JPH0724599B2 - 体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検出系 - Google Patents
体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検出系Info
- Publication number
- JPH0724599B2 JPH0724599B2 JP1101849A JP10184989A JPH0724599B2 JP H0724599 B2 JPH0724599 B2 JP H0724599B2 JP 1101849 A JP1101849 A JP 1101849A JP 10184989 A JP10184989 A JP 10184989A JP H0724599 B2 JPH0724599 B2 JP H0724599B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- carrier
- action
- detection system
- ester
- proteolytic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/525—Multi-layer analytical elements
- G01N33/526—Multi-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2334/00—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases
- C12Q2334/50—Indoles
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2334/00—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases
- C12Q2334/70—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases the product, e.g. phenol, naphthol being diazotised in situ, e.g. with Fast Red
Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、体液のエステル分解作用及び／又はタンパク
質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体
結合の多成分検出系に関する。
質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体
結合の多成分検出系に関する。
従来の技術 体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
を有する内容物の検出は極めて重要になつている。特に
腎及び泌尿生殖器路の疾患の診断にとつて、尿中の白血
球に内在するエステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用に基づいて白血球を検出することは重要である。
このためには例えば試験片の形の担体結合検出系が特に
有利であることが明らかになつた。それというのもこの
検出系を試験すべき液体試料中に短時間浸漬すればよ
く、引続いて試験片を試料から取り出した後で試料１μ
当りの白血球数の測定が例えば呈色に基づいて短時間
内に可能であるからである。このようにして、体液中の
そのような内容物を検出するための清潔で簡単かつ迅速
な実施が、このために試料を用いて煩雑で、時間及び経
費のかかる操作あるいは試料のそのような処理を行なう
必要もなく可能である。
を有する内容物の検出は極めて重要になつている。特に
腎及び泌尿生殖器路の疾患の診断にとつて、尿中の白血
球に内在するエステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用に基づいて白血球を検出することは重要である。
このためには例えば試験片の形の担体結合検出系が特に
有利であることが明らかになつた。それというのもこの
検出系を試験すべき液体試料中に短時間浸漬すればよ
く、引続いて試験片を試料から取り出した後で試料１μ
当りの白血球数の測定が例えば呈色に基づいて短時間
内に可能であるからである。このようにして、体液中の
そのような内容物を検出するための清潔で簡単かつ迅速
な実施が、このために試料を用いて煩雑で、時間及び経
費のかかる操作あるいは試料のそのような処理を行なう
必要もなく可能である。
例えば尿中の白血球のような体液中のエステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用の内容物を比色定量する
ための有利な検出系としては、技術水準からとりわけ所
謂多成分系が公知である。これは、数種の化学物質より
成るような試薬系で、化学物質のうち少なくとも１種は
体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
の内容物により変化して、反応生成物が検出系の１つの
成分と又は数種の他の成分との遂次反応において反応し
て着色物質が生成し、これを比色定量することができ
る。形成された着色物質の量が試料中のエステル分解作
用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物の量の
尺度である。
及び／又はタンパク質分解作用の内容物を比色定量する
ための有利な検出系としては、技術水準からとりわけ所
謂多成分系が公知である。これは、数種の化学物質より
成るような試薬系で、化学物質のうち少なくとも１種は
体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
の内容物により変化して、反応生成物が検出系の１つの
成分と又は数種の他の成分との遂次反応において反応し
て着色物質が生成し、これを比色定量することができ
る。形成された着色物質の量が試料中のエステル分解作
用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物の量の
尺度である。
例えば、このような体液中のエステル分解作用及び／又
はタンパク質分解作用を有する内容物の検出には、初め
にエステルが検出すべき内容物により分解されかつ生成
したヒドロキシル基が他の反応性物質により反応して色
素を形成する２成分系が特に好適である。例えば、この
原理による担体結合の多成分系はヨーロツパ特許公開第
0039880号明細書から公知である。
はタンパク質分解作用を有する内容物の検出には、初め
にエステルが検出すべき内容物により分解されかつ生成
したヒドロキシル基が他の反応性物質により反応して色
素を形成する２成分系が特に好適である。例えば、この
原理による担体結合の多成分系はヨーロツパ特許公開第
0039880号明細書から公知である。
この特許公開明細書は、例えば尿中の白血球のような体
液中のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
を有する内容物を測定するための、担体結合の検出系に
関し、この系では前記の内容物により分解可能なエステ
ルと、エステル分解により生成したヒドロキシ化合物の
ための反応成分としてのジアゾニウム塩とが一緒に同一
の試薬担体上に施されている。検出系の全成分が同一の
試薬担体上に一緒に存在することは、エステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用の内容物との反応により
生成した物質を更に反応させて呈色最終生成物に変換さ
せることができる点を明らかに保証するので最適である
ように思われる。
液中のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
を有する内容物を測定するための、担体結合の検出系に
関し、この系では前記の内容物により分解可能なエステ
ルと、エステル分解により生成したヒドロキシ化合物の
ための反応成分としてのジアゾニウム塩とが一緒に同一
の試薬担体上に施されている。検出系の全成分が同一の
試薬担体上に一緒に存在することは、エステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用の内容物との反応により
生成した物質を更に反応させて呈色最終生成物に変換さ
せることができる点を明らかに保証するので最適である
ように思われる。
検出反応の迅速かつ完全な進行は、敏感な試験のための
ベースである。前記の検出系の場合、尿中の白血球の検
出限界は約２分後の数値の読み捕りの際に尿１μ当り
白血球約15〜25個である。しかしながら医者にとつては
更に敏感な検出剤を開示することが望ましい。
ベースである。前記の検出系の場合、尿中の白血球の検
出限界は約２分後の数値の読み捕りの際に尿１μ当り
白血球約15〜25個である。しかしながら医者にとつては
更に敏感な検出剤を開示することが望ましい。
発明が解決しようとする課題 それ故、本発明は、公知の担体結合の検出系の感度を上
廻り、検出系により表示される数値を読み取るまでの待
ち時間が長いという欠点を伴なわずに、体液のエステル
分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物
を比色定量するための、担体結合の多成分系検出系を医
学的診断のために開発するという課題に基づいている。
廻り、検出系により表示される数値を読み取るまでの待
ち時間が長いという欠点を伴なわずに、体液のエステル
分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物
を比色定量するための、担体結合の多成分系検出系を医
学的診断のために開発するという課題に基づいている。
課題を解決するための手段 従つて、エステル分解作用及び／又は蛋白質分解作用を
有する内容物によりエステル分解及び／又は蛋白質分解
可能な成分と、この反応生成物と反応し有色物質を形成
する成分とを含有し、この際これらの成分が相互間で液
体交換を可能にする別々の試薬担体中に存在し、かつ分
解可能な成分を含有する試薬担体がプラスチック担体と
該反応生成物と反応し有色物質を形成する成分を含有す
る試薬担体との間に存在する、体液のエステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定
量するための、冒頭に定義した多成分検出系が見出され
た。
有する内容物によりエステル分解及び／又は蛋白質分解
可能な成分と、この反応生成物と反応し有色物質を形成
する成分とを含有し、この際これらの成分が相互間で液
体交換を可能にする別々の試薬担体中に存在し、かつ分
解可能な成分を含有する試薬担体がプラスチック担体と
該反応生成物と反応し有色物質を形成する成分を含有す
る試薬担体との間に存在する、体液のエステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定
量するための、冒頭に定義した多成分検出系が見出され
た。
その際、体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質
分解作用を有する内容物を比色定量するための多成分検
出系としては、技術水準からこれについて公知の試薬系
が該当する。エステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用により分解可能なエステルとジアゾニウム塩とを
含有するような多成分検出系が特に有利であることが明
らかになつた。そのような系はとりわけ尿中の白血球を
測定するのに好適であることが明らかになつた。更にま
た、該系と水溶液もしくは体液、例えば全血液、血清、
髄液、パンクレアーゼ分泌物又は水性の便浸出物中のエ
ラスターゼ、キモトリプシン又はトリプシンのようなタ
ンパク質分解酵素を検出するのに利用することができ
る。
分解作用を有する内容物を比色定量するための多成分検
出系としては、技術水準からこれについて公知の試薬系
が該当する。エステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用により分解可能なエステルとジアゾニウム塩とを
含有するような多成分検出系が特に有利であることが明
らかになつた。そのような系はとりわけ尿中の白血球を
測定するのに好適であることが明らかになつた。更にま
た、該系と水溶液もしくは体液、例えば全血液、血清、
髄液、パンクレアーゼ分泌物又は水性の便浸出物中のエ
ラスターゼ、キモトリプシン又はトリプシンのようなタ
ンパク質分解酵素を検出するのに利用することができ
る。
ヨーロツパ特許公開第0039880号明細書に挙げられてい
る試薬系を本発明により特に有利に使用することができ
る。このために、該文献に記載されている種類の、エス
テル分解作用及び／又はタンパク質分解作用により分解
可能なエステル少なくとも１種及びジアゾニウム塩少な
くとも１種を別々の試薬担体上に施す。
る試薬系を本発明により特に有利に使用することができ
る。このために、該文献に記載されている種類の、エス
テル分解作用及び／又はタンパク質分解作用により分解
可能なエステル少なくとも１種及びジアゾニウム塩少な
くとも１種を別々の試薬担体上に施す。
検出反応に直接化学的に関与する検出系の成分、例えば
エステル及びジアゾニウム塩と共に、検出系は多の助
剤、例えば緩衝物質、湿潤剤、安定化剤及び／又は賦活
剤を含有していてもよい。このような助剤は、例えばヨ
ーロツパ特許公開第0039880号明細書からも公知であ
る。しかしながら助剤は本発明による検出系の成分を形
成するものではない。
エステル及びジアゾニウム塩と共に、検出系は多の助
剤、例えば緩衝物質、湿潤剤、安定化剤及び／又は賦活
剤を含有していてもよい。このような助剤は、例えばヨ
ーロツパ特許公開第0039880号明細書からも公知であ
る。しかしながら助剤は本発明による検出系の成分を形
成するものではない。
試薬担体としては、一般にこのために使用することので
きるすべての材料、例えば吸収 か又は膨潤性の、多孔
性か又は非多孔性の材料あるいは被験液体との接触の際
にその中に溶けるような材料を使用することができる。
例えばセルロース、瀘紙、合成繊維フリース、ガラス繊
維フリース、ポリビニルエステルフイルム、ポリアミド
フイルム又は例えばキサンタンゴム製のフイルムが挙げ
られる。
きるすべての材料、例えば吸収 か又は膨潤性の、多孔
性か又は非多孔性の材料あるいは被験液体との接触の際
にその中に溶けるような材料を使用することができる。
例えばセルロース、瀘紙、合成繊維フリース、ガラス繊
維フリース、ポリビニルエステルフイルム、ポリアミド
フイルム又は例えばキサンタンゴム製のフイルムが挙げ
られる。
本発明による担体結合の検出剤は検出系の成分を異なる
試薬担体中に包含する。検出反応に直接化学的に関与す
る試薬は、被験液体との接触後に、初めて、少なくとも
部分的にその液体中に溶解することにより相互に混合す
る。その際に、別々の試薬担体は区分されているが、担
体間で液体交換が可能であるように配置されている。本
発明による担体結合の検出剤の優れた実施形では、例え
ばエステル及びジアゾニウム塩のような検出系の成分を
それぞれ含有する試薬担体が上下に重ねられ、堆積体と
して配置されている。この試薬担体堆積体をより取り扱
い易くするために、この堆積体は例えば剛性シートのよ
うなプラスチツク担体上に配置されていてよい。プラス
チツク担体上への堆積体の固定は、例えばネツト掛け、
側部接着又は試薬担体をプラスチツク担体上に接着させ
かつ他の試薬担体を先行の担体上に点接着することによ
り行なうことができる。被験液体を良好に吸収させるた
めには、そのような試薬担体堆積体の下に例えば空フリ
ースを設けてもよい。
試薬担体中に包含する。検出反応に直接化学的に関与す
る試薬は、被験液体との接触後に、初めて、少なくとも
部分的にその液体中に溶解することにより相互に混合す
る。その際に、別々の試薬担体は区分されているが、担
体間で液体交換が可能であるように配置されている。本
発明による担体結合の検出剤の優れた実施形では、例え
ばエステル及びジアゾニウム塩のような検出系の成分を
それぞれ含有する試薬担体が上下に重ねられ、堆積体と
して配置されている。この試薬担体堆積体をより取り扱
い易くするために、この堆積体は例えば剛性シートのよ
うなプラスチツク担体上に配置されていてよい。プラス
チツク担体上への堆積体の固定は、例えばネツト掛け、
側部接着又は試薬担体をプラスチツク担体上に接着させ
かつ他の試薬担体を先行の担体上に点接着することによ
り行なうことができる。被験液体を良好に吸収させるた
めには、そのような試薬担体堆積体の下に例えば空フリ
ースを設けてもよい。
直接プラスチツク担体上に設ける試薬担体の材料として
は、ポリエステルフイルム又はポリアミドフイルムのよ
うなプラスチツクフイルムあるいはセルロースフリース
のような吸収性材料が特に好適である。その上に設ける
試薬担体には、例えば織物、半透明の多孔性材料、透明
のフイルムあるいは被験液体で溶ける材料が特に有利で
ある。被験液体との接触、例えばそのような担体結合の
検出剤中への浸漬により又は被験液体を計量投与するこ
とにより試薬担体中に包含されている検出系成分が少な
くとも一部溶解し、全体的には溶解過程で混合し、つい
にはエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を
有する内容物の存在では検出反応が開始する。
は、ポリエステルフイルム又はポリアミドフイルムのよ
うなプラスチツクフイルムあるいはセルロースフリース
のような吸収性材料が特に好適である。その上に設ける
試薬担体には、例えば織物、半透明の多孔性材料、透明
のフイルムあるいは被験液体で溶ける材料が特に有利で
ある。被験液体との接触、例えばそのような担体結合の
検出剤中への浸漬により又は被験液体を計量投与するこ
とにより試薬担体中に包含されている検出系成分が少な
くとも一部溶解し、全体的には溶解過程で混合し、つい
にはエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を
有する内容物の存在では検出反応が開始する。
本発明による担体結合の検出剤は従来公知の剤に比べて
倍以上の感度を示し驚異的であつた。２分間の待ち時間
で試料１μ当り５個の白血球を比色定量することがで
きる。試料１μ当り白血球10個以上の数だと担体結合
の検出剤で湿潤して１分後には既に読み取りすることが
できる。
倍以上の感度を示し驚異的であつた。２分間の待ち時間
で試料１μ当り５個の白血球を比色定量することがで
きる。試料１μ当り白血球10個以上の数だと担体結合
の検出剤で湿潤して１分後には既に読み取りすることが
できる。
実施例 次に本発明を実施例により詳説するが、これに限定され
るものではない。
るものではない。
例１ 尿中白血球を検出するための試験感度 Ａ）エステル及びジアゾニウム塩を１回で含浸させた技
術水準による担体結合の検出系（第１図）： ペーパーフリース23SL（Schleicher＆Schll社、西ド
イツ国、Dassel在）を次のように助剤及び検出系の成分
で含浸した： ａ）水１中に硼酸65g及び水酸化ナトリウム21gを含有
しかつ1N塩酸でpH8.0に調節した含浸溶液で前含浸し
た。引続いて、含浸したフリースを乾燥させた。
術水準による担体結合の検出系（第１図）： ペーパーフリース23SL（Schleicher＆Schll社、西ド
イツ国、Dassel在）を次のように助剤及び検出系の成分
で含浸した： ａ）水１中に硼酸65g及び水酸化ナトリウム21gを含有
しかつ1N塩酸でpH8.0に調節した含浸溶液で前含浸し
た。引続いて、含浸したフリースを乾燥させた。
ｂ）ａ）により製造した緩衝液含浸フリースをエタノー
ル１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ）−ベ
ンゼン−ジアゾニウム−テトラクロロチンケート0.35
g、３−（Ｎ−トルエン−４′−スルホニル−Ｌ−アラ
ニルオキシ）−インドール0.78g、リン酸トリモルホリ
ド81.3g及びデカノール21.7mlを含有する溶液で主要含
浸を行ない、引続いて乾燥させた。
ル１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ）−ベ
ンゼン−ジアゾニウム−テトラクロロチンケート0.35
g、３−（Ｎ−トルエン−４′−スルホニル−Ｌ−アラ
ニルオキシ）−インドール0.78g、リン酸トリモルホリ
ド81.3g及びデカノール21.7mlを含有する溶液で主要含
浸を行ない、引続いて乾燥させた。
このように含浸させたフリースを６×6mmの正方形に切
断し、このように製造した試薬担体１を長さ12.6cm、幅
6mm及び厚さ1mmのポリスチレン帯材３上に糸の太さ60μ
ｍのナイロンネツト２ NY75HC（Ｚricher Beuteltuc
hfabrik AG、スイス国、チユーリツヒ在）により固定し
た。このためにこのナイロンネツトを熱時に約175℃プ
ラスチツク帯材と部分的に溶着した。
断し、このように製造した試薬担体１を長さ12.6cm、幅
6mm及び厚さ1mmのポリスチレン帯材３上に糸の太さ60μ
ｍのナイロンネツト２ NY75HC（Ｚricher Beuteltuc
hfabrik AG、スイス国、チユーリツヒ在）により固定し
た。このためにこのナイロンネツトを熱時に約175℃プ
ラスチツク帯材と部分的に溶着した。
Ｂ）エステル及びジアゾニウム塩を別々に含浸した担体
結合の検出系（第１図） ペーパーフリース23SL（Schleicher＆Schll社、西ド
イツ国、Dassel在）を次のように検出系の助剤及び成分
で含浸した： ａ）水１中に硼酸65g及び水酸化ナトリウム21gを含有
しかつ1N塩酸でpH8.0に調節した含浸溶液を前含浸し
た。引続いて、この含浸フリースを乾燥させた。
結合の検出系（第１図） ペーパーフリース23SL（Schleicher＆Schll社、西ド
イツ国、Dassel在）を次のように検出系の助剤及び成分
で含浸した： ａ）水１中に硼酸65g及び水酸化ナトリウム21gを含有
しかつ1N塩酸でpH8.0に調節した含浸溶液を前含浸し
た。引続いて、この含浸フリースを乾燥させた。
ｂ）ａ）により製造した緩衝剤含浸フリースを、エタノ
ール１中に３−（Ｎ−トルエン−４′−スルホニル−
Ｌ−アラニルオキシ）−インドール0.78g、リン酸トリ
モルホリド81.3g及びデカノール21.7mlを含有する溶液
で含浸し、引続いて乾燥させた。
ール１中に３−（Ｎ−トルエン−４′−スルホニル−
Ｌ−アラニルオキシ）−インドール0.78g、リン酸トリ
モルホリド81.3g及びデカノール21.7mlを含有する溶液
で含浸し、引続いて乾燥させた。
ｃ）ａ）及びｂ）により含浸したフリースを、水１中
に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ）−ベンゼン−
ジアゾニウム−テトラクロロチンケート0.37g及び酒石
酸0.22gを含有する溶液で含浸し、引続いて乾燥させ
た。
に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ）−ベンゼン−
ジアゾニウム−テトラクロロチンケート0.37g及び酒石
酸0.22gを含有する溶液で含浸し、引続いて乾燥させ
た。
このように含浸したペーパーフリースを使つてＡ）と同
様に第１図による担体結合の検出系を製造した。
様に第１図による担体結合の検出系を製造した。
Ｃ）本発明による検出系（第２図）： Ｉ）ペーパーフリース23SL（Schleicher＆Schll社、
西ドイツ国、Dassel在）を次のように含浸した： ａ）水１中に硼酸65g及び水酸化ナトリウム21gを含有
しかつ1N塩酸でpH8.0に調節した含浸溶液で前含浸し
た。引続いて、含浸フリースを乾燥させた。
西ドイツ国、Dassel在）を次のように含浸した： ａ）水１中に硼酸65g及び水酸化ナトリウム21gを含有
しかつ1N塩酸でpH8.0に調節した含浸溶液で前含浸し
た。引続いて、含浸フリースを乾燥させた。
ｂ）ａ）により製造した緩衝剤含浸フリースの主要含浸
を、エタノール１中に３−（Ｎ−トルエン−４′−ス
ルホニル−Ｌ−アラニルオキシ）−インドール0.78g、
リン酸トリモルホリド81.3g及びデカノール21.7mlを含
有する溶液で行ない、引続いて乾燥させた。
を、エタノール１中に３−（Ｎ−トルエン−４′−ス
ルホニル−Ｌ−アラニルオキシ）−インドール0.78g、
リン酸トリモルホリド81.3g及びデカノール21.7mlを含
有する溶液で行ない、引続いて乾燥させた。
II）ナイロン織物NY20HC（糸の太さ20μｍ）（Ｚrich
er Beuteltuchfabrik AG社、スイス国、チユーリツヒ
在）を、水１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリ
ノ）−ベンゼン−ジアゾニウム−テトラクロロチンケー
ト3.78g及び酒石酸2.25gを含有する溶液で含浸し、引続
いて乾燥させた。
er Beuteltuchfabrik AG社、スイス国、チユーリツヒ
在）を、水１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリ
ノ）−ベンゼン−ジアゾニウム−テトラクロロチンケー
ト3.78g及び酒石酸2.25gを含有する溶液で含浸し、引続
いて乾燥させた。
Ｉ）からの含浸ペーパーフリースを６×6mmの正方形に
切断しかつ試薬担体１とした。II）で製造したナイロン
織物も同じ大きさの正方形に切断しかつ試薬担体４とし
た。試薬担体１及び４を堆積体として、ナイロンネツト
2 NY75HC（糸の太さ60μｍ）（Ｚricher Beuteltuchf
abrik社、スイス国、チユーリツヒ在）を用いて長さ12.
6cm、幅6mm及び厚さ1mmのポリスチレン帯材３上に固定
した。ナイロンネツトはプラスチツク帯材上で熱時に約
175℃で部分溶着させた。
切断しかつ試薬担体１とした。II）で製造したナイロン
織物も同じ大きさの正方形に切断しかつ試薬担体４とし
た。試薬担体１及び４を堆積体として、ナイロンネツト
2 NY75HC（糸の太さ60μｍ）（Ｚricher Beuteltuchf
abrik社、スイス国、チユーリツヒ在）を用いて長さ12.
6cm、幅6mm及び厚さ1mmのポリスチレン帯材３上に固定
した。ナイロンネツトはプラスチツク帯材上で熱時に約
175℃で部分溶着させた。
Ｄ）白血球含有溶液は、白血球を含まない尿に血液から
単離した白血球を加えることにより製造した。検出系の
試験のために次の濃度を適用した：尿１μ当り白血球
0,5,10,20及び40個。
単離した白血球を加えることにより製造した。検出系の
試験のために次の濃度を適用した：尿１μ当り白血球
0,5,10,20及び40個。
Ａ）,B）及びＣ）で製造した試験片を白血球を含まない
尿試料と白血球を含有する試料中に浸漬しかつ２分後に
色素形成を視覚的に読み取るか又はレミツシヨン測光法
により測定した。Ａ）,B）及びＣ）に記載の検出系によ
り次の結果が得られた。
尿試料と白血球を含有する試料中に浸漬しかつ２分後に
色素形成を視覚的に読み取るか又はレミツシヨン測光法
により測定した。Ａ）,B）及びＣ）に記載の検出系によ
り次の結果が得られた。
検出系Ａ）及びＢ）（技術水準）では試料と接触してか
ら２分後では白血球の検出限界は試料１μ当り白血球
数約20であり、本発明による検出系Ｃ）では既に試料１
μ当り白血球数５である。
ら２分後では白血球の検出限界は試料１μ当り白血球
数約20であり、本発明による検出系Ｃ）では既に試料１
μ当り白血球数５である。
検出系Ｃ）を適用すると、１分後には既に試料１μ当
り白血球数５という濃度を視覚的にあるいはレミツシヨ
ン測定により検出することができる。検出系Ａ）及び
Ｂ）の場合、この短い時間では検出限界は白血球数20/
μよりも高い。
り白血球数５という濃度を視覚的にあるいはレミツシヨ
ン測定により検出することができる。検出系Ａ）及び
Ｂ）の場合、この短い時間では検出限界は白血球数20/
μよりも高い。
第１図は従来技術の担体結合の検出系の略示図であり、
第２図は本発明による検出系の略示図である。 1,4……試薬担体、２……ナイロンネツト、３……ポリ
スチレン帯材。
第２図は本発明による検出系の略示図である。 1,4……試薬担体、２……ナイロンネツト、３……ポリ
スチレン帯材。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ヴオルフガング―ラインホールト・クナツ ペ ドイツ連邦共和国ビユルシユタツト１・カ ールスバーダー・シユトラーセ ３ (56)参考文献 特開 昭62−274262（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−222770（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−182652（ＪＰ，Ａ) 特開 昭63−219397（ＪＰ，Ａ)
Claims (2)
- 【請求項１】エステル分解作用及び／又は蛋白質分解作
用を有する内容物によりエステル分解及び／又は蛋白質
分解可能な成分と、この反応生成物と反応し有色物質を
形成する成分とを含有し、この際これらの成分が相互間
で液体交換を可能にする別々の試薬担体中に存在し、か
つ分解可能な成分を含有する試薬担体がプラスチック担
体と該反応生成物と反応し有色物質を形成する成分を含
有する試薬担体との間に存在する、体液のエステル分解
作用及び／又は蛋白質分解作用を有する内容物を比色定
量するための、担体に結合した多成分検出系。 - 【請求項２】成分としてエステル分解作用及び／又は蛋
白質分解作用により分解可能なエステル少なくとも１種
及びジアゾニウム塩少なくとも１種が別々の試薬担体上
に施されている請求項１記載の検出系。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3813503A DE3813503A1 (de) | 1988-04-22 | 1988-04-22 | Traegergebundenes mehrkomponentiges nachweissystem zur kolorimetrischen bestimmung esterolytisch oder/und proteolytisch aktiver inhaltsstoffe von koerperfluessigkeiten |
| DE3813503.5 | 1988-04-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0213398A JPH0213398A (ja) | 1990-01-17 |
| JPH0724599B2 true JPH0724599B2 (ja) | 1995-03-22 |
Family
ID=6352593
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1101849A Expired - Lifetime JPH0724599B2 (ja) | 1988-04-22 | 1989-04-24 | 体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検出系 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5015572A (ja) |
| EP (1) | EP0340511B2 (ja) |
| JP (1) | JPH0724599B2 (ja) |
| KR (1) | KR910008570B1 (ja) |
| AT (1) | ATE85127T1 (ja) |
| DE (2) | DE3813503A1 (ja) |
| ES (1) | ES2053853T5 (ja) |
| GR (2) | GR3007606T3 (ja) |
| HK (1) | HK173896A (ja) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX9703163A (es) * | 1994-11-07 | 1997-07-31 | Litmus Concepts Inc | Ensayo para la iminopeptidasa de prolina y otras actividades hidroliticas. |
| US5716831A (en) * | 1995-05-24 | 1998-02-10 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Method and test kit for detecting insecticide resistance |
| US6528652B1 (en) * | 1999-01-21 | 2003-03-04 | Chronimed | Composition and device for detecting leukocytes in urine |
| US6348324B1 (en) | 1999-01-21 | 2002-02-19 | Hypoguard America Limited | Composition and device for detecting leukocytes in urine |
| JP4714565B2 (ja) | 2005-11-17 | 2011-06-29 | パイオニア株式会社 | スピーカ装置 |
| JP2014011974A (ja) * | 2012-07-04 | 2014-01-23 | Sony Corp | 化学反応用マイクロチップ及びその製造方法 |
| EP3848708A1 (en) | 2020-01-13 | 2021-07-14 | Roche Diagnostics GmbH | Reagent formulation for leukocyte test strip |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3017721A1 (de) * | 1980-05-09 | 1981-11-26 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme und dafuer geeignete substrate |
| JPS57144996A (en) * | 1981-02-27 | 1982-09-07 | Fuji Photo Film Co Ltd | Film for quantitative analysis |
| DE3118381A1 (de) * | 1981-05-09 | 1982-11-25 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Mehrschichtiges testmittel zum nachweis einer komponente einer fluessigen probe |
| JPS57208998A (en) * | 1981-06-17 | 1982-12-22 | Fuji Photo Film Co Ltd | Multi-layered analytical film for determination of transaminase |
| JPS57208997A (en) * | 1981-06-17 | 1982-12-22 | Fuji Photo Film Co Ltd | Liquid analyzing material for oxidase enzyme reaction system |
| DE3332144A1 (de) * | 1982-09-06 | 1984-03-08 | Konishiroku Photo Industry Co., Ltd., Tokyo | Analytisches element |
| DE3413119A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
| US4637979A (en) * | 1984-04-06 | 1987-01-20 | Miles Laboratories, Inc. | Composition and test device for determining the presence of leukocytes containing a zwitterion coupling agent |
| DE3413078A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Chromogene aminosaeure- und peptidester, verfahren zu deren herstellung, verwendung dieser verbindungen in analysenverfahren sowie mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
| JPS60222770A (ja) * | 1984-04-19 | 1985-11-07 | Fuji Photo Film Co Ltd | 一体型多層分析要素 |
| JPS62182652A (ja) * | 1985-06-20 | 1987-08-11 | Fuji Photo Film Co Ltd | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
| DE3616496A1 (de) * | 1986-05-16 | 1987-11-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | Analyseelement zur bestimmung von gerinnungsparametern |
| JPS63219397A (ja) * | 1986-05-28 | 1988-09-13 | Fuji Photo Film Co Ltd | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
-
1988
- 1988-04-22 DE DE3813503A patent/DE3813503A1/de not_active Ceased
-
1989
- 1989-04-14 EP EP89106745A patent/EP0340511B2/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-14 AT AT89106745T patent/ATE85127T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-04-14 ES ES89106745T patent/ES2053853T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-14 DE DE8989106745T patent/DE58903378D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-19 US US07/340,885 patent/US5015572A/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-22 KR KR1019890005381A patent/KR910008570B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1989-04-24 JP JP1101849A patent/JPH0724599B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-04-09 GR GR930400204T patent/GR3007606T3/el unknown
-
1996
- 1996-09-12 HK HK173896A patent/HK173896A/xx not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-02-27 GR GR970400377T patent/GR3022696T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0340511A1 (de) | 1989-11-08 |
| HK173896A (en) | 1996-09-20 |
| DE58903378D1 (de) | 1993-03-11 |
| JPH0213398A (ja) | 1990-01-17 |
| ES2053853T5 (es) | 1997-06-01 |
| ATE85127T1 (de) | 1993-02-15 |
| EP0340511B1 (de) | 1993-01-27 |
| DE3813503A1 (de) | 1989-11-02 |
| KR890016386A (ko) | 1989-11-29 |
| ES2053853T3 (es) | 1994-08-01 |
| EP0340511B2 (de) | 1997-01-29 |
| GR3022696T3 (en) | 1997-05-31 |
| US5015572A (en) | 1991-05-14 |
| GR3007606T3 (en) | 1993-08-31 |
| KR910008570B1 (ko) | 1991-10-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4057394A (en) | Test device and method for determining blood hemoglobin | |
| EP0345781B1 (en) | Defined volume test device | |
| US5177021A (en) | Element for immunoassay and process of using the same | |
| US5326707A (en) | Composition and device for urinary protein assay and method of using the same | |
| FI80343B (fi) | Testanordning. | |
| EP0587222B1 (en) | Dry immunoassay elements with a separate absorbent layer | |
| JP3667370B2 (ja) | 生物学的試料中の蛋白質の測定方法 | |
| JP2542047B2 (ja) | 蛋白質分析用分析方法及び要素 | |
| KR920000055B1 (ko) | 이온세기 또는 수성액체의 비중측정을 위한 방법과 시약 | |
| JPH0726960B2 (ja) | 乾式全血分析要素 | |
| JPH0627732B2 (ja) | 分析素子の製造方法 | |
| JPH0724599B2 (ja) | 体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検出系 | |
| JP3955911B2 (ja) | 尿中のアルブミン測定方法、尿中のアルブミン測定用指示薬、および尿中のアルブミン測定用試験片 | |
| AU630147B2 (en) | Process and test carrier for the determination of an enzyme from an isoenzyme mixture | |
| JP6803640B2 (ja) | 尿中ケトン体検出用試験片 | |
| JPS5844208B2 (ja) | 検査用試験片 | |
| JPH043504B2 (ja) | ||
| IL96138A (en) | Devices and methods for testing liquid samples | |
| JPH01107137A (ja) | 液体分析方法 | |
| JPH04218770A (ja) | 多層分析素子及び分析方法 | |
| JPH057500A (ja) | 乾式アミラーゼ測定法および測定用素子 | |
| JPH0619354B2 (ja) | カルシウム分析用一体型多層分析要素および分析方法 | |
| JPH026751A (ja) | 乾式分析要素 | |
| JPH04316499A (ja) | 多層分析素子及び分析方法 | |
| JPH05164759A (ja) | アルブミン測定具 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080322 Year of fee payment: 13 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090322 Year of fee payment: 14 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100322 Year of fee payment: 15 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100322 Year of fee payment: 15 |