JPH09308481A - 色調改善剤 - Google Patents
色調改善剤Info
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- JPH09308481A JPH09308481A JP8128565A JP12856596A JPH09308481A JP H09308481 A JPH09308481 A JP H09308481A JP 8128565 A JP8128565 A JP 8128565A JP 12856596 A JP12856596 A JP 12856596A JP H09308481 A JPH09308481 A JP H09308481A
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 動物用の新規な色調改善剤の提供。
【解決手段】 微生物Ｅ−３９６株ＦＥＲＭ ＢＰ−４
２８３）、その変異株、微生物Ａ−５８１−１株（ＦＥ
ＲＭ ＢＰ−４６７１）およびその変異株から選ばれる
微生物の培養液、該微生物菌体そのもの、該微生物菌体
の分解物、該微生物菌体の破砕物、およびそれらから抽
出または単離されるカロテノイド化合物から選ばれる色
調改善剤。
２８３）、その変異株、微生物Ａ−５８１−１株（ＦＥ
ＲＭ ＢＰ−４６７１）およびその変異株から選ばれる
微生物の培養液、該微生物菌体そのもの、該微生物菌体
の分解物、該微生物菌体の破砕物、およびそれらから抽
出または単離されるカロテノイド化合物から選ばれる色
調改善剤。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、魚介類あるいは家
禽類の表皮、肉または生産卵等の色調を改善するための
色調改善剤に関する。
禽類の表皮、肉または生産卵等の色調を改善するための
色調改善剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】カロテノイド化合物は微生物の菌体、藻
類あるいは植物および動物の組織および器官など天然に
広く存在する色素である。カロテノイド化合物は食品、
飲料の着色剤としての食品分野、サケ、マス、マダイ、
エビなどの魚介類の肉あるいは表皮、ニワトリなどの家
禽類の肉、表皮、卵黄の色調改善などを目的とした飼料
分野での用途が拡大している。またカロテノイド化合物
は抗酸化作用を持つことが知られており抗酸化剤として
の用途も期待される。近年ある種のカロテノイド化合物
に発ガン阻止効果が見いだされており今後は医薬品とし
ての用途も期待されている。
類あるいは植物および動物の組織および器官など天然に
広く存在する色素である。カロテノイド化合物は食品、
飲料の着色剤としての食品分野、サケ、マス、マダイ、
エビなどの魚介類の肉あるいは表皮、ニワトリなどの家
禽類の肉、表皮、卵黄の色調改善などを目的とした飼料
分野での用途が拡大している。またカロテノイド化合物
は抗酸化作用を持つことが知られており抗酸化剤として
の用途も期待される。近年ある種のカロテノイド化合物
に発ガン阻止効果が見いだされており今後は医薬品とし
ての用途も期待されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】カロテノイド化合物の
飼料分野での大きな用途に動物の表皮、肉またはそれら
の生産卵の色調改善剤としての利用がある。例えばサ
ケ、マス、マダイなどの魚介類用の色揚げ剤としてアス
タキサンチン、カンタキサンチンなどが使用されてい
る。またニワトリなどの家禽類の表皮、肉および卵黄の
色調を改善する方法としてカンタキサンチン、アスタキ
サンチン、ゼアキサンチン、カプサンチンなどを飼料に
添加することが知られている。
飼料分野での大きな用途に動物の表皮、肉またはそれら
の生産卵の色調改善剤としての利用がある。例えばサ
ケ、マス、マダイなどの魚介類用の色揚げ剤としてアス
タキサンチン、カンタキサンチンなどが使用されてい
る。またニワトリなどの家禽類の表皮、肉および卵黄の
色調を改善する方法としてカンタキサンチン、アスタキ
サンチン、ゼアキサンチン、カプサンチンなどを飼料に
添加することが知られている。
【０００４】カンタキサンチンは化学合成品があるのみ
で天然品は工業的には生産されていない。化学合成品は
安全性の面および近年の天然物指向の状況から問題があ
る。アスタキサンチンは化学合成品および天然物由来の
ものが存在するが、化学合成品は安全性の面および近年
の天然物指向の状況から問題がある。アスタキサンチン
天然品はオキアミやザリガニからの抽出によって得られ
るが含有量が少ないこと、安定供給が困難なこと、コス
ト高の点から問題がある。またアスタキサンチンを生産
する赤色酵母ファフィア・ロドチーマ（Ｐｈａｆｆｉａ
ｒｈｏｄｏｚｙｍａ）は強固な細胞壁を持つためにそ
のままの菌体で供給しても吸収効率は極めて低く菌体を
機械的に粉砕、あるいは化学薬品、酵素などで分解する
必要がありコストの面で問題がある。
で天然品は工業的には生産されていない。化学合成品は
安全性の面および近年の天然物指向の状況から問題があ
る。アスタキサンチンは化学合成品および天然物由来の
ものが存在するが、化学合成品は安全性の面および近年
の天然物指向の状況から問題がある。アスタキサンチン
天然品はオキアミやザリガニからの抽出によって得られ
るが含有量が少ないこと、安定供給が困難なこと、コス
ト高の点から問題がある。またアスタキサンチンを生産
する赤色酵母ファフィア・ロドチーマ（Ｐｈａｆｆｉａ
ｒｈｏｄｏｚｙｍａ）は強固な細胞壁を持つためにそ
のままの菌体で供給しても吸収効率は極めて低く菌体を
機械的に粉砕、あるいは化学薬品、酵素などで分解する
必要がありコストの面で問題がある。
【０００５】しかも菌体を分解した状態ではカロテノイ
ド化合物の安定性が低下する問題も生じる。またアスタ
キサンチンを生産する緑藻類（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ）も細胞壁が固いために、そのままでは着色効果が
低いのがファフィア酵母と同様に問題である。ゼアキサ
ンチンはマリーゴールド等から抽出しているが、色調が
黄色であり用途が限定されるのが欠点である。カプサン
チンはパプリカに含まれるカロテノイドで卵黄の着色に
用いられているが、熱、光などに極めて不安定であるこ
と、パプリカの生育状態が天候に大きく左右されるため
に工業的安定供給が困難であるなどの欠点を有する。
ド化合物の安定性が低下する問題も生じる。またアスタ
キサンチンを生産する緑藻類（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ）も細胞壁が固いために、そのままでは着色効果が
低いのがファフィア酵母と同様に問題である。ゼアキサ
ンチンはマリーゴールド等から抽出しているが、色調が
黄色であり用途が限定されるのが欠点である。カプサン
チンはパプリカに含まれるカロテノイドで卵黄の着色に
用いられているが、熱、光などに極めて不安定であるこ
と、パプリカの生育状態が天候に大きく左右されるため
に工業的安定供給が困難であるなどの欠点を有する。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく種々検討した結果、本発明を完成した。
すなわち、微生物Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２
８３）、その変異株、微生物Ａ−５８１−１株（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４６７１）およびその変異株から選ばれる微
生物の培養液、該微生物菌体そのもの、該微生物菌体の
分解物、該微生物菌体の破砕物、およびそれらから抽出
または単離されるカロテノイド化合物から選ばれる色調
改善剤に関する。
題を解決すべく種々検討した結果、本発明を完成した。
すなわち、微生物Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２
８３）、その変異株、微生物Ａ−５８１−１株（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４６７１）およびその変異株から選ばれる微
生物の培養液、該微生物菌体そのもの、該微生物菌体の
分解物、該微生物菌体の破砕物、およびそれらから抽出
または単離されるカロテノイド化合物から選ばれる色調
改善剤に関する。
【０００７】本発明に使用する微生物としてはまずＥ−
３９６株を挙げることができる。この株は、本発明者ら
が新しく単離したものであり、工業技術院生命工学工業
技術研究所に平成５年４月２７日にＦＥＲＭ ＢＰ−４
２８３として寄託された。この菌株は次の菌学的性質を
有する。
３９６株を挙げることができる。この株は、本発明者ら
が新しく単離したものであり、工業技術院生命工学工業
技術研究所に平成５年４月２７日にＦＥＲＭ ＢＰ−４
２８３として寄託された。この菌株は次の菌学的性質を
有する。
【０００８】
【表１】
【０００９】
【表２】
【００１０】
【表３】
【００１１】
【表４】
【００１２】
【表５】
【００１３】
【表６】
【００１４】以上の結果からＥ−３９６株は好気性のグ
ラム陰性の桿菌で周毛を有していることからアグロバク
テリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属細菌と思わ
れたが色素産生能とスライム形成能、およびＤＮＡ−Ｄ
ＮＡ相同性の結果から否定された。また集落の色調から
Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌や光合成細菌の可能性
も考えられたが、スフィンゴ脂質およびバクテリオクロ
ロフィルが検出されずいずれの属の菌株でもないことが
分かった。集落の色調、周毛、ＧＣ含量、キノン系から
Ｅ−３９６株と菌縁と推定される各菌種の保存菌株とＤ
ＮＡ−ＤＮＡ相同性を調べたが高い相同値を示した属は
得られなかった。さらにＥ−３９６株の１６Ｓリボソー
ムＲＮＡの塩基配列から近隣結合法により分子系統樹を
作成した。
ラム陰性の桿菌で周毛を有していることからアグロバク
テリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属細菌と思わ
れたが色素産生能とスライム形成能、およびＤＮＡ−Ｄ
ＮＡ相同性の結果から否定された。また集落の色調から
Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌や光合成細菌の可能性
も考えられたが、スフィンゴ脂質およびバクテリオクロ
ロフィルが検出されずいずれの属の菌株でもないことが
分かった。集落の色調、周毛、ＧＣ含量、キノン系から
Ｅ−３９６株と菌縁と推定される各菌種の保存菌株とＤ
ＮＡ−ＤＮＡ相同性を調べたが高い相同値を示した属は
得られなかった。さらにＥ−３９６株の１６Ｓリボソー
ムＲＮＡの塩基配列から近隣結合法により分子系統樹を
作成した。
【００１５】その結果Ｅ−３９６株は近縁のいずれの属
とも系統的に独立していることが分かった。よってＥ−
３９６株は既知の属ではない全く新規な属に属する細菌
であることが確認された。本発明において使用する他の
微生物としてはＡ−５８１−１株を挙げることができ
る。この菌株は、本発明者らが新しく単離したものであ
り、工業技術院生命工学工業技術研究所に平成６年５月
２０日にＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１として寄託された。
この菌株は次の菌学的性質を有する。
とも系統的に独立していることが分かった。よってＥ−
３９６株は既知の属ではない全く新規な属に属する細菌
であることが確認された。本発明において使用する他の
微生物としてはＡ−５８１−１株を挙げることができ
る。この菌株は、本発明者らが新しく単離したものであ
り、工業技術院生命工学工業技術研究所に平成６年５月
２０日にＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１として寄託された。
この菌株は次の菌学的性質を有する。
【００１６】
【表７】
【００１７】
【表８】
【００１８】
【表９】
【００１９】以上の結果からＡ−５８１−１株はＥ−３
９６株と共通の性質を有することおよびＥ−３９６株と
のＤＮＡ−ＤＮＡ相同性が高いことからＥ−３９６株と
同一の新規な属に属する細菌であると判断された。これ
らの菌株の培養方法はカロテノイド化合物を生成する条
件であればいずれの方法でもよいが、例えば次の通りで
ある。すなわち、生産菌が生育に必要な炭素源、窒素
源、無機塩、および必要であれば特殊な要求物質（例え
ば、ビタミン、アミノ酸、核酸塩基等）を含む。
９６株と共通の性質を有することおよびＥ−３９６株と
のＤＮＡ−ＤＮＡ相同性が高いことからＥ−３９６株と
同一の新規な属に属する細菌であると判断された。これ
らの菌株の培養方法はカロテノイド化合物を生成する条
件であればいずれの方法でもよいが、例えば次の通りで
ある。すなわち、生産菌が生育に必要な炭素源、窒素
源、無機塩、および必要であれば特殊な要求物質（例え
ば、ビタミン、アミノ酸、核酸塩基等）を含む。
【００２０】炭素源としてはグルコース、シュークロー
ス、フルクトース、トレハロース、マンノース、マンニ
トール、マルトース等の糖類、酢酸、フマル酸、クエン
酸、プロピオン酸、リンゴ酸、マロン酸等の有機酸、エ
タノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、
ヘキサノール、イソブタノール等のアルコール類等が挙
げられる。添加割合は炭素源の種類により異なるが、通
常培地１Ｌ当たり１〜１００ｇ、好ましくは２〜５０ｇ
である。窒素源としては、例えば硝酸カリウム、硝酸ア
ンモニウム、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リ
ン酸アンモニウム、アンモニア、尿素等の１種または２
種以上が用いられる。添加割合は窒素源の種類により異
なるが、通常培地１Ｌに対し０．１ｇ〜１０ｇ、好まし
くは１〜３ｇである。
ス、フルクトース、トレハロース、マンノース、マンニ
トール、マルトース等の糖類、酢酸、フマル酸、クエン
酸、プロピオン酸、リンゴ酸、マロン酸等の有機酸、エ
タノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、
ヘキサノール、イソブタノール等のアルコール類等が挙
げられる。添加割合は炭素源の種類により異なるが、通
常培地１Ｌ当たり１〜１００ｇ、好ましくは２〜５０ｇ
である。窒素源としては、例えば硝酸カリウム、硝酸ア
ンモニウム、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リ
ン酸アンモニウム、アンモニア、尿素等の１種または２
種以上が用いられる。添加割合は窒素源の種類により異
なるが、通常培地１Ｌに対し０．１ｇ〜１０ｇ、好まし
くは１〜３ｇである。
【００２１】無機塩としてはリン酸二水素カリウム、リ
ン酸水素二カリウム、リン酸水素二ナトリウム、硫酸マ
グネシウム、塩化マグネシウム、硫酸鉄、塩化鉄、硫酸
マンガン、塩化マンガン、硫酸亜鉛、塩化亜鉛、硫酸
銅、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム
等の１種または２種以上が用いられる。添加割合は無機
塩の種類により異なるが、通常培地１Ｌに対し０．００
１〜１０ｇである。特殊な要求物質としてはビタミン
類、核酸類、酵母エキス、ペプトン、肉エキス、麦芽エ
キス、コーンスチープリカー、乾燥酵母、大豆粕、大豆
油、オリーブ油、トウモロコシ油、アマニ油、等の１種
または２種以上が用いられる。添加割合は物質の種類に
より異なるが、通常、培地１Ｌに対し１ｇ〜２００ｇ、
好ましくは１０〜１００ｇである。
ン酸水素二カリウム、リン酸水素二ナトリウム、硫酸マ
グネシウム、塩化マグネシウム、硫酸鉄、塩化鉄、硫酸
マンガン、塩化マンガン、硫酸亜鉛、塩化亜鉛、硫酸
銅、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム
等の１種または２種以上が用いられる。添加割合は無機
塩の種類により異なるが、通常培地１Ｌに対し０．００
１〜１０ｇである。特殊な要求物質としてはビタミン
類、核酸類、酵母エキス、ペプトン、肉エキス、麦芽エ
キス、コーンスチープリカー、乾燥酵母、大豆粕、大豆
油、オリーブ油、トウモロコシ油、アマニ油、等の１種
または２種以上が用いられる。添加割合は物質の種類に
より異なるが、通常、培地１Ｌに対し１ｇ〜２００ｇ、
好ましくは１０〜１００ｇである。
【００２２】培地のpHは２〜１２、好ましくは６〜１０
に調整する。培養条件は１５〜８０℃、好ましくは２０
〜３５℃の温度であり、通常１日〜２０日間、好ましく
は２〜８日間振とう培養あるいは通気攪拌培養を行う。
以上の方法で生産した培養菌体中には通常アスタキサン
チン、アドニキサンチン、β−カロテン、エキネノン、
カンタキサンチン、ゼアキサンチン、β−クリプトキサ
ンチン、３−ヒドロキシエキネノン、アステロイデノ
ン、アドニルビン等のカロテノイド化合物が混合物とし
て蓄積する。これら菌体中に含まれるカロテノイド化合
物の生成比率を対象動物などの用途に合わせて調整する
こともできる。
に調整する。培養条件は１５〜８０℃、好ましくは２０
〜３５℃の温度であり、通常１日〜２０日間、好ましく
は２〜８日間振とう培養あるいは通気攪拌培養を行う。
以上の方法で生産した培養菌体中には通常アスタキサン
チン、アドニキサンチン、β−カロテン、エキネノン、
カンタキサンチン、ゼアキサンチン、β−クリプトキサ
ンチン、３−ヒドロキシエキネノン、アステロイデノ
ン、アドニルビン等のカロテノイド化合物が混合物とし
て蓄積する。これら菌体中に含まれるカロテノイド化合
物の生成比率を対象動物などの用途に合わせて調整する
こともできる。
【００２３】例えば、培養における好気条件を変えるこ
とにより、カロテノイド化合物の生成比率を変えること
ができる。一例として培養液中の溶存酸素濃度を高める
ことによりアドニキサンチンの生成比率を高めることが
できる。他の方法として、カロテノイド色素の特定のも
のを優先的に生成させるために生成菌株を変異、例えば
人為的変異処理により一方の成分を他方の成分より優先
的に生成するように改良することができる。このような
変異処理としては、例えばＸ線照射、紫外線照射等の物
理的方法、化学変異剤、例えばＮＴＧ（Ｎ−ｍｅｔｈｙ
ｌ−Ｎ′−ｎｉｔｏｒｏ−Ｎ−ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎ
ｉｄｉｎｅとＥＭＳ（ｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｎｅ ｓｕ
ｌｆｏｎａｔｅ）等による変異処理のような化学的方法
を用いることができる。
とにより、カロテノイド化合物の生成比率を変えること
ができる。一例として培養液中の溶存酸素濃度を高める
ことによりアドニキサンチンの生成比率を高めることが
できる。他の方法として、カロテノイド色素の特定のも
のを優先的に生成させるために生成菌株を変異、例えば
人為的変異処理により一方の成分を他方の成分より優先
的に生成するように改良することができる。このような
変異処理としては、例えばＸ線照射、紫外線照射等の物
理的方法、化学変異剤、例えばＮＴＧ（Ｎ−ｍｅｔｈｙ
ｌ−Ｎ′−ｎｉｔｏｒｏ−Ｎ−ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎ
ｉｄｉｎｅとＥＭＳ（ｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｎｅ ｓｕ
ｌｆｏｎａｔｅ）等による変異処理のような化学的方法
を用いることができる。
【００２４】本発明では対象動物に、微生物Ｅ−３９６
株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）、その変異株、微生物
Ａ−５８１−１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１）および
その変異株から選ばれる微生物の培養液、該微生物菌株
そのもの、該微生物菌体の分解物、該微生物菌体の破砕
物、およびそれらから抽出または単離されるカロテノイ
ド化合物から選ばれる色調改善剤の１種以上を与える
が、そのまま単独で与えてもよいし、飼料と混合して与
えても良い。
株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）、その変異株、微生物
Ａ−５８１−１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４６７１）および
その変異株から選ばれる微生物の培養液、該微生物菌株
そのもの、該微生物菌体の分解物、該微生物菌体の破砕
物、およびそれらから抽出または単離されるカロテノイ
ド化合物から選ばれる色調改善剤の１種以上を与える
が、そのまま単独で与えてもよいし、飼料と混合して与
えても良い。
【００２５】培養液の水分が障害となる場合にはスプレ
ードライヤー等により乾燥して用いることもできる。ま
た培養液から菌体のみを分離する場合には通常の濾過
法、遠心分離法などにより行うことができる。分離で得
られた水分を含む菌体はそのまま与えてもよいし、スプ
レードライヤー等により乾燥して用いることもできる。
また菌体の細胞を酵素的処理、酸加水分解等の化学的処
理により分解または超音波処理、加圧破砕処理等の物理
的処理により破砕して用いることもできる。
ードライヤー等により乾燥して用いることもできる。ま
た培養液から菌体のみを分離する場合には通常の濾過
法、遠心分離法などにより行うことができる。分離で得
られた水分を含む菌体はそのまま与えてもよいし、スプ
レードライヤー等により乾燥して用いることもできる。
また菌体の細胞を酵素的処理、酸加水分解等の化学的処
理により分解または超音波処理、加圧破砕処理等の物理
的処理により破砕して用いることもできる。
【００２６】またカロテノイド化合物は菌体の内部に生
成するから菌体からカロテノイド化合物を溶剤で抽出す
ることもできる。ここで用いる溶剤はカロテノイド化合
物が溶解する化合物であればいずれの溶剤を使用するこ
とができる。例えばアセトン、クロロホルム、ジクロロ
メタン、ヘキサン、テトラヒドロフラン、シクロヘキサ
ン、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコー
ル、ベンゼン、二硫化炭素、ジエチルエーテル等の有機
溶剤が用いられ、好ましくはクロロホルム、ジクロロメ
タン、テトラヒドロフラン、アセトン、エタノール、メ
タノール、イソプロピルアルコールが用いられる。また
それぞれのカロテノイド化合物を単離精製することもで
きる。生成には吸着、溶出、溶解などの通常の方法を用
いることができる。
成するから菌体からカロテノイド化合物を溶剤で抽出す
ることもできる。ここで用いる溶剤はカロテノイド化合
物が溶解する化合物であればいずれの溶剤を使用するこ
とができる。例えばアセトン、クロロホルム、ジクロロ
メタン、ヘキサン、テトラヒドロフラン、シクロヘキサ
ン、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコー
ル、ベンゼン、二硫化炭素、ジエチルエーテル等の有機
溶剤が用いられ、好ましくはクロロホルム、ジクロロメ
タン、テトラヒドロフラン、アセトン、エタノール、メ
タノール、イソプロピルアルコールが用いられる。また
それぞれのカロテノイド化合物を単離精製することもで
きる。生成には吸着、溶出、溶解などの通常の方法を用
いることができる。
【００２７】本発明の色調改善剤はそのまま飼料として
用いてもよいが、これらに含まれるカロテノイドの分解
を防止する目的でＢＨＴ（ブチルハイドロキシトルエ
ン）、エトキシキン、ビタミンＥなどの酸化防止剤を添
加することも好ましく採用される。さらには、これらの
表面をゼラチンなどで被覆しても良い。着色の対象とな
る動物は色調がその価値を高めるものであればいずれで
も良く例えば魚介類であれば、マダイ、ギンザケ、ニジ
マス、シマアジ、マス、ハマチ、金魚、ニシキゴイ、ク
ルマエビ、イセエビなどが挙げられ、表皮、肉、卵の色
調が改善される。また家禽類ではニワトリ、ウズラなど
が挙げられ表皮、肉、卵黄の色調が改善される。
用いてもよいが、これらに含まれるカロテノイドの分解
を防止する目的でＢＨＴ（ブチルハイドロキシトルエ
ン）、エトキシキン、ビタミンＥなどの酸化防止剤を添
加することも好ましく採用される。さらには、これらの
表面をゼラチンなどで被覆しても良い。着色の対象とな
る動物は色調がその価値を高めるものであればいずれで
も良く例えば魚介類であれば、マダイ、ギンザケ、ニジ
マス、シマアジ、マス、ハマチ、金魚、ニシキゴイ、ク
ルマエビ、イセエビなどが挙げられ、表皮、肉、卵の色
調が改善される。また家禽類ではニワトリ、ウズラなど
が挙げられ表皮、肉、卵黄の色調が改善される。
【００２８】また本発明の色調改善剤を飼料と混合する
場合は飼料と粉末状で混合、ペレット状あるいはフレー
ク状にして用いることができる。また本菌株の菌体を分
解あるいは粉砕しないで与える場合の長所は、吸収効率
が極めて良いことである。すなわち本発明の菌体は細菌
に属し、細胞壁は薄く、強固ではないことから動物体内
で分解されやすく吸収効率が極めて高い。これに対し、
赤色酵母ファフィア・ロドチーマでは強固な細胞壁を有
するために動物体内でカロテノイド化合物が吸収される
ためには細胞壁が分解される必要があるため吸収効率は
悪い。
場合は飼料と粉末状で混合、ペレット状あるいはフレー
ク状にして用いることができる。また本菌株の菌体を分
解あるいは粉砕しないで与える場合の長所は、吸収効率
が極めて良いことである。すなわち本発明の菌体は細菌
に属し、細胞壁は薄く、強固ではないことから動物体内
で分解されやすく吸収効率が極めて高い。これに対し、
赤色酵母ファフィア・ロドチーマでは強固な細胞壁を有
するために動物体内でカロテノイド化合物が吸収される
ためには細胞壁が分解される必要があるため吸収効率は
悪い。
【００２９】本発明に使用する菌株が生産するアスタキ
サンチンは（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであり
その純度はほぼ１００％である。天然物であるザリガ
ニ、ヘマトコッカス、サケ、マス、マダイに存在するア
スタキサンチンは（３Ｓ，３′Ｓ）体の含有率が高いこ
とが知られている。一方ファフィア・ロドチーマは（３
Ｒ，３′Ｒ）体の含有率が多く天然に存在するアスタキ
サンチンとは反対の絶対配置を持つことが知られてい
る。本発明の菌株が生産するアスタキサンチンは１００
％の（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであり天然に
おいて多数を占めるアスタキサンチンと同一の絶対配置
を有することは産業上価値が高い。
サンチンは（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであり
その純度はほぼ１００％である。天然物であるザリガ
ニ、ヘマトコッカス、サケ、マス、マダイに存在するア
スタキサンチンは（３Ｓ，３′Ｓ）体の含有率が高いこ
とが知られている。一方ファフィア・ロドチーマは（３
Ｒ，３′Ｒ）体の含有率が多く天然に存在するアスタキ
サンチンとは反対の絶対配置を持つことが知られてい
る。本発明の菌株が生産するアスタキサンチンは１００
％の（３Ｓ，３′Ｓ）−アスタキサンチンであり天然に
おいて多数を占めるアスタキサンチンと同一の絶対配置
を有することは産業上価値が高い。
【００３０】
【実施例】以下、実施例により本発明をさらに詳しく説
明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるも
のではない。実施例１． 表１０の組成からなる培地１０mLを直径１８
mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。こ
れにＥ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白
金耳植菌し３０℃で２日間３００rpm の往復振とう培養
を行った。この培養液１０mLを上と同組成の培地が１０
０mL入った５００mL容量の坂口フラスコ６本に植菌し３
０℃、２日間１００rpm の往復振とう培養を行った。
明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるも
のではない。実施例１． 表１０の組成からなる培地１０mLを直径１８
mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気殺菌した。こ
れにＥ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−４２８３）を１白
金耳植菌し３０℃で２日間３００rpm の往復振とう培養
を行った。この培養液１０mLを上と同組成の培地が１０
０mL入った５００mL容量の坂口フラスコ６本に植菌し３
０℃、２日間１００rpm の往復振とう培養を行った。
【００３１】次にこの培養液６００mLを上と同組成の培
地が２０Ｌ入った３０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０℃，
３００rpm ，１．０vvm の好気培養を７６時間行った。
培養液１８Ｌからシャープレス型遠心分離機により菌体
（湿重量５５０ｇ）を得た。この菌体に水道水を１０Ｌ
添加し十分懸濁した後、再度シャープレス型遠心分離機
により菌体（湿重量５４０ｇ）を得た。次いで菌体５４
０ｇに水道水を１０００Ｌ添加し十分懸濁後、スプレー
ドライヤーを用いて菌体を乾燥し菌体乾燥物１８５ｇを
得た。運転条件は入口空気温度２００℃、出口空気温度
１００℃、懸濁液供給速度４６mL／min で行った。乾燥
菌体物中のカロテノイド含有量を高速液体クロマトグラ
フィーにより分析したところ表１１の組成であった。
地が２０Ｌ入った３０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０℃，
３００rpm ，１．０vvm の好気培養を７６時間行った。
培養液１８Ｌからシャープレス型遠心分離機により菌体
（湿重量５５０ｇ）を得た。この菌体に水道水を１０Ｌ
添加し十分懸濁した後、再度シャープレス型遠心分離機
により菌体（湿重量５４０ｇ）を得た。次いで菌体５４
０ｇに水道水を１０００Ｌ添加し十分懸濁後、スプレー
ドライヤーを用いて菌体を乾燥し菌体乾燥物１８５ｇを
得た。運転条件は入口空気温度２００℃、出口空気温度
１００℃、懸濁液供給速度４６mL／min で行った。乾燥
菌体物中のカロテノイド含有量を高速液体クロマトグラ
フィーにより分析したところ表１１の組成であった。
【００３２】
【表１０】
【００３３】
【表１１】
【００３４】次に、４０週齢の白色レグホン（１０羽）
を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイヤー
試験用標準飼料に上記の方法で得られた菌体乾燥物を
０．５mass％添加した飼料を３週間与えた。卵黄の色調
を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しない対
象区に比べ明らかに赤色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイヤー
試験用標準飼料に上記の方法で得られた菌体乾燥物を
０．５mass％添加した飼料を３週間与えた。卵黄の色調
を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しない対
象区に比べ明らかに赤色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
【００３５】実施例２．１０週齢の白色レグホン（１０
羽）を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイ
ヤー試験用標準飼料に実施例１で得られた菌体乾燥物を
１．５mass％添加した飼料を３週間与えた。表皮、肉の
色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しな
い対象区に比べ明らかに赤色の着色が認められ色調が改
善された。
羽）を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイ
ヤー試験用標準飼料に実施例１で得られた菌体乾燥物を
１．５mass％添加した飼料を３週間与えた。表皮、肉の
色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しな
い対象区に比べ明らかに赤色の着色が認められ色調が改
善された。
【００３６】実施例３．マダイの稚魚（６０〜７０ｇ）
２０匹に対し実施例１で得られた菌体乾燥物を４．０ma
ss％添加した飼料を調整し、９０日間連続添加した。体
表の色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加
しない対象区に比べ赤色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
２０匹に対し実施例１で得られた菌体乾燥物を４．０ma
ss％添加した飼料を調整し、９０日間連続添加した。体
表の色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加
しない対象区に比べ赤色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
【００３７】実施例４．Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ
−４２８３）をＮＴＧ（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｎ′−ｎｉ
ｔｏｒｏ−Ｎ−ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ）で
変異処理し、色調が異なるコロニーを選択した。これら
の株の培養液中のカロテノイド化合物を分析し、アスタ
キサンチンを生産せずカンタキサンチンを生産する株
（カンタキサンチン生産変異株）を選択した。第１表の
組成からなる培地１０mLを直径１８mmの試験管に入れ１
２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これにカンタキサンチ
ン生産変異株を１白金耳植菌し３０℃で２日間３００rp
m の往復振とう培養を行った。この培養液１０mLを上と
同組成の培地が１００mL入った５００mL容量の坂口フラ
スコ６本に植菌し３０℃、２日間１００rpm の往復振と
う培養を行った。
−４２８３）をＮＴＧ（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｎ′−ｎｉ
ｔｏｒｏ−Ｎ−ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ）で
変異処理し、色調が異なるコロニーを選択した。これら
の株の培養液中のカロテノイド化合物を分析し、アスタ
キサンチンを生産せずカンタキサンチンを生産する株
（カンタキサンチン生産変異株）を選択した。第１表の
組成からなる培地１０mLを直径１８mmの試験管に入れ１
２１℃、１５分間蒸気殺菌した。これにカンタキサンチ
ン生産変異株を１白金耳植菌し３０℃で２日間３００rp
m の往復振とう培養を行った。この培養液１０mLを上と
同組成の培地が１００mL入った５００mL容量の坂口フラ
スコ６本に植菌し３０℃、２日間１００rpm の往復振と
う培養を行った。
【００３８】次にこの培養液６００mLを上と同組成の培
地が２０Ｌ入った３０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０℃，
３００rpm ，１．０vvm の好気培養を７６時間行った。
培養液１８Ｌからシャープレス型遠心分離機により菌体
（湿重量５００ｇ）を得た。この菌体に水道水を１０Ｌ
添加し十分懸濁した後、再度シャープレス型遠心分離機
により菌体（湿重量４８０ｇ）を得た。次いで菌体４８
０ｇに水道水を１０００Ｌ添加し十分懸濁後、スプレー
ドライヤーを用いて菌体を乾燥し菌体乾燥物１７０ｇを
得た。運転条件は入口空気温度２００℃、出口空気温度
１００℃、懸濁液供給速度４６mL／min で行った。乾燥
菌体物中のカロテノイド含有を高速液体クロマトグラフ
ィーにより分析したところ表１２の組成であった。
地が２０Ｌ入った３０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３０℃，
３００rpm ，１．０vvm の好気培養を７６時間行った。
培養液１８Ｌからシャープレス型遠心分離機により菌体
（湿重量５００ｇ）を得た。この菌体に水道水を１０Ｌ
添加し十分懸濁した後、再度シャープレス型遠心分離機
により菌体（湿重量４８０ｇ）を得た。次いで菌体４８
０ｇに水道水を１０００Ｌ添加し十分懸濁後、スプレー
ドライヤーを用いて菌体を乾燥し菌体乾燥物１７０ｇを
得た。運転条件は入口空気温度２００℃、出口空気温度
１００℃、懸濁液供給速度４６mL／min で行った。乾燥
菌体物中のカロテノイド含有を高速液体クロマトグラフ
ィーにより分析したところ表１２の組成であった。
【００３９】
【表１２】
【００４０】次に、４０週齢の白色レグホン（１０羽）
を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイヤー
試験用標準飼料に上記の方法で得られた菌体乾燥物を
０．３mass％添加した飼料を３週間与えた。卵黄の色調
を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しない対
象区に比べ明らかに橙色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイヤー
試験用標準飼料に上記の方法で得られた菌体乾燥物を
０．３mass％添加した飼料を３週間与えた。卵黄の色調
を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しない対
象区に比べ明らかに橙色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
【００４１】実施例５．１０週齢の白色レグホン（１０
羽）を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイ
ヤー試験用標準飼料に実施例１で得られた菌体乾燥物を
０．９mass％添加した飼料を３週間与えた。表皮、肉の
色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しな
い対象区に比べ明らかに橙色の着色が認められ色調が改
善された。
羽）を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイ
ヤー試験用標準飼料に実施例１で得られた菌体乾燥物を
０．９mass％添加した飼料を３週間与えた。表皮、肉の
色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しな
い対象区に比べ明らかに橙色の着色が認められ色調が改
善された。
【００４２】実施例６．表１３の組成からなる培地１０
mLを直径１８mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気
殺菌した。これにＡ−５８１−１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４６７１）を１白金耳植菌し３０℃で２日間３００rpm
の往復振とう培養を行った。この培養液１０mLを表１と
同組成の培地が１００mL入った５００mL容量の坂口フラ
スコ６本に植菌し３０℃、２日間１００rpm の往復振と
う培養を行った。次にこの培養液６００mLを表１と同組
成の培地が２０Ｌ入った３０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３
０℃，３００rpm ，１．０vvm の好気培養を８０時間行
った。培養液１８Ｌからシャープレス型遠心分離機によ
り菌体（湿重量４００ｇ）を得た。
mLを直径１８mmの試験管に入れ１２１℃、１５分間蒸気
殺菌した。これにＡ−５８１−１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４６７１）を１白金耳植菌し３０℃で２日間３００rpm
の往復振とう培養を行った。この培養液１０mLを表１と
同組成の培地が１００mL入った５００mL容量の坂口フラ
スコ６本に植菌し３０℃、２日間１００rpm の往復振と
う培養を行った。次にこの培養液６００mLを表１と同組
成の培地が２０Ｌ入った３０Ｌ容量の発酵槽に植菌し３
０℃，３００rpm ，１．０vvm の好気培養を８０時間行
った。培養液１８Ｌからシャープレス型遠心分離機によ
り菌体（湿重量４００ｇ）を得た。
【００４３】この菌体に水道水を１０Ｌ添加し十分懸濁
した後、再度シャープレス型遠心分離機により菌体（湿
重量３８０ｇ）を得た。次いで菌体３８０ｇに水道水を
１０００Ｌ添加し十分懸濁後、スプレードライヤーを用
いて菌体を乾燥し菌体乾燥物１２０ｇを得た。運転条件
は入口空気温度２００℃、出口空気温度１００℃、懸濁
液供給速度４６mL／min で行った。乾燥菌体物中のカロ
テノイド含有を高速液体クロマトグラフィーにより分析
したところ表１４の組成であった。次に、４０週齢の白
色レグホン（１０羽）を一つのケージに入れ日本配合飼
料（株）製のレイヤー試験用標準飼料に上記の方法で得
られた菌体乾燥物を１．２mass％添加した飼料を３週間
与えた。卵黄の色調を目視により観察したところ菌体乾
燥物を添加しない対象区に比べ明らかに赤色の着色が認
められ色調が改善された。
した後、再度シャープレス型遠心分離機により菌体（湿
重量３８０ｇ）を得た。次いで菌体３８０ｇに水道水を
１０００Ｌ添加し十分懸濁後、スプレードライヤーを用
いて菌体を乾燥し菌体乾燥物１２０ｇを得た。運転条件
は入口空気温度２００℃、出口空気温度１００℃、懸濁
液供給速度４６mL／min で行った。乾燥菌体物中のカロ
テノイド含有を高速液体クロマトグラフィーにより分析
したところ表１４の組成であった。次に、４０週齢の白
色レグホン（１０羽）を一つのケージに入れ日本配合飼
料（株）製のレイヤー試験用標準飼料に上記の方法で得
られた菌体乾燥物を１．２mass％添加した飼料を３週間
与えた。卵黄の色調を目視により観察したところ菌体乾
燥物を添加しない対象区に比べ明らかに赤色の着色が認
められ色調が改善された。
【００４４】
【表１３】
【００４５】
【表１４】
【００４６】実施例７．１０週齢の白色レグホン（１０
羽）を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイ
ヤー試験用標準飼料に実施例６で得られた菌体乾燥物を
３．５mass％添加した飼料を３週間与えた。表皮、肉の
色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しな
い対象区に比べ明らかに赤色の着色が認められ色調が改
善された。
羽）を一つのケージに入れ日本配合飼料（株）製のレイ
ヤー試験用標準飼料に実施例６で得られた菌体乾燥物を
３．５mass％添加した飼料を３週間与えた。表皮、肉の
色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加しな
い対象区に比べ明らかに赤色の着色が認められ色調が改
善された。
【００４７】実施例８．マダイの稚魚（６０〜７０ｇ）
２０匹に対し実施例６で得られた菌体乾燥物を９．０ma
ss％添加した飼料を調整し、９０日間連続添加した。体
表の色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加
しない対象区に比べ赤色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
２０匹に対し実施例６で得られた菌体乾燥物を９．０ma
ss％添加した飼料を調整し、９０日間連続添加した。体
表の色調を目視により観察したところ菌体乾燥物を添加
しない対象区に比べ赤色の着色が認められ色調が改善さ
れた。
【００４８】
配列番号：１ 配列の長さ：１４５２ 配列の種類：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列 AGTTTGATCC TGGCTCAGAA CGAACGCTGG CGGCAGGCTT AACACATGCA AGTCGAGCGA 60 GACCTTCGGG TCTAGCGGCG GACGGGTGAG TAACGCGTGG GAACGTGCCC TTCTCTACGG 120 AATAGCCCCG GGAAACTGGG AGTAATACCG TATACGCCCT TTGGGGGAAA GATTTATCGG 180 AGAAGGATCG GCCCGCGTTG GATTAGGTAG TTGGTGGGGT AATGGCCCAC CAAGCCGACG 240 ATCCATAGCT GGTTTGAGAG GATGATCAGC CACACTGGGA CTGAGACACG GCCCAGACTC 300 CTACGGGAGG CAGCAGTGGG GAATCTTAGA CAATGGGGGC AACCCTGATC TAGCCATGCC 360 GCGTGAGTGA TGAAGGCCTT AGGGTTGTAA AGCTCTTTCA GCTGGGAAGA TAATGACGGT 420 ACCAGCAGAA GAAGCCCCGG CTAACTCCGT GCCAGCAGCC GCGGTAATAC GGAGGGGGCT 480 AGCGTTGTTC GGAATTACTG GGCGTAAAGC GCACGTAGGC GGACTGGAAA GTCAGAGGTG 540 AAATCCCAGG GCTCAACCTT GGAACTGCCT TTGAAACTAT CAGTCTGGAG TTCGAGAGAG 600 GTGAGTGGAA TTCCGAGTGT AGAGGTGAAA TTCGTAGATA TTCGGAGGAA CACCAGTGGC 660 GAAGGCGGCT CACTGGCTCG ATACTGACGC TGAGGTGCGA AAGCGTGGGG AGCAAACAGG 720 ATTAGATACC CTGGTAGTCC ACGCCGTAAA CGATGAATGC CAGACGTCGG CAAGCATGCT 780 TGTCGGTGTC ACACCTAACG GATTAAGCAT TCCGCCTGGG GAGTACGGTC GCAAGATTAA 840 AACTCAAAGG AATTGACGGG GGCCCGCACA AGCGGTGGAG CATGTGGTTT AATTCGAAGC 900 AACGCGCAGA ACCTTACCAA CCCTTGACAT GGCAGGACCG CTGGAGAGAT TCAGCTTTCT 960 CGTAAGAGAC CTGCACACAG GTGCTGCATG GCTGTCGTCA GCTCGTGTCG TGAGATGTTC 1020 GGTTAAGTCC GGCAACGAGC GCAACCCACG TCCCTAGTTG CCAGCAATTC AGTTGGGAAC 1080 TCTATGGAAA CTGCCGATGA TAAGTCGGAG GAAGGTGTGG ATGACGTCAA GTCCTCATGG 1140 GCCTTACGGG TTGGGCTACA CACGTGCTAC AATGGTGGTG ACAGTGGGTT AATCCCCAAA 1200 AGCCATCTCA GTTCGGATTG TCCTCTGCAA CTCGAGGGCA TGAAGTTGGA ATCGCTAGTA 1260
【００４９】 ATCGCGGAAC AGCATGCCGC GGTGAATACG TTCCCGGGCC TTGTACACAC CGCCCGTCAC 1320 ACCATGGGAG TTGGTTCTAC CCGACGACGN TGCGCTAACC TTCGGGGGGC AGGCGGCCAC 1380 GGTAGGATCA GCGACTGGGG TGAAGTCGTA ACAAGGTAGC CGTAGGGGAA CCTGCGGCTG 1440 GATCACCTCC TT 1452
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０９Ｂ 61/00 Ｃ０９Ｂ 61/00 Ａ // Ｃ１２Ｎ 15/09 7823−4Ｂ Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ Ｃ１２Ｑ 1/68 9282−4Ｂ Ｃ１２Ｎ 15/00 Ａ (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 水田 美能 神奈川県横浜市中区千鳥町８番地 日本石 油株式会社中央技術研究所内
Claims (1)
- 【請求項１】 微生物Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−
４２８３）、その変異株、微生物Ａ−５８１−１株（Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−４６７１）およびその変異株から選ばれ
る微生物の培養液、該微生物菌体そのもの、該微生物菌
体の分解物、該微生物菌体の破砕物、およびそれらから
抽出または単離されるカロテノイド化合物から選ばれる
色調改善剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12856596A JP3278574B2 (ja) | 1996-05-23 | 1996-05-23 | 色調改善剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12856596A JP3278574B2 (ja) | 1996-05-23 | 1996-05-23 | 色調改善剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09308481A true JPH09308481A (ja) | 1997-12-02 |
| JP3278574B2 JP3278574B2 (ja) | 2002-04-30 |
Family
ID=14987911
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12856596A Expired - Lifetime JP3278574B2 (ja) | 1996-05-23 | 1996-05-23 | 色調改善剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3278574B2 (ja) |
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1996
- 1996-05-23 JP JP12856596A patent/JP3278574B2/ja not_active Expired - Lifetime
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