JPH0853499A

JPH0853499A - キメラ抗体Ｆａｂ断片のオリゴマー体

Info

Publication number: JPH0853499A
Application number: JP6208225A
Authority: JP
Inventors: Takashi Kamigaki; 隆神垣; Wataru Otani; 渡大谷; Masahiro Okubo; 雅啓大久保; Takao Omura; 孝男大村
Original assignee: Green Cross Corp Japan; Green Cross Corp Korea
Current assignee: Mitsubishi Tanabe Pharma Corp; GC Biopharma Corp
Priority date: 1994-08-10
Filing date: 1994-08-10
Publication date: 1996-02-27

Abstract

(57)【要約】【目的】生体内での貯留性を高め、標的部位への集積性
を改善できるキメラ抗体Ｆａｂ断片のオリゴマー体およ
び該オリゴマー体と他の物質との結合体を提供する。【構成】キメラ抗体Ｆａｂ断片同士を化学的に結合して
なるオリゴマー体、該オリゴマー体と抗癌剤との結合
体、および該オリゴマー体と蛍光物質、放射性同位元素
または常磁性金属との結合体である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、キメラ抗体Ｆａｂ断片
のオリゴマー体およびその医薬上有用な誘導体に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】モノクローナル抗体の開発は、マウス・
モノクローナル抗体からヒト・モノクローナル抗体に急
速に移行しつつある。しかし、ヒト・モノクローナル抗
体を細胞融合で自在に産生するためにはまだ抗原感作の
段階で困難が多い。そのため最近では、遺伝子工学手法
でマウス・モノクローナル抗体の可変領域（抗原認識部
位）とヒト抗体の定常領域を組み合わせたキメラ・モノ
クローナル抗体の産生研究が活発に行われている（特開
昭６０−１５５１３２他）。

【０００３】抗体分子の大部分を占める定常領域がヒト
蛋白であるキメラ抗体は、特異抗体の作製が容易で且つ
マウス抗体に比べて抗原性等の面でより高い安全性を示
すと期待される。従って診断・治療薬としての有用性は
高い。しかし、遺伝子工学手法によるキメラ抗体の開発
では効率的な産生系の開発が必須であり、その成果を左
右する。

【０００４】ところで、キメラ抗体は遺伝子工学的手法
によっても、現時点では完全な分子体を調製するのは極
めて困難であるのに対して、そのＦａｂ断片は比較的容
易に、しかもかなり大量に調製できるようになった。そ
の一方でＦａｂ断片は分子量が小さいため、生体内での
貯留性を高めるためには高分子化を計る必要がででき
た。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは上記の事
情を考慮して、鋭意研究を重ねた結果、キメラ抗体Ｆａ
ｂ断片同士を化学的に結合して高分子化を図ることによ
り、生体内での貯留性を高め、標的部位への集積性を改
善できることを見出して、本発明を完成した。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、キメラ抗体Ｆ
ａｂ断片同士を化学的に結合してなるオリゴマー体、該
オリゴマー体と抗癌剤との結合体、および該オリゴマー
体と蛍光物質、放射性同位元素または常磁性金属との結
合体である。本発明のオリゴマー体は、キメラ抗体Ｆａ
ｂ断片同士を化学的に結合したものである。ここで、
「化学的に結合」とは、共有結合を意味する。

【０００７】本発明のオリゴマー体は、キメラ抗体Ｆａ
ｂ断片同士を２以上化学的に結合したものであれば、そ
の結合数は基本的には任意である。従って、例えば、ダ
イマー（二量体）、トリマー（三量体）またはその混合
体でもよい。また、本発明のオリゴマー体は、還元型、
非還元型のいずれでもよい。ここで、還元型とは生体内
投与後、経時的にもとのＦａｂ断片になるもの、言い換
えれば、可逆的な共有結合を含むものを意味し、非還元
型とは生体内投与後もオリゴマー体として存在するも
の、言い換えれば、共有結合が非可逆的なものを意味す
る。

【０００８】該オリゴマー体の分子量は、ダイマー
［（Ｆａｂ）₂］では１０万程度、トリマー［（Ｆａ
ｂ）₃］では１５万程度である。本発明のオリゴマー体
において、キメラ抗体Ｆａｂ断片同士の結合位置は、特
に制限はないが、各断片が抗体としての機能を発揮でき
るように結合させることが望ましい。（１）キメラ抗体Ｆａｂ断片の調製キメラ抗体Ｆａｂ断片は、公知のものを使用できる。好
ましくは、キメラ抗体がヒト抗原由来のマウスモノクロ
ーナル抗体可変領域とヒト抗体の定常領域から構成され
るものが挙げられる。例えば、胃癌細胞株ＭＫＮ−４５
由来抗原に対するマウスモノクローナル抗体（ＫＭ１
０）をキメラ化したもの（特開平３−２８０８８４）、
癌胎児性抗原ＣＥＡに対するマウスモノクローナル抗体
（Ａ１０）をキメラ抗体化したもの（特開平３−２８０
８８４）、ＨＩＶ由来抗原に対するマウスモノクローナ
ル抗体をキメラ化したもの（特開平３−２０６８８
８）、大腸癌Ｃｏｌｏｎ６由来抗原に対するマウスモノ
クローナル抗体（Ａ７）をキメラ化したもの（国際公開
９１／０６６４９）等が挙げられる。

【０００９】これらのキメラ抗体Ｆａｂ断片は、一般的
には遺伝子工学的手法により調製することができる（上
記の各公開公報を参照のこと）。（２）オリゴマー体の調製 ○調製方法キメラ抗体Ｆａｂ断片同士の結合方法としては、蛋白質
における公知の結合方法を用いることができる。例え
ば、アミド結合（−ＮＨ−ＣＯ−）、ジスルフィド結合
（−Ｓ−Ｓ−）、シッフ結合（−ＣＨ＝Ｎ−）、その還
元された形（−ＣＨ₂−ＮＨ−）、エステル結合（−Ｃ
Ｏ−Ｏ−）等が挙げられる。これらの結合は、直接結合
の態様でもよく、架橋剤（２価の有機基を有する。ホ
モ、ヘテロのいずれでも可）を介した間接的な結合態様
であってもよい。具体的には、１）ＳＰＤＰ等のＳＨ基の活性化剤を用いて、キメラ抗
体Ｆａｂ断片の間にジスルフィド結合を形成させる方法
（特開昭５５−４９３２１号公報参照）；２）キメラ抗体Ｆａｂ断片中に少なくとも１個のＳ−ス
ルホ基（−Ｓ−ＳＯ₃ ^-）又は活性ジスルフィド基（例
えば、ＳＰＤＰ等）を有するものと、キメラ抗体Ｆａｂ
断片中に少なくとも１個のチオール基（−ＳＨ）を有す
るものを反応させる方法；３）キメラ抗体Ｆａｂ断片に少なくとも１個のチオール
基を有するものと、キメラ抗体Ｆａｂ断片中に少なくと
も１個のチオール基を有するものを、チオール基と反応
しうる官能基（例えば、マレイミド基、ハロカルボニル
基等）を少なくとも２個有する化合物（架橋剤、例え
ば、ビスマレイミド化合物、ビスハロカルボニル化合
物、ハロカルボニルマレイミド化合物等）を用いて結合
する方法（特開昭５６−１６４１８号公報参照）；４）キメラ抗体Ｆａｂ断片中のアミノ基とマレイミド化
合物を反応させ、次いで得られた生成物と、分子中に少
なくとも１個のチオール基を有するキメラ抗体Ｆａｂ断
片を反応させる方法（特開昭５７−６４６１７号公報参
照）；より好ましくは、Ｎ−サクシニミジル−３−（２−ピリ
ジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、ジサクシニ
ミジル−スベレート（ＤＳＳ）またはジチオビス−サク
シニミジル−プロピオネート（ＤＳＰ）を架橋剤として
使用してキメラ抗体Ｆａｂ断片同士を結合させる。

【００１０】本発明において、架橋剤を用いてオリゴマ
ー体を調製するには、キメラ抗体Ｆａｂ断片を緩衝液に
溶解した溶液と架橋剤のＳＰＤＰ、ＤＳＳ、ＤＳＰ等の
有機溶媒溶液とを混合し、通常、室温〜４０℃の範囲で
１〜１２０分程度反応させて例えば、二量体を形成する
にはキメラ抗体Ｆａｂ断片１モルに対し、架橋剤１〜４
モル程度使用する。オリゴマー体の精製にはゲル濾過カ
ラムが使用される。

【００１１】本発明のオリゴマー体は、任意の有用物質
と結合した結合体を形成することができる。有用物質と
して好ましくは、治療目的では抗癌剤、毒素、放射性同
位元素等が挙げられ、診断目的のためには有用物質とし
て、蛍光物質、放射性同位元素、常磁性物質等が挙げら
れる。ここで、オリゴマー体と有用物質との結合様式
は、一般的には共有結合であるが、放射性同位元素また
は常磁性物質との結合にはキレート結合等も利用され
る。（３）結合体の調製 ○抗癌剤との結合体の調製・抗癌剤は上記のオリゴマー体（蛋白質）と結合できる
ような反応性の基（例えば、アミノ基、カルボキシル
基、チオール基、アルデヒド基）を有するものであれば
よく、また、かかる反応性の基を有しないものについて
も、当該抗癌剤に適当な化合物を結合させて、反応性の
ものに導くことにより、本発明に使用しうる。例えば、
抗癌剤としてはアルキル化剤（クロラムブチル、メルフ
ァラン、ＡＣＮＵ、シクロホスファミド）、代謝拮抗剤
（シタラビン、８−アザグアニン、５−フルオロウラシ
ル、アミノプテリン、メトトレキセート）、抗生物質
（ダウノマイシン、アドリアマイシン、マイトマイシン
Ｃ、アクチノマイシンＤ）、その他（ネオカルチノスタ
チン、ビンデシン）等が例示される。また、毒素、放射
性同位元素も利用することもできる。毒素としてはリシ
ン、ジフテリア毒素等が例示される。放射性同位元素と
しては¹³¹Ｉ、¹⁸⁶Ｒｅ等が例示される。

【００１２】・結合方法は上記の反応性の基を利用し
て、公知の手法により行うことができる。例えば、オ
リゴマー体と抗癌剤を直接結合させる、オリゴマー体
と抗癌剤を架橋剤を介して間接的に結合させる、高分
子化合物を運搬体（キャリアー）として、例えば、オリ
ゴマー体−運搬体−抗癌剤、オリゴマー体−架橋剤−運
搬体−抗癌剤またはオリゴマー体−架橋剤−運搬体−架
橋剤−抗癌剤等のように結合させる（運搬体としては、
アルブミン等の血漿蛋白、酸化デキストラン、ポリアミ
ン等が挙げられる）。

【００１３】放射性同位元素の場合、例えば、¹³¹Ｉは
ヨードゲン（Ｉｏｄｏｇｅｎ）法によりオリゴマー体と
共有結合させることができる。ヨードゲン法はヨードゲ
ン（１，３，４，６−テトラクロロ−３，６−ジフェニ
ルグリコールウリル）をコーティングした試験管中で、
例えば、標識化（¹³¹Ｉ標識）を意図するオリゴマー体
おび標識用試薬（Ｎａ¹³¹Ｉ）を適当な条件下（ｐＨ、
温度、反応時間等）で反応させることによりオリゴマー
体と放射性同位元素との結合体（標識化合物）を調製す
ることができる。

【００１４】・本発明の結合体は、ヒトを始めとする哺
乳類動物の癌に対して有効であり、本発明のオリゴマー
体に結合せしめた抗癌剤の種類に応じた細胞毒性が発揮
される。本発明の抗癌剤との結合体は、例えば、静脈内
投与、点滴静注される。当該結合体は製薬上許容される
賦形剤、希釈剤等、例えば、注射用蒸留水、生理食塩液
等に溶解して使用される。投与量は、結合される抗癌剤
の種類とオリゴマー体の抗原認識能力等により決定され
る。

【００１５】○蛍光物質、放射性同位元素または常磁性
金属との結合体の調製・蛍光物質としてはフルオレセインイソチオシアネート
（ＦＩＴＣ）等が挙げられる。・放射性同位元素としては³Ｈ、¹⁴Ｃ、^99mＴｃ、
¹²³Ｉ、¹⁹⁷Ｈｇ、^87mＳｒ、^113mＩｎ等が挙げられる。

【００１６】・常磁性金属としてはＦｅ、Ｇｄ、Ｍｎ、
Ｃｏ等が挙げられる。・結合方法としては、有機化合物等の蛍光物質とオリゴ
マー体との結合は一般的には共有結合が利用できる。ま
た、放射性同位元素あるいは常磁性金属とオリゴマー体
との結合体は、放射性同位元素あるいは常磁性金属とキ
レート結合しうる化合物（キレート性化合物）とをキレ
ート結合させたものにオリゴマー体を結合させること等
が挙げられる。キレート性化合物としては、エチレンジ
アミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢
酸（ＤＴＰＡ）等が挙げられる。放射性同位元素あるい
は常磁性物質は、原子あるいはイオンの形態で通常使用
される。放射性同位元素の場合、例えば、ヨウ素（Ｉ）
系はヨードゲン法により抗体（オリゴマー体）と結合さ
せることもできる。

【００１７】・オリゴマー体と当該物質との結合体は診
断目的に有用となる。

【００１８】

【発明の効果】本発明によれば、比較的容易で、しかも
大量に調製可能なキメラ抗体Ｆａｂ断片を用いて生体内
での貯留性を高め、標的部位への集積性を改善できるオ
リゴマー体を合成することができる。このものは上記の
特性を活かして、抗癌剤との結合体を調製することによ
り、治療目的として、あるいは蛍光物質、放射性同位元
素または常磁性物質との結合体を調製することにより診
断目的として、各々臨床に適用することが可能となる。

【００１９】

【実施例】以下、本発明の具体的実施例を説明するが、
本発明はこれに限定されるものではない。実施例１（１）キメラＡ１０抗体Ｆａｂ−ＰＤＰの調製特開平３−２８０８８４により調製されたキメラＡ１０
抗体Ｆａｂを等張リン酸緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ７．５）
に溶解したもの（７．２ｍｇ／ｍｌ）５．５ｍｌと、Ｓ
ＰＤＰをエタノールに溶解したもの（１０ｍｇ／ｍｌ）
３８μｌとを混合し、室温で３０分間反応させて次式で
表される化合物（キメラＡ１０抗体Ｆａｂ−ＰＤＰ）を
得た後に、０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）で一晩透
析した。

【００２０】

【化１】（式中、ＮＨはキメラＡ１０抗体Ｆａｂに由来する基で
ある）（２）キメラＡ１０抗体Ｆａｂ−ＳＨの調製（１）のキメラＡ１０抗体Ｆａｂ−ＰＤＰ溶液４．５ｍ
ｌと１００ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）溶液５０
０μｌとを混合し、室温で３０分間反応させた後、ゲル
濾過（分画分子量１万、ＰＤ−１０）にて処理した。（３）キメラＡ１０抗体Ｆａｂオリゴマー体（還元型）
の調製１（１）のキメラＡ１０抗体Ｆａｂ−ＰＤＰ溶液１ｍｌと
（２）のキメラＡ１０抗体Ｆａｂ−ＳＨ溶液２ｍｌとを
ＰＢＳにて一晩透析しながら反応させた。さらにゲル濾
過カラム（スーパーデックス）にて処理し、ダイマー体
およびトリマー体を分離回収した。

【００２１】実施例２キメラＡ１０抗体Ｆａｂオリゴマー体（還元型）の調製
２特開平３−２８０８８４により調製されたキメラＡ１０
抗体Ｆａｂを等張リン酸緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ７．５）
に溶解したもの（７．２ｍｇ／ｍｌ）３ｍｌと、ＤＳＰ
をＤＭＳＯに溶解したもの（０．４０ｍｇ／ｍｌ）１．
２９ｍｌとを混合し、室温で３０分間反応させた後に、
ゲル濾過カラム（スーパーデックス（デキストランと共
有結合した架橋アガロースビーズ）、ファルマシア社
製）にて処理し、ダイマー体およびトリマー体を分離回
収した。

【００２２】実施例３（３）キメラＡ１０抗体Ｆａｂオリゴマー体（非還元
型）の調製特開平３−２８０８８４により調製されたキメラＡ１０
抗体Ｆａｂを等張リン酸緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ７．５）
に溶解したもの（７．２ｍｇ／ｍｌ）３ｍｌと、ＤＳＳ
をＤＭＳＯに溶解したもの（０．３７ｍｇ／ｍｌ）１．
２９ｍｌとを混合し、室温で３０分間反応させた後に、
ゲル濾過カラム（スーパーデックス）にて処理し、ダイ
マー体およびトリマー体を分離回収した。

【００２３】実施例４ヨードゲン法を用いてオリゴマー体と¹²⁵Ｉとの結合体
（¹²⁵Ｉ−標識体）を合成した。ポリプロピレン製チュ
ーブにヨードゲン（１２μｇ）、Ｎａ¹²⁵Ｉ（４７１〜
５７８μＣｉ）、０．１ＭＰＢＳ（適量を加え、最終
的な液量として４６１〜５０８μｌとなるように調
整）、実施例１および３で合成した４種の標識用各種Ｆ
ａｂオリゴマー体（１００μｇ）を添加し、氷上または
室温で１．５〜７分間反応させた後、０．１ＭＰＢＳ
２００μｌを加えてゲル濾過（分画分子量１万、ＰＤ−
１０）にて処理した。調製された標識体の比較放射は２
３〜３７ｋＢｑ／μｇであった。

【００２４】実施例５１）デキストランの酸化デキストラン（分子量７万）を５ｇ秤量後、４５０ｍｌ
の蒸留水に溶解し、メタ過ヨウ素酸ナトリウム溶液（Ｎ
ａＩＯ₄ ６．６ｇを含む）５０ｍｌを添加、暗所室温
にて５時間反応を行い、デキストランＴ−７０のグルコ
ース残基を酸化した。この反応液を一夜透析後、凍結乾
燥を行い５０％開裂デキストランを得た。

【００２５】２）グリシンによる保護この開裂デキストラン１ｇを秤量後、１００ｍｌの５０
ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解し、グリシン６
９５ｍｇを固体のまま添加し、開裂デキストランのアル
デヒド基とグリシンのアミノ基をシッフ塩基にて結合、
同時にシアノ水素化ホウ素ナトリウム５８３ｍｇを含む
水溶液１０ｍｌを添加、室温で一夜攪拌し、生じたシッ
フ塩基を還元した。この反応液を水に対し一夜透析し、
残存のグルコース残基を酸化するためＮａＩＯ₄２．７
ｇを添加、暗所室温にて５時間攪拌後、水に対し透析、
凍結乾燥を行い、５０％がグリシンにより保護された開
裂デキストランを得た。

【００２６】３）アドリアマイシンの結合２）で得た開裂デキストラン（５０％のアルデヒド基を
グリシンにより修飾したもの）４０ｍｇを秤量し５００
μｌのジメチルスルホキシドに溶解した。この溶液にア
ドリアマイシン１０ｍｇを含むジメチルスルホキシド溶
液５００μｌを添加、室温下（２５℃）２０時間反応を
行った。その後、この反応液に５０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ７．５）２ｍｌを加え再び３時間反応を行いアド
リアマイシン−開裂デキストラン−グリシン複合体の粗
成物を得た。この粗成物溶液３ｍｌにエタノール１２ｍ
ｌ加え攪拌した後、９０００ｇ×１０分間の遠心分離を
行った。得られた沈殿を１２ｍｌのエタノールで２回洗
浄、減圧下で乾燥後、このものを精製アドリアマイシン
−酸化デキストラン−グリシン複合体とした。

【００２７】４）活性エステル化アドリアマイシン−酸化デキストラン−グリシン複合体
５００ｍｇをジメチルスルホキシド−ジメチルホルムア
ミド混合（３：１）液１５ｍｌに溶解、氷冷後、ジシク
ロヘキシルカルボジイミド７０３．６ｍｇ（３．４１ｍ
ｍｏｌ）を加え、３０分間攪拌、更にＮ−ヒドロキシス
クシンイミド４２８．２ｍｇ（３．７２ｍｍｏｌ）添加
し、３０分間攪拌を行った。その後、反応温度を室温に
戻し、更に２０時間攪拌した。反応終了後、反応溶液中
に生じた白色沈殿をガラスフィルターを用い吸引濾別
し、その濾液（約１５ｍｌ）にエーテル４００ｍｌを加
えた。生じた沈殿をガラスフィルターにて速やかに濾取
し、更にエーテル５００ｍｌで沈殿を洗浄、減圧下デシ
ケーターにて乾燥し活性エステル体５８８ｍｇを得た。

【００２８】５）オリゴマー体との結合体の調製４）の活性エステル体のジメチルスルホキシド溶液（４
０ｍｇ／ｍｌ）および実施例１または３の各オリゴマー
体｛（実施例１のＦａｂ二量体（還元型）またはＦａｂ
三量体（還元型）、または実施例３のＦａｂ二量体（非
還元型）またはＦａｂ三量体（非還元型）｝の各溶液
（１００ｍｇ／ｍｌ）を調製した。

【００２９】活性エステル体溶液０．４ｍｌ、抗体溶液
０．１ｍｌ、ジメチルスルホキシド０．８ｍｌおよび５
０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）１．７ｍｌからなる
組成において反応（室温、一晩）を行い、メンブランフ
ィルターにて精製を行い、各アドリアマイシン−開裂デ
キストラン−グリシン−オリゴマー体結合体を得た。結
合体の分子量は、Ｆａｂ二量体（還元型）または同（非
還元型）を用いた場合ではいずれも１８万、Ｆａｂ三量
体（還元型）または同（非還元型）を用いた場合ではい
ずれも２３万であった。また、その結合比は上記の４種
のＦａｂオリゴマー体を用いた、いずれの場合ともＦａ
ｂオリゴマー体１分子当たりデキストランが１分子、ア
ドリアマイシンは３０分子であった。

【００３０】実験例１ヒト膵癌ＢｘＰＣ−３細胞を移植した担癌ヌードマウス
に対して、蛋白量として２００μｇ／ｋｇ体重の実施例
４で合成した¹²⁵Ｉ−標識体を静脈投与し、２４時間ま
で各組織中の放射線量をガンマーカウンターにて測定
し、組織内分布を調べた。ＡＵＣ（血中濃度曲線下面
積）および腫瘍集積量を表１に示す。ＦａｂはキメラＡ
１０抗体Ｆａｂ断片を指す。

【００３１】

【表１】実験例２実験例１で測定した組織内放射線量より腫瘍／正常組織
比を計算し腫瘍特異性について検討した。２４時間後の
各放射線量の腫瘍／正常組織比を図１に示す。尚、比較
として、図中に示す各種抗体を用いた。腫瘍／正常組織
比は、「単位重量当たりの腫瘍集積量（μＣｉ／ｇ）」
／「単位重量当たりの正常組織集積量（μＣｉ／ｇ）」
で計算した。

【００３２】実験例の結果より還元型二量体および三量
体はキメラＡ１０抗体Ｆａｂより高い¹²⁵Ｉの腫瘍集積
量を示すとともに、腫瘍／正常組織比の検討からもとの
キメラＡ１０抗体Ｆａｂと同様、高い腫瘍特異性を示し
た。また、非還元型二量体および三量体は、キメラＡ１
０抗体Ｆａｂ、還元型二量体および三量体より高い¹²⁵
Ｉの腫瘍集積量を示した。

【００３３】モノクローナル抗体およびその断片を臨床
上、診断目的に使用する場合には高い腫瘍集積量と腫瘍
特異性が要求される。この点を考慮すれば還元型二量
体、三量体あるいはその混合物を使用するのが望まし
い。また治療目的に使用する場合、抗癌剤との結合体を
利用することが考えられるが、腫瘍内により多くの抗癌
剤を運ぶためには結合体の高い腫瘍集積量を示す必要が
ある。この点からは、非還元型二量体、三量体およびそ
の混合物を使用することが有効と考えられる。

【図面の簡単な説明】

【図１】¹²⁵Ｉ−標識体の２４時間後の腫瘍／正常組織
比で、平均値±Ｓ．Ｄ．（ｎ＝４）を示す。尚、Ｆａ
ｂ：キメラＡ１０抗体Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ′）₂：キ
メラＡ１０抗体Ｆ（ａｂ′）₂断片、ＩｇＧ：キメラＡ
１０抗体ＩｇＧ（完全分子体を指す）、Ｒ−Ｄ：キメラ
Ａ１０抗体Ｆａｂ断片二量体（還元型）、Ｒ−Ｔ：キメ
ラＡ１０抗体Ｆａｂ断片三量体（非還元型）、ＮＲ−
Ｄ：キメラＡ１０抗体Ｆａｂ断片二量体（非還元型）、
Ｒ−Ｔ：キメラＡ１０抗体Ｆａｂ断片三量体（非還元
型）である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者大村孝男大阪府枚方市招提大谷２−25−１株式会社ミドリ十字中央研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】キメラ抗体Ｆａｂ断片同士を化学的に結
合してなるオリゴマー体。
【請求項２】キメラ抗体がヒト抗原由来のマウスモノ
クローナル抗体可変領域とヒト抗体の定常領域から構成
される請求項１記載のオリゴマー体。
【請求項３】ダイマーまたはトリマーの形態である請
求項１記載のオリゴマー体。
【請求項４】請求項１記載のオリゴマー体と抗癌剤と
の結合体。
【請求項５】請求項１記載のオリゴマー体と蛍光物
質、放射性同位元素または常磁性金属との結合体。