下記に詳述する。

【００１０】＜工程Ａの説明＞＜脂質成分の説明＞本発明において、脂質成分とは、主
鎖である親油基およびアミノ酸と結合し得る官能基を有
する化合物、または当該化合物に由来する環状リポペプ
チド化合物中の部分構造をいい、目的とする環状リポペ
プチド化合物の構造に応じて選択される。

【００１１】アミノ酸と結合し得る官能基とは、アミノ
酸のカルボキシル基と反応して結合を形成し得る官能基
および／またはアミノ酸のアミノ基と反応して結合を形
成し得る官能基からなる化合物をいう。

【００１２】目的の環状リポペプチド化合物の構造が、
ペプチド成分のみで環状構造を構成し、それに１点で脂
質成分が結合しているタイプのものである場合には、脂
質成分の官能基は通常１個であるが、２個以上あっても
良い。

【００１３】一方、目的の環状リポペプチド化合物の構
造が、脂質成分が２ヶ所でペプチド成分に結合した環状
構造である場合には、脂質成分の官能基は通常２個であ
るが、３個あっても良い。

【００１４】脂質成分には、必要以上には反応性の官能
基が存在しないことが好ましい。必要以上の官能基が存
在する場合にはそれらが反応に参加して目的の化合物以
外の化合物が生成してしまうため、前もってその余分な
官能基を保護しておく必要があり、反応工程が煩雑とな
る。

【００１５】脂質成分がアミノ酸のカルボキシル基と反
応して結合を形成する場合には、脂質成分の官能基とし
ては、水酸基、アミノ基、メルカプト基、イソシアネー
ト基などが挙げられ、好ましくは水酸基またはアミノ基
である。

【００１６】一方、脂質成分がアミノ酸のアミノ基と反
応して結合を形成する場合には、脂質成分の官能基とし
ては、カルボキシル基、酸無水物、イソシアネート基な
どが挙げられ、好ましくはカルボキシル基である。

【００１７】脂質成分が２つの官能基を有する場合、脂
質成分の２つの官能基の間の距離は、目的の環状リポペ
プチド化合物の構造により決まる。２つの官能基は、主
鎖の同一の炭素に結合するものであっても良く、また、
両末端に結合しても良い。その両者の間の距離として
は、介在する炭素数が２個以上であることが好ましい。
その炭素数は好ましくは７個以下であり、より好ましく
は５個以下であり、さらに好ましくは３個以下である。
２個が最も好ましい。上記の距離が大きすぎるか、ある
いは小さすぎる場合には、得られる化合物における疎水
性（親油性）基／親水性基のバランスが悪くなってバイ
オサーファクタントとしての性能が得られにくくなる。

【００１８】上記の２つの官能基は別種のものであるこ
とが好ましい。同種の官能基である場合には、通常、副
成物が多くなり収率が低くなるかまたは保護基が必要に
なる。２つの官能基の組合せとしては、水酸基およびカ
ルボキシル基の組合せ、または、アミノ基およびカルボ
キシル基の組合せが好ましい。

【００１９】脂質成分の主要部、すなわち、上記官能基
以外の部分は、所望の親油性を有する疎水基である。好
ましくは直鎖または分岐状の炭化水素基であり、中でも
飽和炭化水素基が好ましいが、不飽和結合を含有しても
良く、芳香族基を含有しても良い。また、エーテル結合
などの非反応性の官能基を含有しても良い。

【００２０】脂質成分は、カルボキシル基と反応する
基、およびアミノ基と反応する基以外に、他の官能基を
有しても良いが、極性の大きい官能基を導入すること
は、成分全体の疎水性を損なうため好ましくない場合が
多い。従って、極性を有する官能基を導入する際には、
脂質成分全体として疎水性が保たれる範囲内にする必要
がある。

【００２１】脂質成分の主要部の大きさは、目的とする
環状リポペプチド化合物の性質に応じて決定される。そ
の炭素数は、３個以上であることが好ましく、より好ま
しくは５個以上であり、最も好ましくは８個以上であ
る。また、２０個以下であることが好ましく、より好ま
しくは１５個以下であり、最も好ましくは１３個以下で
ある。脂質成分の主要部が大きすぎるか、あるいは小さ
すぎる場合には、得られる化合物における疎水性（親油
性）基／親水性基のバランスが悪くなってバイオサーフ
ァクタントとしての性能が得られにくくなる。

【００２２】脂質成分は、好ましくは、脂肪酸アルコー
ルまたは脂肪酸アミンであり、より好ましくは、飽和脂
肪酸アルコールまたは飽和脂肪酸アミンである。最も好
ましくは、βヒドロキシ飽和脂肪酸またはβアミノ飽和
脂肪酸であり、具体的には、例えば、CH₃(CH₂)₅CH(OH)C
H₂COOH、または(CH₃)₂CH(CH₂)₃CH(OH)CH₂COOH、あるい
はCH₃(CH₂)₅CH(NH₂)CH₂COOH、または(CH₃)₂CH(CH₂)₃CH
(NH₂)CH₂COOHである。

【００２３】本発明の方法において、脂質成分は、工程
Ａにおいて予め出発物質中に導入しておいても良いし、
工程Ｅにおいて使用しても良い。すなわち、工程Ｃの
後、工程Ｄの前に使用しても良い。工程Ｄの後に使用し
ても良い。

【００２４】＜アミノ酸の説明＞本発明において、アミ
ノ酸とは、アミノ基およびカルボキシル基の両者を同一
分子内に持つ化合物をいう。代表的には、タンパク質を
構成するアミノ酸（グリシン、アラニン、バリン、ロイ
シン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギ
ン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、リシ
ン、ヒドロキシリシン、アルギニン、システイン、シス
チン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリ
プトファン、ヒスチヂン）が好適に使用され得るが、そ
れ以外のアミノ酸であってもよく、天然のアミノ酸以外
のアミノ酸でも構わない。また、脂肪族アミノ酸であっ
ても良く、芳香族であっても良い。また、複数のアミノ
酸が縮合したポリペプチドも、アミノ基およびカルボキ
シル基の両者がその分子内に存在する限り使用可能であ
る。また、光学異性体が存在する場合には、そのD-体、
L-体の任意が使用可能である。

【００２５】アミノ酸の大きさは、任意に選択され得る
が、炭素数が２個以上のものが好ましく、より好ましく
は３個以上である。また、炭素数が７個以下のものが好
ましく、より好ましくは５個以下である。

【００２６】アミノ酸の種類は、任意に選択され得る
が、α-アミノ酸またはβ-アミノ酸が好ましく、より好
ましくはα-アミノ酸である。

【００２７】また、出発物質に使用するアミノ酸Ａ
₁は、任意のアミノ酸が可能であるが、３官能アミノ酸
であることが好ましい。３官能アミノ酸をＡ₁として用
いた場合には、以下に記載の実施態様１の方法が使用可
能であり、環状化工程を固相担体上で行うことが容易と
なり、収率が良好になる。

【００２８】３官能アミノ酸とは、１対のアミノ基およ
びカルボキシル基の他に、さらに、第３の官能基とし
て、ペプチド成分の末端官能基と結合反応し得る官能基
Ｆ_Xを分子内に有するアミノ酸Ａ_Xをいう。官能基Ｆ_Xの
例としては、アミノ基、カルボキシル基、または水酸基
がある。第３の官能基としてアミノ基を有するアミノ酸
として、グルタミン酸（Glu）、アスパラギン酸（Asp）
などがあり、アスパラギン酸が好ましく用いられる。第
３の官能基としてカルボキシル基を有するアミノ酸とし
て、ジアミノモノカルボン酸として、リシン（Lys）な
どがあり、第３の官能基として水酸基を有するアミノ酸
として、セリン（Ser）、トレオニン（Thr）などがあ
る。

【００２９】＜出発物質の説明＞本発明において、出発
物質とは、アミノ酸または、脂質成分とアミノ酸とが結
合した化合物であって２以上の官能基を有する化合物の
いずれかをいう。以下、この出発物質に用いるアミノ酸
を、アミノ酸Ａ₁と記す。出発物質は、目的とする環状
リポペプチド化合物の構造に応じて選択される。ここ
で、アミノ酸Ａ₁は、上記の任意のアミノ酸が使用可能
である。また、脂質成分は、上記の任意の脂質成分が使
用可能である。

【００３０】出発物質は、２以上の官能基を有すること
が必要であり、３つの官能基を有する場合には、第３の
官能基が工程Ｃにおける環状化反応の反応点となり得る
ので好ましい。

【００３１】出発物質の第２の官能基Ｆ_1bは、工程Ｃの
アミノ酸逐次延長反応を行える官能基（アミノ基または
カルボキシル基）であり、好ましくはアミノ基である。
出発物質として、脂質成分とアミノ酸Ａ₁が結合した化
合物を用いる場合、第２の官能基Ｆ_1bは、脂質成分残基
に存在する官能基であっても良いし、アミノ酸残基に存
在する官能基であっても良い。

【００３２】また、出発物質の第１の官能基Ｆ_1aは、担
体に結合し得る官能基である。例えば、カルボキシル基
である。出発物質として、脂質成分とアミノ酸Ａ₁が結
合した化合物を用いる場合、第１の官能基Ｆ_1aは、脂質
成分残基に存在する官能基であっても良いし、アミノ酸
残基に存在する官能基であっても良い。

【００３３】またさらに、第３の官能基Ｆ_1cが存在する
場合には、第３の官能基Ｆ_1cは、工程Ｃにおいて、延長
反応生成物の成長末端アミノ酸Ａ_nの官能基Ｆ_nと結合反
応し得る官能基である。具体的にはアミノ基、カルボキ
シル基、水酸基などである。組合せとしては、Ｆ_nがア
ミノ基である場合にはＦ_1cはカルボキシル基などが好ま
しい。Ｆ_nがカルボキシル基である場合にはＦ_1cはアミ
ノ基、水酸基などが好ましい。

【００３４】工程Ａにおいて、脂質成分とアミノ酸とが
結合した化合物とは、脂質成分の官能基と、アミノ酸の
官能基とを反応させて化学結合させたものをいう。

【００３５】具体的には、脂質成分の水酸基、アミノ
基、メルカプト基などとアミノ酸のカルボキシル基とを
反応させ、エステル結合、ペプチド結合などの化学結合
を形成させたもの、脂質成分のカルボキシル基、酸無水
物、イソシアネート基などとアミノ酸のアミノ基を反応
させ、ペプチド結合などの化学結合を形成したものなど
がある。

【００３６】具体的には、アミノ酸のカルボキシル基と
反応させる場合には、脂質成分の水酸基、アミノ基、メ
ルカプト基などとアミノ酸のカルボキシル基とを反応さ
せ、エステル結合、ペプチド結合などの化学結合を形成
する。また、アミノ酸のアミノ基と反応させる場合に
は、脂質成分のカルボキシル基、酸無水物、イソシアネ
ート基などとアミノ酸のアミノ基とを反応させ、ペプチ
ド結合などの化学結合を形成し、脂質成分-アミノ酸結
合体を得ることができる。

【００３７】このとき、反応に参加させない官能基は保
護しておくことが好ましい。保護を行わない場合には、
多量の副成物が生成して収率が悪くなるおそれがある。
保護の方法としては、当業者に公知の適切な保護基が利
用可能である。例えば、アミノ基の場合は、ベンジルオ
キシカルボニル、トリフェニルメチル（トリチル）、三
級ブチルオキシカルボニル、フタロイル、トリフルオロ
アセチルなどの保護基が可能であり、カルボキシル基の
場合は、エチルエステル、メチルエステル、ベンジルエ
ステル、三級ブチルエステル、などの保護基が可能であ
る。

【００３８】＜担体の説明＞本発明において、担体と
は、ポリペプチドの化学合成の固相合成法に用いられる
固相支持体をいい、公知の任意の固相支持体が使用可能
である。好ましくは、ポリスチレン樹脂粒などが使用可
能である。例として、クロロメチル基を側鎖に持つ架橋
ポリスチレン樹脂がある。

【００３９】本発明において、工程Ｂ、工程Ｃは、出発
物質が担体に化学結合した状態で反応を行う。担体上で
行うため、収率が良好となり、また精製などが容易とな
る。

【００４０】従って、工程Ａにおいて、まず、担体とア
ミノ酸Ａ₁との結合を最初に行い、その後に、脂質成分
をＡ₁に結合させる場合、収率が良好となり、また精製
などが容易となる。

【００４１】＜担体結合体＞本発明において、担体結合
体とは、上記の出発物質が第１の官能基Ｆ_1aを介して担
体に結合している構造を有する化合物をいう。

【００４２】本発明において、担体結合体の調製には、
上記の構造を調製できる方法であれば、任意の方法が使
用可能である。従って、出発物質からの合成によっても
調整可能であるが、出発物質を経由しないルートによっ
て合成しても構わない。

【００４３】出発物質がアミノ酸Ａ₁である場合には、
アミノ酸Ａ₁の第１の官能基Ｆ_1aを担体に結合させて、
担体結合体を調製することができる。

【００４４】一方、出発物質が、脂質成分とアミノ酸Ａ
₁とが結合した化合物であって２以上の官能基を有する
化合物である場合には、１つの方法として、まず、出発
物質を合成し、その第１の官能基Ｆ_1aを担体に結合させ
て、調製することができる。また別の方法として、例え
ば、アミノ酸Ａ₁として３官能アミノ酸を用い、担体に
アミノ酸Ａ₁の第１の官能基Ｆ_1aを結合させて、その
後、アミノ酸Ａ₁を脂肪成分に結合させて、目的とする
担体結合体を調製することができる。

【００４５】工程Ａにおいて、出発物質がアミノ酸であ
る場合、担体とアミノ酸とを結合する方法は、担体とア
ミノ酸との間に化学結合を形成する任意の方法が可能で
ある。

【００４６】例えば、アミノ酸Ａ₁のＮ末端が保護基で
保護された化合物（-Ａ₁-保護基）のカルボキシル基部
分を担体Ｒと反応させてアミノ酸Ａ₁と担体との結合を
生成し、担体結合体（Ｒ-Ａ₁-保護基）を得る。

【００４７】例えば、クロロメチル基を側鎖に持つ架橋
ポリスチレン樹脂（例えば、クロロメチル化・コポリ
（スチレン-２％ジビニルベンゼン））を担体とする場
合には、３級アミン（例えば、Et₃N）の存在下で、アミ
ノ酸Ａ₁のＮ末端が保護基（例えば、t-BOC）で保護され
た化合物（-Ａ₁-保護基）のカルボキシル基部分をクロ
ロメチル基と反応（例えば、脱塩酸）させてアミノ酸Ａ
₁と担体Ｒとの結合（例えば、ベンジルエステル結合）
を生成することができる。

【００４８】また逆に、アミノ酸Ａ₁のＣ末端が保護基
で保護された化合物（-Ａ₁-保護基）のアミノ基部分を
担体Ｒと反応させてアミノ酸Ａ₁と担体との結合を生成
し、（Ｒ-Ａ₁-保護基）の化合物を得ても良い。

【００４９】このとき、反応に参加させない基は保護し
ておくことが好ましい。保護の方法としては、上述した
保護基と同様の保護基が使用可能である。

【００５０】出発物質が、脂質成分とアミノ酸Ａ₁とが
結合した化合物であって２以上の官能基を有する化合物
である場合にも、上記のアミノ酸Ａ₁と担体を結合させ
る方法と同様の方法が使用可能である。

【００５１】上述のように、この担体結合体において、
アミノ酸Ａ₁は脂質成分Ｌを介して担体Ｒと結合してい
ても良い。すなわち、担体Ｒ-脂質成分-アミノ酸結合体
（Ｒ-Ｌ-Ａ₁-）の順に結合したものであっても良い。

【００５２】＜工程Ｂの説明＞＜アミノ酸逐次延長反応＞工程Ｂにおいて、アミノ酸逐
次延長反応とは、ポリペプチド固相合成法によるペプチ
ド鎖の延長反応をいう。即ち、担体上でアミノ酸逐次延
長反応を行いペプチド成分を生成する反応をいい、具体
的には、担体に出発物質（アミノ酸Ａ₁または脂質成分-
アミノ酸結合体、Ｌ-Ａ₁）が結合したままの状態で、出
発物質の第２の官能基Ｆ_1bの保護基を脱離し、遊離した
官能基Ｆ_1bと反応し得る官能基が遊離しておりかつそれ
以外の官能基が保護されているアミノ酸Ａ₂とを、反応
させて結合し、その後、Ａ₂の保護基を脱離し、アミノ
酸Ａ₃と反応させて結合し、という工程を繰り返して所
望の長さまで、所望のアミノ酸を次々に結合させて、所
望のポリペプチドを合成する反応である。

【００５３】アミノ酸延長反応に参加させるアミノ酸Ａ
₂〜Ａ_nは、目的とする化合物の構造に応じて、任意に選
択可能である。ただし、出発物質が２官能である場合に
は、少なくとも１つの３官能アミノ酸Ａ_xを該アミノ酸
逐次延長反応に参加させる。工程Ｃの環状化反応を行う
際の反応点として必要だからである。

【００５４】本発明において、アミノ基およびカルボキ
シル基を有する脂質成分を使用する場合には、脂質成分
が同時にアミノ酸でもあるため、アミノ酸延長反応中の
１工程として脂質成分を取り込むことができる。

【００５５】工程Ｂの手順としては具体的には、以下の
通りである。例えば、出発物質中のアミノ酸Ａ₁のＮ末
端が保護基で保護された化合物（-Ａ₁-保護基）のカル
ボキシル基部分を担体Ｒと結合させた結合体（Ｒ-Ａ₁-
保護基）を使用する場合には、Ｒ-Ａ₁間の結合を切断せ
ずに、脱保護する（Ｒ-Ａ₁−）。次いで、遊離したアミ
ノ基を、触媒の存在下で、アミノ基を保護したアミノ酸
Ａ₂（−Ａ₂-保護基）と、縮合反応させて、（Ｒ-Ａ₁-Ａ
₂-保護基）の化合物を得る。そしてさらに、脱保護-縮
合の工程を繰り返して、所望のポリペプチドを得ること
ができる。

【００５６】また例えば、これと逆にＣ末端側を延長し
ていくことも、同様に可能である。

【００５７】より具体的には、以下の通りである。例え
ば、アミノ酸Ａ₁のＮ末端が保護基（例えば、t-BOC）で
保護された化合物（-Ａ₁-保護基）のカルボキシル基部
分が担体Ｒと結合（例えば、ベンジルエステル結合によ
って）した（Ｒ-Ａ₁-保護基）の化合物を使用する場合
には、ジクロロメタン中50％トリフルオロ酢酸など無水
条件で処理、脱保護し（Ｒ-Ａ₁-）の化合物を得る。こ
の処理ではアミノ酸のベンジルエステル結合は切れな
い。次いで、遊離したアミノ基に対して、縮合剤（例え
ば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（DCCI）、イソブ
チルクロロギ酸、N-N'カルボニルイミダゾール、p-ニト
ロフェニルエステル）の存在下で、アミノ基を保護した
アミノ酸Ａ₂（例えば、Boc-アミノ酸）（-Ａ₂-保護基）
と、縮合反応させて、（Ｒ-Ａ₁-Ａ₂-保護基）の化合物
を得る。そしてさらに、脱保護および縮合の工程を繰り
返して、所望のポリペプチドを得ることができる。

【００５８】このとき、反応に参加させない基は保護し
ておくことが好ましい。保護の方法としては、上述した
方法と同様の方法が可能である。

【００５９】この反応により形成するペプチド成分の大
きさは、目的とする環状リポペプチド化合物の構造によ
り決定されるが、好ましくはアミノ酸の数として２以上
であり、より好ましくは５以上である。また、好ましく
はアミノ酸の数として２０以下であり、より好ましくは
１１以下である。ペプチド成分の大きさが大きくなりす
ぎる、あるいは小さすぎる場合には、得られる化合物に
おける疎水性（親油性）基／親水性基のバランスが悪く
なってバイオサーファクタントとしての性能が得られに
くくなる。

【００６０】＜工程Ｃの説明＞工程Ｃの環状化反応は、
担体上で行う。担体から切り離した後に環状化を行う
と、２、３量体が生成しやすいため収率が低下してしま
うからである。

【００６１】延長反応生成物とは、工程Ｂにおいて得ら
れる生成物をいい、その成長末端アミノ酸Ａ_nの官能基
Ｆ_nとは、生成物において、ペプチド結合に参加せずに
残存する官能基をいう。具体的には、アミノ基、カルボ
キシル基、水酸基などであり、アミノ基、カルボキシル
基が好ましい。

【００６２】ペプチド成分とは、延長反応生成物のう
ち、複数のアミノ酸が縮合して生成した部分をいい、す
なわち、アミノ酸Ａ₁〜アミノ酸Ａ_nの残基で構成され
る。

【００６３】Ｆ_nを反応させる相手の官能基は、目的と
する環状リポペプチド化合物の構造に応じて選択され
る。例えば、ペプチド成分のみでの環状構造を所望する
場合には、Ｆ_nを、ペプチド成分中の３官能アミノ酸Ａ_x
残基の第３の官能基Ｆ_xと結合させる。ペプチド成分中
のアミノ酸Ａ_x残基は、好ましくはＡ₁残基である。

【００６４】また、脂質成分が参加した環状構造を所望
する場合には、Ｆ_nを、出発物質中の脂質成分の官能基
と結合させることができる。

【００６５】延長反応生成物の成長末端アミノ酸Ａ_nの
官能基Ｆ_nと、出発物質の第３の官能基Ｆ_1cまたはペプ
チド成分中の３官能アミノ酸Ａ_x残基の第３の官能基Ｆ_x
とを結合させる方法は、任意の方法が可能である。例え
ば、Ｆ_nがアミノ基である場合には、カルボキシル基で
あるＦ_1cまたはＦ_xを結合させる方法が可能であり、Ｆ_n
がカルボキシル基である場合には、水酸基またはアミノ
基であるＦ_1cまたはＦ_xを結合させる方法が可能であ
り、Ｆ_nが水酸基である場合には、カルボキシル基であ
るＦ_1cまたはＦ_xを結合させる方法が可能である。アミ
ノ基またはカルボキシル基であるＦ_nを用い、カルボキ
シル基またはアミノ基であるＦ_1cまたはＦ_xを用い、ペ
プチド結合を生成させる方法が、収率が良好であるので
好ましい。縮合剤としては、環状化反応に適切な公知の
縮合剤、例えば、HATUなどが使用可能である。

【００６６】手順としては、反応させるべき基の保護基
を脱離し、かつ反応に参加させない遊離基がある場合に
はこれを保護した状態で、Ｆ_1cまたはＦ_x（例えばアミ
ノ基またはカルボキシル基）を、Ｆ_n（例えばカルボキ
シル基またはアミノ基）と結合させる。保護の方法とし
ては、上述した方法と同様の方法が可能である。

【００６７】また、目的とする環状リポペプチドの環状
構造が、ペプチド成分および脂質成分が参加した環を構
成する構造である場合であって、工程Ｂまでにおいて脂
質成分が導入されていない場合には、環状化反応におい
て脂質成分を導入しても良い。すなわち、２以上の官能
基を有する脂質成分を介して環状化反応を行っても良
い。２以上の官能基を有する脂質成分とは、上述したも
のが使用可能である。この場合、Ｆ_nに脂質成分の第１
の官能基を結合させる工程、および脂質成分の第２の官
能基をＦ_1cまたはＦ_xに結合させる工程により、環状化
することができる。脂質成分の第１の官能基とＦ_nとの
結合反応、および脂質成分の第２の官能基とＦ_1cまたは
Ｆ_xとの結合反応には、上述した脂質成分と、各官能基
との反応が利用可能である。

【００６８】Ｆ_nに脂質成分の第１の官能基を結合させ
る工程、および脂質成分の第２の官能基をＦ_1cまたはＦ
_xに結合させる工程の２つの反応は、いずれの順序で行
っても良いし、同時に行っても良いが、いずれかを先に
行うことが、副生物が生成しにくいため収率の点で好ま
しい。

【００６９】本発明において、環状リポペプチドの環の
大きさは、任意のものが可能である。環に参加するアミ
ノ酸の数ｎは、好ましくは２以上であり、より好ましく
は３以上である。また、好ましくは２０以下であり、よ
り好ましくは１１以下である。ｎが大きくなりすぎる、
あるいは小さすぎる場合には、得られる化合物における
疎水性（親油性）基／親水性基のバランスが悪くなって
バイオサーファクタントとしての性能が得られにくくな
る。

【００７０】＜工程Ｄの説明＞工程Ｄにおいては、工程
Ｃで得られた環状構造を有する化合物の、出発物質と担
体との間の結合を切り離す。結合の種類に応じて、公知
の切断条件を適用し得る。例えば、液体HFによりポリペ
プチドのＣ末端と支持体の間のベンジルエステル結合を
切断することができる。この操作では、ポリペプチドの
Ｎ末端のBoc基、側鎖の保護に使ったベンジル基なども
同時に外れる。または、HBr-トリフルオロ酢酸でベンジ
ルエステル結合を開裂することにより、担体を脱離でき
る。

【００７１】＜工程Ｅの説明＞工程Ｅは、工程Ｃで得ら
れた環状構造に脂質成分が結合していない場合にのみ必
要となる。環状構造に脂質成分を結合させるとは、環状
構造中の官能基（例えば、アミノ基、カルボキシル基、
水酸基）に、脂質成分の官能基（例えば、カルボキシル
基、アミノ基、水酸基）を結合させることであり、具体
的には、環状構造のアミノ基と、脂質成分のカルボキシ
ル基とを反応させる方法、環状構造のカルボキシル基
と、脂質成分のアミノ基または水酸基とを反応させる方
法、環状構造の水酸基と、脂質成分のカルボキシル基と
を反応させる方法が可能である。

【００７２】＜各工程の順序＞本発明の合成方法は、上
記の４工程（工程Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ）または５工程（工程
Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ）を順に包含し、そのいずれも可能
である。工程Ａにおいて脂質成分が導入された担体結合
体を調製し、工程Ｅは行わない４工程（工程Ａ、Ｂ、
Ｃ、Ｄ）にすると収率が良好となり、また精製などの操
作が容易になるので好ましい。また、工程Ａ中の手順と
しても、まず、担体とアミノ酸Ａ₁との結合を最初に行
い、その後に、脂質成分を結合させる等の工程を設ける
ことが、収率が良好となり、また精製などの操作が容易
となる。

【００７３】＜好ましい実施態様＞本発明の合成方法の
実施の形態の１つの好ましい例は、以下の通りである。

【００７４】工程Ａとして、第２の官能基Ｆ_1bが保護さ
れている３官能アミノ酸Ａ₁の、第１の官能基Ｆ_1aを担
体に結合させて担体-アミノ酸結合体を得る。

【００７５】次いで、３官能アミノ酸Ａ₁の他の官能基
を２官能脂質成分Ｌの第１の官能基Ｇ₁に結合させ、脂
質成分Ｌ-アミノ酸Ａ₁-担体Ｒの結合体を得る。ここ
で、脂質成分Ｌの第２の官能基Ｇ₂は保護しておく。

【００７６】工程Ｂとして、脂質成分Ｌ-アミノ酸Ａ₁-
担体Ｒの結合体中のアミノ酸Ａ₂上の官能基Ｆ_1bの部分
においてアミノ酸逐次延長反応を行う。

【００７７】工程Ｃとして、得られた延長反応生成物の
成長末端アミノ酸Ａ_nの保護されている官能基Ｆ_n、およ
び官能基Ｇ₂のそれぞれにおいて保護基を脱離し、官能
基Ｆ_nおよび官能基Ｇ₂を結合させて環状化する。

【００７８】工程Ｄとして、その後担体を脱離して、環
状リポペプチド化合物を得ることができる。

【００７９】上記合成例の、より具体的な実施態様とし
ては、以下のものが挙げられる。

【００８０】工程Ａとして、アミノ基である第２の官能
基Ｆ_1bが保護された３官能アミノ酸Ａ₁の、第１の官能
基Ｆ_1aを担体に結合させて、担体-アミノ酸Ａ₁の結合体
を得る。

【００８１】次いで、３官能アミノ酸Ａ₁残基の他の官
能基であるカルボキシル基と、保護されたカルボキシル
基および水酸基を含有する脂質成分（例えばヒドロキシ
脂肪酸またはアミノ脂肪酸）の水酸基またはアミノ基Ｇ
₁とをエステル化反応またはペプチド化反応させて、担
体-アミノ酸Ａ₁-脂質成分の結合体を得る。

【００８２】工程Ｂとして、アミノ酸Ａ₁残基の第２の
官能基Ｆ_1bの部分においてアミノ酸逐次延長反応を行
う。

【００８３】工程Ｃとして、脂質成分のカルボキシル基
Ｇ₂の保護基、および成長末端アミノ酸の保護基を脱離
し、遊離したカルボキシル基Ｇ₂およびアミノ基Ｆ_nを、
結合させて環状化する。

【００８４】工程Ｄとして、担体を脱離して、環状リポ
ペプチド化合物を得る。

【００８５】＜本発明の化合物についての説明＞以下、
本発明の化合物について説明する。

【００８６】本発明において化学合成とは、化学的な手
法により合成されたことをいい、微生物による生物学的
合成方法を含まない。化学合成の方法としては、本発明
の合成方法を用いることが好ましいが、液相における合
成法などの、他の化学合成方法を用いることも可能であ
る。

【００８７】化学合成された環状リポペプチドにおいて
は、天然物由来の不純物がない、品質安定性が良い、と
いう微生物由来の環状リポペプチドに対する利点があ
る。

【００８８】さらに、化学合成により、天然の環状リポ
ペプチドと化学構造が同一であるが、不斉中心の立体配
置が異なる、非天然型の光学異性体を提供することがで
きる。同時に天然の環状リポペプチドと構成アミノ酸お
よび構成脂質成分は同一であるが、それらの結合様式ま
たは結合順序が異なる、非天然型の構造異性体を提供す
ることもできる。また、天然の環状リポペプチドの１つ
以上のアミノ酸について保存的置換が導入された非天然
型の変異体を提供することもできる。これらは、天然型
の化合物に比べ、活性、安定性などでより優れた性質を
示す場合がある。

【００８９】本発明の化学合成された化合物は、具体的
には、例えば、一般構造式化１または化２を有する化合
物であって、

【００９０】

【化１】

【００９１】

【化２】

【００９２】ただし、ここで、Ａ₁、Ａ₂、〜Ａ_nは任意
のアミノ酸、Ｌは脂質成分、ｎは任意の整数である。

【００９３】ここでアミノ酸の数ｎは、好ましくは２以
上であり、より好ましくは３以上である。また、好まし
くは２０以下であり、より好ましくは１１以下である。
ｎが大きくなりすぎる、あるいは小さすぎる場合には、
得られる化合物における疎水性（親油性）基／親水性基
のバランスが悪くなってバイオサーファクタントとして
の性能が得られにくくなる。

【００９４】脂質成分Ｌの大きさは、その炭素数とし
て、好ましくは３以上であり、より好ましくは５以上で
あり、最も好ましくは８以上である。また、好ましくは
２０以下であり、より好ましくは１５以下であり、最も
好ましくは１３以下である。Ｌが大きくなりすぎる、あ
るいは小さすぎる場合には、得られる化合物における疎
水性（親油性）基／親水性基のバランスが悪くなってバ
イオサーファクタントとしての性能が得られにくくな
る。

【００９５】また、ペプチド成分の大きさと脂質成分Ｌ
の大きさとの比は、ペプチド成分：脂質成分の分子量の
比として、好ましくは２０：１〜１：２であり、より好
ましくは１５：１〜１：１であり、さらに好ましくは１
０：１〜２：１である。この比が大きくなりすぎる、あ
るいは小さすぎる場合には、得られる化合物における疎
水性（親油性）基／親水性基のバランスが悪くなってバ
イオサーファクタントとしての性能が得られにくくなる
という欠点を有する。

【００９６】また、この環状リポペプチド化合物の大き
さは、その分子量として、好ましくは２００以上であ
り、より好ましくは３００以上である。また、好ましく
は３０００以下であり、より好ましくは２０００以下で
ある。分子量が大きくなりすぎる場合には、融点が高く
なりすぎて取扱いにくくなるという欠点を有する。ま
た、分子量が小さすぎる場合には、バイオサーファクタ
ントとしての性能が発現しにくくなるという欠点を有す
る。

【００９７】本発明の合成方法によって新規化合物たる
環状リポペプチド化合物の入手が実現される。従って、
本発明は、かかる新規化合物をその対象として意図す
る。当該新規化合物は、同一分子内に脂質成分と、ペプ
チド成分の両者を有する化合物であり、化学合成法によ
って合成されたものであっても良いし、微生物などによ
って産生される場合には、それらの生物由来のものであ
っても良い。ここで、化学合成の方法としては、本発明
の合成方法を用いることが好ましいが、液相における合
成法などの、他の化学合成方法を用いることも可能であ
る。

【００９８】本発明の新規化合物について、アルスロフ
ァクチンとは、構造式化３を有する化合物をいう。

【００９９】

【化３】

【０１００】また、サーファクチンとは、構造式化４を
有する化合物をいう。

【０１０１】

【化４】

【０１０２】また、イチュリンとは、構造式化５を有す
る化合物をいう。

【０１０３】

【化５】

【０１０４】また、セラウェッチンとは、構造式化６を
有する化合物をいう。

【０１０５】

【化６】

【０１０６】また、アルスロファクチンンの同族体と
は、アルスロファクチンン中の脂質成分の炭素数が異な
る天然の化合物をいう。具体的には炭素数８個〜１２個
のものが知られている。サーファクチンの同族体とは、
サーファクチン中の脂質成分の炭素数が異なる天然の化
合物をいう。アルスロファクチンおよびその同族体、サ
ーファクチンおよびその同族体、イチュリン、セラウェ
ッチンのみが、従来公知の環状リポペプチド系化合物で
あり、これらは従来微生物から産生されていたものであ
る。

【０１０７】本発明の新規化合物は、具体的には、例え
ば、一般構造式化７または化８を有する環状リポペプチ
ド化合物である。

【０１０８】

【化７】

【０１０９】

【化８】

【０１１０】ただし、ここで、Ａ₁、Ａ₂、〜Ａ_nは任意
のアミノ酸、Ｌは脂質成分、ｎは任意の整数であり、か
つ、この化合物からは、アルスロファクチン同族体、サ
ーファクチン同族体、イチュリン、セラウェッチンは除
かれる。

【０１１１】ここでアミノ酸の数ｎは、好ましくは２以
上であり、より好ましくは３以上である。また、好まし
くは２０以下であり、より好ましくは１１以下である。
ｎが大きくなりすぎる、あるいは小さすぎる場合には、
得られる化合物における疎水性（親油性）基／親水性基
のバランスが悪くなってバイオサーファクタントとして
の性能が得られにくくなる。

【０１１２】また、脂質成分Ｌの大きさは、その炭素と
して、好ましくは３以上であり、より好ましくは５以上
であり、最も好ましくは８以上である。また、好ましく
は２０以下であり、より好ましくは１５以下であり、最
も好ましくは１３以下である。Ｌが大きくなりすぎる、
あるいは小さすぎる場合には、得られる化合物における
疎水性（親油性）基／親水性基のバランスが悪くなって
バイオサーファクタントとしての性能が得られにくくな
る。

【０１１３】また、ペプチド成分の大きさと脂質成分Ｌ
の大きさとの比は、ペプチド成分：脂質成分の分子量の
比として、好ましくは２０：１〜１：２であり、より好
ましくは１５：１〜１：１であり、さらに好ましくは１
０：１〜２：１である。この比が大きくなりすぎる、あ
るいは小さすぎる場合には、得られる化合物における疎
水性（親油性）基／親水性基のバランスが悪くなってバ
イオサーファクタントとしての性能が得られにくくな
る。

【０１１４】また、この環状リポペプチド化合物の大き
さは、その分子量として、好ましくは２００以上であ
り、より好ましくは３００以上である。また、好ましく
は３０００以下であり、より好ましくは２０００以下で
ある。分子量が大きくなりすぎる場合には、融点が高く
なりすぎて取扱いにくくなるという欠点を有する。ま
た、分子量が小さすぎる場合には、バイオサーファクタ
ントとしての性能が発現しにくくなる。

【０１１５】上記の本発明の化合物は、天然型アルスロ
ファクチンの界面活性を基準としたとき、好ましくは、
約80％以上、より好ましくは約90％以上、さらにより好
ましくは約100％以上の界面活性を有する、バイオサー
ファクタントとして機能する化合物である。界面活性の
上限値は特に限定されないが、少なくとも約150〜200％
の範囲にあり得る。

【０１１６】以下、実施例に従って本発明を説明する
が、本発明はこれらによって限定されるものではない。

【０１１７】

【実施例】

（実施例１）７ステップ（段階）からなる合成を行っ
た。前半の３ステップまでに固相法によるペプチド合成
に必要な担体の調製を行い、その後の４ステップで、ペ
プチド合成機を利用したアミノ酸逐次延長と環状化反応
を行った。最終的な環状化反応を固相担体上で行えるよ
うに、アスパラギン酸の側鎖官能基を担体に固定した樹
脂を用い、ステップ１でこの樹脂のアリル基の脱保護を
行い、カルボキシル基を遊離させた。ステップ２で、脂
肪酸部分となるβ-ヒドロキシデカン酸のカルボキシル
基を、アリルアルコールとの縮合により、アリル基で保
護した。こうして得られた産物１のカルボキシル基と産
物２の水酸基との間でエステル結合を形成させ、この産
物３にアミノ酸を逐次延長した。そしてステップ５、６
で、環状化反応の反応基となるカルボキシル基とアミノ
基を遊離させ、最後に、アミド結合形成により環状化を
行った。

【０１１８】

【化９】

【０１１９】ステップ１で、Fmoc-L-アスパラギン酸ア
リルエステルの側鎖官能基（β-カルボキシル基）を固
定した担体（ポリエチレングリコール−ポリスチレン樹
脂）を用いた。この脱アリル反応を行った。パラジウム
触媒を使用して、脱アリル反応を３時間行った。反応後
の洗浄としてジエチルジチオカルバミン酸ナトリウムを
主体とするジメチルホルムアミド(DMF)溶液を用い、す
べての操作を室温で行った。反応産物の確認として、担
体から生成アミノ酸を95％トリフルオロ酢酸(TFA)で切
り出した後、逆相HPLCに供した。また、標品のFmoc-Asp
-OHを同条件でHPLCを行った。（カラム：Cosmosil 5C18
-ARを充填したカラム(120オングストローム，4.6×150m
m)、溶媒：(A)H₂O/0.1％TFA，(B)CH₃CN/0.1％TFA）全く
同じリテンションタイムにピークが検出され、この結
果、反応の進行が確認された。

【０１２０】

【化１０】

【０１２１】次に、ステップ２で脂肪酸部分である3-ヒ
ドロキシデカン酸のカルボキシル基をアリル基で保護す
るため、アリルアルコールとのエステル化反応を行っ
た。3-ヒドロキシ酸は熱すると水を失い不飽和酸となる
ため、カルボキシル基をカルボジイミドで活性化し、常
温でエステル化反応を行った。生産物の確認は、CI法に
よるGC-MSにより行った。この結果、目的とするアリル
化物の分子量と一致した分子イオンピークが検出され
た。また、フラグメントのパターンからも反応が進行し
ていることが確認された。

【０１２２】

【化１１】

【０１２３】ステップ３では、産物１のカルボキシル基
と、産物２の水酸基との間でエステル化反応を行った。
縮合剤としてＯ-(7-アザベンゾトリアゾール-１-イル）
-１,１,３,３-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロ
ホスフェート（HATU）を使用し、添加剤としてジメチル
アミノピリジン(DMAP)を加え、気相をAr置換した後、室
温で10時間撹拌した。反応産物を担体から切り出した
後、HPLCを行った（カラム：Cosmosil 5C18-ARを充填し
たカラム(120オングストローム，4.6×150mm)、溶媒：
(A)H₂O/0.1％TFA，(B)CH₃CN/0.1％TFA）。リテンション
タイムが近接した２本のピークが観測された。FAB -MS
による分子量測定の結果、いずれもが分子量565であ
り、目的の分子量と一致した。HPLC上でこのようにピー
クが２本に分離したことから、β-ヒドロキシデカン酸
の３位の水酸基について立体構造が異なるジアステレオ
マー混合物が得られたと考えられる。

【０１２４】

【化１２】

【０１２５】以上のステップ１〜３で合成した樹脂を用
い、ステップ４でアミノ酸逐次延長反応、ステップ５、
６で脱保護を行いアミノ基とカルボキシル基とを遊離し
て産物６を得た。そして、ステップ７では脂肪酸部分の
カルボキシル基と延長末端アミノ酸(Ｄ−Leu)のアミノ
基との間で、固相担体に固定したまま、アミド結合形成
により、分子内環状化反応を行った。HATUを縮合剤とし
て使用し、添加剤にジイソプロピルエチルアミンを用い
たDMF溶液中で反応を行った。気相をArガスで置換し、
温度は室温、反応時間は14時間行った。反応産物を95%
トリフルオロ酢酸（TFA）を用いて担体から切り出し、
同時に脱保護も行った。生成物をHPLCに供した（カラ
ム：Cosmosil 5C18-ARを充填したカラム(120オングスト
ローム，4.6×150mm)、溶媒：(A)H₂O/0.1％TFA，(B)CH₃
CN/0.1％TFA）。天然のアルスロファクチンとはリテン
ションタイムの異なる３本のピークが検出された。FAB-
MSによる分子量測定の結果、そのいずれもが分子量1353
であり、天然のアルスロファクチンと同じ分子量であっ
た。

【０１２６】

【化１３】

【０１２７】これらHPLC上で３つのピークに分離する合
成アルスロファクチンと、天然型アルスロファクチンに
ついて界面活性を測定した。活性の測定方法として、従
来の表面張力活性ではなく、油膜排除活性を行った。す
なわち、水の上に油膜を広げ試料を静かに滴下すると円
形または楕円形の乳化円を形成する（図１）。形成した
乳化円の面積とバイオサーファクタントの界面活性との
間に相関関係があることを発見し、１ＢＳunitを１cm²
として、この方法により活性を測定した（図２）。アル
スロファクチンやサーファクチンなどのＢＳだけでな
く、合成界面活性剤についても直線的にプロットされ
た。従って、本明細書において界面活性とは、上記方法
により測定される油膜排除活性を示す。

【０１２８】天然型アルスロファクチンの活性を１００
とした相対活性を表に示す。この結果、油膜排除活性に
関しては、合成アルスロファクチンと天然アルスロファ
クチンには、ほぼ同程度の活性があることがわかった。

【０１２９】

【表１】

【０１３０】

【発明の効果】本発明は上述した内容であるので、従来
の微生物を用いて生産を行う方法より生産の効率が良い
環状リポペプチド化合物の製造を可能にする。本法は微
生物によらない化学合成であるため、任意の化合物の設
計が可能であり、所望の分子設計を行うことが可能であ
る。従って、本発明によれば、所望の性能に応じて任意
に分子設計された環状リポペプチド化合物が提供され
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、ＢＳ活性の定義を示す、模式図であ
る。

【図２】図２は、界面活性剤と油膜除去領域の関係を示
すグラフである。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】環状リポペプチド化合物の化学合成方法
であって、（Ａ）アミノ酸Ａ₁、または脂質成分とアミノ酸Ａ₁とが
結合した化合物であって２以上の官能基を有する化合物
のいずれかである出発物質の第１の官能基Ｆ_1aが担体に
結合した担体結合体を調製する工程、（Ｂ）担体に結合した出発物質の第２の官能基Ｆ_1bの部
分においてアミノ酸逐次延長反応を行う工程、ここで、
出発物質が２官能である場合には、少なくとも１つの３
官能アミノ酸Ａ_xを該アミノ酸逐次延長反応に参加させ
る工程、（Ｃ）延長反応生成物の成長末端アミノ酸Ａ_nの官能基
Ｆ_nと、出発物質の第３の官能基Ｆ_1cまたはペプチド成
分中のアミノ酸Ａ_x残基の第３の官能基Ｆ_xとを結合させ
て、環状化を行う工程、および（Ｄ）工程Ｃで得られた環状構造を有する化合物の担体
とＦ_1aとの結合を切り離す工程、を包含し、ここで、工
程Ｃで得られた環状構造に脂質成分が結合していない場
合にはさらに、（Ｅ）工程Ｃで得られた環状構造に脂質成分を結合させ
る工程を包含する、方法。
【請求項２】化学合成された環状リポペプチド化合
物。
【請求項３】アルスロファクチンおよびその同族体、
サーファクチンおよびその同族体、イチュリン、セラウ
ェッチンを除く、環状リポペプチド化合物。