JPH0770125A

JPH0770125A - （６ｒ）−ｎ（１０）−ホルミル−５，６，７，８−テトラヒドロ葉酸のアルカリ土類金属塩の製造方法

Info

Publication number: JPH0770125A
Application number: JP4266234A
Authority: JP
Inventors: Attilio Melera; メレーラアッティリオ; Fabrizio Marazza; マラッツァファブリィジオ
Original assignee: Sapetsuku SA Fine Chem; Sapec Fine Chemicals SA
Current assignee: Sapetsuku SA Fine Chem; Sapec Fine Chemicals SA
Priority date: 1991-10-04
Filing date: 1992-10-05
Publication date: 1995-03-14
Also published as: CH684270A5; US5332815A; EP0535710A1

Abstract

(57)【要約】【構成】本発明は、水あるいは水性緩衝液に溶解した、
式ＩＩの（６ＲＳ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，
７，８−テトラヒドロ葉酸のアンモニウム塩あるいはア
ルカリ金属塩に、固形物の形状あるいは水溶液の形状と
したアルカリ土類金属の塩を、好ましくは不活性雰囲気
中で添加し、得られた混合物を晶出させ、そして得られ
た固形物を分離する式Ｉの（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホル
ミル−５，６，７，８−テトラヒドロ葉酸のアルカリ土
類金属塩の製造方法である。【効果】ジアステレオ異性体の混合物から、特定の異性
体を選択的に得ることができ、得られた化合物のジアス
テレオ異性体純度が高い。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【技術分野】本発明は、（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミ
ル−５，６，７，８−テトラヒドロ葉酸のアルカリ土類
金属塩を製造する方法に関するものである。

【０００２】

【発明の背景】均一な（６Ｓ）−あるいは（６Ｒ）−形
状を有する還元葉酸塩の製造方法は、フランス国特許出
願第９００３０３２号（公開番号第２６５９３３０）に
記載されている。この特許出願には、さらに別の従来技
術も記載されている。この特許出願に言及することをも
って、本明細書にこれらの記載内容を開示したものとみ
なすこととする。

【０００３】以下では、５，６，７，８−テトラヒドロ
葉酸の略称としてＴＨＦを使用する。Ｎ（５），Ｎ（１
０）−メテニル−ＴＨＦ・Ｃｌ^-が、中性あるいは塩基
性のｐＨ値の水性緩衝液中で加水分解すると、Ｎ（１
０）−ホルミル−ＴＨＦが生じることが知られている。
ロビンソン（D. R. Robinson）、酵素学の方法（Method
s in Enzymology ）、１９７１、第ＸＶＩＩＩ巻、第Ｂ
部、１８４；スミスら（G. K. Smith, P. A. Benkovic,
S. J. Benkovic ）、生化学（Biochem.）、１９８１、
２０、４０３４；ならびにラビノウィッツ（J. C. Rabi
nowitz）、酵素学の方法（Methods in Enzymology ）、
１９６３、６、８１４を参照されたい。

【０００４】Ｎ（１０）−ホルミル−ＴＨＦを、熱によ
ってＮ（５）−ホルミル−ＴＨＦに転化しうることも知
られている。上掲のロビンソン（D. R. Robinson）の論
文を参照されたい。Ｎ（５），Ｎ（１０）−メテニル−
ＴＨＦ・Ｃｌ^-の純粋なジアステレオ異性体を加水分解
すると、これと対応したＮ（１０）−ホルミル−ＴＨＦ
の純粋なジアステレオ異性体が得られる。上掲のスミス
（G. K. Smith ）らの論文を参照されたい。

【０００５】驚くべきことに、今回、ジアステレオ異性
体の混合物である（６ＲＳ）−Ｎ（１０）−ホルミル−
ＴＨＦのアンモニウム塩あるいはアルカリ金属塩を水あ
るいは水性緩衝液に溶解したものに、アルカリ土類金属
の塩を加えると、（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミル−Ｔ
ＨＦのアルカリ土類金属塩が選択的に晶出することを見
いだした。

【０００６】

【発明の開示】本発明は、特に、（６Ｒ）−Ｎ（１０）
−ホルミル−５，６，７，８−テトラヒドロ葉酸のアル
カリ土類金属塩を製造する方法に関するものである。本
発明の、式Ｉ：

【化４】で、式中のＹがアルカリ土類金属の陽イオン、特にＣａ
²⁺である（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，
７，８−テトラヒドロ葉酸のアルカリ土類金属塩の製造
方法は、水あるいは水性緩衝液に溶解した、式ＩＩ：

【化５】で、式中のＸがアルカリ金属陽イオンあるいはＮＨ₄ ⁺
である（６ＲＳ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，
７，８−テトラヒドロ葉酸のアンモニウム塩あるいはア
ルカリ金属塩に、固形物の形状あるいは水溶液の形状と
したアルカリ土類金属の塩を、好ましくは不活性雰囲気
中で添加し、得られた混合物を晶出させ、そして得られ
た式Ｉの固形物を分離することを特徴とするものであ
る。

【０００７】ここで、使用する水が、脱イオン水および
／または脱ガス水であり、使用する緩衝液が、アルカリ
土類金属塩で析出を生じることがなく、好ましくは、ト
リス−ヒドロキシメチル−アミノ−メタン−ヒドロクロ
リドであるのが好ましい。

【０００８】また、アルカリ土類金属塩の添加は、２０
℃〜６０℃、好ましくは約３０℃付近で行い、晶出を、
２０℃〜４０℃、好ましくは約３０℃付近で行うのが好
ましい。

【０００９】アルカリ土類金属塩が、アルカリ土類金属
のハロゲン化物、好ましくはハロゲン化カルシウム、特
に塩化カルシウム、またはアルカリ土類金属の酢酸塩で
あるのが良い。

【００１０】さらに、本発明は、式ＩＩＩ：

【化６】の（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，７，８−
テトラヒドロ葉酸を製造するにあたっての、式Ｉの化合
物の、出発物質としての使用および（６Ｒ）−Ｎ
（５），Ｎ（１０）−メテニル−ＴＨＦ、（６Ｓ）−Ｎ
（５）−メチル−ＴＨＦ、または（６Ｓ）−Ｎ（５）−
ホルミル−ＴＨＦを製造するにあたっての、式Ｉまたは
ＩＩＩの化合物の出発物質としての使用である。

【００１１】

【好適実施態様の説明】本発明の方法は、水あるいは水
性緩衝液に溶解した式ＩＩで示される（６ＲＳ）−Ｎ
（１０）−ホルミル−５，６，７，８−テトラヒドロ葉
酸のアンモニウム塩あるいはアルカリ金属塩に、アルカ
リ土類の金属の塩を、好ましくは不活性雰囲気中で添加
し、得られた混合物を晶出させて、式Ｉの化合物を分離
する（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，７，８
−テトラヒドロ葉酸のアルカリ土類金属塩の製造方法で
ある。

【化７】ただしＸは、アルカリ金属イオンあるいはＮＨ₄ ⁺であ
る。

【化８】ただしＹは、アルカリ土類金属の陽イオン、特にＣａ²⁺
である。式ＩＩの化合物を溶解する水は、脱イオンおよ
び／または脱ガス水が好ましく、使用する水性緩衝液
は、アルカリ土類金属塩と反応して析出物を生じないも
ので、好ましくは、トリス−ヒドロキシメチル−アミノ
−メタン−ヒドロクロリドである。添加されるアルカリ
土類金属塩は、アルカリ土類金属のハロゲン化物、好ま
しくはハロゲン化カルシウム、特に塩化カルシウム、ま
たはアルカリ土類金属の酢酸塩が例示される。

【００１２】アルカリ土類金属塩の添加は、好ましくは
不活性雰囲気中で添加し、２０℃〜６０℃、好ましくは
約３０℃付近で行う。式Ｉの化合物の晶出は、２０℃〜
４０℃、好ましくは約３０℃付近で行う。

【００１３】本発明の好適実施態様は、従属クレームに
定義してある。

【００１４】本発明の方法によれば、ジアステレオ異性
体の混合物から、特定のジアステレオ異性体を選択的に
得ることができる。

【００１５】ジアステレオ異性体純度を測定するため
に、本発明の方法にしたがって製造した（６Ｒ）−Ｎ
（１０）−ホルミル−ＴＨＦ・Ｃａ²⁺を、フランス国特
許出願第９００３０３２号（公開番号第２６５９３３
０）に記載された方法にしたがって、（６Ｓ）−Ｎ
（５）−メチル−ＴＨＦに転化した。キラルＨＰＬＣカ
ラム（レゾルボシル（ＲＥＳＯＬＶＯＳＩＬ）カラム）
で分析したところ、この化合物のジアステレオ異性体純
度は８０−９０％であった。

【００１６】本発明にしたがって製造したジアステレオ
異性体として純粋な化合物は、上掲のロビンソン（D.
R. Robinson）の論文にしたがって、（６Ｓ）−Ｎ
（５）−ホルミル−ＴＨＦに転化することができる。

【００１７】本発明で製造したジアステレオ異性体とし
て純粋な化合物は、公知の方法にしたがって、酸性条件
下で、（６Ｒ）−Ｎ（５），Ｎ（１０）−メテニル−Ｔ
ＨＦに転化することもできる。上掲のラビノウィッツ
（J. C. Rabinowitz）の論文を参照されたい。

【００１８】（６Ｒ）−Ｎ（５），Ｎ（１０）−メテニ
ル−ＴＨＦは、公知の方法にしたがって、（６Ｓ）−Ｎ
（５）−メチル−ＴＨＦに還元することもできる。ホワ
イトら（White, B ailey, Goldman）、生物化学雑誌
（J. Biol. Chem.）、１９７８、２５３、２４２を参照
されたい。

【００１９】本発明の方法で得られるジアステレオ異性
体のアルカリ土類金属塩は、上述のように、医薬用に用
いられる種々の混合物を製造する原料として用いること
ができる。

【００２０】

【実施例】以下の実施例は、本発明を例示するものであ
り、本発明はこれらに限定されるものではない。

【００２１】（実施例１）塩酸でｐＨの値を８．３に調
整した２００mlのトリス−ヒドロキシメチル−アミノ−
メタン−ヒドロクロリドの０．２Ｎ水溶液に、１５ｇの
（６ＲＳ）−Ｎ（５），Ｎ（１０）−メテニル−ＴＨＦ
・Ｃｌ^-および十分な量のＮａＯＨの２０％水溶液を、
同時に、少量ずつ、室温でかきまぜながら、アルゴン雰
囲気中で加えて、ｐＨの値が８．３の透明な溶液を得
た。この溶液を３０℃の温度まで暖め、３．７ｇのＣａ
Ｃｌ₂・２Ｈ₂Ｏを少量（約１０ml）の水に溶解して、
上記溶液に加えた。

【００２２】２、３分で晶出が自発的に生じた。混合物
を同じ温度で２時間にわたってかきまぜた。結晶状の固
形分を濾別し、水で１回、９４％エタノールで１回、そ
してアセトンで１回洗浄し、減圧下で６０℃の温度にて
乾燥した。

【００２３】５．５ｇの（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミ
ル−ＴＨＦ・Ｃａ²⁺の白色の結晶が得られた。

【００２４】逆相カラムを用いたＨＰＬＣで分析したと
ころ、９８％の化学純度を示した。高速原子衝撃質量分析法（マトリックス、チオグリセリ
ン）：ｍ⁺が５１２で、これは推定式Ｃ₂₀Ｈ₂₁Ｎ₇Ｏ
₇Ｃａに対応する。

【００２５】ＩＲ（ＫＢｒ）：３４０７、３３４５、
３２２０、１６６０、１６３５、１６０５、１５７５、
１５４５、１５０５、１４５５、１４２５、１４１０、
１３６０、１３３０ｃｍ^-1。

【００２６】ジアステレオ異性体純度を測定するため
に、１５ｍｇの上述の結晶を１．５mlのｐ−トルエンス
ルホン酸の１．８％溶液に溶解した。次に、６ｍｇのＮ
ａＢＨ ₃ＣＮを加え、混合物を室温で３０分間にわたっ
てかきまぜた。（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミル−ＴＨ
Ｆが、完全に（６Ｓ）−Ｎ（５）−メチル−ＴＨＦに転
化した。後者の化合物を、キラルＨＰＬＣカラム（レゾ
ルボシル（ＲＥＳＯＬＶＯＳＩＬ））で分析したとこ
ろ、ジアステレオ異性体純度は８５％であった。

【００２７】

【発明の効果】本発明方法によれば、簡易な反応で異性
体混合物から特定の異性体を高純度で得ることができ
る。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式Ｉ：【化１】で、式中のＹがアルカリ土類金属の陽イオン、特にＣａ
²⁺である（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，
７，８−テトラヒドロ葉酸のアルカリ土類金属塩を製造
するにあたり、水あるいは水性緩衝液に溶解した、式ＩＩ：【化２】で、式中のＸがアルカリ金属陽イオンあるいはＮＨ₄ ⁺
である（６ＲＳ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，
７，８−テトラヒドロ葉酸のアンモニウム塩あるいはア
ルカリ金属塩に、固形物の形状あるいは水溶液の形状と
したアルカリ土類金属の塩を、好ましくは不活性雰囲気
中で添加し、得られた混合物を晶出させ、そして得られた式Ｉの固形
物を分離することを特徴とする式Ｉの（６Ｒ）−Ｎ（１
０）−ホルミル−５，６，７，８−テトラヒドロ葉酸の
アルカリ土類金属塩の製造方法。
【請求項２】前記水が、脱イオン水および／または脱ガ
ス水である請求項１記載の方法。
【請求項３】前記緩衝液が、アルカリ土類金属塩で析出
を生じることがなく、好ましくは、トリス−ヒドロキシ
メチル−アミノ−メタン−ヒドロクロリドである請求項
１または２記載の方法。
【請求項４】前記アルカリ土類金属塩の添加を、２０℃
〜６０℃、好ましくは約３０℃付近で行う請求項１ない
し３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】前記晶出を、２０℃〜４０℃、好ましくは
約３０℃付近で行う請求項１ないし４のいずれかに記載
の方法。
【請求項６】前記アルカリ土類金属塩が、アルカリ土類
金属のハロゲン化物、好ましくはハロゲン化カルシウ
ム、特に塩化カルシウム、またはアルカリ土類金属の酢
酸塩である請求項１ないし５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】式ＩＩＩ：【化３】の（６Ｒ）−Ｎ（１０）−ホルミル−５，６，７，８−
テトラヒドロ葉酸を製造するにあたっての、請求項１記
載の式Ｉの化合物の、出発物質としての使用。
【請求項８】（６Ｒ）−Ｎ（５），Ｎ（１０）−メテニ
ル−ＴＨＦ、（６Ｓ）−Ｎ（５）−メチル−ＴＨＦ、ま
たは（６Ｓ）−Ｎ（５）−ホルミル−ＴＨＦを製造する
にあたっての、請求項１記載の式ＩまたはＩＩＩの化合
物の出発物質としての使用。