JPH08245400A - 抗炎症剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 炎症に対する治療効果及び予防効果に優れ、
副作用が低いと共に、安価に供給できる抗炎症剤を提供
する。 【構成】 リン酸基と硫酸基が導入されたキチン又はそ
の塩類を有効成分とする。また、前記キチンがリン酸化
された後に硫酸化されたキチンである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、炎症の治療や予防等
に有用な医薬である抗炎症剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】周知のように、炎症とは、微少循環系が
分布している組織に対し、外来性の異物、物理的エネル
ギー、損傷等の有害刺激が加わった場合に生じる局所性
の反応である。有害刺激の加わった組織の微少循環系
は、一過性に収縮した後、拡大し、通常は閉じている毛
細血管床が開き、血流量が増加する。さらに、細静脈領
域の血管内皮細胞間隙が開くことにより、この間隙を通
じて血漿成分や、多形核白血球、単球、リンパ球等の細
胞成分が組織間質へ浸出する血管透過亢進現象が起こ
る。このように、これら血漿成分や細胞成分によって生
成される活性因子系の作用により、組織細胞の増殖は促
進され、修復へと導かれるのである。

【０００３】しかしながら、炎症反応は、生体にとって
有利な反応ばかりではない。すなわち、組織間質に浸潤
した多数の多形核白血球や単球等が、蛋白分解酵素や活
性酸素等を放出することによって、肺、肝臓、腎臓等の
臓器、あるいは関節、筋肉等に対して損傷を引き起こす
ことがある。このような炎症反応により主要臓器が障害
を受けた場合、生体は重篤な状態に追い込まれることに
なる。例えば、特に近時多発する傾向にある成人呼吸窮
迫症候群（ＡＲＤＳ）は、肺における多形核白血球の突
発的な組織間質への浸潤によって引き起こされる難病で
あり、その治療法が発症メカニズムの点から検討されて
いる。

【０００４】一般的に、上記のような炎症反応の治療や
予防等を目的とした従来の抗炎症剤としては、副腎皮質
ホルモン剤（ステロイド剤）や非ステロイド剤等が繁用
されており、その消炎メカニズムは、炎症細胞自体の機
能を抑制するもの、又は炎症産物を分解あるいは吸着し
て無毒化するものである。また、Ｓｉａｌｙｌ−Ｌｅｗ
ｉｓＸ等の糖鎖を利用して血管内皮細胞の白血球接着レ
セプターをブロックする研究（ＮＡＴＵＲＥ，３６４
巻，８号，１４９−１５１頁，発行所 MacmillanMagazi
nes Ltd. ）も行われている。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来の
抗炎症剤においては、その治療効果が満足できるもので
はなかった。例えば、副腎皮質ホルモン剤（ステロイド
剤）においては、感染誘発、副腎皮質機能抑制等の副作
用が認められ、非ステロイド剤においても、ステロイド
剤と比較して毒性は低いものの、薬効の点で十分ではな
い。また、Ｓｉａｌｙｌ−ＬｅｗｉｓＸについては、製
造に手間が掛かり、値段も高価であるため、大量供給が
困難である等の問題点があった。

【０００６】この発明は、上記のような事情や問題点に
鑑みてなされたものであって、炎症に対する治療効果及
び予防効果に優れ、副作用が低いと共に、安価に供給で
きる抗炎症剤を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】すなわち、この発明の請
求項１記載の抗炎症剤は、リン酸基と硫酸基が導入され
たキチン又はその塩類を有効成分とするものである。ま
た、請求項２記載の抗炎症剤は、リン酸化された後に硫
酸化されたキチン又はその塩類を有効成分とするもので
ある。

【０００８】

【作用】この発明に使用するリン酸基と硫酸基が導入さ
れたキチンとは、構成単糖としてＮ−アセチル−Ｄ−グ
ルコサミンとＤ−グルコサミンを有し、且つＤ−グルコ
サミンの割合が２０％以下のもの、又はＮ−アセチル−
Ｄ−グルコサミンのみからなる多糖であるキチンに、リ
ン酸基と硫酸基を導入した構造を有するものである。ま
た、リン酸基と硫酸基が導入されたキチンの製造法とし
ては、例えば、カニ、エビ等の甲殻、イカの軟甲等から
蛋白の除去、及び灰分の除去を行って抽出したキチンを
リン酸化及び硫酸化する方法を挙げることができる。な
お、キチンをリン酸化及び硫酸化する場合の順序は、リ
ン酸化を行った後に硫酸化を行うのが操作上、効率が良
い。

【０００９】前記リン酸化の方法としては、オルトリン
酸を用いる方法や、メタンスルホン酸を溶媒として五酸
化二リンを用いる方法等の公知の方法（例えば「最後の
バイオマス キチン、キトサン」，第２章，「２．３．
５ 硫酸とリン酸エステル化反応」，キチン、キトサン
研究会編，１９８８年２月２０日１版１刷発行，技報堂
出版）を用いることができ、リン酸化剤の添加量、反応
時間、反応温度等を適宜調節することによって、リン酸
基の置換度を調節することができる。

【００１０】また、前記硫酸化の方法としては、Ｎ，Ｎ
−ジメチルホルムアミドを溶媒とした三酸化硫黄−Ｎ，
Ｎ−ジメチルホルムアミド錯体を用いる方法、クロロス
ルホン酸とピリジンを用いる方法、クロロスルホン酸と
ジクロロエタンを用いる方法、濃硫酸を用いる方法等の
公知の方法（例えば「最後のバイオマス キチン、キト
サン」，第２章，「２．３．５ 硫酸とリン酸エステル
化反応」，キチン、キトサン研究会編，１９８８年２月
２０日１版１刷発行，技報堂出版）を用いることがで
き、硫酸化剤の添加量、反応時間、反応温度等を適宜調
節することによって、硫酸基の置換度も調節することが
できる。

【００１１】ここで、リン酸基と硫酸基が導入されたキ
チンの構成単糖当たりのリン酸基及び硫酸基の置換度
は、共に０．１〜１．９の範囲で導入するのがよく、且
つ双方の置換度の和が、構成単糖当たり０．２〜２の範
囲であることが望ましい。なお、構成単糖当たりの双方
の置換度の和が０．２未満である場合は、水に溶けにく
いため取り扱いが困難であると共に、抗炎症剤としての
効果も低いものである。

【００１２】一方、この発明に使用するリン酸基と硫酸
基が導入されたキチンの塩としては、ナトリウム塩、カ
リウム塩、アンモニウム塩等の無機塩基との塩、及びジ
エタノールアミン塩、シクロヘキシルアミン塩、アミノ
酸塩等の有機塩基との塩等、医学的に許容し得る塩が含
まれる。

【００１３】なお、リン酸基と硫酸基が導入されたキチ
ン又はその塩類の投与量は、生体内において目的とする
治療効果を生ずるに十分な量であり、一般に体重１ｋｇ
当たり０．０１〜２００ｍｇ、好ましくは０．１〜１０
０ｍｇであり、必要に応じて、例えば、１日当たり１〜
４回、あるいは１週間間隔等、任意の回数や間隔で投与
できる。

【００１４】また、投与方法としては、経口、肛門、
鼻、局所（舌下を含む）、膣、注射（皮下、筋肉内、静
脈内、皮内を含む）、塗布等の任意の方法をとることが
できるが、好ましい投与経路は、炎症の部位や程度等に
より異なる。

【００１５】投与に際しては、リン酸基と硫酸基が導入
されたキチンを、上記の投与方法に適した有機又は無機
の個体、又は液体賦形剤のような医薬用担体と混合して
製剤として投与することができる。このような製剤に
は、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の個体、及び液
剤、乳剤、懸濁剤等の液体や軟膏が含まれる。また、必
要に応じて補佐薬、安定剤、乳化剤、ｐＨ調節剤等の添
加剤を加えることもできる。

【００１６】なお、リン酸基と硫酸基が導入されたキチ
ン又はその塩類を含有する抗炎症剤の作用効果について
は、現在のところ明確に解明されてはいないが、リン酸
基と硫酸基が導入されたキチン又はその塩類が、炎症反
応における有害刺激によって引き起こされる白血球の血
管内皮への接着を阻害することによって、血管外への白
血球の浸潤を抑制し、炎症反応を抑えるものと考えられ
る。

【００１７】

【実施例】次に、実施例を挙げてこの発明を詳細に説明
するが、この発明はかかる実施例に限定されるものでは
ない。

【００１８】実施例１ スルメイカの軟甲１０ｋｇをフェザーミル（５ｍｍスク
リーン通過）により粉砕し、粉砕物を１規定の水酸化ナ
トリウム水溶液（３０リットル）に投入し、９０℃で１
時間保持し、水洗後、０．１規定の塩酸水溶液に１時間
浸漬した。次いで、水洗後、１規定の水酸化ナトリウム
水溶液（９０℃）中に１時間保持し、水洗した後、オー
ブン（５０℃）で５時間乾燥し、精製イカキチン１．２
ｋｇを得た。この精製イカキチンを遠心流動化ミルにて
粉砕し、１００メッシュ以下の微粉末に粉砕した。

【００１９】そして、ジメチルホルムアミド１５０ｍｌ
に尿素１５０ｇを加え、１００℃に加温して溶解させた
溶液に、前記微粉末状キチン１０ｇを加えて分散させた
後、オルトリン酸２６ｍｌを加え、１５０℃で３時間反
応させてキチンのリン酸化を行った。この反応溶液に脱
イオン水１０００ｍｌを加えた後、濃水酸化ナトリウム
溶液を用いてｐＨを９に調整し、不溶部を遠心分離にて
除去し、３日間透析を行った。さらに、透析後の溶液を
濃縮し、凍結乾燥を行うことにより、リン酸化キチンの
ナトリウム塩約１２ｇを得た。

【００２０】上記により調製したリン酸化キチンのナト
リウム塩５ｇにピリジン５０ｍｌを加え、一晩浸漬し
た。そして、遠心分離にて不溶部を回収し、新たにピリ
ジン１００ｍｌ中に懸濁させ、三酸化硫黄とピリジンの
錯体１２．１６ｇを添加し、窒素雰囲気中８０℃で６０
分間反応させた。次いで、反応溶液を室温まで冷却した
後、反応溶液に４００ｍｌのエタノールを添加し、生成
した沈殿をろ別し、５０ｍｌの脱イオン水に溶解した
後、１規定の水酸化ナトリウムでｐＨを９に調整し、不
溶部を濾過し、４日間透析を行った。さらに、透析後の
溶液を濃縮し、凍結乾燥することにより、４．４ｇのリ
ン酸基と硫酸基が導入されたキチンを得た。得られたリ
ン酸基と硫酸基が導入されたキチンの置換度は、元素分
析の結果より、リン酸化度１．１８、硫酸化度０．１５
であり、分子量は、標準物質としてプルランを用いたＨ
ＰＬＣ分析の結果、約１１万であった。

【００２１】上記のようにして製造したリン酸基と硫酸
基が導入されたキチンを、５ｍｇ／ｍｌの濃度に生理食
塩水で溶解し、１規定の塩酸及び１規定の水酸化ナトリ
ウムでｐＨを７．２に調製し、腎不全の症状を呈してい
た体重５ｋｇ、４歳の雑種、雄猫の治療に用いた。な
お、治療の全過程を通じて併用薬は使用しなかった。

【００２２】治療開始前に血液生化学検査をＶＩＳＩＯ
Ｎシステム（ダイナボット株式会社製）を用いて行った
ところ、血中尿素窒素量（ＢＵＮ）が１３６．８ｍｇ／
ｄｌ、血中クレアチニン量が７．８ｍｇ／ｄｌと尿毒症
を併発していた。上記にて調製したリン酸基と硫酸基が
導入されたキチンの溶液１０ｍｌを、３日間隔で橈側皮
静脈に投与（体重１ｋｇ当たり１０ｍｇ投与）した結
果、投与開始後１週間でＢＵＮが５６．８ｍｇ／ｄｌ、
血中クレアチニン量が１．９ｍｇ／ｄｌと改善し、２週
間の投与でＢＵＮが１９．２ｍｇ／ｄｌ、血中クレアチ
ニン量が０．６ｍｇ／ｄｌと正常値を示し、炎症症状が
消失した。

【００２３】実施例２ 上記実施例１で調製したリン酸基と硫酸基が導入された
キチンの溶液を、体重３．１ｋｇ、４歳の雑種、去勢猫
の口内炎及び歯肉炎の治療に使用した。リン酸基と硫酸
基が導入されたキチンの溶液１．５ｍｌを３日間隔で橈
側皮静脈に投与（体重１ｋｇ当たり２．４ｍｇ投与）し
た結果、投与開始前の血中の白血球数が２９０００個／
μｌであったのが、投与開始後１週間で１３２００個／
μｌと正常値を示し、投与開始後２週間で口内炎及び歯
肉炎が完全に消失した。

【００２４】実施例３ 上記実施例１で調製したリン酸基と硫酸基が導入された
キチンを３０ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解し、体重６５０ｋ
ｇ、２歳の和牛の関節炎の治療に使用した。リン酸基と
硫酸基が導入されたキチンの溶液１０ｍｌを炎症部皮下
に単回投与（体重１ｋｇ当たり０．４６ｍｇ投与）した
ところ、１週間後には炎症症状は消失していた。

【００２５】実施例４ 本願発明者らは、キトサンを犬の皮下に体重１ｋｇ当た
り２００ｍｇ投与することにより、キトサン投与後３日
以内に肺に炎症が生じ、極度に肺血管の透過性が亢進
し、血漿成分や細胞成分の重度な浸潤が起こり、肺水腫
による呼吸困難が発生することを確認している（第８
回、キチン、キトサンシンポジウム講演要旨集、２９〜
３０頁）。そこで、犬に炎症を生じさせるためにキトサ
ンを投与し、この症例の治療にリン酸基と硫酸基が導入
されたキチンを使用した。なお、治療の全過程を通じて
併用薬は使用しなかった。

【００２６】健康な体重８．５ｋｇの雄のビーグル犬
に、キトサン粉末を５０ｍｇ／ｍｌの濃度になるように
リン酸緩衝液に分散させた懸濁液３４ｍｌ（体重１ｋｇ
当たり２００ｍｇ投与）を頸部皮下に投与し、キトサン
投与直後に、上記実施例１にて調製したリン酸基と硫酸
基が導入されたキチンを５ｍｇ／ｍｌの濃度で生理食塩
水に溶解し、１規定の塩酸でｐＨを７．２に調製した溶
液１７ｍｌ（体重１ｋｇ当たり１０ｍｇ投与）を静脈内
に投与した。

【００２７】キトサンと、リン酸基と硫酸基が導入され
たキチンを投与して４日目までは、臨床的な症状は見ら
れず、投与後４日目に共試犬を安楽死させ、肺を摘出
し、組織を観察したところ、健康な肺の像を呈してい
た。

【００２８】比較例１ 健康な体重１０ｋｇの雄のビーグル犬に、キトサン粉末
を５０ｍｇ／ｍｌの濃度になるようにリン酸緩衝液に分
散させた懸濁液４０ｍｌ（体重１ｋｇ当たり２００ｍｇ
投与）を頸部皮下に投与した。

【００２９】キトサンを投与して２日目より食欲減退、
しゅう明、呼吸困難を呈した。そして、投与後４日目、
共試犬を安楽死させ、肺を摘出し、組織を観察したとこ
ろ、血漿成分及び細胞成分の肺組織内への重度な浸潤、
多量の出血、気管支内への浸出液の貯留、無気肺化が起
こっていた。

【００３０】

【発明の効果】上記のように構成されたリン酸基と硫酸
基が導入されたキチン又はその塩類を有効成分とする抗
炎症剤は、炎症に対する治療効果及び予防効果に優れる
と共に、副作用が低い。また、製造が容易であるので、
安価に供給できると共に、キチンをリン酸化した後に硫
酸化したものでは、リン酸基と硫酸基が導入されたキチ
ンを効率的に製造できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 宮崎 聡 鳥取県鳥取市湖山町東５丁目133番地 サ ンファイブ株式会社内

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 リン酸基と硫酸基が導入されたキチン又
   はその塩類を有効成分とする抗炎症剤。
2. 【請求項２】 前記キチンがリン酸化された後に硫酸化
   されたキチンである請求項１記載の抗炎症剤。