JPH0670749A - 麹菌及びその育種方法 - Google Patents
麹菌及びその育種方法Info
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- JPH0670749A JPH0670749A JP4250463A JP25046392A JPH0670749A JP H0670749 A JPH0670749 A JP H0670749A JP 4250463 A JP4250463 A JP 4250463A JP 25046392 A JP25046392 A JP 25046392A JP H0670749 A JPH0670749 A JP H0670749A
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- deoxyglucose
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 本発明は、麹菌を変異処理し、２−デオキシ
グルコース耐性株を採取して、フィターゼ高活性麹菌を
得る。 【効果】 フィターゼ高活性麹菌を清酒製造に用いるこ
とによってフィチンの量を低減し、イノシトールの量を
増加させることができる。
グルコース耐性株を採取して、フィターゼ高活性麹菌を
得る。 【効果】 フィターゼ高活性麹菌を清酒製造に用いるこ
とによってフィチンの量を低減し、イノシトールの量を
増加させることができる。
Description
【０００１】本発明は、フィターゼ高活性麹菌及びその
育種方法に関するものである。
育種方法に関するものである。
【０００２】一般に、イノシトールは脂肪肝及び肝硬変
の予防、動脈硬化予防作用、成長促進作用などが知ら
れ、総合ビタミン剤、肝臓強化剤、老化防止剤などの医
薬に用いられている生理活性物質である。
の予防、動脈硬化予防作用、成長促進作用などが知ら
れ、総合ビタミン剤、肝臓強化剤、老化防止剤などの医
薬に用いられている生理活性物質である。
【０００３】イノシトールはフィチンの構成成分であっ
て、そのフィチンは米糠に最も多く約１０％程度含有さ
れている。玄米にも１％程度含有していることになる。
そしてそれらのフィチンの約１０％がイノシトールとい
うことになる。
て、そのフィチンは米糠に最も多く約１０％程度含有さ
れている。玄米にも１％程度含有していることになる。
そしてそれらのフィチンの約１０％がイノシトールとい
うことになる。
【０００４】玄米にはイノシトールは０．１〜０．１２
％含有しているが大部分はフィチン態として存在してい
るため、人がそのまま摂取してもほとんど利用されない
ばかりか、フィチンのキレート作用によりカルシウムな
どの吸収阻害が起こったりすることがある。
％含有しているが大部分はフィチン態として存在してい
るため、人がそのまま摂取してもほとんど利用されない
ばかりか、フィチンのキレート作用によりカルシウムな
どの吸収阻害が起こったりすることがある。
【０００５】また、フィターゼは酸性フォスファターゼ
の一種でフィチンを基質としミオイノシトール核からリ
ン酸基が一つずつ遊離する６段階の加水分解反応に関与
する酵素で、植物種子、カビ、酵母などで存在が確認さ
れている。
の一種でフィチンを基質としミオイノシトール核からリ
ン酸基が一つずつ遊離する６段階の加水分解反応に関与
する酵素で、植物種子、カビ、酵母などで存在が確認さ
れている。
【０００６】フィターゼによって米に含まれるフィチン
を分解すれば、米の分解物、例えば清酒中にフィチンの
量を低減し、イノシトールの量を増加させることが可能
となる。
を分解すれば、米の分解物、例えば清酒中にフィチンの
量を低減し、イノシトールの量を増加させることが可能
となる。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、フィターゼ
高活性の麹菌を得ることを目的としている。
高活性の麹菌を得ることを目的としている。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明では麹菌を変異処
理し、２−デオキシグルコース含有培地で生育した２−
デオキシグルコース耐性株を採取してフィターゼ高活性
麹菌を得ることができた。
理し、２−デオキシグルコース含有培地で生育した２−
デオキシグルコース耐性株を採取してフィターゼ高活性
麹菌を得ることができた。
【０００９】本発明は、フィターゼ高活性麹菌に関する
もので、特にその麹菌がＰＨＡ ２−４−３、ＦＥＲＭ
Ｐ−１３０６２に関するものである。
もので、特にその麹菌がＰＨＡ ２−４−３、ＦＥＲＭ
Ｐ−１３０６２に関するものである。
【００１０】本発明のフィターゼ高活性麹菌の育種にお
いては、一般に清酒製造に用いられている麹菌であれば
いかなる麹菌でもよい。
いては、一般に清酒製造に用いられている麹菌であれば
いかなる麹菌でもよい。
【００１１】麹菌はまず変異処理されるが、紫外線、Ｘ
線、放射線などの物理的変異処理やニトロソグアニジン
（ＮＴＧ）などの薬剤による化学的変異処理などいずれ
でもよく、また併用する変異処理でもよい。
線、放射線などの物理的変異処理やニトロソグアニジン
（ＮＴＧ）などの薬剤による化学的変異処理などいずれ
でもよく、また併用する変異処理でもよい。
【００１２】変異処理の終了した麹菌は菌体もしくは胞
子を２−デオキシグルコースを１〜１．５％程度含有し
た基本培地に接種し、３０℃で２４時間培養し、生育し
た麹菌体より２−デオキシグルコース耐性株を得る。２
−デオキシグルコース耐性麹菌の分離培養は２回以上４
回程度くりかえすことによってより強い２−デオキシグ
ルコース耐性麹菌を得ることができる。
子を２−デオキシグルコースを１〜１．５％程度含有し
た基本培地に接種し、３０℃で２４時間培養し、生育し
た麹菌体より２−デオキシグルコース耐性株を得る。２
−デオキシグルコース耐性麹菌の分離培養は２回以上４
回程度くりかえすことによってより強い２−デオキシグ
ルコース耐性麹菌を得ることができる。
【００１３】本発明においては、２−デオキシグルコー
スに対する耐性の高い麹菌ほどフィターゼ活性が高い麹
菌であることを見出したのである。
スに対する耐性の高い麹菌ほどフィターゼ活性が高い麹
菌であることを見出したのである。
【００１４】２−デオキシグルコースに対する耐性の高
い麹菌が何故にフィターゼを多量産生するようになるの
か、その理由は不明である。今後の研究に待たなければ
ならない。
い麹菌が何故にフィターゼを多量産生するようになるの
か、その理由は不明である。今後の研究に待たなければ
ならない。
【００１５】本発明において、ＮＴＧ変異処理し、２−
デオキシグルコース含有培地で４回培養し、これに対す
る耐性の高い麹菌を得、これから分離した胞子を０．５
％フィチン酸カルシウムを含むＰＳ培地（後述）に接種
し、３０℃で２４時間培養し、ハローの形成を行い、フ
ィターゼ高活性麹菌を分離し、その菌株とハロー値等を
次の表１に示した。なお、表１においてＲＩＢ１２８は
変異処理等なんらの処理もしていない普通の麹菌であ
る。
デオキシグルコース含有培地で４回培養し、これに対す
る耐性の高い麹菌を得、これから分離した胞子を０．５
％フィチン酸カルシウムを含むＰＳ培地（後述）に接種
し、３０℃で２４時間培養し、ハローの形成を行い、フ
ィターゼ高活性麹菌を分離し、その菌株とハロー値等を
次の表１に示した。なお、表１においてＲＩＢ１２８は
変異処理等なんらの処理もしていない普通の麹菌であ
る。
【００１６】
【表１】
【００１７】本発明のフィターゼ高活性麹菌は従来の麹
菌よりもフィターゼを多量生産するために、清酒製造に
用いてフィチン量の低い清酒を製造することが可能であ
る。
菌よりもフィターゼを多量生産するために、清酒製造に
用いてフィチン量の低い清酒を製造することが可能であ
る。
【００１８】また、米糠、玄米、低精白米中にイノシト
ールの基質となるフィチンが多いことに注目し、これら
にフィターゼ高活性株を繁殖させ麹を作ることにより従
来の清酒よりイノシトールを多く含有する清酒を醸造す
ることも可能である。
ールの基質となるフィチンが多いことに注目し、これら
にフィターゼ高活性株を繁殖させ麹を作ることにより従
来の清酒よりイノシトールを多く含有する清酒を醸造す
ることも可能である。
【００１９】
【実施例１】 フィターゼ高活性変異株の造成方法 親株としてAspergillus oryzae RIB 128 を使用した。R
IB 128の胞子懸濁液３ml（２×106／ml）にＮＴＧ（ニ
トロソグアニジン）４mg／mlで３０℃、１０分間処理し
洗浄後、麹エキス培地に塗布し２８℃で５〜７日培養す
る。着生した胞子を集め、２−デオキシグルコースを１
〜１．５％含む培地（グルコース０〜０．５％、硫安
０．５％、リン酸２水素カリウム０．８％、硫酸マグネ
シウム０．０５％、ペプトン０．２％）に植菌し３０℃
で２４時間振盪培養後、同様の培地に植菌した。これを
４回繰り返した後、麹エキス培地で培養し、得られた胞
子をＰＳ培地（グルコース１．５％、フィチン酸カルシ
ウム０．５％、硝酸アンモニウム０．５％、硫酸マグネ
シウム０．０５％、塩化カリウム０．０５％、硫酸第一
鉄０．００１％、硫酸マンガン０．００１％、Ｔｒｉｔ
ｏｎ Ｘ−１００ ０．３％、寒天２％）１プレート当
たり５０個になるように塗布し４〜５日培養する。
IB 128の胞子懸濁液３ml（２×106／ml）にＮＴＧ（ニ
トロソグアニジン）４mg／mlで３０℃、１０分間処理し
洗浄後、麹エキス培地に塗布し２８℃で５〜７日培養す
る。着生した胞子を集め、２−デオキシグルコースを１
〜１．５％含む培地（グルコース０〜０．５％、硫安
０．５％、リン酸２水素カリウム０．８％、硫酸マグネ
シウム０．０５％、ペプトン０．２％）に植菌し３０℃
で２４時間振盪培養後、同様の培地に植菌した。これを
４回繰り返した後、麹エキス培地で培養し、得られた胞
子をＰＳ培地（グルコース１．５％、フィチン酸カルシ
ウム０．５％、硝酸アンモニウム０．５％、硫酸マグネ
シウム０．０５％、塩化カリウム０．０５％、硫酸第一
鉄０．００１％、硫酸マンガン０．００１％、Ｔｒｉｔ
ｏｎ Ｘ−１００ ０．３％、寒天２％）１プレート当
たり５０個になるように塗布し４〜５日培養する。
【００２０】でてきたコロニーのハローを計測しハロー
の大きい株をフィターゼ高活性株として選択した。これ
により得られた突然変異株のうち特にハローの大きかっ
たＰＨＡ２−４株を親株として再度同様の操作を行い、
胞子の着生の良好なＰＨＡ２−４−３株が得られた。Ｐ
ＨＡ２−４−３株のフィターゼ活性は親株より優れてい
た。
の大きい株をフィターゼ高活性株として選択した。これ
により得られた突然変異株のうち特にハローの大きかっ
たＰＨＡ２−４株を親株として再度同様の操作を行い、
胞子の着生の良好なＰＨＡ２−４−３株が得られた。Ｐ
ＨＡ２−４−３株のフィターゼ活性は親株より優れてい
た。
【００２１】次の表２に変異株ＰＨＡ２−４−３と親株
ＲＩＢ１２８のフィターゼ活性を比較して示した。
ＲＩＢ１２８のフィターゼ活性を比較して示した。
【００２２】
【表２】
【００２３】なお、ＰＨＡ２−４−３株は工業技術院微
生物工業技術研究所に微工研菌寄第１３０６２号として
寄託されている。
生物工業技術研究所に微工研菌寄第１３０６２号として
寄託されている。
【００２４】
【実施例２】 ＰＨＡ２−４−３株によるイノシトール
の生産 ＲＩＢ１２８とＰＨＡ２−４−３の各々の胞子懸濁液を
１×１０2cells／mlになるよう調整し、バークホルダー
合成培地からイノシトール、塩化カルシウム、リン酸２
水素カリウムを除き、フィチン酸ナトリウム０．５％、
塩化カリウム０．１５％添加した培地３０mlに植菌し２
８℃、５日間の振盪培養を行い培養液中のイノシトール
をガスクロマトグラフィーにより定量した。次の表３に
イノシトールの生産を比較して示した。
の生産 ＲＩＢ１２８とＰＨＡ２−４−３の各々の胞子懸濁液を
１×１０2cells／mlになるよう調整し、バークホルダー
合成培地からイノシトール、塩化カルシウム、リン酸２
水素カリウムを除き、フィチン酸ナトリウム０．５％、
塩化カリウム０．１５％添加した培地３０mlに植菌し２
８℃、５日間の振盪培養を行い培養液中のイノシトール
をガスクロマトグラフィーにより定量した。次の表３に
イノシトールの生産を比較して示した。
【００２５】
【表３】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 新 藤 充 宏 兵庫県宝塚市千種４−４−14
Claims (3)
- 【請求項１】 フィターゼ高活性麹菌。
- 【請求項２】 フィターゼ高活性麹菌がＰＨＡ２−４−
３、ＦＥＲＭ Ｐ−１３０６２であることを特徴とする
請求項１の麹菌。 - 【請求項３】 麹菌を変異処理し、２−デオキシグルコ
ース耐性株を採取することを特徴とするフィターゼ高活
性麹菌の育種方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4250463A JPH0670749A (ja) | 1992-08-27 | 1992-08-27 | 麹菌及びその育種方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4250463A JPH0670749A (ja) | 1992-08-27 | 1992-08-27 | 麹菌及びその育種方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0670749A true JPH0670749A (ja) | 1994-03-15 |
Family
ID=17208250
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4250463A Pending JPH0670749A (ja) | 1992-08-27 | 1992-08-27 | 麹菌及びその育種方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0670749A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08196286A (ja) * | 1995-01-24 | 1996-08-06 | Ii M Kenkyu Kiko:Kk | イノシトールの製造方法 |
| WO2010135588A2 (en) | 2009-05-21 | 2010-11-25 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2397486A1 (en) | 2006-09-21 | 2011-12-21 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
-
1992
- 1992-08-27 JP JP4250463A patent/JPH0670749A/ja active Pending
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08196286A (ja) * | 1995-01-24 | 1996-08-06 | Ii M Kenkyu Kiko:Kk | イノシトールの製造方法 |
| EP2617820A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2397486A1 (en) | 2006-09-21 | 2011-12-21 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617823A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617819A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617815A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617816A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617728A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617729A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617817A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2617821A2 (en) | 2006-09-21 | 2013-07-24 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| WO2010135588A2 (en) | 2009-05-21 | 2010-11-25 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
| EP2698374A1 (en) | 2009-05-21 | 2014-02-19 | Verenium Corporation | Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
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