JP2003012622A - Ｎ−置換オリゴマーの合成 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 固体基体支持体上で直接ポリ（Ｎ−置換アミ
ド）を合成する方法を提供すること。 【解決手段】 第２のアミンによって求核置換し得る脱
離基を含む第１のサブモノマーアシル化剤で、基体に結
合している第１のアミンをアシル化して、該アシル化剤
および該基体結合アミンが、該基体に結合された該第１
のアミンをアシル化するに有効な条件下、反応すること
によりアシル化アミンを得る工程、該アシル化アミンは
該第２のアミンによる求核置換用の脱離基をその上に有
し、該基体に結合している；および該アシル化アミン
を、アシル化工程の間に付加された該脱離基の該第２の
アミンとの求核置換を行ってポリ（Ｎ−置換アミド）ポ
リマーの要素を形成するように、十分な量の、該第２の
アミンを含む第２のサブモノマー置換剤と反応させる工
程を包含するポリ（Ｎ−置換アミド）を合成する方法。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【発明の属する技術分野】本発明は、一般的に化学合成
技術に関する。さらに特定すると、本発明はＮ−置換オ
リゴマーに関し、特に固相合成法を用いた、ポリ（Ｎ−
置換グリシン）（本明細書において、ポリＮＳＧとい
う）の形態のペプチド様化合物に関する。 【０００２】 【従来の技術】ペプチド合成のための古典的な固相法に
類似の標準法は、ＮＳＧの合成に適用され得る。このよ
うな方法に従って、Ｎ，α−Ｆｍｏｃ保護（および側鎖
が保護された）ＮＳＧが活性化され、次いで樹脂結合ア
ミノ基にカップリングされる。次いで、Ｆｍｏｃ基が除
去され、次いで次のモノマーが付加される。このよう
に、オリゴマー性のＮＳＧは、Ｎ−置換グリシンの縮合
ホモポリマーとして調製され得る。このようなアプロー
チは、保護されたＮ−置換グリシンモノマーの適切な量
の異なるセットを調製する時間および費用のため適切で
はない。Ｆｍｏｃまたは他の保護基を付加することおよ
び除去することは、時間を消費し、効率的でない。 【０００３】 【発明が解決しようとする課題】各Ｎ−置換モノマー
が、固体基体上において、直接２つの「サブモノマー」
から組み立てられるという合成方法が開示されている。
サブモノマー上の基本構造および置換基を種々変化させ
ることによって、広範囲の異なるオリゴマーが製造され
得る。そのいくつかは、天然のタンパク質および核酸ま
たはそれらの部分の構造および活性と似ている。 【０００４】Ｎ−置換オリゴマー、例えば、Ｎ−置換グ
リシン（ポリＮＳＧ）は、２つのサブモノマーから調製
されるモノマーからなる。第１のサブモノマーは、求核
置換し得る脱離基を含むアシル化剤（例えば、ハロ酢
酸）であり、そして第２のサブモノマーは、−ＮＨ₂基
を含む（例えば、１級アミン）。サブモノマーを用いた
ポリマー合成の方向は、カルボキシからアミノ方向であ
る。 【０００５】各モノマーの固相アセンブリー−および同
時に生じるポリマー形成−は、Ｎ，α−保護モノマーの
必要性を除く。反応性の側鎖官能基のみが保護されてい
ることが必要である。 【０００６】さらに、各サブモノマーは、アミド（アミ
ノ酸を含む）のオリゴマーの合成に予め用いられるモノ
マーより、構造が単純である。多くのサブモノマーは、
市販されている。これは、ポリＮＳＧ合成に必要な時間
および費用を劇的に低減する。 【０００７】本発明の第１の目的は、固体基体支持体上
で直接ポリ（Ｎ−置換アミド）を合成する方法を提供す
ることである。 【０００８】本発明の他の目的は、Ｎ−置換グリシンの
ようなＮ−置換オリゴマー（このオリゴマーは、広範囲
の種類の側鎖置換基を有し得る）を合成するための固相
法を提供することである。 【０００９】本発明の利点は、この方法が、固相法を用
いた以前の通常の合成より効率良く行われ得るというこ
とである。 【００１０】本発明の重要な実施態様は、本明細書で、
ポリＮ−置換アミドという特定のタイプのオリゴマー、
特にポリ（Ｎ−置換グリシン）を合成するための、自動
で、かつ高効率の固相法である。 【００１１】本発明の他の利点は、この方法がＮ，α−
保護モノマーを必要としないということである。 【００１２】本発明の特徴は、合成の間、反応性の側鎖
基のみが保護されているかまたはブロックされているこ
とが必要であることである。 【００１３】本発明のさらに他の利点は、モノマー（お
よびオリゴマー）の各サブモノマーが、迅速でそして効
率の良い合成をし得る単純な構造を有していることであ
る。 【００１４】本発明の他の特徴は、本発明に関連して用
いられる多くのサブモノマー成分が市販されていること
である。 【００１５】本発明のこれらのおよび他の目的、利点、
および特徴は、以下でさらに十分に記載されるような構
造、合成、および使用法の詳細を読むことにより、当業
者に明らかとなる。 【００１６】 【課題を解決するための手段】本発明のポリ（Ｎ−置換
アミド）を合成する方法は、第２のアミンによって求核
置換し得る脱離基を含む第１のサブモノマーアシル化剤
で、基体に結合している第１のアミンをアシル化して、
アシル化剤および基体結合アミンが、基体に結合された
第１のアミンをアシル化するのに有効な条件下、反応さ
せられ、それによって、アシル化アミンを得る工程、こ
こでアシル化アミンは第２のアミンによる求核置換用の
脱離基をその上に有し、そして基体に結合している；お
よび、アシル化アミンを、アシル化工程の間に付加され
た脱離基の該第２のアミンとの求核置換を行い、それに
よってポリ（Ｎ−置換アミド）ポリマーの要素を形成す
るように、十分な量の、第２のアミンを含む第２のサブ
モノマー置換剤と反応させる工程；を包含する方法であ
り、これによって上記目的が達成される。 【００１７】本発明の１実施態様では、基体に結合して
いるアミンが２級アミンである。 【００１８】本発明の１実施態様では、アミノ基を含む
第２のサブモノマーが、１級アミン、２級アミン、アル
コキシアミン、セミカルバジド、アシルヒドラジド、ま
たはカルバゼートである。 【００１９】本発明の１実施態様では、第２のサブモノ
マーが１級アミンである。 【００２０】本発明の１実施態様では、１級アミンが、
４−（２−アミノエチル）モルホリン、アニリン、ベン
ジルアミン、シクロペンチルアミン、Ｎ−Ｂｏｃ−１，
６−ジアミノヘキサンＨＣｌ、グリシン−ＯｔＢｕ Ｈ
Ｃｌ、ヘキシルアミン、２−メトキシエチルアミン、メ
チルアミン、およびチラミンからなる群より選択され
る。 【００２１】本発明の１実施態様では、脱離基がハロゲ
ンである。 【００２２】本発明の１実施態様では、第１のサブモノ
マーアシル化剤がハロ酢酸である。 【００２３】本発明の１実施態様では、ハロ酢酸のハロ
ゲン原子が、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩからなる群より選択
される。 【００２４】本発明の１実施態様では、アシル化工程お
よび反応工程を連続的に繰り返して、ポリ（Ｎ−置換ア
ミド）を得る工程をさらに包含する。 【００２５】本発明の１実施態様では、アシル化工程に
おいて、カルボキシレート活性化剤が存在する。 【００２６】本発明の１実施態様では、アシル化剤がハ
ロメチル安息香酸であり、そして予備活性化剤が存在す
る。 【００２７】本発明の１実施態様では、下式Ｉのオリゴ
マーであって、 【００２８】 【化１】 【００２９】ここで、Ｒが上記で定義されたような側鎖
であり；Ｚが、結合、−Ｏ−、−ＮＣ（Ｏ）Ｗ−であ
り、ここでＷ−が、結合、Ｏ−、または−ＮＲ_aであ
り、ここでＲ_aが、低級アルキル（炭素数１個〜６個）
であり；各Ｘが独立して、−ＮＨ₂、−ＯＨ、Ｈ、また
は低級アルキル（炭素数１個〜６個）であり；Ｙがヒド
ロカルビレン基であり；そして、ｎが２から２，０００
の整数であり、ここで、オリゴマーが、−ＮＨ₂によっ
て求核置換し得る脱離基を含む第１のサブモノマーアシ
ル化剤で、基体に結合している２級アミンをアシル化し
て、アシル化アミンを得る工程；アシル化アミンを、脱
離基の求核置換を行うために十分な量の、−ＮＨ ₂基を
含む第２のサブモノマー置換剤と反応させる工程；およ
び、アシル化工程および反応工程を連続的に繰り返し
て、ポリ（Ｎ−置換グリシン）を得る工程；の手順によ
って製造される、オリゴマーである。 【００３０】本発明の１実施態様では、下式ＩＩのオリ
ゴマー： 【００３１】 【化２】 【００３２】ここで、Ｙは−ＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₄−であり、そ
してｎは２から２，０００の整数であり、そしてＲはＨ
または１個〜６個の炭素を含有するアルキルである。 【００３３】本発明の１実施態様では、下式ＩＩＩのオ
リゴマー： 【００３４】 【化３】 【００３５】ここで、Ｘは、結合、−Ｏ−、−Ｎ−、ま
たはヒドロカルビレン基であり；Ｙは、結合またはヒド
ロカルビレン基であり；Ｒ¹は、Ｘに連結可能な任意の
モイエティーであり；そして、ｎは、２から２，０００
の整数である。 【００３６】本発明の１実施態様では、下式ＩＶのオリ
ゴマー： 【００３７】 【化４】【００３８】ここで、Ｙは、結合またはヒドロカルビレ
ン基であり；Ｒ¹は、酸素に結合可能なモイエティーで
あり；そして、ｎは、２から２，０００の整数である。 【００３９】本発明の１実施態様では、下式Ｉの少なく
とも２個の異なるオリゴマーの混合物であって、 【００４０】 【化５】 【００４１】ここで、Ｒが上記で定義されたような側鎖
であり；Ｚが、結合、−Ｏ−、−ＮＣ（Ｏ）Ｗ−であ
り、ここで、Ｗ−が、結合、−Ｏ−、または−Ｎ−であ
り；Ｙがヒドロカルビレン基であり；そして、ｎが２か
ら２，０００の整数であり、ここで、混合物のオリゴマ
ーが、−ＮＨ₂によって求核置換し得る脱離基を含む第
１のサブモノマーアシル化剤で、基体に結合している２
級アミンをアシル化して、アシル化アミンを得る工程；
アシル化アミンを、該脱離基の求核置換を行うために十
分な量の、−ＮＨ₂基を含む第２のサブモノマー置換剤
と反応させる工程；および、アシル化工程および反応工
程を連続的に繰り返して、ポリ（Ｎ−置換グリシン）を
得る工程；の手順によって製造される、オリゴマーの混
合物である。 【００４２】本発明の１実施態様では、ポリ（Ｎ−置換
グリシン）のバックボーン鎖の窒素原子上に置換された
側鎖を有するポリ（Ｎ−置換グリシン）であって、−Ｎ
Ｈ₂によって求核置換し得る脱離基を含む第１のサブモ
ノマーアシル化剤で、基体に結合している２級アミンを
アシル化して、アシル化アミンを得る工程；アシル化ア
ミンを、脱離基の求核置換を行うために十分な量の、−
ＮＨ₂基を含む第２のサブモノマー置換剤と反応させる
工程；および、アシル化工程および反応工程を連続的に
繰り返して、ポリ（Ｎ−置換グリシン）を得る工程；の
手順によって製造される、ポリ（Ｎ−置換グリシン）で
ある。 【００４３】本発明の１実施態様では、下式Ｖを有する
ポリ（Ｎ−置換グリシン）： 【００４４】 【化６】 【００４５】ここで、Ｘは−ＮＨ₂または−ＯＨであ
り、Ｒ¹およびＲ⁴は、それぞれ独立して、窒素原子に結
合可能な任意のモイエティーであり；Ｒ²およびＲ³は、
それぞれ独立して、炭素原子に結合可能な任意のモイエ
ティーであり；ｍは１から２，０００の整数であり；ｎ
は１から１０の整数であり；そして、Ｘは−Ｈ、−Ｏ
Ｈ、−ＮＨ₂、または１個から６個の炭素原子を含有す
る分枝鎖アルキルである。 【００４６】本発明の１実施態様では、ｎが２から１０
０である。 【００４７】本発明の１実施態様では、Ｒ¹、Ｒ²、
Ｒ³、およびＲ⁴が、それぞれ独立して、天然に存在する
アミノ酸の側鎖モイエティーである。 【００４８】本発明の１実施態様では、Ｒ¹およびＲ
³が、それぞれ−Ｈである。 【００４９】本発明の１実施態様では、下式ＶＩを有す
るポリ（Ｎ−置換グリシン）： 【００５０】 【化７】 【００５１】ここで、Ｒ⁹は、プリンまたはピリミジン
塩基であり；Ｒ¹は、窒素原子に結合可能な分子モイエ
ティーであり；ｍは、１〜５の範囲の整数であり；ｎ
は、１から２，０００までの範囲内の整数であり；そし
て、Ｘは、結合、−Ｏ−、−ＮＲ−、またはＯ＝Ｃ−Ｏ
−である。 【００５２】本発明の１実施態様では、Ｒ⁹が天然のヌ
クレオシド塩基であり；Ｒ¹が脂質モイエティーであ
り；ｍが２であり；そしてｎが３から１００までの範囲
内の整数である。 【００５３】本発明の１実施態様では、検出可能な標識
をさらに含む。 【００５４】本発明の１実施態様では、前記標識が、放
射性標識、蛍光標識、および酵素標識からなる群より選
択される。 【００５５】本発明の１実施態様では、アンチセンス処
理方法であって、下式ＶＩの化合物の治療に有効な量を
その中に分散して有する薬学的に受容可能な賦形剤キャ
リアを含む薬学的処方物を、哺乳類細胞に投与すること
を包含する、方法： 【００５６】 【化８】 【００５７】ここで、Ｒ⁹は、プリンまたはピリミジン
またはそれらの誘導体であり；Ｒ¹は、窒素原子に結合
可能な任意の分子モイエティーであり；ｍは、１〜５の
範囲の整数であり；ｎは、１から２，０００までの範囲
内の整数であり；そして、Ｘは、結合、−Ｏ−、−ＮＲ
−、またはＯ＝Ｃ−Ｏ−である。 【００５８】本発明の１実施態様では、診断または治療
のための組成物であって、有効量のオリゴマー、および
その任意の薬学的に受容可能な塩、アミド、またはエス
テルを含む、組成物である。 【００５９】本発明の１実施態様では、ポリアミド化合
物を合成する方法であって、以下の工程：（ａ）結合部
位を有する第１のキャップモイエティーを提供する工
程；（ｂ）下式のアシル化用化合物： 【００６０】 【化９】 【００６１】ここで、Ｌは脱離基であり、Ａは、結合、 【００６２】 【化１０】 【００６３】、または 【００６４】 【化１１】 【００６５】、ここで、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、およびＲ⁵は、
それぞれ独立して、Ｈ、低級アルキル、低級アルケニ
ル、低級アルキニル、アリール、アリール−低級アルキ
ル、１〜３の低級アルキルまたはハロで置換されたアリ
ール、または１〜３の低級アルキルまたはハロで置換さ
れたアリール−低級アルキルであり、ｍは０から６（こ
れらの数を含む）までの整数であり、そしてＲ_aは、Ｏ
Ｈまたはカルボニル活性化基である；を用いて結合部位
をアシル化して、下式のアシル化キャップモイエティー
を形成する工程： 【００６６】 【化１２】 【００６７】ここで、Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、または−
ＮＨ−である；（ｃ）該アシル化キャップモイエティー
と、次式のアミノ化合物：Ｈ₂Ｎ−Ｙ−Ｒ₁、ここで、Ｙ
は、結合、−Ｏ−、−ＮＲ₆−、 【００６８】 【化１３】 【００６９】 【化１４】 【００７０】、または 【００７１】 【化１５】 【００７２】であり、そして、Ｒ₁、Ｒ₆、およびＲ
₇は、それぞれ独立して、アルキル、アルケニル、アル
キニル、アルコキシ−アルキル、アリール、アリール−
低級アルキル、ジアリール−低級アルキル、ヘテロアリ
ール、ヘテロアリール−低級アルキル、アリールオキシ
−低級アルキル、ヘテロアリールオキシ−低級アルキル
からなる群より選択され、ここで、アリールおよびヘテ
ロアリールは、ハロ、−ＯＨ、−ＮＨ₂、−ＣＦ₃、−Ｎ
Ｏ₂、−ＣＮ、低級アルキル、フェニル、ベンジル、フ
ェネチル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキ
シ、フェノキシ、およびベンジルオキシからなる群より
選択される０個〜４個の基で置換される；とを接触させ
て、下式の化合物を形成する工程： 【００７３】 【化１６】 【００７４】ここで、脱離基Ｌは、結合部位を提供す
る、を包含する、方法である。 【００７５】本発明の１実施態様では、下式の化合物： 【００７６】 【化１７】 【００７７】ここで、ＸおよびＺは、それぞれ独立し
て、キャッピングモイエティーであり；Ａは、結合、 【００７８】 【化１８】 【００７９】、または 【００８０】 【化１９】 【００８１】であり、ここで、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、および
Ｒ₅は、それぞれ独立して、Ｈ、低級アルキル、低級ア
ルケニル、低級アルキニル、アリール、アリール−低級
アルキル、１〜３の低級アルキルまたはハロで置換され
たアリール、または１〜３の低級アルキルまたはハロで
置換されたアリール−低級アルキルであり、そしてｍは
０から６までの（これらの数を含む）の整数であり；Ｙ
は、−Ｏ−、−ＮＲ₆−、 【００８２】 【化２０】 【００８３】、または 【００８４】 【化２１】 【００８５】、そして、Ｒ₁、Ｒ₆、およびＲ₇は、それ
ぞれ独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、ア
ルコキシ−アルキル、アリール、アリール−低級アルキ
ル、ジアリール−低級アルキル、ヘテロアリール、ヘテ
ロアリール−低級アルキル、アリールオキシ−低級アル
キル、ヘテロアリールオキシ−低級アルキルからなる群
より選択され、ここで、アリールおよびヘテロアリール
は、ハロ、−ＯＨ、−ＮＨ₂、−ＣＦ₃、−ＮＯ₂、−Ｃ
Ｎ、低級アルキル、フェニル、ベンジル、フェネチル、
ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ、フェノキ
シ、およびベンジルオキシからなる群より選択される０
個〜４個の基で置換されており；そしてｎは、１〜５０
の整数である。 【００８６】本発明の１実施態様では、アミド化合物の
混合物を調製する方法であって、以下の工程：（ａ）多
くの反応容器を提供する工程：ここで、各反応容器は、
結合部位を有する第１のキャップモイエティーを含有す
る；（ｂ）下式のアシル化用化合物： 【００８７】 【化２２】 【００８８】ここで、Ｌは脱離基であり、Ａは、結合、 【００８９】 【化２３】 【００９０】、または 【００９１】 【化２４】 【００９２】、ここで、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、およびＲ₅は、
それぞれ独立して、Ｈ、低級アルキル、低級アルケニ
ル、低級アルキニル、アリール、アリール−低級アルキ
ル、１〜３の低級アルキルまたはハロで置換されたアリ
ール、または１〜３の低級アルキルまたはハロで置換さ
れたアリール−低級アルキルであり、ｍは０から６まで
（これらの数を含む）の整数であり、そしてＲ_aは、Ｏ
Ｈまたはカルボニル活性化基である；を用いて結合部位
をアシル化して、下式のアシル化キャップモイエティー
を形成する工程： 【００９３】 【化２５】 【００９４】ここで、Ｘは、−Ｏ−、−Ｓ−、または−
ＮＨ−である；（ｃ）該アシル化キャップモイエティー
と、次式のアミノ化合物：Ｈ₂Ｎ−Ｙ−Ｒ₁、ここで、Ｙ
は、結合、−Ｏ−、−ＮＲ₆−、 【００９５】 【化２６】 【００９６】 【化２７】 【００９７】、または 【００９８】 【化２８】 【００９９】であり、そして、Ｒ₁、Ｒ₆、およびＲ
₇は、それぞれ独立して、アルキル、アルケニル、アル
キニル、アルコキシ−アルキル、アリール、アリール−
低級アルキル、ジアリール−低級アルキル、ヘテロアリ
ール、ヘテロアリール−低級アルキル、アリールオキシ
−低級アルキル、ヘテロアリールオキシ−低級アルキル
からなる群より選択され、ここで、アリールおよびヘテ
ロアリールは、ハロ、−ＯＨ、−ＮＨ₂、−ＣＦ₃、−Ｎ
Ｏ₂、−ＣＮ、低級アルキル、フェニル、ベンジル、フ
ェネチル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキ
シ、フェノキシ、およびベンジルオキシからなる群より
選択される０個〜４個の基で置換される；とを接触させ
て、下式のアミド化合物を形成する工程： 【０１００】 【化２９】 【０１０１】ここで、脱離基Ｌは、結合部位を提供す
る；および（ｄ）工程（ｂ）または工程（ｃ）の後に、
多くの反応容器の２つからの化合物を合わせて、化合物
の混合物を形成する工程、を包含する、方法である。 【０１０２】 【発明の実施の形態】本固相合成の方法論が開示され、
そして記載される前に、本発明の方法は、調製され得る
特定のモノマーまたはオリゴマー、または記載された条
件および技法（これらはもちろん変更し得る）に、限定
されないということが理解される。本明細書中で用いら
れる用語は特定の実施態様のみを記載するためのもので
あって、本発明の範囲が特許請求の範囲によってのみ限
定されるということを意図しないこともまた理解され
る。 【０１０３】本明細書および特許請求の範囲において用
いられるように、単数の形態「ａ」、「ａｎ」、および
「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに複数でないことを示して
いない限り、複数の指示物も含むことに注意すべきであ
る。従って、例えば、「サブモノマー（ａ ｓｕｂ−ｍ
ｏｎｏｍｅｒ）」のような「反応成分（ａ ｒｅａｃｔ
ａｎｔ）」という指示は、複数のこのようなモノマーお
よび／またはこのようなモノマーの混合物を含み、
「Ｎ，α−保護モノマー（ａｎ Ｎ，α−ｐｒｏｔｅｃ
ｔｅｄ ｍｏｎｏｍｅｒ）」という指示は、複数のこの
ようなモノマーを含み、そして「ポリマー（ｔｈｅ ｐ
ｏｌｙｍｅｒ）」という指示は、複数のこのようなポリ
マーおよびこのようなポリマーの混合物などを含む。 【０１０４】本明細書に記載されている全ての文献は、
これらの文献が関連して述べられている本発明の特徴を
開示し、そして記載するために、本明細書中に参考とし
て援用されている。 【０１０５】他に定義がない限り、本明細書に用いられ
ている全ての技術用語および科学用語は、本発明が属す
る当業者によって通常理解されている意味と同じ意味を
有する。本明細書において記載されているものと同様ま
たは同等のいかなる方法および材料も、本発明の実施お
よび試験において用いられ得るが、好適な方法および材
料がここに記載される。 【０１０６】多くの用語は、好都合に提供された以下の
定義によって明細書中に定義され、そして用いられる。 【０１０７】（オリゴマー）用語「オリゴマー」には、
本発明のプロセスによって製造されるポリマー（例え
ば、ポリＮＳＧ）が含まれる。これには、いかなる長さ
のホモポリマー、コポリマー、およびインターポリマー
も含まれる。さらに詳細には、オリゴマーは、１種類の
繰り返しモノマー、２種類の交互にならんだモノマーユ
ニット、ランダムにならんだ２種類またはそれ以上のモ
ノマーユニットおよび／または互いに故意に間隔をあけ
たユニットを含み得る。製造されるポリアミドのタイプ
にかかわらず、本発明のポリアミドは、２工程サイクル
（以下で詳細に記載する）を繰り返すことを含む同じ一
般手順によって製造される。この２工程サイクルでは、
新しいモノマーユニットが、所望の長さのオリゴマーが
得られるまで、各サイクルにおいて加えられる。オリゴ
マーは、好ましくは、２個〜１００個のモノマー、さら
に好ましくは２個〜５０個、または２個〜２０個、そし
て最も好ましくは２個〜６個のモノマーである。 【０１０８】（アシルサブモノマー）用語「アシルサブ
モノマー」は、本発明の方法において用いられるアシル
化剤をいう。アシルサブモノマーは、反応性のカルボニ
ルまたはカルボニルの同等物、およびアミンによる求核
置換によって置換され得る脱離基を含む。「カルボニル
またはカルボニル同等物」は、限定されないが、カルボ
ン酸、エステル、アミド、無水物、アシルハライド、お
よびイソシアネート（本発明のポリカルバメートの合成
において）を包含する。用いられるエステルおよびアミ
ドは、一般に、「反応性の」形態、例えば、ＤＩＣ付加
物などである。アシルサブモノマーは、さらに側鎖を含
み得る。適切なアシルサブモノマーは、限定されない
が、ブロモ酢酸、３−ブロモプロピオン酸、２−ブロモ
プロピオン酸、２−ブロモエチルイソシアネート、２−
ブロモエチルクロロホルメート、６−フェニル−３−ブ
ロモヘキサン酸、４−ブロモメチル安息香酸、４−ブロ
モメチル−２−メトキシ安息香酸、５−ブロモメチル−
ピリジン−２−カルボン酸などを包含する。 【０１０９】（アミノサブモノマー）用語「アミノサブ
モノマー」は、アシルサブモノマーにおける脱離基の求
核置換をもたらし得るアミノ基を含有する化合物をい
う。このアミノ基は、１級、２級、または３級であり得
る。３級アミンを加えることによって、４級アンモニウ
ム塩を生じ、そして好ましくは鎖終止剤（ｃｈａｉｎ
ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ）（すなわち、オリゴマーのさら
なるアシル化が不可能となる）として用いられる。現在
のところ好ましいアミノサブモノマーは、１級アミンお
よびヒドラジンであるが、アミド、カルバメート、ウレ
ア、カルバジド、カルバゼート、セミカルバジドなども
また適切である。 【０１１０】（側鎖）用語「側鎖」は、本発明の化合物
のポリアミドバックボーンに窒素原子または炭素原子の
いずれかで、結合する基をいう。側鎖は、以下であり得
る：Ｈ、ヒドロキシ、 【０１１１】 【化３０】 【０１１２】ここで、Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、およびＲ_dは、そ
れぞれ独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、
アリール、アラルキル、アラルケニル、またはアラルキ
ニルであり；ここで、Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、およびＲ_dは、そ
れぞれ、０個〜６個のハロ、ＮＯ₂、−ＯＨ、低級アル
キル、−ＳＨ、−ＳＯ₃、−ＮＨ₂、低級アシル、低級ア
シルオキシ、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミ
ノ、トリハロメチル、−ＣＮ、低級アルキルチオ、低級
アルキルスルフィニル、または低級アルキルスルホニル
で置換される。 【０１１３】（ポリアミド）用語「ポリアミド」は、上
記のように、本発明のオリゴマーを記載するために本明
細書において用いられる。ここで、オリゴマーは、以下
で記載のようなポリ（Ｎ−置換グリシン）に限定されな
い。本発明のポリアミド化合物は、反応スキームＩにお
いて示される２工程サイクルを繰り返すことによって製
造される。窒素原子上の置換基が常に水素である場合に
は、得られるポリマーはポリ（Ｎ−置換グリシン）であ
り、それに対し、置換基が水素以外のモイエティーであ
る場合には、得られる化合物はポリアミドである。ポリ
アミドには、本明細書でさらに記載されるように、ポリ
カルバメートが含まれる。 【０１１４】（ポリ（Ｎ−置換グリシン））用語ポリ
（Ｎ−置換グリシン）、オリゴ（Ｎ−置換）グリシン、
およびポリＮＳＧは、本明細書において相互交換可能に
用いられ、そして本発明の方法論を用いて製造される。
ポリＮＳＧはペプチドではない。すなわち、ポリＮＳＧ
は、ペプチド結合で結合される天然に存在するアミノ酸
から構成されない。しかし、ポリＮＳＧは、天然に存在
するペプチドおよびタンパク質に親密に関連した構造上
の特徴（例えば、反応性部位）を有するように設計され
得、そして、潜在的な治療剤として、および／またはア
ッセイにおける結合部位として有用である。本明細書に
開示されているポリＮＳＧは、広範囲の種類の側鎖置換
基（通常、天然のアミノ酸に見られる置換基および天然
に存在しない他の置換基を含む）を有するように設計さ
れ得る。例えば、本発明は、公知の薬物の薬物フォア
（ｐｈａｒｍａｃｏｐｈｏｒｅ）（例えば、フェノキシ
フェニル、２−アダマンチルなど）と似た側鎖を有する
化合物を合成することを可能にする。 【０１１５】（サブモノマー）用語「サブモノマー」
は、本発明の方法において用いられる有機反応成分をい
い、これは、本発明の工程において基体結合材料に添加
される。本発明の「アシルサブモノマー」（スキームＩ
Ａの第１のサブモノマー）は、任意のアミノ基（例え
ば、−ＮＨ₂、−ＮＲＨ、または−ＮＲ₂）によって求核
置換し得る脱離基を含むアシル化剤である。「アミノサ
ブモノマー」（スキームＩＡの第２のサブモノマー）
は、−ＮＨ₂基を含む置換剤反応成分である。２つのサ
ブモノマーは、反応して本発明のサイクルにおいてモノ
マーユニットを形成し、そしてこのサイクルを繰り返す
ことによって、ポリＮＳＧを製造する。サブモノマー合
成の詳細は、本発明において、本発明者らの米国特許出
願第０７／９５０，８５３号において、および本発明者
らの文献、Ｒ． Ｚｕｃｋｅｒｍａｎｎら、Ｊ． Ａｍ
Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．（１９９２）１１４：１０６４６
−７において、記載されており、これらはすべて本明細
書中で参考として援用されている。 【０１１６】（分子モイエティー）用語「分子モイエテ
ィー」は、オリゴマー主鎖の窒素原子または炭素原子に
結合可能ないかなる原子または原子団をも含み、それに
より、オリゴマーの主鎖において側鎖が形成される。例
えば、ＣＨ₃（Ｒ¹）ＮＣ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ²）ＣＨ₃におい
て、Ｒ¹は、オリゴマー主鎖の窒素原子に結合可能な分
子モイエティーであり、それにより、窒素原子に結合す
る側鎖が形成される。そして、Ｒ²は、オリゴマー主鎖
の炭素原子に結合可能な分子モイエティーであり、それ
により、炭素原子に結合する側鎖が形成される。このよ
うに、広範囲の種類の分子モイエティーが用いられ得る
ことは、ポリペプチドまたはポリアミド合成の当業者に
容易に明らかである。分子モイエティーには、水素、お
よびヒドロカルビルモイエティー（例えば、アルキル、
アリール、およびアリールアルキルモイエティー）を含
み、これらには限定されない。以下の式Ｉの新規なポリ
（Ｎ−置換グリシン）において、窒素に結合可能な分子
モイエティーの少なくとも１つは、Ｈ以外である（すな
わち、窒素上に置換された側鎖を形成する）。 【０１１７】（炭化水素、ヒドロカルビル、ヒドロカル
ビレン）「炭化水素」は、化合物を示し、それに対し、
「ヒドロカルビル」および「ヒドロカルビレン」は、そ
れぞれ１個または２個の水素が除去された基を示す。そ
れぞれは、完全に水素原子および炭素原子で構成されて
おり、そして飽和または不飽和の脂肪族、脂環式、また
は芳香族であり得る。環が含まれる場合には、その構造
は、通常、１個、２個、または３個の環を含み、これら
の環は、融合、または架橋、またはスピロ融合（ｓｐｉ
ｒｏ−ｆｕｓｅｄ）し得る。 【０１１８】（置換基、置換された、および誘導体）置
換基は、第１の分子の一部であって、他の原子または基
に置き換わる原子または基を示す。分子が置換される場
合には、それは、１個またはそれ以上の置換基を有する
分子の誘導体である。本発明の任意のサブモノマーにお
ける有用な置換基には、ハロ、アルキル、アルコキシ、
アルキルチオ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ハロチ
オ、二置換アミノなどが包含され、これらは、窒素また
は炭素に結合している水素のような原子と置き換わる。 【０１１９】（プリンまたはピリミジン塩基）「プリン
またはピリミジン塩基」は、天然のヌクレオシド塩基
（例えば、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ、またはＵ）、および１個ま
たはそれ以上のアルキル、カルボキシアルキル、アミ
ノ、ヒドロキシル、ハロゲン（すなわち、フルオロ、ク
ロロ、ブロモ、またはヨード）、チオール、またはアル
キルチオール（ここで、アルキル基は１個から約６個ま
での炭素原子を含有する）によって置換されたプリンお
よびピリミジンを含む天然のヌクレオシド塩基の誘導体
を包含する。プリンおよびピリミジンの限定されない例
としては、２，６−ジアミノプリン、５−フルオロウラ
シル、キサンチン、ヒポキサンチン、８−ブロモグアニ
ン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒ
ドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグア
ニン、２−アミノプリン、５−エチルシトシン、５−メ
チルシトシン、５−ブロモウラシル、５−エチルウラシ
ル、５−ヨードウラシル、５−プロピルウラシル、２−
メチルアデニン、メチルチオアデニン、Ｎ，Ｎ−ジメチ
ルアデニン、８−ブロモアデニン、８−ヒドロキシアデ
ニン、６−ヒドロキシアミノプリン、６−チオプリン、
４−（６−アミノヘキシル／シトシン）などが挙げられ
る。 【０１２０】（脱離基）「脱離基」は、アミン、例え
ば、−ＮＨ２によって求核置換し得るモイエティーを意
味する。いかなる脱離基も、求核置換によって容易に除
去されるという条件で、本明細書において用いられ得
る。本発明において有用な脱離基の限定されない例とし
ては、ハロ（例えば、ブロモ、クロロ、ヨード）、Ｏ−
トシル、Ｏ−トリフリル、Ｏ−メシルなどが挙げられ
る。 【０１２１】（基体）「基体」または固体支持体は、ペ
プチド合成において用いられる通常の固体支持材料であ
る。このような基体または支持体の限定されない例とし
ては、種々の支持体樹脂、および支持体樹脂の連結材
（例えば、光で切り離し可能な、ＤＫＰ−形成リンカー
（ＤＫＰとは、ジケトピペラジンである；例えば、本明
細書中に参考として援用されているＷＯ９０／０９３９
５を参照のこと）、ＴＦＡ、ＨＦ、フッ化物イオン、ま
たは還元で切り離し可能なリンカー、および塩基に不安
定なリンカーである）が挙げられる。 【０１２２】（保護基）「保護基」とは、保護基が結合
する原子、通常酸素または窒素が、通常合成反応におい
て望ましくない反応または結合に関係することを妨げ得
るいかなる基をも意味する。保護基はまた、カルボン
酸、チオールなどの反応または結合を妨げることも知ら
れている。このような基およびこれらの調製および導入
は、当該技術分野において通常のものであり、そしてこ
れらには、塩、エステルなどが包含される。 【０１２３】（サブモノマーからのモノマーの合成の方
法）本発明の基本的な方法において、各Ｎ−置換モノマ
ーは、本明細書においてサブモノマーといわれている２
つの反応成分から、固体基体（支持体）上で直接合成さ
れる。 【０１２４】各モノマーは、２工程を含む合成サイクル
によって製造される。第１の工程は、アミン（例えば、
−ＮＨ₂）によって求核置換し得る脱離基を含む第１サ
ブモノマーアシル化剤（例えば、ハロ酢酸）を用いて行
われる基体結合アミンのアシル化を含む。このモノマー
合成サイクルの第２の工程は、十分な量（通常過剰量）
の、アミン（例えば、−ＮＨ₂）を含む第２サブモノマ
ー置換剤（例えば、１級アミン）を提供することによる
脱離基（例えば、ハロゲンまたはトシル）の求核置換に
よって側鎖を導入することを含む。この２工程方法は、
反応スキームＩ．Ａ．に示される。 【０１２５】しかし、反応スキームＩ．Ａ．はまた、反
応スキームＩ．Ｂ．に示されるように、逆方向にも行わ
れ得る。さらに詳細には、反応スキームＩ．Ａ．のよう
に、「基体結合アミン」を用いて反応を開始するのでな
く、基体に結合するアシル化剤サブモノマーを用いて反
応を開始し得る。従って、カルボン酸基は、基体の表面
から伸びており、そして第１の工程においてアミンと反
応する。この時点で、アミン基は、基体から外側に伸
び、そして上記の反応スキームＩ．Ａ．の第１の工程の
ように、サブモノマーアシル化剤を用いてアシル化に供
される。 【０１２６】反応スキームＩ（ＡまたはＢ）の基本的な
２工程方法は、モノマーユニットを産生し、そして繰り
返されて、以下の構造Ｉのモノマーのように、任意の所
望の長さのポリマー（以下の式Ｖの通り）を産生し得
る。この構造において示される変更可能な箇所は、所望
の結果を得るために変更され得る。さらに、基本的なサ
ブモノマー構造はまた、構造ＩＩ、ＩＩＩ、およびＩＶ
におけるような異なるモノマー／ポリマー構造を得るた
めに以下のように変更され得る。 【０１２７】 【化３１】 【０１２８】 【化３２】【０１２９】上記のそれぞれにおいて、「Ｐ」は固相表
面であり、各Ｒ¹およびＲ³は、独立して、炭素原子に結
合する任意の分子モイエティーであり、Ｒ²およびＲ
⁴は、独立して、窒素原子に結合する任意の分子モイエ
ティーであり、そしてｎは、１〜１０（好ましくは１ま
たは２）の整数である。Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、およびＲ⁴のい
ずれも、以下の２０個の天然アミノ酸に結合する２０個
の異なる側鎖部分を含み得る：グリシンの−Ｈ；アラニ
ンの−ＣＨ₃；バリンの−ＣＨ（ＣＨ₃）₂；ロイシンの
−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）₂；イソロイシンの−ＣＨ（Ｃ
Ｈ₃）ＣＨ₂ＣＨ₃；セリンの−ＣＨ₂ＯＨ；スレオニンの
−ＣＨＯＨＣＨ₃；システインの−ＣＨ₂ＳＨ；メチオニ
ンの−ＣＨ₂ＣＨ₂ＳＣＨ₃；フェニルアラニンの−ＣＨ₂
−（フェニル）；チロシンの−ＣＨ₂−（フェニル）−
ＯＨ；トリプトファンの−ＣＨ₂−（インドール基）；
アスパラギン酸の−ＣＨ₂ＣＯＯ−；アスパラギンの−
ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）（ＮＨ₂）；グルタミン酸の−ＣＨ₂ＣＨ₂
ＣＯＯ−；グルタミンの−ＣＨ₂ＣＨ ₂Ｃ（Ｏ）（Ｎ
Ｈ₂）；アルギニンの−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−Ｎ−（Ｈ）−
Ｃ（ＮＨ₂）⁺−ＮＨ₂；ヒスチジンの−ＣＨ₂−（イミダ
ゾール）⁺基；およびリジンの−ＣＨ₂（ＣＨ₂）₃Ｎ
Ｈ₃ ⁺。 【０１３０】反応スキームＩ（ＡおよびＢ）には、本発
明に関連して用いられる試薬を意味する数種の略語が含
まれる。例えば、ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを意
味し、ＤＩＣはＮ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド
を意味し、そしてＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミ
ドを意味する。 【０１３１】本発明の２工程方法の各工程は、およそ２
０℃の室温および１気圧の圧力で通常行われる。しか
し、反応はまた、約５℃から約８０℃の間の広範囲の温
度にわたって行われ得、そして用いられる溶媒に依存し
て変化する。温度に依存して、２工程反応スキームＩの
時間は、約５分から約２４時間の範囲内で変化し得る。
上記温度、時間、および試薬は、大気圧で反応を行うた
めに適応し得る。他の圧力も用いられ得る。 【０１３２】サブモノマーが液体である場合には、各工
程は溶媒の非存在下で行われ得る。しかし、サブモノマ
ーが固体である場合、またはこの反応を促進するために
は、不活性溶媒が用いられ得る。適切な不活性溶媒とし
ては、エーテル（例えば、ジオキサン）、ブロックされ
たアミド（例えば、ジメチルホルムアミド）、スルホキ
シド（例えば、ジメチルスルホキシド）などが包含され
る。 【０１３３】反応成分の割合は、変更され得る。しか
し、最高収率を得るためには、基体結合材料の約１．０
１から１０倍量、好ましくは約１．５から５倍量の過剰
量のサブモノマーを供給することが望ましい。 【０１３４】スキームＩにおいて示される本発明の２工
程サイクルにおいて、基体に結合している２級アミン
は、好ましくは、１級アミンから調製されるアミンであ
り、そして基体支持体ベース表面または固相（「Ｐ」の
文字で表される）に（通常の方法論を用いて）結合され
る。 【０１３５】サイクルの第１の工程は、アミン（例え
ば、−ＮＨ₂）によって求核置換し得る脱離基を含むア
シル化剤（例えば、スキームＩに代表的に例示されるハ
ロ酢酸、および特に、ブロモ酢酸）を含む第１サブモノ
マーと、基体結合２級アミンとを反応させて、アシル化
アミンを得ることによって行われるアシル化である。 【０１３６】本発明の２工程モノマー合成方法の第２の
工程は、バックボーンの窒素およびモノマーユニットの
側鎖またはＲ²基が付加される工程である。この第２工
程において、アシル化アミンは、十分な量の、−ＮＨ₂
基（例えば、１級アミンまたは２級アミン、アルコキシ
アミン、セミカルバジド、カルバゼート、アシルヒドラ
ジドなど）を含む第２のサブモノマー（これはＲ²基
（すなわち、側鎖基）を含み、このＲ²基はオリゴマー
においてこのモノマーの位置で付加される）と反応す
る。第２のサブモノマーの反応は、好ましくは、十分な
量（通常は過剰量）の、脱離基の求核置換を生じる第２
のサブモノマーを加えることによって達成される。これ
は、スキームＩにおいて示される臭素として代表的に例
示される。 【０１３７】（サブモノマー方法による環状ペプトイド
の調製）環状ペプトイドは、サブモノマー法によって調
製される。このような一般的な反応スキームは、以下に
示される。 【０１３８】 【化３３】 【０１３９】環状化をもたらす重要な反応は、側鎖の求
核原子によるＮ−末端ブロモアセトアミドの置換であ
り、それにより、樹脂上に「先端から側鎖（ｈｅａｄ−
ｔｏ−ｓｉｄｅ−ｃｈａｉｎ）」の環状構造を生じる。
側鎖の求核原子は、標準的なサブモノマーを通してオリ
ゴマーの所望の部分に導入される。典型的な求核原子
は、保護され得るチオールおよびアミンである。この目
的の好適にサブモノマーは、Ｍｏｚ−ＮＨ−ＣＨ₂−Ｃ
Ｈ₂−ＮＨ₂、 Ａｌｌｏｃ−ＮＨ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＮＨ
₂、およびＴｒｔ−Ｓ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＮＨ₂である。次
いで、オリゴマーは、所望の長さまで合成され、そして
ブロモアセトアミド基で終止される。次いで、側鎖の求
核原子は、選択的に脱保護され、そして環状化が行われ
る。 【０１４０】製造された環状ペプトイドの特定の例およ
び得られる収率は、以下に示される。 【０１４１】 【化３４】【０１４２】（サブモノマー法によるカルバメート合
成） 次いで、各反応工程は、続いて反応溶媒、およびＤＣ
Ｍ、ＤＭＦ、および／またはＭｅＯＨのいくつかの組合
せで洗浄される。反応は、一般に最適化される。 【０１４３】ＦＭＯＣ保護Ｒｉｎｋアミド樹脂（２５０
ｍｇ， ０．４３ミリモル／ｇ）を、２０分間２０％ピ
ペリジン／ＤＭＦで処理して、Ｎ−末端ＦＭＯＣ基を除
去した。洗浄後、樹脂を、標準的な方法を用いてＦＭＯ
Ｃ−Ｓａｒ−ＯＨでアシル化した。Ｎ−末端ＦＭＯＣ基
を、２０％ピペリジン／ＤＭＦで除去した。 【０１４４】上記樹脂を、ＤＣＭで膨張し、そして排出
した。ブロモエチルクロロホルメート（１８０μＬ，
１．６７ミリモル）とＤＩＥＡ（２６０μＬ， １．５
ミリモル）とのＤＣＭ ５ｍＬ溶液を、樹脂に加え、そ
してこの樹脂を４５分間振盪した。次いで、この樹脂を
十分に洗浄した。この樹脂に、ブチルアミン（７９０μ
Ｌ， ８．０ミリモル）のＤＭＦ（３．２ｍＬ）溶液を
加え、そして穏やかに振盪しながら２時間反応させた。 【０１４５】ＤＣＭ（５ｍＬ）中のブロモエチルクロロ
ホルメート（１６０μＬ， １．５ミリモル）およびＤ
ＩＥＡ（２６０μＬ， １．５ミリモル）を用いて、４
５分間、アシル化を繰り返した。洗浄後、樹脂をベンジ
ルアミン（８７５μＬ， ８ミリモル）の３．２ｍＬ
ＤＭＦ溶液で、２時間処理した。 【０１４６】次いで、樹脂を洗浄し、そして、９５％
ＴＦＡ／Ｈ２Ｏで９０分間切り出し処理した。得られた
溶液をＣ−４ ＰＲ−ＨＰＬＣおよびＭＳによって分析
した。３つの主要なピークが、約１：２：１の割合で得
られた。ＭＳは、中央のピークが以下に示される構造を
有する目的物質であることを示した。最初の溶出ピーク
は、欠失産物（ＢｕＮＨ₂工程での不完全な反応）によ
るものであった。最後のピークは、第２のアシル化、す
なわち、最終のベンジルアミン工程における不完全な反
応に由来の生成物らしい。 【０１４７】 【化３５】 【０１４８】ブチルまたはベンジルは、上記で定義され
たようないかなる側鎖でもあり得るか、または以下から
なる群より選択される：ハロ、ニトロ、低級アルキル、
低級シクロアルキル、 −ＯＨ、−ＮＲ_aＲ_b（ここで、
Ｒ_aおよびＲ_bは、それぞれ独立して、 −Ｈまたは低級
アルキルである）、−ＯＲ_a、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_a、−ＯＣ
（Ｏ）Ｒ_a、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_a、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ_a、−
（ＣＨ２）ｎ−ＣＸ₁Ｘ₂Ｘ₃（ここで、ｎは、０〜６で
あり、そしてＸ₁〜Ｘ₃は、それぞれ独立して、Ｈまたは
ハロである）、−ＮＣ（Ｏ）Ｒ_a、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ
_aＲ_b、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ_aＲ_b、または−ＮＣ（Ｏ）ＮＲ
_aＲ_b。 【０１４９】（フォトリソグラフィー法）本発明の方法
はまた、Ｐｉｒｒｕｎｇらの米国特許第５，１４３，８
５４号（これは、本明細書中で参考として援用されてい
る）によって記載されている光学的に扱われる（ｏｐｔ
ｉｃａｌｌｙ−ａｄｄｒｅｓｓｅｄ）空間的アレイ技法
にも適用され得る。この技法は、半導体マスク技術のア
ナログを用いて、アレイ中のあらゆる基体の表面上にオ
リゴマー性の化合物を形成する。光に不安定な保護基
が、表面結合化合物を反応から保護するために用いられ
る。特定の化合物（すなわち、アレイにおける特定の領
域）に対して他のモノマーを加えるために、その領域の
みを照明することまたは照射することによって、その領
域中の化合物を脱保護する。このことは、例えば、注意
深く照準した光源またはレーザー、または所望の領域の
み照明が行われるマスクを用いて達成される。半導体型
のフォトリソグラフィー法を用いて、本方法は、非常に
小さいサイズにスケールダウンされ得る。適切な光に不
安定な保護基には、限定されないが、以下のものが含ま
れる：６−ニトロベラトリルオキシカルボニル（ＮＶＯ
Ｃ：３，４−ジメトキシ−６−ニトロベンジルオキシカ
ルボニル）、２−ニトロベンジルオキシカルボニル、
α，α−ジメチル−ジメトキシベンジルオキシカルボニ
ル（ＤＤＣ）、５−ブロモ−７−ニトロインドリニル、
ｏ−ヒドロキシ−α−メチルシンナモイル、および２−
オキシメチレンアントラキノン。 【０１５０】Ｐｉｒｒｕｎｇらの方法は、空間的に決ま
ったアレイにおいて合成されたオリゴマーのアミノサブ
モノマーにおける末端を保護するために不安定な保護基
を用いることによって、本発明の方法に応用される。例
えば、アシルサブモノマーは、反応ゾーンのアレイ中の
平面基体（例えば、８×１２、２０×２０、１００×１
００など）に結合する。次いで、第１のアミノサブモノ
マーが、全てのアシルサブモノマーに結合され、次い
で、例えば、ＮＶＯＣで保護される。ゾーンは、次のモ
ノマー（アシルサブモノマーおよびアミノサブモノマ
ー）を結合するために選択され、そして残りのゾーン
は、反応を妨げるためにマスクされる。この選択された
ゾーンは、照明または照射によって脱保護され、続い
て、次のアシルサブモノマー、次いで、次のアミノサブ
モノマーと反応される。次いで、末端アミノサブモノマ
ーは、（次の合成時にさらに改変されるのでなければ）
ＮＶＯＣによって再び保護され、そしてこのゾーンは結
合される次のモノマー用に選択される。このサイクル
は、全てのオリゴマーが合成されるまで繰り返される。
次いで、この化合物は、この支持体から切り離され得る
か、またはインサイチュでアッセイされ得る（典型的に
は、蛍光標識された抗体またはリガンドを結合する能力
をアッセイすることによる）。 【０１５１】（ハロメチル安息香酸）本発明の１つの実
施態様において、第１のサブモノマーは、ハロゲン化有
機酸（例えば、ブロモ酢酸、クロロメチル安息香酸な
ど）である。このサブモノマーの合成によって、種々の
異なるハロ酸（例えば、ブロモ酢酸およびクロロメチル
安息香酸）を同じポリマー鎖へ組み込んで、ハイブリッ
ドバックボーンを発生し得る。さらに、他の誘導される
芳香族酸もまた、用いられ得る。 【０１５２】（アシルヒドラジド）アシルヒドラジド、
カルバゼート、セミカルバジドおよび下式の関連の化合
物： 【０１５３】 【化３６】 【０１５４】（ここで、Ｘは、結合、−Ｏ−、−Ｎ−、
またはヒドロカルビレン基である）は、本発明の方法に
おいて、第２のサブモノマー置換剤として、アミンの代
わりに用いられ得る。 【０１５５】アシルヒドラジドを用いるサブモノマー合
成によって生じるオリゴマーは、水素結合ドナー、およ
び各側鎖において置換されるアクセプター基を有し得
る。これは、２級および３級の構造モチーフを安定化さ
せ得る。 【０１５６】アシルヒドラジドは、カルボン酸／エステ
ルおよびヒドラジドから容易に調製される： 【０１５７】 【化３７】 【０１５８】同様に、カルバゼートおよびセミカルバジ
ドは、アルコールまたはアミン、ｐ−ニトロフェニルク
ロロホルメート、およびヒドラジンから調製され得る： 【０１５９】 【化３８】【０１６０】このように、ヒドラジンは、オリゴ（Ｎ−
置換）ポリマーバックボーンをカルボン酸、アルコー
ル、およびアミンと結合し得る「アダプター分子」とし
て見なし得る。したがって、サブモノマー合成は、アミ
ンベースの変更だけでなく、アルコールおよびカルボン
酸の変更も含む方向に拡張され得る。非常に多くの数の
アルコールおよびカルボン酸が市販されており、そして
他のものは、公知の技法によって容易に製造され得る。 【０１６１】置換剤は、広範囲の求核性、立体障害、揮
発性、側鎖保護基（存在する場合）、溶解性などを有し
得る。 【０１６２】別の方法で反応工程を妨げる基を含有しな
い、あらゆる通常のアミン（例えば、１級アミン）が用
いられ得る。これは、保護された形態での基を有するア
ミンを含む。この保護は、続いて除去され得る。好まし
いアミンの限定されない例には、４−（２−アミノエチ
ル）モルホリン、アニリン、ベンジルアミン、シクロペ
ンチルアミン、Ｎ−Ｂｏｃ−１，６−ジアミノヘキサ
ン、グリシン−ＯｔＢｕ、ヘキシルアミン、２−メトキ
シエチルアミン、メチルアミン、チラミンなどが包含さ
れる。 【０１６３】本発明の他の実施態様においては、第２の
サブモノマーはアシルヒドラジドである。このようなサ
ブモノマーの利点は、各側鎖において、水素結合ドナー
およびアクセプター基を提供することによって、２級お
よび３級のモチーフを安定化することであり得る。アシ
ルヒドラジドは、通常の技法を用いて、カルボン酸およ
びエステルおよびヒドラジドから容易に調製され得る。 【０１６４】同様に、カルバゼートおよびセミカルバジ
ドは、通常、例えば、アルコールまたはアミン、ｐ−ニ
トロフェニルクロロホルメート、およびヒドラジドから
調製され得る。 【０１６５】（オリゴマーを合成する方法）スキームＩ
の基本的な２工程方法により、モノマーユニットが得ら
れる。本発明の他のそして重要な実施態様は、アシル化
および置換の２工程サイクルを繰り返すことを含む、オ
リゴマー合成方法に向けられる。本発明の特に好適な実
施態様は、オリゴマー（例えば、ポリＮＳＧ）を製造す
る方法である。 【０１６６】工程１および２では、任意の所望の回数の
サイクルで繰り返されて、所望の数のモノマーユニット
が得られ得る。各サイクルの工程のそれぞれにおいて、
スキームＩ．Ａ．において示される可変基Ｒ１およびＲ
４は、異なる側鎖モイエティーを製造するために、変更
され得る。末端Ｎは、本明細書において、Ｒ⁴およびＨ
に連結することが示される。しかし、これは、他のサイ
クルにモノマーユニットを加えさせるために行われる。
実際の末端−Ｎ含有基は、以下の式ＶのポリＮＳＧにつ
いて定義されるように、Ｒ³および／またはＲ⁴にアルキ
ルおよび／またはアシル基を提供することによって、キ
ャップされ得る。可変基Ｒ²およびＲ³は、任意の所望の
側鎖モイエティーおよび生成オリゴマーを得るために、
各サイクルの各工程において変更され得る。従って、反
応スキームＩ．ＡおよびＩ．Ｂはともに、所望の側鎖基
および任意の所望の末端モイエティーを有する任意の所
望のオリゴマーを製造するように、実行され得るという
ことが理解され得る。 【０１６７】異なるＲ基が、各サイクルの工程２におい
て適切な第２のサブモノマーを用いることによって分子
中に正確に配置される。得られるポリＮＳＧは、モノマ
ーユニットの所望の配列からなる。 【０１６８】（オリゴマー混合物を製造すること）ポリ
アミドの混合物を製造するために本発明を用いることも
また可能である。この混合物は、第２のサブモノマーの
混合物を、工程１のアシル化アミンと反応させる（工程
２において）ことによって、既知量の各ポリアミドを有
する。各第２のサブモノマーとアシル化アミンとの反応
についての反応定数を知ることまたは計算することによ
って、得られたポリＮＳＧ中の各生成物の量比を計算す
ること、および得えられるポリＮＳＧの混合物の組成を
正確に決定することが可能である。このような方法論
は、１９９３年７月６日に発行された米国特許第５，２
２５，５３３号において反応速度定数に基づいて通常の
アミノ酸を反応させることによって通常のペプチドの混
合物を製造することに関して記載されている。 【０１６９】さらに、本発明の方法は、個々のポリエチ
レンバッグを用いたＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ法の修飾を教
示するＨｏｕｇｈｔｅｎ，Ｒ．Ａ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔ
ｌＡｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ（１９８５）８２：５１３
１−５１３５などの他の方法に適用され得る。これは、
一般のＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ法において、所望のペプチ
ドのＣ末端アミノ酸は、固体支持体に結合し、そしてこ
のペプチド鎖は、連続的アミノ酸残基の付加によって形
成される。したがって、鎖はＮ末端へと伸張する。この
付加は、以下を含む連続的工程において行われる：脱保
護、保護化形態の次のアミノ酸残基の結合、ペプチドの
脱保護、次の保護化残基の結合など。 【０１７０】Ｈｏｕｇｈｔｅｎ法においては、固体支持
体に結合したＣ末端アミノ酸を含有する個々のポリエチ
レンバッグは、例えば、支持体に結合した異なるＣ末端
残基を含有する２０個のバッグが、次に結合される同じ
保護化アミノ酸残基を用いて同時に脱保護され、そして
処理され、次いで回収され、そして、所望に応じて、均
一にまたは別々に処理され得るように連続的結合手法を
通して混合され、そして配合され得る。この手法で得ら
れる生成物は、それぞれ異なるペプチド配列を含有する
一連のポリエチレンバッグである。各バッグは多くのペ
プチドを含有するが、いずれのバッグにおける全てのペ
プチドも同じである。次いで、各バッグにおけるペプチ
ドは、回収され、そして例えば、生物学的アッセイによ
って個々に試験され得る。 【０１７１】本発明は、混合物中に予め決められた量の
異なるポリＮＳＧを含むポリＮＳＧの混合物を製造する
ために他の方法とともに用いられ得る。混合物中には等
モル量の各ポリＮＳＧが含まれる。各ポリＮＳＧが、回
収され、そして分析され得るような量で、混合物中に存
在するような方法が用いられ得る。ポリＮＳＧのこのよ
うな混合物は、樹脂ビーズのプールを等量部分に分割す
ること、唯一のＮＳＧを各部分に結合させること、次い
でこれらの部分を混合することを含む合成アルゴリズム
によって生成され得る。（Ｆｕｒｋａ，Ａ．ら（１９９
１）Ｉｎｔ．Ｊ． Ｐｅｐ． Ｐｒｏ． Ｒｅｓ．，
３７：４８７−４９３； Ｌａｍ，Ｋ．ら（１９９１）
Ｎａｔｕｒｅ，３５４：８２−８４；Ｈｏｕｇｈｔｅ
ｎ，Ｒ．ら（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ， ３５４：８４
−８６； Ｚｕｃｋｅｒｍａｎｎ，Ｒら（１９９１）Ｐ
ＣＴ特許出願ＷＯ ９１／１７８２３；Ｚｕｃｋｅｒｍ
ａｎｎ，Ｒら（１９９２） Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ８９：４５０５−４５０９を参
照のこと。これらは本明細書中で参考として援用されい
ている。）。 【０１７２】本発明の方法はまた、Ｇｅｙｓｅｎ，Ｈ．
Ｍ．ら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳ
Ａ（１９８４）８１：３９９８−４００２によって考案
された代替法においても用いられ得る。第４，８３３，
０９２号、第５，１９４，３９２号、ＷＯ８６／０６４
８７号およびＷＯ８６／００９９１号を参照のこと。こ
の方法は、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄシステムの修飾法であ
る。この方法では、Ｃ末端アミノ酸残基は、ポリエチレ
ンピンの形態で固体支持体に結合され、そしてこれらの
ピンは、残りのアミノ酸残基と結合するために連続し
て、個々にまたは集合的に処理される。支持体からペプ
チドを切り離すことなく、これらのペプチドは、次い
で、効率よく、所望の活性（例えば、所定の抗体または
レセプターとの相互作用）について、効果的にそして個
々に評価される。このＧｅｙｓｅｎの手法は、個々の異
なるペプチドを産生するにもかかわらず、合成および試
験手法の両方の効率をかなり向上させる。ペプチドはま
た、ピンから切り離され、そして溶液中でアッセイされ
得る。 【０１７３】（自動合成）サブモノマーを反応させるこ
とによるＮＳＧオリゴマーの調製は、自動合成機に適用
し得る（Ｚｕｃｋｅｒｍａｎｎ， Ｒ．Ｎ．， Ｋｅｒ
ｒ， Ｊ．Ｍ．，Ｓｉａｎｉ， Ｍ．およびＢａｎｖｉ
ｌｌｅ， Ｓ．， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｅｐｔｉｄｅ
Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．（１９９２）、第４０巻、４
９７−５０６頁、および米国特許第５，２５２，２９６
号を参照のこと）。モノマー付加（スキームＩに示され
るように）の各サイクルは（１）アシル化工程、および
（２）置換工程の２工程を含む。ただし、Ｎ，α−脱保
護工程はない。 【０１７４】２級アミンのアシル化は、アシルサブモノ
マーを結合する場合に特に困難であり得る。従って、ア
シル化は、効果的なアシル化剤混合物としてカルボキシ
レート活性化剤（例えば、カルボジイミド）の存在下
で、アシル化剤を使用することによって促進され得る。
従って、それは、第１のサブモノマー（例えば、ハロ酢
酸）を用いた基体結合２級アミンのアシル化の第１の工
程について望ましくあり得る（Ｌｉｎｄｎｅｒ， Ｗ，
Ｒｏｂｅｙ， Ｆ．Ａ．， Ｉｎｔ． Ｊ．Ｐｅｐｔ
ｉｄｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．， ３０， ７９４
−８００（１９８７）； Ｒｏｂｅｙ， Ｆ．Ａ．，
Ｆｉｅｌｄｓ， Ｒ．Ｌ．， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ．， １７７， ３７３−３７７（１９８９）；
Ｗｅｔｚｅｌ， Ｒ．， Ｈａｌｕａｌａｎｉ，
Ｒ．， Ｓｔｕｌｔｓ， Ｊ．Ｔ．，Ｑｕａｎ，
Ｃ．， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，
１， １１４−１２２（１９９０））； Ｆｉｓｔｈｅ
ｒ， Ｅ． Ｂｅｒ． Ｄｔｓｃｈ．Ｃｈｅｍ． Ｇｅ
ｓ．（１９０４），３７：３０６２−３０７１は、適切
なカルボキシレート活性化方法を用いる。カルボジイミ
ド、ハロアセチルハライド、または他の適切な活性化剤
もまた用いられ得る。 【０１７５】本発明の２工程方法における第２の工程
は、アミノ基（例えば、−ＮＨ₂、−ＮＲＨ、−ＮＲ
₂基）を含む過剰の第２のサブモノマーを用いて、一般
にハロゲン（基体結合α−ハロアセトアミドとして）で
ある脱離基の求核置換により側鎖を導入する。この置換
の効率は、脱離基の選択（例えば、脱離基がハロ原子で
ある場合（例えば、Ｉ＞Ｃｌ））によって調節される。 【０１７６】側鎖上のカルボキシル、チオール、アミノ
および他の反応性基の保護は、望ましくない副反応を最
小にするために望ましい。しかし、数種の側鎖モイエテ
ィー（例えば、インドール、イミダゾール、フェノー
ル）は置換またはアシル化に対して穏やかに反応するた
め、保護なしで好適に使用され得る。 【０１７７】（オリゴマー）本発明の新規な方法の使用
によって、反応スキームＩおよび上記で示されるよう
に、下式Ｉの広範囲のオリゴマーが製造され得る： 【０１７８】 【化３９】 【０１７９】ここで、Ｒは上記で定義される側鎖であ
り；Ｚは、結合、−Ｏ−、−ＮＣ（Ｏ）Ｗ−であり、こ
こでＷ−は、結合、−Ｏ−、または−Ｎ−であり；Ｙは
ヒドロカルビレン基またはＡｒであり、ここでＡｒは、
アリーレン、１個〜４個のヘテロ原子を有するヘテロア
リーレン、シクロアルキレン、シクロアルケニレン、１
個〜４個のヘテロ原子を有するヘテロシクロアルキレン
であり、ここで、Ａｒは、１個から３個の環を有し、そ
して該環は、結合またはアルキレン基によって連結され
るか、または融合、架橋、またはスピロ融合される。Ａ
ｒは、ハロ、ニトロ、低級アルキル、低級シクロアルキ
ル、−ＯＨ、−ＮＲ_aＲ_b（ここで、Ｒ_aおよびＲ_bは、そ
れぞれ独立して、−Ｈまたは低級アルキルである）、−
ＯＲ_a、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_a、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_a、−Ｃ（Ｏ）
ＯＲ_a、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ_a、−（ＣＨ₂）_n−ＣＸ₁Ｘ₂Ｘ
₃（ここで、ｎは、０〜６であり、そしてＸ₁〜Ｘ₃は、
それぞれ独立して、Ｈまたはハロである）、−ＮＣ
（Ｏ）Ｒ_a、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_aＲ_b、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ_aＲ
_b、または−ＮＣ（Ｏ）ＮＲ_aＲ_bからなる群より選択さ
れる１個〜６個の置換基で置換され得；そしてｎは２か
ら２，０００の整数である。 【０１８０】クロロメチル安息香酸がブロモ酢酸の代わ
りに用いられる場合には、オリゴマーは下式ＩＩを有す
る： 【０１８１】 【化４０】 【０１８２】ＲおよびＲ¹は、窒素原子に結合可能ない
かなるモイエティーであり得るが、それぞれは好ましく
は、独立して、１個から３０個の炭素原子を含有するヒ
ドロカルビルである。 【０１８３】このオリゴマーを合成する好ましい方法
は、アシル化工程１を改変して、例えば、メタまたはパ
ラクロロメチル安息香酸無水物アシル化剤などのアシル
化剤をも含有させることである。従って、ｐ−クロロメ
チル安息香酸の約０．６Ｍ溶液は、カルボキシレート活
性化剤（例えば、約０．５当量のジイソプロピルカルボ
ジイミド）と、約３０分間室温で合わされる。次いで、
沈澱した（ジイソプロピルウレア）が濾過によって除去
されて、アシル化溶液が得られる。次いで、アシル化反
応が上記のように行われる。予備活性化工程は、酢酸モ
イエティーと比べて、安息香酸モイエティーの活性化速
度が遅いために用いられる。 【０１８４】本発明のＮ−置換オリゴマーは、反応スキ
ームＩにおける反応成分の１種または両方を変更するこ
とによって変えられ得る。特に、反応は、アシルヒドラ
ジド、カルバゼート、セミカルバジド、または以下の構
造を有する関連の化合物を用いて行われ得る： 【０１８５】 【化４１】 【０１８６】ここで、Ｘは、−Ｏ−、−Ｎ−、または結
合であり、そしてＲ¹は、反応スキームＩにおいて上記
で定義されたとおりである。このような反応成分が反応
スキームＩにおいて用いられる場合、Ｎ−置換オリゴマ
ーが生じる。ここで、このオリゴマーは、下式ＩＩＩに
よって表される： 【０１８７】 【化４２】 【０１８８】ここで、Ｘは、結合、Ｏ、Ｎ、またはヒド
ロカルビレン基であり；Ｙは、ヒドロカルビレン基また
はアリーレンであり；そしてＲ¹は、反応スキームＩに
おいて上記で定義されたとおりである。 【０１８９】（アルコキシアミン）オリゴマーを合成す
るために用いられる第２のサブモノマーがアルコキシア
ミンである場合には、このオリゴマーは下式ＩＶを有し
得る： 【０１９０】 【化４３】 【０１９１】ここで、Ｙは、ヒドロカルビレン基（例え
ば、メチレン）、または−ＣＨ₂Ｃ₆Ｈ ₄−であり、そし
てＲ¹は上記で定義されたとおりである。 【０１９２】アルコキシアミンを用いて反応スキームＩ
を行う場合、アルコキシアミンはＤＭＳＯ中１．０〜
２．０Ｍ溶液として置換反応（工程２）に用いられる。 【０１９３】新規なポリアミド構造は、側鎖がα−炭素
よりもむしろ（またはα−炭素に加えて）窒素上に置換
されている点でポリペプチドとは異なる。本発明の１つ
の実施態様は、下式Ｖを有する化合物である。： 【０１９４】 【化４４】 【０１９５】ここで、Ｒ¹およびＲ⁴は、それぞれ独立し
て、窒素原子に結合可能な任意のモイエティーであり；
Ｒ²およびＲ³は、それぞれ独立して、炭素原子に結合可
能な任意のモイエティーであり、これは、−Ｈ、または
１個から６個の炭素原子を含有するアルキルモイエティ
ーを含み、好ましくは−ＣＨ₃であり、さらに好ましく
は−Ｈであり；Ｘは、それぞれ独立して−ＨＮＲ⁵であ
り、ここで、Ｒ⁵は、Ｒ¹と同様であり、そしてＸは、好
ましくは、−ＮＨ₂、−ＯＨ、Ｈ、および直鎖または分
枝鎖アルキル（１個〜６個の炭素）または２つの低級ア
ルキル、あるいはＸは、−ＯＲ ⁶であり、ここでＲ⁶は−
Ｈまたは低級アルキル（１個〜６個の炭素）であり；ｍ
は１から２，０００、好ましくは２〜１００、さらに好
ましくは２〜１２、そして最も好ましくは３〜８の整数
であり；そしてｎは１から１０の整数、そして好ましく
は１または２である。 【０１９６】Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、およびＲ⁴（特に、Ｒ⁴）
について有用なモイエティーの限定されない例として
は、天然に存在する以下のアミノ酸上に存在する側鎖部
分が包含される：グリシンの−Ｈ；アラニンの−Ｃ
Ｈ₃；バリンの−ＣＨ（ＣＨ₃）₂；ロイシンの−ＣＨ₂Ｃ
Ｈ（ＣＨ₃）₂；イソロイシンの−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₃；
セリンの−ＣＨ₂ＯＨ；スレオニンの−ＣＨＯＨＣＨ₃；
システインの−ＣＨ₂ＳＨ；メチオニンの−ＣＨ₂ＣＨ₂
ＳＣＨ₃；フェニルアラニンの−ＣＨ₂−（フェニル）；
チロシンの−ＣＨ₂−（フェニル）−ＯＨ；トリプトフ
ァンの−ＣＨ₂−（インドール基）；アスパラギン酸の
−ＣＨ₂Ｃ００−；アスパラギンＣＨ₂Ｃ（Ｏ）（Ｎ
Ｈ₂）；グルタミン酸の−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｃ００−；グルタ
ミンの−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂；アルギニンの−Ｃ
Ｈ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−Ｎ−（Ｈ）−Ｃ（ＮＨ₂）⁺−ＮＨ₂；ヒ
スチジンの−ＣＨ₂−（イミダゾール）⁺基；およびリジ
ンの−ＣＨ₂（ＣＨ₂）₃ＮＨ₃ ⁺。Ｒ¹〜Ｒ⁴（特にＲ¹およ
びＲ³）について他の有用なモイエティーには、１個〜
６個の炭素を含有するアルキル（直鎖または分枝鎖）；
アリール、アラルキル、ヌクレオシド塩基およびこれら
の誘導体、炭水化物、および脂質が含まれる。 【０１９７】通常のアミノ酸には多くの周知の修飾され
た形態（例えば、Ｏ−ホスホセリン；Ｏ−ホスホスレオ
ニン；Ｏ−ホスホチロシン；Ｎ−ホルミルメチオニン；
およびグリシンアミド）があり、そしてこれらの修飾さ
れたアミノ酸の側鎖はまた、式ＶおよびＶＩの化合物に
おけるＲ基として容易に用いられる。 【０１９８】用いられる典型的なＲ基には、薬物フォア
および天然のアミノ酸およびそれらの誘導体が含まれ
る。生じるポリＮＳＧは、生物学的に活性（例えば、模
擬的）であるか、または天然のレセプター部位に付着す
る天然に存在のペプチドまたは非ペプチド分子の活性を
ブロックする。 【０１９９】いくらかの化合物および化合物の基もま
た、本発明の重要な局面である。１つの好ましいサブク
ラスは、式ＶＩの化合物である： 【０２００】 【化４５】 【０２０１】ここで、Ｒ⁹は、水素結合および塩基対を
形成し得るヘテロ環ヌクレオシド塩基（例えば、Ａ、
Ｔ、Ｇ、ＣまたはＵ、またはその誘導体）を含むプリン
またはピリミジン塩基；Ｒ¹は、上記で定義されたとお
りであり、そして好ましくは−Ｈ、または１個から６個
の炭素原子を含有するアルキルモイエティー、さらに好
ましくは−ＣＨ ₃、最も好ましくは−Ｈであり；ｍは、
１から５の整数、好ましくは２であり；ｎは、１から
２，０００の整数であり；そしてＸは、結合、−Ｏ−、
−ＮＲ−、またはＯ＝Ｃ−Ｏ−である。 【０２０２】（有用性）本発明の個々のオリゴマーおよ
びオリゴマーの混合物は、通常の窒素ベースのオリゴマ
ー、タンパク質、ポリアミド、およびポリペプチド様オ
リゴマーの用途と同様の種々の用途に有用である。これ
らは、例えば、タンパク質（例えば、酵素、レセプタ
ー、抗体など）、核酸、炭水化物、脂質を含む種々のモ
イエティーへの結合において１つまたはそれ以上の特性
を有し得、さらに酵素と反応して生成物を形成し得る
か、または例えば、ワクチンまたはプローブを含む診断
用試薬のための抗原性化合物のような他の特性を有し得
る。本発明の液体オリゴマーはまた、溶媒、不凍液など
を含む機能性流体としての有用性を見い出し得る。本発
明の固体オリゴマーはまた、食品用添加物として、そし
て、商業的および研究的適用における診断用材料および
他の技術的材料用支持体としての有用性を見い出し得
る。上式のような化合物はまた、酵素阻害剤として、そ
してアフィニティークロマトグラフィーと関連して、用
いられ得る。 【０２０３】式ＶＩの化合物は、ＤＮＡおよびＲＮＡへ
の結合において有用であり、そして例えば、プローブと
しておよび／またはアンチセンス技術において用いられ
得る。有用なプローブは、式ＶＩの化合物を合成するこ
とによって製造され得る。ここで、Ｒ⁹は、ヌクレオシ
ド塩基であり、ｍは２であり、そしてさらに、この化合
物のモノマーユニットは、ポリマーと適切なＤＮＡまた
はＲＮＡ標的とのハイブリダイゼーションを起こさせる
ように設計され、予め決定された配列中に配置されたプ
リンまたはピリミジンヌクレオシド塩基を有する。 【０２０４】反応スキームＩによって製造される化合物
および化合物の混合物には、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、Ｉ
Ｖ、Ｖ、ＶＩ、およびＶＩＩに含まれる化合物およびそ
の混合物が包含される。これらの化合物またはこの混合
物は、上記で示すように、種々のレセプターに結合す
る。従って、このような化合物またはその混合物は、支
持体と結合して有用なアッセイデバイスを提供し得る。 【０２０５】式ＶＩの化合物はプローブとして用いられ
るので、ポリマーに適切な標識を結合することが好まし
い。適切な標識およびその結合の手段は、当業者に公知
であり、そして放射性、蛍光、および酵素標識などを包
含する。 【０２０６】式ＶＩのポリマーはまた、Ｒ⁹がプリンま
たはピリミジン塩基である場合、アンチセンス技術にお
いて用いられ得、そしてこのポリマーにおける塩基の配
列は、病原性であることが知られている特定のＤＮＡお
よびＲＮＡ分子にハイブリダイゼーションして、転写ま
たは翻訳を妨げるように設計される。アンチセンス技術
と関連して用いられる場合、Ｒ¹モイエティーは、細胞
および細胞の核への化合物の送達を提供するために脂質
モイエティーであり得る。 【０２０７】式ＶＩの化合物に関連する化合物は、本発
明の合成方法を用いることによって、Ｎｉｅｌｓｅｎ，
Ｐ．Ｅ．， Ｅｘｈｏｌｍ， Ｍ．， Ｂｅｒｇ，
Ｒ．Ｈ．らのＳｃｉｅｎｃｅ，２５４（１９９１）１４
９７に開示されているが、Ｒ ¹基は、種々の所望の性質
（例えば、脂質モイエティーとしてのＲ¹を用いる細胞
浸透性の改良）を有する式ＶＩの新規な化合物を得るた
めに変更され得る。「脂質モイエティー」は、長鎖脂肪
族炭化水素およびその誘導体を含有するモイエティーを
意味する。この鎖上の官能基（一般的に末端基）には、
カルボン酸、アルコール、アミン、アミノアルコール、
およびアルデヒドが含まれる。この用語はまた、ワック
ス、脂肪、および誘導した化合物を包含する。 【０２０８】さらに、Ｒ¹部分は、金属キレート剤、ヌ
クレアーゼなどに対する部位特異的結合ポイントとして
用いられ得る。 【０２０９】上記の合成された本発明のオリゴマーの混
合物は、たとえあったとすると、ＮＳＧが所与の生物学
的活性、例えば、公知のレセプターに結合する活性を有
することを決定するために、それらがスクリーニングさ
れ得ることにおいて有用である。このような混合物を用
いる方法は、１９９１年４月２３日に発行された米国特
許第５，０１０，１７５号に教示されており、これらは
本明細書中で参考として援用されている。 【０２１０】（診断および治療）本発明は、治療に効果
的な量の下式ＶＩの化合物をその中に分散して有する薬
学的に受容可能な賦形剤キャリアを含む薬学的処方物を
インビトロでまたはインビボで哺乳類（ヒト）細胞に投
与することを包含するアンチセンス治療の方法を包含す
る： 【０２１１】 【化４６】 【０２１２】全ての可変基は、上記定義通りである。 【０２１３】本発明はまた、効果的な量の本発明のオリ
ゴマーおよび生理学的に受容可能な賦形剤またはキャリ
アを含む診断または治療のための組成物を包含する。 【０２１４】ペプチドおよびポリアミドタイプの試薬と
用いるための生理学的に受容可能で、かつ薬学的に受容
可能な賦形剤およびキャリアは、当業者に周知である。 【０２１５】本明細書で用いられるような「生理学的ま
たは薬学的に受容可能なキャリア」によって、投与のた
めのいかなる実質的に無毒のキャリアをも意味する。オ
リゴマーが用いられるとき、そのキャリア中においては
オリゴマーは、安定で、かつ生物学的に利用可能なまま
である。例えば、このオリゴマーは、通常の手法で、液
体中に溶解され、媒体中に分散または乳化されて、液体
調製物を形成し得るか、または半固形物（ゲル）または
固体キャリアと混合して、ペースト、軟膏、クリーム、
ローションなどを形成する。 【０２１６】適切なキャリアには、水、石油ゼリー（ワ
セリン）、ペトロラタム、鉱油、植物油、動物油、有機
および無機ワックス（例えば、微結晶ワックス、パラフ
ィンワックス、および切ロウ）、天然ポリマー（例え
ば、キサンタン、ゼラチン、セルロース、またはアラビ
アゴム）、下記のような合成ポリマー、アルコール、ポ
リオール、水などが含まれる。好ましくは、無毒性のた
めに、キャリアは、実質的に水に混和可能な、水混和性
キャリア組成物である。このような水混和性キャリア組
成物には、上記の１種またはそれ以上の成分と共に製造
されるものが含まれ得るが、持続性または遅延性放出キ
ャリアもまた含まれ得る。これには、水含有組成物、水
に分散可能または水溶性組成物（例えば、リポソーム、
マイクロスポンジ、マイクロスフェア、またはマイクロ
カプセル、水ベースの軟膏、油中水型または水中油型エ
マルジョン、またはゲル）が含まれる。 【０２１７】本発明の１つの実施態様においては、キャ
リアは、持続性放出キャリアまたは遅延性放出キャリア
を包含する。このキャリアは、オリゴマーの放出を持続
または遅延し得るいかなる材料であり、より効率の良い
投与を提供する。その結果、タンパク質増殖因子の投与
回数および／または投与量の減少、操作の簡易性、およ
び延長または遅延効果のうちの１種またはそれ以上をも
たらす。オリゴマーの放出を得るために、キャリアは、
診断または治療のための環境領域に晒された場合、ある
いは、オリゴマーがキャリアに導入される度合に依存す
る拡散または放出によってオリゴマーを放出し得る。こ
のようなキャリアの限定されない例には、リポソーム、
マイクロスポンジ、マイクロスフェア、または天然およ
び合成ポリマーなどが方がされる。湿った環境における
持続性または遅延性放出のための適切なキャリアの例に
は、ゼラチン、アラビアゴム、キサンタンポリマーが包
含され；導入の度合によっては、リグニンポリマーなど
が包含され；油性、脂肪性、またはワックス性の環境下
では、熱可塑性または可撓性熱硬化樹脂またはエラスト
マー樹脂が包含される。熱可塑性樹脂には、例えば、ポ
リビニルハライド、ポリビニルエステル、ポリビニリデ
ンハライド、およびハロゲン化ポリオレフィン、エラス
トマーには、例えば、ブラシリエンシス（ｂｒａｓｉｌ
ｉｅｎｓｉｓ）、ポリジエン、およびハロゲン化天然お
よび合成ゴム、および可撓性熱硬化性樹脂には、例え
ば、ポリウレタン、エポキシ樹脂などが含まれる。 【０２１８】好ましくは、持続性または遅延性放出キャ
リアは、リポソーム、マイクロスポンジ、マイクロスフ
ェア、またはゲルである。 【０２１９】本発明の組成物は、任意の適切な手段（こ
れには、注射、経皮、眼内、経粘膜、ブカール（ｂｕｃ
ａｌ）、肺臓内、および経口が含まれる）によって投与
される。要求されなければ、非経口用組成物は、所望の
位置で約２４時間から４８時間オリゴマーを維持する；
このように、持続性放出処方物は用いられ得る。持続性
放出処方物は、注射可能、および注入可能な処方物を含
む。 【０２２０】所望であれば、１種またはそれ以上のさら
なる成分がキャリア中に組み合わされ得る：例えば、加
湿剤、ビタミン、乳化剤、分散剤、湿潤剤、臭気改良
剤、ゲル化剤、安定化剤、推進剤（ｐｒｏｐｅｌｌａｎ
ｔ）、抗菌剤、日焼け止め剤など。診断上の薬学的処方
物の当業者は、適切な特定のさらなる成分およびその量
を容易に選択し得る。さらなる成分の適切な限定されな
い例には、ステアリルアルコール、イソプロピルミリス
テート、ソルビタンモノオレエート、ポリオキシエチレ
ンステアレート、プロピレングリコール、水、アルカリ
金属またはアルカリ土類金属ラウリルスルフェート、メ
チルパラベン、オクチルジメチル−ｐ−アミノ安息香酸
（Ｐａｄｉｍａｔｅ Ｏ）、尿酸、レチクラン（ｒｅｔ
ｉｃｕｌａｎ）、ポリムコ多糖、ヒアルロン酸、真性ア
ロエ、レシチン、ポリオキシエチレンソルビタンモノオ
レエート、トコフェロール（ビタミンＥ）などが含まれ
る。 【０２２１】好ましくは、このキャリアは、注射用のｐ
Ｈ平衡緩衝水溶液である。しかし、好ましいキャリア
は、投与の様式によって変わる。 【０２２２】投与のための組成物は、通常組成物の全重
量に比して約０．０００１重量％から約９０重量％のオ
リゴマーを含有し、好ましくは全組成物に比して約０．
５重量％から約２０重量％のオリゴマーを含有し、そし
て特に、全組成物に比して約２重量％から約２０重量％
のオリゴマーを含有する。 【０２２３】治療または診断のために用いられるオリゴ
マーの効果的な量は、もちろん、１種またはそれ以上の
因子（例えば、用いられる特定のオリゴマー、患者の年
齢および体重、処方物およびキャリア成分のタイプ、使
用頻度、行われる治療または診断のタイプなど）に依存
して変えられ得る。これらの因子および本明細書を考慮
して、用いるための正確な量を決定することは、当業者
にとって簡単なことである。 【０２２４】 【実施例】以下の実施例は、本発明の合成を行う方法の
完全な開示および記載を当業者に提供するために示さ
れ、そして本発明者らが発明とみなす範囲を限定するこ
とを意味するものではない。用いられる数値（例えば、
量、温度など）に関する正確さを確実にするために努力
がなされてきたが、いくらかの実験誤差および偏差は斟
酌されなければならない。他に指示がない限り、部は重
量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂
氏であり、そして圧力は大気圧またはそれに近い。 【０２２５】オリゴマー合成は、自動合成機によって行
われた（Ｚｕｃｋｅｒｍａｎｎ，Ｒ． Ｎ．， Ｋｅｒ
ｒ， Ｊ．Ｍ．， Ｓｉａｎｉ，Ｍ．およびＢａｎｖｉ
ｌｌｅ， Ｓ．， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｅｐｔｉｄｅ
Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．（１９９２），第４０巻、４
９７−５０６頁）。この合成は、ジケトピペラジン形成
を妨げるために、Ｒｉｎｋアミドポリスチレン樹脂を用
いて行われた（Ｒｉｎｋ， Ｈ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄ
ｒｏｎ Ｌｅｔｔ．， ２８ ３７８７−３７９０（１
９８７））（５０μｍｏｌ， 置換レベル０．４５ｍｍ
ｏｌ／ｇ）。しかし、当業者に公知の種々の通常のペプ
チド合成樹脂が、ポリスチレンの代わりに用いられ得
る。 【０２２６】アシル化反応を、ＤＭＦ（０．８３ｍＬ）
中のブロモ酢酸（６００μｍｏｌ，８３ｍｇ）の添加、
次いでＤＭＦ（１７０μＬ）中のＮ，Ｎ’−ジイソプロ
ピルカルボジイミド活性化剤（６６０μｍｏｌ， １０
３μＬ）の添加によって行った。反応混合物を、室温で
３０分間撹拌した。置換工程に続く前に、各アシル化
を、１回繰り返した。 【０２２７】置換反応を、１級アミン（２．０ｍｍｏ
ｌ）をジメチルスルホキシド（１．０ｍＬ）の２．５Ｍ
溶液として添加し、次いで、室温で２時間撹拌すること
によって行った。置換反応の最適化を、０．２５Ｍから
２．５Ｍまでアミン濃度を変化させることによって行っ
た。 【０２２８】水（１０ｍＬ）中の９５％トリフルオロ酢
酸を用いて、オリゴマー樹脂を室温で２０分間処理する
ことによって得られたオリゴマーの脱保護／切り離しを
行い、次いで濾過および凍結乾燥した。 【０２２９】（実施例１〜８）サブモノマー法によっ
て、８種の代表的なペンタＮＳＧを、求核性に乏しく、
立体的に障害があり、そして側鎖が保護されたアミンを
含む種々のアミンから調製した。全ての化合物を、質量
分析による確定により、首尾よく合成し、その単離され
た粗生成物の収率は、５２％と９０％との間であり、そ
して、純度は、一般に、８５％より大きかった（ＨＰＬ
Ｃによる）。この５量体の純度、収率、および質量分析
データを得、以下の表Ｉに示す。 【０２３０】 【表１】 【０２３１】ペンタＮＳＧ合成の最適化を、クロロ、ブ
ロモ、およびヨード酢酸と、アニリンおよびシクロヘキ
シルアミンの両方との組合せを用いて行った。ブロモ酢
酸およびヨード酢酸は、ペンタ−（Ｎ−フェニルグリシ
ン）の形成において、クロロ酢酸より優れていることを
示した（それぞれ、収率７９％、８３％、および５％未
満）。全ての３つのハロアセチル化合物により、７５％
を越える収率で、ペンタ−（Ｎ−シクロヘキシルグリシ
ン）オリゴマーが得られた。しかし、アシル化反応に、
０．６Ｍ Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールを加える
と（Ｒｏｂｅｙ， Ｆ．Ａ．， Ｈａｒｒｉｓ， Ｔ．
Ａ．， Ｈｅｇａａｒｄ， Ｎ．Ｈ．Ｈ．， Ｎｇｕｙ
ｅｎ， Ａ．Ｋ．， Ｂａｔｉｎｉｃ， Ｄ． Ｃｈｉ
ｍｉｃａＯｇｇｉ ２７−３１（１９９２））、ペンタ
−（Ｎ−シクロヘキシルグリシン）ポリマーの収率は５
％未満であった。 【０２３２】さらなる最適化の研究においては、ｎ−ブ
チルアミン、シクロプロピルアミン、およびジフェニル
エチルアミンについて、１級アミンのモル濃度を、ブロ
モ酢酸を用いて、０．２５Ｍ（４．０当量）から２．５
Ｍ（４０当量）まで変化させた。１．０Ｍ以上のｎ−ブ
チルアミンおよびシクロプロピルアミン濃度、および
２．５Ｍ以上のジフェニルエチルアミン濃度を用いて、
５量体を、８０％を越える収率で得た。 【０２３３】（実施例９）２５量体、［（Ｎ−ｎ−ブチ
ルグリシン）₄（Ｎ−（３−アミノ−プロピル）グリシ
ン）］₅を、サブモノマー法によって合成し、それによ
って、より長いオリゴマーの調製のためのこの方法の有
用性を示した。分析的ＨＰＬＣを、Ｃ４逆相ＨＰＬＣカ
ラム（Ｖｙｄａｃ， ２５ｃｍ×４．６ｍｍ）およびグ
ラジエント溶出（溶媒Ａ： Ｈ₂Ｏ／０．１％ ＴＦＡ
および溶媒Ｂ： ＣＨ₃ＣＮ／０．１％ ＴＦＡ； ３
５分において１０％〜７５％ Ｂ）を用いてＲａｉｎｉ
ｎ ＨＰＸシステムコントローラーで行った。質量分析
によって、８６％収率および６５％純度（ＨＰＬＣ）で
得られたこの化合物の正体を確認した（ＭＨ＋ ＝ ２
８５０．９）。 【０２３４】本明細書において示されたように、自動的
な合成技術を用いた広範囲の種々のオリゴマー性ＮＳＧ
の効率の良い合成は、これらのポリマーを、多様なペプ
チド様ライブラリーの生成および迅速なスクリーニング
のための魅力的な候補にする。 【０２３５】（実施例１０）ジメチルホルムアミド（Ｄ
ＭＦ）および２００μｌのジイソプロピルカルボジイミ
ド中の樹脂結合アミンを、室温で３０分間、ＤＭＦ中の
０．６Ｍブロモ酢酸８００μｌで２回アシル化した。こ
のアシル化された樹脂結合アミンを、ＤＭＦ ２ｍＬで
３回洗浄した。 【０２３６】アシル化樹脂結合アミンを、表ＩＩの１級
アミン１ｍＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中１
〜２Ｍ溶液を用いて、室温で２時間処理した。上記の工
程を繰り返して、５量体を形成した。所望の５量体生成
物を、２ｍＬのＤＭＦで３回洗浄し、そして標準のアセ
トニトリルグラジエント（３０分間で０〜６０％）を用
いた逆相ＨＰＬＣを行って、８５％より高い純度で所望
の５量体を得た。 【０２３７】 【表２】 【０２３８】列挙された全てのアミン化合物は、他に注
意がない場合以外は、ＤＭＳＯに２Ｍ溶解した。チラミ
ンは、溶解するのが遅かったが、熱水浴中で穏やかに暖
めることにより、このプロセスの速度は速まった。フェ
ノール官能基を保護するための必要性はなかった。メチ
ルアミンは、かなり揮発性であったが、その水への高い
溶解性により、水溶液として用い得た（容器から希釈さ
れない）。アニリンは、最少の求核性アミンであった
が、２Ｍ濃度でなお作用した。 【０２３９】ＤＭＳＯ中に化合物を溶解し、次いで等モ
ルの水性ＨＣｌを加えることによって、塩酸塩を調製し
た。次いで、この塩沈澱物を、遠心分離によって除去
し、そしてこの上澄液をモレキュラーシーブで乾燥し
た。 【０２４０】Ｒｉｎｋアミドリンカーを有するペプトイ
ドオリゴマーを、以下のようにして切り離した：支持体
結合オリゴマー２５〜５０μｍｏｌを、室温で２０〜３
０分間、２〜４ｍＬの９５％トリフルオロ酢酸／５％水
と反応させ；等量の水で希釈し、凍結乾燥し、３〜６ｍ
Ｌの氷酢酸に再溶解し、そして再凍結乾燥した。このオ
リゴマーは、通常、オイルよりむしろ粉末であった。 【０２４１】（実施例１１）表ＩＶおよびＶに記載の化
合物を、式ＶＩＩＩで表される５量体として合成した： 【０２４２】 【化４７】 【０２４３】ここで、Ｒ＝表ＩＶおよびＶに挙げられた
側鎖。全てのオリゴマーを、逆相ＨＰＬＣで分析し、そ
してＬＳＩＭＳ質量分析によって特徴付けた。 【０２４４】全ての化合物を、上記の固相サブモノマー
法（上記の修飾を含む）によって合成した。 【０２４５】 【表３】 【０２４６】 【表４】【０２４７】（実施例１２）本発明の方法を使用し、−
ＮＨ₂によって置換される第２のサブモノマーとしてア
ルコキシアミンを用いて、Ｂｎ−Ｘ−Ｂｎ−Ｘ−Ｂｎ形
式（ここで、ＢｎはＮ−ベンジルグリシンである）の５
量体を合成した。このアルコキシアミンがメトキシアミ
ンである場合には、この収率は７６％であり、そしてＨ
ＰＬＣによる純度は９０％であった。フェニルメトキシ
アミンがアルコキシアミンとして用いられる場合には、
この収率は５６％であり、そしてＨＰＬＣによる純度は
５０％であった。 【０２４８】 【表５】 【０２４９】（実施例１３） α₁ アドレナリン作動性レセプターのためのリガンド
の合成 Ａ．化合物の一般的な合成 オリゴマー合成を、Ｒｉｎｋアミドポリスチレン樹脂
（０．６１ｍｍｏｌ／ｇ， １％架橋、１００〜２００
メッシュ）で行った。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、塩化
メチレン、氷酢酸、およびトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）
を、市販の供給者から得、そしてさらに精製せずに用い
た。ピペリジン、ブロモ酢酸、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル
カルボジイミド（ＤＩＣ）、フェネチルアミン、４−ア
ミノビフェニル、チラミン、および他の試薬を、Ａｌｄ
ｒｉｃｈから得、そしてさらに精製せずに用いた。 【０２５０】全ての反応を、１０ｃｍの粗いガラスフリ
ットを備えた２．０Ｌ容器において、室温で行った。樹
脂−試薬スラリーの撹拌を、各工程で２００ｒｐｍで回
転振盪することによって行った。樹脂−試薬スラリーの
濾過を、真空の適用によって達成した。 【０２５１】２．０Ｌ容器にＲｉｎｋアミド樹脂（１０
０ｇ， ０．０６１ｍｏｌ）を入れた。この樹脂を、穏
やかな撹拌によってＤＭＦ（１．５Ｌ）中で一時的に膨
張させ、そして排出させた。次いで、９−フルオレニル
メトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基を、２０％ピペリジ
ン／ＤＭＦ（１．７Ｌ， １×５分、次いで１×２０
分）で処理することによって、除去した。次いで、この
樹脂を、ＤＭＦ（６×１．７Ｌ）で洗浄した。この化合
物の残りを、ブロモ酢酸によるアシル化およびアミンに
よる置換のサイクルを３回行うことによって、合成し
た。一般的なアシル化条件（０．０６１ｍｏｌ樹脂）：
樹脂結合アミンを、インサイチュで、ＤＩＣを用いた活
性化によってブロモアセチル化した。オリゴマー樹脂
に、ブロモ酢酸（０．６７Ｍ， ９００ｍＬ）のＤＭＦ
溶液、次いでＤＩＣ（ニート、９３ｍＬ， ０．６０ｍ
ｏｌ）を加えた。この反応混合物を、室温で３０分間撹
拌した。この混合物を排出し、そしてこの反応を１回繰
り返した。樹脂をＤＭＦ（３×１．７Ｌ）で洗浄した。 一般的な置換条件（０．６１ｍｏｌ）：樹脂結合ブロモ
アセタミドを、アミンをＤＭＳＯ溶液（１〜２Ｍ，
１．０Ｌ）として加えることによって置換した。この反
応混合物を、室温で２時間撹拌した。この反応混合物を
排出し、そしてこの樹脂をＤＭＦ（３×１．７Ｌ）で洗
浄した。チラミンおよびフェネチルヒドラジンを１．０
Ｍで用いながら、フェネチルアミンおよび４−アミノビ
フェニルを２．０Ｍ濃度で用いた。 一般的な切り離しおよび精製：合成完了後、樹脂をＣＨ
₂Ｃｌ₂（３×１．７Ｌ）で洗浄し、そして５分間風乾し
た。完全長の３量体を、室温で１５分間、９５％ ＴＦ
Ａ／５％水（１．５Ｌ）で処理することによって、樹脂
（０．０６１ｍｏｌ）から切り離した。次いで、この樹
脂を、９５％ ＴＦＡ／５％水（１×１．０Ｌ）および
ＣＨ₂Ｃｌ₂（１×１Ｌ）で洗浄した。濾液をプールし、
そして溶媒をロータリーエバポレーションによって除去
した。残渣を、氷酢酸（１５０ｍＬ）で溶解し、そして
凍結乾燥した。 【０２５２】（実施例１４） Ｎｈｔｙｒ−Ｎｂｉｐｈ−Ｎｈｐｈｅの合成 化合物Ｎｈｔｙｒ−Ｎｂｉｐｈ−Ｎｈｐｈｅを、添加す
る第１のアミンとしてフェネチルアミン、添加する第２
のアミンとして４−アミノビフェニル、そして添加する
第３のアミンとして４−ヒドロキシフェネチルアミンを
用いて、上記の実施例１８に記載のようにして、合成し
た。 【０２５３】合成完了後、樹脂を、ＣＨ₂Ｃｌ₂（３×
１．７Ｌ）で洗浄し、そして５分間風乾した。完全長の
３量体を、室温で１５分間、９５％ ＴＦＡ／５％水
（１．５Ｌ）で処理することによって、樹脂（０．０６
１ｍｏｌ）から切り離した。次いで、この樹脂を、９５
％ ＴＦＡ／５％水（１×１．０Ｌ）およびＣＨ₂Ｃｌ₂
（１×１Ｌ）で洗浄した。濾液をプールし、そして溶媒
をロータリーエバポレーションによって除去した。残渣
を、氷酢酸（１５０ｍＬ）に溶解し、そして凍結乾燥し
て、淡黄色粉末を得た（１．７ｇ， 収率８２％）。粗
生成物の純度が９０％であることを逆相ＨＰＬＣによっ
て決定した。この生成物をＦＡＢ質量分析した（ＭＨ⁺
＝ ５６５）。 【０２５４】（実施例１５） Ｎｈｔｙｒ−Ｎｐｏｐ−Ｎｈｐｈｅの合成 化合物Ｎｈｔｙｒ−Ｎｐｏｐ−Ｎｈｐｈｅを、添加する
第１のアミンとしてフェネチルアミン、添加する第２の
アミンとして４−アミノ−１−フェノキシベンゼン、そ
して添加する第３のアミンとして４−ヒドロキシフェネ
チルアミンを用いて、上記の実施例１８に記載のように
して、合成した。 【０２５５】（実施例１６） バックボーン可変基の合成 いくつかの段階で、ブロモ酢酸の代わりに３−ブロモプ
ロパン酸および２−ブロモプロパン酸を用いたこと以外
は、上記の実施例１８に記載のようにして、以下の化合
物を調製した： 【０２５６】 【化４８】 【０２５７】（実施例１７） さらなる化合物の合成 チラミンの代わりに、フェネチルアミン、フェネチルヒ
ドラジン、および３，４−メチレンジオキシフェネチル
アミンを用いたこと以外は、上記の実施例１８に記載の
ようにして、化合物Ｎｈｐｈｅ−Ｎｂｉｐｈ−Ｎｈｐｈ
ｅ、Ｎｚｈｐｈｅ−Ｎｂｉｐｈ−Ｎｈｐｈｅ、およびＮ
ｏｃｏ−Ｎｂｉｐｈ−Ｎｈｐｈｅを調製した。化合物Ｎ
ｈｐｈｅ−Ｎｂｉｐｈ−Ｎｈｐｈｅを、さらにＮ−ベン
ジル化して、Ｂｚ−Ｎｈｐｈｅ−Ｎｂｉｐｈ−Ｎｈｐｈ
ｅを製造した。 【０２５８】（実施例１８）フェネチルアミンの代わり
に、３−トリフルオロメチルフェネチルアミン、２−ク
ロロフェネチルアミン、３−クロロフェネチルアミン、
４−クロロフェネチルアミン、２，４−ジクロロフェネ
チルアミン、３−ブロモフェネチルアミン、４−ヨード
フェネチルアミン、３−ヒドロキシフェネチルアミン、
４−ヒドロキシフェネチルアミン、２，４−ジヒドロキ
シフェネチルアミン、２−メチルフェネチルアミン、３
−メチルフェネチルアミン、４−メチルフェネチルアミ
ン、２，４−ジメチルフェネチルアミン、２，４，６−
トリメチルフェネチルアミン、３−エチルフェネチルア
ミン、４−エチルフェネチルアミン、４−ヘキシルフェ
ネチルアミン、３−ニトロフェネチルアミン、２−アミ
ノフェネチルアミン、４−アミノフェネチルアミン、
２，４−ジアミノフェネチルアミン、２−メトキシフェ
ネチルアミン、３−メトキシフェネチルアミン、４−メ
トキシフェネチルアミン、２，４−ジメトキシフェネチ
ルアミン、２，４，６−トリメトキシフェネチルアミ
ン、３，４−ジメトキシフェネチルアミン、２−エトキ
シフェネチルアミン、３−エトキシフェネチルアミン、
４−エトキシフェネチルアミン、３−プロポキシフェネ
チルアミン、４−ブトキシフェネチルアミン、４−ｔ−
ブトキシフェネチルアミン、３−メトキシメチルフェネ
チルアミン、４−メトキシメチルフェネチルアミン、３
−（２−メトキシエチル）フェネチルアミン、４−（２
−メトキシエチル）フェネチルアミン、４−（２−ヒド
ロキシエチル）フェネチルアミン、４−（３−ヒドロキ
シプロピル）フェネチルアミン、４−（２−ヒドロキシ
エトキシ）フェネチルアミン、４−フェニルフェネチル
アミン、４−（２−クロロフェニル）フェネチルアミ
ン、４−（２−アミノフェニル）フェネチルアミン、３
−（２，４，６−トリメチルフェニル）フェネチルアミ
ン、４−フェノキシフェネチルアミン、４−（３−クロ
ロフェノキシ）フェネチルアミン、４−（４−アミノフ
ェノキシ）フェネチルアミン、３−ベンジルフェネチル
アミン、４−フェネチルフェネチルアミン、３−アセチ
ルフェネチルアミン、４−アセチルフェネチルアミン、
４−（２−フェノキシエチル）フェネチルアミン、およ
び３−ベンジルオキシフェネチルアミンを用い、そして
／または、４−アミノビフェニルの代わりに、３’−ト
リフルオロメチル−４−アミノビフェニル、２’−クロ
ロ−４−アミノビフェニル、３−クロロ−４−アミノビ
フェニル、４’−クロロ−４−アミノビフェニル、
２’，４’−ジクロロ−４−アミノビフェニル、３−ブ
ロモ−４−アミノビフェニル、４’−ヨード−４−アミ
ノビフェニル、３’−ヒドロキシ−４−アミノビフェニ
ル、４’−ヒドロキシ−４−アミノビフェニル、２’，
４’−ジヒドロキシ−４−アミノビフェニル、２’−メ
チル−４−アミノビフェニル、３’−メチル−４−アミ
ノビフェニル、４’−メチル−４−アミノビフェニル、
２’，４’−ジメチル−４−アミノビフェニル、２’，
４’，６’−トリメチル−４−アミノビフェニル、
２’，３， ４’，５，６’−ペンタメチル−４−アミ
ノビフェニル、３’−エチル−４−アミノビフェニル、
４’−エチル−４−アミノビフェニル、４’−ヘキシル
−４−アミノビフェニル、３’−ニトロ−４−アミノビ
フェニル、２’−アミノ−４−アミノビフェニル、４’
−アミノ−４−アミノビフェニル、２’，４’−ジアミ
ノ−４−アミノビフェニル、２’−メトキシ−４−アミ
ノビフェニル、３’−メトキシ−４−アミノビフェニ
ル、４’−メトキシ−４−アミノビフェニル、２’，
４’−ジメトキシ−４−アミノビフェニル、２’，
４’，６’−トリメトキシ−４−アミノビフェニル、
３’，４’−ジメトキシ−４−アミノビフェニル、２’
−エトキシ−４−アミノビフェニル、３’−エトキシ−
４−アミノビフェニル、４’−エトキシ−４−アミノビ
フェニル、３’−プロポキシ−４−アミノビフェニル、
４’−ブトキシ−４−アミノビフェニル、４’−ｔ−ブ
トキシ−４−アミノビフェニル、３’−メトキシメチル
−４−アミノビフェニル、４’−メトキシメチル−４−
アミノビフェニル、３’−メトキシエチル−４−アミノ
ビフェニル、４’−メトキシエチル−４−アミノビフェ
ニル、４’−ヒドロキシエチル−４−アミノビフェニ
ル、４’−ヒドロキシプロピル−４−アミノビフェニ
ル、４’−ヒドロキシエトキシ−４−アミノビフェニ
ル、４’−フェニル−４−アミノビフェニル、４’−
（２−クロロフェニル）−４−アミノビフェニル、４’
−（２−アミノフェニル）−４−アミノビフェニル、
３’−（２，４，６−トリメチルフェニル）−４−アミ
ノビフェニル、４’−フェノキシ−４−アミノビフェニ
ル、４’−（３−クロロフェノキシ）−４−アミノビフ
ェニル、４’−（４−アミノフェノキシ）−４−アミノ
ビフェニル、３’−ベンジル−４−アミノビフェニル、
４’−フェネチル−４−アミノビフェニル、３’−アセ
チル−４−アミノビフェニル、４’−アセチル−４−ア
ミノビフェニル、４’−（２−フェノキシエチル）−４
−アミノビフェニル、および３’−ベンジルオキシ−４
−アミノビフェニルを用い、そして／または、４−ヒド
ロキシフェネチルアミンの代わりに、フェネチルアミ
ン、３−トリフルオロメチルフェネチルアミン、２−ク
ロロフェネチルアミン、３−クロロフェネチルアミン、
４−クロロフェネチルアミン、２，６−ジクロロフェネ
チルアミン、３−ブロモフェネチルアミン、４−フルオ
ロフェネチルアミン、３−ヒドロキシフェネチルアミ
ン、２，５−ジヒドロキシフェネチルアミン、２−メチ
ルフェネチルアミン、３−メチルフェネチルアミン、４
−メチルフェネチルアミン、２，４−ジメチルフェネチ
ルアミン、２，４，６−トリメチルフェネチルアミン、
３−エチルフェネチルアミン、４−エチルフェネチルア
ミン、４−ヘキシルフェネチルアミン、３−ニトロフェ
ネチルアミン、２−アミノフェネチルアミン、４−アミ
ノフェネチルアミン、２，４−ジアミノフェネチルアミ
ン、２−メトキシフェネチルアミン、２，５−ジメトキ
シフェネチルアミン、２，３−ジメトキシフェネチルア
ミン、３，５−ジメトキシフェネチルアミン、３，４，
５−トリメトキシフェネチルアミン、３−メトキシフェ
ネチルアミン、４−メトキシフェネチルアミン、２，４
−ジメトキシフェネチルアミン、２，４，６−トリメト
キシフェネチルアミン、３，４−ジメトキシフェネチル
アミン、２−エトキシフェネチルアミン、３−エトキシ
フェネチルアミン、４−エトキシフェネチルアミン、３
−プロポキシフェネチルアミン、４−ブトキシフェネチ
ルアミン、４−ｔ−ブトキシフェネチルアミン、３−メ
トキシメチルフェネチルアミン、４−メトキシメチルフ
ェネチルアミン、３−メトキシエチルフェネチルアミ
ン、４−メトキシエチルフェネチルアミン、４−ヒドロ
キシエチルフェネチルアミン、４−ヒドロキシプロピル
フェネチルアミン、４−ヒドロキシエトキシフェネチル
アミン、４−フェニルフェネチルアミン、４−（２−ク
ロロフェニル）フェネチルアミン、４−（２−アミノフ
ェニル）フェネチルアミン、３−（２，４，６−トリメ
チルフェニル）フェネチルアミン、４−フェノキシフェ
ネチルアミン、４−（３−クロロフェノキシ）フェネチ
ルアミン、３，４−メチレンジオキシフェネチルアミ
ン、６−メトキシ−３，４−メチレンジオキシフェネチ
ルアミン、２−メトキシ−３，４−メチレンジオキシフ
ェネチルアミン、４，５−メチレンジオキシフェネチル
アミン、３−メトキシ−４，５−メチレンジオキシフェ
ネチルアミン、４−（４−アミノフェノキシ）フェネチ
ルアミン、３−ベンジルフェネチルアミン、４−フェネ
チルフェネチルアミン、３−アセチルフェネチルアミ
ン、４−アセチルフェネチルアミン、４−（２−フェノ
キシエチル）フェネチルアミン、および３−ベンジルオ
キシフェネチルアミンを用いたこと以外は、上記の実施
例１８および２２に記載のようにして、対応の化合物を
調製する。 【０２５９】本発明は、最も実用的で、かつ好ましい実
施態様であるとみなされるものを、本明細書において、
示し、そして記載している。しかし、出発物質が本発明
の範囲内のものから製造され得ること、およびこの開示
を読むことによって、明らかな改変が当業者によってな
されることが、理解される。 【０２６０】Ｎ−置換オリゴマーの合成のための固相
法、例えば（Ｎ−置換グリシン）（本明細書では、ポリ
ＮＳＧという）がオリゴマーを得るために用いられる
（例えば、潜在的な治療上の目的物のポリＮＳＧ。ここ
で、ポリＮＳＧは、広範囲の種類の側鎖置換基を有し得
る）。各Ｎ−置換グリシンモノマーは、固体支持体上で
直接２つの「サブモノマー」から作られる。モノマー付
加の各サイクルは、２つの工程からなる：（１）−ＮＨ
₂によって求核置換し得る脱離基を含むアシル化剤（例
えば、ハロ酢酸）で、該支持体に結合する２級アミンを
アシル化する工程；および（２）十分な量の −ＮＨ₂
基を含む第２のサブモノマー（例えば、１級アミン、ア
ルコキシアミン、セミカルバジド、アシルヒドラジド、
カルバゼートなど）による、脱離基（例えば、ハロゲン
（樹脂−結合α−ハロアセトアミドなど））の求核置換
によって側鎖を導入する工程。アシル化および置換の２
工程サイクルの繰り返しによって、所望のオリゴマーが
得られる。本方法の自動合成技術を用いた広範囲の種類
のオリゴマー性のＮＳＧの効率の良い合成によって、こ
れらのオリゴマーは、異なるペプチド様の（ｐｅｐｔｉ
ｄｏｍｉｍｅｔｉｃ）ライブラリーの生成および迅速な
スクリーニングにとって魅力的な候補となる。本発明の
オリゴマー（例えば、本明細書で開示されているＮ−置
換グリシン（すなわち、ポリＮＳＧ））は、天然では見
い出されないが、これは合成で入手可能であり、そして
著しい生物活性およびタンパク質分解による安定性を有
することが知られている、ペプチド様化合物の新しいク
ラスを提供する。 【０２６１】 【発明の効果】本発明によって、固体基体支持体上で直
接ポリ（Ｎ−置換アミド）を合成する方法を提供するこ
とができる。 【０２６２】さらに本発明によって、Ｎ−置換グリシン
のようなＮ−置換オリゴマー（このオリゴマーは、広範
囲の種類の側鎖置換基を有し得る）を合成するための固
相法を提供することができる。 【０２６３】本発明の利点は、この方法が、固相法を用
いた以前の通常の合成より効率良く行われ得るというこ
とである。 【０２６４】本発明の他の利点は、本明細書で、ポリＮ
−置換アミドという特定のタイプのオリゴマー、特にポ
リ（Ｎ−置換グリシン）を合成するための、自動で、か
つ高効率の固相法が開示され、この方法がＮ，α−保護
モノマーを必要としないということである。 【０２６５】本発明の特徴は、合成の間、反応性の側鎖
基のみが保護されているかまたはブロックされているこ
とが必要であることである。 【０２６６】本発明のさらに他の利点は、モノマー（お
よびオリゴマー）の各サブモノマーが、迅速でそして効
率の良い合成をし得る単純な構造を有していることであ
る。 【０２６７】本発明の他の特徴は、本発明に関連して用
いられる多くのサブモノマー成分が市販されていること
である。

【図面の簡単な説明】 【図１】４つの分離プールのＩＣ５０値（および相対的
な結合親和性）を測定するために用いられた競合的結合
アッセイの結果を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ジャニス エム． カー アメリカ合衆国 カリフォルニア 94602, オークランド， グリーンウッド アベニ ュー 3863エイ (72)発明者 スティーブン ブライアン ヘンリー， ケント アメリカ合衆国 カリフォルニア 92037, ラ ホヤ， コステベル ドライブ 2766 (72)発明者 ウォルター エイチ． ムース アメリカ合衆国 カリフォルニア 94608, エミリービル，ホートン ストリート 4560 (72)発明者 レイナ ジェイ． サイモン アメリカ合衆国 カリフォルニア 94608, エミリービル，ホートン ストリート 4560 (72)発明者 デーン エイ． ゴフ アメリカ合衆国 カリフォルニア 94608, エミリービル，ホートン ストリート 4560 Ｆターム(参考） 4H006 AA02 AB10 AB80 AB84 AC52 AC53 AC80 BJ50 BP10 BU38 BV72

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 【請求項１】 ポリ（Ｎ−置換アミド）を合成する方法
   であって、第２のアミンによって求核置換し得る脱離基
   を含む第１のサブモノマーアシル化剤で、基体に結合し
   ている第１のアミンをアシル化して、該アシル化剤およ
   び該基体結合アミンが、該基体に結合された該第１のア
   ミンをアシル化するのに有効な条件下、反応させられ、
   それによって、アシル化アミンを得る工程、ここで該ア
   シル化アミンは該第２のアミンによる求核置換用の脱離
   基をその上に有し、そして該基体に結合している；およ
   び該アシル化アミンを、アシル化工程の間に付加された
   該脱離基の該第２のアミンとの求核置換を行い、それに
   よってポリ（Ｎ−置換アミド）ポリマーの要素を形成す
   るように、十分な量の、該第２のアミンを含む第２のサ
   ブモノマー置換剤と反応させる工程、ここで該第２のサ
   ブモノマーが、アルコキシアミン、セミカルバジド、ア
   シルヒドラジド、またはカルバゼートである；を包含す
   る方法。