JPH0767634A - 不活化病原体の鶏用経口ワクチン - Google Patents
不活化病原体の鶏用経口ワクチンInfo
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- JPH0767634A JPH0767634A JP21433893A JP21433893A JPH0767634A JP H0767634 A JPH0767634 A JP H0767634A JP 21433893 A JP21433893 A JP 21433893A JP 21433893 A JP21433893 A JP 21433893A JP H0767634 A JPH0767634 A JP H0767634A
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- Japan
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- chicken
- virus
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 不活化病原体を用いて、鶏の感染症の予防に
有効な免疫誘導を与えることができる経口ワクチンを提
供する。 【構成】 ホルマリンにより不活化した鶏伝染性ファブ
リキウス嚢病ウイルスを主成分として経口ワクチンを製
造する。
有効な免疫誘導を与えることができる経口ワクチンを提
供する。 【構成】 ホルマリンにより不活化した鶏伝染性ファブ
リキウス嚢病ウイルスを主成分として経口ワクチンを製
造する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、不活化病原体を用い
て、鶏の感染症の予防に有効な免疫誘導を与えることが
できる経口ワクチンに関するものである。
て、鶏の感染症の予防に有効な免疫誘導を与えることが
できる経口ワクチンに関するものである。
【０００２】
【発明の背景及び従来の技術】鶏の感染症は、生又は不
活化された病原体のワクチンにより予防されている。そ
の投与方法は、生ワクチンでは種々の方法が採用されて
いるが、不活化ワクチンでは通常、注射による方法が採
用されていて、経口投与による方法は用いられていな
い。また鶏の感染症に対する経口ワクチンは、具体的な
鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス、ニューカッスル
病ウイルス、ヘモフィルスパラガリナラムＡ型について
は勿論のこと、一般的にも未だ全く提供されていない。
活化された病原体のワクチンにより予防されている。そ
の投与方法は、生ワクチンでは種々の方法が採用されて
いるが、不活化ワクチンでは通常、注射による方法が採
用されていて、経口投与による方法は用いられていな
い。また鶏の感染症に対する経口ワクチンは、具体的な
鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス、ニューカッスル
病ウイルス、ヘモフィルスパラガリナラムＡ型について
は勿論のこと、一般的にも未だ全く提供されていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかし、不活化ワクチ
ンを用いた注射による投与は、１個体ずつ行わなければ
ならないため非常に手間がかかるという問題がある他、
また針を刺すという行為から鶏にストレスを与えること
になり、経済的な負担が大きいという問題がある。
ンを用いた注射による投与は、１個体ずつ行わなければ
ならないため非常に手間がかかるという問題がある他、
また針を刺すという行為から鶏にストレスを与えること
になり、経済的な負担が大きいという問題がある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明者は以上のよう
な従来技術の状況において、経口的な投与よって、鶏の
感染症に対する有効な免疫を誘導することができる不活
化経口ワクチンを提供することを目的としてなされたも
のである。
な従来技術の状況において、経口的な投与よって、鶏の
感染症に対する有効な免疫を誘導することができる不活
化経口ワクチンを提供することを目的としてなされたも
のである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記目的を実現した本発
明よりなる経口ワクチンの特徴の一つは、ホルマリンに
より不活化した鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルスを
主成分とするところにある。
明よりなる経口ワクチンの特徴の一つは、ホルマリンに
より不活化した鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルスを
主成分とするところにある。
【０００６】また本発明の経口ワクチンの他の特徴は、
ホルマリン又はβ−プロピオラクトンにより不活化した
ニューカッスル病ウイルスを主成分とするところにあ
る。
ホルマリン又はβ−プロピオラクトンにより不活化した
ニューカッスル病ウイルスを主成分とするところにあ
る。
【０００７】更に又本発明の経口ワクチンの特徴は、チ
メロサールにより不活化したヘモフィルスパラガリナラ
ムＡ型を主成分とするところにある。不活化剤としては
上記チメロサールに代えてホルマリン、β−プロピオラ
クトン、マーゾニンを用いることもできる。
メロサールにより不活化したヘモフィルスパラガリナラ
ムＡ型を主成分とするところにある。不活化剤としては
上記チメロサールに代えてホルマリン、β−プロピオラ
クトン、マーゾニンを用いることもできる。
【０００８】不活化病原体を経口的に投与するところに
ある。
ある。
【０００９】本発明の別の特徴は、上記した各経口ワク
チンの主成分である不活化病原体を、１５ｍｇ／ｍｌ〜
６０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは３０ｍｇ／ｍｌ程度の重曹
が添加された燐酸緩衝液に浮遊させて、免疫の効率を向
上させた経口ワクチンを提供するところにある。
チンの主成分である不活化病原体を、１５ｍｇ／ｍｌ〜
６０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは３０ｍｇ／ｍｌ程度の重曹
が添加された燐酸緩衝液に浮遊させて、免疫の効率を向
上させた経口ワクチンを提供するところにある。
【００１０】
【実施例】以下本発明の実施例に基づいて説明するが、
本発明がこの実施例に限定されないことは言うまでもな
い。
本発明がこの実施例に限定されないことは言うまでもな
い。
【００１１】実施例１濃縮後不活化鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス（Ｉ
ＢＤＶ）ＩＱ株経口ワクチンの製造 ニワトリ胚繊維芽細胞にＩＢＤＶ、ＩＱ株（下記参照）
を接種して細胞変性の極期に培養上清を集めた。このウ
イルス液１０ＬをコントロンＴＳＴ２８．３８ローター
にて１７０００ｒｐｍ，９０分遠心し、その沈澱を燐酸
緩衝食塩液（ＰＢＳ、ｐＨ７．２）５０ｍｌに浮遊させ
た。次ぎに０．２％になるようにホルマリンを加え、３
７℃で４８時間不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵
庫に保存した。 （ＩＢＤＶ、ＩＱ株；細胞順化株） 日生研ＩＢＤ不活化ワクチン（商品名；日生研株式会社
製）に使用されている株 実施例２不活化ＩＢＤＶ、ＩＱ株経口ワクチンの製造 ニワトリ胚繊維芽細胞にＩＢＤＶ、ＩＱ株を接種して細
胞変性の極期に培養上清を集めた。このウイルス液にホ
ルマリンを０．２％になるように加え、３８℃で４８時
間不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵庫に保存し
た。
ＢＤＶ）ＩＱ株経口ワクチンの製造 ニワトリ胚繊維芽細胞にＩＢＤＶ、ＩＱ株（下記参照）
を接種して細胞変性の極期に培養上清を集めた。このウ
イルス液１０ＬをコントロンＴＳＴ２８．３８ローター
にて１７０００ｒｐｍ，９０分遠心し、その沈澱を燐酸
緩衝食塩液（ＰＢＳ、ｐＨ７．２）５０ｍｌに浮遊させ
た。次ぎに０．２％になるようにホルマリンを加え、３
７℃で４８時間不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵
庫に保存した。 （ＩＢＤＶ、ＩＱ株；細胞順化株） 日生研ＩＢＤ不活化ワクチン（商品名；日生研株式会社
製）に使用されている株 実施例２不活化ＩＢＤＶ、ＩＱ株経口ワクチンの製造 ニワトリ胚繊維芽細胞にＩＢＤＶ、ＩＱ株を接種して細
胞変性の極期に培養上清を集めた。このウイルス液にホ
ルマリンを０．２％になるように加え、３８℃で４８時
間不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵庫に保存し
た。
【００１２】実施例３不活化ＩＢＤＶ、９１−６株経口ワクチンの製造 ５週齢のＳＰＦラインＭニワトリに９１−６株ＩＢＤＶ
（下記参照）を経口的に接種し、感染ニワトリのファブ
リキウス嚢を取り出し、細切した後、等量のＰＢＳ（前
出）を加えてホモジナイズし、遠心にて組織の破片等を
除いた上清に０．２％になるようにホルマリンを加え、
３７℃で４８時間不活化し、その後、使用まで４℃の冷
蔵庫に保存した。 （９１−６株；高度病原性株） ［Z.Lin ，A.Kato，Y.Otaki ，T.Nakamura，E.Sasmaz，
and S.Ueda． Sequencecomparisons of a highly virul
ent infectious bursal disease virusprevalent in Ja
pan. Avian Diseases. 37:315-323，1993. T.Nakamura，A.Kato，Z.Lin ，T.Nunoya，Y.Otaki ，an
d S.Ueda． A rapidquantitative method for detecti
ng infectious bursal disease virus usingpolystyren
e latex microsepheres. J.Virol. Mehods，43:123-13
0,1993 ］ 実施例４不活化ニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）経口ワクチ
ンの製造 発育鶏卵に佐藤株ＮＤＶ（下記参照）を接種し、感染し
た胎児を取り出して、細切し、４倍量のＰＢＳ（前出）
加えてホモジナイズし、濾紙にて組織の破片等を除去し
た液に、０．３％になるようにホルマリンを加え、３７
℃で４８時間不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵庫
に保存した。 （佐藤株ＮＤＶ；強毒株） ［ネオ日生研ニューカスル不活化ワクチン（商品名；日
生研株式会社製）に使用されている株］ 実施例５不活化後濃縮ＮＤＶ経口ワクチンの製造 実施例４の不活化ウイルス５Ｌ液をベックマンタイプ１
９ローターで１８５００ｒｐｍ，１５０分遠心し、その
沈澱を５０ｍｌのＰＢＳ（前出）で浮遊し、その後、使
用まで４℃の冷蔵庫に保存した。
（下記参照）を経口的に接種し、感染ニワトリのファブ
リキウス嚢を取り出し、細切した後、等量のＰＢＳ（前
出）を加えてホモジナイズし、遠心にて組織の破片等を
除いた上清に０．２％になるようにホルマリンを加え、
３７℃で４８時間不活化し、その後、使用まで４℃の冷
蔵庫に保存した。 （９１−６株；高度病原性株） ［Z.Lin ，A.Kato，Y.Otaki ，T.Nakamura，E.Sasmaz，
and S.Ueda． Sequencecomparisons of a highly virul
ent infectious bursal disease virusprevalent in Ja
pan. Avian Diseases. 37:315-323，1993. T.Nakamura，A.Kato，Z.Lin ，T.Nunoya，Y.Otaki ，an
d S.Ueda． A rapidquantitative method for detecti
ng infectious bursal disease virus usingpolystyren
e latex microsepheres. J.Virol. Mehods，43:123-13
0,1993 ］ 実施例４不活化ニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）経口ワクチ
ンの製造 発育鶏卵に佐藤株ＮＤＶ（下記参照）を接種し、感染し
た胎児を取り出して、細切し、４倍量のＰＢＳ（前出）
加えてホモジナイズし、濾紙にて組織の破片等を除去し
た液に、０．３％になるようにホルマリンを加え、３７
℃で４８時間不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵庫
に保存した。 （佐藤株ＮＤＶ；強毒株） ［ネオ日生研ニューカスル不活化ワクチン（商品名；日
生研株式会社製）に使用されている株］ 実施例５不活化後濃縮ＮＤＶ経口ワクチンの製造 実施例４の不活化ウイルス５Ｌ液をベックマンタイプ１
９ローターで１８５００ｒｐｍ，１５０分遠心し、その
沈澱を５０ｍｌのＰＢＳ（前出）で浮遊し、その後、使
用まで４℃の冷蔵庫に保存した。
【００１３】実施例６不活化鶏伝染性コリーザ（ＩＣ、Haemophilus paragall
inarum）Ａ型経口ワクチンの製造 ヘモフィルスパラガリナラム（Haemophilus paragallin
arum） Ａ型の２２１株（下記参照）を倍地にて３７
℃，２０時間培養した後、８０００ｒｐｍで３０分遠心
し，その沈澱を、菌数が２．５×１０10になるようにＰ
ＢＳ（前出）に浮遊し、０．０１％になるようにチメロ
サールを加えて不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵
庫に保存した。 （２２１株） ［日生研コリーザワクチン（商品名；日生研株式会社
製）に使用されている株 Otauki，K. and Y.Iritani. Preparation and immunolo
gical response to anew mixed vaccine composed of i
nactivated Newcastle disease virus ，inactivated i
nfectious bronchitis virus ，and inactivated Haemo
philusgallinarum. Avian Diseases. 18:297-304，197
4］ 以上のようにして製造した各経口ワクチンについて、以
下の試験を行なった。なお、実験例１〜３については不
活化後ラテックス凝集価を下記方法に準拠して測定す
ると共に、ＩＢＤＶに対する抗体価を下記方法に準拠
して測定した。 ＩＢＤＶのラテックス凝集反応による抗原量の測定
法 ［T.Nakamura，A.Kato，Z.Lin ，T.Nunoya，Y.Otaki, a
nd S.Ueda A rapidquantitative method for detecti
ng infectious bursal disease virus usingpolystyren
e latex microsepheres. J.Virol. Mehods，43:123-13
0,1993 ］ ＩＢＤＶのラテックス凝集阻害反応による抗体価の
測定法 ［T.Nakamura，Y.Otaki ，Z.Lin, and A.Kato. Rapid a
nd quantitative assaysystem for measuring anti-inf
ectious bursal disease virus antibody usingmonoclo
nal antibody bound polystylene latex microspheres.
Avian Diseases ,37:1993 ］ 試験例１：不活化濃縮ＩＢＤＶ経口ワクチンの抗体誘導
能及び感染防御試験 濃縮不活化前ウイルス価が１０7.8 ＰＦＵ／ｍｌ（不活
化後のラテックス凝集価が３２／０．０ｌｍｌ）の実施
例１のウイルス液の原液０．３ｍｌを重曹（ＮａＨＣＯ
3 ）を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだ燐酸緩衝生理食塩液
（ＰＢＳ、重曹添加前ｐＨ７．２、添加後ｐＨ８．２、
以下同じ）で希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ラ
インＭ、３週齢）に１週間隔で３回経口的に投与した。
同様のウイルス原液０．３ｍｌを等量の完全フロインド
アジュバントと混合乳化し、１週間隔で３回筋肉内に注
射した。最終免疫２週後に採血し、血清の抗体価をラテ
ックス凝集阻害反応で測定した。採血直後にＩＢＤＶ、
Ｉ株（下記参照）（１０3.8ＥＩＤ50）を経口投与攻撃
してファブリキウス嚢の病変を組織学的に調ベた。結果
を表１に示す。
inarum）Ａ型経口ワクチンの製造 ヘモフィルスパラガリナラム（Haemophilus paragallin
arum） Ａ型の２２１株（下記参照）を倍地にて３７
℃，２０時間培養した後、８０００ｒｐｍで３０分遠心
し，その沈澱を、菌数が２．５×１０10になるようにＰ
ＢＳ（前出）に浮遊し、０．０１％になるようにチメロ
サールを加えて不活化し、その後、使用まで４℃の冷蔵
庫に保存した。 （２２１株） ［日生研コリーザワクチン（商品名；日生研株式会社
製）に使用されている株 Otauki，K. and Y.Iritani. Preparation and immunolo
gical response to anew mixed vaccine composed of i
nactivated Newcastle disease virus ，inactivated i
nfectious bronchitis virus ，and inactivated Haemo
philusgallinarum. Avian Diseases. 18:297-304，197
4］ 以上のようにして製造した各経口ワクチンについて、以
下の試験を行なった。なお、実験例１〜３については不
活化後ラテックス凝集価を下記方法に準拠して測定す
ると共に、ＩＢＤＶに対する抗体価を下記方法に準拠
して測定した。 ＩＢＤＶのラテックス凝集反応による抗原量の測定
法 ［T.Nakamura，A.Kato，Z.Lin ，T.Nunoya，Y.Otaki, a
nd S.Ueda A rapidquantitative method for detecti
ng infectious bursal disease virus usingpolystyren
e latex microsepheres. J.Virol. Mehods，43:123-13
0,1993 ］ ＩＢＤＶのラテックス凝集阻害反応による抗体価の
測定法 ［T.Nakamura，Y.Otaki ，Z.Lin, and A.Kato. Rapid a
nd quantitative assaysystem for measuring anti-inf
ectious bursal disease virus antibody usingmonoclo
nal antibody bound polystylene latex microspheres.
Avian Diseases ,37:1993 ］ 試験例１：不活化濃縮ＩＢＤＶ経口ワクチンの抗体誘導
能及び感染防御試験 濃縮不活化前ウイルス価が１０7.8 ＰＦＵ／ｍｌ（不活
化後のラテックス凝集価が３２／０．０ｌｍｌ）の実施
例１のウイルス液の原液０．３ｍｌを重曹（ＮａＨＣＯ
3 ）を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだ燐酸緩衝生理食塩液
（ＰＢＳ、重曹添加前ｐＨ７．２、添加後ｐＨ８．２、
以下同じ）で希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ラ
インＭ、３週齢）に１週間隔で３回経口的に投与した。
同様のウイルス原液０．３ｍｌを等量の完全フロインド
アジュバントと混合乳化し、１週間隔で３回筋肉内に注
射した。最終免疫２週後に採血し、血清の抗体価をラテ
ックス凝集阻害反応で測定した。採血直後にＩＢＤＶ、
Ｉ株（下記参照）（１０3.8ＥＩＤ50）を経口投与攻撃
してファブリキウス嚢の病変を組織学的に調ベた。結果
を表１に示す。
【００１４】
【表１】
【００１５】表１によれば、本発明の不活化ワクチンを
経口投与された全てのニワトリで明かな抗体産生が認め
られ、かつ感染防御（ファブリキウス嚢の組織病変が観
察されない）することがわかった。 （Ｉ株；病原性株） ［T.Nunoya，Y.Otaki ，M.Tajima，M.Hiraga，and T.Sa
ito. Occurrence ofacute infectious bursal diseas
e with high mortality in Japan andpathogenicity of
field isolates in specific-pathogen-free chicken
s.Avian Diseaes ，36:597-609，1992。 Z.Lin ，A.Kato，Y.Otaki ，T.Nakamura，E.Sasmaz，an
d S.Ueda． Sequencecomparisons of a highly virulen
t infectious bursal disease virusprevalent in Japa
n. Avian Diseases. 37:315-323，1993］ 試験例２：不活化ＩＢＤＶ経口ワクチンの投与回数及び
重曹の効果の検討 不活化前ウイルス価が約１０7.3 ＥＩＤ50／ｍｌ（不活
化後のラテックス凝集価が６４／０．０ｌｍｌ）の実施
例３のウイルス液の原液０．２５ｍｌを重曹（ＮａＨＣ
０3 ）を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだ燐酸緩衝生理食塩液
（ＰＢＳ、ｐＨ７．２）で希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦ
ニワトリ（ラインＭ、３週齢）に１〜３回経口的に投与
した。３回の場合は１週間隔で、２回の場合は１週間隔
（０及びｌ週目：Ａ）と２週間隔（０及び２週目：Ｂ）
でワクチンを投与した。陽性対照として市販の不活化ワ
クチンを１回筋肉内に注射した。初回免疫４週後に採血
し、血清の抗体価をラテックス凝集阻害反応で測定し
た。採血直後にＩＢＤＶ、９０−１１株（下記参照）
（１０4.5 ＥＩＤ50）を経口投与攻撃して生死及びファ
ブリキウス嚢の病変を組織学的に調べた。結果を表２に
示す。
経口投与された全てのニワトリで明かな抗体産生が認め
られ、かつ感染防御（ファブリキウス嚢の組織病変が観
察されない）することがわかった。 （Ｉ株；病原性株） ［T.Nunoya，Y.Otaki ，M.Tajima，M.Hiraga，and T.Sa
ito. Occurrence ofacute infectious bursal diseas
e with high mortality in Japan andpathogenicity of
field isolates in specific-pathogen-free chicken
s.Avian Diseaes ，36:597-609，1992。 Z.Lin ，A.Kato，Y.Otaki ，T.Nakamura，E.Sasmaz，an
d S.Ueda． Sequencecomparisons of a highly virulen
t infectious bursal disease virusprevalent in Japa
n. Avian Diseases. 37:315-323，1993］ 試験例２：不活化ＩＢＤＶ経口ワクチンの投与回数及び
重曹の効果の検討 不活化前ウイルス価が約１０7.3 ＥＩＤ50／ｍｌ（不活
化後のラテックス凝集価が６４／０．０ｌｍｌ）の実施
例３のウイルス液の原液０．２５ｍｌを重曹（ＮａＨＣ
０3 ）を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだ燐酸緩衝生理食塩液
（ＰＢＳ、ｐＨ７．２）で希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦ
ニワトリ（ラインＭ、３週齢）に１〜３回経口的に投与
した。３回の場合は１週間隔で、２回の場合は１週間隔
（０及びｌ週目：Ａ）と２週間隔（０及び２週目：Ｂ）
でワクチンを投与した。陽性対照として市販の不活化ワ
クチンを１回筋肉内に注射した。初回免疫４週後に採血
し、血清の抗体価をラテックス凝集阻害反応で測定し
た。採血直後にＩＢＤＶ、９０−１１株（下記参照）
（１０4.5 ＥＩＤ50）を経口投与攻撃して生死及びファ
ブリキウス嚢の病変を組織学的に調べた。結果を表２に
示す。
【００１６】
【表２】
【００１７】表２によれば、本発明の不活化ワクチンを
２回以上経口投与された全てのニワトリで明かな抗体産
生が認められ、かつ感染防御（ファブリキウス嚢の組織
病変が観察されない）することがわかった。また市販ワ
クチンと同等以上の抗体価が誘導されることが明かとな
った。１回経口投与群でも５羽中４羽で抗体が上昇し、
かつ感染防御した。重曹非添加のワクチン投与でも強い
抵抗生が認められたが、抗体価は添加ワクチンより低か
った。即ち重曹の効果が認められた。投与回数では１週
間隔３回投与群と２週間隔２回投与群の抗体価がほぼ同
等であった。 （９０−１１株；高度病原性株） ［T.Nunoya，Y.Otaki ，M.Tajima，M.Hiraga，and T.Sa
ito. Occurrence ofacute infectious bursal disease
with high mortality in Japan andpathogenicity of f
ield isolates in specific-pathogen-free chickens.A
vian Diseaes ，36:597-609，1992。 T.Nakamura，Y.Otaki ，and T.Nunoya. Immunosuppre
ssive effct of ahighly virulent infectious bursal
disease virus isolated in Japan.Avian Diseases. 3
6:891-896，1992］ 試験例３：不活化ＩＢＤＶ経口ワクチンの抗原量の検討 不活化前ウイルス価が約１０7.3 ＥＩＤ50／ｍｌ（不活
化後のラテックス凝集価が６４／０．０ｌｍｌ）の実施
例３のウイルス液の原液をそれぞれ０．２５ｍｌ、１／
４×０．２５ｍｌ、１／１６×０．２５ｍｌおよび１／
６４×０．２５ｍｌを重曹を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだ
ＰＢＳで希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ライン
Ｍ、３週齢）に２週間隔で２回投与した。また不活化前
ウイルス価が１０7.1 ＰＦＵ／ｍｌの実施例２のウイル
ス液の原液１ｍｌを重曹を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだＰ
ＢＳで希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ライン
Ｍ、３週齢）に２週間隔で２回投与した。陽性対照とし
て市販の不活化ワクチンを２回筋肉内に注射した。初回
免疫４週後に採血し、血清の抗体価をラテックス凝集阻
害反応で測定した。採血直後にＩＢＤＶ、９０−１１株
（１０4.5 ＥＩＤ50）を経口投与攻撃して生死及びファ
ブリキウス嚢の病変を組織学的に調べた。結果を第３表
に示す。
２回以上経口投与された全てのニワトリで明かな抗体産
生が認められ、かつ感染防御（ファブリキウス嚢の組織
病変が観察されない）することがわかった。また市販ワ
クチンと同等以上の抗体価が誘導されることが明かとな
った。１回経口投与群でも５羽中４羽で抗体が上昇し、
かつ感染防御した。重曹非添加のワクチン投与でも強い
抵抗生が認められたが、抗体価は添加ワクチンより低か
った。即ち重曹の効果が認められた。投与回数では１週
間隔３回投与群と２週間隔２回投与群の抗体価がほぼ同
等であった。 （９０−１１株；高度病原性株） ［T.Nunoya，Y.Otaki ，M.Tajima，M.Hiraga，and T.Sa
ito. Occurrence ofacute infectious bursal disease
with high mortality in Japan andpathogenicity of f
ield isolates in specific-pathogen-free chickens.A
vian Diseaes ，36:597-609，1992。 T.Nakamura，Y.Otaki ，and T.Nunoya. Immunosuppre
ssive effct of ahighly virulent infectious bursal
disease virus isolated in Japan.Avian Diseases. 3
6:891-896，1992］ 試験例３：不活化ＩＢＤＶ経口ワクチンの抗原量の検討 不活化前ウイルス価が約１０7.3 ＥＩＤ50／ｍｌ（不活
化後のラテックス凝集価が６４／０．０ｌｍｌ）の実施
例３のウイルス液の原液をそれぞれ０．２５ｍｌ、１／
４×０．２５ｍｌ、１／１６×０．２５ｍｌおよび１／
６４×０．２５ｍｌを重曹を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだ
ＰＢＳで希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ライン
Ｍ、３週齢）に２週間隔で２回投与した。また不活化前
ウイルス価が１０7.1 ＰＦＵ／ｍｌの実施例２のウイル
ス液の原液１ｍｌを重曹を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだＰ
ＢＳで希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ライン
Ｍ、３週齢）に２週間隔で２回投与した。陽性対照とし
て市販の不活化ワクチンを２回筋肉内に注射した。初回
免疫４週後に採血し、血清の抗体価をラテックス凝集阻
害反応で測定した。採血直後にＩＢＤＶ、９０−１１株
（１０4.5 ＥＩＤ50）を経口投与攻撃して生死及びファ
ブリキウス嚢の病変を組織学的に調べた。結果を第３表
に示す。
【００１８】
【表３】
【００１９】表３によれば、本発明の実施例２の不活化
ワクチンを２回投与された全てのニワトリで明かな抗体
産生が認められ、かつ５羽中４羽で感染防御することが
わかつた。また実施例３の不活化ワクチンでは１回当り
の投与量を１／４×０．２５ｍｌにしても市販ワクチン
と同等程度の抗体価が誘導され、かつ全てのニワトリが
感染防御することが明かとなった。
ワクチンを２回投与された全てのニワトリで明かな抗体
産生が認められ、かつ５羽中４羽で感染防御することが
わかつた。また実施例３の不活化ワクチンでは１回当り
の投与量を１／４×０．２５ｍｌにしても市販ワクチン
と同等程度の抗体価が誘導され、かつ全てのニワトリが
感染防御することが明かとなった。
【００２０】試験例４：不活化ＮＤＶ経口ワクチンの感
染防御試験 不活化前ウイルス価が１０9.1 ＥＩＤ50／ｍｌの実施例
４のウイルス液の原液２．５重曹を１ｍｌ当り６０ｍｇ
含んだＰＢＳで希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ
（ラインＭ、３０日齢）に２週間隔で２回投与した。ま
た実施例５のウイルス液の原液２．５ｍｌを重曹を１ｍ
ｌ当り６０ｍｇ含んだＰＢＳで希釈し５ｍｌとして、Ｓ
ＰＦニワトリに同様に投与した。陽性対照として市販の
不活化ワクチンを２回筋肉内に注射した。初回免疫４週
後に採血し、血清の抗体価を、ニューカッスル病ウイル
ス赤血球凝集素（日生研株式会社製）を用いて赤血球凝
集阻害反応で測定した。採血直後にＮＤＶ佐藤株（１０
4.5 ＥＩＤ50）を筋肉内接種攻撃して生死を調べた。結
果を表４に示す。
染防御試験 不活化前ウイルス価が１０9.1 ＥＩＤ50／ｍｌの実施例
４のウイルス液の原液２．５重曹を１ｍｌ当り６０ｍｇ
含んだＰＢＳで希釈し５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ
（ラインＭ、３０日齢）に２週間隔で２回投与した。ま
た実施例５のウイルス液の原液２．５ｍｌを重曹を１ｍ
ｌ当り６０ｍｇ含んだＰＢＳで希釈し５ｍｌとして、Ｓ
ＰＦニワトリに同様に投与した。陽性対照として市販の
不活化ワクチンを２回筋肉内に注射した。初回免疫４週
後に採血し、血清の抗体価を、ニューカッスル病ウイル
ス赤血球凝集素（日生研株式会社製）を用いて赤血球凝
集阻害反応で測定した。採血直後にＮＤＶ佐藤株（１０
4.5 ＥＩＤ50）を筋肉内接種攻撃して生死を調べた。結
果を表４に示す。
【００２１】
【表４】
【００２２】表４によれば、実施例４及び５のワクチン
を経口投与されたニワトリでは部分的ではあるが抗体産
生が認められ、かつ感染防御することがわかった。
を経口投与されたニワトリでは部分的ではあるが抗体産
生が認められ、かつ感染防御することがわかった。
【００２３】試験例５：不活化ＩＣ経口ワクチンの感染
防御試験 菌数が２．５×ｌ０10ｍｌの実施例６の菌液の原液のそ
れぞれ０．４ｍｌ、０．０４ｍｌ及び０．００４ｍｌ
（順に１０10、１０9 、及び１０8 の菌が含まれてい
る）を重曹を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだＰＢＳで希釈し
５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ラインＭ、６週齢）に
２週間隔で２回経口投与した。。陽性対照として不活化
ワクチンを１回筋肉内に注射した。初回免疫４週後に採
血し、血清の抗体価を、コリーザＡ型ＨＡ抗原「ＮＰ」
（日本ファマシー株式会社製）を用いて赤血球凝集阻害
反応で測定した。採血直後にヘモフィルスパラガリナラ
ム Ａ型２２１株（菌数３×ｌ０6 ）を点鼻接種攻撃
し、１週間観察した。発症は鼻汁あるいは顔面の腫脹に
て判定した。菌分離は鼻汁を出したニワトリについては
鼻汁より行い、鼻汁を出さなかったニワトリ及び鼻汁か
ら菌分離されなかったニワトリについては攻撃１週後に
眼窩下洞よりスワブを採取して行った。結果を表５に示
す。
防御試験 菌数が２．５×ｌ０10ｍｌの実施例６の菌液の原液のそ
れぞれ０．４ｍｌ、０．０４ｍｌ及び０．００４ｍｌ
（順に１０10、１０9 、及び１０8 の菌が含まれてい
る）を重曹を１ｍｌ当り３０ｍｇ含んだＰＢＳで希釈し
５ｍｌとして、ＳＰＦニワトリ（ラインＭ、６週齢）に
２週間隔で２回経口投与した。。陽性対照として不活化
ワクチンを１回筋肉内に注射した。初回免疫４週後に採
血し、血清の抗体価を、コリーザＡ型ＨＡ抗原「ＮＰ」
（日本ファマシー株式会社製）を用いて赤血球凝集阻害
反応で測定した。採血直後にヘモフィルスパラガリナラ
ム Ａ型２２１株（菌数３×ｌ０6 ）を点鼻接種攻撃
し、１週間観察した。発症は鼻汁あるいは顔面の腫脹に
て判定した。菌分離は鼻汁を出したニワトリについては
鼻汁より行い、鼻汁を出さなかったニワトリ及び鼻汁か
ら菌分離されなかったニワトリについては攻撃１週後に
眼窩下洞よりスワブを採取して行った。結果を表５に示
す。
【００２４】
【表５】
【００２５】表５によれば、実施例６のワクチンを１羽
１回当たり１０10菌経口投与されたニワトリでは６羽中
５羽で抗体の上昇が認められ、６羽全てが感染防御する
ことが明かとなった。
１回当たり１０10菌経口投与されたニワトリでは６羽中
５羽で抗体の上昇が認められ、６羽全てが感染防御する
ことが明かとなった。
【００２６】
【発明の効果】以上のように、本発明の不活化経口ワク
チンを用いて、従来の不活化ワクチンの注射による免疫
と同等の免疫誘導を得ることができる効果がある。
チンを用いて、従来の不活化ワクチンの注射による免疫
と同等の免疫誘導を得ることができる効果がある。
【００２７】したがって、従来、いずれも注射によって
筋肉内に投与されていた鶏伝染性ファブリキウス嚢病、
ニューカッスル病、及び鶏伝染性コリーザの不活化ワク
チンは、本発明の不活化経口ワクチンの経口投与によっ
てそれぞれの病原体に対する抗体を誘導して、感染症を
有効に予防することができ、鶏にストレスを与えず、か
つ省力化した投与が可能となる効果が得られる。
筋肉内に投与されていた鶏伝染性ファブリキウス嚢病、
ニューカッスル病、及び鶏伝染性コリーザの不活化ワク
チンは、本発明の不活化経口ワクチンの経口投与によっ
てそれぞれの病原体に対する抗体を誘導して、感染症を
有効に予防することができ、鶏にストレスを与えず、か
つ省力化した投与が可能となる効果が得られる。
Claims (3)
- 【請求項１】 不活化した鶏伝染性ファブリキウス嚢病
ウイルスを主成分とする鶏伝染性ファブリキウス嚢病の
予防用経口ワクチン。 - 【請求項２】 不活化したニューカッスル病ウイルスを
主成分とするニューカッスル病の予防用経口ワクチン。 - 【請求項３】 不活化したヘモフィルスパラガリナラム
Ａ型を主成分とする鶏伝染性コリーザＡ型の予防用経口
ワクチン。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21433893A JPH0767634A (ja) | 1993-08-30 | 1993-08-30 | 不活化病原体の鶏用経口ワクチン |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21433893A JPH0767634A (ja) | 1993-08-30 | 1993-08-30 | 不活化病原体の鶏用経口ワクチン |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0767634A true JPH0767634A (ja) | 1995-03-14 |
Family
ID=16654112
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21433893A Pending JPH0767634A (ja) | 1993-08-30 | 1993-08-30 | 不活化病原体の鶏用経口ワクチン |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0767634A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6084670A (en) * | 1997-03-11 | 2000-07-04 | Nihon Kohden Corporation | Particle analyzer and composite lens formed by integrally joining plural lens elements of different focal points |
| JP2019214555A (ja) * | 2018-06-06 | 2019-12-19 | 株式会社ＭａｎａＨＳ | ウイルス感染症予防用組成物 |
-
1993
- 1993-08-30 JP JP21433893A patent/JPH0767634A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6084670A (en) * | 1997-03-11 | 2000-07-04 | Nihon Kohden Corporation | Particle analyzer and composite lens formed by integrally joining plural lens elements of different focal points |
| US6157500A (en) * | 1997-03-11 | 2000-12-05 | Nihon Kohden Corporation | Particle analyzer and composite lens formed by integrally joining plural lens elements of different focal points |
| US6409141B1 (en) | 1997-03-11 | 2002-06-25 | Nihon Kohden Corporation | Particle analyzer and composite lens formed by integrally joining plural lens elements of different focal points |
| JP2019214555A (ja) * | 2018-06-06 | 2019-12-19 | 株式会社ＭａｎａＨＳ | ウイルス感染症予防用組成物 |
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