JPH026751A - 乾式分析要素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は生化学液及び生体液のような液体を分析するの
に用いる乾式分析要素に関する。

〔従来の技術〕

水、ミルクのような食品及び生体液のごとき液体の化学
的分析がしばしば望まれ、また必要となっている。液体
分析を容易にする様々な分析要素が知られている。この
ような分析要素は、分析すべき物質（以下単に、被験物
質と呼ぶ）を含む液状試料と接触することによって、被
験物質の存在に応じて着色物質を生成したシ、又はその
他の検知可能な変化を引起したシする試薬を含むのが普
通である。このような分析要素としでは、例えば、紙又
はその他の非常に吸収性の担体に、化学的に活性又は不
活性で、水素イオン又はその他の被験物質を含む液体と
の接触に応答して発色又は変色する物質を含浸したｐＨ
試験紙及び類似の指示体がある。このような応答物質の
選定によるが、前記変化は、通常、定性的であシ、良く
ても半定量的である。ある種の分野においては、迅速に
定量分析結果を得ることができる分析技術がしばしば要
求される。

血液、血清、尿などのような体液を含む生体液の試験を
迅速かつ好都合に、しかも高い定量性を与えるように行
わなければならない診断学上の化学分析に有用な要素を
提供することが最近の多くの開発研究によって企てられ
ている。

溶液化学分析技術は臨床検査、特に自動分析の分野にお
いて広く受けいれられている。しかしながら、この技術
では複雑な溶液の取扱いや輸送が可能な分析装置が必要
である。例えば、米国特許第２７９７１４９号、同第３
０５６８９３号及び同第！＋５２６４８０号各明細書な
どに例示されているような、様々な「湿式化学」分析装
置は、しばしば高価であシ、しかも分析操作に熟練を要
し、そしてサンプル間の汚染を防止するために高度にｍ
清浄に保つためにも熟練を要する。

この溶液化学分析技術に代わるものとして、非溶液型で
、実質的には乾式化学分析用のいろいろな乾式分析要素
が提案されている。

乾式分析要素の代表例としては多層一体型分析要素があ
るが、その基本的な形は米国特許第３０９２４６５号明
細書に記載されている。

溶液を用いる湿式分析法（ウェットケミストリー）では
、各試薬が保存安定性の良い状態で、個々に、あるいは
幾つかまとめられて保存され、測定の際は、試薬の調整
を行い溶液状態にした後、検体を添加する。

それに対し、試薬調整を不要とした乾式分析要素は、湿
式分析と比較して、貯蔵、取扱い及びその他の点につい
て便利さがあるが混合された各種試薬及び分析反応の反
応性についての保存安定性が問題である。酵素等の試薬
が、一般に水分を含んだ状態での保存が効かないため、
分析要素自体も測定以前には乾燥状態を保持させておく
必要がある。

そのために、分析要素を防湿包装するか、あるいは乾燥
剤を保存容器等に入れておく等の処置を行うのが通例で
ある。

したがって、測定以前に液体成分は存在し々いに等しく
、測定反応時の液体成分はほとんどそのすべてが検体に
よるものである。化学分析では測定反応時の系の温度を
一定にしておく。

これは、各種の反応の速度、色素の濃度等が反応時、及
び測定時の温度により左右されるためである。

〔発明が解決しようとする課題〕

乾式分析要素においては、温度の一定化は更に厳密に行
われなければならない。液体成分としては、検体がほと
んどそのすべてであり、またその量も極く少ｊｋＣ６μ
ｔ〜５０μＬ）であるだめ、僅かな温度変化及びそれに
よる蒸発量の変化が招く液体成分量の変化が、測定値に
影響を及ぼし、性能を悪化させる。特に液体成分量の変
化は大きな、’ｌｉｄ定誤差全誤差る。

本発明の目的は、上記従来技術の欠点のない乾式分析素
子を提供することにある。

〔課題を解決するための手段〕

本発明を概説すれば、本発明は乾式分析要素に関する発
明であって、液体試料中の活性成分を分析するための乾
式分析要素において、多価アルコールを含有しているこ
とを特徴とする。

本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、従来の欠点を解
決し本発明を完成するに至った。

すなわち、多価のアルコールを乾式分析要素に含有させ
ることにより分析要素の性能を格段に向上させることが
可能となった。

本発明における多価アルコールとは、好ましくは下記一
般式１及び■： ＨＯ＝　ｚ　−ＯＨ−の〔１〕 Ｃ２Ｈｓ Ｃ，Ｈ。

（式中Ｚはそれぞれ置換又は未置換の炭素数１〜１０の
アルキレン基又は炭素数２〜１０のアルケニレン基若し
くはアルキニレン基、Ｒ１及びＲ７は水素又は低級アル
キル基、ｎｌは２〜４の整数、ｎ！は２〜５の整数を示
す）で表される化合物よシなる群から選択した少なくと
も１種の化合物である。

更に具体的には、以下に示す化合物等である。

ＯＨ３ＣＨ３ ＯＨ ２Ｈａ ＣＨ，ＯＨ 薯 （１）　−（ｍ）　ＨＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＲ
２ＣＨ２ＣＲ２ＣＨ２０ＨＣＩ）　−（Ｔ））　ＨＯＣ
Ｅ（、ＣＨ−ＣＨＣＨ，ＯＨＣｌ）　−（ｑ）　ＨＯＣ
ＩＨ２Ｃ＝ＣＣ％０ＨＣ４馬　Ｃ４為 ＣＨ３ｃｌ（３ Ｃ３Ｍ７に３ｔｉ７ ＯＨ３ ＯＨ３ ＯＨ３ ＣＨ。

Ｃ’！Ｈ，Ｃ，Ｈ。

本発明に用いられる多価アルコールのうち最も好ましい
のは、ジヒドーロキシエチレンオキシド類及びジヒドロ
キシアルカン類である。

本発明における多価アルコール、すなわち少なくとも２
つのアルコール性水酸基を有する化合物は一般に湿潤剤
として知られる。

本発明において多価アルコールの有無は分析要素の乾燥
状態でのカブリに明確な差を与えない。また、カブリの
度合の大小と測定精度に因果関係は見られない。したが
って本発明における多価アルコ−μの効果と現象は、感
光材料における湿潤剤のそれとは異なる。

本発明に用いられる多価アルコールは分析要素中に含有
されていれば効果はあるが、親水層に含有させるのが最
も効果的である。親水層とは親水性バインダー　具体的
には、ゼラチン、寒天、デンプン、各種の親水性ポリマ
ー　親水性高分子等からなる１である。

該多価アルコールを含有させるには、分析要素を形成す
るための各種試薬を含む液に、水若しくは水と相溶性の
ある溶剤あるいはこれらの混合溶媒に溶解した後、若し
くは直接添加すれば良い。

添加量は構成要素１−の種類、使用する化合物の種類等
によシ異なるが、概して、バインダーとしてゼラチンを
用いる場合、ゼラチン１２当シ、一般式Ｉ及び■で示さ
れる化合物を１０〜３００■好ましくは４０〜２００ｑ
の範囲で使用することが望ましい。

バインダーとして親水性ポリマーを用いる場合は、親水
性ポリマー１２当シ、一般式Ｉ又は■で表される化合物
を３０〜４００ｍｇ、好ましくは５０〜１６ｏ１ηの範
囲で使用することが望ましい。

本発明に用いられる多価アルコールは組合せても用いら
れるが、その総量は上記の単体で用いた場合の範囲を超
えないことが望ましい。

本発明が適用できる分析要素としては、液体試料を用い
るものであればいかなる分析要素でも適用可能であるが
、特に、生化学分析での酵素活性測定のような、多点測
定による反応速度測定及び高感度を得にくい微量物質の
濃度測定の場合に好結果が得られる。

〔実施例〕

以下、本発明を実施例により更に具体的に説明するが、
本発明はこれら実施例に限定されない。

比較分析素子−１ 透明な下塗り済み厚さ約１８０μｍのポリエチレンテレ
フタレート支持体上に下記組成の層を積層したＬＤＨ分
析素子を作成した。

（試薬層） トリトンＸ−１００（ロームアンド）−−ス社）　　　
　　　　　２　　Ｓ’／ｍ”（接着層） ビ我りリドχ４詐酸ビｑン共重合体（重合比２：８）　
　　４．６９／ｍ”トリトンＸ−１００ トリヌヒドロキシアミノメタン トリヌヒドロキシアミノメタン塩酸塩 （展開舊） 濾紙原材料用繊維 トリトンＸ−１００ ０，６ｆ／ｍ２ ５．２ｆ／ｍ” ｏ、ａｔ／ｍ” １０９　９７ｍ２ １１　９７ｍ” β−Ｎ　Ａ　Ｄ”　　　　　　　　　　　　　　　３　
９７ｍ２ジアホラーゼ　　　　　　　　　２０００　Ｕ
／ｍ２乳酸リチウム　　　　　　　　　　ｓ　ｔ／ｍ″
牛血清アルブミン　　　　　　　　２　ｆ／ｍ２比較分
析素子−２ 比較分析素子−１のアクリルアミド：メチルメタクリレ
ート共重合体の代わりにゼラチン２１ｔ／　ｍ２．１，
２−ビス（ビ＝　ｔｖ　ヌｙｖ　＊　＝　ｙｖ　）　ｘ
　ｐンａ　ｑ　ｙ　／　ｍ”を含む分析素子比較分析素
子−３ 比較分析素子−１の各層の構成を下記組成に代エタＨＤ
　Ｌ−コレステロール測定用分析素子（試薬、１） ゼラチン トリイソブレビシ六７タレンスルホン酸ナトリウムフタ
ル酸ジブチμ ｍ、２−ビス（ビニルスルホニル）エタンアジ化ソーダ ブスコルビン酸オキシダーゼ ベルオキシダーゼ りん酸水素２す）リウム シん酸２水素ナトリウム （接着層） （展開ｍ） ポリエチレンテレフタＶ−）紡績糸製織物コレステロー
ルエステラーゼ コレステロールオキシダーゼ ２０　９７ｍ” αｑｔ／ｍ” １．８ｔ／ｍ” ０．０７１Ｆ／ｍ” α３ｔ／ｍ” ７５００　　Ｕ／ｍ” ｚｏｏｏｏｕ／ｍ” 五９９／ｍ２ ２．６９７ｍ” ４８　９７ｍ２ ２８００　　Ｕ／ｍ” ２８００　　Ｔ１７ｍ” アヌコルビン酸オキシダーゼ　　　７５００　Ｕ／ｍ２
ポリオキシエチレンラウリｌレエーテｌＶ　　　　　　
　２０　ｆ／ｍ２５．５−ジメチルシクロヘキサンジオ
ン　　　　　　　　　　　２．６ｆ／ｍ２実施例１ 比較分析素子−１，２に対し、多価アルコ−ｐが含有さ
れた分析素子−１，２と比較分析素子−１，２とにＬＤ
Ｉ’（（５００Ｗ−Ｕ）を含む検体を１０μを滴下した
。専用測定器を用いて３７°Ｃにインキュベートした後
、比較分析素子及び分析素子の３分生から７分までの反
射濃度の差を測定した。

その測定値を各々の素子の検量線で変換し変換濃度を求
めた。

この操作を複数回（ｘ＝２０）繰返し再現性の差を比較
した。

なお、再現性は（標準偏差／平均値）Ｘ１００で示した
。値が小さい程再現性が良いことを示す。結果を第１表
、第２表に示す。

第 表 上記の第１表、第２表に示すように本発明に用られる多
価アルコールを分析要素に含有させることにより、再現
性に優れた分析要素が得られることがわかる。

実施例２ 比較分析素子−３に対し、多価アルコールが含有された
分析素子−３と、比較分析素子−３トニ、分画操作剤の
ＨＤＬ−コレステロ−／Ｌ／（５０■／ａ）を含む検体
を滴下し、実施例１と同様にして再現性を比較した。

但し、測定は検体滴下後７分経過時の反射濃度を求め変
換した。

また、４０℃条件下に６０時間保存した素子と５°Ｃ条
件下で保存した素子とを同様に測定し保存安定性を比較
した。

なお、保存安定性は５°Ｃ条件下保存の素子の測定値を
基準とし、４０°Ｃ条件下保存の素子の測定値とのずれ
を で示した。しだがって変動率の絶対値が小さい程保存安
定性に優れる。結果を第３表に示した。

上記の第３表に示すように、本発明に用いられる多価ア
ルコールを分析要素に含有させることＫよシ再現性及び
保存安定性に優れた分析要素が得られることがわかる。

〔発明の効果〕

以上詳説したように、本発明に用いられる多価アルコー
ルを乾式分析要素に含有させることによシ、再現性及び
保存安定性に優れた乾式分析要素の製造が可能であり、
実用的に極めて有効である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、液体試料中の活性成分を分析するための乾式分析要
   素において、多価アルコールを含有していることを特徴
   とする乾式分析要素。 ２、該分析要素が、少なくとも１層の親水層、及びその
   上方に多孔性展開層を有する多層構造のものである請求
   項１記載の乾式分析要素。 ３、該多価アルコールが、下記一般式 I 及びII：ＨＯ
   −Ｚ−ＯＨ・・・〔 I 〕 ▲数式、化学式、表等があります▼・・・〔II〕 （式中Ｚはそれぞれ置換又は未置換の炭素数１〜１０の
   アルキレン基又は炭素数２〜１０のアルケニレン基若し
   くはアルキニレン基、Ｒ＿１及びＲ＿２は水素又は低級
   アルキル基、ｎ＿１は２〜４の整数、ｎ＿２は２〜５の
   整数を示す）で表される化合物よりなる群から選択した
   少なくとも１種の化合物である請求項１又は２記載の乾
   式分析要素。 ４、該多価アルコールが、該親水層に含有されている請
   求項２記載の乾式分析要素。