JPH09124679A - セレクチンアンタゴニストとしての新規な糖模擬体およびそれから製造される抗炎症活性薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】 細胞接着の阻害剤としての作用が改善された
四糖シアリル−ルイス−Ｘ(ＳＬｅＸ)およびシアリル−
ルイス−Ａ(ＳＬｅＡ)の新規な模擬体の提供。 【解決手段】 式Ｉの化合物、その製造方法及び当該化
合物を含有する薬剤。 〔式中、Ｄは−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−または−
ＮＲ^６−Ｃ（Ｏ）−であり、Ｅは−ＣＲ^７Ｒ^８−、−Ｎ
Ｒ^７−または５員乃至６員の含窒素複素環であり、
Ｘ^１，Ｘ^２は、−Ｈ、−ＣＯＯＲ^９、−ＮＲ^９Ｒ^１０、
−ＯＨ等であるか一緒になって＝Ｏであり、Ｒ^１は−
Ｈ，−ＣＨ_３または−ＣＨ_２ＯＨであり、Ｒ^２は−Ｈま
たは−ＣＨ_３であり、Ｒ^３，Ｒ^４，Ｒ^５は−Ｈ，Ｃ_１〜
Ｃ_４−アルキルまたは−ＯＨであり、Ｒ^６，Ｒ^７，
Ｒ^８，Ｒ^９，Ｒ^１０は−ＨまたはＣ_１〜Ｃ_４−アルキル
であり、ｎは１，２；ｍは０，１そしてｐは０〜１０の
整数である〕 【効果】 式Ｉの化合物は抗炎症活性を有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は細胞接着の阻害剤としての作用が
改善された四糖シアリル−ルイス−Ｘ（sialyl-Lewis-
X）（ＳＬｅＸ）およびシアリル−ルイス−Ａ（ＳＬｅ
Ａ）の新規な模擬体（mimetics）、これらの化合物の製
造法、並びに薬理活性化合物および診断剤としてのこれ
らの使用に関する。

【０００２】血液細胞、例えば白血球、好中球、顆粒球
および単球の循環は分子レベルにおいて非常に複雑な多
段階からなる過程であり、それらの個々の段階は知られ
ている（T.A. SpringerのCell 76, 301〜314（1994年）
を参照）。ごく最近の研究結果から、免疫監視において
決定的なリンパ球の再循環、並びに炎症性の病巣におけ
る好中球および単球の局在化は非常に似た分子機構に反
応することがわかった。したがって、急性および慢性の
炎症性過程において、白血球は内皮細胞に接着し、炎症
性の病巣および二次リンパ系器官に移動する。

【０００３】この過程には数多くの特異的シグナル分
子、例えばインターロイキン、ロイコトリエンおよび腫
瘍壊死因子（ＴＮＦ）、これらのＧタンパク質に結合さ
れた受容体、特に免疫細胞および内皮細胞の識別を確実
に正確に制御する組織特異的細胞接着分子が関与する。
下記で受容体と呼ばれる、この過程に関与する最も重要
な接着分子にはセレクチン（Ｅ−、Ｐ−およびＬ−セレ
クチン）、インテグリンおよび免疫グロブリンのスーパ
ーファミリーの一員が含まれる。炎症性過程の初期にセ
レクチン受容体によって誘起される、白血球の内皮細胞
への接着は様々な炎症性の刺激および血管組織の損傷に
対する自然で必要な免疫反応である。

【０００４】しかしながら、一連の急性および慢性疾
患、例えばリウマチ；心筋虚血／梗塞（ＭＩ）のような
再潅流損傷；外科手術後の急性肺炎；外傷性ショックお
よび発作；乾癬、皮膚炎、ＡＲＤＳ（成人呼吸障害症候
群）、および外科的介入（例えば血管形成およびバイパ
ス手術）後に起こる再発狭窄症の経過は白血球の過剰接
着およびそれらの冒された組織への浸潤により悪影響を
受ける。したがって、炎症の非常に早い段階でこの接着
過程に影響を及ぼすことは炎症性疾患の薬理学的制御に
おいて非常に魅力のある、一般に応用可能な概念であ
る。今のところ、細胞粘膜上のスフィンゴ糖脂質および
糖タンパク質の基礎構造として存在する四糖シアリル−
ルイス−Ｘ（ＳＬｅＸ）およびシアリル−ルイス−Ａ
（ＳＬｅＡ）はすべての３つのセレクチン受容体に対す
るリガンドとして機能できることが一般に認識されてい
る。

【０００５】文献には、セレクチンの内因性リガンドと
して使用するのに適当な範囲の糖タンパク質、ムチンお
よび糖脂質が記載されている。これらには、Ｌ−セレク
チンに関して粘膜血管アドレシンＭａｄＣＡＭ−１（Be
rgらのNature, 366, 695(1993年）)およびシアロムチン
ＣＤ３４（BaumhuterらのScience, 262, 436(1993
年））、ヒト好中球Ｐ−セレクチンにおけるＯ−結合ポ
リラクトサミンシアロムチンＰＳＧＬ−１（Mooreらの
J. Biol. Chem. 269, 23318(1994年））、並びにＥ−セ
レクチンに関してＥＳＬ−１型のＮ−結合シアロ糖タン
パク質（VestweberらのCell Biol. 121, 449(1993
年））が含まれる。

【０００６】生体内でのセレクチンに対するこれらのお
よび他の潜在的なリガンドの特異性はまだ明らかにされ
ていない。セレクチンリガンド上に存在する四糖ＳＬｅ
ＸおよびＳＬｅＡは実質的により複雑な内因性リガンド
構造の基礎構造を示すだけであり、それらの非常に似た
セレクチン親和性のため、それらは特定の受容体結合を
明らかにするのに単独で使用できない。これらの構造が
複雑なため、セレクチンと結合する四糖ＳＬｅＸ／Ａを
様々な投与形態で基礎構造として、または修飾構造を有
する簡単なその模擬体を過剰の白血球接着の調節または
抑制のアンタゴニストとして使用して上記の疾患の軽減
または治療に寄与する試みは非常に見込みのある治療上
の出発点である。

【０００７】ＳＬｅＸの構造を有する天然リガンドはす
でに、Ｐ−セレクチン依存肺損傷（M.S. MulliganらのN
ature, 364, 149(1993年））および心筋の再潅流損傷
（M. BuerkeらのJ. Clin. Invest. 93, 1140(1994
年））における動物実験で成功裡に使用されている。急
性肺炎の場合、一次臨床試験において、化合物は患者に
１日あたり１〜２ｇの投与量で使用される（第２回糖テ
クノロジー会合におけるCytel Corp. ／La Jolla(CA.)
／La JollaのCHI／USA(1994年5月16〜18日）からのコミ
ュニケーション）。他方、幾つかの刊行物および特許出
願において、様々な構造のリガンドによってより強く結
合するアンタゴニストを得る試みが報告されている。こ
のような研究の目的は潜在的に生体内において低い投与
量で使用するのに適したより活性なアンタゴニストを提
供することである。

【０００８】しかしながら、今日まで構造−活性関係に
ついて重要であるとみなされている様々なフコースおよ
びノイラミン酸単位（B.K. Brandleyらの「糖バイオロ
ジー」, 3, 633(1993年）およびM. Yoshidaらの「複合
糖質」, 10, 3(1993年））は有意な改善された阻害値を
まったくもたらさなかった。グルコサミン単位を変えた
場合（ＧｌｃＮＡｃの２−位でのグルコース、アジドお
よびアミノ基によるＧｌｃＮＡｃの置換）だけ、Ｅ−セ
レクチン受容体に対する有意に増大した親和性を達成す
ることができた。対照的にＰ−セレクチン受容体の場
合、結合は改善されなかった。

【０００９】一般に、ＳＬｅＸ誘導体およびＳＬｅＡ誘
導体の結合親和性の改善における今日までの成功のすべ
てはＥ−セレクチン受容体に限られており、Ｐ−セレク
チン受容体は約１mMの阻害剤濃度で弱い阻害作用しか示
さないことがわかっている（R.M. NelsonらのJ. Clin.
Invest. 91, 1157(1993年））。セレクチンに対する修
飾ＳＬｅＸ／Ａ構造の結合親和性に関する従来技術はPh
armacochem. Libr. 20（薬剤研究の傾向）、第33〜40頁
（1993年）に記載されている。

【００１０】しかしながら、これらの化合物のセレクチ
ンに対する結合親和性が低いことの他に、これらはすべ
て少なくとも１個の不安定なグリコシド結合を有し、そ
れはこれらの活性化合物の経口的利用可能性をかなり制
限する。この不安定性はまた、分解されやすい感受性グ
リコシド結合が反応条件に大きな制限を強いるため、種
々の誘導体の合成を大幅に制限する。安定性を高めるた
めに、模擬体の合成について広範囲のアプローチが行な
われている。安定性の増大はＣ−Ｃ結合を介して側鎖を
フコースのＣ−４炭素に結合させることにより達成され
ている（FloydらのTetrahedron Asymmetry, 5, 2061(19
94年））。

【００１１】

【化１１】

【００１２】しかしながら、この場合、フコースのＣ−
４への結合は天然リガンドのものとは異なる側鎖の配向
を引き起こす。セレクチンとの結合については非常に小
さい親和性であることが明らかにされただけである。側
鎖の結合がＣ−１へのＣ−Ｃ結合によるものである炭素
環式炭水化物類似体（carbacyclic carbohydrate analo
gs）の使用は天然リガンドのと似た配座をもたらすが、
それでも分解に対して安定である。単糖単位の炭素環式
炭水化物類似体の製造に関して大変熱を入れて研究が行
なわれている。

【００１３】様々な方法の中で強調する価値のあるもの
は活性化単糖とニトロメタン（Gross P.H.のTetrahedro
n, 47, 6113(1991年））、アリルシラン（Y. Kishiらの
J. Am. Chem. Soc. 104, 4976〜4978（1982年））およ
びオレフィン（D.A. LevyらのTetrahedron Asymmetry,
5, 2265〜2268(1994年））の反応であり、導入されたそ
の官能基は生成物をその上のカップリング反応のための
単位として適したものにする。

【００１４】セレクチンアンタゴニストの構成単位とし
ての炭素環式類似体の使用はセレクチンに対して親和性
を有する模擬体をもたらした。これに関して、フコース
単位をアリルシランと反応させてα配向の側鎖を有する
特定のＣ−グリコシド単位１を合成することによりそれ
は可能であった（ＷＯ ９５／０４７５１）。α／β＝
１４／１の場合、アリル化の選択性は非常に良好である
が、提案された反応条件のため容易に反応を拡大するこ
とはできないであろう。同様に、構成単位のクロマトグ
ラフィーによる精製は必要であるが、これはα／β混合
物を分離するのに使用することができない。

【化１２】

【００１５】側鎖の末端酸官能基を使用してグリコペプ
チド類似体、例えば２が合成される。これらの誘導体は
１mMまでの範囲のＩＣ₅₀値を有する。しかしながら、グ
リコペプチド類似体はプロテアーゼによるペプチド鎖の
分解に対して不安定であるため、Ｃ−グリコシドによる
糖単位の安定化にも関らず、これらの化合物の経口的利
用可能性もまた非常に制限される。さらなる不利益はβ
−化合物はそれをこの合成で分離して除くことができな
いことである。その相当するβ−誘導体は相当するモデ
ル計算により証明されるように、側鎖が不適当な配向を
有するため不活性である。

【化１３】

【００１６】同様にして、Ｃ−グリコシド単位１はま
た、ＳＬｅ^Xの活性配座を模倣するよう意図された様々
な他の模擬体を合成するために使用されている。しかし
ながら、試験した化合物、例えば３は１０〜２０mMのＩ
Ｃ₅₀値を有し、天然リガンドＳＬｅ^Xのより１０〜２０
倍高かった（WongらのJ. Am. Chem. Soc. 117, 5395(19
95年））。

【化１４】

【００１７】置換アリルシランを使用して、Ｃ−グリコ
シド４を製造することができた。

【化１５】

【００１８】トリテルペノイド酸誘導体（ベツリン酸：
ＷＯ ９５／０４５２６；グリシルレチン酸：ＷＯ ９４
／２４１４５）４ａへの結合により、「多様の薬剤とし
ての可能性」を有すると言われている模擬体が製造さ
れ、広範囲の系（５−リポキシゲナーゼの阻害、抗転移
作用、Ｐ−セレクチン阻害）で試験されている。これら
の試験において、Ｐ−セレクチンとの結合についてのＩ
Ｃ₅₀は０.７５mMであった。しかしながら、トリテルペ
ノイド酸単独ではこの試験において０.１２５mMの値を
与えることに留意すべきである。

【化１６】

【００１９】Ｃ−グリコシド単位４の製造はまた、β−
誘導体を分離するのが困難な場合、複雑なクロマトグラ
フィー精製を必要とする。さらに、Ｃ−グリコシドの安
定性は反応性のアリルクロライド基により制限される。

【００２０】すでに記載した製造上の問題（複雑なクロ
マトグラフィー精製、保護基戦略による多数の段階、α
／β混合物）の他に、上記のＣ−グリコシド模擬体はそ
れらが有効に接着過程に介在するには小さすぎる、セレ
クチンとの結合親和性を有する。その理由はフコース模
擬体が全く安定であるという面の他に、セレクチンとの
結合に関して特に重要な条件が主として側鎖の配向およ
び配座固定であり、その条件は上記の誘導体によって満
たされないためである。このような局面はWongらの誘導
体において特に明らかであり、その側鎖の構造の僅かな
変化は結合強度に著しい効果を及ぼす（Ｏ−Ｃ交換）。

【００２１】L.A. Laskyによれば、陰電荷のシアル酸
（または陰電荷のスルホン酸基）はセレクチンとの結合
のために絶対に必要である。Ｅ−セレクチンの結晶構造
は解明されているため、可能な結合部位に関する研究は
すでに行なわれている。これに関して、シアル酸官能基
について提案された可能な結合部位は一方では２つのリ
シンＫ１１１およびＫ１１３（J. Bajorathらの「生化
学」，33, 1332(1994年））であり、他方ではＡｒｇ９
７、Ｌｙｓ１１１およびＬｙｓ１１３（「構造生物
学」, 1, 140(1994年））である。

【００２２】上記に照らして、本発明の目的はその構造
および配置がセレクチンに対して有意に増大した親和性
を有し、オリゴ糖よりも合成が容易であり、そしてその
構造がそれらを潜在的な経口的利用可能性を有する薬剤
として適当なものにする、それぞれシアリル−ルイス−
Ｘおよびシアリル−ルイス−Ａ構造の安定で低分子量の
模擬体を提供することである。

【００２３】本目的は式Ｉ

【化１７】 （式中、Ｒ¹は−Ｈ、−ＣＨ₃または−ＣＨ₂ＯＨであ
り、Ｒ²は−Ｈまたは−ＯＨであり、Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵
は互いに独立して−Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルまたは−Ｏ
Ｈであり、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹およびＲ¹⁰は互いに独立
して−ＨまたはＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであり、Ｄは−Ｏ−
Ｃ(Ｏ)−、−Ｃ(Ｏ)−または−ＮＲ⁶−Ｃ(Ｏ)−であ
り、Ｅは−ＣＲ⁷Ｒ⁸−、−ＮＲ⁷−または式

【化１８】 の窒素、複素環であり、ｎは１または２であり、ｍは０
または１であり、ｐは０〜１０の整数であり、ｑは１ま
たは２であり、そしてＸ¹およびＸ²は互いに独立して−
Ｈ、−ＣＯＯＲ⁹、−ＮＲ⁹Ｒ¹⁰、−ＯＨ、−ＯＳＯ
₃Ｈ、−ＣＨ₂ＣＯＯＲ⁹もしくは−ＣＨ₂ＯＳＯ₃Ｈであ
るか、または一緒になって＝Ｏである）の化合物により
達成される。

【００２４】式Ｉの化合物において、ｍは好ましくは１
であり、そしてＤは好ましくは−Ｏ−Ｃ(Ｏ)であるか、
またはｍは好ましくは０である。あるいは、式Ｉにおい
てｎは２であり、Ｒ²は−ＯＨであり、Ｒ¹は好ましくは
−ＣＨ₃または−ＣＨ₂ＯＨであり、そして式Ｉ中のオキ
サ環

【化１９】 は特に好ましくはＬ−フコシル基またはＤ−マンノシル
基の配置を有するか、またはｎは１であり、Ｒ¹は−Ｃ
Ｈ₂ＯＨであり、Ｒ²は−ＯＨであり、そして式Ｉ中のオ
キサ環は特に好ましくはリボシル基の配置を有する。あ
るいは、本発明の化合物において、

【００２５】１．Ｅは−ＮＲ⁷−であり、Ｒ⁷は−Ｈであ
り、ｐは０であり、Ｒ⁵は−Ｈであり、Ｘ¹は−ＣＯＯＲ
⁹であり、Ｘ²は−ＣＨ₂ＣＯＯＲ⁹であり、そしてＲ⁹は
−Ｈである、例えば

【化２０】 であるか、

【００２６】２．Ｅは−ＮＲ⁷−であり、Ｒ⁷は−Ｈであ
り、ｐは４であり、Ｒ³およびＲ⁴は−Ｈであり、Ｒ⁵は
−Ｈであり、Ｘ¹は−ＣＯＯＲ⁹であり、Ｘ²は−ＮＲ⁹Ｒ
¹⁰であり、そしてＲ⁹およびＲ¹⁰は−Ｈである、例えば

【化２１】 であるか、

【００２７】３．Ｅは式

【化２２】 の複素環であり、ｑは２であり、ｐは０であり、Ｒ⁵は
−ＯＨであり、そしてＸ¹およびＸ²は一緒になって＝Ｏ
である、例えば

【００２８】

【化２３】 であるか、

【００２９】４．Ｅは式

【化２４】 の複素環であり、ｑは２であり、ｐは０であり、Ｒ⁵お
よびＲ⁹は−Ｈであり、そしてＸ¹およびＸ²は−ＣＯＯ
Ｒ⁹である、例えば

【００３０】

【化２５】 であるということもまた可能である。

【００３１】本目的はまた、式II

【化２６】 （式中、Ｒ¹、Ｒ²およびｎは上記で定義された通りであ
り、Ｒ¹およびＲ²は必要に応じて保護基を有し、そして
Ｒはアセチル基である）の化合物をアリルシランと適当
な溶媒中、ルイス酸触媒の作用下で、例えばアセトニト
リル中の三フッ化ホウ素、エテラートまたはニトロメタ
ン中のトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネー
ト（トリメチルシリルトリフレート）を用いて反応させ
て式III

【化２７】 （式中、すべての記号は上記で定義された通りである）
の、一般には簡単な再結晶により純粋な形態で（すなわ
ち、相当するエピマーなしに）製造することのできる化
合物を生成させ、その後すべての保護基をベンジル保護
基に変換し、アリル性２重結合を官能化して式IV

【化２８】 （式中、記号Ｒ¹およびＲ²は上記で定義された通りであ
り、また必要に応じて保護基を有し、Ｒはベンジル基で
あり、そしてＹはハロゲン、または例えば活性エステル
として活性化されたＯＨ基である）の化合物を生成さ
せ、その後式IVの化合物を式Ｖ Ｘ−Ｅ−(ＣＲ³Ｒ⁴)_p−ＣＲ⁵Ｘ¹Ｘ² （Ｖ） （式中、Ｘは−Ｈまたは−ＣＯＯＨであり、そしてすべ
ての他の記号は上記で定義された通りである）の化合物
と反応させ、その後すべての保護基を除去して式Ｉの化
合物を得ることからなる、式Ｉの化合物の製造法によっ
て達成される。

【００３２】活性化ＯＨ基Ｙは遊離のＯＨ基をｐ−ニト
ロフェニルクロロホルメートと反応させることにより有
利に製造することができる（「ポリマー」, 34, 26〜33
（1993年））。

【００３３】本発明の化合物およびそれらの生理学的に
適合しうる塩はそれらの有用な薬理学的性質のため、哺
乳動物、特にヒトの医薬として使用するのに非常に適し
ている。したがって、本発明はさらに、式Ｉの化合物を
含有する薬剤、および例えばリウマチ、再潅流損傷、虚
血または心筋梗塞のような疾患により影響される組織に
おいてセレクチン受容体が関与する過剰の細胞接着を伴
なう疾患の治療または予防のための薬剤の製造における
その使用を提供する。

【００３４】これらの薬剤は細胞、例えばリンパ球、単
球および好中性顆粒球の循環の破壊が病態生理学的な特
徴である急性および慢性の炎症を治療するのに特に適し
ている。これには、急性多発関節炎、リウマチ様関節炎
およびインシュリン依存型真性糖尿病（ＩＤＤＭ）のよ
うな自己免疫疾患；急性および慢性の移植拒絶反応、Ａ
ＲＤＳ（成人呼吸障害症候群）、炎症性およびアレルギ
ー性の皮膚疾患、例えば乾癬および接触湿疹；心筋梗
塞、血栓崩壊、血管形成またはバイパス手術後の再潅流
損傷、敗血症性ショックおよび全身性ショックのような
心臓血管の疾患が含まれる。さらに、腫瘍細胞は識別エ
ピトープとしてシアリル−ルイス−Ｘおよびシアリル−
ルイス−Ａ構造の両方を有する表面抗原を担持するた
め、転移性腫瘍の治療が潜在的に考えられる。その上、
胃の酸性媒質中で安定なこれらの薬剤を適当ならば抗生
物質と組み合せてヘリコバクターピロリ菌および関連の
微生物の抗接着治療に使用することができる。これらの
薬剤の助けによって、脳性マラリアの治療もまた考えら
れる。

【００３５】本発明の薬剤は一般に静脈内的に、経口的
に、非経口的に、またはインプラントとして投与される
が、原則的に経腸的投与もまた可能である。適当な固体
または液体の製剤形態は顆粒剤、散剤、錠剤、フィルム
コーチング錠、マイクロカプセル剤、坐剤、シロップ
剤、乳剤、懸濁剤、エアゾル剤、滴剤またはアンプル形
態の注射剤、さらに活性化合物の放出が遅延される製剤
であり、その製造では一般に賦形剤、添加剤および／ま
たは補助剤、例えば崩壊剤、結合剤、コーチング剤、膨
潤剤、滑剤、潤滑剤、芳香剤、甘味剤または可溶化剤を
使用する。しばしば使用される賦形剤または補助剤とし
て、例えば炭酸マグネシウム、二酸化チタン、ラクトー
ス、マンニトールおよび他の糖、タルク、ラクトタンパ
ク質、ゼラチン、スターチ、ビタミン、セルロースおよ
びその誘導体、動物および植物油、ポリエチレングリコ
ールおよび溶媒、例えば滅菌水、アルコール、グリセロ
ールおよび多価アルコールが挙げられる。

【００３６】製剤は好ましくは投与単位で製造され、投
与される。固体の投与単位は錠剤、カプセル剤および坐
剤である。患者を治療するためには、化合物の有効性、
投与方法、病気の性質および程度、患者の年令および体
重に応じて異なる１日量が要求される。しかしながら、
特定の情況下では多めまたは少なめの１日量が適当であ
る。１日量は単一の投与単位形態でまたは多数の小さい
投与単位として一度に、あるいは所定の間隔での部分投
与量の繰り返し投与により投与することができる。投与
される１日量はさらに、病気の経過中に発現する受容体
の数に依存する。病気の初期段階ではほんの少しの受容
体しか細胞表面上に発現せず、その結果投与される１日
量は深刻に冒された患者の場合よりも低いことが考えら
れる。

【００３７】新規な薬剤は本発明の化合物を慣用の賦形
剤、所望により添加剤および／または補助剤と一緒に適
当な投与形態にすることにより製造される。下記で本発
明を特にその好ましい態様に関して詳しく説明する。

【００３８】式Ｉの化合物の合成 僅か３段階で全収率７２％の純粋なα−Ｃ−グリコシド
８の合成を行なうことができた（スキーム）。

【化２９】

【００３９】Ｌ−フコース５を無水酢酸／ピリジンでア
セチル化（９５〜９８％）した後、それをＢＦ₃触媒を
使用してアリルシランと反応させた（９２％、α／β比
１０：１）。得られたＣ−グリコシド７を（定量的に）
脱アシル化し、再結晶により精製した。再結晶条件を適
当に選択することにより、知られている方法と比べて純
粋な形態で（すなわち、その相当するβ誘導体を含まな
いで）α誘導体８を得ることができた。このシーケンス
における唯一の精製工程は再結晶である。Ｃ−グリコシ
ド８は側鎖を官能化し、固定するのに使用することがで
きる。

【００４０】８のヒドロキシル基をベンジル化して保護
し、ボランでヒドロホウ素化してアルコール１０を６３
％の収率で得た。アルコールをトリフェニルホスフィン
／ジブロモテトラクロロエタンで臭化物１１に変換した
（収率９２％）。

【化３０】 アルコール１０および臭化物１１は結合に必要な側鎖の
合成に適した構成単位である（実施例１２ａ〜ｄおよび
１３ａ、ｂを参照）。

【００４１】反応は同様に他のＣ−グリコシド単位、例
えばＤ−マンノースから製造することができる化合物１
４またはリボースから出発して化合物１９を通って製造
することができる化合物２０に変化させることができ
る。さらに、本発明の方法は同様にＬ−ガラクトース、
Ｌ−ラムノースおよびグルコースの誘導体を製造するた
めに使用することができる。

【化３１】

【００４２】再結合の可溶性セレクチン融合タンパク質
への細胞接着に関する本発明の化合物の作用を調べるた
めの基本アッセイ それらのリガンドを有するＥ−およびＰ−セレクチン
（前者の名称はそれぞれＥＬＡＭ−１およびＧＭＰ−１
４０）間の相互作用に関する新規化合物の活性を試験す
るために、それぞれの場合においてこれらの相互作用の
一方にのみ特異的なアッセイが使用される。リガンドは
前骨髄球ＨＬ６０細胞の表面構造として天然の形態で供
給される。ＨＬ６０細胞はリガンドおよび非常に異なる
特異性の接着分子を含有するため、結合成分を用いて所
望の特異性のアッセイを行なうことができるだけであ
る。使用した結合成分はそれぞれの場合においてＥ−ま
たはＰ−セレクチンの細胞質外ドメインおよびＩｇＧ１
サブクラスのヒト免疫グロブリンの一定領域から遺伝学
的に製造された可溶性の融合タンパク質である。

【００４３】Ｌ−セレクチン−ＩｇＧ１の製造 可溶性のＬ−セレクチン−ＩｇＧ１融合タンパク質を製
造するため、Walzらにより公表（１９９０年）された遺
伝子構造“ＥＬＡＭ−Ｒｇ”を使用した。発現のため、
プラスミドＤＮＡをＤＥＡＥ−デキストランによりＣＯ
Ｓ−７細胞(ＡＴＣＣ）でトランスフェクションした
（分子生物学方法：Ausubel, F.M.,Brent, R., Kingsto
n, R.E., Moore, D.D., Seidman, J.G., Struhl, K.お
よびSmith, J.A.の「分子生物学における現在のプロトコ
ル」，John Wiley(1990年）を参照）。トランスフェク
ションしてから７日後、培養物の上澄みを回収し、細胞
および細胞断片から遠心分離により分離し、そして２５
mMのＨＥＰＥＳ（pH７.０）、０.３mMのＰＭＳＦ、０.
０２％アジ化ナトリウムに移し、４℃で保存した（Wal
z, G., Aruffo, A., Kolanus, W., Bevilacqua, M.およ
びSeed, B.の「骨髄および腫瘍細胞におけるシリアル−
Ｌｅｘ決定基のＥＬＡＭ−１による識別」、“サイエン
ス”250, 1132〜1135(1990年））。

【００４４】Ｐ−セレクチン−ＩｇＧ１の製造 可溶性のＰ−セレクチン−ＩｇＧ１融合タンパク質を製
造するため、Aruffoらにより公表（１９９１年）された
遺伝子構造“ＣＤ６２Ｒｇ”を使用した。その後の手順
はＡ１に示したＬ−セレクチン−ＩｇＧ１の製造と一致
する（Aruffo,A., Kolanus, W., Walz, G., Fredman,
P.およびSeed, B.の「骨髄および腫瘍細胞スルファチド
のＣＤ６２／Ｐ−セレクチン識別」，“細胞”67，35〜
44（1991年））。

【００４５】ＣＤ４−ＩｇＧ１の製造 可溶性のＣＤ４−ＩｇＧ１融合タンパク質を製造するた
め、Zettlemeisslらにより公表（１９９０年）された遺
伝子構造“ＣＤ４：ＩｇＧ１ヒンジ”を使用した。その
後の手順はＡ１に示したＬ−セレクチン−ＩｇＧ１の製
造と一致する（Zettlemeissl, G., Gregersen, J.P., D
uport, J.M., Mehdi, S., Reiner, G.およびSeed, B.の
「ヒトＣＤ４：免疫グロブリン融合タンパク質の発現お
よび特性決定」、“ＤＮＡおよび細胞生物学”9, 347〜
353（1990年））。

【００４６】組換え体の可溶性接着分子におけるＨＬ６
０細胞接着アッセイの実施 １．９６ウェル（well）のマイクロタイターアッセイプ
レート（Nunc Maxisorb社製）を５０mMのトリス（pH９.
５）で希釈（１＋１００）された１００μｌのヤギ抗ヒ
トＩｇＧ抗体（Sigma社製）と一緒に、室温で２時間イ
ンキュベートする。抗体溶液を除去した後、ＰＢＳで洗
浄を１回行なう。 ２．１５０μｌの阻止緩衝液をウェルに入れて室温で１
時間放置する。阻止緩衝液の組成は次のようである：
０.１％ゼラチン、１％ＢＳＡ、５％仔ウシ血清、０.２
mMのＰＭＳＦ、０.０２％アジ化ナトリウム。阻止緩衝
液を除去した後、ＰＢＳで洗浄を１回行なう。

【００４７】３．適当にトランスフェクションし、発現
したＣＯＳ細胞からのそれぞれ１００μｌの細胞培養上
澄みをピペットでウェルに入れる。インキュベーション
を室温で２時間行なう。細胞培養上澄みを除去した後、
ＰＢＳで洗浄を行なう。 ４．２０μｌの結合緩衝液をウェルに加える。結合緩衝
液は次の組成を有する：５０mMのＨＥＰＥＳ（pH７.
５）、１００mMのＮａＣｌ、１mg／mlのＢＳＡ、２mMの
ＭｇＣｌ₂、１mMのＣａＣｌ₂、３mMのＭｎＣｌ₂、０.０
２％アジ化ナトリウム、０.２mMのＰＭＳＦ。５μｌの
試験物質をピペットで加え、プレートをゆらして混合
し、室温で１０分間インキュベートする。

【００４８】５．１mlあたり２００,０００個の細胞を
含有する５０mlのＨＬ６０細胞培養物を３５０ｇで４分
間遠心分離する。ペレットを１０mlのＲＰＭＩ １６４
０中で再懸濁し、細胞を再び遠心分離する。細胞を標識
するため、５０μｇのＢＣＥＣＦ−ＡＭ（分子プロー
ブ）を５μｌの無水ＤＭＳＯに溶解し、次に１.５mlの
ＲＰＭＩ １６４０をＢＣＥＣＦ−ＡＭ／ＤＭＳＯ溶液
に加える。この溶液を使用して細胞を再懸濁し、３７℃
で３０分間インキュベートする。３５０ｇで２分間遠心
分離した後、標識細胞ペレットを１１mlの結合緩衝液中
で再懸濁し、その再懸濁細胞を１００μｌのアリコート
でマイクロタイタープレートのウェルに分配する。プレ
ートを室温で１０分間放置して細胞を試験プレートの底
に沈降させる。この操作の間に、細胞は被覆プラスチッ
クに接着する機会を有する。

【００４９】６．アッセイを停止するため、マイクロタ
イタープレートを停止緩衝液（２５mMのトリス（pH７.
５）、１２５mMのＮａＣｌ、０.１％ＢＳＡ、２mMのＭ
ｇＣｌ ₂、１mMのＣａＣｌ₂、３mMのＭｎＣｌ₂、０.０２
％アジ化ナトリウム）に４５°の角度で完全に浸漬す
る。停止緩衝液を逆さにすることによりウェルから除去
し、その操作をさらに２回繰り返す。 ７．ウェルにしっかりと接着するＢＣＥＣＦ−ＡＭ−標
識細胞の測定を細胞蛍光計（Millipore社製）により感
度設定４、励起波長４８５／２２nmおよび発光波長５３
０／２５nmで行なう。

【００５０】白血球接着−生体内での新規化合物の活性
試験 炎症性過程やサイトキンを活性化する他の状態におい
て、微小循環で移動する、またはそれを遮断する白血球
による組織の破壊が重要な役割を果たす。病気のその後
の経過において重要な初期は特に前および後毛細血管領
域における血流中の白血球の活性化である。これは、白
血球が血液の軸流から離れた後、内部血管壁、すなわち
血管の内皮への白血球の初期接着をもたらす。その後の
すべての白血球の作用、すなわち血管壁中の活性な移動
および組織におけるその後の配向移動は二次反応である
（Harlan, J.M.の「白血球−内皮相互作用」、“血液”
65,513〜525（1985年））。

【００５１】この受容体が関与する白血球および内皮細
胞の相互作用は炎症性過程の初期徴候であると考えられ
る。単に生理学的に発現した接着分子の他に、炎症仲介
物質（ロイコトリエン、ＰＡＦ）およびサイトキン（Ｔ
ＮＦ−α、インターロイキン）の作用下、細胞上で接着
分子の多くの、年代順に配列した発現がある。これらは
一般に３つのグループに分けられる：１．免疫グロブリ
ン遺伝子上科、２．インテグリン、および３．セレクチ
ン。Ｉｇ遺伝子のスーパーファミリーの分子間接着はタ
ンパク質−タンパク質結合により起こるが、セレクチン
間の協同性の場合、レクチン−炭水化物結合が主として
関与する（Springer, T.A.の「免疫系の接着受容体」、
“ネーチャー”346, 425〜434（1990年）；Huges, G.の
「細胞接着分子−万能薬への鍵」、“スクリップスマガ
ジン”6, 30〜33（1993年）；Springer, T.A.の「リン
パ球再循環および白血球遊出のためのトラフィックシグ
ナル；多段階モデル」、“細胞”76, 301〜314（1994
年））。

【００５２】方法：白血球の誘発接着はラットの腸間膜
において生存中の顕微鏡検査を含む分析法により定量さ
れる（Atherton A.およびBorn G.V.R.の「循環する多形
核白血球の血管壁への接着の定量分析」、J. Physiol.
222, 447〜474（1972年）；Seiffgeの「炎症における受
容体によって誘起される白血球および内皮細胞の相互作
用の分析法」、Ersatz-und Ergaenzungsmethoden zu Ti
erversuchen in der biomedizinischen Forschung, Sch
oeffl, H.ら編, Springer, 1995(出版中））。エーテル
吸入麻酔下、ウレタン（１.２５mg／kg体重）の筋肉内
注射により長期間の麻酔が誘発される。血管（物質を注
射するために大腿静脈、そして血圧を測定するために頚
動脈）の露出後、カテーテルをこれらの血管に挿入し、
しっかりと留める。次に、相当する透明な組織（腸間
膜）を文献で知られている標準的な方法により露出さ
せ、顕微鏡の載物台に移し、そして３７℃の熱パラフィ
ン油の層でカバーする（Menger, M.D.およびLehr, H.A.
の「生存中の顕微鏡検査の範囲および展望−生体外から
生体内までの橋渡し」、“現代の免疫学”14, 519〜522
（1993年））。試験物質を静脈内的に投与（１０mg／k
g）する。リポ多糖（ＬＰＳ、１５mg／kg）の全身投与
による血液細胞接着の実験的増加はサイトキン活性化に
より試験物質を投与してから１５分後に開始する（Fost
er S.J., McCormick L.M.,Ntolosi B.A.およびCampbell
D.の「ＬＰＳ−刺激ネズミ、ラットおよびヒト血液に
よるＴＮＦ−αの産生、およびその薬理学的調節」、
“薬剤および作用”38, C77〜C79, 1993, 18.01. 199
5）。得られる内皮上の増大した白血球接着は直接、生
体顕微鏡検査により、または蛍光染料を用いて定量され
る。すべての測定作業をビデオカメラで記録し、ビデオ
レコーダーに保存する。６０分間にわたって、循環する
白血球の数（すなわち、流れる赤血球よりも遅いすべて
の目に見える循環する白血球）および（５秒を越えて）
内皮に接着する白血球の数を１０分毎に計測する。実験
の終了後、麻酔をかけた動物をＴ６１の全身注射により
興奮させることなく苦痛を与えずに殺す。８匹の処置動
物の結果をそれぞれの場合の８匹の未処置動物の結果
（対照グループ；％）と比較して評価する。

【００５３】

【実施例】

実施例１ Ｃ−グリコシド単位１０および１１の製造 フコースのアセチル化 ピリジン（６１６ml、７.６２モル）および無水酢酸
（６３３ml、６.７モル）をＬ−フコース５（２５０
ｇ、１.５２モル）に加え、混合物を室温で２４時間撹
拌した。溶媒を回転蒸発器で除去し、残留物を高真空下
で乾燥した。６（４９６ｇ、９８％）を黄色の油状物と
して得た。 ＴＬＣ〔ヘキサン／酢酸エチル：１／１〕：R_f=0.60- ¹
H-NMR (300 MHz, CDCl₃): d=1.18(d, 3H, J_6.5=6.9 Hz,
6-H^Fuc), 2.00-2.15(4s, 12H, CH₃)

【００５４】フコース誘導体６（５０ｇ、０.１５モ
ル）をアルゴン下でアセトニトリル（３００ml）に溶解
し、−１０℃に冷却した。アリルシラン（４７.９ml、
０.３０モル）および三フッ化ホウ素−ジエチルエーテ
ル錯体（２０.４ml、０.１６６モル）を添加した後、混
合物を−１０℃で１時間撹拌した。室温まで加温した
後、さらに３時間撹拌した。溶液を飽和炭酸水素ナトリ
ウム溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。溶媒を回転蒸
発器で除去した。残留物をジクロロメタンに取り、短シ
リカゲルカラムを通して濾過した。溶媒を除去して７
（α／β＝１０／１）を黄色の油状物として得た（４
３.５ｇ、９２％）。 ＴＬＣ〔ヘキサン／酢酸エチル：１／１〕：R_f=0.65- ¹
H-NMR (300 MHz, CDCl₃): d=1.19(d, 3H, J_6.5=6.9 Hz,
6-H ^Fuc), 2.00-2.15(3s, 9H, CH₃), 2.20-2.58(m, 2
H), 3.98(m, 1H), 4.28(m, 1H), 5.05-5.85(m, 6H)

【００５５】アリル誘導体７（４３.５ｇ、０.１３９モ
ル）をメタノール（２００ml）に溶解し、ナトリウムメ
タノレート溶液（３ml、３０％濃度）を加えた。溶液を
室温で２時間撹拌し、酸性イオン交換体（Ｄｏｗｅｘ
５０ＷＸ８）を用いて中和した。イオン交換体を濾過に
より除去し、溶媒を回転蒸発器で除去した。脱アセチル
化フコース誘導体を淡黄色の固体として得た（２６.０
ｇ、定量）。残留物を加熱しながら酢酸エチルに溶解
し、温濾過した。回転蒸発器で溶媒を除去した後、残留
物を再び加熱しながら湿った酢酸エチルに溶解した。溶
液を冷却して８を白色の固体として結晶化した（２０.
８ｇ、８０％）。 ＴＬＣ〔ジクロロメタン／メタノール：１０／１〕：R_f
=0.25- ¹H-NMR (300 MHz, D₂O): d=1.05(d, 3H, J_6.5=
6.9 Hz, 6-H^Fuc), 2.19-2.43(m, 2H), 3.60-4.00(m, 5
H), 5.05(m, 2H), 5.62-5.80(m, 1H)

【００５６】ＤＭＦ（５ml）中における８（５.０ｇ、
２７.０ミリモル）の溶液をＤＭＦ（４０ml）中におけ
る水素化ナトリウム（９５％、２.２７ｇ、９５ミリモ
ル）の懸濁液にアルゴン下、０℃でゆっくりと滴加し
た。混合物をこの温度で３０分間撹拌した。臭化ベンジ
ル（１０.３ml、８６.５ミリモル）を滴加した。１時間
後、混合物を室温まで加温し、室温でさらに１２時間撹
拌した。メタノールおよび水を注意しながら加えた後、
酢酸エチルで抽出した。有機相を数回水で洗浄し、硫酸
マグネシウム上で乾燥した。溶媒を回転蒸発器で除去し
て油状残留物を得、それをフラッシュクロマトグラフィ
ー（イソヘキサン／酢酸エチル＝４／１〜１／１）によ
り精製した。９（９.１ｇ、１９.９ミリモル、７４％）
を無色の油状物として得た。 ＴＬＣ〔トルエン／酢酸エチル：１／１〕：R_f=0.55- ¹
H-NMR (300 MHz, CDCl₃): d＝1.15(d, 3H, J_6.5=6.9 H
z, 6-H^Fuc), 2.22-2.45(m, 2H), 3.78(m, 3H), 3.90-4.
10(m, 2H), 4.40-4.80(m, 6H), 5.00-5.12(m, 2H), 5.8
0(m, 1H), 7.30-7.40(m, 15H)

【００５７】アリル化合物９（９.１ｇ、１９.９ミリモ
ル）をアルゴン下でＴＨＦ（４０ml）に溶解し、溶液を
０℃に冷却し、そして１Ｍボラン−ＴＨＦ（２５ml）溶
液をこの温度で滴加した。添加終了後、溶液を室温まで
加温し、３時間撹拌した。混合物を再び０℃に冷却し、
５ＭのＮａＯＨ溶液（２５ml）および３０％濃度の過酸
化水素溶液（２０ml）を注意しながら加えた。酢酸エチ
ルで抽出した後、溶媒を回転蒸発器で除去した。残留物
をフラッシュクロマトグラフィー（イソヘキサン／酢酸
エチル＝２／１〜１／１）により精製した。１０（８.
０５ｇ、１６.９ミリモル、８５％）を無色の油状物と
して得た。

【００５８】アルコール１０（７４０mg、１.６ミリモ
ル）をジクロロメタン（１０ml）に溶解し、溶液を０℃
に冷却した。トリエチルアミン（２３０μｌ、６.４ミ
リモル）、トリフェニルホスフィン（ポリマー結合、
１.１ｇ、３.２ミリモル）およびジブロモテトラクロロ
エタン（１.０４ｇ、３.２ミリモル）を連続して加え
た。混合物を０℃で撹拌して変換を完了（１時間）さ
せ、ジクロロメタンに取り、水で洗浄した。溶媒を回転
蒸発器で除去した後、残留物をフラッシュクロマトグラ
フィー（イソヘキサン／酢酸エチル＝４／１〜２／１）
により精製した。１１を無色の油状物として得た（０.
７９ｇ、１.４７ミリモル、９２％）。 ＴＬＣ〔トルエン／酢酸エチル：１／１〕：R_f=0.85- ¹
H-NMR (300 MHz, CDCl₃): d=1.15(d, 3H, J_6.5=6.9 Hz,
6-H^Fuc), 1.56-2.00(m, 3H), 3.40(m, 2H), 3.78(m, 3
H), 3.80-4.00(m, 3H), 4.40-4.80(m, 6H), 7.30-7.40
(m, 15H)

【００５９】実施例２ カルバメート１２ａ〜ｄの製造法 アルコール１０をジクロロメタン（１０ml／ミリモル）
に溶解し、トリエチルアミン（１.１当量）を加えた。
ｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（１.３当量）お
よび触媒量のＤＭＡＰを０℃で加えた。溶液を一晩撹拌
し、ＤＩＰＥＡ（３当量）およびアミン成分（１.５当
量）を加えた。溶液を室温でさらに１０時間撹拌し、ジ
クロロメタンに取り、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗
浄した。溶媒を回転蒸発器で除去した後、残留物をＭｅ
ＯＨ／ジオキサン／ＡｃＯＨ（５／１／１）に溶解し、
触媒としてＰｄ／Ｃ（１０％）を使用して水素化した
（１０時間）。濾過により触媒を除去し、溶媒を除去し
た後、油状残留物を１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（３〜５
ml）に取り、加水分解が完了するまで混合物を撹拌した
（２時間）。混合物をクロマトグラフィー（Bakerbon
d、シリカゲル ＲＰ １８、４０μｍ、メタノール／水
＝１０／９０〜９０／１０）により精製した。

【００６０】１２ａ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール
／ギ酸／水＝５／３／０.５／１〕：R _f=0.30- ¹H-NMR
(300 MHz, D₂O): d=1.05(d, 3H, J_6.5=6.9 Hz, 6-
H^Fuc), 1.60-1.95(m, 2H), 2.96(m, 1H), 3.78-10(m, 8
H), 4.58(m, 1H) １２ｂ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝
５／３／０.５／１〕：R _f=0.35- ¹H-NMR (300 MHz, D
₂O): d=1.05(d, 3H, J_6.5=6.9 Hz, 6-H^Fuc), 1.10-1.80
(m, 10H), 3.00(m, 2H), 3.57-4.05(8H) １２ｃ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝
５／３／０.５／１〕：R _f=0.25- ¹H-NMR (300 MHz, D
₂O): d=1.5(d, 3H, J_6.5=6.9 Hz, 6-H^Fuc), 1.25-1.80
(m, 7H), 2.4(m, 1H), 2.80(m, 2H), 3.60-4.05(m, 9H) １２ｄ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝
５／３／０.５／１〕：R _f=0.20- ¹H-NMR (300 MHz, D
₂O): d=1.5(d, 3H, J_6.5=6.9 Hz, 6-H^Fuc), 1.80-2.05
(m, 4H), 3.60-4.50(m, 16H)

【００６１】実施例３ アミン１３ａ、ｂの製造法 アミン（１当量）、トリエチルアミン（２当量）および
触媒量のＤＭＡＰをジクロロメタン（３ml／ミリモル）
中における臭素１１の溶液に加えた。混合物を反応が完
了するまで室温で撹拌して、ジクロロメタンに取り、水
で洗浄した。溶媒を回転蒸発器で除去した後、残留物を
フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキ
サン／酢酸エチル＝４／１〜１／１）により精製した。
残留物をＭｅＯＨ／ジオキサン／ＡｃＯＨ（５／１／
１）に溶解し、触媒としてＰｄ／Ｃ（１０％）を使用し
て水素化した（１０時間）。濾過により触媒を除去し、
溶媒を除去した後、油状残留物を１Ｍ水酸化ナトリウム
溶液（３〜５ml）に取り、加水分解が完了するまで撹拌
した。混合物をクロマトグラフィー（Bakerbond、シリ
カゲル ＲＰ １８、４０μｍ、メタノール／水＝１０／
９０〜９０／１０）により精製した。

【００６２】１３ａ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール
／ギ酸／水＝５／３／０.５／１〕：R _f=0.25-¹H-NMR (3
00 MHz, D₂O): d= １３ｂ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝
５／３／０.５／１〕：R _f=0.20-¹H-NMR (300 MHz, D
₂O): d=

【００６３】実施例４ マンノース誘導体 ８と同様にして、３段階でマンノース誘導体１４をα／
β混合物として６２％の収率で製造した。 ＴＬＣ〔ジクロロメタン／メタノール：１０／１〕：R_f
=0.30- ¹H-NMR(300 MHz,D₂O): d=2.19-2.43(m, 2H), 3.
64-4.00(m, 7H), 5.05(m, 2H), 5.62-5.80(m, 1H) ９と同様に１４のベンジル化により、アリル化合物１５
を製造した。１５はまた、その相当するベンジル先駆物
質のアリル化により直接製造することができる。 ＴＬＣ〔トルエン／酢酸エチル：５／１〕：R_f=0.45- ¹
H-NMR(300 MHz, CDCl₃):d=2.35(m, 2H), 3.60-4.20(m,
6H), 4.50-4.60(m, 8H), 4.72(m, 1H), 5.00(m,2H), 5.
78(m, 1H), 7.20-7.40(m, 20H)

【００６４】１５のヒドロホウ素化により１６を得た。 ＴＬＣ〔トルエン／酢酸エチル：１／１〕：R_f=0.25- ¹
H-NMR(300 MHz, CDCl₃):d=1.60(m, 4H), 3.58-4.05(m,
9H), 3.50-4.05(m, 8H)

【００６５】フコース誘導体１０と同様にして誘導体１
７ａ〜ｃおよび１８ａ、ｂを１６から合成した。 １７ａ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝
５／３／０.５／１〕：R _f=0.25- ¹H-NMR (300 MHz, D
₂O): d=1.40-1.93(m, 9H), 2.5(m, 1H), 2.80-3.00(m,
2H), 3.40-4.12(m, 10H)

【００６６】アスパラギン誘導体 １７ｂ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝
５／３／０.５／１〕：R _f=0.30- ¹H-NMR (300 MHz, D
₂O): d=1.40-1.75(m, 4H), 3.20(m, 1H), 3.40-3.82(m,
10H) リシン誘導体 １７ｃ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝
５／３／０.５／１〕：R _f=0.30- ¹H-NMR (300 MHz, D
₂O)：d=1.30-1.78(m, 7H), 3.35-3.80(m, 15H) ピペリジン誘導体 １８ ＴＬＣ〔酢酸エチル／メタノール／ギ酸／水＝５
／３／０.５／１〕：R_f=0.30- ¹H-NMR(300 MHz, D₂O):
ｄ＝1.38-1.50(m, 1H), 1.60-1.85(m, 5H), 1.92-2.04
(m, 2H), 2.30-2.40(m, 1H), 2.80-3.15(m, 4H), 3.22-
3.88(m, 9H)

【００６７】実施例５ リボース誘導体 １−Ｏ−アセチル−２,３,５−トリ−Ｏ−ベンゾイル−
β−Ｄ−リボフラノース（１.０ｇ、２.０ミリモル）を
アルゴン下でアセトニトリル（１０ml）に溶解し、−１
０℃に冷却した。アリルシラン（０.４８ml、３.０ミリ
モル）および三フッ化ホウ素−ジエチルエーテル錯体
（０.２５ml、０.２ミリモル）を加えた後、混合物を−
１０℃で１時間撹拌した。室温まで加熱した後、撹拌を
２時間続けた。溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液に注
ぎ、酢酸エチルで抽出した。溶媒を回転蒸発器で除去し
た。残留物をジクロロメタンに取り、短シリカゲルカラ
ムを通して濾過した。溶媒を除去してアリル化合物（α
／β＝４／１）を黄色の油状物として得た（０.７９８
ｇ、７６％）。 ＴＬＣ〔ヘキサン／酢酸エチル：１／１〕：R_f=0.60- ¹
H-NMR (300 MHz, CDCl₃): d=2.51(m, 2H), 4.20-6.05
(m, 8H), 7.10-8.35(m, 15H)

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＢＳ Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＢＳ ＡＣＤ ＡＣＤ ＡＤＡ ＡＤＡ ＡＤＵ ＡＤＵ // Ｃ０７Ｍ 7:00 (72)発明者 ゲールハルト・クレツチユマル ドイツ連邦共和国65760エシユボルン．ウ ルメンヴエーク10 (72)発明者 ホルスト・クンツ ドイツ連邦共和国55127マインツ．ゲマイ ンデホール50

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式Ｉ 【化１】 （式中、Ｒ¹は−Ｈ、−ＣＨ₃または−ＣＨ₂ＯＨであ
   り、 Ｒ²は−Ｈまたは−ＯＨであり、 Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵は互いに独立して−Ｈ、Ｃ₁〜Ｃ₄−
   アルキルまたは−ＯＨであり、 Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹およびＲ¹⁰は互いに独立して−Ｈま
   たはＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであり、 Ｄは−Ｏ−Ｃ(Ｏ)−、−Ｃ(Ｏ)−または−ＮＲ⁶−Ｃ
   (Ｏ)−であり、 Ｅは−ＣＲ⁷Ｒ⁸−、−ＮＲ⁷−または式 【化２】 の窒素、複素環であり、 ｎは１または２であり、 ｍは０または１であり、 ｐは０〜１０の整数であり、 ｑは１または２であり、そしてＸ¹およびＸ²は互いに独
   立して−Ｈ、−ＣＯＯＲ⁹、−ＮＲ⁹Ｒ¹⁰、−ＯＨ、−Ｏ
   ＳＯ₃Ｈ、−ＣＨ₂ＣＯＯＲ⁹もしくは−ＣＨ₂ＯＳＯ₃Ｈ
   であるか、または一緒になって＝Ｏである）の化合物。
2. 【請求項２】 ｍは１であり、そしてＤは−Ｏ−Ｃ(Ｏ)
   である請求項１記載の化合物。
3. 【請求項３】 ｍは０である請求項１記載の化合物。
4. 【請求項４】 Ｅは−ＮＲ⁷−であり、Ｒ⁷は−Ｈであ
   り、ｐは０であり、Ｒ ⁵は−Ｈであり、Ｘ¹は−ＣＯＯＲ
   ⁹であり、Ｘ²は−ＣＨ₂ＣＯＯＲ⁹であり、そしてＲ⁹は
   −Ｈである請求項２または３記載の化合物。
5. 【請求項５】 Ｅは−ＮＲ⁷−であり、Ｒ⁷は−Ｈであ
   り、ｐは４であり、Ｒ ³およびＲ⁴は−Ｈであり、Ｒ⁵は
   −Ｈであり、Ｘ¹は−ＣＯＯＲ⁹であり、Ｘ²は−ＮＲ⁹Ｒ
   ¹⁰であり、そしてＲ⁹およびＲ¹⁰は−Ｈである請求項２
   または３記載の化合物。
6. 【請求項６】 Ｅは 【化３】 であり、ｑは２であり、ｐは０であり、Ｒ⁵は−ＯＨで
   あり、そしてＸ¹およびＸ ²は一緒になって＝Ｏである請
   求項２または３記載の化合物。
7. 【請求項７】 Ｅは 【化４】 であり、ｑは２であり、ｐは０であり、Ｒ⁵およびＲ⁹は
   −Ｈであり、そしてＸ¹およびＸ²は−ＣＯＯＲ⁹である
   請求項２または３記載の化合物。
8. 【請求項８】 ｎは２であり、そしてＲ²は−ＯＨであ
   る請求項１〜７の何れかの項記載の化合物。
9. 【請求項９】 Ｒ¹は−ＣＨ₃である請求項８記載の化合
   物。
10. 【請求項１０】 式Ｉ中のオキサ環 【化５】 はＬ−フコシル基の配置を有する請求項９記載の化合
    物。
11. 【請求項１１】 Ｒ¹は−ＣＨ₂ＯＨである請求項８記載
    の化合物。
12. 【請求項１２】 式Ｉ中のオキサ環 【化６】 はＤ−マンノシル基の配置を有する請求項１１記載の化
    合物。
13. 【請求項１３】 ｎは１であり、Ｒ¹は−ＣＨ₂ＯＨであ
    り、そしてＲ²は−ＯＨである請求項１〜７の何れかの
    項記載の化合物。
14. 【請求項１４】 式Ｉ中のオキサ環 【化７】 はリボシル基の配置を有する請求項１３記載の化合物。
15. 【請求項１５】 式II 【化８】 （式中、Ｒ¹、Ｒ²およびｎは上記で定義された通りであ
    り、Ｒ¹およびＲ²は必要に応じて保護基を有し、そして
    Ｒはアセチル基である）の化合物をアリルシランと適当
    な溶媒中、ルイス酸触媒の作用下に反応させて式III 【化９】 （式中、すべての記号は上記で定義された通りである）
    の化合物を生成させ、その後すべての保護基をベンジル
    保護基に変換し、アリル性２重結合を官能化して式IV 【化１０】 （式中、記号Ｒ¹およびＲ²は上記で定義された通りであ
    り、また必要に応じて保護基を有し、Ｒはベンジル基で
    あり、そしてＹはハロゲン、−ＮＨＲ⁶または活性化Ｏ
    Ｈ基である）の化合物を生成させ、その後式IVの化合物
    を式Ｖ Ｘ−Ｅ−(ＣＲ³Ｒ⁴)_p−ＣＲ⁵Ｘ¹Ｘ² （Ｖ） （式中、Ｘは−Ｈまたは−ＣＯＯＨであり、そしてすべ
    ての他の記号は上記で定義された通りである）の化合物
    と反応させ、その後すべての保護基を除去して請求項１
    〜１４の何れかの項記載の式Ｉの化合物を得ることから
    なる、請求項１〜１４の何れかの項記載の化合物の製造
    法。
16. 【請求項１６】 請求項１〜１４の何れかの項記載の化
    合物を少なくとも１種含有する薬剤。
17. 【請求項１７】 セレクチン受容体が関与する過剰の細
    胞接着を伴う疾患により影響を受ける組織におけるその
    疾患の治療または予防のための薬剤の製造における請求
    項１〜１４の何れかの項記載の化合物の使用。