JPH10179733A - 高脂血症治療用吸着材 - Google Patents
高脂血症治療用吸着材Info
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- JPH10179733A JPH10179733A JP8354650A JP35465096A JPH10179733A JP H10179733 A JPH10179733 A JP H10179733A JP 8354650 A JP8354650 A JP 8354650A JP 35465096 A JP35465096 A JP 35465096A JP H10179733 A JPH10179733 A JP H10179733A
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- peptide
- amino acid
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Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 ５〜１０個のアミノ酸残基からなるペプ
チドであって、少なくとも１つのＰｈｅおよび少なくと
も１つのＡｒｇまたはＬｙｓを含むアミノ酸配列を有
し、かつ、特定の電荷を有し、さらに、該ペプチドはそ
のアミノ酸配列中に、特定されたアミノ酸配列を少なく
とも１つ有するペプチドで、これが結合した水不溶性担
体からなる高脂血症治療用吸着材。 【効果】 優れた低比重リポ蛋白質選択吸着性を有し、
それでいて、ブラジキニンの産生、血液細胞の活性化や
ペプチドへの吸着、血液凝固系の活性化等を惹起しない
ため、全血や血漿等の体液から低比重リポ蛋白質を除去
するための吸着材として有利に用いることができる。さ
らに、吸着材に結合しているペプチドは、１０個以下の
アミノ酸残基からなるため、比較的容易に、しかも、低
コストで作製することができるだけでなく、滅菌操作等
に対する安定性や、保存性に優れている。
チドであって、少なくとも１つのＰｈｅおよび少なくと
も１つのＡｒｇまたはＬｙｓを含むアミノ酸配列を有
し、かつ、特定の電荷を有し、さらに、該ペプチドはそ
のアミノ酸配列中に、特定されたアミノ酸配列を少なく
とも１つ有するペプチドで、これが結合した水不溶性担
体からなる高脂血症治療用吸着材。 【効果】 優れた低比重リポ蛋白質選択吸着性を有し、
それでいて、ブラジキニンの産生、血液細胞の活性化や
ペプチドへの吸着、血液凝固系の活性化等を惹起しない
ため、全血や血漿等の体液から低比重リポ蛋白質を除去
するための吸着材として有利に用いることができる。さ
らに、吸着材に結合しているペプチドは、１０個以下の
アミノ酸残基からなるため、比較的容易に、しかも、低
コストで作製することができるだけでなく、滅菌操作等
に対する安定性や、保存性に優れている。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、低比重リポ蛋白質
（以下、しばしば、”ＬＤＬ”と称す）結合用ペプチド
を水不溶性担体に結合させてなる高脂血症治療用吸着材
に関する。
（以下、しばしば、”ＬＤＬ”と称す）結合用ペプチド
を水不溶性担体に結合させてなる高脂血症治療用吸着材
に関する。
【０００２】
【従来の技術】血液中に存在するリポ蛋白のうち、ＬＤ
Ｌはコレステロールを多く含み、動脈硬化の原因になる
ことが知られている。従来、血液中のＬＤＬの量が多い
家族性高コレステロール血症患者において、ＬＤＬを吸
着する吸着材を用いた血液体外循環治療（以下、しばし
ば、ＬＤＬアフェレーシスと称す）が施され、患者の種
々の症状が改善されてきた。ＬＤＬ除去用の吸着材とし
ては、例えば、ＥＰ特許第０ ２２５ ８６７号公報
に、陰性の電荷を有する硫酸化多糖をリガンドとして化
学的に固定化させた樹脂が開示され、実際に、デキスト
ラン硫酸をリガンドとしてセルロース粒子担体に固定化
したものが市販されている。
Ｌはコレステロールを多く含み、動脈硬化の原因になる
ことが知られている。従来、血液中のＬＤＬの量が多い
家族性高コレステロール血症患者において、ＬＤＬを吸
着する吸着材を用いた血液体外循環治療（以下、しばし
ば、ＬＤＬアフェレーシスと称す）が施され、患者の種
々の症状が改善されてきた。ＬＤＬ除去用の吸着材とし
ては、例えば、ＥＰ特許第０ ２２５ ８６７号公報
に、陰性の電荷を有する硫酸化多糖をリガンドとして化
学的に固定化させた樹脂が開示され、実際に、デキスト
ラン硫酸をリガンドとしてセルロース粒子担体に固定化
したものが市販されている。
【０００３】しかし、デキストラン硫酸をリガンドとし
たＬＤＬ吸着材を用いてＬＤＬアフェレーシスを行う
と、デキストラン硫酸が持つ陰性電荷の影響により、血
液中にブラジキニンと呼ばれる生理活性物質が産生され
易い。ブラジキニンは血圧降下作用、平滑筋収縮作用お
よび膜透過性亢進作用等を有する物質であることが知ら
れている。（例えば、ＥＰ特許出願公開第９３ １０４
３４８．３号公報を参照）。また、例えば、ＷＯ９０
／０４４１６号公報には、アガロース粒子にヒト低比重
リポ蛋白質と結合性を持つ抗体を結合させたものが開示
されている。
たＬＤＬ吸着材を用いてＬＤＬアフェレーシスを行う
と、デキストラン硫酸が持つ陰性電荷の影響により、血
液中にブラジキニンと呼ばれる生理活性物質が産生され
易い。ブラジキニンは血圧降下作用、平滑筋収縮作用お
よび膜透過性亢進作用等を有する物質であることが知ら
れている。（例えば、ＥＰ特許出願公開第９３ １０４
３４８．３号公報を参照）。また、例えば、ＷＯ９０
／０４４１６号公報には、アガロース粒子にヒト低比重
リポ蛋白質と結合性を持つ抗体を結合させたものが開示
されている。
【０００４】しかし、抗体は、一般的に細胞培養や生物
体内で産生されるために、ＬＤＬが関与している疾患に
対する治療に用いるのに十分な量を調製するためには、
多大な労力と生産コストがかかるばかりでなく、体外循
環治療に用いるには、滅菌操作等に対する安定性が低
い。また、一般に、ＬＤＬアフェレーシス治療において
は、特に高比重リポ蛋白質（以下、しばしば、”ＨＤ
Ｌ”と称す）の吸着除去を行わずに、ＬＤＬを選択的に
吸着除去することが望まれている。したがって、全血お
よび血漿等の体液からのＬＤＬの吸着除去を行う際に、
優れたＬＤＬ選択吸着性を示すだけでなく、ブラジキニ
ンの産生を惹起しない等、安全性に優れたＬＤＬ除去用
吸着材の開発が望まれていた。
体内で産生されるために、ＬＤＬが関与している疾患に
対する治療に用いるのに十分な量を調製するためには、
多大な労力と生産コストがかかるばかりでなく、体外循
環治療に用いるには、滅菌操作等に対する安定性が低
い。また、一般に、ＬＤＬアフェレーシス治療において
は、特に高比重リポ蛋白質（以下、しばしば、”ＨＤ
Ｌ”と称す）の吸着除去を行わずに、ＬＤＬを選択的に
吸着除去することが望まれている。したがって、全血お
よび血漿等の体液からのＬＤＬの吸着除去を行う際に、
優れたＬＤＬ選択吸着性を示すだけでなく、ブラジキニ
ンの産生を惹起しない等、安全性に優れたＬＤＬ除去用
吸着材の開発が望まれていた。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明の１つの目的
は、優れたＬＤＬ選択吸着性を有し、それでいて、ブラ
ジキニンの産生を惹起しないために安全性に優れてお
り、全血や血漿等の体液からＬＤＬを除去するための高
脂血症治療用吸着材を提供することにある。本発明のさ
らに他の１つの目的は、上記の優れた特性を有し、さら
に、比較的容易に、しかも、低コストで作製することが
できるだけでなく、滅菌操作等に対する安定性や保存性
に優れたＬＤＬ結合用ペプチドを、水不溶性担体に結合
させてなるＬＤＬ除去用吸着材であって、ＬＤＬアフェ
レーシスに用いる血液浄化処理装置等に用いると、効率
よく、しかも、安全にＬＤＬの除去を行うことができる
高脂血症治療用吸着材を提供することにある。本発明の
さらに他の１つの目的は、体液を上記の高脂血症治療用
吸着材と接触させることにより、効率よく、しかも、安
全に体液からＬＤＬを除去する方法を提供することにあ
る。
は、優れたＬＤＬ選択吸着性を有し、それでいて、ブラ
ジキニンの産生を惹起しないために安全性に優れてお
り、全血や血漿等の体液からＬＤＬを除去するための高
脂血症治療用吸着材を提供することにある。本発明のさ
らに他の１つの目的は、上記の優れた特性を有し、さら
に、比較的容易に、しかも、低コストで作製することが
できるだけでなく、滅菌操作等に対する安定性や保存性
に優れたＬＤＬ結合用ペプチドを、水不溶性担体に結合
させてなるＬＤＬ除去用吸着材であって、ＬＤＬアフェ
レーシスに用いる血液浄化処理装置等に用いると、効率
よく、しかも、安全にＬＤＬの除去を行うことができる
高脂血症治療用吸着材を提供することにある。本発明の
さらに他の１つの目的は、体液を上記の高脂血症治療用
吸着材と接触させることにより、効率よく、しかも、安
全に体液からＬＤＬを除去する方法を提供することにあ
る。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本明細書において、アミ
ノ酸およびペプチドは、下記に示すＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ
生化学命名委員会（ＣＢＮ）で採用された略号を用いて
表される。なお、アミノ酸等に関し特に記載のない場合
は、Ｌ体もしくはＤ体のいずれかの立体構造をとるアミ
ノ酸残基を示すものとする。さらに、特に明示しない限
りペプチドのアミノ酸配列の左端および右端は、それぞ
れＮ末端およびＣ末端である。ＡまたはＡｌａ：アラニ
ン残基、 ＤまたはＡｓｐ：アスパラギン酸残基、Ｅ
またはＧｌｕ：グルタミン酸残基、ＦまたはＰｈｅ：フ
ェニルアラニン残基、ＧまたはＧｌｙ：グリシン残基、
ＨまたはＨｉｓ：ヒスチジン残基、ＩまたはＩｌ
ｅ：イソロイシン残基、ＫまたはＬｙｓ：リジン残基、
ＬまたはＬｅｕ：ロイシン残基、 ＭまたはＭｅｔ：
メチオニン残基、ＮまたはＡｓｎ：アスパラギン残基、
ＰまたはＰｒｏ：プロリン残基、ＱまたはＧｌｎ：グル
タミン残基、 ＲまたはＡｒｇ：アルギニン残基、Ｓま
たはＳｅｒ：セリン残基、 ＴまたはＴｈｒ：スレ
オニン残基、ＶまたはＶａｌ：バリン残基、 Ｗま
たはＴｒｐ：トリプトファン残基、ＹまたはＴｙｒ：チ
ロシン残基、 ＣまたはＣｙｓ：システイン残基
ノ酸およびペプチドは、下記に示すＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ
生化学命名委員会（ＣＢＮ）で採用された略号を用いて
表される。なお、アミノ酸等に関し特に記載のない場合
は、Ｌ体もしくはＤ体のいずれかの立体構造をとるアミ
ノ酸残基を示すものとする。さらに、特に明示しない限
りペプチドのアミノ酸配列の左端および右端は、それぞ
れＮ末端およびＣ末端である。ＡまたはＡｌａ：アラニ
ン残基、 ＤまたはＡｓｐ：アスパラギン酸残基、Ｅ
またはＧｌｕ：グルタミン酸残基、ＦまたはＰｈｅ：フ
ェニルアラニン残基、ＧまたはＧｌｙ：グリシン残基、
ＨまたはＨｉｓ：ヒスチジン残基、ＩまたはＩｌ
ｅ：イソロイシン残基、ＫまたはＬｙｓ：リジン残基、
ＬまたはＬｅｕ：ロイシン残基、 ＭまたはＭｅｔ：
メチオニン残基、ＮまたはＡｓｎ：アスパラギン残基、
ＰまたはＰｒｏ：プロリン残基、ＱまたはＧｌｎ：グル
タミン残基、 ＲまたはＡｒｇ：アルギニン残基、Ｓま
たはＳｅｒ：セリン残基、 ＴまたはＴｈｒ：スレ
オニン残基、ＶまたはＶａｌ：バリン残基、 Ｗま
たはＴｒｐ：トリプトファン残基、ＹまたはＴｙｒ：チ
ロシン残基、 ＣまたはＣｙｓ：システイン残基
【０００７】本発明者らは、前記の目的を解決するため
に鋭意研究を重ねた。本発明者らは、まず、下記式
（１’）または式（２’）で表されるアミノ酸配列を有
し、ペプチド分子の総荷電数が＋１以上、＋４以内であ
り、かつ、総アミノ酸残基数が２以上、１０以下である
ペプチドが、優れたＬＤＬ吸着性を有することを見いだ
し、すでに特許出願を行った（特願平７−１７６９０
４）。
に鋭意研究を重ねた。本発明者らは、まず、下記式
（１’）または式（２’）で表されるアミノ酸配列を有
し、ペプチド分子の総荷電数が＋１以上、＋４以内であ
り、かつ、総アミノ酸残基数が２以上、１０以下である
ペプチドが、優れたＬＤＬ吸着性を有することを見いだ
し、すでに特許出願を行った（特願平７−１７６９０
４）。
【００１３】 −Ａ−（Ｘｎ）−Ｂ− ・・・・・・・・（１’） −Ｂ−（Ｘｎ）−Ａ− ・・・・・・・・（２’） ここで、 Ａ ： Ｐｈｅ または Ｔｒｐ Ｂ ： Ａｒｇ または Ｌｙｓ Ｘｎ： 任意のｎ個のアミノ酸からなるアミノ酸配列 ｎは、Ｍ−２を越えず、かつ、０以上、５以下の整数 （ただし、Ｍは総アミノ酸残基数）
【０００８】さらに、鋭意検討した結果、５〜１０個の
アミノ酸残基からなるペプチドであって、少なくとも１
つのＰｈｅおよび少なくとも１つのＡｒｇまたはＬｙｓ
を含む特定のアミノ酸配列を有し、かつ、特定の電荷
（Ｅ）［ただし、Ｅは式：Ｅ＝（該ペプチド中の正電荷
を有する官能基の数）−（該ペプチド中の負電荷を有す
る官能基の数）で定義される］が式：＋１≦Ｅ≦＋２の
条件を満足し、さらに、該ペプチドはそのアミノ酸配列
中に、Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−
Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒ
ｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ−Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌ
ｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ
−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇｌｙ，Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａ
ｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈ
ｅ−ＬｙｓあるいはＰｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ただし、
各Ｘa および各Ｘb は、任意の１つのアミノ酸残基を示
す）のいずれかの配列を少なくとも１つ有するペプチド
が結合した水不溶性担体からなる高脂血症治療用吸着材
が、驚くべきことに、優れたＬＤＬ選択吸着性を有し、
それでいてブラジキニンの産生を惹起しないため、優れ
た高脂血症治療用吸着材であることを見いだし、本発明
を完成した。
アミノ酸残基からなるペプチドであって、少なくとも１
つのＰｈｅおよび少なくとも１つのＡｒｇまたはＬｙｓ
を含む特定のアミノ酸配列を有し、かつ、特定の電荷
（Ｅ）［ただし、Ｅは式：Ｅ＝（該ペプチド中の正電荷
を有する官能基の数）−（該ペプチド中の負電荷を有す
る官能基の数）で定義される］が式：＋１≦Ｅ≦＋２の
条件を満足し、さらに、該ペプチドはそのアミノ酸配列
中に、Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−
Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒ
ｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ−Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌ
ｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ
−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇｌｙ，Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａ
ｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈ
ｅ−ＬｙｓあるいはＰｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ただし、
各Ｘa および各Ｘb は、任意の１つのアミノ酸残基を示
す）のいずれかの配列を少なくとも１つ有するペプチド
が結合した水不溶性担体からなる高脂血症治療用吸着材
が、驚くべきことに、優れたＬＤＬ選択吸着性を有し、
それでいてブラジキニンの産生を惹起しないため、優れ
た高脂血症治療用吸着材であることを見いだし、本発明
を完成した。
【０００９】すなわち、本発明は、式（１）または式
（２）で表されるアミノ酸配列を有するペプチドであ
り、該ペプチドが有する電荷（Ｅ）が＋１≦Ｅ≦＋２、
さらに、該ペプチドはそのアミノ酸配列中にＩｌｅ−Ｐ
ｈｅ−Ｘa −Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌ
ｙｓ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −
Ａｒｇ−Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅ
ｕ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇ
ｌｙ，Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈ
ｅ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓあるいは
Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa および各Ｘb
は、任意の１つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの配
列を少なくとも１つ有するペプチドが結合した水不溶性
担体からなる高脂血症治療用吸着材が提供される。
（２）で表されるアミノ酸配列を有するペプチドであ
り、該ペプチドが有する電荷（Ｅ）が＋１≦Ｅ≦＋２、
さらに、該ペプチドはそのアミノ酸配列中にＩｌｅ−Ｐ
ｈｅ−Ｘa −Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌ
ｙｓ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −
Ａｒｇ−Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅ
ｕ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇ
ｌｙ，Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈ
ｅ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓあるいは
Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa および各Ｘb
は、任意の１つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの配
列を少なくとも１つ有するペプチドが結合した水不溶性
担体からなる高脂血症治療用吸着材が提供される。
【００１０】 （Ｘ1 ）p ―Ｐｈｅ―（Ｘ2 ）q ―Ｌｙｓ―（Ｘ3 ）r （１）、または （Ｘ1 ）p ―Ｐｈｅ―（Ｘ2 ）q ―Ａｒｇ―（Ｘ3 ）r （２） ［ただし、式（１）および式（２）の左端および右端
は、それぞれＮ末端およびＣ末端であり、各Ｘ1 、各Ｘ
2 および各Ｘ3 は、それぞれ独立して、任意のアミノ酸
残基であり、ｐ、ｑおよびｒは、それぞれアミノ酸残基
Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 の数であり，さらに、ｐ、ｑおよ
びｒは次の関係を満足する。 ３≦ｐ＋ｑ＋ｒ≦８ ０≦ｑ≦３］ さらに、本発明は、高脂血症の体液と上記の吸着材を接
触させた後、体液を回収することからなる、体液からＬ
ＤＬを選択的に除去する方法を提供する。
は、それぞれＮ末端およびＣ末端であり、各Ｘ1 、各Ｘ
2 および各Ｘ3 は、それぞれ独立して、任意のアミノ酸
残基であり、ｐ、ｑおよびｒは、それぞれアミノ酸残基
Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 の数であり，さらに、ｐ、ｑおよ
びｒは次の関係を満足する。 ３≦ｐ＋ｑ＋ｒ≦８ ０≦ｑ≦３］ さらに、本発明は、高脂血症の体液と上記の吸着材を接
触させた後、体液を回収することからなる、体液からＬ
ＤＬを選択的に除去する方法を提供する。
【００１１】本発明の高脂血症治療用吸着材に結合して
いるペプチドは、式（１）または式（２）で表されるア
ミノ酸配列を有し、芳香族炭化水素基を側鎖とするアミ
ノ酸残基であるＰｈｅを少なくとも１つ有し、さらに、
陽性電荷を有するグアニジノ基を側鎖に持つＡｒｇ、ま
たは陽性電荷を有するアミノ基を側鎖に持つＬｙｓから
選ばれるアミノ酸残基を少なくとも１つ有することが必
要である。
いるペプチドは、式（１）または式（２）で表されるア
ミノ酸配列を有し、芳香族炭化水素基を側鎖とするアミ
ノ酸残基であるＰｈｅを少なくとも１つ有し、さらに、
陽性電荷を有するグアニジノ基を側鎖に持つＡｒｇ、ま
たは陽性電荷を有するアミノ基を側鎖に持つＬｙｓから
選ばれるアミノ酸残基を少なくとも１つ有することが必
要である。
【００１２】本発明において、上記のアミノ酸残基であ
るＰｈｅおよびＡｒｇまたはＬｙｓは、いずれもＬ型で
あってもＤ型であってもよい。陽性電荷を有するグアニ
ジノ基を側鎖に持つＡｒｇ、および陽性電荷を有するア
ミノ基を側鎖に持つＬｙｓは、ＬＤＬが有するリン脂質
のリン酸部位と静電的に相互作用することができると考
えられる。
るＰｈｅおよびＡｒｇまたはＬｙｓは、いずれもＬ型で
あってもＤ型であってもよい。陽性電荷を有するグアニ
ジノ基を側鎖に持つＡｒｇ、および陽性電荷を有するア
ミノ基を側鎖に持つＬｙｓは、ＬＤＬが有するリン脂質
のリン酸部位と静電的に相互作用することができると考
えられる。
【００１３】さらに、該ペプチドは、Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−
Ｘa −Ｘｂ−Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，
Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ
−Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅｕ−Ｐ
ｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇｌｙ，
Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔ
ｒｐ−Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＬｙｓあるいはＰｈｅ
−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa および各Ｘb は、任
意の１つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの配列を少
なくとも１つ有することが必須である。
Ｘa −Ｘｂ−Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，
Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ
−Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅｕ−Ｐ
ｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇｌｙ，
Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔ
ｒｐ−Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＬｙｓあるいはＰｈｅ
−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa および各Ｘb は、任
意の１つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの配列を少
なくとも１つ有することが必須である。
【００１４】本発明の高脂血症治療用吸着材に結合して
いるペプチド、すなわち、少なくとも１つのアミノ酸残
基であるＰｈｅと、少なくとも１つのアミノ酸残基であ
るＡｒｇまたはＬｙｓを有し、Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −
Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｉｌｅ
−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ−Ｌｙ
ｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−
Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇｌｙ，Ｐｈｅ
−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−
Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＬｙｓあるいはＰｈｅ−Ｐｒ
ｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa および各Ｘb は、任意の１
つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの配列を少なくと
も１つ有するペプチドが、優れたＬＤＬ選択吸着性を発
揮する理由は明らかではないが、以下のように考えられ
る。
いるペプチド、すなわち、少なくとも１つのアミノ酸残
基であるＰｈｅと、少なくとも１つのアミノ酸残基であ
るＡｒｇまたはＬｙｓを有し、Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −
Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｉｌｅ
−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ−Ｌｙ
ｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−
Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇｌｙ，Ｐｈｅ
−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−
Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＬｙｓあるいはＰｈｅ−Ｐｒ
ｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa および各Ｘb は、任意の１
つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの配列を少なくと
も１つ有するペプチドが、優れたＬＤＬ選択吸着性を発
揮する理由は明らかではないが、以下のように考えられ
る。
【００１５】一般に、疎水性分子はＬＤＬやＨＤＬのよ
うな脂溶性物質と相互作用すると言われている。同じ疎
水性アミノ酸に分類されるものに、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖ
ａｌ等の脂肪族アミノ酸とＰｈｅの芳香族アミノ酸があ
る。本発明者らは、ＡｒｇまたはＬｙｓを有し、さら
に、Ｉｌｅ、ＬｅｕおよびＶａｌ等の脂肪族アミノ酸を
有し、上記のアミノ酸配列からなる構成単位を有さない
ペプチドのＬＤＬおよびＨＤＬの吸着性と、Ａｒｇまた
はＬｙｓを有し、さらに、芳香族アミノ酸であるＰｈｅ
を有する上記のアミノ酸配列からなる構成単位を有する
ペプチドのＬＤＬおよびＨＤＬの吸着性を、それぞれ測
定し、比較した。その結果、驚くべきことに、後者の方
が前者に比べ、ＬＤＬ選択吸着性が高いということを見
いだした。すなわち、上記のアミノ酸配列からなる構成
単位を有するペプチドは、上記のアミノ酸配列からなる
構成単位を有さないペプチドよりも、ＬＤＬに存在する
脂質部分と強く相互作用することができるので、ＨＤＬ
よりもＬＤＬとより強く結合することができると考えら
れる。
うな脂溶性物質と相互作用すると言われている。同じ疎
水性アミノ酸に分類されるものに、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖ
ａｌ等の脂肪族アミノ酸とＰｈｅの芳香族アミノ酸があ
る。本発明者らは、ＡｒｇまたはＬｙｓを有し、さら
に、Ｉｌｅ、ＬｅｕおよびＶａｌ等の脂肪族アミノ酸を
有し、上記のアミノ酸配列からなる構成単位を有さない
ペプチドのＬＤＬおよびＨＤＬの吸着性と、Ａｒｇまた
はＬｙｓを有し、さらに、芳香族アミノ酸であるＰｈｅ
を有する上記のアミノ酸配列からなる構成単位を有する
ペプチドのＬＤＬおよびＨＤＬの吸着性を、それぞれ測
定し、比較した。その結果、驚くべきことに、後者の方
が前者に比べ、ＬＤＬ選択吸着性が高いということを見
いだした。すなわち、上記のアミノ酸配列からなる構成
単位を有するペプチドは、上記のアミノ酸配列からなる
構成単位を有さないペプチドよりも、ＬＤＬに存在する
脂質部分と強く相互作用することができるので、ＨＤＬ
よりもＬＤＬとより強く結合することができると考えら
れる。
【００１６】なお、本明細書に記載されるＬＤＬ選択吸
着性とは、（ＬＤＬの吸着率／ＨＤＬの吸着率）の値、
または（ＬＤＬの吸着量／ＨＤＬの吸着量）の値をい
う。例えば、（ＬＤＬの吸着率／ＨＤＬの吸着率）の
値、または（ＬＤＬの吸着量／ＨＤＬの吸着量）の値が
１より大きいものは、ＨＤＬよりもＬＤＬを多く吸着
し、ＬＤＬ選択吸着性があり、その値が大きければ大き
いほど、ＬＤＬ選択吸着性に優れていることになる。逆
に、（ＬＤＬの吸着率／ＨＤＬの吸着率）の値、または
（ＬＤＬの吸着量／ＨＤＬの吸着量）の値が１以下のも
のは、ＬＤＬ選択吸着性がないことになる。
着性とは、（ＬＤＬの吸着率／ＨＤＬの吸着率）の値、
または（ＬＤＬの吸着量／ＨＤＬの吸着量）の値をい
う。例えば、（ＬＤＬの吸着率／ＨＤＬの吸着率）の
値、または（ＬＤＬの吸着量／ＨＤＬの吸着量）の値が
１より大きいものは、ＨＤＬよりもＬＤＬを多く吸着
し、ＬＤＬ選択吸着性があり、その値が大きければ大き
いほど、ＬＤＬ選択吸着性に優れていることになる。逆
に、（ＬＤＬの吸着率／ＨＤＬの吸着率）の値、または
（ＬＤＬの吸着量／ＨＤＬの吸着量）の値が１以下のも
のは、ＬＤＬ選択吸着性がないことになる。
【００１７】式（１）または式（２）で表されるアミノ
酸配列を有する本発明の高脂血症治療用吸着材に結合し
たペプチドにおいて、Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 として用い
ることのできるアミノ酸残基とは、１分子内に少なくと
も１つのアミノ基と少なくとも１つのカルボキシル基を
持つ有機化合物分子であるアミノ酸に由来するものであ
れば特に限定はなく、アミノ基の水素が分子内の他の部
分と置換して二級アミンとなった環状化合物に由来する
残基であってもよく、また、非蛋白質性のアミノ酸に由
来する残基であってもよい。上記のアミノ酸の例として
は、Ｌ体の立体構造を有するαーアミノ酸、Ｄ体の立体
構造を有するαーアミノ酸、βーアミノ酸、γーアミノ
酸およびδーアミノ酸が挙げられる。
酸配列を有する本発明の高脂血症治療用吸着材に結合し
たペプチドにおいて、Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 として用い
ることのできるアミノ酸残基とは、１分子内に少なくと
も１つのアミノ基と少なくとも１つのカルボキシル基を
持つ有機化合物分子であるアミノ酸に由来するものであ
れば特に限定はなく、アミノ基の水素が分子内の他の部
分と置換して二級アミンとなった環状化合物に由来する
残基であってもよく、また、非蛋白質性のアミノ酸に由
来する残基であってもよい。上記のアミノ酸の例として
は、Ｌ体の立体構造を有するαーアミノ酸、Ｄ体の立体
構造を有するαーアミノ酸、βーアミノ酸、γーアミノ
酸およびδーアミノ酸が挙げられる。
【００１８】αーアミノ酸の例としてはグリシンや、Ｌ
体の立体構造を有するＬ−アラニン、Ｌ−アスパラギン
酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−ヒ
スチジン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−リジン、Ｌ−ロイシ
ン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−プロリ
ン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−セリン、Ｌ
−スレオニン、Ｌ−バリン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−
チロシンおよびＬ−システインが挙げられる。
体の立体構造を有するＬ−アラニン、Ｌ−アスパラギン
酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−ヒ
スチジン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−リジン、Ｌ−ロイシ
ン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−プロリ
ン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−セリン、Ｌ
−スレオニン、Ｌ−バリン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−
チロシンおよびＬ−システインが挙げられる。
【００１９】Ｄ型の立体構造を有するアミノ酸の例とし
ては、上記したＬ型アミノ酸の光学異性体が挙げられ
る。非蛋白質性のアミノ酸としては、β−アラニン、γ
−アミノ酪酸、ホモシステイン、オルニチン、５−ヒド
ロキシトリプトファン、３，４−ジヒドロキシフェニル
アラニン、トリヨードチロニンおよびチロキシンが挙げ
られる。本発明におけるペプチドとは、アミノ酸がペプ
チド結合したものを言うが、さらに、アミノ酸とＮ−置
換グリシンモノマーが結合した組成物も、本発明におけ
るペプチドに含まれる。本発明においてペプチドの電荷
（Ｅ）とは、ペプチドが担体に結合する前のペプチドの
電荷を指し、式：Ｅ＝（該ペプチド中の正電荷を有する
官能基の数）−（該ペプチド中の負電荷を有する官能基
の数）で定義される。
ては、上記したＬ型アミノ酸の光学異性体が挙げられ
る。非蛋白質性のアミノ酸としては、β−アラニン、γ
−アミノ酪酸、ホモシステイン、オルニチン、５−ヒド
ロキシトリプトファン、３，４−ジヒドロキシフェニル
アラニン、トリヨードチロニンおよびチロキシンが挙げ
られる。本発明におけるペプチドとは、アミノ酸がペプ
チド結合したものを言うが、さらに、アミノ酸とＮ−置
換グリシンモノマーが結合した組成物も、本発明におけ
るペプチドに含まれる。本発明においてペプチドの電荷
（Ｅ）とは、ペプチドが担体に結合する前のペプチドの
電荷を指し、式：Ｅ＝（該ペプチド中の正電荷を有する
官能基の数）−（該ペプチド中の負電荷を有する官能基
の数）で定義される。
【００２０】本発明において、正電荷を有する官能基ま
たは負電荷を有する官能基とは、該ペプチドが有する官
能基の中で中性（ｐＨ７．０）の水溶液中でイオン化し
て、正または負の電荷を帯びる官能基のことである。例
えば、ペプチド分子のＮ末端のアミノ基は正の電荷を有
し、Ｃ末端のカルボキシル基は負の電荷を有する。ただ
し、アミノ酸は水溶液中において、その種類および水溶
液のｐＨによって様々な電離状態を有するので、側鎖に
官能基を有するアミノ酸残基の場合、そのアミノ酸を有
するペプチドの中性（ｐＨ７．０）水溶液において、そ
のアミノ酸残基の８０％以上が有する電離状態に基づ
き、イオン化した官能基の数を求める。例えば、ペプチ
ドが側鎖にグアニジノ基を有するＡｒｇを有する場合、
そのペプチドの中性（ｐＨ７．０）水溶液中において、
８０％以上のＡｒｇが、イオン化されて正電荷を帯びた
グアニジノ基を有するので、Ａｒｇが側鎖に有するグア
ニジノ基は、正電荷を有する官能基とみなす。Ｌｙｓが
側鎖に有するアミノ基も、正電荷を有する官能基であ
る。一方、ＡｓｐやＧｌｕが側鎖に有するカルボキシル
基等は、負電荷を持つ官能基である。ただし、該ペプチ
ド分子が有するアミノ基またはカルボキシル基が、該ペ
プチド分子以外の分子と反応して酸アミド結合等を形成
したり、保護基によって保護されたりして、電荷を持た
ない状態になった基は、もちろん、イオン化した官能基
とはみなさない。
たは負電荷を有する官能基とは、該ペプチドが有する官
能基の中で中性（ｐＨ７．０）の水溶液中でイオン化し
て、正または負の電荷を帯びる官能基のことである。例
えば、ペプチド分子のＮ末端のアミノ基は正の電荷を有
し、Ｃ末端のカルボキシル基は負の電荷を有する。ただ
し、アミノ酸は水溶液中において、その種類および水溶
液のｐＨによって様々な電離状態を有するので、側鎖に
官能基を有するアミノ酸残基の場合、そのアミノ酸を有
するペプチドの中性（ｐＨ７．０）水溶液において、そ
のアミノ酸残基の８０％以上が有する電離状態に基づ
き、イオン化した官能基の数を求める。例えば、ペプチ
ドが側鎖にグアニジノ基を有するＡｒｇを有する場合、
そのペプチドの中性（ｐＨ７．０）水溶液中において、
８０％以上のＡｒｇが、イオン化されて正電荷を帯びた
グアニジノ基を有するので、Ａｒｇが側鎖に有するグア
ニジノ基は、正電荷を有する官能基とみなす。Ｌｙｓが
側鎖に有するアミノ基も、正電荷を有する官能基であ
る。一方、ＡｓｐやＧｌｕが側鎖に有するカルボキシル
基等は、負電荷を持つ官能基である。ただし、該ペプチ
ド分子が有するアミノ基またはカルボキシル基が、該ペ
プチド分子以外の分子と反応して酸アミド結合等を形成
したり、保護基によって保護されたりして、電荷を持た
ない状態になった基は、もちろん、イオン化した官能基
とはみなさない。
【００２１】本発明の高脂血症治療用吸着材に結合して
いるペプチドの電荷（Ｅ）は、ペプチドが担体に結合す
る前の状態で、＋１以上、＋２以内であることが必要で
ある。電荷（Ｅ）が０以下の場合には、ＬＤＬとの結合
に重要なリン脂質に存在するリン酸部位との静電的な相
互作用が弱まり、ＬＤＬとの結合性が低下する。さら
に、電荷（Ｅ）が負の場合、陰性電荷の影響により、血
液中にブラジキニンと呼ばれる生理活性物質が生成され
てしまう恐れがある。
いるペプチドの電荷（Ｅ）は、ペプチドが担体に結合す
る前の状態で、＋１以上、＋２以内であることが必要で
ある。電荷（Ｅ）が０以下の場合には、ＬＤＬとの結合
に重要なリン脂質に存在するリン酸部位との静電的な相
互作用が弱まり、ＬＤＬとの結合性が低下する。さら
に、電荷（Ｅ）が負の場合、陰性電荷の影響により、血
液中にブラジキニンと呼ばれる生理活性物質が生成され
てしまう恐れがある。
【００２２】本発明の高脂血症治療用吸着材に結合して
いるペプチドの総アミノ酸残基数は、最低５残基が必要
である。また、アミノ酸残基数は一般に多くなれば物理
化学的な安定性が悪くなり、１０個を越えるアミノ酸残
基からなるペプチドは、耐滅菌性や保存性が低下する傾
向にある。さらに、経済性を考慮すると、できるだけ短
い方が好ましく、より好ましくは５残基である。
いるペプチドの総アミノ酸残基数は、最低５残基が必要
である。また、アミノ酸残基数は一般に多くなれば物理
化学的な安定性が悪くなり、１０個を越えるアミノ酸残
基からなるペプチドは、耐滅菌性や保存性が低下する傾
向にある。さらに、経済性を考慮すると、できるだけ短
い方が好ましく、より好ましくは５残基である。
【００２３】式（１）または式（２）で表されるアミノ
酸配列を有する本発明の高脂血症治療用吸着材に結合し
ているペプチドにおいては、ＬＤＬの有する脂質部位と
相互作用するアミノ酸残基であるＰｈｅと、ＬＤＬのリ
ン脂質の陰性電荷を帯びたリン酸部位と相互作用するア
ミノ酸残基であるＡｒｇまたはＬｙｓとの間の距離が、
優れたＬＤＬ選択吸着性を達成するために特に重要であ
る。
酸配列を有する本発明の高脂血症治療用吸着材に結合し
ているペプチドにおいては、ＬＤＬの有する脂質部位と
相互作用するアミノ酸残基であるＰｈｅと、ＬＤＬのリ
ン脂質の陰性電荷を帯びたリン酸部位と相互作用するア
ミノ酸残基であるＡｒｇまたはＬｙｓとの間の距離が、
優れたＬＤＬ選択吸着性を達成するために特に重要であ
る。
【００２４】すなわち、ＬＤＬと結合する本発明のペプ
チドは、式（１）および式（２）におけるアミノ酸残基
Ｘ2 の数ｑが０〜３であることが必要である。ｑが４以
上になると、アミノ酸残基ＰｈｅとＡｒｇまたはＬｙｓ
との共同作用によるＬＤＬとの相互作用が弱まり、ペプ
チドとＬＤＬとの結合性は低下する。したがって、ペプ
チドに存在するアミノ酸残基であるＰｈｅとＡｒｇまた
はＬｙｓとの共同作用による効果を利用して、ＬＤＬと
の結合性を高めるには、ｑが０〜３の範囲にあることが
必要である。
チドは、式（１）および式（２）におけるアミノ酸残基
Ｘ2 の数ｑが０〜３であることが必要である。ｑが４以
上になると、アミノ酸残基ＰｈｅとＡｒｇまたはＬｙｓ
との共同作用によるＬＤＬとの相互作用が弱まり、ペプ
チドとＬＤＬとの結合性は低下する。したがって、ペプ
チドに存在するアミノ酸残基であるＰｈｅとＡｒｇまた
はＬｙｓとの共同作用による効果を利用して、ＬＤＬと
の結合性を高めるには、ｑが０〜３の範囲にあることが
必要である。
【００２５】本発明において、例えば、アミノ酸残基に
その光学異性体や光学異性体の混合物を用いたり、該ペ
プチドのＮ末端部分のアミノ基やＣ末端部分のカルボキ
シル基および該ペプチドに含まれるアミノ酸残基の側鎖
に有するアミノ基、グアニジノ基、イミダゾリル基、カ
ルボキシル基、カルバミド基、水酸基、メルカプト基お
よびインドリル基等を保護基にて保護してもよい。
その光学異性体や光学異性体の混合物を用いたり、該ペ
プチドのＮ末端部分のアミノ基やＣ末端部分のカルボキ
シル基および該ペプチドに含まれるアミノ酸残基の側鎖
に有するアミノ基、グアニジノ基、イミダゾリル基、カ
ルボキシル基、カルバミド基、水酸基、メルカプト基お
よびインドリル基等を保護基にて保護してもよい。
【００２６】ペプチドのＮ末端部分のアミノ基や、アミ
ノ酸残基の側鎖に存在するアミノ基の保護基の例として
は、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）基、ｐ−メトキシ
ベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（ＯＭｅ）〕基、ｐ−ク
ロロベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（Ｃｌ）〕基、ｐ−
ニトロベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（ＮＯ2 ）〕基、
ｐ−フェニルアゾベンジルオキシカルボニル（Ｐｚ）
基、ｐ−メトキシフェニルアゾベンジルオキシカルボニ
ル（Ｍｚ）基、３，５−ジメトキシベンジルオキシカル
ボニル〔Ｚ（ＯＭｅ）2 〕基、３，４，５−トリメトキ
シベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（ＯＭｅ）3 〕基、第
三ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）基、第三アミロキシカ
ルボニル（Ａｏｃ）基、ｐ−ビフェニルイソプロピルオ
キシカルボニル（Ｂｐｏｃ）基、ジイソプロピルメチロ
キシカルボニル（Ｄｉｐｍｏｃ）基、アダマンチルオキ
シカルボニル（Ａｄｏｃ）基、イソボルニルオキシカル
ボニル基、シクロペンチルオキシカルボニル（Ｐｏｃ）
基、シクロヘキシルオキシカルボニル基、フルフリルオ
キシカルボニル基、ベンズヒドリルオキシカルボニル
基、ピペリジノオキシカルボニル基、ホルミル（ＨＣ
Ｏ）基、トリフルオロアセチル（Ｔｆａ）基、フタリル
（Ｐｈｔ）基、トシル（Ｔｏｓ）基、ｏ−ニトロフェニ
ルスルフェニル（Ｎｐｓ）基、ベンゾイル（Ｂｚ）基、
クロロアセチル基、アセトアセチル基、トリチル（Ｔｒ
ｔ）基、ベンジリデン基、ベンジル基、２−ベンゾイル
−１−メチルビニル（Ｂｍｖ）基、トリメチルシリル
（Ｔｍｓ）基、２−ヒドロキシアリリデン基、エナミン
基、ジメドン（５，５−ジメチルシクロヘキサン−１，
３−ジオン）基、９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニル（Ｆｍｏｃ）基等が挙げられる。
ノ酸残基の側鎖に存在するアミノ基の保護基の例として
は、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）基、ｐ−メトキシ
ベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（ＯＭｅ）〕基、ｐ−ク
ロロベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（Ｃｌ）〕基、ｐ−
ニトロベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（ＮＯ2 ）〕基、
ｐ−フェニルアゾベンジルオキシカルボニル（Ｐｚ）
基、ｐ−メトキシフェニルアゾベンジルオキシカルボニ
ル（Ｍｚ）基、３，５−ジメトキシベンジルオキシカル
ボニル〔Ｚ（ＯＭｅ）2 〕基、３，４，５−トリメトキ
シベンジルオキシカルボニル〔Ｚ（ＯＭｅ）3 〕基、第
三ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）基、第三アミロキシカ
ルボニル（Ａｏｃ）基、ｐ−ビフェニルイソプロピルオ
キシカルボニル（Ｂｐｏｃ）基、ジイソプロピルメチロ
キシカルボニル（Ｄｉｐｍｏｃ）基、アダマンチルオキ
シカルボニル（Ａｄｏｃ）基、イソボルニルオキシカル
ボニル基、シクロペンチルオキシカルボニル（Ｐｏｃ）
基、シクロヘキシルオキシカルボニル基、フルフリルオ
キシカルボニル基、ベンズヒドリルオキシカルボニル
基、ピペリジノオキシカルボニル基、ホルミル（ＨＣ
Ｏ）基、トリフルオロアセチル（Ｔｆａ）基、フタリル
（Ｐｈｔ）基、トシル（Ｔｏｓ）基、ｏ−ニトロフェニ
ルスルフェニル（Ｎｐｓ）基、ベンゾイル（Ｂｚ）基、
クロロアセチル基、アセトアセチル基、トリチル（Ｔｒ
ｔ）基、ベンジリデン基、ベンジル基、２−ベンゾイル
−１−メチルビニル（Ｂｍｖ）基、トリメチルシリル
（Ｔｍｓ）基、２−ヒドロキシアリリデン基、エナミン
基、ジメドン（５，５−ジメチルシクロヘキサン−１，
３−ジオン）基、９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニル（Ｆｍｏｃ）基等が挙げられる。
【００２７】ペプチドのＣ末端部分のカルボキシル基
や、アミノ酸残基の側鎖に存在するカルボキシル基の保
護基の例としては、アミド、ジメチルアミド、メチルエ
ステル（―ＯＭｅ）、エチルエステル（―ＯＥｔ）、ベ
ンジルエステル（―ＯＢｚｌ）、ｐ−ニトロベンジルエ
ステル〔―ＯＢｚｌ（ＮＯ2 ）〕、ｐ−メトキシベンジ
ルエステル、２，４，６−トリメチルベンジルエステ
ル、ペンタメチルベンジルエステル、第三ブチルエステ
ル（―ＯＢｕｔ）、ジフェニルメチルエステル（―ＯＤ
ＰＭ）、ベンズヒドリルエステル、トリチルエステル、
フタルイミドメチルエステル、シクロペンチルエステ
ル、β―メチルチオエチルエステル、β―（ｐ−ニトロ
チオフェニル）―エチルエステル、フェナシルエステ
ル、４−ピコリルエステルなどが挙げられる。その他、
アミノ酸残基が側鎖に有する官能基に対して、種々の保
護基を用いることができる。（例えば、泉屋信夫、加藤
哲夫、青柳東彦、脇道典著「ペプチド合成の基礎と実
験」日本国、丸善株式会社（１９８５年）参照）。
や、アミノ酸残基の側鎖に存在するカルボキシル基の保
護基の例としては、アミド、ジメチルアミド、メチルエ
ステル（―ＯＭｅ）、エチルエステル（―ＯＥｔ）、ベ
ンジルエステル（―ＯＢｚｌ）、ｐ−ニトロベンジルエ
ステル〔―ＯＢｚｌ（ＮＯ2 ）〕、ｐ−メトキシベンジ
ルエステル、２，４，６−トリメチルベンジルエステ
ル、ペンタメチルベンジルエステル、第三ブチルエステ
ル（―ＯＢｕｔ）、ジフェニルメチルエステル（―ＯＤ
ＰＭ）、ベンズヒドリルエステル、トリチルエステル、
フタルイミドメチルエステル、シクロペンチルエステ
ル、β―メチルチオエチルエステル、β―（ｐ−ニトロ
チオフェニル）―エチルエステル、フェナシルエステ
ル、４−ピコリルエステルなどが挙げられる。その他、
アミノ酸残基が側鎖に有する官能基に対して、種々の保
護基を用いることができる。（例えば、泉屋信夫、加藤
哲夫、青柳東彦、脇道典著「ペプチド合成の基礎と実
験」日本国、丸善株式会社（１９８５年）参照）。
【００２８】ペプチドの合成は、ペプチド合成において
通常用いられる方法、例えば、固相合成法、または液相
合成法により行われるが、固相合成法により行う方が、
操作が簡便であるため好ましい〔例えば、日本国、日本
生化学会編「新生化学実験講座１タンパク質ＩＶ 合成
および発現」日本国、東京化学同人（１９９２年）参
照〕。
通常用いられる方法、例えば、固相合成法、または液相
合成法により行われるが、固相合成法により行う方が、
操作が簡便であるため好ましい〔例えば、日本国、日本
生化学会編「新生化学実験講座１タンパク質ＩＶ 合成
および発現」日本国、東京化学同人（１９９２年）参
照〕。
【００２９】固相合成法によるペプチドの合成は、市販
のペプチド合成用の樹脂、例えば、ジビニルベンゼンを
含むポリスチレンなどの重合体に、ペプチド固相合成に
適した反応性を持つ官能基を結合させた樹脂を用い、目
的とするペプチドの合成を、そのＣ末端側からＮ末端方
向に向かって行う。例えば、α−カルボキシル基以外の
アミノ基などの官能基を保護したアミノ酸と、α−アミ
ノ基以外の、カルボキシル基等の官能基を保護したアミ
ノ酸とを縮合させて結合させる操作と、結合したアミノ
酸におけるα−アミノ基などのペプチド結合を形成する
アミノ基が有する保護基のみを除去する操作を、順次繰
返していくことによってペプチド鎖を伸長させ、所望の
アミノ酸配列を持つペプチドを形成し、次いで、該ペプ
チドを樹脂から脱離させ、かつ、保護基が付加されてい
る全ての官能基から保護基を除去することにより、目的
とするペプチドを得ることができる。必要に応じてこの
ペプチドをさらに精製することにより、純度の高いもの
を得ることができる。ペプチドの精製は有機化合物の精
製に、一般的に用いられている方法が使用できる。特に
カラムクロマトグラフィーによる精製は、効率良く精製
を行えるので好ましい。
のペプチド合成用の樹脂、例えば、ジビニルベンゼンを
含むポリスチレンなどの重合体に、ペプチド固相合成に
適した反応性を持つ官能基を結合させた樹脂を用い、目
的とするペプチドの合成を、そのＣ末端側からＮ末端方
向に向かって行う。例えば、α−カルボキシル基以外の
アミノ基などの官能基を保護したアミノ酸と、α−アミ
ノ基以外の、カルボキシル基等の官能基を保護したアミ
ノ酸とを縮合させて結合させる操作と、結合したアミノ
酸におけるα−アミノ基などのペプチド結合を形成する
アミノ基が有する保護基のみを除去する操作を、順次繰
返していくことによってペプチド鎖を伸長させ、所望の
アミノ酸配列を持つペプチドを形成し、次いで、該ペプ
チドを樹脂から脱離させ、かつ、保護基が付加されてい
る全ての官能基から保護基を除去することにより、目的
とするペプチドを得ることができる。必要に応じてこの
ペプチドをさらに精製することにより、純度の高いもの
を得ることができる。ペプチドの精製は有機化合物の精
製に、一般的に用いられている方法が使用できる。特に
カラムクロマトグラフィーによる精製は、効率良く精製
を行えるので好ましい。
【００３０】本発明の高脂血症治療用吸着材は、本発明
におけるペプチドを水不溶性担体に、直接またはスペー
サーを介して間接的に結合させることによって、腹水、
組織液、全血および血漿等の体液から、ＬＤＬを除去す
るための吸着材として使用することができる。例えば、
血液を人工的な装置によって体外循環させ、血液中のＬ
ＤＬを除去する際に用いる吸着材として用いることがで
き、例えば、家族性高コレステロール血症等の疾病を有
する患者に対し、ＬＤＬアフェレーシスを行う際に、上
記の吸着材を利用した装置を用いると、効率よく、しか
も、安全にＬＤＬを除去することができるので、高い治
療効果を得ることが可能である。上記の吸着材は、該ペ
プチドのＮ末端部分のアミノ基や、Ｃ末端部分のカルボ
キシル基、またはアミノ酸の側鎖が有する官能基を利用
して、水不溶性担体に固定化することにより得ることが
できる。
におけるペプチドを水不溶性担体に、直接またはスペー
サーを介して間接的に結合させることによって、腹水、
組織液、全血および血漿等の体液から、ＬＤＬを除去す
るための吸着材として使用することができる。例えば、
血液を人工的な装置によって体外循環させ、血液中のＬ
ＤＬを除去する際に用いる吸着材として用いることがで
き、例えば、家族性高コレステロール血症等の疾病を有
する患者に対し、ＬＤＬアフェレーシスを行う際に、上
記の吸着材を利用した装置を用いると、効率よく、しか
も、安全にＬＤＬを除去することができるので、高い治
療効果を得ることが可能である。上記の吸着材は、該ペ
プチドのＮ末端部分のアミノ基や、Ｃ末端部分のカルボ
キシル基、またはアミノ酸の側鎖が有する官能基を利用
して、水不溶性担体に固定化することにより得ることが
できる。
【００３１】ペプチドを水不溶性担体に固定化する具体
的な方法としては、例えば、水不溶性担体上に、保護基
を外す条件においても切断されない結合性の基を付加
し、上記水不溶性担体上で、ペプチドを上記のペプチド
の固相合成法で合成し、保護基が付加されている全ての
官能基から保護基を除去することにより得る方法が挙げ
られる。
的な方法としては、例えば、水不溶性担体上に、保護基
を外す条件においても切断されない結合性の基を付加
し、上記水不溶性担体上で、ペプチドを上記のペプチド
の固相合成法で合成し、保護基が付加されている全ての
官能基から保護基を除去することにより得る方法が挙げ
られる。
【００３２】また、ペプチドの水不溶性担体への固定化
は、一般にペプチドまたは蛋白質を担体上に固定化する
方法を用いて行うことができる。そのような方法として
は、例えば、カルボキシル基を有する担体を用い、この
カルボキシル基をＮ−ヒドロキシコハク酸イミドと反応
させることによって、スクシンイミドオキシカルボニル
基に変換し、これにペプチドをアミノ基の部分で反応さ
せる方法（活性エステル法）、アミノ基またはカルボキ
シル基を有する担体を用い、ジシクロヘキシルカルボジ
イミドなどの縮合試薬の存在下で、担体のアミノ基また
はカルボキシル基と、ペプチドのカルボキシル基または
アミノ基を縮合反応させて結合させる方法（縮合法）、
担体とペプチドとを、グルタルアルデヒドなどの２個以
上の官能基を有する化合物を用いて架橋させて結合させ
る方法（担体架橋法）、水酸基を有する担体を用い、臭
化シアンなどのハロゲン化シアンを担体に作用させ、ペ
プチドや蛋白質のアミノ基の部分で反応させて結合させ
る方法、メルカプト基を有する担体を用い、ペプチドや
蛋白質のメルカプト基の部分で反応させる方法、および
エピクロロヒドリンなどのエポキシドを担体に作用さ
せ、ペプチドのアミノ基の部分や水酸基の部分で反応さ
せて結合させる方法等が挙げられる。
は、一般にペプチドまたは蛋白質を担体上に固定化する
方法を用いて行うことができる。そのような方法として
は、例えば、カルボキシル基を有する担体を用い、この
カルボキシル基をＮ−ヒドロキシコハク酸イミドと反応
させることによって、スクシンイミドオキシカルボニル
基に変換し、これにペプチドをアミノ基の部分で反応さ
せる方法（活性エステル法）、アミノ基またはカルボキ
シル基を有する担体を用い、ジシクロヘキシルカルボジ
イミドなどの縮合試薬の存在下で、担体のアミノ基また
はカルボキシル基と、ペプチドのカルボキシル基または
アミノ基を縮合反応させて結合させる方法（縮合法）、
担体とペプチドとを、グルタルアルデヒドなどの２個以
上の官能基を有する化合物を用いて架橋させて結合させ
る方法（担体架橋法）、水酸基を有する担体を用い、臭
化シアンなどのハロゲン化シアンを担体に作用させ、ペ
プチドや蛋白質のアミノ基の部分で反応させて結合させ
る方法、メルカプト基を有する担体を用い、ペプチドや
蛋白質のメルカプト基の部分で反応させる方法、および
エピクロロヒドリンなどのエポキシドを担体に作用さ
せ、ペプチドのアミノ基の部分や水酸基の部分で反応さ
せて結合させる方法等が挙げられる。
【００３３】さらに、必要に応じて水不溶性担体とペプ
チドを、任意の長さの分子（スペーサー）を介して結合
させてもよい。スペーサーの詳細に関しては、例えば、
「アフィニティクロマトグラフィー」笠井献一ら、日本
国、東京化学同人、１９９１年、１０５〜１０８頁を参
照することができる。スペーサーを使用することは、本
発明のＬＤＬ結合用ペプチドと水不溶性担体との間に距
離をもたせることにより、該ペプチドとＬＤＬの結合部
位を増加させる観点から好ましい。スペーサーの例とし
ては、ポリメチレン鎖およびポリエチレングリコール鎖
等が挙げられる。スペーサーの長さは、５００Å以下で
あることが好ましく、２００Å以下であることがさらに
好ましい。スペーサーを介して水不溶性担体にペプチド
を結合させる方法としては、例えば、水不溶性担体とし
てアガロースを用いる場合、アガロースの水酸基とスペ
ーサーとして用いるヘキサメチレンジイソシアナートの
片側のイソシアナート基を反応、結合させ、残ったイソ
シアナート基とペプチドのアミノ基、水酸基またはカル
ボキシル基等を反応、結合させる方法が挙げられる。
チドを、任意の長さの分子（スペーサー）を介して結合
させてもよい。スペーサーの詳細に関しては、例えば、
「アフィニティクロマトグラフィー」笠井献一ら、日本
国、東京化学同人、１９９１年、１０５〜１０８頁を参
照することができる。スペーサーを使用することは、本
発明のＬＤＬ結合用ペプチドと水不溶性担体との間に距
離をもたせることにより、該ペプチドとＬＤＬの結合部
位を増加させる観点から好ましい。スペーサーの例とし
ては、ポリメチレン鎖およびポリエチレングリコール鎖
等が挙げられる。スペーサーの長さは、５００Å以下で
あることが好ましく、２００Å以下であることがさらに
好ましい。スペーサーを介して水不溶性担体にペプチド
を結合させる方法としては、例えば、水不溶性担体とし
てアガロースを用いる場合、アガロースの水酸基とスペ
ーサーとして用いるヘキサメチレンジイソシアナートの
片側のイソシアナート基を反応、結合させ、残ったイソ
シアナート基とペプチドのアミノ基、水酸基またはカル
ボキシル基等を反応、結合させる方法が挙げられる。
【００３４】水不溶性担体としては、親水性の表面を有
し、かつ、ペプチドとの間で共有結合を形成することが
できるアミノ基、カルボキシル基および水酸基などの反
応性の官能基を有するものが好ましい。また、上記の不
溶性担体は、吸着させ得る有効表面積が広い多孔質性で
あるものが好ましい。多孔質の担体は、排除限界分子量
が２．０×１０6 〜１．０×１０8 の範囲であることが
好ましく，２．２×１０6 〜８．０×１０7 の範囲であ
ることがさらに好ましい。また、多孔質の担体の平均細
孔径については、２０〜１００ｎｍの範囲であることが
好ましく、２２〜８０ｎｍの範囲であることがさらに好
ましい。担体は粒子状、繊維状、シート状、中空糸状な
どの任意の形状を用いることができる。
し、かつ、ペプチドとの間で共有結合を形成することが
できるアミノ基、カルボキシル基および水酸基などの反
応性の官能基を有するものが好ましい。また、上記の不
溶性担体は、吸着させ得る有効表面積が広い多孔質性で
あるものが好ましい。多孔質の担体は、排除限界分子量
が２．０×１０6 〜１．０×１０8 の範囲であることが
好ましく，２．２×１０6 〜８．０×１０7 の範囲であ
ることがさらに好ましい。また、多孔質の担体の平均細
孔径については、２０〜１００ｎｍの範囲であることが
好ましく、２２〜８０ｎｍの範囲であることがさらに好
ましい。担体は粒子状、繊維状、シート状、中空糸状な
どの任意の形状を用いることができる。
【００３５】使用できる担体の材質としては、表面にペ
プチドを担持できるものであれば特に限定されず、無機
化合物、有機化合物であってもよく、また、通常のアフ
ィニティクロマトグラフィーに用いられる担体用の材料
は全て用いることができる。有機化合物からなる担体の
具体例としては、旭化成マイクロキャリア〔日本国、旭
化成工業（株）社製〕、ＣＭ−セルロファインＣＨ〔排
除限界タンパク質分子量：約３×１０6 、日本国、生化
学工業（株）社販売〕などのセルロース系担体；セファ
デックス［Ｓｅｐｈａｄｅｘ：スウェーデン国、ファル
マシアバイオテク（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃ
ｈ ＡＢ）社製］等のデキストラン系担体；日本国、特
公平１−４４７２５号公報記載の全多孔質活性化ゲル
や、ＣＭ−トヨパール６５０Ｃ〔排除限界タンパク質分
子量：５×１０6 、日本国、東ソー（株）社製〕等のポ
リビニルアルコール系担体；ＣＭ−トリスアクリルＭ
（ＣＭ−Ｔｒｉｓａｃｒｙｌ Ｍ）〔排除限界タンパク
質分子量：１×１０7 、スウェーデン国、ファルマシア
−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製〕等のポ
リアクリルアミド系担体；ポリエチレン系担体（特開平
６−２９６８５９号、特開平６−２９６８６０号参照）
およびセファロースＣＬ−４Ｂ（ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣ
Ｌ−４Ｂ）〔排除限界タンパク質分子量：２×１０7 、
スウェーデン国、ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａ
ｃｉａ−ＬＫＢ）社製〕、Ｔｈｉｏｐｒｏｐｙｌ−Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ［排除限界タンパク質分子量：４
×１０6、スウェーデン国、ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐ
ｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製］等のアガロース系担
体が挙げられる。
プチドを担持できるものであれば特に限定されず、無機
化合物、有機化合物であってもよく、また、通常のアフ
ィニティクロマトグラフィーに用いられる担体用の材料
は全て用いることができる。有機化合物からなる担体の
具体例としては、旭化成マイクロキャリア〔日本国、旭
化成工業（株）社製〕、ＣＭ−セルロファインＣＨ〔排
除限界タンパク質分子量：約３×１０6 、日本国、生化
学工業（株）社販売〕などのセルロース系担体；セファ
デックス［Ｓｅｐｈａｄｅｘ：スウェーデン国、ファル
マシアバイオテク（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃ
ｈ ＡＢ）社製］等のデキストラン系担体；日本国、特
公平１−４４７２５号公報記載の全多孔質活性化ゲル
や、ＣＭ−トヨパール６５０Ｃ〔排除限界タンパク質分
子量：５×１０6 、日本国、東ソー（株）社製〕等のポ
リビニルアルコール系担体；ＣＭ−トリスアクリルＭ
（ＣＭ−Ｔｒｉｓａｃｒｙｌ Ｍ）〔排除限界タンパク
質分子量：１×１０7 、スウェーデン国、ファルマシア
−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製〕等のポ
リアクリルアミド系担体；ポリエチレン系担体（特開平
６−２９６８５９号、特開平６−２９６８６０号参照）
およびセファロースＣＬ−４Ｂ（ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣ
Ｌ−４Ｂ）〔排除限界タンパク質分子量：２×１０7 、
スウェーデン国、ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａ
ｃｉａ−ＬＫＢ）社製〕、Ｔｈｉｏｐｒｏｐｙｌ−Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ［排除限界タンパク質分子量：４
×１０6、スウェーデン国、ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐ
ｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製］等のアガロース系担
体が挙げられる。
【００３６】無機化合物からなる担体の具体例として
は、ＣＰＧ−１０−１０００〔排除限界タンパク質分子
量：１×１０8 、平均細孔径：１００ｎｍ、米国エレク
トロ−ニュークレオニクス（Ｅｌｅｃｔｒｏ−ｎｕｃｌ
ｅｏｎｉｃｓ）社製〕などの多孔性ガラス等が挙げられ
る。水不溶性担体に固定化するペプチドの量は、一般的
には、０．００１μｍｏｌ／ｍｌ（担体）〜１，０００
μｍｏｌ／ｍｌ（担体）の範囲であり、０．０１μｍｏ
ｌ／ｍｌ〜５００μｍｏｌ／ｍｌの範囲であることが好
ましく、０．１μｍｏｌ／ｍｌ〜２００μｍｏｌ／ｍｌ
の範囲であることがより好ましい。また、上記の水不溶
性担体として、アガロースゲルなどのソフトゲルまたは
架橋されたポリビニルアルコールなどのハードゲルを用
いた場合には、液体クロマトグラフィー等において、Ｌ
ＤＬの分離、精製用ゲルとして用いることもできる。
は、ＣＰＧ−１０−１０００〔排除限界タンパク質分子
量：１×１０8 、平均細孔径：１００ｎｍ、米国エレク
トロ−ニュークレオニクス（Ｅｌｅｃｔｒｏ−ｎｕｃｌ
ｅｏｎｉｃｓ）社製〕などの多孔性ガラス等が挙げられ
る。水不溶性担体に固定化するペプチドの量は、一般的
には、０．００１μｍｏｌ／ｍｌ（担体）〜１，０００
μｍｏｌ／ｍｌ（担体）の範囲であり、０．０１μｍｏ
ｌ／ｍｌ〜５００μｍｏｌ／ｍｌの範囲であることが好
ましく、０．１μｍｏｌ／ｍｌ〜２００μｍｏｌ／ｍｌ
の範囲であることがより好ましい。また、上記の水不溶
性担体として、アガロースゲルなどのソフトゲルまたは
架橋されたポリビニルアルコールなどのハードゲルを用
いた場合には、液体クロマトグラフィー等において、Ｌ
ＤＬの分離、精製用ゲルとして用いることもできる。
【００３７】水不溶性担体にペプチドを結合させてなる
吸着材のＬＤＬおよびＨＤＬに対する結合性を評価する
方法の例としては、吸着材にＬＤＬまたはＨＤＬを吸着
させ、ＬＤＬまたはＨＤＬの吸着した担体を用いて発色
させる方法が挙げられる［ＡＢＣ法（ avidin-biotin c
omplex method ）］。例えば、ビオチン標識化されたＬ
ＤＬまたはＨＤＬを血漿中に添加し、吸着材をその血漿
中に、一定時間浸漬後、吸着材を取り出して洗浄し、こ
れを西洋ワサビペルオキシダーゼで標識されたストレプ
トアビジン溶液に浸漬し、上記酵素の基質であるオルト
フェニレンジアミン溶液を添加することによって、発色
させることによりＬＤＬまたはＨＤＬの結合性を評価す
ることができる。なお、ＬＤＬおよびＨＤＬの結合性の
評価方法に関しては、例えば、S.M. Hsu, L. Raine, H.
Fanger: J. Histchem. Cytochem., 29, 577 (1981) お
よび H. Towbin, T. Staehelin, J. Gordon: Proc. Nat
l.Acad. Sci. U.S.A.,76, 4350 (1979)を参照すること
ができる。
吸着材のＬＤＬおよびＨＤＬに対する結合性を評価する
方法の例としては、吸着材にＬＤＬまたはＨＤＬを吸着
させ、ＬＤＬまたはＨＤＬの吸着した担体を用いて発色
させる方法が挙げられる［ＡＢＣ法（ avidin-biotin c
omplex method ）］。例えば、ビオチン標識化されたＬ
ＤＬまたはＨＤＬを血漿中に添加し、吸着材をその血漿
中に、一定時間浸漬後、吸着材を取り出して洗浄し、こ
れを西洋ワサビペルオキシダーゼで標識されたストレプ
トアビジン溶液に浸漬し、上記酵素の基質であるオルト
フェニレンジアミン溶液を添加することによって、発色
させることによりＬＤＬまたはＨＤＬの結合性を評価す
ることができる。なお、ＬＤＬおよびＨＤＬの結合性の
評価方法に関しては、例えば、S.M. Hsu, L. Raine, H.
Fanger: J. Histchem. Cytochem., 29, 577 (1981) お
よび H. Towbin, T. Staehelin, J. Gordon: Proc. Nat
l.Acad. Sci. U.S.A.,76, 4350 (1979)を参照すること
ができる。
【００３８】また、水不溶性担体に固定化されたペプチ
ドのＬＤＬおよびＨＤＬの吸着量を測定する方法の例と
しては、吸着材にＬＤＬまたはＨＤＬを吸着させ、ＬＤ
ＬまたはＨＤＬの減少率を測定する方法が挙げられる。
例えば、ペプチドが固定化された担体を、一定時間ＬＤ
ＬまたはＨＤＬ溶液に浸漬させ、その後、ＬＤＬまたは
ＨＤＬの減少率を、コレステロールを定量して求めるこ
とができる。
ドのＬＤＬおよびＨＤＬの吸着量を測定する方法の例と
しては、吸着材にＬＤＬまたはＨＤＬを吸着させ、ＬＤ
ＬまたはＨＤＬの減少率を測定する方法が挙げられる。
例えば、ペプチドが固定化された担体を、一定時間ＬＤ
ＬまたはＨＤＬ溶液に浸漬させ、その後、ＬＤＬまたは
ＨＤＬの減少率を、コレステロールを定量して求めるこ
とができる。
【００３９】また、吸着材を、一定時間血漿に浸漬さ
せ、その後、ＬＤＬコレステロールまたはＨＤＬコレス
テロールを分離し、そのそれぞれの減少率を、コレステ
ロールを定量して求めることができる。なお、ＬＤＬお
よびＨＤＬの吸着量の測定方法については、例えば、Ri
chmond, W,: Scand. J. Clin. Lab. Invest., 29(supp
l.), 126 (1972)や Allain, C.C., Poon, L.S., Chan,
C.S.G., Richmond, W. and Fu, P.C.: Clin. Chem., 2
0, 470-475 (1974) および Burstein, M., Scholnick,
H.R. and Morfin, R: J. Lipid Res., 11, 583-595 (19
70) を参照することができる。
せ、その後、ＬＤＬコレステロールまたはＨＤＬコレス
テロールを分離し、そのそれぞれの減少率を、コレステ
ロールを定量して求めることができる。なお、ＬＤＬお
よびＨＤＬの吸着量の測定方法については、例えば、Ri
chmond, W,: Scand. J. Clin. Lab. Invest., 29(supp
l.), 126 (1972)や Allain, C.C., Poon, L.S., Chan,
C.S.G., Richmond, W. and Fu, P.C.: Clin. Chem., 2
0, 470-475 (1974) および Burstein, M., Scholnick,
H.R. and Morfin, R: J. Lipid Res., 11, 583-595 (19
70) を参照することができる。
【００４０】
【発明の実施の形態】以下、実施例および比較例を挙げ
て、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は、何ら
これに限定されるものではない。また、実施例中では、
アミノ酸残基は１文字で表記する。
て、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は、何ら
これに限定されるものではない。また、実施例中では、
アミノ酸残基は１文字で表記する。
【００４１】
（実施例１および比較例１）表１に示す一連のペプチド
をペプチド合成キットＳＰＯＴｓ（米国、Ｇｅｎｏｓｙ
ｓ社製）を用いて、取り扱い説明書に従い、セルロース
ｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分にそれぞれ合成した。
また、ペプチドとＬＤＬとの結合性の測定は、以下の手
順にて行った。すなわち、それぞれのペプチドが合成さ
れたｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分を直径５ｍｍの円
形状に切り取り、９６穴プレートにそれぞれ一枚ずつ入
れた。
をペプチド合成キットＳＰＯＴｓ（米国、Ｇｅｎｏｓｙ
ｓ社製）を用いて、取り扱い説明書に従い、セルロース
ｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分にそれぞれ合成した。
また、ペプチドとＬＤＬとの結合性の測定は、以下の手
順にて行った。すなわち、それぞれのペプチドが合成さ
れたｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分を直径５ｍｍの円
形状に切り取り、９６穴プレートにそれぞれ一枚ずつ入
れた。
【００４２】その後、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰ
ＢＳ（−）ｂｕｆｆｅｒで４倍に希釈したブロックエー
ス（日本国、大日本製薬製）溶液１５０μｌを加えて、
４℃で一昼夜放置した。その後、上記溶液を除去後、２
００μｌの０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ（−）
ｂｕｆｆｅｒで３回洗浄し、続いて２００μｌの蒸留水
で３回洗浄除去後、予めＬＤＬを除去した１０分の１量
の３．８％クエン酸ナトリウム溶液を含む健常人血漿
に、ビオチン標識キット（米国、アマシャム社製）を用
いて、その添付された操作手順書に従い、ＬＤＬ（米
国、シグマ社製）をビオチン標識した溶液を、終濃度が
０．２６μｇ／ｍｌになるように加えた血漿を１００μ
ｌ添加し、室温で１時間放置した。その後、上記溶液を
除去後、２００μｌの０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むリ
ン酸緩衝溶液（以後、ＰＢＳと略す）で３回洗浄し、続
いて２００μｌの蒸留水で３回洗浄除去後、０．１％Ｔ
ｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで１０倍に希釈したブロック
エース（日本国、大日本製薬製）溶液で５０００倍に希
釈された西洋ワサビペルオキシダーゼ標識ストレプトア
ビジン溶液（０．２μｇ／ｍｌ）１００μｌを添加し、
３０分間室温で放置した。その後、上記溶液を除去後、
２００μｌの０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで５
回洗浄し、続いて２００μｌの蒸留水で５回洗浄除去
後、０．００８％の過酸化水素水を含むオルトフェニレ
ンジアミン溶液（０．５５ｍｇ／ｍｌ）１００μｌを加
えて、１５分間室温で反応させた。その後、２Ｎの硫酸
溶液１００μｌを加えて反応停止させ、反応溶液１５０
μｌを別の９６穴プレートに移し替え、その溶液の４９
０ｎｍにおける吸光度を測定し、それぞれのペプチドに
対するＬＤＬの吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合
を１００％としたときの相対値（％）として求めた。
ＢＳ（−）ｂｕｆｆｅｒで４倍に希釈したブロックエー
ス（日本国、大日本製薬製）溶液１５０μｌを加えて、
４℃で一昼夜放置した。その後、上記溶液を除去後、２
００μｌの０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ（−）
ｂｕｆｆｅｒで３回洗浄し、続いて２００μｌの蒸留水
で３回洗浄除去後、予めＬＤＬを除去した１０分の１量
の３．８％クエン酸ナトリウム溶液を含む健常人血漿
に、ビオチン標識キット（米国、アマシャム社製）を用
いて、その添付された操作手順書に従い、ＬＤＬ（米
国、シグマ社製）をビオチン標識した溶液を、終濃度が
０．２６μｇ／ｍｌになるように加えた血漿を１００μ
ｌ添加し、室温で１時間放置した。その後、上記溶液を
除去後、２００μｌの０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むリ
ン酸緩衝溶液（以後、ＰＢＳと略す）で３回洗浄し、続
いて２００μｌの蒸留水で３回洗浄除去後、０．１％Ｔ
ｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで１０倍に希釈したブロック
エース（日本国、大日本製薬製）溶液で５０００倍に希
釈された西洋ワサビペルオキシダーゼ標識ストレプトア
ビジン溶液（０．２μｇ／ｍｌ）１００μｌを添加し、
３０分間室温で放置した。その後、上記溶液を除去後、
２００μｌの０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳで５
回洗浄し、続いて２００μｌの蒸留水で５回洗浄除去
後、０．００８％の過酸化水素水を含むオルトフェニレ
ンジアミン溶液（０．５５ｍｇ／ｍｌ）１００μｌを加
えて、１５分間室温で反応させた。その後、２Ｎの硫酸
溶液１００μｌを加えて反応停止させ、反応溶液１５０
μｌを別の９６穴プレートに移し替え、その溶液の４９
０ｎｍにおける吸光度を測定し、それぞれのペプチドに
対するＬＤＬの吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合
を１００％としたときの相対値（％）として求めた。
【００４３】なお、ペプチドとＨＤＬとの結合性の測定
は、上記記載のペプチドとＬＤＬとの結合性測定の操作
において、ビオチン標識したＬＤＬの代わりにビオチン
標識されたＨＤＬ（米国、パーイミューン社製）を用い
て、同様に測定し、それぞれのペプチドに対するＨＤＬ
の吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合を１００％と
したときの相対値（％）として求めた。また、ＬＤＬ選
択吸着性は、ＬＤＬの吸着率（％）／ＨＤＬの吸着率
（％）として数値化して求めた。以上の結果を表１に示
した。明らかに、実施例１のペプチドは、比較例１に比
べて、ＬＤＬ選択吸着性が優れていることがわかる。
は、上記記載のペプチドとＬＤＬとの結合性測定の操作
において、ビオチン標識したＬＤＬの代わりにビオチン
標識されたＨＤＬ（米国、パーイミューン社製）を用い
て、同様に測定し、それぞれのペプチドに対するＨＤＬ
の吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合を１００％と
したときの相対値（％）として求めた。また、ＬＤＬ選
択吸着性は、ＬＤＬの吸着率（％）／ＨＤＬの吸着率
（％）として数値化して求めた。以上の結果を表１に示
した。明らかに、実施例１のペプチドは、比較例１に比
べて、ＬＤＬ選択吸着性が優れていることがわかる。
【００４４】
【表１】
【００４５】（実施例２および比較例２）表２に示す一
連のペプチドをペプチド合成キットＳＰＯＴｓ（米国、
Ｇｅｎｏｓｙｓ社製）を用いて、取り扱い説明書に従
い、セルロースｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分にそれ
ぞれ合成した。また、ペプチドとＬＤＬとの結合性の測
定は、実施例１と同様の方法で実施した。
連のペプチドをペプチド合成キットＳＰＯＴｓ（米国、
Ｇｅｎｏｓｙｓ社製）を用いて、取り扱い説明書に従
い、セルロースｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分にそれ
ぞれ合成した。また、ペプチドとＬＤＬとの結合性の測
定は、実施例１と同様の方法で実施した。
【００４６】なお、ペプチドとＨＤＬとの結合性の測定
は、上記記載のペプチドとＬＤＬとの結合性測定の操作
において、ビオチン標識したＬＤＬの代わりにビオチン
標識されたＨＤＬ（米国、パーイミューン社製）を用い
て、同様に測定し、それぞれのペプチドに対するＨＤＬ
の吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合を１００％と
したときの相対値（％）として求めた。また、ＬＤＬ選
択吸着性は、ＬＤＬの吸着率（％）／ＨＤＬの吸着率
（％）として数値化して求めた。以上の結果を表２に示
した。明らかに、実施例２のペプチドは、比較例２に比
べて、ＬＤＬ選択吸着性が優れていることがわかる。
は、上記記載のペプチドとＬＤＬとの結合性測定の操作
において、ビオチン標識したＬＤＬの代わりにビオチン
標識されたＨＤＬ（米国、パーイミューン社製）を用い
て、同様に測定し、それぞれのペプチドに対するＨＤＬ
の吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合を１００％と
したときの相対値（％）として求めた。また、ＬＤＬ選
択吸着性は、ＬＤＬの吸着率（％）／ＨＤＬの吸着率
（％）として数値化して求めた。以上の結果を表２に示
した。明らかに、実施例２のペプチドは、比較例２に比
べて、ＬＤＬ選択吸着性が優れていることがわかる。
【００４７】
【表２】
【００４８】（実施例３および比較例３）表３に示す一
連のペプチドをペプチド合成キットＳＰＯＴｓ（米国、
Ｇｅｎｏｓｙｓ社製）を用いて、取り扱い説明書に従
い、セルロースｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分にそれ
ぞれ合成した。また、ペプチドとＬＤＬとの結合性の測
定は、実施例１と同様の方法で実施した。
連のペプチドをペプチド合成キットＳＰＯＴｓ（米国、
Ｇｅｎｏｓｙｓ社製）を用いて、取り扱い説明書に従
い、セルロースｍｅｍｂｒａｎｅ上の SPOT 部分にそれ
ぞれ合成した。また、ペプチドとＬＤＬとの結合性の測
定は、実施例１と同様の方法で実施した。
【００４９】なお、ペプチドとＨＤＬとの結合性の測定
は、上記記載のペプチドとＬＤＬとの結合性測定の操作
において、ビオチン標識したＬＤＬの代わりにビオチン
標識されたＨＤＬ（米国、パーイミューン社製）を用い
て、同様に測定し、それぞれのペプチドに対するＨＤＬ
の吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合を１００％と
したときの相対値（％）として求めた。また、ＬＤＬ選
択吸着性は、ＬＤＬの吸着率（％）／ＨＤＬの吸着率
（％）として数値化して求めた。以上の結果を表３に示
した。明らかに、実施例３のペプチドは、比較例３に比
べて、ＬＤＬ選択吸着性が優れていることがわかる。
は、上記記載のペプチドとＬＤＬとの結合性測定の操作
において、ビオチン標識したＬＤＬの代わりにビオチン
標識されたＨＤＬ（米国、パーイミューン社製）を用い
て、同様に測定し、それぞれのペプチドに対するＨＤＬ
の吸着率は、ＷＦＷＲＲＧＧＧＧＧの場合を１００％と
したときの相対値（％）として求めた。また、ＬＤＬ選
択吸着性は、ＬＤＬの吸着率（％）／ＨＤＬの吸着率
（％）として数値化して求めた。以上の結果を表３に示
した。明らかに、実施例３のペプチドは、比較例３に比
べて、ＬＤＬ選択吸着性が優れていることがわかる。
【００５０】
【表３】
【００５１】（実施例４）カルボキシル基末端がアミド
化されたすべてＬ体のアミノ酸からなるＦＦＫＲＤＣ−
ＣＯＮＨ2 の配列を持つペプチドを、ペプチド自動合成
機（９０５０ ｐｌｕｓペプチドシンセサイザー、日本
国、日本パーセプティブ・リミテッド社）を用いて、固
相合成法により合成した。すなわち、４−アミノメチル
−３，５−ジメトキシフェノキシメチル基を０．１８ｍ
ｍｏｌ／ｇ（樹脂）の割合で有するスチレン−ジビニル
ベンゼン共重合体からなる粒状樹脂（Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ
−ＰＥＧ−ＰＳ：日本国、日本パーセプティブリミテッ
ド社製）を用い、すべてＬ体のＦｍｏｃ−アミノ酸を用
いて、定法に従って固相合成を行った。
化されたすべてＬ体のアミノ酸からなるＦＦＫＲＤＣ−
ＣＯＮＨ2 の配列を持つペプチドを、ペプチド自動合成
機（９０５０ ｐｌｕｓペプチドシンセサイザー、日本
国、日本パーセプティブ・リミテッド社）を用いて、固
相合成法により合成した。すなわち、４−アミノメチル
−３，５−ジメトキシフェノキシメチル基を０．１８ｍ
ｍｏｌ／ｇ（樹脂）の割合で有するスチレン−ジビニル
ベンゼン共重合体からなる粒状樹脂（Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ
−ＰＥＧ−ＰＳ：日本国、日本パーセプティブリミテッ
ド社製）を用い、すべてＬ体のＦｍｏｃ−アミノ酸を用
いて、定法に従って固相合成を行った。
【００５２】得られたペプチドを分析用高速液体クロマ
トグラフィーにて、逆相系カラム〔ＴＳＫｇｅｌ ＯＤ
Ｓ−８０ＴＭ：日本国、東ソー（株）社製〕を用いて、
２２０ｎｍの波長で分析し、単一のピークであることを
確認した。同様にして、カルボキシル基末端がアミド化
されたすべてＬ体のアミノ酸からなるＬＦＹＫＧＣ−Ｃ
ＯＮＨ2 、ＩＦＦＫＰＣ−ＣＯＮＨ2 、ＩＦＩＲＴＣ−
ＣＯＮＨ2 の配列を持つペプチドも合成した。
トグラフィーにて、逆相系カラム〔ＴＳＫｇｅｌ ＯＤ
Ｓ−８０ＴＭ：日本国、東ソー（株）社製〕を用いて、
２２０ｎｍの波長で分析し、単一のピークであることを
確認した。同様にして、カルボキシル基末端がアミド化
されたすべてＬ体のアミノ酸からなるＬＦＹＫＧＣ−Ｃ
ＯＮＨ2 、ＩＦＦＫＰＣ−ＣＯＮＨ2 、ＩＦＩＲＴＣ−
ＣＯＮＨ2 の配列を持つペプチドも合成した。
【００５３】上記のペプチドを定法に従い、Thiopropyl
-Sepharose 6B （スウェーデン国、ファルマシア社製）
に、ペプチドの固定化量が９．６〜１１．０μｍｏｌ／
ｍｌゲルになるように樹脂に固定化した。すなわち、樹
脂を秤り取り、脱気した０．２Ｍの食塩を含む０．１Ｍ
のｐＨ７．０のトリス塩酸緩衝溶液で洗浄後、精製した
ペプチド１６０μｍｏｌを、上記の緩衝溶液１６ｍｌに
溶解し、膨潤したゲル８ｍｌに加えて、室温で２時間反
応させた。反応終了後、上記の緩衝溶液で洗浄し、反応
を終了させた。
-Sepharose 6B （スウェーデン国、ファルマシア社製）
に、ペプチドの固定化量が９．６〜１１．０μｍｏｌ／
ｍｌゲルになるように樹脂に固定化した。すなわち、樹
脂を秤り取り、脱気した０．２Ｍの食塩を含む０．１Ｍ
のｐＨ７．０のトリス塩酸緩衝溶液で洗浄後、精製した
ペプチド１６０μｍｏｌを、上記の緩衝溶液１６ｍｌに
溶解し、膨潤したゲル８ｍｌに加えて、室温で２時間反
応させた。反応終了後、上記の緩衝溶液で洗浄し、反応
を終了させた。
【００５４】その後、樹脂をＰＢＳで洗浄後、膨潤状態
の樹脂２５０μｌに、高脂血症患者の血漿１ｍｌを添加
した。ＬＤＬの吸着量は、ＬＤＬコレステロール分離キ
ット（米国、SIGMA DIAGNOSTICS社製）を用いて、ＬＤ
Ｌコレステロールを血漿中から分離し、添加前後でのＬ
ＤＬの含有量を、コレステロールＥ−テストワコー（日
本国、和光純薬製）を用いて求めた。ＨＤＬの吸着量
は、添加前後でのＨＤＬの含有量を、ＨＤＬコレステロ
ールＥ−テストワコー（日本国、和光純薬製）を用いて
求めた。また、ＬＤＬ選択吸着性は、ＬＤＬの吸着量／
ＨＤＬの吸着量として数値化して求めた。その結果を表
４に示す。本発明の吸着材は、高脂血症治療用に有効で
あることがわかる。
の樹脂２５０μｌに、高脂血症患者の血漿１ｍｌを添加
した。ＬＤＬの吸着量は、ＬＤＬコレステロール分離キ
ット（米国、SIGMA DIAGNOSTICS社製）を用いて、ＬＤ
Ｌコレステロールを血漿中から分離し、添加前後でのＬ
ＤＬの含有量を、コレステロールＥ−テストワコー（日
本国、和光純薬製）を用いて求めた。ＨＤＬの吸着量
は、添加前後でのＨＤＬの含有量を、ＨＤＬコレステロ
ールＥ−テストワコー（日本国、和光純薬製）を用いて
求めた。また、ＬＤＬ選択吸着性は、ＬＤＬの吸着量／
ＨＤＬの吸着量として数値化して求めた。その結果を表
４に示す。本発明の吸着材は、高脂血症治療用に有効で
あることがわかる。
【００５５】
【表４】
【００５６】（実施例５および比較例４）実施例４で合
成したペプチドＦＦＫＲＤＣ−ＣＯＮＨ2 を実施例４と
同様の方法でThiopropyl-Sepharose 6B（スウェーデン
国、ファルマシア社製）に結合させた。ブラジキニンの
測定については、以下の手順で行った。ヘパリン（１０
ＩＵ／ｍｌ）を添加した健常人の血液を遠心分離器で分
離し、得られた血漿にカプトプリル（５０ｎｇ／ｍｌ、
米国、シグマ社製）を添加した血漿成分５ｍｌを、膨潤
状態の樹脂１ｍｌの入ったポリカーボネート製三角フラ
スコに加え、３７℃で５分間放置した。
成したペプチドＦＦＫＲＤＣ−ＣＯＮＨ2 を実施例４と
同様の方法でThiopropyl-Sepharose 6B（スウェーデン
国、ファルマシア社製）に結合させた。ブラジキニンの
測定については、以下の手順で行った。ヘパリン（１０
ＩＵ／ｍｌ）を添加した健常人の血液を遠心分離器で分
離し、得られた血漿にカプトプリル（５０ｎｇ／ｍｌ、
米国、シグマ社製）を添加した血漿成分５ｍｌを、膨潤
状態の樹脂１ｍｌの入ったポリカーボネート製三角フラ
スコに加え、３７℃で５分間放置した。
【００５７】その後、直ちに血漿成分を分離し、その血
漿成分にトラジロール、大豆トリプシンインヒビター、
硫酸プロタミンおよびＥＤＴＡ−２Ｎａの入ったインヒ
ビター溶液２ｍｌを加え反応を停止させ、血漿中に産生
されたブラジキニン量をＲＩＡ法にて測定した。なお、
比較のために、樹脂として市販のデキストラン硫酸固定
化セルロースも用いて、本操作を行った。また、参考の
ために、ブラジキニン産生を顕著に促進させると考えら
れるガラス製三角フラスコを用い、樹脂を入れずにこの
操作を行った。その結果を表５に示した。明らかに、Ｆ
ＦＫＲＤＣ−ＣＯＮＨ2 固定化Thiopropyl-Sepharose 6
B は、対照として行った空容器試験以上のブラジキニン
産生はなかった。
漿成分にトラジロール、大豆トリプシンインヒビター、
硫酸プロタミンおよびＥＤＴＡ−２Ｎａの入ったインヒ
ビター溶液２ｍｌを加え反応を停止させ、血漿中に産生
されたブラジキニン量をＲＩＡ法にて測定した。なお、
比較のために、樹脂として市販のデキストラン硫酸固定
化セルロースも用いて、本操作を行った。また、参考の
ために、ブラジキニン産生を顕著に促進させると考えら
れるガラス製三角フラスコを用い、樹脂を入れずにこの
操作を行った。その結果を表５に示した。明らかに、Ｆ
ＦＫＲＤＣ−ＣＯＮＨ2 固定化Thiopropyl-Sepharose 6
B は、対照として行った空容器試験以上のブラジキニン
産生はなかった。
【００５８】
【表５】
【００５９】
【発明の効果】本発明の高脂血症治療用吸着材は、優れ
たＬＤＬ選択吸着性を有し、それでいて、ブラジキニン
の産生を惹起しないため、全血や血漿等の体液からＬＤ
Ｌを除去するための吸着材として有利に用いることがで
きる。さらに、本発明の高脂血症治療用吸着材に結合し
ているペプチドは、１０個以下のアミノ酸残基からなる
ため、比較的容易に、しかも、低コストで作製すること
ができるだけでなく、滅菌操作等に対する安定性や、保
存性に優れている。また、本発明の高脂血症治療用吸着
材を、血液中のＬＤＬが病的な原因により、健常人より
も多くなる疾患において、そのＬＤＬを血液中から除去
する場合に必要な血液浄化処理装置等に用いると、効率
よく、しかも、安全にＬＤＬの除去を行うことができ
る。
たＬＤＬ選択吸着性を有し、それでいて、ブラジキニン
の産生を惹起しないため、全血や血漿等の体液からＬＤ
Ｌを除去するための吸着材として有利に用いることがで
きる。さらに、本発明の高脂血症治療用吸着材に結合し
ているペプチドは、１０個以下のアミノ酸残基からなる
ため、比較的容易に、しかも、低コストで作製すること
ができるだけでなく、滅菌操作等に対する安定性や、保
存性に優れている。また、本発明の高脂血症治療用吸着
材を、血液中のＬＤＬが病的な原因により、健常人より
も多くなる疾患において、そのＬＤＬを血液中から除去
する場合に必要な血液浄化処理装置等に用いると、効率
よく、しかも、安全にＬＤＬの除去を行うことができ
る。
Claims (9)
- 【請求項１】 下記式（１）または式（２）で表される
アミノ酸配列を有するペプチドであり、該ペプチドが有
する電荷（Ｅ）が＋１≦Ｅ≦＋２であり、さらに、該ペ
プチドはそのアミノ酸配列中にＩｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −
Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｉｌｅ
−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ−Ｌｙ
ｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−
Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇｌｙ，Ｐｈｅ
−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−
Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−ＬｙｓあるいはＰｈｅ−Ｐｒ
ｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa および各Ｘb は、任意の１
つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの配列を少なくと
も１つ有するペプチドが結合した水不溶性担体からなる
高脂血症治療用吸着材。 （Ｘ1 ）p −Ｐｈｅ−（Ｘ2 ）q −Ｌｙｓ−（Ｘ3 ）r （１）、または （Ｘ1 ）p −Ｐｈｅ−（Ｘ2 ）q −Ａｒｇ−（Ｘ3 ）r （２） 〔ただし、式（１）および式（２）の左端および右端
は、それぞれＮ末端およびＣ末端であり、各Ｘ1 、各Ｘ
2 および各Ｘ3 は、それぞれ独立して、任意のアミノ酸
残基であり、ｐ、ｑおよびｒは、それぞれアミノ酸残基
Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 の数であり、さらに、ｐ、ｑおよ
びｒは次の関係を満足する。 ３≦ｐ＋ｑ＋ｒ≦８ ０≦ｑ≦３〕 - 【請求項２】 ３≦ｐ＋ｑ＋ｒ≦４であるところのペプ
チドが水不溶性担体に結合ししていることを特徴とする
請求項１に記載の高脂血症治療用吸着材。 - 【請求項３】 ペプチドが水不溶性担体に直接結合して
いることを特徴とする請求項１に記載の高脂血症治療用
吸着材。 - 【請求項４】 ペプチドが水不溶性担体にスペーサーを
介して結合していることを特徴とする請求項１に記載の
高脂血症治療用吸着材。 - 【請求項５】 水不溶性担体に結合したペチドの量が
０．００１μｍｏｌ／ｍｌ以上１０００μｍｏｌ／ｍｌ
以下であることを特徴とする請求項１に記載の高脂血症
治療用吸着材。 - 【請求項６】 水不溶性担体に結合したペプチドの量が
０．０１μｍｏｌ／ｍｌ以上５００μｍｏｌ／ｍｌ以下
であることを特徴とする請求項１に記載の高脂血症治療
用吸着材。 - 【請求項７】 水不溶性担体に結合したペプチドの量が
０．１μｍｏｌ／ｍｌ以上２００μｍｏｌ／ｍｌ以下で
あることを特徴とする請求項１に記載の高脂血症治療用
吸着材。 - 【請求項８】 水不溶性担体がアガロース系担体、セル
ロース系担体、ポリビニルアルコール系担体、あるいは
ポリエチレン系担体のいずれかであることを特徴とする
請求項１に記載の高脂血症治療用吸着材。 - 【請求項９】 高脂血症の体液と、下記式（１）または
式（２）で表されるアミノ酸配列を有するペプチドであ
り、該ペプチドが有する電荷（Ｅ）が＋１≦Ｅ≦＋２、
さらに、該ペプチドはそのアミノ酸配列中にＩｌｅ−Ｐ
ｈｅ−Ｘa −Ｘb −Ｐｒｏ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌ
ｙｓ，Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｘa −
Ａｒｇ−Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ，Ｌｅ
ｕ−Ｐｈｅ−Ｘa −Ｌｙｓ，Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｘa −Ｇ
ｌｙ，Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ，Ｉｌｅ−Ｐｈ
ｅ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ，Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓあるいは
Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（ただし、各Ｘa およびＸ
b は、任意の１つのアミノ酸残基を示す）のいずれかの
配列を少なくとも１つ有するペプチドが結合した水不溶
性担体からなる吸着材とを接触させた後、体液を回収す
ることからなる、体液から低比重リポ蛋白質を選択的に
除去する方法。 （Ｘ1 ）p −Ｐｈｅ−（Ｘ2 ）q −Ｌｙｓ−（Ｘ3 ）r （１）、または （Ｘ1 ）p −Ｐｈｅ−（Ｘ2 ）q −Ａｒｇ−（Ｘ3 ）r （２） 〔ただし、式（１）および式（２）の左端および右端
は、それぞれＮ末端およびＣ末端であり、各Ｘ1 、Ｘ2
およびＸ3 は、それぞれ独立して、任意のアミノ酸残基
であり、ｐ、ｑおよびｒは、それぞれアミノ酸残基
Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 の数であり、さらに、ｐ、ｑおよ
びｒは次の関係を満足する。 ３≦ｐ＋ｑ＋ｒ≦８ ０≦ｑ≦３〕
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8354650A JPH10179733A (ja) | 1996-12-20 | 1996-12-20 | 高脂血症治療用吸着材 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8354650A JPH10179733A (ja) | 1996-12-20 | 1996-12-20 | 高脂血症治療用吸着材 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10179733A true JPH10179733A (ja) | 1998-07-07 |
Family
ID=18438986
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8354650A Withdrawn JPH10179733A (ja) | 1996-12-20 | 1996-12-20 | 高脂血症治療用吸着材 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10179733A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2012143707A (ja) * | 2011-01-12 | 2012-08-02 | Asahi Kasei Medical Co Ltd | 水不溶性担体及びエンドトキシン吸着材 |
-
1996
- 1996-12-20 JP JP8354650A patent/JPH10179733A/ja not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2012143707A (ja) * | 2011-01-12 | 2012-08-02 | Asahi Kasei Medical Co Ltd | 水不溶性担体及びエンドトキシン吸着材 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20040302 |