JPH09503216A

JPH09503216A - 抗菌性組成物に関する改良

Info

Publication number: JPH09503216A
Application number: JP7510597A
Authority: JP
Inventors: バクー，マンモハン
Original assignee: ユニリーバー・ナームローゼ・ベンノートシヤープ
Priority date: 1993-10-05
Filing date: 1994-09-28
Publication date: 1997-03-31
Anticipated expiration: 2016-04-25
Also published as: EP0722327B1; DE69426333D1; WO1995009638A1; DE69426333T2; HUT74379A; JP3162078B2; AU7810694A; AU695290B2; HU9600873D0; BR9407770A; US5629282A; EP0722327A1; CA2169084A1; ES2153861T3

Abstract

(57)【要約】本発明は特定化合物からなる抗菌性組成物、抗菌剤としての前記化合物の使用、前記化合物からなる治療用もしくは医療用組成物の製造、および物体を前記化合物で処理することを含む物体の消毒方法に関するものである。これら化合物は少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなるペプチドとして同定される。本発明を食品および口内衛生の分野での使用に関し説明するが、本発明は家庭および／または工業衛生の分野で特に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】抗菌性組成物に関する改良発明の技術分野：本発明は、特定化合物からなる抗菌性組成物、抗菌剤としての前記化合物の使用、前記化合物からなる治療用もしくは医療用組成物の製造、および物質を前記化合物で処理する工程を含む物質の消毒方法に関するものである。本発明を食品および口内衛生の分野での使用に関し説明するが、本発明は家庭および／または工業衛生の分野で特に有用である。発明の背景：ペプチドはアミノ酸のポリマーである。アミノ酸は一般にα−アミノカルボン酸であって、殆どがα−炭素にて置換された他の官能基を有する。ペプチドは単一種類のアミノ酸またはアミノ酸の混合物を縮合させて合成することができる。天然に存在するペプチドは分子量および性質において著しく相違するが、一般に約２０個の天然アミノ酸モノマーの種々異なる個数のポリマーで構成される。これらは「標準的」アミノ酸として知られ、一般にＬ−キラル性を有すると共に、高度に構造化された配列を有するペプチドを形成する。ランダムペプチドは実験室にて比較的容易に合成しうるのに対し、特定の構造化された配列を有するペプチドはより複雑な合成法を必要とする。合成ペプチドが統計上ランダムでない構造だけを有することが望ましければ、これは合成の過程で反応混合中に存在するアミノ酸のモル比を変化させて達成することができる。より高度に構造化されたペプチドについては格別の注意を払って個々の工程で反応が進行することを確保せねばならず、これには反応ブロック剤またはいわゆる固相合成のいずれかの使用を必要とし、ペプチドを成長させて過剰の反応体を洗出しうるような巨視的基質を用いる。次いで反応混合物の性質を各延長化工程の間で変化させて、特定配列が生成されるよう確保することができる。本明細書において、「プソイド−ランダム」という用語は完全ランダムなペプチドおよびペプチド連鎖の単一工程延長にペプチド成長を抑制もしくは制限して残基の規則配列を生成させる工程を用いていないペプチドの両者を意味すべく使用される。天然に存在するよりもずっと少ない構造化を有するこれらペプチドが公知であり、薬物キャリヤとして或いは免疫学分析技術における試薬として使用されている。特定アミノ酸配列を有する高度に構造化されたペプチドは、特定の生化学反応に関与することが知られている。この種のペプチドの例はたとえばインシュリンのようなホルモンおよびたとえばアミラーゼのような酵素を包含し、特異的な代謝機能を有する。これらペプチドにおけるアミノ酸配列の若干の変化は、完全ではないが部分的な機能の変化をもたらしうる。天然に存在する或る種の高度に構造化されたペプチドは、微生物をこれらに露出すると抑制もしくは溶解活性を示すことが知られている。たとえば或る種のヘビ毒成分のような、高級植物もしくは動物の細胞に対し同様な活性を示す他のペプチドも知られている。ＥＰ５１０９１２号（森永乳業）は１つもしくはそれ以上の特定群のアミノ酸配列を有する抗菌性ペプチドを開示しており、これら配列は牛ラクトフェリンの全配列から誘導されると思われ、この蛋白質の酵素分解によって単離することができる。さらにＥＰ５１０９１２号は、一般にシェパード等の方法［ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエティー・パーキンＩ、第５３８頁（１９８１）］にしたがい、特定ペプチドを産生させるため自動化ペプチド合成技術を用いる合成法により産生されるペプチドにも関するものである。一般に、いわゆる「遺伝子工学」ルートによる若干複雑なペプチドの合成は比較的簡単な仕事であると思われる。しかしながら近年の相当な進歩にも拘らず特定配列の特定ペプチドの合成は工業規模ではまだ高価であって、たとえば薬理学的興味を有する特に貴重な化合物など比較的数少ないペプチドおよび或る種の酵素に限定されている。したがって構造的に高度に特異的な抗微生物ペプチドも知られているが、これらは高価かつ製造困難である。抗菌性物質の毒性は「ログ−キルス（ｌｏｇ−ｋｉｌｌｓ）」の用語で現すのが便利であり、たとえば培養における細胞の生存カウント数を９９．９％減少させる物質は３ログ−キルスにて効果的であるのに対し、生存カウント数を１００００００のファクターで減少させる物質は６ログ−キルスにて効果的である。多くの抗菌性物質の用途につき、３〜５ログ−キルスが優秀な性能であると考えられる。歯科病原体については２ログ−キルスが充分な性能を示すと考えられる。明らかなように、特定抗菌性物質の効果は１部には物質が作用する環境および物質の濃度によって決定される。特に細菌集団においては或る細胞が物質に対し耐性であり、高濃度においてさえ効果が１００％（無限のログ −キルス）に達しえない一方、ずっと低い濃度でも３〜５ログ−キルスを達成しうることに注目すべきである。さらに、毒性は細菌の種類毎に変化すると予想される。上記から判るように或る種の有効な抗菌性ペプチドが知られているが、これらは比較的多量に製造するのが高価につくとと予想される。抗菌作用は簡単なペプチドでも観察されている。ＥＰ０１４９２５４号（ニューヨーク州立大学：１９８５）において、ポリＬ−ヒスチジン（約１００００の平均分子量を有する）は抗細菌作用と抗カビ作用とを有することが示されている。この作用は、ヒトおよび旧大陸サルの口内に存在する天然産のヒスチジンリッチなペプチドに対する前記分子の構造類似性に基づくと思われる。ＥＰ０２５４４１９号は、特に細菌ストレプトミセス・アルブスのサブ群（Ｄｅｐ３８３４ＦＲＩ）により産生されるポリリジンが抗ウィルス活性を有することを開示している。ＧＢ１２３７９１８号は、一般式Ｒ−Ｌ−プロピル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−グリシンアミドおよびその塩［式中、Ｒはグリシン、チロシン、ロイシン、トリプトファン、セリン、３−ヒドロキシピコリン酸、アスパラギン、フェニルアラニン、プロリン、グルタミン酸、アルギニンおよびヒスチジンから選択されるアミノ酸である］を有するテトラペプチドが広範囲の細菌に対し抗菌作用を示すことを開示している。たとえば家庭用清浄組成物および家庭用衛生組成物のような製品に抗菌性化合物を使用するには、これらを低価格にて多量に入手しえねばならず、比較的低レベルで存在しても広範囲の細菌に対し高ログ−キルスにて有効でなければならない。発明の簡単な説明：今回アルギニン、リジンおよびオルニチンの１種もしくはそれ以上からなるプソイド−ランダムペプチドは広範囲の細菌に対し驚異的に有効な抗菌特性を示し、その結果として比較的容易に得られると共に広範囲の用途に使用しうることが突き止められた。これらペプチドは、従来技術にて公知のポリ−ヒスチジンよりも抗菌剤として効果的であると思われる。本発明は特に、媒体中に０．１ｍｇ／ｍＬ程度に低いペプチド濃度で存在させた場合に細菌細胞集団に対し３以上のログ−キルスを達成するプソイド−ランダムペプチドに関するものである。特に、これらペプチドは残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなるアミノ酸の混合物のランダム縮合によって生成されるものである。発明の詳細な説明：本発明の第１面は抗菌剤としてのプソイド−ランダム合成ペプチドの使用であり、このペプチドは少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とで構成される。本発明の他面によればプソイド−ランダム合成ペプチドを含む液状もしくはペースト状抗菌性組成物が提供され、このペプチドは少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とで構成される。他面において本発明は細菌病を処置するための薬剤もしくは治療組成物を製造する際のプソイド−ランダム合成ペプチドの使用であり、このペプチドは少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とで構成される。さらに他面において本発明は人体もしくは動物体で実施される治療法以外の物体の消毒方法であり、この方法は物体を抗菌性プソイド−ランダム合成ペプチドで処理することからなり、前記ペプチドは少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とで構成される。本発明の背景から明らかなように、抗菌活性を有するとは従来思われていなかった本発明の各具体例で使用されるプソイド−ランダムペプチドは比較的低価格で得ることができる。さらに、これらペプチドは広範囲の細菌株に対し驚くほど効果的であることも判明した。正確な配列の必要がないので、ペプチドの製造コストは自動化ペプチド合成技術および／またはたとえば細胞原料の遺伝子工学のような他の生物工学技術を必要とせず、著しく低下する。ペプチド：典型的にはペプチドは７より高い等電点を有するアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物から選択される少なくとも１種のアミノ酸と、アルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物から選択される嵩高の官能基を有する少なくとも１種のアミノ酸とのコポリマーを含む。これらプソイド−ランダムペプチドは３より高いログ−キルスを達成することができ、多くの場合は０．１ｍｇ／ｍＬ程度に低い濃度で存在する際に６を越えるログ−キルスを達成しうることが突き止められた。特定の理論に拘束されるものでないが、効果的な抗菌活性には塩基性アミノ酸残基と嵩高アミノ酸残基との両者の存在が必要とされると思われるが、残基の正確な配列は一般に無関係である。嵩高の基は全部で５個もしくはそれ以上の炭素および異原子を有するものである。これらはトルイル環（フェニルアラニンおよびチロシンの場合）およびインドール（トリプトファンの場合）から誘導される芳香族基、並びにたとえばアルギニンのグアニジン基およびリジンのアミノ基のような充分長い側鎖を包含する。非標準的なアミノ酸も本発明による組成物に存在させうるが、入手性と生物分解性とコストとの理由から本発明のアミノ酸は天然に存在するものとするのが好適である。これらは、必須アミノ酸でないが充分高い等電点（１０に近い）を有するオルニチンを包含する。アルギニン、リジンおよびオルニチンは充分高い等電点と側鎖における充分嵩高の官能基とを有して、そのホモポリマー（すなわちポリ−アルギニン、ポリ− リジンおよびポリ−オルニチン）は本発明の各具体例にて有効なペプチドとなることに注目すべきである。特に好適なペプチドはアルギニン、リジンもしくはオルニチンのホモポリマーおよびリジンとフェニルアラニンとのコポリマー、アルギニンとトリプトファンとのコポリマーおよび／またはリジンとトリプトファンとのコポリマーからなるものである。混合系も可能である。大して好ましくないが１種の分子はオルミチンとトリプトファンとのコポリマーであり、これはより狭い範囲の細菌に対して活性であると思われるからである。上記アミノ酸は全てＬキラル性にて天然に存在し、したがってこの形態のアミノ酸を使用するのが好適である。２種類のアミノ酸のモル比は好ましくは５：１〜１：２であり、塩基性アミノ酸が同等もしくは優勢なモル量が好適である。他のアミノ酸残基もペプチド中に存在させうる。下記の実施例で示すように、セリンおよびアラニンも組成物の効能を低下させることなく存在させることができる。塩基性もしくは芳香族アミノ酸以外のアミノ酸を５０％未満の量でペプチド中に存在させることが好適である。本発明によるペプチドは典型的には５０００個までのアミノ酸残基、より好ましくは３０００個までのアミノ酸残基で構成される。これら範囲内でより長い連鎖はより短い連鎖よりも効果的であると思われる。５ｋＤ未満の分子量を有するペプチドは抗菌剤としてずっと低い効果を示すことが判明した。液状もしくはペースト状の生成物におけるペプチドの典型的レベルは０．００１〜１０重量％の範囲であり、好適レベルは０．０１〜１．０重量％である。ペプチドの有効濃度は０．１〜１０ｍｇ／ｍＬの範囲であり、約０．５〜１ｍｇ／ｍＬの濃度が特に好適である。羊赤血球の血液分解データが示すところでは、本発明のペプチドは通常の使用条件下で哺乳動物に対し有害となるほど血液分解性でない。本発明のペプチドは他の抗微生物剤および処置（たとえば抗生物質、高温度および高圧力）と組合せて使用することができる。しかしながら、高められた圧力および温度における処理は特に家庭用清浄では回避するのが好ましい。表面活性剤：表面活性剤は本発明による組成物の必須成分でない。表面活性剤は好ましくは非イオン型、両性イオン型、双性イオン型もしくは陽イオン型である。陰イオン型表面活性剤は、ペプチドと相互作用して特にグラム陰性細菌に対するペプチドの抗微生物活性を妨げ或いは減少させるので大して好適でない。表面活性剤は好ましくは非イオン型表面活性剤、両性イオン型表面活性剤またはこれら２種の混合物である。好ましくは非イオン型表面活性剤はアルコキシル化された非イオン型表面活性剤である。エトキシル化された非イオン型表面活性剤が特に好適である。好ましくは両性イオン型表面活性剤はベタインである。好適な表面活性剤レベルは組成物に対し１〜３０重量％の範囲である。組成物：本発明の特に好適な具体例は次の成分を含む：（ａ）０．００１〜２．０重量％の上記ペプチド、（ｂ）１〜３０重量％の非イオン型表面活性剤、（ｃ）組成物の残部としての適合性の水性液体媒体。特に好適な抗菌性組成物は次の成分を含む：（ａ）少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなる０．００１〜０．１重量％のペプチド、（ｂ）１〜３０重量％の表面活性剤（この表面活性剤はエトキシル化アルコール、ベタインもしくはその混合物を含む）、および（ｃ）組成物の残部としての適合性の水性媒体。上記必須成分の他に、本発明による組成物はさらに組成物の用途を考慮して選択される成分を含むこともでき、ただしこれら成分はペプチドに対し適合性のものとする。組成物の用途は好ましくは家庭用の清浄および衛生組成物であるが、本発明はヒトの皮膚、歯もしくは毛髪に対し化粧、洗浄もしくはクレンジングの目的で使用する製品とすることもできる。この種の組成物は限定はしないが化粧石鹸、顔もしくは人体の液体洗浄剤、歯磨、マウスウォッシュ、発汗防止剤および脱臭剤、シェービングフォーム、クリームおよび石鹸、シャワーゲル、化粧品およびシャンプー製品を包含する。本発明による組成物の医療および治療組成物における使用も排除されない。ここに非限定的に説明した本発明の具体例につき、特定種類の細胞に対する特定プソイド−ランダムペプチドの効果は、ペプチドの存在下で培養した細胞培養物とペプチドの不存在下で培養した同様な細胞培養物との間の生存カウント数の比較により決定することができる。これは比較的簡単な技術であって、その使用により特定用途に適するペプチドを確認することができる。ここに記載した或る種のヘテロポリマーは抗ウィルス、抗カビもしくは抗真菌活性を有することも了解されよう。以下、非限定的実施例により本発明をさらに説明する。実施例：以下の実施例は、本発明による組成物の抗微生物活性を特に細菌に対する活性を参照して例示する。これら実施例に使用した材料は次のように同定される。ペプチドは角括弧にて標準的表示法で示した成分アミノ酸により表中に示され、必要に応じこれらアミノ酸の比およびペプチドの平均分子量をも示す。ペプチドの大部分は１種のアミノ酸のホモポリマーまたは２種のアミノ酸のヘテロポリマーのいずれかである。これらペプチドは全てシグマ社から入手しうる。幾つかの実施例にて［Ｐｒｏ，Ｇｌｙ−Ｐｒｏ］が使用される。このペプチドは［Ｌ−プロリンおよびＬ−グリシン−Ｌ− プロリン］単位の反復ブロックで構成され、ｐ６６６５としてシグマ社から入手しうる。他の実施例においては［Ａｒｇ，Ｐｒｏ、Ｔｈｒ］として同定される物質を使用する。この物質はアルギニン、プロリンおよびスレオニンの６：３：１の比におけるランダムポリマーである。この物質はシグマ社から入手しうる。これら実施例の組成物に存在させる表面活性剤および他の成分を以下に示す：ＳＤＳ：ドデシル硫酸ナトリウム、陰イオン型洗剤、ＢＤＨ社。トリトン：トリトンＸ−１００（商標）、非イオン型表面活性剤、ＢＤＨ社。ツイーン：ツイーン（商標）８０。実施例１：下表１〜３に示したように液体媒体における組成物を作成し、２時間にわたり培養し、次いで一連の希釈にて試料を栄養寒天（オキソイド（商標））に塗沫して全生存カウント数／ｍＬを測定し、さらにペプチドの存在下および不存在下における寒天プレートの培養後に形成されたコロニーをカウントすることにより抗微生物活性を決定した。存在させる場合、ペプチドは２．５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在させた。毒性の結果は、２．５×１０⁶〜２．３×１０⁸の生存細胞数／ｍＬの初期細菌濃度につき対数死亡数（log deaths）として示す。より高い尺度はより効果的な抗微生物性組成物を示し、すなわち５は生存細胞カウント数における１０^-5の減少である。便宜上、３より大のログ−キルスが観察された例を太字で示す。第１表に示した結果から見られるように、本発明による組成物は殆ど全ての環境にてＳ．アウレウスの生存カウント数における顕著な低下を示したのに対し、他のランダムペプチドが存在する組成物は表面活性剤ＳＤＳが存在する場合を除き生存カウント数を減少させない。驚くことに、ＳＤＳはＳ．アウレウスに対し抗微生物活性を示すと思われ、したがってＳＤＳの存在下における生存カウント数の低下も予想されるが、ＳＤＳ単独では生存カウント数を減少させない。これら結果から見られるように、ペプチドにおける成分アミノ酸の種類が特に重要である。アルギニン、オルニチンもしくはリジンが唯一の成分として存在する場合、許容しうる死滅が一般に得られる。これら成分が存在しない場合は、許容しうる死滅が得られない。これら結果が示すように、アミノ酸の相対比は或る程度重要である。リジンとチロシンもしくはトリプトファンのいずれかとを１：９の比で用いた実施例において、１５％未満のリジンを両者の場合に存在させてると不良な死滅が観察される。この比が一層均衡してリジンとチロシンもしくはトリプトファンとの比が１：１または一層良好には４：１となれば許容しうる死滅が観察される。これら結果は、ペプチドの寸法が或る程度重要であることを示す。ポリ−リジンを使用する例において、３．９７ｋＤの分子量を有するポリマーは貧弱な結果を示したのに対し、７．９〜２２４．５ｋＤの分子量を有するポリマーは許容しうる死滅を示した。ポリ−アルギニンを用いた実施例につき見られるように、この菌株に対し境界的結果が８．９ｋＤの分子量にて得られた。幾つかの変則的な結果が認められる：すなわちポリ−オルニチンは２３ｋＤおよび４６ｋＤの両者にて許容しうる結果を与えるのに対し、類似した分子量（３１ｋＤ）を有するオルニチン／トリプトファンの４：１コポリマーは貧弱な結果を示す。しかしながら、後記の実施例で示すように、このコポリマーは或る種の細菌に対し有効である。６．３ｋＤの分子量を有する［Ｈｉｓ，Ｈｉｓ］は比較的不良の死滅を示すことが注目される。第２表に示した結果から見られるように、本発明による組成物は殆ど全ての環境にて大腸菌の生存カウント数における顕著な減少を示したのに対し、他のランダムペプチドが存在する組成物は生存カウント数を減少させない。第１表の場合と同様に、表面活性剤ＳＤＳが存在すれば異なる性能が示されることも判るであろう。ペプチドおよびＳＤＳは大腸菌に対しいずれか一方の場合よりも大きい相互親和性を有すること、したがってＳＤＳの存在下における生存カウント数の低下は予想されない。一般に第２表における結果は、第１表の場合と同じ効果を分子量および各成分の比に基づいて示す。第２表で見られるように、８．９ｋＤの分子量を有するポリ−アルギニンはより高い分子量のポリ−アルギニンよりもこの菌株に対しずっと効果が低い。さらに［Ｈｉｓ，Ｈｉｓ］はより良好な比較例の１つであるが、効果は本発明のペプチドで得られるよりもずっと低いことが判るであろう。第３表に示した結果から見られるように、本発明による組成物は殆ど全ての環境にてＰ．エアロギノーサの生存カウント数における顕著な減少を示したのに対し、他のランダムペプチドが存在する組成物は生存カウント数を減少させない。第２表の場合と同様に、表面活性剤ＳＤＳが存在すれば異なる性能が示されることも判るであろう。さらにペプチドとＳＤＳとはＰ．エアロギノーサに対しいずれか一方の場合よりもＰ．エアロギノーサに対し大きい相互親和性を有し、したがってＳＤＳの存在下における生存カウント数の低下は予想されない。さらにオルニチンとトリプトファンとのヘテロポリマーはＰ．エアロギノーサに対し或る程度の活性を示すのに対し、このポリマーは第１表および第２表に示した微生物に対し殆どまたは全く活性を示さないことも判るであろう。実施例２：下記表４は、ポリ−リジン（１３２．４ｋＤ）およびポリ−アルギニン（１３９．２ｋＤ）の濃度を変化させる効果を、これらポリアミノ酸で得られるログ− キルスに関して示す。これら全ての場合、初期摂取材料は３．７×１０⁸〜２．１×１０⁹生存細胞数／ｍＬで構成し、培養を室温にて２時間にわたり進行させた。実施例３：上記実施例１および２は、一般的な家庭細菌である細菌株に関するものである。本発明の一層広い利用性を例示するため、以下の実施例はストレプトコッカスミュータンス、すなわちヒト口内に一般的に存在してデンタルカリエスの発生に関与すると認められた細菌に関するものである。これら実施例は異なる鎖長のペプチドの作用をも示す。抗微生物活性は、ストレプトコッカスミュータンスＮＣＴＣ１０４４９の細胞をブロス中でペプチドの不存在下または特定分子量のポリ−アルギニンペプチドの存在下で培養して決定した。存在させる場合、ペプチドは分子量とは無関係に１．０ｍｇ／ｍＬの全濃度にて存在させた。下記表５に示す毒性の結果は、所定時間におけるブロスの試料中の生存カウント数として示す。第５表から見られるように、比較試料は指数増殖を示したのに対し、ポリ−アルギニンを含有する試料は全て実験の時間経過にわたり極めて低いカウント数を示した。高レベルの抑制がペプチドの分子量とは無関係に得られたが、より高い分子量における一層顕著な抑制に対する一般的傾向が見られる。より高い分子量にて、比例的に少ないペプチド分子が試料中に存在することに注目すべきである。下記表６は、一定分子量のペプチドを用い、存在する［Ａｒｇ，Ｔｒｐ］ペプチドのレベルを変化させる効果を示すデータである。この実施例において見られるように、ストレプトコッカスミュータンスＮＣＴＣ１０４４９の増殖はペプチドの存在により抑制された。第７表は一定分子量のペプチドを用い、存在する［Ｌｙｓ，Ｔｒｐ］ペプチドのレベルを変化させる効果を示すデータである。この実施例において、Ｓ．ミュータンスＮＣＴＣ１０４４９の増殖はペプチドの存在により抑制されたことが判るであろう。実施例３第８表は、アクチノミセス・ビスカスＴ１４Ｖの増殖に対する本発明によるペプチドの抑制作用を示す。データをポリ［ａｒｇ，ｔｒｐ］およびポリ［ｌｙｓ，ｔｒｐ］につき示し、これらは初期生存カウント数（１，０００，０００）および濃度を変化させたペプチドの存在下で４時間にわたり培養した後の最終生存カウント数（１，０００，０００）を示す。実施例４：第９表は、大腸菌およびＬ．イノキュラに対し評価した数種のペプチドに関する最小抑制濃度（ＭＩＣ）をｍｇ／ｍＬで示す。ＭＩＣはＰＧＹ培地にて次のように測定した。ＰＧＹ培地における試験微生物の１晩培養物を、ＰＧＹ培地における１００００ＣＦＵ／ｍＬの出発接種レベルまで希釈した。測定は２．５、１．２５、０．６２５、０．３１、０．１５５、０．０７８、０．０３９および０．０２ｍｇ／ｍＬの一連の希釈物、並びに無菌培地およびポリアミノ酸を含まない対照を有するブランクウェルに対する対比を用いタイテレック（商標）プレートで行った。これらの結果から見られるように、ペプチドは比較的低い濃度にて有効である。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年８月２９日【補正内容】抗菌性組成物に関する改良発明の技術分野：本発明は、特定化合物からなる抗菌性組成物、抗菌剤としての前記化合物の使用、前記化合物からなる治療用もしくは医療用組成物の製造、および物質を前記化合物で処理する工程を含む物質の消毒方法に関するものである。本発明を食品および口内衛生の分野での使用に関し説明するが、本発明は家庭および／または工業衛生の分野で特に有用である。発明の背景：ペプチドはアミノ酸のポリマーである。アミノ酸は一般にα−アミノカルボン酸であって、殆どがα−炭素にて置換された他の官能基を有する。ペプチドは単一種類のアミノ酸またはアミノ酸の混合物を縮合させて合成することができる。天然に存在するペプチドは分子量および性質において著しく相違するが、一般に約２０個の天然アミノ酸モノマーの種々異なる個数のポリマーで構成される。これらは「標準的」アミノ酸として知られ、一般にＬ−キラル性を有すると共に、高度に構造化された配列を有するペプチドを形成する。ランダムペプチドは実験室にて比較的容易に合成しうるのに対し、特定の構造化された配列を有するペプチドはより複雑な合成法を必要とする。合成ペプチドが統計上ランダムでない構造だけを有することが望ましければ、これは合成の過程で反応混合中に存在するアミノ酸のモル比を変化させて達成することができる。より高度に構造化されたペプチドについては格別の注意を払って個々の工程で反応が進行することを確保せねばならず、これには反応ブロック剤またはいわゆる固相合成のいずれかの使用を必要とし、ペプチドを成長させて過剰の反応体を洗出しうるような巨視的基質を用いる。次いで反応混合物の性質を各延長化工程の間で変化させて、特定配列が生成されるよう確保することができる。本明細書において、「プソイド−ランダム」という用語は完全ランダムなペプチドおよびペプチド連鎖の単一工程延長にペプチド成長を抑制もしくは制限して残基の規則配列を生成させる工程を用いていないペプチドの両者を意味すべく使用される。天然に存在するよりもずっと少ない構造化を有するこれらペプチドが公知であり、薬物キャリヤとして或いは免疫学分析技術における試薬として使用されている。特定アミノ酸配列を有する高度に構造化されたペプチドは、特定の生化学反応に関与することが知られている。この種のペプチドの例はたとえばインシュリンのようなホルモンおよびたとえばアミラーゼのような酵素を包含し、特異的な代謝機能を有する。これらペプチドにおけるアミノ酸配列の若干の変化は、完全ではないが部分的な機能の変化をもたらしうる。天然に存在する或る種の高度に構造化されたペプチドは、微生物をこれらに露出すると抑制もしくは溶解活性を示すことが知られている。たとえば或る種のヘビ毒成分のような、高級植物もしくは動物の細胞に対し同様な活性を示す他のペプチドも知られている。ＥＰ５１０９１２号（森永乳業）は１つもしくはそれ以上の特定群のアミノ酸配列を有する抗菌性ペプチドを開示しており、これら配列は牛ラクトフェリンの全配列から誘導されると思われ、この蛋白質の酵素分解によって単離することができる。さらにＥＰ５１０９１２号は、一般にシェパード等の方法［ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエティー・パーキンＩ、第５３８頁（１９８１）］にしたがい、特定ペプチドを産生させるため自動化ペプチド合成技術を用いる合成法により産生されるペプチドにも関するものである。一般に、いわゆる「遺伝子工学」ルートによる若干複雑なペプチドの合成は比較的簡単な仕事であると思われる。しかしながら近年の相当な進歩にも拘らず特定配列の特定ペプチドの合成は工業規模ではまだ高価であって、たとえば薬理学的興味を有する特に貴重な化合物など比較的数少ないペプチドおよび或る種の酵素に限定されている。したがって構造的に高度に特異的な抗微生物ペプチドも知られているが、これらは高価かつ製造困難である。抗菌性物質の毒性は「ログ−キルス（ｌｏｇ−ｋｉｌｌｓ）」の用語で現すのが便利であり、たとえば培養における細胞の生存カウント数を９９．９％減少させる物質は３ログ−キルスにて効果的であるのに対し、生存カウント数を１００００００のファクターで減少させる物質は６ログ−キルスにて効果的である。多くの抗菌性物質の用途につき、３〜５ログ−キルスが優秀な性能であると考えられる。歯科病原体については２ログ−キルスが充分な性能を示すと考えられる。明らかなように、特定抗菌性物質の効果は１部には物質が作用する環境および物質の濃度によって決定される。特に細菌集団においては或る細胞が物質に対し耐性であり、高濃度においてさえ効果が１００％（無限のログ −キルス）に達しえない一方、ずっと低い濃度でも３〜５ログ−キルスを達成しうることに注目すべきである。さらに、毒性は細菌の種類毎に変化すると予想される。上記から判るように或る種の有効な抗菌性ペプチドが知られているが、これらは比較的多量に製造するのが高価につくとと予想される。抗菌作用は簡単なペプチドでも観察されている。ＥＰ０１４９２５４号（ニューヨーク州立大学：１９８５）において、ポリＬ−ヒスチジン（約１００００の平均分子量を有する）は抗細菌作用と抗カビ作用とを有することが示されている。この作用は、ヒトおよび旧大陸サルの口内に存在する天然産のヒスチジンリッチなペプチドに対する前記分子の構造類似性に基づくと思われる。ＥＰ０２５４４１９号は、特に細菌ストレプトミセス・アルブスのサブ群（Ｄｅｐ３８３４ＦＲＩ）により産生されるポリリジンが抗ウィルス活性を有することを開示している。ＧＢ１２３７９１８号は、一般式Ｒ−Ｌ−プロピル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−グリシンアミドおよびその塩［式中、Ｒはグリシン、チロシン、ロイシン、トリプトファン、セリン、３−ヒドロキシピコリン酸、アスパラギン、フェニルアラニン、プロリン、グルタミン酸、アルギニンおよびヒスチジンから選択されるアミノ酸である］を有するテトラペプチドが広範囲の細菌に対し抗菌作用を示すことを開示している。たとえば家庭用清浄組成物および家庭用衛生組成物のような製品に抗菌性化合物を使用するには、これらを低価格にて多量に入手しえねばならず、比較的低レベルで存在しても広範囲の細菌に対し高ログ−キルスにて有効でなければならない。発明の簡単な説明：今回アルギニン、リジンおよびオルニチンの１種もしくはそれ以上からなるプソイド−ランダムペプチドは表面活性剤の存在下で広範囲の細菌に対し驚異的に有効な抗菌特性を示し、その結果として比較的容易に得られると共に広範囲の用途に使用しうることが突き止められた。これらペプチドは、従来技術にて公知のポリ−ヒスチジンよりも抗菌剤として効果的であると思われる。本発明は特に、媒体中に０．１ｍｇ／ｍＬ程度に低いペプチド濃度で存在させた場合に細菌細胞集団に対し３以上のログ−キルスを達成するプソイド−ランダムペプチドに関するものである。特に、これらペプチドは残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなるアミノ酸の混合物のランダム縮合によって生成されるものである。発明の詳細な説明：本発明の第１面は少なくとも１重量％の表面活性剤とプソイド−ランダム合成ペプチドとを含む液状もしくはペースト状抗菌性組成物であり、このペプチドは少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とで構成される。他面において本発明は人体もしくは動物体で実施される治療法以外の物体の消毒方法であり、この方法は物体を少なくとも１％の表面活性剤と抗菌性プソイド −ランダム合成ペプチドとからなる組成物で処理することからなり、前記ペプチドは少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とで構成される。本発明の背景から明らかなように、抗菌活性を有するとは従来思われていなかった本発明の各具体例で使用されるプソイド−ランダムペプチドは比較的低価格で得ることができる。さらに、これらペプチドは広範囲の細菌株に対し驚くほど効果的であることも判明した。正確な配列の必要がないので、ペプチドの製造コストは自動化ペプチド合成技術および／またはたとえば細胞原料の遺伝子工学のような他の生物工学技術を必要とせず、著しく低下する。ペプチド：典型的にはペプチドは７より高い等電点を有するアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物から選択される少なくとも１種のアミノ酸と、アルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物から選択される嵩高の官能基を有する少なくとも１種のアミノ酸とのコポリマーを含む。これらプソイド−ランダムペプチドは３より高いログ−キルスを達成することができ、多くの場合は０．１ｍｇ／ｍＬ程度に低い濃度で存在する際に６を越えるログ−キルスを達成しうることが突き止められた。特定の理論に拘束されるものでないが、効果的な抗菌活性には塩基性アミノ酸残基と嵩高アミノ酸残基との両者の存在が必要とされると思われるが、残基の正確な配列は一般に無関係である。嵩高の基は全部で５個もしくはそれ以上の炭素および異原子を有するものである。これらはトルイル環（フェニルアラニンおよびチロシンの場合）およびインドール（トリプトファンの場合）から誘導される芳香族基、並びにたとえばアルギニンのグアニジン基およびリジンのアミノ基のような充分長い側鎖を包含する。非標準的なアミノ酸も本発明による組成物に存在させうるが、入手性と生物分解性とコストとの理由から本発明のアミノ酸は天然に存在するものとするのが好適である。これらは、必須アミノ酸でないが充分高い等電点（１０に近い）を有するオルニチンを包含する。アルギニン、リジンおよびオルニチンは充分高い等電点と側鎖における充分嵩高の官能基とを有して、そのホモポリマー（すなわちポリ−アルギニン、ポリ− リジンおよびポリ−オルニチン）は本発明の各具体例にて有効なペプチドとなることに注目すべきである。特に好適なペプチドはアルギニン、リジンもしくはオルニチンのホモポリマーおよびリジンとフェニルアラニンとのコポリマー、アルギニンとトリプトファンとのコポリマーおよび／またはリジンとトリプトファンとのコポリマーからなるものである。混合系も可能である。大して好ましくないが１種の分子はオルミチンとトリプトファンとのコポリマーであり、これはより狭い範囲の細菌に対して活性であると思われるからである。上記アミノ酸は全てＬキラル性にて天然に存在し、したがってこの形態のアミノ酸を使用するのが好適である。２種類のアミノ酸のモル比は好ましくは５：１〜１：２であり、塩基性アミノ酸が同等もしくは優勢なモル量が好適である。他のアミノ酸残基もペプチド中に存在させうる。下記の実施例で示すように、セリンおよびアラニンも組成物の効能を低下させることなく存在させることができる。塩基性もしくは芳香族アミノ酸以外のアミノ酸を５０％未満の量でペプチド中に存在させることが好適である。本発明によるペプチドは典型的には５０００個までのアミノ酸残基、より好ましくは３０００個までのアミノ酸残基で構成される。これら範囲内でより長い連鎖はより短い連鎖よりも効果的であると思われる。５ｋＤ未満の分子量を有するペプチドは抗菌剤としてずっと低い効果を示すことが判明した。液状もしくはペースト状の生成物におけるペプチドの典型的レベルは０．００１〜１０重量％の範囲であり、好適レベルは０．０１〜１．０重量％である。ペプチドの有効濃度は０．１〜１０ｍｇ／ｍＬの範囲であり、約０．５〜１ｍｇ／ｍＬの濃度が特に好適である。羊赤血球の血液分解データが示すところでは、本発明のペプチドは通常の使用条件下で哺乳動物に対し有害となるほど血液分解性でない。本発明のペプチドは他の抗微生物剤および処置（たとえば抗生物質、高温度および高圧力）と組合せて使用することができる。しかしながら、高められた圧力および温度における処理は特に家庭用清浄では回避するのが好ましい。表面活性剤：表面活性剤は本発明による組成物の必須成分である。表面活性剤は好ましくは非イオン型、両性イオン型、双性イオン型もしくは陽イオン型である。陰イオン型表面活性剤は、ペプチドと相互作用して特にグラム陰性細菌に対するペプチドの抗微生物活性を妨げ或いは減少させるので大して好適でない。表面活性剤は好ましくは非イオン型表面活性剤、両性イオン型表面活性剤またはこれら２種の混合物である。好ましくは非イオン型表面活性剤はアルコキシル化された非イオン型表面活性剤である。エトキシル化された非イオン型表面活性剤が特に好適である。好ましくは両性イオン型表面活性剤はベタインである。好適な表面活性剤レベルは組成物に対し１〜３０重量％の範囲である。組成物：本発明の特に好適な具体例は次の成分を含む：（ａ）０．００１〜２．０重量％の上記ペプチド、（ｂ）１〜３０重量％の非イオン型表面活性剤、（ｃ）組成物の残部としての適合性の水性液体媒体。特に好適な抗菌性組成物は次の成分を含む：（ａ）少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなる０．００１〜０．１重量％のペプチド、（ｂ）１〜３０重量％の表面活性剤（この表面活性剤はエトキシル化アルコール、ベタインもしくはその混合物を含む）、および（ｃ）組成物の残部としての適合性の水性媒体。上記必須成分の他に、本発明による組成物はさらに組成物の用途を考慮して選択される成分を含むこともでき、ただしこれら成分はペプチドに対し適合性のものとする。組成物の用途は好ましくは家庭用の清浄および衛生組成物であるが、本発明はヒトの皮膚、歯もしくは毛髪に対し化粧、洗浄もしくはクレンジングの目的で使用する製品とすることもできる。この種の組成物は限定はしないが化粧石鹸、顔もしくは人体の液体洗浄剤、歯磨、マウスウォッシュ、発汗防止剤および脱臭剤、シェービングフォーム、クリームおよび石鹸、シャワーゲル、化粧品およびシャンプー製品を包含する。本発明による組成物の医療および治療組成物における使用も排除されない。ここに非限定的に説明した本発明の具体例につき、特定種類の細胞に対する特定プソイド−ランダムペプチドの効果は、ペプチドの存在下で培養した細胞培養物とペプチドの不存在下で培養した同様な細胞培養物との間の生存カウント数の比較により決定することができる。これは比較的簡単な技術であって、その使用により特定用途に適するペプチドを確認することができる。ここに記載した或る種のヘテロポリマーは抗ウィルス、抗カビもしくは抗真菌活性を有することも了解されよう。以下、非限定的実施例により本発明をさらに説明する。実施例：以下の実施例は、本発明による組成物の抗微生物活性を特に細菌に対する活性を参照して例示する。これら実施例に使用した材料は次のように同定される。ペプチドは角括弧にて標準的表記法で示した成分アミノ酸により表中に示され、必要に応じこれらアミノ酸の比およびペプチドの平均分子量をも示す。ペプチドの大部分は１種のアミノ酸のホモポリマーまたは２種のアミノ酸のヘテロポリマーのいずれかである。これらペプチドは全てシグマ社から入手しうる。幾つかの実施例にて［Ｐｒｏ，Ｇｌｙ−Ｐｒｏ］が使用される。このペプチドは［Ｌ−プロリンおよびＬ−グリシン−Ｌ−プロリン］単位の反復ブロックで構成され、ｐ６６６５としてシグマ社から入手しうる。他の実施例においては［Ａｒｇ，Ｐｒｏ、Ｔｈｒ］として同定される物質を使用する。この物質はアルギニン、プロリンおよびスレオニンの６：３：１の比におけるランダムポリマーである。この物質はシグマ社から入手しうる。これら実施例の組成物に存在させる表面活性剤および他の成分を以下に示す：ＳＤＳ：ドデシル硫酸ナトリウム、陰イオン型洗剤、ＢＤＨ社。トリトン：トリトンＸ−１００（商標）、非イオン型表面活性剤、ＢＤＨ社。ツイーン：ツイーン（商標）８０。実施例１：下表１〜３に示したように液体媒体における組成物を作成し、２時間にわたり培養し、次いで一連の希釈にて試料を栄養寒天（オキソイド（商標））に塗沫して全生存カウント数／ｍＬを測定し、さらにペプチドの存在下および不存在下における寒天プレートの培養後に形成されたコロニーをカウントすることにより抗微生物活性を決定した。存在させる場合、ペプチドは２．５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在させた。毒性の結果は、２．５×１０⁶〜２．３×１０⁷の生存細胞数／ｍＬの初期細菌濃度につき対数死亡数（log deaths）として示す。より高い尺度はより効果的な抗微生物性組成物を示し、すなわち５は生存細胞カウント数における１０^-5の減少である。便宜上、３より大のログ−キルスが観察された例を太字で示す。第１表に示した結果から見られるように、本発明による組成物は殆ど全ての環境にてＳ．アウレウスの生存カウント数における顕著な低下を示したのに対し、他のランダムペプチドが存在する組成物は表面活性剤ＳＤＳが存在する場合を除き生存カウント数を減少させない。驚くことに、ＳＤＳはＳ．アウレウスに対し抗微生物活性を示すと思われ、したがってＳＤＳの存在下における生存カウント数の低下も予想されるが、ＳＤＳ単独では生存カウント数を減少させない。これら結果から見られるように、ペプチドにおける成分アミノ酸の種類が特に重要である。アルギニン、オルニチンもしくはリジンが唯一の成分として存在する場合、許容しうる死滅が一般に得られる。これら成分が存在しない場合は、許容しうる死滅が得られない。これら結果が示すように、アミノ酸の相対比は或る程度重要である。リジンとチロシンもしくはトリプトファンのいずれかとを１：９の比で用いた実施例において、１５％未満のリジンを両者の場合に存在させると不良な死滅が観察される。この比が一層均衡してリジンとチロシンもしくはトリプトファンとの比が１：１または一層良好には４：１となれば許容しうる死滅が観察される。これら結果は、ペプチドの寸法が或る程度重要であることを示す。ポリ−リジンを使用する例において、３．９７ｋＤの分子量を有するポリマーは貧弱な結果を示したのに対し、７．９〜２２４．５ｋＤの分子量を有するポリマーは許容しうる死滅を示した。ポリ−アルギニンを用いた実施例につき見られるように、この菌株に対し境界的結果が８．９ｋＤの分子量にて得られた。幾つかの変則的な結果が認められる：すなわちポリ−オルニチンは２３ｋＤおよび４６ｋＤの両者にて許容しうる結果を与えるのに対し、類似した分子量（３１ｋＤ）を有するオルニチン／トリプトファンの４：１コポリマーは貧弱な結果を示す。しかしながら、後記の実施例で示すように、このコポリマーは或る種の細菌に対し有効である。６．３ｋＤの分子量を有する［Ｈｉｓ，Ｈｉｓ］は比較的不良の死滅を示すことが注目される。第２表に示した結果から見られるように、本発明による組成物は殆ど全ての環境にて大腸菌の生存カウント数における顕著な減少を示したのに対し、他のランダムペプチドが存在する組成物は生存カウント数を減少させない。第１表の場合と同様に、表面活性剤ＳＤＳが存在すれば異なる性能が示されることも判るであろう。ペプチドおよびＳＤＳは大腸菌に対しいずれか一方の場合よりも大きい相互親和性を有すること、したがってＳＤＳの存在下における生存カウント数の低下は予想されない。一般に第２表における結果は、第１表の場合と同じ効果を分子量および各成分の比に基づいて示す。第２表で見られるように、８．９ｋＤの分子量を有するポリ−アルギニンはより高い分子量のポリ−アルギニンよりもこの菌株に対しずっと効果が低い。さらに［Ｈｉｓ，Ｈｉｓ］はより良好な比較例の１つであるが、効果は本発明のペプチドで得られるよりもずっと低いことが判るであろう。第３表に示した結果から見られるように、本発明による組成物は殆ど全ての環境にてＰ．エアロギノーサの生存カウント数における顕著な減少を示したのに対し、他のランダムペプチドが存在する組成物は生存カウント数を減少させない。第２表の場合と同様に、表面活性剤ＳＤＳが存在すれば異なる性能が示されることも判るであろう。さらにペプチドとＳＤＳとはＰ．エアロギノーサに対しいずれか一方の場合よりもＰ．エアロギノーサに対し大きい相互親和性を有し、したがってＳＤＳの存在下における生存カウント数の低下は予想されない。さらにオルニチンとトリプトファンとのヘテロポリマーはＰ．エアロギノーサに対し或る程度の活性を示すのに対し、このポリマーは第１表および第２表に示した微生物に対し殆どまたは全く活性を示さないことも判るであろう。実施例２：下記表４は、ポリ−リジン（１３２．４ｋＤ）およびポリ−アルギニン（１３９．２ｋＤ）の濃度を変化させる効果を、これらポリアミノ酸で得られるログ− キルスに関して示す。これら全ての場合、初期摂取材料は３．７×１０⁸〜２．１×１０⁹生存細胞数／ｍＬで構成し、培養を室温にて２時間にわたり進行させた。実施例３：上記実施例１および２は、一般的な家庭細菌である細菌株に関するものである。本発明の一層広い利用性を例示するため、以下の実施例はストレプトコッカスミュータンス、すなわちヒト口内に一般的に存在してデンタルカリエスの発生に関与すると認められた細菌に関するものである。これら実施例は異なる鎖長のペプチドの作用をも示す。抗微生物活性は、ストレプトコッカスミュータンスＮＣＴＣ１０４４９の細胞をブロス中でペプチドの不存在下または特定分子量のポリ−アルギニンペプチドの存在下で培養して決定した。存在させる場合、ペプチドは分子量とは無関係に１．０ｍｇ／ｍＬの全濃度にて存在させた。下記表５に示す毒性の結果は、所定時間におけるブロスの試料中の生存カウント数として示す。第５表から見られるように、比較試料は指数増殖を示したのに対し、ポリ−アルギニンを含有する試料は全て実験の時間経過にわたり極めて低いカウント数を示した。高レベルの抑制がペプチドの分子量とは無関係に得られたが、より高い分子量における一層顕著な抑制に対する一般的傾向が見られる。より高い分子量にて、比例的に少ないペプチド分子が試料中に存在することに注目すべきである。下記表６は、一定分子量のペプチドを用い、存在する［Ａｒｇ，Ｔｒｐ］ペプチドのレベルを変化させる効果を示すデータである。この実施例において見られるように、ストレプトコッカスミュータンスＮＣＴＣ１０４４９の増殖はペプチドの存在により抑制された。第７表は一定分子量のペプチドを用い、存在する［Ｌｙｓ，Ｔｒｐ］ペプチドのレベルを変化させる効果を示すデータである。この実施例において、Ｓ．ミュータンスＮＣＴＣ１０４４９の増殖はペプチドの存在により抑制されたことが判るであろう。実施例３第８表は、アクチノミセス・ビスカスＴ１４Ｖの増殖に対する本発明によるペプチドの抑制作用を示す。データをポリ［ａｒｇ，ｔｒｐ］およびポリ［ｌｙｓ，ｔｒｐ］につき示し、これらは初期生存カウント数（１，０００，０００）および濃度を変化させたペプチドの存在下で４時間にわたり培養した後の最終生存カウント数（１，０００，０００）を示す。実施例４：第９表は、大腸菌およびＬ．イノキュラに対し評価した数種のペプチドに関する最小抑制濃度（ＭＩＣ）をｍｇ／ｍＬで示す。ＭＩＣはＰＧＹ培地にて次のように測定した。ＰＧＹ培地における試験微生物の１晩培養物を、ＰＧＹ培地における１００００ＣＦＵ／ｍＬの出発接種レベルまで希釈した。測定は２．５、１．２５、０．６２５、０．３１、０．１５５、０．０７８、０．０３９および０．０２ｍｇ／ｍＬの一連の希釈物、並びに無菌培地およびポリアミノ酸を含まない対照を有するブランクウェルに対する対比を用いタイテレック（商標）プレートで行った。これらの結果から見られるように、ペプチドは比較的低い濃度にて有効である。請求の範囲１．少なくとも１％の表面活性剤とプソイド−ランダム合成ペプチドとからなる液状もしくはペースト状の抗菌性組成物において、前記ペプチドが少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなることを特徴とする液状もしくはペースト状の抗菌性組成物。２．人体もしくは動物体で実施される治療法以外の細菌感染された物体の消毒方法において、前記物体を少なくとも１％の表面活性剤と抗菌性プソイド−ランダム合成ペプチドとからなる組成物で処理することを含み、前記ペプチドが少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなることを特徴とする物体の消毒方法。３．ペプチドがアルギニン、オルニチンもしくはリジンのホモポリマーからなる請求の範囲第１項に記載の組成物。４．ペプチドがリジンとフェニルアラニンとのコポリマー、アルギニンとトリプトファンとのコポリマーおよびリジンとトリプトファンとのコポリマーよりなる群から選択される請求の範囲第１項に記載の組成物。５．ペプチドが最高５０００個のアミノ酸残基からなる請求の範囲第１項に記載の組成物。６．液状もしくはゲル状であって、０．００１〜１０重量％の前記抗菌性ペプチドを含む請求の範囲第１項に記載の組成物。７．表面活性剤が非イオン型、両性型、双性イオン型、陰イオン型および陽イオン型の表面活性剤よりなる群から選択される請求の範囲第１項に記載の組成物。８．表面活性剤が非イオン型もしくは両性型の表面活性剤である請求の範囲第１項に記載の組成物。９．表面活性剤が組成物に対し１〜３０重量％のレベルで存在する請求の範囲第１項に記載の組成物。１０．（ａ）少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなる０．００１〜０．１重量％のペプチドと、（ｂ）１〜３０重量％の非イオン型表面活性剤と、（ｃ）組成物の残部としての適合しうる水性媒体とからなる抗菌性組成物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 9/06 7329−4ＣＡ６１Ｋ 9/06 Ｋ 9/08 7329−4Ｃ 9/08 Ｍ 38/00 ＡＤＹ 37/02 ＡＤＹ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．プソイド−ランダム合成ペプチドが少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなることを特徴とするプソイド−ランダム合成ペプチドの抗菌剤としての使用。２．プソイド−ランダム合成ペプチドからなる液状もしくはペースト状の抗菌性組成物において、前記ペプチドが少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなることを特徴とする液状もしくはペースト状の抗菌性組成物。３．細菌性疾病を処置するための薬剤もしくは治療組成物を製造する際のプソイド−ランダム合成ペプチドの使用において、前記ペプチドが少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなることを特徴とするプソイド−ランダム合成ペプチドの使用。４．人体もしくは動物体で実施される治療法以外の細菌感染された物体の消毒方法において、前記物体を抗菌性プソイド−ランダム合成ペプチドで処理し、前記ペプチドが少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなることを特徴とする物体の消毒方法。５．ペプチドがアルギニン、オルニチンもしくはリジンのホモポリマーからなる請求の範囲第２項に記載の組成物。６．ペプチドがリジンとフェニルアラニンとのコポリマー、アルギニンとトリプトファンとのコポリマーおよびリジンとトリプトファンとのコポリマーよりなる群から選択される請求の範囲第２項に記載の組成物。７．ペプチドが最高５０００個のアミノ酸残基からなる請求の範囲第２項に記載の組成物。８．液状もしくはゲル状であって、０．００１〜１０重量％の前記抗菌性ペプチドを含む請求の範囲第２に記載の組成物。９．表面活性剤をさらに含む請求の範囲第２項に記載の組成物。１０．表面活性剤が非イオン型、両性型、双性イオン型、陰イオン型および陽イオン型の表面活性剤よりなる群から選択される請求の範囲第９項に記載の組成物。１１．表面活性剤が非イオン型もしくは両性型の表面活性剤である請求の範囲第１０項に記載の組成物。１２．表面活性剤が組成物に対し１〜３０重量％のレベルで存在する請求の範囲第１１項に記載の組成物。１３．（ａ）少なくとも５ｋＤの分子量を有すると共に残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチンもしくはその混合物と、残基の個数で少なくとも１５％のアルギニン、リジン、オルニチン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンもしくはその混合物とからなる０．００１〜０．１重量％のペプチドと、（ｂ）１〜３０重量％の非イオン型表面活性剤と、（ｃ）組成物の残部としての適合しうる水性媒体とからなる抗菌性組成物。