JPH0687785B2 - γ−リノレン酸の製造法 - Google Patents
γ−リノレン酸の製造法Info
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- JPH0687785B2 JPH0687785B2 JP61055840A JP5584086A JPH0687785B2 JP H0687785 B2 JPH0687785 B2 JP H0687785B2 JP 61055840 A JP61055840 A JP 61055840A JP 5584086 A JP5584086 A JP 5584086A JP H0687785 B2 JPH0687785 B2 JP H0687785B2
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 (a)産業上の利用分野 本発明は、オエノセラ(Oenothera)属の植物から誘導
されるカルスを分化誘導した不定胚を利用してγ−リノ
レン酸をまたは、これを含む脂質を製造する方法に関す
る。
されるカルスを分化誘導した不定胚を利用してγ−リノ
レン酸をまたは、これを含む脂質を製造する方法に関す
る。
(b)従来の技術 γ−リノレン酸は体内でプロスタグランジンに変化して
種々の重要な生理活性作用を果たすものであるところか
ら、近年注目を集めている脂肪酸である。
種々の重要な生理活性作用を果たすものであるところか
ら、近年注目を集めている脂肪酸である。
このものはオエノセラ属植物である月見草の種子から得
られる油脂中に多く含まれているため、従来から月見草
油がγ−リノレン酸の主要な供給源とされてきた。
られる油脂中に多く含まれているため、従来から月見草
油がγ−リノレン酸の主要な供給源とされてきた。
(c)発明が解決しようとする問題点 しかし月見草は現在極めて限られた地域でしか栽培され
ず、他の大部分の地域では野生植物から採集しており、
任意の量の種子を任意の時期に入手するのが困難であ
る。
ず、他の大部分の地域では野生植物から採集しており、
任意の量の種子を任意の時期に入手するのが困難であ
る。
本発明の目的は従って、γ−リノレン酸または、これを
含む脂質の新規な製造法を提供し、以ってγ−リノレン
酸を量的,時期的に安定に供給することにある。
含む脂質の新規な製造法を提供し、以ってγ−リノレン
酸を量的,時期的に安定に供給することにある。
(d)問題点を解決するための手段 即ち、本発明はオエノセラ属の植物を人工培地で組織培
養し、得られたカルスを明培養して分化誘導させた不定
胚からγ−リノレン酸または、その含有脂質を分離する
ことを特徴とするγ−リノレン酸の製造法である。
養し、得られたカルスを明培養して分化誘導させた不定
胚からγ−リノレン酸または、その含有脂質を分離する
ことを特徴とするγ−リノレン酸の製造法である。
本発明に用いるオエノセラ属の植物としては、Oenother
a biennis(メマツヨイグサ),O.lamarkiana(オオマツ
ヨイグサ),O.hookeri,O.laciniata,O.agrillicolla,O.
rhombipetalaなどを例示し得るが、これらに限定される
ものではない。
a biennis(メマツヨイグサ),O.lamarkiana(オオマツ
ヨイグサ),O.hookeri,O.laciniata,O.agrillicolla,O.
rhombipetalaなどを例示し得るが、これらに限定される
ものではない。
オエノセラ属の植物のカルスを誘導するには一般的な公
知の手法が適用できる。即ち、種子を無菌的に発芽させ
た芽ばえや成長の旺盛な植物体に組織切片例えば葉,
茎,茎頂,根,花の組織切片や種子の胚のいずれを培養
してもよいが、最も培養しやすい芽ばえの葉や茎から組
織切片を採取すると作業性が良い。
知の手法が適用できる。即ち、種子を無菌的に発芽させ
た芽ばえや成長の旺盛な植物体に組織切片例えば葉,
茎,茎頂,根,花の組織切片や種子の胚のいずれを培養
してもよいが、最も培養しやすい芽ばえの葉や茎から組
織切片を採取すると作業性が良い。
カルスの培養に用いる培地は一般的な無機塩類を基本と
した人工培地またはそれらの改変培地、例えばムラシゲ
・スクーグ(MS)の培地,ホワイトの培地,ヘラーの培
地,リンスマイヤー・スクーグ(LS)の培地,ニッチの
培地,ハイポネックス培地などのいずれでもよく、また
これらの培地に限定することなく公知のどの培地を使用
することもでき、それらの基本組成を適宜改変してもよ
い。培地には、ビタミン類としてサイアミン塩酸塩,ニ
コチン酸,ピリドキシン塩酸塩,イノシトール,パント
テン酸塩,ビオチンなど、糖としてグルコース,蔗糖,
ソルビトールなど、アミノ酸としてグリシン,アスパラ
ギン,グルタミンなどの有機物を適宜添加し得る。ま
た、植物ホルモンとしてオーキシン類即ち2,4-D,インド
ール酢酸,インドール酪酸,ナフタレン酢酸などやサイ
トカイニン類即ちカイネチン,ベンジルアデニン,ゼア
チンなどを適宜組み合わせて用い、ココナッツミルク,
イーストエキス,モルトエキス,ペプトン,カゼイン分
解物,バナナ汁など天然抽出物も適宜加え得る。これら
の培地は液体培地でも寒天を加えた固体培地でもよい。
した人工培地またはそれらの改変培地、例えばムラシゲ
・スクーグ(MS)の培地,ホワイトの培地,ヘラーの培
地,リンスマイヤー・スクーグ(LS)の培地,ニッチの
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これらの培地に限定することなく公知のどの培地を使用
することもでき、それらの基本組成を適宜改変してもよ
い。培地には、ビタミン類としてサイアミン塩酸塩,ニ
コチン酸,ピリドキシン塩酸塩,イノシトール,パント
テン酸塩,ビオチンなど、糖としてグルコース,蔗糖,
ソルビトールなど、アミノ酸としてグリシン,アスパラ
ギン,グルタミンなどの有機物を適宜添加し得る。ま
た、植物ホルモンとしてオーキシン類即ち2,4-D,インド
ール酢酸,インドール酪酸,ナフタレン酢酸などやサイ
トカイニン類即ちカイネチン,ベンジルアデニン,ゼア
チンなどを適宜組み合わせて用い、ココナッツミルク,
イーストエキス,モルトエキス,ペプトン,カゼイン分
解物,バナナ汁など天然抽出物も適宜加え得る。これら
の培地は液体培地でも寒天を加えた固体培地でもよい。
本発明における培養条件として温度は15〜30℃,pHは3.5
〜8.5,暗または明条件で静置または振とう培養のいずれ
も採用し得る。明条件は天然光でも人工光でもよいが分
化誘導のステージには強光線が好ましい。植継ぎは培養
物の生長に合わせ1〜6週間毎に行い、適宜分割する。
〜8.5,暗または明条件で静置または振とう培養のいずれ
も採用し得る。明条件は天然光でも人工光でもよいが分
化誘導のステージには強光線が好ましい。植継ぎは培養
物の生長に合わせ1〜6週間毎に行い、適宜分割する。
十分増殖させた培養物は分化誘導培地に移して分化を促
進する。即ちオーキシン濃度を低下させカイネチンを増
加させたり、或いは植物生長ホルモンを除去したり、塩
濃度や糖濃度を低下させて不定胚を形成させる。
進する。即ちオーキシン濃度を低下させカイネチンを増
加させたり、或いは植物生長ホルモンを除去したり、塩
濃度や糖濃度を低下させて不定胚を形成させる。
組織培養によってγ−リノレン酸をつくるには、その培
養のステージを選ぶと効果が大きい。カルスが未分化で
急速増殖期にあるとこの時期のカルスには油脂の含有量
は希薄であるが、分化誘導し、不定胚を形成させるとそ
れらの含有量は高まる。しかも出芽、発根をはじめると
再びそれらの含有量は低下するので、好ましくは不定胚
を収穫するとよい。
養のステージを選ぶと効果が大きい。カルスが未分化で
急速増殖期にあるとこの時期のカルスには油脂の含有量
は希薄であるが、分化誘導し、不定胚を形成させるとそ
れらの含有量は高まる。しかも出芽、発根をはじめると
再びそれらの含有量は低下するので、好ましくは不定胚
を収穫するとよい。
組織培養によって脂質を製造する方法としては、大豆,
小麦,ベニバナを原料としてトコフェロールを製造する
方法が知られているが(特開昭59-154998号,同60-1493
93号),γ−リノレン酸の製造法は本発明が最初であ
る。
小麦,ベニバナを原料としてトコフェロールを製造する
方法が知られているが(特開昭59-154998号,同60-1493
93号),γ−リノレン酸の製造法は本発明が最初であ
る。
(e)実施例 実施例1 a.カルス誘導 月見草種子を2時間流水洗浄後70%エチルアルコール液
に短時間漬浸したのち、5%次亜塩素酸ナトリウム液に
20分間漬浸して滅菌し、滅菌水で洗い、この操作をもう
1度繰り返した後、滅菌水で十分洗浄し、滅菌した1%
寒天液を固めた培養ビン上に滅菌種子を置床し、25℃3
日間で発芽させ、更に5日間昼明所,夜暗所の条件を与
えて芽ばえ(2〜3cm)を得、これを無菌的に0.5〜1cm
の組織片とし、25℃暗所でMS培地(所定無機塩類の他、
イノシトール100,サイアミン塩酸塩0.1,ニコチン酸0.5,
ピリドキシン塩酸0.5,クエン酸150各mg/l、蔗糖30g/lを
添加後、pHを6に調節し、2,4-D1ppm,カイネチン0.1ppm
を添加したもの)を1/2濃度に薄め液体培養した。2週
間でカルス化が観察され、3週間後には10〜15mmの大き
さに生長した。カルスを切離し、標準濃度のMS寒天培地
に置床し、3週間毎に植継ぎ、2カ月後には生育の旺盛
な急速生長期のカルスを得た。
に短時間漬浸したのち、5%次亜塩素酸ナトリウム液に
20分間漬浸して滅菌し、滅菌水で洗い、この操作をもう
1度繰り返した後、滅菌水で十分洗浄し、滅菌した1%
寒天液を固めた培養ビン上に滅菌種子を置床し、25℃3
日間で発芽させ、更に5日間昼明所,夜暗所の条件を与
えて芽ばえ(2〜3cm)を得、これを無菌的に0.5〜1cm
の組織片とし、25℃暗所でMS培地(所定無機塩類の他、
イノシトール100,サイアミン塩酸塩0.1,ニコチン酸0.5,
ピリドキシン塩酸0.5,クエン酸150各mg/l、蔗糖30g/lを
添加後、pHを6に調節し、2,4-D1ppm,カイネチン0.1ppm
を添加したもの)を1/2濃度に薄め液体培養した。2週
間でカルス化が観察され、3週間後には10〜15mmの大き
さに生長した。カルスを切離し、標準濃度のMS寒天培地
に置床し、3週間毎に植継ぎ、2カ月後には生育の旺盛
な急速生長期のカルスを得た。
b.分化誘導 このカルスを5〜10mmに分割し、濃度を1/2に下げたMS
寒天培地に置床し、5000ルックスの照明下で明培養して
不定胚を得た。一方1/2濃度MS培地からオーキシンを除
去した液体培地で3週間毎に継代し、明培養することに
より同じく不定胚を得た。
寒天培地に置床し、5000ルックスの照明下で明培養して
不定胚を得た。一方1/2濃度MS培地からオーキシンを除
去した液体培地で3週間毎に継代し、明培養することに
より同じく不定胚を得た。
実施例2 実施例1で得た不定胚を凍結乾燥し、試料a(1/2濃度M
S寒天培地による培養物)、試料b(1/2濃度MS液体培地
による培養物)を得た。これらをヘキサンで抽出し、そ
の油脂(油分含量およびその構成脂肪酸中のγ−リノレ
ン酸含量)を月見草種子からヘキサン抽出した油脂と比
較した。結果を表−1に示す。
S寒天培地による培養物)、試料b(1/2濃度MS液体培地
による培養物)を得た。これらをヘキサンで抽出し、そ
の油脂(油分含量およびその構成脂肪酸中のγ−リノレ
ン酸含量)を月見草種子からヘキサン抽出した油脂と比
較した。結果を表−1に示す。
このように種子から得た月見草油に匹敵するγ−リノレ
ン酸含有油脂を得た。
ン酸含有油脂を得た。
(f)発明の効果 本発明によれば、高価で供給不安定な月見草油に匹敵す
る油脂を任意の時期に必要量得ることができる。そして
そのγ−リノレン酸含量は種子からの月見草油と同等で
ある。
る油脂を任意の時期に必要量得ることができる。そして
そのγ−リノレン酸含量は種子からの月見草油と同等で
ある。
Claims (1)
- 【請求項1】オエノセラ(Oenothera)属の植物を人工
培地で組織培養し、得られるカルスを明培養して分化誘
導させた不定胚からγ−リノレン酸または、その含有脂
質を分離することを特徴とするγ−リノレン酸の製造
法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP61055840A JPH0687785B2 (ja) | 1986-03-12 | 1986-03-12 | γ−リノレン酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP61055840A JPH0687785B2 (ja) | 1986-03-12 | 1986-03-12 | γ−リノレン酸の製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS62210995A JPS62210995A (ja) | 1987-09-17 |
JPH0687785B2 true JPH0687785B2 (ja) | 1994-11-09 |
Family
ID=13010195
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP61055840A Expired - Lifetime JPH0687785B2 (ja) | 1986-03-12 | 1986-03-12 | γ−リノレン酸の製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0687785B2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010062236A1 (en) * | 2008-11-28 | 2010-06-03 | Maria Brodelius | Fatty acids and methods for producing them from cultures derived from plants of genus portulaca |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS62195291A (ja) * | 1986-02-20 | 1987-08-28 | Nitto Electric Ind Co Ltd | マツヨイグサの組織培養によるγ−リノレン酸エステル含有油脂の製造方法 |
-
1986
- 1986-03-12 JP JP61055840A patent/JPH0687785B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010062236A1 (en) * | 2008-11-28 | 2010-06-03 | Maria Brodelius | Fatty acids and methods for producing them from cultures derived from plants of genus portulaca |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS62210995A (ja) | 1987-09-17 |
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