JPH07502975A

JPH07502975A - 抗腫瘍及び抗―レトロウィルス剤として有用なアデノシンジホスホリボースポリメラーゼ結合性ニトロソ芳香族化合物

Info

Publication number: JPH07502975A
Application number: JP4505220A
Authority: JP
Inventors: カン，アーネスト; メンデレイエブ，ジェローム; ライス，ウィリアム　ジー．
Original assignee: オクタマー，インコーポレイティド; エモリーユニバーシティ
Priority date: 1991-10-22
Filing date: 1991-11-26
Publication date: 1995-03-30
Anticipated expiration: 2015-07-31
Also published as: JP3070767B2; AU1260992A; EP0609211A1; WO1993007868A1; AU676992B2; EP0609211A4; CA2121900A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】抗腫瘍及び抗−レトロウィルス剤として有用なアデノレンジホスホリボースポリメラーゼ結合性ニトロン芳香族化合物発明の分野本発明は一般的に、レトロウィルス治療剤及びウィルス感染及び癌の処理へのそれらの使用に関する。より特定には、それは、＾ＤＰ−リボーストランスフェラーゼを阻害する治療剤及び特に種々のニトロソーヘンゾピロン、ニトロソ−イソキノリノン及びニトロソーヘンズアミドに関する。

発明の背景酵素ＡＤＰ−リポーストランスフェラーゼ（ＡＤＰＲＴ）　（Ｅ、Ｃ，４，２，３０）は、はとんどの真核細胞の核に位置するクロマチン結合酵素である。その酵素は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）を形成するためにニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ’　）のＡＤＰ−リボース成分の重合を触媒する。そのポリマーは、ポリメラーゼ自体を包含する、種々の核タンパク譬に共有結合される。

ＡＤＰ−リポノル化が細胞代謝において作用する多くの種々の役割は、新生体及びウィルス感染を攻撃するのに実質的に有用な薬物のための標的にＡＤＰＲＴをすることであった。多くの生理学的活性が、ＡＤＰＲＴのポリメラーゼ活性を阻害する化合物のために検出された。

そのような活性は、ヒト繊維芽細胞の発癌物質誘発性悪性形質転換の細胞周期依存性防止（Ｋｕｎ、　Ｅ、、　Ｋｉｒｓｔｅｎ、　Ｅ、、　Ｍｉｌｏ、　Ｇ、Ｅ、Ｋｕｒｉａｎ。

Ｐ、ａｎｄ　Ｋｕｍａｒｉ、Ｈ，Ｌ、（１９８３）　Ｐｒｏｃ、Ｎａ１１．　八ｃａｄ、Ｓｃｉ、ＬＩＳＡ　８０ニア２１９〜７２２３）、また発癌物質耐性の付与（Ｍｉｌｏ、　Ｇ、Ｅ、、　Ｋｕｒｉａｎ、　Ｐ−＋に１ｒｓｔｅｎ、Ｅ、ａｎｄ　Ｋｕｎ、Ｅ、（１９８５）　ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ、１７９　：　３３２〜３３６）　、ハムスター胚及びマウスＣ３Ｈ１０Ｔｌ／２細胞培養物における悪性形質転換の阻害（Ｂｏｒｅｋ、　Ｃ，、Ｍｏｒｇａｎ、　Ｗ、Ｆ、、　Ｏｎｇ＋　Ａ、　ａｎｄ　Ｃ１ｅａｖｅｒ、　Ｊ、Ｅ。

（１９８４）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、＾ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ｌｌ５Ａ　８１　：　２４３〜２４７）、Ｍｌ）ｌ　３Ｔ３細胞からトランスフェクトされた癌遺伝子の欠失（Ｎａｋａｙａｓｌ＋ｕ、　Ｍ、。

Ｓｈｉｍａ、１１．、Ａｏｎｕｍａ、Ｓ、、Ｎａｋａｇａｍａ、Ｈ，、Ｎａｇａｏ、Ｍ、ａｎｄ　Ｓｕｇｉｍｕｒａ。

Ｔ、（１９８８）　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、八ｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ　旦５　：　９０６６〜９０７０）　、　Ｍ！瘍プロモーターのマイトジェン刺激の抑制（Ｒｏｍａｎｏ、　Ｆ、、　Ｍｅｎａｐａｃｅ＋１、、　ａｎｄ　ＡｒｍａＬｏ、　Ｖ、（１９８３）　Ｃａｒｃｉｎｏ　ｅｎｅｓｉｓ　９　：２１４７〜２１５４）　、非正統的ＤＮＡ＆Ｉｉｌ＊えの阻害（Ｗａｌｄｍａｎ、　Ｂ、Ｃ，ａｎｄ　Ｗａｌｄｍａｎ、　Ａ、　（１９９０）Ｎｕｃｌ、＾ｃｉｄｓ　Ｒｅｓ、１８　：　５９Ｂ１〜５９８８）及び組込み（Ｆａｒｚａｎｅｈ、　ｐ、ＩＰａｎａｙｏｔｏｕ＋　Ｇ、Ｎ、、　Ｂｏｗｌｅｒ、　１．、Ｄ、、Ｈａｒｄａｓ、　Ｂ、Ｄ、＋　Ｂｒｏｏ＋＊＋　Ｔ、、　ＷａｌＬｈｅ秩B Ｃ，ａｎｄ　５ｈａｌｌ、Ｓ、（１９８Ｂ）　Ｎａｃｌ、八ｃｉｄｓ　Ｒｅｓ、　１６　：　１１３１９〜１１３２６）、姉妹染色分体交換の誘発（ｌｋｕｓｈｉｍａ、　Ｔ、　（１９９０）　側皿恕赳懸９９　：３６０〜３６４）及び一定の増幅された癌遺伝子のｔ員失（Ｇｒｏｓｓｏ、　Ｌ、Ｅ。

ａｎｄ　Ｐｉｌｏｔ、　Ｈ，Ｃ，（１９８４）　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏ　ｈ　ｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏ＋ｍｍｕｎ、月迫：４７３　−４８０：　Ｓｈｉｍａ、Ｈ，、Ｎａｋａｙａｓｕ、Ｍ、、Ａｏｎｕｍａ、Ｓ、、Ｓｕｇｉｍｕｒａ、Ｊ。

ａｎｄ　Ｎａｇａｏ、Ｍ、（＋９８９）　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＩＩｓ　＾　８６　二　７４４２〜７１１４５）を包含する。

ＡＤＰＲ丁ポリメラーゼ活性を阻害することが知られている化合物は、ベンズアミド（Ｋｕｎ、　Ｅ、、　Ｋｉｒｓｔｅｎ、　Ｅ、＋　Ｍｉｌｏ、　Ｇ、Ｅ、Ｋｕｒｉａｎ、　Ｐ、　ａｎｄにｕｍａｒｉ、）Ｉ几、（１９８３）　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、八ｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ　８０　：　７２１９〜７２２３）　、置換ヘンズアミト’（Ｂｏｒｅｋ、　Ｃ，、Ｍｏｒｇａｎ、　Ｗ、Ｆ、、　Ｏｎｇ、八。

ａｎｄ　Ｃ１ｅａｖｅｒ、　Ｊ、Ｅ、　（１９８４）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＩＪｓＡ　８１　：２４３〜２４７　；　Ｒｏｍａｎｏ、　Ｆ、、門ｅｎａｐａｃｅ、　Ｌ、　ａｎｄ　Ａｒｍａｔｏ、　Ｖ、　（１９８３）７竺牡見９　：　２１４７〜２１５４　；　Ｆａｒｚａｎｅｈ、　Ｆ、、　Ｐａｎａｙｏｔｏｕ。

Ｇ、Ｎ、、　Ｂｏｉｉｌｅｒ、　Ｌ、Ｄ、、　Ｈａｒｄａｓ、　Ｂ、Ｄ、、　Ｂｒｏｏｍ、　Ｔ、、　Ｗａｌｔｈｅｒ、　Ｃ，ａｎｄＳｈａｌｌ、　Ｓ、（１９８Ｂ）　Ｈａｃｌ、Ａｃ１ｄｓ　Ｒｅｓ、１６　：　１１３１９〜１１３２６　：　Ｇｒｏｓｓｏ。

Ｌ、Ｅ、ａｎｄ　Ｐｉｔｏｔ、Ｈ，Ｃ，（１９８４）　Ｂｉｏｃｈｅｗ、Ｂｉｏ　ｈ　ｓ、Ｒｅｓ、Ｃｏｍｍｕｎ。

１１９　：　４７３〜４８０　；　Ｓｈｉｍａ、）１．ｌ　Ｎａｋａｙａｓｕ＋　Ｍ、＋　Ａｏｎｕｍａ＋　ｓ、ｌ　Ｓｕｇｉｗｕｒａ＋Ｔ、ａｎｄ　Ｎａｇａｏ、Ｍ、（１９８９）　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ　旦６　ニア４４２〜７４４５）　、　３−アミノナフチルヒドラジド（Ｗａｌｄｍａｎ、　Ｂ、Ｃ，ａｎｄ　Ｗａｌｄｍａｎ。

Ａ、　（１９９０）　Ｎｕｃｌ、＾ｃｉｄｓ　Ｒｅｓ、１Ｂ　：　５９８１〜５９８８）　、イソキノリン、フェルシトリン、及びクマリン（１，２−ベンゾピロン）（Ｍｉｌｏ、　ｃ＋。

Ｅ、、　Ｋｕｒｉａｎ＋　ｐ、ｌ　Ｋｉｒｓｔｅｎ＋　Ｅ、　ａｎｄ　Ｋｕｎ＋　Ｅ、（１９８５）　ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ、　１７９：３３２〜３３６）を包含する。１，２−ベンゾピロンの抗−形質転換及び抗−悪性効果は、インビトロ及びインビボで示された（Ｔｓｅｎｇ＋　ｔｌｅ、＋（１９８７）　（Ｐｒｏｃ、　Ｎａ１１．　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８４　：　１１０７〜１１１１）　。

他の既知のＡＤＰＲＴポリメラーゼ活性インヒビターは、“Ｎｏｖｅｌ　５−Ｉｎｄｏ−６−Ａｍｉｎｏ４＋２−Ｂｏｎｚｏｐｙｒｏｎｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　Ｕｓｅｆｕｌ　ａｓＣｙｓｔｏｓｔａｔｉｃ　ａｎｄ　Ａｎｔｉ−Ｖｉｒａｌ　Ａｇｅｎｔｓ″の表題の１９９０年１０月１９日に出願されたアメリカ特許出願第６００．５９３号に記載されるような、抗−腫瘍及び抗−ウィルス剤として使用するための５−ヨード−６−アミノ−１，２− ベンゾピロンを包含する。引用された特許は、抗−腫瘍剤又は抗−ウィルス剤として５−ヨード−６−ニトロソ−１゜２−ベンゾピロンを使用することの可能性を論しる。

６−ニドロソーヘンゾピロンは、これまで知られておらず、又は記載されてもいない。文献に見出される唯一のわずかに関連する化合物は、６−ニトロ−１，２ −ベンゾピロン及び６−アミノ−１゜２−ベンゾピロン（６−ＡＲＰ）（Ｊ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｓｏｃ、　Ｊａｐ、、４９８　：　６１５（１９２３））であり、これに関しては、単に少々の医学的評価が報告されている。特に、試験は、鎮静及び催眠効果（Ｊ、Ｐｈａｒｍ、　Ｓｏｃ、　Ｊａｐａｎ。

７３　：　３５１　（１９５３）　；　ｆｉ、７４　：　２７１　（１９５４））、低体温作用（ＹａｋｕｇａｋｕＺａｓｓｈｉ、邦：　４７１　（１９５８））及び解熱、催眠、低血圧及びアドレナリン分解作用（＠ｊｌ、　８３　：　１１２４　（１９６３））について行なわれた。これらの化合物のいづれかについての有意な用途は、６−へＢＰを除いて記載されていない。

ｎ　−二Ｉ・ロソヘンズアミド（Ｉｒｎｅ−Ｒａｓａ、　Ｋ、Ｍ、　ａｎｄ　Ｋｏｕｂｅｋ、　Ｅ。

（１９６３）　Ｊ、ユ釘１４匹加」−邦：　３２４０〜３２４１）及び４−ニトロソベンズアミド（Ｗａｂｂｅｌｓ、　Ｇ、Ｇ、、　Ｋａｌｈｏｒｎ＋　Ｔ、Ｆ、＋　Ｊｏｈｎｓｏ＋＋＋　Ｄ、Ｅ、　ａｎｄＣａｍｐｂｅｌｌ、　Ｄ、（１９Ｂ２）　Ｊ、　Ｏｒ　、　Ｃｈｅｗ、４７　：　４６６４〜４６７０）が、化学文献に報告されているが、しかしそれらの異性体の商業的使用は知られていない。それらの文献は、ＡＤＰＲＴインヒビターとしてニトロソベンズアミドの使用を示唆していない。

置換された及び置換されていない６−アミノ−１，２−ベンゾピロン及び５−ヨード−６−アミノ−１，２−ベンゾピロンの抗−ウィルス及び抗−１１ｆ１ｍ作用は、“６−＾ｍ１ｎｏ４＋２−Ｂｏｎｚｏｐｙｒｏｎｅｓ　Ｕｓｅｆｕｌｆｏｒ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｒ　Ｖｉｒａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ　’の表題の１９９０年９月２１日に出願された継続出願アメリカ特許第５８５，２３１号及び ’Ｎｏｖｅ１５−１ｏｄｏ−６−Ａｍｉｎｏ−１＋２−Ｂｏｎｚｏｐｙｒｏｎｅｓ　ａｎｄ　Ｔｈｅｉｒ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　Ｕｓｅｆｕｌ　ａｓＣｙｔｏｓｔａｔｉｃ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｖｉｒａｌ　Ａｇｅｎｔｓ’の表題の１９９０年１０月１９日に出願されたアメリカ特許第６００．５９３号（これらは引用により本明細書に組込まれる）の主題である。

前駆体分子、１．２−ベンゾピロン（クマリン）は、アデンシンジホスホリボシルトランスフェラーゼ（八〇ＰＰＴ）、すなわちすべての哺乳類細胞に存在するＤＮＡ−結合核タンパク質の■害すガンドであることが示された（Ｔｓｅｎｇ、　星Ｅ、、　（１９８７）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、八ｃａｄ、　Ｓｃｉ。

ＵＳＡ、８４　二　１１０７〜１１１１）　。

Ｈａｋａｍ＋　ｆｌｅｌ、ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ、、２１２　：　７３　（１９８７）は、６−アミノ−１，２−ベンゾピロン（６−ＡＲＰ）がまた、ＤＮＡに結合する部位でＡＤＰＲＴ上特異的に結合することを示し、これは、６−ＡＲＰ及びＤＮＡがＡＤＰＲＴ上で同じ部位と競争することを示唆する。ＡＤＰＲＴの合成リガンドは、特にＩＩ瘍性細胞においてＤＮ＾増殖を阻害する（Ｋｉｒｓｔｅｎ＋　１１炙、、　（１９９１）ハム」」土−恒Ｌ　月Ｕ：１〜４）。続いて、これらのりガントは、ウィルス複製を阻害することが見出され、そして１９９０年９月２１日に出願された、”６−Ａｍ１ｎｏ−１＋２−Ｂｏｎｚｏｐｙｒｏｎｅｓ　ｕｓｅｆｕｌ　ｆｏｒＴｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｖｉｒａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ’の表題の継続出願アメリカ特許第５８５．２３１号（引用により本明細書に組込まれる）の主題である。

従って、抗−ウィルス及び抗−ＭＩ瘍剤として使用するために＾叶ＲＴポリメラーゼ活性インヒビターを供給することが興味の対象である。

本発明は、抗−ウィルス及び抗−腫瘍治療剤として使用するための新規ニトロソ −１，２−ベンゾピロン、ニトロソ−ベンズアミド及びニトロソイソキノリノン化合物、並びに種々の構造的に関連する他のニトロソ化合物を提供する０本発明への使用について教授される化合物は、構造的に類似するアミノ化合物よりも有意に低い毒性より高い（５００〜１０００倍）の可能性を有すると思われる。

発明の要約本発明は、新規抗−腫瘍及び抗−ウィルス化合物を供給する。これらの化合物は、６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロン、３−ニトロソベンズアミド、５−ニトロソ−１（２Ｈ）　−イソキノリノン、７−ニトロソ−１（２１（）　−イソキノリノン、８−ニトロソ−１（２Ｈ）−イソキノリノンを包含する０本発明はまた、ｌ又は複数の化合物を含む組成物、及びこれらの化合物及び組成物によるウィルス感染及び癌を処理するための方法を提供する。

また、２−ニトロソベンズアミド及び４−ニトロソベンズアミドにより癌及びウィルス感染を処理するための方法も提供される。１又は複数のこれらの化合物を含む組成物も提供される。

図面の記載第１図は、種々の濃度の６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロン、３−ニトロソ− ベンズアミド、及びニトロソ−１（２＋１）−イソキノリノン（ＮＯＱ）　（５及び７個のニトロソ異性体の混合物）により示されるＡＤＨＰＴポリメラーゼ活性（ＡＤＰＲＰ）の不活性化の程度を比較するグラフである。

第２図は、（Ａ）　８５５−２細胞（ヒ１−Ｂ−細胞系急性リンパ芽球性白血病の細胞系）、（Ｂ）Ｈ９細胞（ヒ）Ｔ−細胞系急性リンパ芽球性白血病の細胞系）、（Ｃ）ＨＬ−６０細胞（ヒｌ性非リンパ芽球性白血病の細胞系）及び（Ｄ）に５６２細胞（ヒト慢性骨髄性白血病の細胞系）に対するＡＤＲＰＴリガンドの阻害効果を有すグラフの組成である。これらの細胞は、１０％ウシ胎児血清（Ｆｅ２）における増殖因子の影響下で培養されるが、ところが（Ｅ）及び（Ｆ）においては、８５５−２細胞はそれぞれ、自己分泌増殖因子活性（ＡＧＦ）又は低分子量Ｂ細胞増殖因子（ＢＣＧＦ、　Ｔ−細胞誘導リンホカイン）の存在下で培養された。

第３図は、６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロン（ＮＯＢＰ）及び３−ニトロソヘンズアミド（ＮＯＢ八）による８５５−２細胞の白血病細胞増殖の高まるレベル（Ｆｅ５の高まる濃度に応答して）の阻害を示すグラフである。

第４図は、Ｎ０ＢＩ”及びＮ０ＢＡが、半固体培地において単一の細胞からコロニー（ＣＦＩＩ）を形成するヒト白血病細胞（８５５−２及びＨＬ−６０）の能力を阻害することを示すグラフである。

第５図は、軟質寒天において（Ａ）正常なリーサス骨髄幹細胞又は（Ｂ）ヒト末梢血管軸細胞の能力に対する抗−白血病投与量のＡＤＲＰＴ　リガンドの相対的阻害効果のグラフを示す。Ｎ０ＢＰ及びＮ０ＢＡが正常な細胞に対して最少の効果を有したことが注目される。

第６図は、４種のヒト脳腫瘍細胞系に対するＮ０ＢＰ、　Ｎ０ＢＡ及びＮＯＱの阻害効果を示すグラフを示す。

第７図は、ビンクリスチンによるＮ０ＢＰの有効性を比較するグラフである。

第８図は、ヒト乳腫瘍細胞系ＭＤＡ４６８に対するＮ０ＢＰ、　Ｎ０ＢＡ及びＮＯＱの効果を示すグラフである。

第９図は、ネズミ白血病細胞系Ｌ１２１０に対するＮ０ＢＰ、　Ｎ０ＢＡ及びＮＯＱの効果を示すグラフである。

特定態様の記載本発明は、へ〇ＰＰＴポリメラーゼ活性インヒビターであるいくつかのニトロソ化合物を提供する。これらの化合物は、抗−１Ｈｇ＆及び抗−ウィルス化合物として使用される。

化合物（１）は、下記式：〔式中、Ｒ１−Ｒｚ　、Ｒ３、Ｒ−、Ｒｓ　、及びＲ４は、水素及びニトロソから成る群から選択され、そしてＲ＋　、Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４゜Ｒ５，及びＲ６のうちたった１つはニトロソ基である〕を有する。

化合物■の好ましい態様は、Ｒ４がニトロソ基、すなわち分子６〜ニトロソ−１，２−ベンゾピロンである場合である。

化合物■は、下記式二〇〔式中、Ｒ，、Ｒ，、及びＲ３は水素及びニトロソから成る群から選択され、そしてＲ，、Ｒ，、及びＲ３のうちたった１つはニトロソ基である〕を有する。

化合物■は、下記式：〔式中、Ｒ９，Ｒｚ　、Ｒｉ　、Ｒ−、及びＲ１は、水素及びニトロソから成る群から選択され、そしてＲ，、Ｒ，、Ｒ３，Ｒ，、及びＲ３のうちたった１つはニトロソ基である〕を有する。

化合物■の好ましい態様は、Ｒ，又はＲ２のいづれかがニトロソ基、すなわちそれぞれ５−ニトロソ−１（２＋１）−イソキノリノン及び７−ニトロソ−１（２Ｈ）　−イソキノリノンである場合である。

５−ニトロソ−１（２１１）　−イソキノリノンについての開示される合成は、２種のひしように開運する構造的異性体、すなわち７−ニトロン−１（２Ｈ）− イソキノリノン及び８−ニトロソ−１（２）１）　−イソキノリノンを生成することができる。５−ニトロソ−１（２１１）−イソキノリノンの生物学的活性を試験する実験は有意な量の８−ニトロソ−１（２Ｈ）−イソキノリノン又は゛１ −ニトロソー１　（２Ｈ）−イソキノリノンを含むが、すべての３種の異性体は、それらの密接な構造的類似性に基づいて類似する抗−腫瘍及び抗−ウィルス活性を有すると思われる。この仮説は、薄層クロマトグラフィー又は類似する方法により異性体を分離し、そして分離された化合物の抗−腫瘍及び抗−ウィルス活性を比較することによって便利に試験され得る。

６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロン、３−ニトロソーヘンズアミド、５−ニトロソ−１（２＋１）−イソキノリノン、７−ニトロソ−１（２Ｈ）−イソキノリノン及び８−ニトロソ−１（２Ｈ）−イソキノリノンの詳細な合成は、下記例のセクションに供給される。

−ａ的に本発明のニトロソ化合物は、酢酸エチル又はハロカーボン溶媒における３−クロロペルオキシ安息香酸（又は他のベルオキシ酸）による酸化により本発明の化合物に対応するアミノ化合物を酸化することによって合成され得る。これらの前駆体アミン化合物の合成は、化学文献に記載されており、そしていくつかの化合物は市販されている。本発明のニトロソ化合物への酸化のためのいくつかの前駆体アミノ化合物は次の通りである＝３−アミノ−１，２−ベンゾピロン（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ酊ｇ、　Ｃｏｒｐ、、　Ｇａｒｄｅｎａ、　ＣＡ＋　９０２４８）；４−アミノ−１，２−ベンゾピロン（Ａｌｄｒｉｏｈ、　Ｒａｒｅ　Ｃｈｅ＊ｉｃａｌＣａｔａｌｏｇ）　；　５−アミノ−１，２− ベンゾピロン（５−ニトロ−１゜２−ベンゾピロンの還元による、Ｇｕｔｔｌｉｅｂ、　屋＆＋、Ｊ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓａｃ。

Ｐｅｒｋｉｎ、　Ｔｒａｎｓ、ＩＩ　４３５　（１９７９））；　８−アミノ− １，２−ヘンゾヒ。

ロン（８−アミノ−１，２−ベンゾピロンの還元による、Ａｂｄｅｌ−Ｍｅｇｉｄ、ｆｅｅ、、Ｅ　ｔ　Ｊ、　Ｃｈｅｍ、　２０　：　４５３〜４６２　（１９７７））　、及び４−アミノ−１（２）１）−イソキノリノン（その対応する４ −ニトロ類似体の還元による、Ｉｌｏｒｎｉｎｇ、ｆｌＥ、、　（１９７１）　Ｃａｎ、　Ｊ、　Ｃｈｅａｐ、　４９：２７８５〜２７９６）　。

化合物（１）〜（ｎｌ）の他に、本発明は、類似する制癌性及び又は抗−ウィルス活性を有する種々の構造的に関連する化合物にも関する。これらの構造的に類似する化合物は、へ〇ＰＰＴポリメラーゼ活性に対するそれらの高い可能な阻害効果に基づいて便利にスクリーンされる。対象の構造的に関連する化合物は、追加のニトロソ基及び小さな、たとえばＣ＋　Ｃ３のアルキル基により置換された誘導体を包含する。また、種々のニトロソ置換された構造的に関連する複素環式環、たとえば３．４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−イソキノリノン、ニコチンアミド、フタルヒドラジド及び１，３−ベンズオキサジン−２，４−ジオンも本発明の対象である。

本発明の化合物のもう１つの観点は、それらが細胞膜に侵入するのの容易性及びタンパク質及び核酸への非特異的結合の比較的な不在性である。

実際、本発明のＡＤＰＲＴポリメラーゼインヒビター、すなわち化合物（１）〜（Ｉ［［）及びそれらの医薬的に許容できる塩のいづれかが、単独又はお互い組合しての量で、及び悪性増殖又はウィルス複製を阻害する又は哺乳類宿主における癌増殖又はウィルス感染を防ぐのに十分であり、且つ効果的である医薬形で投与され得る。

本明細書に記載される活性化合物及び塩の投与は、治療剤のための投与の許容される態様のいづれかを通してである。これらの方法は、全身性又は局所的投与、たとえば経口、非経口、経皮的、皮下又は局部的投与態様を包含する。それらの薬物の投与の好ましい方法は、静脈内であり、但し、対象が局部的腫瘍又は損傷を有する場合、局部的投与が適切である。他の場合、他の非経口又はさらに経口形で組成物を投与することが必要である。

意図される態様に依存して、組成物は、固体、半固体、又は液体投与形、たとえば注射剤、錠剤、座剤、ピル、特効性カプセル、粉末、液体、懸濁液又は同様のもの、好ましくは単位投与で存在する。

組成物は、有効量の少なくとも１種の化合物（１）〜（■）、又は医薬的に許容できるそれらの塩を含み、そしてさらに、それはいづれかの医薬的賦形剤及び他の医学的又は医薬的薬物又は物質、キャリヤー、アジュバント、希釈剤、等を含むことができる。

固体組成物に関しては、化合物（１）〜（Ｉ［［）の他に、たとえば医薬品種のマンニトール、ラクトース、スターチ、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウム及び同様のもののような賦形剤が使用され得る０本発明の化合物はまた、たとえばポリアルキレングリコール、たとえばプロピレングリコールをキャリヤーとして使用して、座剤として配合され得る。

液体、特に注射用組成物は、医薬溶液、たとえば水、塩溶液、水性デキストロース、グリセロール、エタノール、ＤＭＳＯ及び同様のものに少なくとも１種の活性化合物（１）〜（Ｉ［ｌ）を溶解し、又は分散することによって調製され得、それによって注射用溶液又は懸濁液を形成することができる。

所望により、投与されるべく医薬組成物はまた、少量の非毒性補助物質、たとえば湿潤又は乳化剤、ｐＨｆｆ１街剤及び他の物質、たとえば酢酸ナトリウム、トリエタノールアミンオレエート、等を含むことができる。

非経に注射投与は一船的に、皮下、筋肉内又は静脈内注射又は注入のために使用される。注射用物質は、注射の前、液体に溶解するのに適切な液体溶液又は懸濁液又は固体形として従来の形で調製され得る。

非経口投与のための最近開発されたアプローチは、アメリカ特許第３，７１０，７９５号（引用により本明細書に組込まれる）によれば、一定レベルの投与が維持されることを確保する除法性又は持効性システムの移植を使用する。

上記医薬組成物のいづれかは、活性成分０．１〜９９％、好ましくは１〜７０％を含むことができる。

そのような投与形を調製するための実際の方法は、知られており、又は当業者に明らかであり、そしてＲｅｍ１ｎ　ｔｏｎ’ｓ　ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、　Ｍａｃｋ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｅａｓｔｏｎ、　Ｐｅｎｎ５ｙｌｖａｎｉａ　、第１７版、１９８５に詳細に記載される。いづれにしても、投与されるべき組成物又は配合物は、治療的に効果的な量が患者に投与されるであろうことを確かめるような量の活性化合物を含むであろう。治療的に有効な量とは、処理されるべき患者の存在する病状の進行を妨げ、又は緩和するのに有効な量を意味する。

もちろん、投与される活性化合物の量は、処理されるべき患者、Φ者の体重、重症度、投与の態様及び処方する医者の判断に依存するであろう。しかしながら、有効投与量は、１回の処理サイクルで、１〜２日間、１〜１２ｍｇ／　ｋｇ／日、好ましくは１〜５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。一般的に、薬物投与のための上限は、その可能性ある毒性により平衡化されたその効率である。

本発明はこれまで記載されて来たが、次の例は例示的であって、本発明を限定するものではない。

■ １、　６−ニトロソ−１２−ベンゾピロンの八゛　び６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロンの調製方法の例は、次のようにして提供される：２２°Ｃでの水（４０ｄ）における６−アミノ−１，２−ベンゾピロン塩酸塩（４，００ｇ　、　２０ｍモル）の撹拌溶液に、水（２０ｄ）中、タングステン酸ナトリウム（５，９３ｇ、２０ｍモル）の溶液、続いて３０％水性過酸化水素（５ｍ）を添加し、そして撹拌を１．５時間続けた。酸化生成物を、酢酸エチル１００ｄ体積により緑色の混合物から抽出し、その組合された抽出物を０．ＩＮのｌｌＣｌ　（５０ｄ）及び次に水（１００Ｉ１１）により洗浄した。酢酸エチルを回転蒸発により除去し、そして残渣を温エタノール（２５０＋ｄ）から結晶化した。

反妄↓戊立夏分捉結晶化段階から得られた緑色の結晶（１，４８ｇ、　４２％の収率）は、モノマー性アリールニトロソ化合物の特徴である７５抛蒙での吸光度を示した。質量スペクトル二ｍ／ｚ（相対的強度）　：　１７５　（Ｍ’　。

１００）、　１６Ｎ１６．８８）、　１４５（３３，７７）、　１３３（１０，３８）、　１１７（５６，０９）、　８９（７９，７１）。

６３　（５７，１３）。Ｍ゛ビークついての高い分析データ’ＣＪｓＮ（ｈについての計算値：　１７５．０２６８；実測値：　１７５．０２７１　＜偏差−ｔ、ｔｐｐｗ）。

ＴＭＳからの’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２．３００ＭＨｚ）δ（ｐｐ＋ａ）　：ダブレット（６，５７２及び６．６０４）　Ｈ−３によるＨ−４スプリツト↓ダブレツト（７，４７２及び７．５０１）　Ｈ−７によるＨ−８スプリット；ダブレットのダブレット（７，８６０／７．８６６及び７．８８９／７．７９８）　Ｈ −８によるＨ−７スプリ、ト及びＨ−５による細かなスプリット；ダブレット（７，９１０及び７．９４２）Ｈ−４によるＨ−３スプリット；ダブレット（８，３０８及び８．３１５）　Ｈ−７によるＨ−５の細かなスプリット。エタノールにおけるＵＶ／ＶＩＳスペクトルに、λｍａｘ　（ε）　：　７５０ｒ＋ｓ＋　（４６）、　３１６ｎｍ　（８，９６ｘｌＯ’）。

２７４ｎｍ（２，２４Ｘ　１０’）。融点：化合物は１６０°Ｃ以上で重合し、３２５〜３４０°Ｃの範囲で黒化し、として溶融する。

このニトロソ−化合物はまた、６−アミノ−１，２−ベンゾピロン（遊離塩として）と３−クロロペルオキシ安息香酸とを酢酸エチル又はハロカーボン溶媒中で反応せしめることによっても調製され得る。

Ｉｔ、３−ニトロソベンズアミドの人周囲温度で酢酸エチル（５０ｄ）中、３−アミノベンズアミド（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、）の撹拌溶液に、１　、２０８　ｇの３−クロロペルオキシ安息香酸（市販商品、５０〜６０％の純度、Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加し、その後、その溶液は緑色に変わった。１０分後、混合物を、０．１４Ｍの水性炭酸水素ナトリウム（５８ＩＩｉ）により抽出し、水４０Ｍ１により３度続けて洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、次に回転蒸発により２０ｄの体積に滅し、そしてフリーザー（−２０°Ｃ）に置き、その後、生成物は、７２時間の間、淡黄色の固体としてゆっくりと沈殿した（０．１８０ｇ、　３４％の収率）。

２−ニトロソベンズアミド及び４−ニトロソベンズアミド異性体を、それぞれ２ −アミノベンズアミド及び４−アミノベンズアミドに対して上記酸化を行なうことによって同様にして調製することができる。

反ル」」■鼾λ側或融点：物質は１３５°Ｃ以上で黒化し、１５０〜１６０°Ｃの範囲で軟化し、そして明らかに重合し、そして２４０〜２５０°Ｃで溶融する（分解を伴う）、溶液において、化合物は緑青色である。質量スペクトル：ｍ／ｚ（相対的強度）　：　１５０（Ｍ’　、　１００）、　１３６（１０，９）、　１２０（７７，２）。

１０３（３１，６）、　９２（４６，５）、　８５（２２，８）、　７１（３３，３）。Ｍ４ピークについての高い分析データ’　ＣＪａＨｚＯｚについての計算値：　１５０．０４２９２８　ｉ実測値：　１５０．０４２９００　（偏差− ０，２ｐｐｍ）。ＮＭＲスペクトル：　Ｔ？ＩＳからの’ｆｌ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）　δ（Ｉｌｌ）Ｉｔ）　：広いシングレット（７，７３７）　Ｎ−Ｈ；　ｔ　（７，８２，ｉ、　７．８５０．７．８７５）　Ｈ−４及びＨ−６によるＨ−５スプリット；　ｄ　（８，０５９及び８．０８６）　Ｈ −５によるＨ−６スプリノト；ｄ（８，３５７及び８．３８３）　Ｈ−５によるＨ−４スプリント；　ｓ　（８，４７２）　Ｈ−２，７，７３７でのシングレットは、■プロトンに対応し；この化合物においてスペクトロ的に対応しない第２　Ｎ　−ＨプロトンはＨ−４のダブレットによりオーバーレイされる。このダブレットは、２つのプロトンに統合し、そしてＤＭＳＯｉ液へのＤ２０の添加により分解され得る。無水エタノールにおけるｕｖ−ｖ＋ｓ吸収スペクトル、λ、ｌｌ、ｌ（ｇ）　：　７５０ｒ＋＋＋（３７，６）、　３０４ｎｍ　（５，３５ｘ１０’）及び２１８ｎｍ（１，５０Ｘ　１０’）。

７５０ｎ■で最大の吸光度は、モノマー性アリールニトロソ化合物の特徴である。

■、ニトロソー１２Ｈ）−イソキノリノン　５−ニトロソ　び７−ニトロソ−の　人　の入１　（２Ｈ）−イソキノリノン（メソカルボスチリル）　（Ａｌｄｒｉｃｈ）を、イソキノリン化合物のための一般的方法を用いてニトロ化した（Ｃ。

ハ旦、　（Ｔｏｋｙｏ）　１６　：　７１５〜７２０　（１９６８）により選定されたような５−ニトロ及び７−二トロ異性体の混合物、但し、その異性体の１つは８−二トロ異性体であり得る）を次に、水性メタノールにおける水素化硼素カリウム及び炭素上パラジウム触媒の組合せを用いて、その対応するアミノ−１（２８）−イソキノリノンに還元した。３０°Ｃでの酢酸エチル（１７５ｄ）中、その得られたアミノ−１（２Ｈ）−イソキノリノン（遊離塩基として）に、３ −クロロペルオキシ安息香酸（Ａｌｄｒｉｃｈ）　１．２０８　ｇを添加した。

その混合物は曇り、そして２０分後、それを濾過し、０．１４Ｍの炭酸水素ナトリウム（５８ｄ）により抽出し、水５０ｄにより２回洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめた。

？８液の体積を、回転蒸発により５０戚に滅し、そして次に、フリーザー上に置き、その後、オレンジ色の固体生成物が沈殿した（０．１０２ｇ）。

融点：物質は１７５°Ｃ以上で濃くなり、軟化し、黒化し、そして１９５　’Ｃ以上で明らかに重合し、そして最後に、３１０〜３３５°Ｃの範囲で溶融する。

ＮＭＲ分析：　ＴＭＳからの’Ｉｔ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６１０□０．３００門Ｈ，）δ（ｐｐｍ）　：　ｍ　（６，７２３，６，７４１，６，７５２）　；　ｍ（７，５１１，７，５１８，７，５３３゜７．５３９．７．５４７．７．５５９．７．５７７．７．５８５）　；　ｍ（７，６０３，７，６７４，７，６８６゜７．６９８．７．７４７）　；　ｄ　（７，８１８，７，８４６）、　０．０の存在下で、化合物はまた、］１．９０ｐｐｍで広いシングレットを示す。異性体成分は、薄層クロマトグラフィー（シリカゲルプレート、酢酸エチル溶媒）により分析的に分解され、２つのバンド、Ｒ，０，８２及びＲ，０，７２を与えた。

Ｒ，０，８２についての質量スペクトル二ｍ／ｚ（相対的強度）：１７４（Ｍ’ 。

１００）、　１６０（２６，８）、　１４４（９３，０）、　１１７（９０，８）、　９７（２１，９）、　８９（９６，１）。

７Ｎ２４．１）。Ｍ゛ピークついての高い分析データ：　Ｃ９Ｈ，Ｎ２０□についての計算（ｉ　：　１７４．０４２９８　；実測値：　１７４．０４３２００　（偏差＝　−０，３ｐｐｍ）　。

Ｒ，０，７２，Ｍ’を有する成分に関しての、Ｃ，Ｈ，Ｎ、Ｏ□についての計算値：　１７４．０４２９２８　ｉ計算値：　１７４．０４３２００　（偏差＝− １，６ｐｐ麟）、これらのデータは、化合物がモノ−ニトロソ異性体であることを確証する。

■、す朋二Ｅ乳１化研ヌ。

本発明の化合物を、アデノンンジホスホリボシルトランスフエラーゼ（ＡＤＰＲＴ）のポリメラーゼ活性を不活性化するそれらの能力について試験した。アッセイは、ウシ胸腺ＡＤＰＲＴを用いて、Ｂｕｋｉ　ａｎｄＫｕｍ、Ｂｉｏｃｈｅｏ＋、　２７　：　５９９０〜５９９５　（１９８８）の方法に従って行なわれた。第１表に与えられるようなアッセイ結果は、ニトロソ前駆体（６−アミノ−１，２−ベンゾピロン）及びより可能性ある５−ヨード−誘導体（第１表、それぞれ化合物１及び２）のＡＤＰＲＴについてのＩ、。値（酵素活性を５０％阻害する化合物の濃度）を提供する。

ニトロソ化合物（第１表において３．４．５）は、抗−腫瘍及び抗−旧Ｖ分子としてひしように高い活性を有しく後のセクションに示されるように）、そして３０分などの短い期間の間の細胞の暴露の後でさえ、効果的である。これらの研究における５−ｉ６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロン（化合＠ｈ６）は、ＡＤＰＲＴの比較的低いインヒビターであることが示され（ヨード置換は電子体としてＮＯ５を不活性化すると思われる）、そしてその生物学的作用は、６−ＮＯ−１，２−ベンゾピロンの作用よりも１０倍弱い。これらの理由のために、本発明の組成物は、良好でない浸透性分子であることが示されているＳ−１−６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロンよりも卓越していると思われる。

玉上表ＡＤＰＲＴの芳香族インヒビターについての１５０データ且−号　インヒビ　− 　±ｎ２ＬＭ１　６−ＮＨ！−１，２−ベンゾピロン″″　３７０２　５−■−６−Ｎｌ＋□ −１．２−ヘンゾピロン′″　４１３　３−Ｎｏ−ベンズアミド　１５４　５（７）−ニトロソ−（２Ｈ）−イソキノリノン−１３５６−ＮＯ−１，２ −ベンゾピロン　４０６　５−ｌ−６−ＩＪＯ−１，２−ベンゾピロン　４００＊：ニトロソ化合物５及び６の生化学的前駆体。

＊＊：５−及び７−ニトロソ化合物の混合物。

アッセイ条件：ＡＤＰＲＴ、　０．４Ｈｇ；。。ＤＮ＾、４Ｈｇ；５０ＭＭのトリス−ＨＣｌ　、５０ｗＦＩのＭＣＩ　、５ｍＭの２−メルカプトエタノール、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、Ｏ，ＩｍＭのＮＡＤ　（［３Ｉ　Ｐ　）−ラヘルされた）、ρ■７．５の？８液５０μ２中、０．８〜６００　μＭの間に希釈されたインヒビター５０μ２゜２５°Ｃで４分間の重合。

第１図は、いくつかの濃度でのニトロソ化合物インヒビターと共に２時間のインキュヘーンヨンの後に観察されるＡＤＰＲＴポリメラーゼ活性の％不活性化を示す。

６５　Ｚｎ　ｔ　”及びＡＤＰＲＴ結合のＺｎ”の間の平衡を包含する追加の実験は、ニトロソ化合物のへ〇ＰＰＴ阻害活性がＺｎ”の放出によりタンパク質を不安定化することによって作用すると思われることを示唆する（ＢｕｋｉＫ、Ｇ、、Ｂａｕｅｒ　Ｐ、Ｔ、、門ｅｎｄｅｌｅｙｅｖ、Ｆ、；　Ｈａｋａｍ、Ｈ，ａｎｄ　Ｋｕｎ　Ｅ、（１９９１）ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ、　２９０：　１８１〜１８５）。ＡＤＰＲＴインヒビターにツイテノ上記作用の機構は、推論的であり、そして本発明の請求の範囲を制限するものではない。

■、ニトロソヘンゾビロン、ニトロソベンズアミド　びニトロソ−イソキノリノンの　８・　−戸パ種々のヒト白血病細胞系が、上昇する濃度の６−アミノ−１，２−ベンゾピロン（八ＢＰ）、５−ヨード−６−アミノ−１，２−ベンゾピロン（ＩＡＢＰ）　、６−ニトロチー１．２−ベンゾピロン（ＮＯ，ＢＰ）、６−ニトロソ−１，２− ベンゾピロン（ＮＯＢＰ）　、３−ニトロソベンズアミド（ＮＯＢＡ）又は５（７）−ニトロソ−１（２）１）−イソキノリノン（ＮＯＱ）　（５−ニトロソ及び７−ニトロソ異性体の混合物）が暴露され、そして〔３Ｈ〕チミジン摂取のレベルが細胞増殖の測定として決定される実験を行なった。第２図に示されるように、試験される個々の細胞系（８５５−２細胞、第２Ａ図；Ｈ９細胞、第２Ｂ図、１ＩＬ−６０細胞、第２Ｃ図、　Ｋ５６２細胞、第２Ｄ図）に関しては、ニトロソ含有リガンド（ＮＯＢＰ、　ＮＯＢ＾、　Ｎ０Ｑ）は、他の化合物よりも低いモル濃度で”Ｈ−チミジン摂取を阻害することができた。Ｎ０ＢＰ、　Ｎ０ＢＡ及びＮＯＱは、１０μＭの濃度で３８−チミジン摂取を強力的に阻害し、この濃度で、他の化合物は、比較的わずかな阻害効果を示した。

１０％ウシ胎児血清（Ｆｅ２）において増殖せしめられたＨ９細胞による実験（第２Ｂ図）は、ＮＯＱが最っとも可能性あるインヒビターであることが見出され、これは、１０μＭレヘルで最っとも完全な阻害を示した。　Ｎ０ＢＰは、１０ μＭでチミジン摂取において約３０％の低下を示し、そして１００μＭで摂取のほとんど完全な阻害を示した。Ｎ０ＢＡは、１０μＭで７５％レベルの阻害、１００μＭで約８５％レベルの阻害、及び２５０μＭでほとんど完全なレベルの阻害を示した。残るアミノ及びニトロ化合物は、有意に低い可能性を有し、そして１０００　ＩＩＭの濃度に達するまで、完全な阻害を示さなかった。

１０％ウシ胎児血清において増殖せしめられたに５６２細胞についての実験（第２Ｄ図）は、ＮＯＱ及びＮ０ＢＰが細胞増殖の最っとも可能性あるインヒビターであることが見出された。ＮＯＱ及びＮ０ＢＰの両者は、１０μＭの濃度でほとんど完全な阻害をもたらした。Ｎ０ＢＰは、ＮＯＱとほとんど同し可能性を有し、そして１０μＭの濃度で約９０％の阻害、及び１００μＭの濃度でほとんど完全な阻害を生成した。他の３種の試験された化合物は、有意に低い可能性を有した。

１０％ウシ胎児血清において増殖せしめられた８５５−２細胞についての実験（第２Ａ図）は、ＮＯＱ及びＮ０ＢＰが１０μＭの濃度でほとんど完全な阻害を生成することが見出された。１μＭの濃度で、ＮＯＱは、ＮＯＢよりもいく分高い阻害を生成し、そしてＮ０ＢＰはＮ０ＢＡよりもいく分高い阻害を生成した。試験された他の３種の化合物は、有意に低い可能性を有した。

Ｎ０ＢＰの増殖阻害効果に対する種々の増殖因子の効果を試験した。

（１）１０％ウシ胎児血清、（２）自己分泌増殖因子（ＡＧＦ）及び（３）低分子量−ＢＣＧＦ　（Ｔ細胞由来のリンホカイン）を有する培地において増殖せしめられた８５５−２細胞を、上昇する濃度のＡＤＲＰＴリガンドに暴露した。その結果は、第２図（Ａ、Ｅ、Ｆ）に供給される。個々の増殖因子で増殖せしめられた細胞は、ニトロソ含有化合物によりたぶん阻害され、そして５〜ｌＯｕＭの濃度で１００％阻害をもたらした。従って、Ｎ０ＢＰ、　Ｎ０ＢＡ及びＮＯＱは、増殖因子活性の源にもががねらず、可能性ある阻害効果を示す。

Ｎ０ＢＰ及びＮ０ＢＡが、増殖因子の不活性化を通してそれらの増殖阻害効果を示す可能性を排除するために、上昇する濃度のウシ胎児血清（Ｆｅ２）の存在下で８５５−２細胞に対するｌＯμＭのＮ０ＢＰ又はＮ０ＢＡ　（一定濃度）の効果を試験した（Ｆｅ２は８５５−２細胞についての増殖因子を含む）。そのデータは第３図に提供される。増殖阻止は、Ｆｅ２の濃度に関係なく生じる。従って、Ｎ０ＢＰの作用の態様は、増殖因子の拮抗性によって存在するのではなく、しかしＤＮＡ複製に関連するＡＤＰＲＴ部位で存在するように思える。

Ｎ０ＢＰ及びＮ０ＢＡの腫瘍細胞阻害濃度は、正常な細胞の生存性に悪影響を及ぼさないことが示された。種々の癌細胞（８５５−２及びＨＬ　−６０白血病細胞、０３２．　Ｄ３７及びＣＲＬ７７１２グリオブラストーマ細胞系、１８細胞腫瘍細胞系、ＬＬ２１０ネズミ白血病細胞系、ＭＤＡ−４６８ヒト乳腫瘍細胞系）及び正常な細胞（好中球増多性白血球及び骨髄又は末梢血液細胞）の機能が化合物の不在又は存在下で評価される実験を行なった。結果は、第４〜９図に示される。さらに、そのデータは、１０μＭの濃度のニトロソ含有リガンドが細胞増殖を効果的に抑制し、そして正常な細胞に対してその機能を単に適度な効果で示したことを示す。

■１世上０．２μＭ、４μＭ、８μＭ及び１０μＭのＮ０ＢＰの細胞毒性を、正常なヒト幹細胞（ＰＢＳＣ）のコニニー形成（ＣＦＵ−ＧＭ）に対する化合物の効果を試験することによって測定した。その実験の結果は、第５Ｂ図に提供される。毒性は、８５５−２細胞増殖を阻止するのに十分なＮＯ［ＩＰのレベルが試験される場合でさえ、検出されなかった。

比較が（八ＢＰ）　６−アミノ−】、２−ベンゾピロン１１、（１＾ＢＰ）　５〜１−６−アミノ−１，２−ベンゾピロン２５０μＭ、　（Ｎｏ□ＢＰ）　６　 −二トロ″Ｐ−１，２−ヘンゾピロン（弱い活性）２５０μＭ、　１ｉＯＢＰ１０μＭ、及びＮ０ＢＡ　１０μＭ間で行なわれる、類領するＣＦＵ幹細胞毒性ア、セイを行なった。その実験の結果は第５Ａ図に示される。６−アミノ−１，２ −ベンゾピロン、５−１−６−アミノ−１，２−ベンゾピロン及び６−ニトロ誘導体は試験された一定用量で毒性であるが、はとんど非効果的な（腫瘍細胞に対して）６−二トロ誘導体及びひしように効果的な（腫瘍細胞に対して）　Ｎ０ＢＰ及びＮ０ＢＡは非毒性であった。

正常なヒト末梢血液好中球増多性白血球によるスーパーオキシド生成に対するｌＯμＭのＮ０ＢＰ及びＮ０ＢＡの効果を試験した。その結果は第■表に示される。スーパーオキシド生成の唯一の少々の低下が観ヒト好中球によるスーパーオキシドの生成に対する１０μＭのＮ０ＢＰ及びＮ０ＢＡの効果１０１０５Ｐ　＋　Ｐ門Ａ　：　５５．９±７．７＋１０μＭのＮ０ＢＰ　３４．１±１４．１＋１０μＭのＮ０ＢＡ　４４．４±１０．０■、ル較苅圭Ｍλ 高い毒性の化学療法化合物であるビンクリスチンは、白血病及び他の悪性の処理に現在使用されているものである。インヒドロで増殖される８５５−２白血病細胞に対してアッセイされる場合、１０μＭのＮ０ＢＰと同じレベルの増殖阻害を生成するビンクリスチンの濃度を決定するために研究を行なった。ビンクリスチンを、０．１．　１．１０及び１００μＭの投与量で試験した。第７図に示されるように、１００μＭのビンクリスチン（高い毒性の濃度）が、１０μＭのＮ０ＢＰと同じレベルの阻害を生成するために必要とされ、従ってＮ０ＢＰは等しい濃度のビンクリスチンよりも約１０倍高い可能性を存し、そして正常な細胞に対しては毒性を示さない。

従って、またＡＤＰＲＴポリメラーゼ活性のインヒビターでもある一定の芳香族ニトロソ分子は、低い毒性と組合されるそれらの有効性のために、有用な化学療法的な細胞増殖抑制剤であり得る。

）１１Ｖ感染を阻害するｌｌ０ＢＰ（６−ニトロソ−１，２−ベンゾピロン）及びＮ０ＢＡ（３−ニトロソベンズアミド）の能力を、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆｌｍｍｕｎｏｌｏ　１ｃａｌ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　７６　：　１７１〜１８３　（１９８５）ニ記載される方法を用いて試験した。それらの２種の薬物への暴露は、ウィルス感染の開始でたった３０分間であり、そして薬物は決して再び添加されなかった。第■表に与えられる結果は、Ｉ（ＩＶによる細胞培養物の感染の後１０日でＩＤＳ。の旧Ｖ力価を提供する。第■表におけるデータは、１０日Ｍのニトロソ含有リガンドがＨＩＶ−１感染力価の３対数低下を引き起こすことを示す。

第１表」基サンプル　攻」倉９グ工匹ス　（文・　１０５゜）ウィルスのみ　５．２５＋５００μＭのＡＢＰ　４．５０＋２５０μＭの夏ＡＲＰ　４．６６＋２５０μＭのＮＯ□ＢＰ　４．９３＋ｌＯμＭのＮ０ＢＰ　２．０１＋１０μＭのＮ０ＢＡ　１．０５＋１０μＭのＮＯＯ１，７３ ■、　ＡＤＰＲＴリガンドの　゛」１二１１乙ヱ」／−培養物及び軟質寒天に見出される８５５−２細胞の増殖の阻害が、ニトロソ化合物Ｎ０ＢＰ、　Ｎ０ＢＡ、及びＮＯＱの細胞増殖抑制又は殺細胞効果によるかどうかを決定するための実験を行なった。Ｉ　ＸＩＯ’　／ｄ（骨髄アッセイに使用される濃度）での細胞を、］、　、　２．５．５及び１０μＭでのＮ０ＢＰ、　ＮＯＢ＾及びＮＯＱにより２時間処理し、次に１０％ウシ胎児血清により刺激し、そして２４時間インキュベートした０次に、１ｍｇ／ｄでのＭＴＴ　（ｉ　（４，５−ジメチル−２ −イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムプロミド）を、１６時間添加した０次に、ペレット化された細胞の吸光度を、細胞を溶解するためにＤＭＳＯを添加した後、５５０ｎ＋ｉで測定した。

結果：１０μＭのＮ０ＢＰ、　Ｎ０ＢＡ及びＮＯＱにより、完全な殺害が、ｉｏｏ、ｏｏ。

により本明細書に組込まれる。

前述の明細書は、当業者の本発明の実施を可能にするのに十分であると思われる。実際、医薬製剤の分野又は関連する分野において熟練した人々に対して明らかである本発明を実施するための上記態様の種々の修飾が、本発明の請求の範囲内で実施され得る。

ＦＩＧ、１ニトロソ化合物によるＡＤＰＰＰの不活性化０．０　０．２　０．４　０．６　０．８　１．０インヒビターの濃度、嘘ＦＩＧ、　２ＡＦｅ２における８５５−２細胞ＦＩＧ、２ＥＦｅ２におけるＨ９細胞 −ＡＢＰ　＋ＩＡＢＰ　＋Ｎ０２８Ｐ　−Ｅ）−ＮＯＢＰ　−４−Ｎ○ＢＡ十Ｎ（３）化合物の濃度（ｌｏｇ　ｕＭ）ＦＩＧ、２ＤＦｅ２におけるに５６２細胞 −ＡＢＰ　−＋−ＩＡＢＰ　−＋−ＮＯ２ＢＰ　−＋Ｎ０ＢＰ　−Ａ−Ｎ０ＢＡ　−ｅ−Ｎ囚ＦＩＧ、　２ＥＡＧＦにおける８５５−２細胞化合物の濃度（ｌｏｇ　ｕＭ）ＦＩＧ、２Ｆ８５５−２細胞＋Ｌλ留−ＢＣＧＦ −ＡＢＰ　＋ＩＡＢＰ　−４−ＮＯ２８Ｐ　＋−ＮＯＢＰ　−Ａ−Ｎ０ＢＡ　− ＋−Ｎ０ＱＦＩＧ、　３＋Ｎ０ＢＰ　５３±５３３０±１３５３±３８３９±１５＋Ｎ０ＥＩＡ　１００　±８４　１７９　＋：２０７　１５　土８　１４±１３ＦＩＧ、　４ＣＦＵ　（平均±ＳＤ、　ｎ＝８）口　細胞【ココ　Ｎｏ日Ｐ口　ＮＯＢＡＦＩＧ、　５ＡＡＤＰＲＰリガンドへの連続した暴露の機能としてのＣＦＵ−ＧＭｏ　１０　２０　３０　４０　５０ＣＦＵ−ＧＭ　（平均　土ＳＤ、ｎ＝すＦＩＧ、５ＢＮＯＢＰ濃度ＦＩＧ、７ピンクリスチン＆ＮＯ−ＮＰ８５５−２細胞系間の比較ＰＭＦＩＧ、　８ニトロソ芳香族化合物によるＭＤＡ−４８６細胞系の阻害０．１　１　１０　１００　１１０００１ｏ　（ｕＭ）＋　Ｎ０ＢＰ　−に−ＮＯＢＡ　＋　ＮＯＱＦＩＧ、９Ｌ　１２１０ネズミ白血病細胞のＢＺＰの投与量応答阻害０．１　１　１０　１１００１ｏ　（ｕＭ） −Ｎ０ＢＰ　＋Ｎ０ＢＡ　−Ｉ−Ｎ園フロントページの続き（５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，’　識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３１／４４　ＡＤＵ　９４５４−４ＣＣＯ７Ｄ　２１７／２４　７４３１−４Ｃ３１１／１２　９３６０−４Ｃ３１１／１４　９３６０−４Ｃ３１１／１６　９３６０−４Ｃ３１１／１８　９３６０−４Ｃ（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、　ＥＳ、ＰＲ，ＧＢ、　ＧＲ，ＩＴ、　ＬＵ、　ＮＬ、ＳＥ）、０Ａ（ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、ＴＧ）、ＡＴ、ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＣＨ，ＤＥ、　ＤＫ、　ＥＳ。

ＦＩ、ＧＢ、ＨＵ、ＪＰ、ＫＰ、ＫＲ，ＬＫ、ＬＵ、ＭＣ，ＭＧ、　ＭＷ、　ＮＬ、　ＮＯ，ＰＬ、　ＲＯ，ＳＤ、ＳＥＩ（７２）発明者　メンプレイニブ、ジェロームアメリカ合衆国、カリフォルニア　９４１１７゜サンフランシスコ、スタニャンストリート（７２）発明者　ライス、ウィリアム　ジー。

アメリカ合衆国、カリフォルニア　３０２７８゜スニールビル、コープイツト　ループ

Claims

【特許請求の範囲】

１．下記式：（Ｉ）▲数式、化学式、表等があります▼〔式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５、及びＲ６は、水素及びニトロソから成る群から選択され、そしてＲ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５、及びＲ６のうちたった１つはニトロソ基である〕を有する化合物。
２．前記Ｒ４がニトロソ基である請求の範囲第１項記載の化合物。
３．下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。
４．下記式：（ＩＩＩ）▲数式、化学式、表等があります▼〔式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４、及びＲ５は、水素及びニトロソから成る群から選択され、そしてＲ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４、及びＲ５のうちたった１つはニトロソ基である〕を有する化合物。
５．Ｒ２又はＲ４がニトロソ基である請求の範囲第４項記載の化合物。
６．癌及びレトロウイルス疾患の処理のための組成物であって、請求の範囲第１項記載の化合物を含んで成る組成物。
７．癌及びレトロウイルス疾患の処理のための組成物であって、下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ１，Ｒ２、及びＲ３は水素及びニトロソから成る群から選択され、そしてＲ１，Ｒ２、及びＲ３のうちたった１つはニトロソ基である〕で表わされる化合物を含んで成る組成物。
８．癌及びレトロウイルス疾患の処理のための組成物であって、請求の範囲第４項記載の化合物を含んで成る組成物。
９．癌及びレトロウイルス疾患の処理のための方法であって、請求の範囲第１項記載の化合物の有効量を投与する段階を含んで成る方法。
１０．癌及びレトロウイルス疾患の処理のための方法であって、下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ１，Ｒ２、及びＲ３は水素及びニトロソから成る群から選択され、そしてＲ１、Ｒ２、及びＲ３のうちたった１つはニトロソ基である〕で表わされる請求の範囲第２項記載の化合物の有効量を投与する段階を含んで成る方法。
１１．癌及びレトロウイルス疾患の処理のための方法であって、請求の範囲第４項記載の化合物の有効量を投与する段階を含んで成る方法。