JPH08140681A - プロテインホスファターゼをコードするｃＤＮＡ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 新しい医薬として期待される新規プロテイン
ホスファターゼをコードするヒトｃＤＮＡ、それがコー
ドする蛋白質、およびその発現ベクターを提供する。 【構成】 配列番号１で表される、新規プロテインホス
ファターゼをコードするヒトｃＤＮＡ、このヒトｃＤＮ
Ａがコードする蛋白質、およびこのヒトｃＤＮＡを有す
る発現ベクター。 【効果】 ヒトｃＤＮＡは癌遺伝子診断用プローブ等と
して、またこれがコードする蛋白質は抗腫瘍剤開発試薬
や抗原として有用である。ｃＤＮＡベクターは、該ｃＤ
ＮＡに基づくプローブ調製や蛋白質発現を容易にする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ヒト細胞内で発現して
いるｍＲＮＡに由来する新規ｃＤＮＡ、それがコードす
るプロテインホスファターゼ、およびこのヒトｃＤＮＡ
を有する発現ベクターに関する。プロテインホスファタ
ーゼは癌の遺伝子診断や抗腫瘍剤開発などに有用であ
る。

【０００２】

【従来技術】細胞機能の多くは、蛋白質のリン酸化・脱
リン酸化を介して制御されている。ここでリン酸化を触
媒するのがプロテインキナーゼ、脱リン酸化を触媒する
のがプロテインホスファターゼである。特に細胞の癌化
にともない、蛋白質のリン酸化レベルが著しく高くなる
ことから、プロテインキナーゼやプロテインホスファタ
ーゼが癌化に深く関与していると考えられている。事実
いくつかのプロテインキナーゼが癌遺伝子であることが
明らかになった。また逆の作用を有するプロテインホス
ファターゼが癌抑制遺伝子である可能性が示唆されてい
る［長尾・島・波多野、実験医学 Ｖｏｌ．１０ Ｎ
ｏ．１７、２２６０〜２２６７（１９９２）］。ただプ
ロテインホスファターゼに関してはまだ未解明の点が多
く、より多くの種類のプロテインホスファターゼの単離
精製が望まれている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、新規
プロテインホスファターゼをコードするヒトｃＤＮＡ、
このヒトｃＤＮＡがコードする蛋白質、およびこのヒト
ｃＤＮＡを有する発現ベクターを提供することである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意研究の
結果、新規プロテインホスファターゼをコードするヒト
ｃＤＮＡをクローン化し、本発明を完成した。すなわ
ち、本発明は新規プロテインホスファターゼをコードす
るヒトｃＤＮＡ、このヒトｃＤＮＡがコードする蛋白
質、およびこのヒトｃＤＮＡを有する発現ベクター（以
下、ｃＤＮＡベクターと呼ぶ）を提供する。

【０００５】本発明のヒトｃＤＮＡ及びｃＤＮＡベクタ
ーは、多機能クローニングベクターを用いて作製したｃ
ＤＮＡライブラリーからクローン化することが出来る。
多機能クローニングベクターとしては、一本鎖ファージ
由来のオリジンを有するものであって、かつｃＤＮＡク
ローニング部位の上流に動物細胞内で働くプロモーター
およびＲＮＡポリメラーゼプロモーターを有するもので
あればいかなるものでも利用できる。実施例では、ｐＫ
Ａ１（特開平４−１１７２９２号に記載）を用いた。ｃ
ＤＮＡはヒト細胞から抽出した ポリ（Ａ）⁺ＲＮＡを鋳
型として合成する。ヒト細胞としては、人体から手術な
どによって摘出されたものでも培養細胞でも良い。実施
例ではヒトリンホーマ細胞株Ｕ９３７から単離したポリ
（Ａ）⁺ＲＮＡを用いた。ｃＤＮＡは、岡山−Ｂｅｒｇ
法［Ｏｋａｙａｍａ，Ｈ． ＆ Ｂｅｒｇ，Ｐ．， Ｍｏ
ｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ． ２：１６１〜１７０（１９
８２）］、Ｇｕｂｌｅｒ−Ｈｏｆｆｍａｎ法［Ｇｕｂｌ
ｅｒ，Ｕ． ＆ Ｈｏｆｆｍａｎ，Ｊ． Ｇｅｎｅ ２
５：２６３〜２６９（１９８３）］などいかなる方法を
用いて合成してもよいが、完全長クローンを効率的に得
るためには、実施例にあげたようなベクタープライマー
を用いる方法が望ましい。ｃＤＮＡの同定は、シーケン
シングによる全塩基配列の決定、塩基配列から予測され
るアミノ酸配列と類似配列を有する既知蛋白質の検索、
大腸菌による発現によって行なう。

【０００６】本発明者は以上の方法に基づき、新規プロ
テインホスファターゼをコードするヒトｃＤＮＡを同定
した。得られたｃＤＮＡは、１５２６ｂｐからなる塩基
配列を有し、９１８ｂｐのオープンリーディングフレー
ムを有していた。このオープンリーディングフレーム
は、３０５アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしてい
る。この蛋白質はアミノ酸配列レベルでヒトプロテイン
ホスファターゼＰＰ−Ｘ［Ｂｒｅｗｉｓ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ１１
７１：２３１〜２３３（１９９２）］と６１．２％とい
う高い類似性を有している。

【０００７】なお、配列番号１に記載のｃＤＮＡの塩基
配列に基づいて合成したオリゴヌクレオチドプローブを
用いて、本発明で用いた細胞株から作製したヒトｃＤＮ
Ａライブラリーをスクリーニングすれば、本発明のｃＤ
ＮＡと同一のクローンを容易に得ることが出来る。

【０００８】一般にヒト遺伝子は個体差による多型が頻
繁に認められる。従って配列番号１で表される塩基配列
において、１個又は複数個のヌクレオチドの付加、欠失
および／又は他のヌクレオチドによる置換がなされてい
るｃＤＮＡも本発明の範疇にはいる。

【０００９】同様に、これらの変更によって生じる、１
個又は複数個のアミノ酸の付加、欠失および／又は他の
アミノ酸による置換がなされている蛋白質も、本発明の
範疇にはいる。

【００１０】本発明の蛋白質は、本発明のｃＤＮＡベク
ターからインビトロ転写によってＲＮＡを調製し、これ
を鋳型としてインビトロ翻訳を行なうことによりインビ
トロで発現出来る。また翻訳領域を適当な発現ベクター
に組換えてやれば、大腸菌、枯草菌、酵母、動物細胞等
で、コードしている蛋白質を大量に発現させることもで
きる。あるいは本発明のアミノ酸配列に基づき、化学合
成によってペプチドを調製することも出来る。

【００１１】本発明のｃＤＮＡベクターは、クローニン
グベクターに本発明のｃＤＮＡを組換えることにより構
築できる。クローニングベクターとしては、クローニン
グ部位の上流にプロモーターを有するものであればいか
なるものでもよい。好ましいクローニングベクターは、
一本鎖ファージ由来のオリジンを有するものであって、
かつｃＤＮＡクローニング部位の上流に動物細胞内で働
くプロモーターおよびＲＮＡポリメラーゼプロモーター
を有する多機能クローニングベクターである。一本鎖フ
ァージ由来のオリジンとしては、Ｍ１３ファージ、ｆｄ
ファージ、ｆ１ファージなどのオリジンを例示しうる。
動物細胞内で働くプロモーターとしては、ＳＶ４０の初
期プロモーターや後期プロモーター、アデノウイルスの
後期プロモーター、レトロウイルスのＬＴＲ、ＣＭＶの
プロモーター、チミジンキナーゼのプロモーター、メタ
ロチオネインのプロモーター、β−アクチンのプロモー
ター、延長因子のプロモーターなどが例示できる。ＲＮ
Ａポリメラーゼプロモーターとしては、Ｔ７ＲＮＡポリ
メラーゼ、Ｔ３ＲＮＡポリメラーゼ、ＳＰ６ＲＮＡポリ
メラーゼなどのプロモーターが例示できる。ちなみに、
実施例のように多機能クローニングベクターを用いて作
製したｃＤＮＡライブラリーからクローン化した場合に
は、得られたクローンその物がすでに目的とする性質を
有している。

【００１２】上記の多機能クローニングベクターを用い
てなる本発明のｃＤＮＡベクターは、例えばｆ１ファー
ジのオリジンおよびＴ７プロモーターを有しているの
で、ｃＤＮＡを他のベクターに組換えることなしに、ｃ
ＤＮＡのアンチセンス鎖に対応する一本鎖ＤＮＡ並びに
センス鎖ＲＮＡを容易に調製することが出来る。即ち、
本発明のｃＤＮＡベクターを有する大腸菌（Ｆ’含有
株）の培養液に、ヘルパーファージを感染させると、培
地中にｃＤＮＡのアンチセンス鎖に相当する一本鎖ＤＮ
Ａを含むファージが放出される。したがって培地からこ
のファージを回収すれば容易にアンチセンス一本鎖ＤＮ
Ａを調製できる。実施例ではこれを用いて塩基配列決定
を行なっている。また本発明のｃＤＮＡベクターを制限
酵素で切断して直鎖状にした後、ＲＮＡポリメラーゼを
作用させると、センス鎖ＲＮＡが調製できる。この際ラ
ジオアイソトープや色素などで標識した基質を混合して
おけば、これらの化合物によって標識されたＲＮＡプロ
ーブを調製することが出来る。

【００１３】

【実施例】次に実施例により発明を具体的に説明する
が、本発明はこれらの例に限定されるものではない。Ｄ
ＮＡの組換えに関する基本的な操作および酵素反応は、
文献［”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ．Ａ Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ”、Ｃｏｌｄ Ｓｐ
ｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、１９
８９］に従った。制限酵素および各種修飾酵素は特に記
載の無い場合、宝酒造社製のものを用いた。各酵素反応
の緩衝液組成、並びに反応条件は付属の説明書に従っ
た。

【００１４】ｃＤＮＡクローニング ヒトリンホーマ細胞株Ｕ９３７のｃＤＮＡライブラリー
（特開平４−１１７２９２号に記載）から任意に選択し
たクローンの塩基配列決定を行ない、得られた塩基配列
を３フレームのアミノ酸配列に変換した後、これらの配
列でプロテインデータベースを検索した。解析ソフトウ
エアはＧＥＮＥＴＹＸ−ＭＡＣ（ソフトウエア開発社
製）を用いた。その結果、クローンＨＰ００５２７がコ
ードしている蛋白質は、プロテインホスファターゼとア
ミノ酸配列レベルで類似性を有していることが判明し
た。このクローンの構造を図１に示す。ｃＤＮＡインサ
ートの全塩基配列を決定したところ、６３ｂｐの５’非
翻訳領域、９１８ｂｐのオープンリーディングフレー
ム、５４５ｂｐの３’非翻訳領域、７５ｂｐのポリ
（Ａ）テールからなる構造を有していた（配列番号
１）。オープンリーディングフレームは３０５アミノ酸
残基からなる蛋白質をコードしており、この配列を用い
てプロテインデータベースを検索したところ、全領域に
わたってヒトプロテインホスファターゼＰＰ−Ｘのアミ
ノ酸配列と６１．２％という高い類似性を有していた。
表１に、本発明の蛋白質ＨＰ５２７（ＨＰ）とヒトプロ
テインホスファターゼＰＰ−Ｘ（ＰＰＸ）のアミノ酸配
列の比較を示す。-（ハイフン）はギャップを、＊（ア
スタリスク）は本発明の蛋白質と同一アミノ酸残基
を、．（ドット）は本発明の蛋白質と類似アミノ酸残基
をそれぞれ表す。

【００１５】

【表１】 表１ _________________________________________________________________ HP MAPL-DLDKYVEIARLCKYLPENDLKRLCDYVCDLLLEESNVQPVSTPVTVCGDIHGQFY ** . ***. .* * *. . *...* **. . ..*.******.*..************* PPX MAEISDLDRQIEQLRRCELIKESEVKALCAKAREILVEESNVQRVDSPVTVCGDIHGQFY HP DLCELFRTGGQVPDTNYIFMGDFVDRGYYSLETFTYLLALKAKWPDRITLLRGNHESRQI ** ****.**.**. **.*********.**.*** *****...******.********* PPX DLKELFRVGGDVPERNYLFMGDFVDRGFYSVETFLLLLALKVRYPDRITLIRGNHESRQI HP TQVYGFYDECQTKYGNANAWRYCTKVFDMLTVAALIDEQILCVHGGLSPDIKTLDQIRTI ********** ***....*****..** *...*.**..*.********.*.******** PPX TQVYGFYDECLRKYGSVTVWRYCTEIFDYLSLSAIIDGKIFCVHGGLSPSIQTLDQIRTI HP ERNQEIPHKGAFCDLVWSDPEDVDTWAISPRGAGWLFGAKVTNEFVHINNLKLICRAHQL .*.**.**.*..***.******...*..******.***..*...* *....******* PPX DRKQEVPHDGPMCDLLWSDPEDTTGWGVSPRGAGYLFGSDVVAQFNAANDIDMICRAHQL HP VHEGYKFMFDEKLVTVWSAPNYCYRCGNIASIMVFKDVNTREPKLFRAVPDSERVIPPRT * ****. *.*...**************.*.*. ... .. .* *.*...* **... PPX VMEGYKWHFNETVLTVWSAPNYCYRCGNVAAILELDEHLQKDFIIFEAAPQETRGIPSKK HP TTP-YFL ... *** PPX PVADYFL _________________________________________________________________

【００１６】大腸菌による発現 プラスミドｐＨＰ００５２７ ５μｇを５０単位のＮａ
ｒＩ（東洋紡）で消化した後、クレノウ処理を行ない、
ついでＳｔｕＩで消化し、反応産物を１．５％アガロー
スゲル電気泳動にかけ、約９００ｂｐのＤＮＡ断片をゲ
ルから切り出し精製した。

【００１７】次いでｐＭＡＬ^TM−ｃ２（ニューイングラ
ンドバイオラボス社）１μｇを、２０単位のＥｃｏＲＩ
で消化した後、マングビーンヌクレアーゼ処理、ついで
ＣＩＰ処理を行なった。これを０．６％アガロースゲル
電気泳動にかけ、６．７ｋｂｐのＤＮＡ断片をゲルから
切り出した。ベクター断片とｃＤＮＡ断片をライゲーシ
ョンキットにより連結後、大腸菌ＪＭ１０９を形質転換
した。形質転換体からプラスミドｐＭＡＬＨＰ５２７を
調製し、制限酵素切断地図により目的とする組換え体を
確認した。得られたプラスミドの構造を図２に示す。

【００１８】ｐＭＡＬＨＰ５２７／ＪＭ１０９ の一晩
培養液１０ｍｌを１００μｇ／ｍｌアンピシリン含有リ
ッチ培地（１リットル当たりトリプトン１０ｇ、酵母抽
出物５ｇ、ＮａＣｌ５ｇ、グルコース２ｇを含む）１リ
ットルに懸濁し、３７℃で振とう培養し、Ａ₆₀₀が約
０．５になったときにイソプロピルチオガラクトシドを
０．３ｍＭになるように添加した。さらに３７℃で８時
間培養後、遠心によって集菌し、菌体をカラムバッファ
ー（１０ｍＭトリス塩酸、ｐＨ７．４、２００ｍＭ Ｎ
ａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ）５０ｍｌに懸濁した。この
溶液を超音波処理後、遠心し、上澄を２．５ｘ１０ｃｍ
のアミロースカラム（ニューイングランドバイオラボス
社）にかけた。カラム体積の８倍量のカラムバッファー
でカラムを洗浄後、１０ｍＭマルトースを含むカラムバ
ッファーでマルトース結合蛋白質／ＨＰ５２７融合蛋白
質を溶出した。得られた融合蛋白質の一部をとりＳＤＳ
−ポリアクリルアミド電気泳動にかけたところ、約７７
ｋＤａの位置に単一のバンドが認められた。この分子量
の値は、マルトース結合蛋白質／ＨＰ５２７融合蛋白質
の予想分子量と一致した。

【００１９】マルトース結合蛋白質／ＨＰ５２７融合蛋
白質１０μｇを含むカラムバッファー１００μｌにファ
クターＸａ ０．１μｇを添加し、４℃で１２時間反応
させた。反応液をアミロースカラムにかけ素通りしてき
た分画を集めた。この一部を取って、ＳＤＳ−ポリアク
リルアミドゲル電気泳動にかけたところ、本発明の蛋白
質ＨＰ５２７に相当する約３４ｋＤａの位置にバンドが
認められた。

【００２０】

【発明の効果】本発明により新規プロテインホスファタ
ーゼをコードするヒトｃＤＮＡ、このヒトｃＤＮＡがコ
ードする蛋白質、およびこのヒトｃＤＮＡを有する発現
ベクターが提供される。本発明のヒトｃＤＮＡは、癌の
遺伝子診断用プローブとして用いることが出来る。ま
た、該ｃＤＮＡがコードしている蛋白質を大量生産する
ための遺伝子源として用いることが出来る。本発明の蛋
白質は、抗腫瘍剤開発のための試薬として、あるいは該
蛋白質に対する抗体を作製するための抗原として用いる
ことが出来る。本発明のｃＤＮＡベクターは、該ｃＤＮ
Ａに基づくプローブ調製や蛋白質発現を容易にする。

【００２１】

【配列表】

配列番号：１ 配列の長さ：１５２６ 配列の型：核酸 鎖の数： 二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ｃＤＮＡ ｔｏ ｍＲＮＡ 起源： 生物名：ホモ＝サピエンス 細胞の種類：リンホーマ セルライン：Ｕ９３７ クローン名：ＨＰ００５２７ 配列の特徴： 特徴を表す記号：ＣＤＳ 存在位置：６４．．９８１ 配列 CCGCTGCCGC CGCCGCTGCT ACAGCCGCCG CCGCCGCTGT TGCCGCGGCT TGTTATTCTT 60 AAA ATG GCG CCG CTA GAC CTG GAC AAG TAT GTG GAA ATA GCG CGG CTG 108 Met Ala Pro Leu Asp Leu Asp Lys Tyr Val Glu Ile Ala Arg Leu 1 5 10 15 TGC AAG TAC CTG CCA GAG AAC GAC CTG AAG CGG CTA TGT GAC TAC GTT 156 Cys Lys Tyr Leu Pro Glu Asn Asp Leu Lys Arg Leu Cys Asp Tyr Val 20 25 30 TGT GAC CTC CTC TTA GAA GAG TCA AAT GTT CAG CCA GTA TCA ACA CCA 204 Cys Asp Leu Leu Leu Glu Glu Ser Asn Val Gln Pro Val Ser Thr Pro 35 40 45 GTA ACA GTG TGT GGA GAT ATC CAT GGA CAG TTT TAT GAC CTT TGT GAA 252 Val Thr Val Cys Gly Asp Ile His Gly Gln Phe Tyr Asp Leu Cys Glu 50 55 60 CTG TTC AGA ACT GGA GGT CAG GTT CCT GAC ACA AAC TAC ATA TTT ATG 300 Leu Phe Arg Thr Gly Gly Gln Val Pro Asp Thr Asn Tyr Ile Phe Met 65 70 75 GGT GAT TTT GTA GAC AGA GGT TAC TAT AGT TTG GAG ACC TTC ACT TAC 348 Gly Asp Phe Val Asp Arg Gly Tyr Tyr Ser Leu Glu Thr Phe Thr Tyr 80 85 90 95 CTT CTT GCA TTA AAG GCT AAA TGG CCT GAT CGT ATT ACA CTT TTG CGA 396 Leu Leu Ala Leu Lys Ala Lys Trp Pro Asp Arg Ile Thr Leu Leu Arg 100 105 110 GGA AAT CAT GAG AGT AGA CAG ATA ACA CAG GTC TAT GGA TTT TAT GAT 444 Gly Asn His Glu Ser Arg Gln Ile Thr Gln Val Tyr Gly Phe Tyr Asp 115 120 125 GAG TGC CAA ACC AAA TAT GGA AAT GCT AAT GCC TGG AGA TAC TGT ACC 492 Glu Cys Gln Thr Lys Tyr Gly Asn Ala Asn Ala Trp Arg Tyr Cys Thr 130 135 140 AAA GTT TTT GAC ATG CTC ACA GTA GCA GCT TTA ATA GAT GAG CAG ATT 540 Lys Val Phe Asp Met Leu Thr Val Ala Ala Leu Ile Asp Glu Gln Ile 145 150 155 TTG TGT GTC CAT GGT GGT TTA TCT CCT GAT ATC AAA ACA CTG GAT CAA 588 Leu Cys Val His Gly Gly Leu Ser Pro Asp Ile Lys Thr Leu Asp Gln 160 165 170 175 ATT CGA ACC ATC GAA CGG AAT CAG GAA ATT CCT CAT AAA GGA GCA TTT 636 Ile Arg Thr Ile Glu Arg Asn Gln Glu Ile Pro His Lys Gly Ala Phe 180 185 190 TGT GAT CTG GTT TGG TCA GAT CCT GAA GAT GTG GAT ACC TGG GCT ATC 684 Cys Asp Leu Val Trp Ser Asp Pro Glu Asp Val Asp Thr Trp Ala Ile 195 200 205 AGT CCC CGA GGA GCA GGT TGG CTT TTT GGA GCA AAG GTC ACA AAT GAG 732 Ser Pro Arg Gly Ala Gly Trp Leu Phe Gly Ala Lys Val Thr Asn Glu 210 215 220 TTT GTT CAT ATC AAC AAC TTA AAA CTC ATC TGC AGA GCA CAT CAA CTA 780 Phe Val His Ile Asn Asn Leu Lys Leu Ile Cys Arg Ala His Gln Leu 225 230 235 GTG CAC GAA GGC TAT AAA TTT ATG TTT GAT GAG AAG CTG GTG ACA GTA 828 Val His Glu Gly Tyr Lys Phe Met Phe Asp Glu Lys Leu Val Thr Val 240 245 250 255 TGG TCT GCT CCT AAT TAC TGC TAT CGT TGT GGA AAT ATT GCT TCG ATC 876 Trp Ser Ala Pro Asn Tyr Cys Tyr Arg Cys Gly Asn Ile Ala Ser Ile 260 265 270 ATG GTC TTC AAA GAT GTA AAT ACA AGA GAA CCA AAG TTA TTC CGG GCA 924 Met Val Phe Lys Asp Val Asn Thr Arg Glu Pro Lys Leu Phe Arg Ala 275 280 285 GTT CCA GAT TCA GAA CGT GTT ATT CCT CCC AGA ACG ACA ACG CCA TAT 972 Val Pro Asp Ser Glu Arg Val Ile Pro Pro Arg Thr Thr Thr Pro Tyr 290 295 300 TTC CTT TGAGGCCTTC GCCCATCCTG CTGACCCATT TTTCTGCCCT CT 1020 Phe Leu 305 TCTTACCCCA ATTTTCTTGT ATTACCCTCT ACAATATACT TTTTATTGAG CACTTTGCTG 1080 CTGAAATGCT GCCTCTTGCC TTTTTTTTTT TAAATTTTAA ATTATCTAAA TTTATTGTTT 1140 GTTGTGGTGT CTATAGCAAA GTTTTTCTAT CAATTTTCCC CCATCCCATC CCCACCCTGG 1200 ACTCATTTGA GAAGACTTGA GAAATGTCTT AATACTCACA CTGCTGCATG TAGCTCTTGC 1260 TTATTTACTG GTCTGGGAAA CAGGATGTGT TTCCTTTTTT TAAAAGCCAA TTGACAGATT 1320 ACACCTAAAT ACTCCTCCTT TTGTATCATT CAGCCTTTTG TTTTAGTTTG GTAAGTTTTA 1380 AGAAATTTCA GCAGCAAAGT TGTTATTCAG TGGGCACGAT GGACTCCAAA TGCCTCAAGT 1440 TATGTATACC TGTCCCAGAT GTAAACTTCA TTGTCCTTTG TTGGATGATA TTTTAAATGG 1500 ATATAAAATA AATTGGTCTA AAGGGC 1526

【図面の簡単な説明】

【図１】 クローンＨＰ００５２７の構造を表す図であ
る。

【図２】 大腸菌用融合蛋白質発現ベクターｐＭＡＬＨ
Ｐ５２７の構造を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ａ６１Ｋ 38/46 ＡＤＵ Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ 9453−4Ｂ

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 配列番号１で表される塩基配列を含むｃ
   ＤＮＡ。
2. 【請求項２】 配列番号１で表されるアミノ酸配列を含
   む蛋白質。
3. 【請求項３】 請求項１記載のｃＤＮＡを有する発現ベ
   クター。