JPH08319431A - スーパー抗原吸着材料 - Google Patents
スーパー抗原吸着材料Info
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- JPH08319431A JPH08319431A JP8142976A JP14297696A JPH08319431A JP H08319431 A JPH08319431 A JP H08319431A JP 8142976 A JP8142976 A JP 8142976A JP 14297696 A JP14297696 A JP 14297696A JP H08319431 A JPH08319431 A JP H08319431A
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- External Artificial Organs (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】滅菌操作に対して安定で、安価な単一の材料
で、各種スーパー抗原を選択的に結合できる材料を提供
することを目的とする。 【解決手段】(1) 下記構造を側鎖に有するポリマからな
るスーパー抗原吸着材料。 −（ＣＨ2 ) ｎ−Ｙ ［Ｉ］ （ｎは、１以上、２０以下の整数、Ｙは、１級、２級、
３級あるいは４級のアミノ基、または水素を示す。） (2) 下記構造を側鎖に有するポリマからなるスーパー抗
原吸着材料。 −Ｒ−（ＣＨ2 ) ｎ−Ｒ’−Ｙ ［II］ （ｎは０または１、Ｒ，Ｒ’は、ベンゼン環、シクロヘ
キサン環及びその誘導体から選ばれる１種，Ｙは１級、
２級あるいは３級のアミノ基、または水素を示す。）
で、各種スーパー抗原を選択的に結合できる材料を提供
することを目的とする。 【解決手段】(1) 下記構造を側鎖に有するポリマからな
るスーパー抗原吸着材料。 −（ＣＨ2 ) ｎ−Ｙ ［Ｉ］ （ｎは、１以上、２０以下の整数、Ｙは、１級、２級、
３級あるいは４級のアミノ基、または水素を示す。） (2) 下記構造を側鎖に有するポリマからなるスーパー抗
原吸着材料。 −Ｒ−（ＣＨ2 ) ｎ−Ｒ’−Ｙ ［II］ （ｎは０または１、Ｒ，Ｒ’は、ベンゼン環、シクロヘ
キサン環及びその誘導体から選ばれる１種，Ｙは１級、
２級あるいは３級のアミノ基、または水素を示す。）
Description
【０００１】
【発明が属する技術分野】本発明は、黄色ブドウ球菌毒
素や連鎖球菌毒素等のスーパー抗原を、選択的に吸着す
るスーパー抗原吸着材料、およびその材料を用いた体液
浄化や感染症の治療に用いるカラムあるいは創傷被覆材
料に関する。特にヒト血液中等の高蛋白濃度溶液から選
択的にスーパー抗原を吸着除去するのに好適に用いられ
る。
素や連鎖球菌毒素等のスーパー抗原を、選択的に吸着す
るスーパー抗原吸着材料、およびその材料を用いた体液
浄化や感染症の治療に用いるカラムあるいは創傷被覆材
料に関する。特にヒト血液中等の高蛋白濃度溶液から選
択的にスーパー抗原を吸着除去するのに好適に用いられ
る。
【０００２】
【従来の技術】スーパー抗原とは、従来の抗原と異な
り、抗原提示細胞内におけるプロセッシング過程を経る
ことなく、抗原提示細胞上の主要組織適合性抗原クラス
II蛋白（以下、「ＭＨＣクラスII」と言うことがある）
に結合し、さらにはこのＭＨＣクラスIIとの複合体を形
成することにより特定のＶ領域を有するＴ細胞を刺激
し、免疫系を異常に活性化させる化合物であり、敗血症
時の発熱、発疹、血圧低下や食中毒時の嘔吐あるいは自
己免疫疾患の誘発等を引き起こすとされている。スーパ
ー抗原としては、黄色ブドウ球菌外毒素や連鎖球菌外毒
素、あるいはある種のウイルス蛋白やヒートショック蛋
白が確認されているが、今後も特定化されていく可能性
がある。
り、抗原提示細胞内におけるプロセッシング過程を経る
ことなく、抗原提示細胞上の主要組織適合性抗原クラス
II蛋白（以下、「ＭＨＣクラスII」と言うことがある）
に結合し、さらにはこのＭＨＣクラスIIとの複合体を形
成することにより特定のＶ領域を有するＴ細胞を刺激
し、免疫系を異常に活性化させる化合物であり、敗血症
時の発熱、発疹、血圧低下や食中毒時の嘔吐あるいは自
己免疫疾患の誘発等を引き起こすとされている。スーパ
ー抗原としては、黄色ブドウ球菌外毒素や連鎖球菌外毒
素、あるいはある種のウイルス蛋白やヒートショック蛋
白が確認されているが、今後も特定化されていく可能性
がある。
【０００３】もし、スーパー抗原を選択的に吸着するこ
とができる材料が存在すれば、これを用いて血液、尿等
の体液や食料品、飲料物中からスーパー抗原を除去する
ことが可能となり、食中毒、敗血症や自己免疫疾患の治
療や発症を予防することが可能になる。
とができる材料が存在すれば、これを用いて血液、尿等
の体液や食料品、飲料物中からスーパー抗原を除去する
ことが可能となり、食中毒、敗血症や自己免疫疾患の治
療や発症を予防することが可能になる。
【０００４】これまで、これら毒素を選択的に血液中や
培養液上清から吸着するための結合物質には、毒素に対
する抗体や、黄色ブドウ球菌外毒素に対する主要組織適
合性抗原クラスII蛋白質等の高親和性ポリペプチドが固
定されたカラム材料が用いられてきた。
培養液上清から吸着するための結合物質には、毒素に対
する抗体や、黄色ブドウ球菌外毒素に対する主要組織適
合性抗原クラスII蛋白質等の高親和性ポリペプチドが固
定されたカラム材料が用いられてきた。
【０００５】しかし、これらの結合物質はペプチドある
いは蛋白質であることが多く、その結果、高価である，
滅菌により失活しやすい等の欠点を有していた。
いは蛋白質であることが多く、その結果、高価である，
滅菌により失活しやすい等の欠点を有していた。
【０００６】また、毒素蛋白質を精製するために培養上
清よりイオン交換樹脂を用いて毒素を吸着してくる方法
も知られているが、この方法では、溶液のｐＨの影響を
受けやすく、血液や食料品等でｐＨを中性に保つ必要性
のある場合には特異性が低く、血液中等の高蛋白質溶液
から微量の毒素を溶液組成を変化することなく吸着する
には不適当である。
清よりイオン交換樹脂を用いて毒素を吸着してくる方法
も知られているが、この方法では、溶液のｐＨの影響を
受けやすく、血液や食料品等でｐＨを中性に保つ必要性
のある場合には特異性が低く、血液中等の高蛋白質溶液
から微量の毒素を溶液組成を変化することなく吸着する
には不適当である。
【０００７】
【本発明が解決しようとする課題】本発明はこれら従来
技術の欠点を解消しようとするものであり、選択性に優
れ、滅菌による失活がなく、かつ安価であるスーパー抗
原の吸着材料を提供することを目的とする。さらに、本
発明の目的は、該材料を用いたスーパー抗原除去用の体
液浄化モジュールおよびスーパー抗原吸着性の創傷被覆
材料を提供することにある。
技術の欠点を解消しようとするものであり、選択性に優
れ、滅菌による失活がなく、かつ安価であるスーパー抗
原の吸着材料を提供することを目的とする。さらに、本
発明の目的は、該材料を用いたスーパー抗原除去用の体
液浄化モジュールおよびスーパー抗原吸着性の創傷被覆
材料を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意検討し
た結果、黄色ブドウ球菌外毒素等のスーパー抗原が疎水
性相互作用を強く有する官能基に対して選択的に吸着す
る性質を見出し、種々の官能基を検討した。その結果、
上記目的を達成するために、本発明は下記の構成を有す
る。
た結果、黄色ブドウ球菌外毒素等のスーパー抗原が疎水
性相互作用を強く有する官能基に対して選択的に吸着す
る性質を見出し、種々の官能基を検討した。その結果、
上記目的を達成するために、本発明は下記の構成を有す
る。
【０００９】「(1) 下記構造を側鎖に有するポリマから
なるスーパー抗原吸着材料。
なるスーパー抗原吸着材料。
【００１０】 −（ＣＨ2 ) ｎ−Ｙ ［Ｉ］ （ｎは、１以上、２０以下の整数、Ｙは、１級、２級、
３級あるいは４級のアミノ基、または水素を示す。） (2) 下記構造を側鎖に有するポリマからなるスーパー抗
原吸着材料。
３級あるいは４級のアミノ基、または水素を示す。） (2) 下記構造を側鎖に有するポリマからなるスーパー抗
原吸着材料。
【００１１】 −Ｒ−（ＣＨ2 ) ｎ−Ｒ’−Ｙ ［II］ （ｎは０または１、Ｒ，Ｒ’は、ベンゼン環、シクロヘ
キサン環及びその誘導体から選ばれる１種，Ｙは１級、
２級あるいは３級のアミノ基、または水素を示す。）」 本発明においてポリマ成分としては特に限定なく、ナイ
ロン、ポリメチルメタクリレート、ポリスルホン、ポリ
スチレン、ポリエチレン、ポリビニルアルコール、ポリ
テトラフルオロエチレンなどの合成高分子材料や、セル
ロース、コラーゲン、キトサン及びその誘導体を含む天
然高分子材料等が好ましく用いられ、これらポリマは、
単独重合あるいは共重合、また、ブレンドしても用いる
ことができる。さらに、本発明の材料においては、後述
の式［Ｉ］あるいは［II] で示される側鎖を有するが、
かかる側鎖の導入のし易さを考慮すると、前記ポリマと
して、アミノ基やカルボキシル基を有する高分子材料が
特に好ましい。また、本発明においては、これらアミノ
基やカルボキシル基を有しない材料の表面を、アミノ基
やカルボキシル基を有する材料で被覆して用いることも
好ましい。
キサン環及びその誘導体から選ばれる１種，Ｙは１級、
２級あるいは３級のアミノ基、または水素を示す。）」 本発明においてポリマ成分としては特に限定なく、ナイ
ロン、ポリメチルメタクリレート、ポリスルホン、ポリ
スチレン、ポリエチレン、ポリビニルアルコール、ポリ
テトラフルオロエチレンなどの合成高分子材料や、セル
ロース、コラーゲン、キトサン及びその誘導体を含む天
然高分子材料等が好ましく用いられ、これらポリマは、
単独重合あるいは共重合、また、ブレンドしても用いる
ことができる。さらに、本発明の材料においては、後述
の式［Ｉ］あるいは［II] で示される側鎖を有するが、
かかる側鎖の導入のし易さを考慮すると、前記ポリマと
して、アミノ基やカルボキシル基を有する高分子材料が
特に好ましい。また、本発明においては、これらアミノ
基やカルボキシル基を有しない材料の表面を、アミノ基
やカルボキシル基を有する材料で被覆して用いることも
好ましい。
【００１２】また、本発明の材料は、体液浄化カラム、
創傷被覆材、免疫学的な測定材料などとして好ましく用
いられる。その形状としては特に限定はないが、カラム
として用いる場合にはビーズ、繊維、中空繊維、織物等
が好ましく、また、免疫学的な測定に用いる場合には、
ビーズ、プレート、チューブ等の形状が好ましく、創傷
被覆材料の場合は、織物あるいはフィルム等の形状が好
ましい。さらに、本発明の材料には、例えば、金属、セ
ラミックス、ガラスなどの無機材料などに、前記ポリマ
を被覆した材料も含まれる。
創傷被覆材、免疫学的な測定材料などとして好ましく用
いられる。その形状としては特に限定はないが、カラム
として用いる場合にはビーズ、繊維、中空繊維、織物等
が好ましく、また、免疫学的な測定に用いる場合には、
ビーズ、プレート、チューブ等の形状が好ましく、創傷
被覆材料の場合は、織物あるいはフィルム等の形状が好
ましい。さらに、本発明の材料には、例えば、金属、セ
ラミックス、ガラスなどの無機材料などに、前記ポリマ
を被覆した材料も含まれる。
【００１３】本発明においては、スーパー抗原を吸着す
るために、上記ポリマの側鎖に、 −（ＣＨ2 ) ｎ−Ｙ ［Ｉ］ （ｎは、１以上、２０以下の整数、Ｙは、１級、２級、
３級あるいは４級のアミノ基、または水素を示す。）、
あるいは −Ｒ−（ＣＨ2 ) ｎ−Ｒ’−Ｙ ［II］ （ｎは０または１、Ｒ，Ｒ’は、ベンゼン環、シクロヘ
キサン環及びその誘導体から選ばれる１種，Ｙは１級、
２級あるいは３級のアミノ基、または水素を示す。）を
有する。
るために、上記ポリマの側鎖に、 −（ＣＨ2 ) ｎ−Ｙ ［Ｉ］ （ｎは、１以上、２０以下の整数、Ｙは、１級、２級、
３級あるいは４級のアミノ基、または水素を示す。）、
あるいは −Ｒ−（ＣＨ2 ) ｎ−Ｒ’−Ｙ ［II］ （ｎは０または１、Ｒ，Ｒ’は、ベンゼン環、シクロヘ
キサン環及びその誘導体から選ばれる１種，Ｙは１級、
２級あるいは３級のアミノ基、または水素を示す。）を
有する。
【００１４】これら［Ｉ］あるいは［II］で示される官
能基として、［Ｉ］としては、アミノヘキシル基、モノ
メチルアミノヘキシル基、ジメチルアミノヘキシル基、
アミノオクチル基、アミノドデシル基などが挙げられ
る。また、［II］としては、ｐ−（β−ｐ−アミノフェ
ニルエチル）フェニル基、ｐ−（ｐ−アミノフェニルメ
チル）フェニル基、４−（４アミノシクロヘキシルメチ
ル）シクロヘキシル基、ｐ−（β−ｐ−モノメチルアミ
ノフェニルエチル）フェニル基等が挙げられる。リガン
ドの結合法としては、一般に公知の方法が用いられる。
例えば、１級アミノ基を有する材料に、１級アミノ基に
対して過剰量、つまりはアミノ基１モルに対して２モル
以上、好ましくは５モル以上のヘキサメチレンジイソシ
アネートや４，４’−ジフェニルメタンジイソシアネー
ト，ナフタレンジイソシアネート、１，４ジシクロヘキ
シルジイソシアネート等の有機ジイソシアネートを反応
させた後、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の塩基
性水溶液あるいは熱水で処理し末端の未反応イソシアネ
ート基を加水分解し１級アミノ基を得る方法が挙げられ
る。
能基として、［Ｉ］としては、アミノヘキシル基、モノ
メチルアミノヘキシル基、ジメチルアミノヘキシル基、
アミノオクチル基、アミノドデシル基などが挙げられ
る。また、［II］としては、ｐ−（β−ｐ−アミノフェ
ニルエチル）フェニル基、ｐ−（ｐ−アミノフェニルメ
チル）フェニル基、４−（４アミノシクロヘキシルメチ
ル）シクロヘキシル基、ｐ−（β−ｐ−モノメチルアミ
ノフェニルエチル）フェニル基等が挙げられる。リガン
ドの結合法としては、一般に公知の方法が用いられる。
例えば、１級アミノ基を有する材料に、１級アミノ基に
対して過剰量、つまりはアミノ基１モルに対して２モル
以上、好ましくは５モル以上のヘキサメチレンジイソシ
アネートや４，４’−ジフェニルメタンジイソシアネー
ト，ナフタレンジイソシアネート、１，４ジシクロヘキ
シルジイソシアネート等の有機ジイソシアネートを反応
させた後、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の塩基
性水溶液あるいは熱水で処理し末端の未反応イソシアネ
ート基を加水分解し１級アミノ基を得る方法が挙げられ
る。
【００１５】あるいは、イソシアネート基あるいはカル
ボキシル基あるいはスクシンイミド等のカルボン酸の活
性エステル基を有する材料にヘキサメチレンジアミン、
オクタメチレンジアミン、ドデカメチレンジアミン、
４，４’ジフェニルメタンジアミン等のジアミン類をイ
ソシアネート基あるいはカルボキシル基あるいはスクシ
ンイミド等のカルボン酸の活性エステル基に対して過剰
量、つまりはアミノ基１モルに対して２モル以上好まし
くは５モル以上反応させることも挙げられる。
ボキシル基あるいはスクシンイミド等のカルボン酸の活
性エステル基を有する材料にヘキサメチレンジアミン、
オクタメチレンジアミン、ドデカメチレンジアミン、
４，４’ジフェニルメタンジアミン等のジアミン類をイ
ソシアネート基あるいはカルボキシル基あるいはスクシ
ンイミド等のカルボン酸の活性エステル基に対して過剰
量、つまりはアミノ基１モルに対して２モル以上好まし
くは５モル以上反応させることも挙げられる。
【００１６】溶媒としては、上記の有機ジイソシアネー
トや有機ジアミン類が溶解する極性溶媒、例えばメタノ
ール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｎブタノ
ール等のアルコール類やアセトン、メチルエチルケトン
等のケトン類、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセト
アミド等のアミド類が使用できる。
トや有機ジアミン類が溶解する極性溶媒、例えばメタノ
ール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｎブタノ
ール等のアルコール類やアセトン、メチルエチルケトン
等のケトン類、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセト
アミド等のアミド類が使用できる。
【００１７】有機ジイソシアネートおよび有機ジアミン
の反応時間及び温度に関しては限定はないが、用いた極
性溶媒の沸点以下の温度において３０分から２４時間の
温度が好ましい。また、アミノ基の２級、３級および４
級化としては、ヨウ化メチルなどのハロゲン化アルキル
やジメチル硫酸を反応させることにより容易に行える。
の反応時間及び温度に関しては限定はないが、用いた極
性溶媒の沸点以下の温度において３０分から２４時間の
温度が好ましい。また、アミノ基の２級、３級および４
級化としては、ヨウ化メチルなどのハロゲン化アルキル
やジメチル硫酸を反応させることにより容易に行える。
【００１８】以下に実施例を用いて詳細に説明を加える
が発明の内容が実施例に限定されるものではない。
が発明の内容が実施例に限定されるものではない。
【００１９】
実施例１ 疎水性基を付加したキトサンビーズによるスーパー抗原
のバッチ法のよる吸着試験を以下の通り行った。
のバッチ法のよる吸着試験を以下の通り行った。
【００２０】粒径０．１mmのキトサンビーズ（富士紡
（株）製、“キトパール”ＡＬ−０１）１２ｍｌ（沈降
時体積、乾燥時重量は１．０ｇ）をジメチルホルムアミ
ド中で撹拌する。この操作を１回２０分間、４回繰り返
し、含水水分をジメチルホルムアミドと完全に置換させ
た。
（株）製、“キトパール”ＡＬ−０１）１２ｍｌ（沈降
時体積、乾燥時重量は１．０ｇ）をジメチルホルムアミ
ド中で撹拌する。この操作を１回２０分間、４回繰り返
し、含水水分をジメチルホルムアミドと完全に置換させ
た。
【００２１】このビーズを１０ｇのヘキサメチレンジイ
ソシアネートを溶解させた１リットルのジメチルホルム
アミドに徐々に添加し、撹拌しながら室温で１時間反応
させた後、これらを取り出し、別々に準備しておいた１
リットルのジメチルホルムアミド中に入れて２０分間洗
浄操作を行い、この洗浄操作を３回繰り返し未反応ヘキ
サメチレンジイソシアネートを完全に除去した。次い
で、水洗を４回行い、ジメチルホルムアミドを水と置換
し、さらに０．１Ｍの水酸化ナトリウム溶液と撹拌しな
がら室温で２０分間反応させイソシアネート基を１級ア
ミノ基に加水分解し、さらに水洗を４回行い、最後に８
０℃の水中で２０分間浸漬し、次の構造式を有するキト
サンビーズを得た。
ソシアネートを溶解させた１リットルのジメチルホルム
アミドに徐々に添加し、撹拌しながら室温で１時間反応
させた後、これらを取り出し、別々に準備しておいた１
リットルのジメチルホルムアミド中に入れて２０分間洗
浄操作を行い、この洗浄操作を３回繰り返し未反応ヘキ
サメチレンジイソシアネートを完全に除去した。次い
で、水洗を４回行い、ジメチルホルムアミドを水と置換
し、さらに０．１Ｍの水酸化ナトリウム溶液と撹拌しな
がら室温で２０分間反応させイソシアネート基を１級ア
ミノ基に加水分解し、さらに水洗を４回行い、最後に８
０℃の水中で２０分間浸漬し、次の構造式を有するキト
サンビーズを得た。
【００２２】
【化３】 この修飾キトサンビーズおよびコントロールとしての未
修飾キトサンビーズを用いて、ウサギ血漿中の３種のス
ーパー抗原、黄色ブドウ球菌外毒素Ｂ（ＳＥＢ）及び外
毒素Ｃ（ＳＥＣ）及びトキシックショックシンドローム
トキシン１（ＴＳＳＴ１）の吸着除去を行った。スーパ
ー抗原の初期濃度は１ｎｇ／ｍｌとし、血漿量１０ｍｌ
に対して上記のキトサンビーズ１ｍｌを添加し、３７℃
において６０分間振盪し、反応前後のウサギ血漿中の３
種のスーパー抗原濃度を酵素免疫学的に測定した。６０
分後のウサギ血漿中のスーパー抗原濃度を表１に示す。
この結果が示すように、化学修飾によりキトサンビーズ
にスーパー抗原吸着能が付加されることが示された。
修飾キトサンビーズを用いて、ウサギ血漿中の３種のス
ーパー抗原、黄色ブドウ球菌外毒素Ｂ（ＳＥＢ）及び外
毒素Ｃ（ＳＥＣ）及びトキシックショックシンドローム
トキシン１（ＴＳＳＴ１）の吸着除去を行った。スーパ
ー抗原の初期濃度は１ｎｇ／ｍｌとし、血漿量１０ｍｌ
に対して上記のキトサンビーズ１ｍｌを添加し、３７℃
において６０分間振盪し、反応前後のウサギ血漿中の３
種のスーパー抗原濃度を酵素免疫学的に測定した。６０
分後のウサギ血漿中のスーパー抗原濃度を表１に示す。
この結果が示すように、化学修飾によりキトサンビーズ
にスーパー抗原吸着能が付加されることが示された。
【００２３】
【表１】 実施例２ 疎水性基を付加したキトサンビーズによるスーパー抗原
の循環法による吸着試験について以下のとおり行なっ
た。
の循環法による吸着試験について以下のとおり行なっ
た。
【００２４】粒径０．１mmの実施例１と同様のキトサン
ビーズ１２ｍｌ（沈降時体積、乾燥時重量は１．０ｇ）
をジメチルホルムアミド中で撹拌する。この操作を１回
２０分間、４回繰り返し、含水水分をジメチルホルムア
ミドと完全に置換させた。
ビーズ１２ｍｌ（沈降時体積、乾燥時重量は１．０ｇ）
をジメチルホルムアミド中で撹拌する。この操作を１回
２０分間、４回繰り返し、含水水分をジメチルホルムア
ミドと完全に置換させた。
【００２５】このビーズを１５ｇの４，４’−ジフェニ
ルメタンジイソシアネートを溶解させた１リットルのジ
メチルホルムアミドに徐々に添加し、撹拌しながら室温
で１時間反応させた後、これらを取り出し、別々に準備
しておいた１リットルのジメチルホルムアミド中に入れ
て２０分間洗浄操作を行い、この洗浄操作を３回繰り返
し未反応４，４’−ジフェニルメタンジイソシアネート
を完全に除去した。次いで、水洗を４回行い、ジメチル
ホルムアミドを水と置換し、さらに０．１Ｍの水酸化ナ
トリウム溶液と撹拌しながら室温で２０分間反応させイ
ソシアネート基を１級アミノ基に加水分解し、さらに水
洗を４回行い、最後に８０℃の水中で２０分間浸漬し、
次の構造式を有するキトサンビーズを得た。
ルメタンジイソシアネートを溶解させた１リットルのジ
メチルホルムアミドに徐々に添加し、撹拌しながら室温
で１時間反応させた後、これらを取り出し、別々に準備
しておいた１リットルのジメチルホルムアミド中に入れ
て２０分間洗浄操作を行い、この洗浄操作を３回繰り返
し未反応４，４’−ジフェニルメタンジイソシアネート
を完全に除去した。次いで、水洗を４回行い、ジメチル
ホルムアミドを水と置換し、さらに０．１Ｍの水酸化ナ
トリウム溶液と撹拌しながら室温で２０分間反応させイ
ソシアネート基を１級アミノ基に加水分解し、さらに水
洗を４回行い、最後に８０℃の水中で２０分間浸漬し、
次の構造式を有するキトサンビーズを得た。
【００２６】
【化４】 この修飾キトサンビーズおよびコントロールとしての未
修飾キトサンビーズを用いて、実施例１同様にウサギ血
漿中のスーパー抗原（ＴＳＳＴ１）の循環方法による吸
着除去を行った。スーパー抗原の初期濃度は１ｎｇ／ｍ
ｌとし、血漿量１０ｍｌに対して上記のキトサンビーズ
１ｍｌを添加し、３７℃において６０分間反応させ、５
分，１５分，３０分，４５分，６０分後のウサギ血漿中
の３種のスーパー抗原濃度を酵素免疫学的に測定した
（図１）。このように、化学修飾によりキトサンビーズ
に体外循環のような流動条件下におけるスーパー抗原吸
着能が示された。
修飾キトサンビーズを用いて、実施例１同様にウサギ血
漿中のスーパー抗原（ＴＳＳＴ１）の循環方法による吸
着除去を行った。スーパー抗原の初期濃度は１ｎｇ／ｍ
ｌとし、血漿量１０ｍｌに対して上記のキトサンビーズ
１ｍｌを添加し、３７℃において６０分間反応させ、５
分，１５分，３０分，４５分，６０分後のウサギ血漿中
の３種のスーパー抗原濃度を酵素免疫学的に測定した
（図１）。このように、化学修飾によりキトサンビーズ
に体外循環のような流動条件下におけるスーパー抗原吸
着能が示された。
【００２７】比較例１ ３種の疎水性ビーズによるスーパー抗原吸着試験につ
き、以下の通り行った。実施例１で作製した疎水性キト
サンビーズ及び市販の疎水クロマトグラフィー用ビーズ
であるブチルトヨパール（東ソー（株））及びフェニル
セファロース（ファルマシア バイオテク（株））を用
いて３種のスーパー抗原、ＳＥＢ、ＳＥＣ、ＴＳＳＴ−
１の吸着試験を行った。スーパー抗原の初期濃度は１ｎ
ｇ／ｍｌとし、血漿量１０ｍｌに対して上記のビーズ１
ｍｌを添加し、３７℃において６０分間振盪し、反応前
後のウサギ血漿中の３種のスーパー抗原濃度を酵素免疫
学的に測定した。その結果を表２に示す。
き、以下の通り行った。実施例１で作製した疎水性キト
サンビーズ及び市販の疎水クロマトグラフィー用ビーズ
であるブチルトヨパール（東ソー（株））及びフェニル
セファロース（ファルマシア バイオテク（株））を用
いて３種のスーパー抗原、ＳＥＢ、ＳＥＣ、ＴＳＳＴ−
１の吸着試験を行った。スーパー抗原の初期濃度は１ｎ
ｇ／ｍｌとし、血漿量１０ｍｌに対して上記のビーズ１
ｍｌを添加し、３７℃において６０分間振盪し、反応前
後のウサギ血漿中の３種のスーパー抗原濃度を酵素免疫
学的に測定した。その結果を表２に示す。
【００２８】
【表２】 このように、他の疎水性のビーズに比較しても本発明の
リガンドを有するビーズはスーパー抗原に対して高い結
合活性があることが示された。
リガンドを有するビーズはスーパー抗原に対して高い結
合活性があることが示された。
【００２９】
【発明の効果】本発明により、選択性に優れ、滅菌によ
る失活がなく、かつ安価であるスーパー抗原の吸着材料
が提供された。本発明の吸着材料を用いて、各種スーパ
ー抗原を選択的に効率よく除去できるので、血液、尿等
の体液や食料品、飲料物中よりスーパー抗原を除去する
ために用いることができ、これにより、除去カラムや創
傷被覆材料を構成することで食中毒、敗血症や自己免疫
疾患の治療や発症を予防することが可能となる。
る失活がなく、かつ安価であるスーパー抗原の吸着材料
が提供された。本発明の吸着材料を用いて、各種スーパ
ー抗原を選択的に効率よく除去できるので、血液、尿等
の体液や食料品、飲料物中よりスーパー抗原を除去する
ために用いることができ、これにより、除去カラムや創
傷被覆材料を構成することで食中毒、敗血症や自己免疫
疾患の治療や発症を予防することが可能となる。
【図１】循環法によるスーパー抗原吸着試験の結果を示
す。
す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０８Ｌ 5/00 ＬＡＷ Ｃ０８Ｌ 5/00 ＬＡＷ Ｃ１２Ｎ 11/08 Ｃ１２Ｎ 11/08 Ｚ 11/10 11/10 Ｇ０１Ｎ 33/545 Ｇ０１Ｎ 33/545 Ｚ // Ａ２３Ｌ 3/3562 Ａ２３Ｌ 3/3562 Ａ６１Ｋ 39/00 ＡＤＴ Ａ６１Ｋ 39/00 ＡＤＴＡ Ａ６１Ｌ 15/44 Ａ６１Ｌ 15/03
Claims (8)
- 【請求項１】下記構造［Ｉ］を側鎖に有するポリマから
なるスーパー抗原吸着材料。 −（ＣＨ2 ）ｎ−Ｙ ［Ｉ］ （ｎは、１以上、２０以下の整数、Ｙは、１級、２級、
３級あるいは４級のアミノ基、または水素を示す。） - 【請求項２】該ポリマが、下記一般式［III ］で示され
るポリマである請求項１記載のスーパー抗原吸着材料。 【化１】 - 【請求項３】請求項１または２記載のスーパー抗原吸着
材料を用いた体液浄化カラム。 - 【請求項４】請求項１または２記載のスーパー抗原吸着
材料を用いた創傷被覆材。 - 【請求項５】下記構造［II］を側鎖に有するポリマから
なるスーパー抗原吸着材料。 −Ｒ−（ＣＨ2 ) ｎ−Ｒ’−Ｙ （ｎは０または１、Ｒ，Ｒ’は、ベンゼン環、シクロヘ
キサン環及びその誘導体から選ばれる１種，Ｙは１級、
２級あるいは３級のアミノ基、または水素を示す。） - 【請求項６】該ポリマが、下記一般式［IV］で示される
ポリマである請求項５記載のスーパー抗原吸着材料。 【化２】 - 【請求項７】請求項５または６記載のスーパー抗原吸着
材料を用いた体液浄化カラム。 - 【請求項８】請求項５または６記載のスーパー抗原吸着
材料を用いた創傷被覆材。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14297696A JP3890625B2 (ja) | 1996-06-05 | 1996-06-05 | スーパー抗原吸着材料 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14297696A JP3890625B2 (ja) | 1996-06-05 | 1996-06-05 | スーパー抗原吸着材料 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP07117175 Division | 1995-05-16 | 1995-05-16 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08319431A true JPH08319431A (ja) | 1996-12-03 |
| JP3890625B2 JP3890625B2 (ja) | 2007-03-07 |
Family
ID=15328041
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14297696A Expired - Lifetime JP3890625B2 (ja) | 1996-06-05 | 1996-06-05 | スーパー抗原吸着材料 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3890625B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998032015A1 (fr) * | 1997-01-21 | 1998-07-23 | The Kitasato Institute | Procede d'examen de plaies et d'evaluation de leur evolution, necessaires a cet effet et technique permettant de decider d'une methode de traitement de ces surfaces lesees |
| US8785141B2 (en) | 2000-08-25 | 2014-07-22 | Kaneka Corporation | Bacterial toxin adsorbing material, method of removing the toxin by adsorbing, and an adsorber formed by filling the adsorbing material therein |
-
1996
- 1996-06-05 JP JP14297696A patent/JP3890625B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998032015A1 (fr) * | 1997-01-21 | 1998-07-23 | The Kitasato Institute | Procede d'examen de plaies et d'evaluation de leur evolution, necessaires a cet effet et technique permettant de decider d'une methode de traitement de ces surfaces lesees |
| US8785141B2 (en) | 2000-08-25 | 2014-07-22 | Kaneka Corporation | Bacterial toxin adsorbing material, method of removing the toxin by adsorbing, and an adsorber formed by filling the adsorbing material therein |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3890625B2 (ja) | 2007-03-07 |
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