JPH09295968A - ピロリドン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 本発明の目的は、新規のタンパク質脱リン酸
化酵素の阻害剤の提供することにある。 【解決手段】 式（Ｉ） 【化１】 （式中Ｒ¹は水素原子もしくは炭素数１〜２０のアルキ
ル基を示し、Ｒ²はシアノ基もしくはアセチル基を示
す）で示されるピロリドン誘導体。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明が属する技術分野】本発明はピロリドン誘導体に
関し、さらに詳しくはタンパク質脱リン酸化酵素阻害作
用を有するピロリドン誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】タンパク質のリン酸化、脱リン酸化は生
体機能の基本的な調節機構の一つである。このうち、タ
ンパク質のリン酸化酵素を阻害する薬剤は抗腫瘍剤とし
て数多く報告されている。しかし、同じく細胞増殖にと
って必須な役割をはたしているタンパク質脱リン酸化酵
素に対する阻害物質については、ほとんどその報告がな
されていない。タンパク質の脱リン酸化は、リン酸化と
同様に、タンパク質の働きの、いわゆる「スイッチ」の
役割をしており、生体内でのタンパク質の活性、不活性
を制御していることが近年明らかになりつつある。従っ
て、タンパク質の脱リン酸化酵素の阻害は抗腫瘍剤、免
疫抑制剤などの研究分野において、新しい作用機序であ
り、さらに特異性、有効性に優れたタンパク質脱リン酸
化酵素の阻害剤の開発が望まれている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、新規
のタンパク質脱リン酸化酵素の阻害剤を提供することに
ある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決するため種々検討した結果、ある種のピロリドン誘
導体がその目的を達成することを見出しこの発明を完成
した。

【０００５】すなわち本発明は、式（Ｉ）

【０００６】

【化２】

【０００７】（式中Ｒ¹は水素原子または炭素数１〜２
０のアルキル基を示し、Ｒ²はシアノ基またはアセチル
基を示す）で表わされるピロリドン誘導体である。

【０００８】

【発明の実施の形態】本発明において、炭素数１〜２０
のアルキル基とは炭素原子数１〜２０個の直鎖状または
分枝鎖状のアルキル基であり、たとえばメチル基、エチ
ル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ヘキシ
ル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基などである。

【０００９】式（Ｉ）に示される本発明化合物は以下に
示すような方法で合成することができる。すなわち、ジ
ャーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソサイア
ティ［J.Am.Chem.Soc.第８１巻、第４３５５頁（１９５
９年）］に記載の方法に準じて、２，３−ジオキソブタ
ンと式

【００１０】

【化３】Ｒ²ＣＨ₂ＣＯＮＨＲ¹ （式中Ｒ¹及びＲ²は前述と同義である。）で示される化
合物を縮合させて得られる化合物を、酸で処理すること
によって合成することができる。このときに用いる酸と
しては例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸などの鉱酸
類、１０− カンフルスルホン酸、ｐ−トルエンスルホ
ン酸、メタンスルホン酸などのスルホン酸類などを用い
ることができる。酸処理は溶媒中で行っても良く、その
ときの溶媒としてはジオキサン、テトラヒドロフラン、
ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、塩化メ
チレン、クロロホルム、アセトン、トルエン、ベンゼン
などの溶媒を用いることができる。

【００１１】本発明化合物をタンパク質脱リン酸化酵素
の阻害剤として用いるには、化合物をそのまま、または
常法に従い製剤化することにより、錠剤、丸剤、カプセ
ル剤、顆粒剤、液剤、乳剤、懸濁剤、注射剤などに調製
し、経口的または非経口的に投与することができる。

【００１２】投与量は、成人の患者に対して、通常経口
投与の場合、１〜１０００ｍｇ、非経口投与の場合、
０．０１〜１００ｍｇを１日１回〜数回に分けて投与す
ることができる。この投与量は疾病の種類、患者の年
齢、体重、症状などにより適宜増減することができる。

【００１３】

【発明の効果】本発明の化合物は、後述の試験例から明
らかなようにタンパク質脱リン酸化酵素阻害作用を有す
るので、抗腫瘍剤、免疫抑制剤、糖尿病治療薬などの医
薬として有用である。

【００１４】

【実施例】本発明を、実施例および試験例からさらに詳
細に説明する。

【００１５】実施例１３−シアノ−４−メチル−５−ビニリデン−２−ピロリ
ドン （化合物１） （１）２，３−ジオキソブタン（２５．６ｇ）および、
シアノアセトアミド（２５ｇ）を水（３７．５ｍｌ）に
溶解し１０％水酸化ナトリウム液（０．４５ｍｌ）を加
え、室温で１．５時間撹拌した。析出した結晶を濾取し
て３−シアノ−５−ヒドロキシ−４，５−ジメチル−２
−ピロリドン（融点１４５〜１４９℃）を得た。

【００１６】（２）（１）の化合物（０．７６ｇ）およ
び１０−カンフルスルホン酸（０．０７ｇ）を塩化メチ
レン（１０ｍｌ）に溶解し、室温で１６時間撹拌した。
反応混合物に水を加え、分離した塩化メチレン層を飽和
炭酸水素ナトリウム液、続いて飽和食塩水で洗浄後、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後減圧留去した。残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メ
タノール＝９５：５）に付して化合物１を得た。

【００１７】m.p. ２００℃以上（分解）¹ H-NMR(CDCl₃)δ:2.4ppm(s,3H)、5.3ppm(dd,2H)、8.4ppm
(bs,1H) MS(EI)m/z:134 IR(KBr)cm^-1:3176、2231、1703、1642、1362、1167、895、771、
689、652。

【００１８】実施例２３−アセチル−１−ヘキサデシル−４−メチル−５−ビ
ニリデン−２−ピロリドン （１）２，３−ジオキソブタン（４．３ｇ）、Ｎ−ヘキ
サデシルアセトアセトアミド（１６．２ｇ）、水（６ｍ
ｌ）、エタノール（５０ｍｌ）およびクロロホルム（１
０ｍｌ）の混合物に１０％水酸化ナトリウム液（０．２
５ｍｌ）を加え、１．５時間撹拌した。反応混合物に飽
和食塩水を加えクロロホルムで抽出した。クロロホルム
層を１０％水酸化ナトリウム液、飽和食塩水で順次洗浄
後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を減圧留去した。
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：
クロロホルム）に付した後エーテルから再結晶して３−
アセチル−１−ヘキサデシル−５−ヒドロキシ−４，５
−ジメチル−２−ピロリドン（融点８３．５〜８５℃）
を得た。

【００１９】（２）（１）で得た化合物（１．０ｇ）お
よび１０−カンフルスルホン酸（０．０７ｇ）を塩化メ
チレン（１０ｍｌ）に溶解し室温で１６時間撹拌した。
反応混合物に水を加え分離した塩化メチレン層を飽和炭
酸水素ナトリウム液、続いて飽和食塩水で洗浄後無水硫
酸ナトリウムで乾燥した後減圧留去した。残渣をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（展開液クロロホルム：
メタノール＝９５：５）に付して３−アセチル−１−ヘ
キサデシル−４−メチル−５−ビニリデン−２−ピロリ
ドン（融点６６〜６７℃）を得た。

【００２０】試験例 化合物はジメチルスルホキシドに溶解して調製した。

【００２１】試験例１［人細胞由来タンパク質脱リン酸
化酵素阻害作用］ 人細胞由来タンパク質脱リン酸化酵素はＶＨＲ遺伝子を
導入した大腸菌により調製した。

【００２２】試験は、タンパク質脱リン酸化酵素に一連
の希釈倍率の測定対象物を加え、基質としてパラニトロ
フェニルホスフェート（シグマ社製）を用い、３７℃で
３０分間反応させた。反応後１Ｎの水酸化ナトリウムを
加え、生成したパラニトロフェノールの吸光度をＥＩＡ
リーダー（モデル２５５０：バイオラッド社製）で測定
して、その数値を本発明化合物の活性の有無の判定の指
標とした。

【００２３】薬剤無添加時のタンパク質脱リン酸化酵素
活性を１００％としたときの、化合物１の添加における
５０％阻害活性濃度は２６μＭであった。

【００２４】試験例２［タンパク質脱リン酸化酵素ＣＤ
４５阻害作用］ タンパク質チロシン脱リン酸化酵素ＣＤ４５は培養細胞
Ｂａｌｌ−１の細胞膜より調整した。

【００２５】試験は、タンパク質脱リン酸化酵素に一連
の希釈倍率の測定対象物を加え、基質としてホスホチロ
シン（シグマ社製）を用い、３７℃で３０分間反応後２
５％トリクロロ酢酸で反応停止させた。反応液とassay
buffer（６Ｎ硫酸：１０％アスコルビン酸：２．５％モ
リブデン酸アンモニウム：水＝１：１：１：２）を３７
℃で２時間インキュベートし、生成したリンモリブデン
酸の吸光度をＥＩＡリーダー（モデル２５５０：バイオ
ラッド社製）で測定して、これを本発明化合物の活性の
有無の判定の指標とした。

【００２６】薬剤無添加時のタンパク質脱リン酸化酵素
活性を１００％としたときの、化合物１添加における５
０％阻害活性濃度は５２μＭであった。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｎ 9/99

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（Ｉ） 【化１】 （式中Ｒ¹は水素原子または炭素数１〜２０のアルキル
   基を示し、Ｒ²はシアノ基またはアセチル基を示す。）
   で示されるピロリドン誘導体。
2. 【請求項２】 式（Ｉ）で示されるピロリドン誘導体か
   らなる医薬。