JPH09511654A - マイコプラズマ・ニューモニエ核酸を標的とする核酸ハイブリダイゼーションアッセイプローブ - Google Patents
マイコプラズマ・ニューモニエ核酸を標的とする核酸ハイブリダイゼーションアッセイプローブInfo
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- JPH09511654A JPH09511654A JP8508958A JP50895896A JPH09511654A JP H09511654 A JPH09511654 A JP H09511654A JP 8508958 A JP8508958 A JP 8508958A JP 50895896 A JP50895896 A JP 50895896A JP H09511654 A JPH09511654 A JP H09511654A
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.厳密なハイブリダイゼーションアッセイ条件下で、 からなる群より選択されるヌクレオチド配列を有するヌクレオチドポリマーの少 なくとも一部分とともに検出用の安定な核酸ハイブリッドを形成しうるオリゴヌ クレオチドを含む核酸ハイブリダイゼーションアッセイプローブであって、該厳 密なハイブリダイゼーション条件下で、マイコプラズマ・ゲニタリウム中に存在 する核酸よりもマイコプラズマ・ニューモニエの核酸に優先的にハイブリダイゼ ーションするプローブ。 2.該厳密なハイブリダイゼーション条件下で、マイコプラズマ・オラレ、マ イコプラズマ・ファウシウム、マイコプラズマ・ブッカレおよびマイコプラズマ ・サリバリウム中に存在する核酸よりもマイコプラズマ・ニューモニエの核酸に 優先的にハイブリダイゼーションしうる請求項1の核酸ハイブリダイゼーション アッセイプローブ。 3.マイコプラズマ・ニューモニエおよびマイコプラズマ・ニューモニエに密 接に関連した分類学上の近縁種のリボゾームRNAまたはリボゾームRNAをコ ードしているDNAの配列を比較することに基づいて化学的または生物学的に合 成された請求項1の核酸ハイブリダイゼーションアッセイプローブ。 4. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 長さ18ないし100ヌクレオチドのオリゴヌクレオチドを含む、マイコプラズ マ・ニューモニエを検出しうる核酸ハイブリダイゼーションアッセイプローブで あって、厳密なハイブリダイゼーションアッセイ条件下で、マイコプラズマ・ゲ ニタリウム中に存在する核酸よりもマイコプラズマ・ニューモニエの核酸に優先 的にハイブリダイゼーションしうるプローブ。 5. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 請求項4のハイブリダイゼーションアッセイプローブ。 6. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 請求項4のハイブリダイゼーションアッセイプローブ。 7. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 請求項4のハイブリダイゼーションアッセイプローブ。 8. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 請求項4のハイブリダイゼーションアッセイプローブ。 9. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 請求項4のハイブリダイゼーションアッセィプローブ。 10. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 請求項4のハイブリダイゼーションアッセィプローブ。 11. からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 請求項4のハイブリダイゼーションアッセイプローブ。 12. からなる群より選択されるヘルパー標的ヌクレオチド配列中に存在する少なくと も10個の一連の核酸に完全に相補的なヌクレオチド配列を有する長さ12ない し100ヌクレオチドのオリゴヌクレオチドを含むヘルパーオリゴヌクレオチド 。 13. およびそれらに対するRNA同等物からなる群より選択されるヌクレオチド配列 を有する請求項12のヘルパーオリゴヌクレオチド。 14.a)厳密なハイブリダイゼーションアッセイ条件下で、マイコプラズマ ・ニューモニエを検出しうる核酸ハイブリダイゼーションアッセイプローブであ って、 からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する 長さ18ないし100ヌクレオチドのオリゴヌクレオチドを含むプローブ;およ び b)厳密なハイブリダイゼーションアッセイ条件下でマイコプラズマ・ニューモ ニエの核酸にハイブリダイゼーションし、該プローブとマイコプラズマ・ニュー モニエの核酸配列領域との間のハイブリダイゼーションを促進する少なくとも1 つのヘルパーオリゴヌクレオチド を含むマイコプラズマ・ニューモニエ検出のためのプローブミックス。 15.該ヘルパープローブが長さが少なくとも12ヌクレオチドであり、該厳 密なハイブリダイゼーションアッセイ条件下でヘルパー標的領域とともに検出用 の安定なハイブリッドを形成するものであり、該標的領域が からなる群より選択される標的ヌクレオチド配列中に存在する少なくとも10個 の一連のヌクレオチドを有するものである、請求項14のプローブミックス。 16.該ヘルパーオリゴヌクレオチドが およびそれらに対するRNA同等物からなる群より選択されるヌクレオチド配列 を有する請求項15のプローブミックス。 17.該ハイブリダイゼーションアッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有し、 該ヘルパー標的ヌクレオチド配列が からなる群より選択される請求項15のプローブミックス。 18.該ハイブリダイゼーションアッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有し、 該ヘルパー標的ヌクレオチド配列が からなる群より選択される請求項15のプローブミックス。 19.該ハイブリダイゼーションアッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有し、 該ヘルパー標的ヌクレオチド配列が からなる群より選択される請求項15のプローブミックス。 20.該ハイブリダイゼーションアッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有し、 該ヘルパー標的ヌクレオチド配列が からなる群より選択される請求項15のプローブミックス。 21.該ハイブリダイゼーションアッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有し、 該ヘルパー標的ヌクレオチド配列が からなる群より選択される請求項15のプローブミックス。 22.該ハイブリダイゼーションアッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有し、 該ヘルパー標的ヌクレオチド配列が からなる群より選択される請求項15のプローブミックス。 23.該ハイブリダイゼーションアッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有し、 該ヘルパー標的ヌクレオチド配列が からなる群より選択される請求項15のプローブミックス。 24.厳密なハイブリダイゼーションアッセイ条件下で、オリゴヌクレオチド ハイブリダイゼーションアッセイプローブとヌクレオチドポリマーの少なくとも 一部分との間で形成された核酸ハイブリッドを含む組成物であって、該ポリマー が、 およびウラシルのかわりにチミンを有する上記配列のDNA同等物からなる群よ り選択されるヌクレオチド配列からなるものであり、該プローブが、該厳密なハ イブリダイゼーションアッセイ条件下で、マイコプラズマ・ゲニタリウム、マイ コプラズマ・オラレ、マイコプラズマ・ファウシウム、マイコプラズマ・ブッカ レおよびマイコプラズマ・サリバリウム中に存在する核酸よりもマイコプラズマ ・ニューモニエの核酸に優先的にハイブリダイゼーションするものである組成物 。 25.該プローブが、マイコプラズマ・ニューモニエおよびマイコプラズマ・ ニューモニエに密接に関連した分類学上の近縁種のリボゾームRNA、またはリ ボゾームRNAをコードしているDNAの配列を比較することに基づいて化学的 または生物学的に合成されたものである請求項24の組成物。 26.マイコプラズマ・ニューモニエの核酸と長さ18ないし100ヌクレオ チドのオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションアッセイプローブとの間で形 成された核酸ハイブリッドを含む組成物であって、該アッセイプローブが からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似である核酸配列を有 するものであり、該プローブが、マイコプラズマ・ゲニタリウム中に存在する核 酸よりもマイコプラズマ・ニューモニエの核酸に優先的にハイブリダイゼーショ ンするものである組成物。 27.該プローブが、マイコプラズマ・ニューモニエおよびマイコプラズマ・ ニューモニエに密接に関連した分類学上の近縁種のリボゾームRNAまたはリボ ゾームRNAをコードしているDNAの配列を比較することに基づいて化学的ま たは生物学的に合成されたものである請求項26の組成物。 28. およびそれらに対するRNA同等物からなる群より選択されるヌクレオチド配列 を有する長さ18ないし100ヌクレオチドの増幅オリゴヌクレオチド。 29.マイコプラズマ・ニューモニエの存在の検出、およびマイコプラズマ・ ゲニタリウム、マイコプラズマ・オラレ、マイコプラズマ・ファウシウム、マイ コプラズマ・ブッカレまたはマイコプラズマ・サリバリウムからの該マイコプラ ズマ・ニューモニエの識別のための方法であって、下記工程: a) からなる群より選択される配列を有するヌクレオチドポリマーの少なくとも一部 分とともに検出用の安定なハイブリッドを厳密なハイブリダイゼーション条件下 で形成する核酸ハイブリダイゼーションアッセイプローブに、厳密な条件下で試 験試料を接触させ、ここに、該プローブは、該条件下で、マイコプラズマ・ゲニ タリウム、マイコプラズマ・オラレ、マイコプラズマ・ファウシウム、マイコプ ラズマ・ブッカレまたはマイコプラズマ・サリバリウム中に存在する核酸よりも マイコプラズマ・ニューモニエの核酸に優先的にハイブリダイゼーションするも のであり;次いで b)該試験試料中の該ハイブリダイゼーションしたプローブの存在または量を 測定する を含む方法。 30.マイコプラズマ・ニューモニエの存在の検出、および他のマイコプラズ マからの該マイコプラズマ・ニューモニエの識別のための方法であって、下記工 程: a)試験試料を厳密なハイブリダイゼーションアッセイ条件下で核酸ハイブリ ダイゼーションアッセイプローブに接触させ、ここに、該核酸ハイブリダイゼー ションアッセイプローブは、該ハイブリダイゼーションアッセイ条件下において マイコプラズマ・ゲニタリウム中に存在する核酸配列領域よりもマイコプラズマ ・ニューモニエの標的核酸配列領域に優先的にハイブリダイゼーションしうるも の であって、 からなる群より選択されるヌクレオチド配列に実質的に類似の核酸配列を有する ものであり、次いで、 b)該試験試料中のハイブリダイゼーションしたプローブの存在または量を測 定する を含む方法。 31.さらに、少なくとも1つのヘルパーオリゴヌクレオチドの使用を含む請 求項30の方法。 32.マイコプラズマ・ニューモニエの核酸の検出方法であって、下記工程: a)1またはそれ以上の増幅オリゴヌクレオチドおよびマイコプラズマ・ニュ ーモニエの核酸鋳型を含むハイブリッドを形成し、ここに、該1またはそれ以上 の増幅オリゴヌクレオチドは およびそれらに対するRNA同等物 からなる群より選択されるヌクレオチド配列を有するものであり、 b)該鋳型を増幅し;次いで c)厳密なハイブリダイゼーション条件下でマイコプラズマ・ゲニタリウムの 核酸よりもマイコプラズマ・ニューモニエの核酸に優先的にハイブリダイゼーシ ョンしうるオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションアッセイプローブを用い て、増幅された核酸を検出する を含む方法。 33.さらに、該増幅オリゴヌクレオチドが、RNAポリメラーゼにより認識 される核酸配列またはRNAポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進する配 列を含むものである請求項32の方法。 34.マイコプラズマ・ニューモニエの核酸の検出方法であって、下記工程: a)1またはそれ以上の増幅オリゴヌクレオチドおよびマイコプラズマ・ニュ ーモニエの核酸鋳型を含むハイブリッドを形成し、ここに、該1またはそれ以上 の増幅オリゴヌクレオチドは およびそれらのRNA同等物 からなる群より選択されるヌクレオチド配列を必須としてなるものであり、 b)該鋳型を増幅し;次いで c)厳密なハイブリダイゼーション条件下でマイコプラズマ・ゲニタリウムの 核酸よりもマイコプラズマ・ニューモニエの核酸に優先的にハイブリダイゼーシ ョンしうるオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションアッセイプローブを用い て、増幅された核酸を検出する を含む方法。 35.さらに、該増幅オリゴヌクレオチドが、RNAポリメラーゼにより認識 される核酸配列またはRNAポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進する配 列を含むものである請求項34の方法。 36.試験試料中のマイコプラズマ・ニューモニエまたはマイコプラズマ・ゲ ニタリウムの核酸の増幅方法であって、下記工程: a)1またはそれ以上の増幅オリゴヌクレオチドおよびマイコプラズマ・ニュ ーモニエまたはマイコプラズマ・ゲニタリウムいずれかの核酸鋳型を含むハイブ リッドを形成し、ここに、該1またはそれ以上の増幅オリゴヌクレオチドは またはそれらに対するRNA同等物からなる群より選択されるヌクレオチド配列 を有するものであり;次いで、 b)該鋳型を増幅する を含む方法。 37.さらに、該増幅オリゴヌクレオチドが、RNAポリメラーゼにより認識 される核酸配列またはRNAポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進する配 列を含むものである請求項36の方法。
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