JPH0670084B2 - アルカリゲネス・キュピダスの産出する多糖類、それを用いた凝集剤及び凝集方法 - Google Patents
アルカリゲネス・キュピダスの産出する多糖類、それを用いた凝集剤及び凝集方法Info
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- JPH0670084B2 JPH0670084B2 JP2044434A JP4443490A JPH0670084B2 JP H0670084 B2 JPH0670084 B2 JP H0670084B2 JP 2044434 A JP2044434 A JP 2044434A JP 4443490 A JP4443490 A JP 4443490A JP H0670084 B2 JPH0670084 B2 JP H0670084B2
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- polysaccharide
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は新規な多糖類、該多糖類の製法、微生物由来の
凝集剤及び凝集方法に関するものであり、これらは、各
種の汚濁物質の処理、各種工業の排水処理分野、都市下
水、各種の発酵液の処理、さらには有用物質等の回収利
用等広範囲にわたり利用が期待される。
凝集剤及び凝集方法に関するものであり、これらは、各
種の汚濁物質の処理、各種工業の排水処理分野、都市下
水、各種の発酵液の処理、さらには有用物質等の回収利
用等広範囲にわたり利用が期待される。
凝集剤は各種工業の進展に伴い、各種工程及びそれから
排出される廃水分野に広く使用されている。凝集剤は一
般的に合成高分子系（例えば、ポリアクリルアミド系
等）、無機系凝集剤（例えば、硫酸バンド等）および生
物系凝集剤に大別される。このうち微生物産生凝集剤は
微生物が生産する物質で他の物質を凝集させる沈澱（沈
降）し易くさせる性能を有する物質である。また、機能
面よりとらえると、カチオン系、ノニオン系、アニオン
系の３つに分類することができる。
排出される廃水分野に広く使用されている。凝集剤は一
般的に合成高分子系（例えば、ポリアクリルアミド系
等）、無機系凝集剤（例えば、硫酸バンド等）および生
物系凝集剤に大別される。このうち微生物産生凝集剤は
微生物が生産する物質で他の物質を凝集させる沈澱（沈
降）し易くさせる性能を有する物質である。また、機能
面よりとらえると、カチオン系、ノニオン系、アニオン
系の３つに分類することができる。
従来、これら合成高分子及び無機系凝集剤は活性汚泥法
等を用いた廃水処理分野から土木凌渫工事等への清澄処
理剤として多用されてきた。また、上水道、中水道の造
水分野、発酵工業における発酵液と菌体の分離といった
ダウンストリームプロセッシング分野からさらには食品
工業分野への適用というように非常に広範囲な分野にわ
たって凝集剤の使用は期待されている。このように、凝
集剤の使用は今日の社会生活に深く組み込まれており、
なくてはならないものであるがゆえに、さらに今後ます
ますその使途が多岐にわたり使用量が増加するものと予
想される。このため凝集剤の使用は環境面ひいては人間
の健康にも直結していると考えられる。
等を用いた廃水処理分野から土木凌渫工事等への清澄処
理剤として多用されてきた。また、上水道、中水道の造
水分野、発酵工業における発酵液と菌体の分離といった
ダウンストリームプロセッシング分野からさらには食品
工業分野への適用というように非常に広範囲な分野にわ
たって凝集剤の使用は期待されている。このように、凝
集剤の使用は今日の社会生活に深く組み込まれており、
なくてはならないものであるがゆえに、さらに今後ます
ますその使途が多岐にわたり使用量が増加するものと予
想される。このため凝集剤の使用は環境面ひいては人間
の健康にも直結していると考えられる。
しかしながら、現在広く用いられている合成高分子凝集
剤（例えば、ポリアクリルアミド）等は能力、経済性の
点で優れているが安全性及び環境面での問題点も指摘さ
れていると言われている。さらに、バイオインダストリ
ーにおけるダウンストリームプロセッシングへの適用を
考えると合成高分子系凝集剤の使用には問題があると考
えられる。
剤（例えば、ポリアクリルアミド）等は能力、経済性の
点で優れているが安全性及び環境面での問題点も指摘さ
れていると言われている。さらに、バイオインダストリ
ーにおけるダウンストリームプロセッシングへの適用を
考えると合成高分子系凝集剤の使用には問題があると考
えられる。
これらの欠点を解消・克服する新規凝集剤の開発は各方
面より切望されており、特に生分解性を持ち安全でかつ
二次公害の恐れのない生物由来の凝集剤の開発が急務な
課題となっている。
面より切望されており、特に生分解性を持ち安全でかつ
二次公害の恐れのない生物由来の凝集剤の開発が急務な
課題となっている。
ところで、微生物産生凝集剤についてはグラム陽性細菌
に属するロードコッカス属由来の微生物産生凝集剤NOC-
1（日本特許第1,096,062号）又、黒色菌科（Dematiacea
e）のデマチューム属（Dematium）が生産する微生物産
生凝集剤（特広昭61-47512号公報）又、グラム陰性細菌
アルカリゲネス・レイタスが生産する微生物産生凝集剤
（日本発酵工学会 昭和63年大会要旨集p.150,1988年）
も知られており、凝集剤として有効であるが、より高い
収率の微生物産生凝集剤が求められていた。
に属するロードコッカス属由来の微生物産生凝集剤NOC-
1（日本特許第1,096,062号）又、黒色菌科（Dematiacea
e）のデマチューム属（Dematium）が生産する微生物産
生凝集剤（特広昭61-47512号公報）又、グラム陰性細菌
アルカリゲネス・レイタスが生産する微生物産生凝集剤
（日本発酵工学会 昭和63年大会要旨集p.150,1988年）
も知られており、凝集剤として有効であるが、より高い
収率の微生物産生凝集剤が求められていた。
このような背景のもとに、本発明者らは高分子系凝集剤
等のもつ問題点を解消・克服すべく広く微生物、特にグ
ラム陰性細菌による微生物産生凝集物質を求めて検索を
行った。
等のもつ問題点を解消・克服すべく広く微生物、特にグ
ラム陰性細菌による微生物産生凝集物質を求めて検索を
行った。
即ち、安全性、生分解性が優れており二次公害の恐れの
ない安全な凝集剤及びその凝集方法について種々の研究
開発を重ねたところ、グラム陰性細菌のアルカリゲネス
属に属する微生物、特にアルカリゲネス・キュピダスの
産生する多糖類、アルカリゲネス・キュピダスの培養物
又は培養処理或いはそれらと無機塩の１種との存在下で
非常に優れた凝集効果を有すること、かつ高収率で凝集
剤が得られることを見出し、本発明を完成させるに至っ
た。
ない安全な凝集剤及びその凝集方法について種々の研究
開発を重ねたところ、グラム陰性細菌のアルカリゲネス
属に属する微生物、特にアルカリゲネス・キュピダスの
産生する多糖類、アルカリゲネス・キュピダスの培養物
又は培養処理或いはそれらと無機塩の１種との存在下で
非常に優れた凝集効果を有すること、かつ高収率で凝集
剤が得られることを見出し、本発明を完成させるに至っ
た。
すなわち、本発明は、次の１乃至４の技術的構成からな
る。
る。
1.アルカリゲネス・キュピダスに属し凝集物質産生能を
有する微生物の培養物又はその培養処理物を主成分とす
る微生物産生凝集剤。
有する微生物の培養物又はその培養処理物を主成分とす
る微生物産生凝集剤。
2.アルカリゲネス・キュピダスがアルカリゲネス・キュ
ピダス KT201株（FERM P-10609）である上記１記載の微
生物産生凝集剤。
ピダス KT201株（FERM P-10609）である上記１記載の微
生物産生凝集剤。
3.カチオン性無機塩の少なくとも１種以上を含有する上
記１ないし２記載の微生物産生凝集剤。
記１ないし２記載の微生物産生凝集剤。
4.上記１ないし３のいずれかの微生物産生凝集剤を被処
理物と接触せしめることを特徴とする凝集方法。
理物と接触せしめることを特徴とする凝集方法。
5.下記の理化学的物質を有する多糖類。
（１）元素分析：炭素 36.94％，水素 5.42％ （２）紫外吸収スペクトル:340〜190nmの範囲内では極
大吸収はないが300nmから徐々に吸光度が増加した。
大吸収はないが300nmから徐々に吸光度が増加した。
（３）赤外吸収スペクトル;3550cm-1にOHの吸収、1720c
m-1にカルボキシエステルの吸収、1605cm-1にカルボキ
シル基の吸収が確認できる。
m-1にカルボキシエステルの吸収、1605cm-1にカルボキ
シル基の吸収が確認できる。
（４）呈色反応：ニンヒドリン反応 − キサントプロテイン反応 − フェノール硫酸法 ＋ アンスロン硫酸法 ＋ カルバゾール硫酸法 ＋ Elson-Morgan反応 − （５）物質の色：白色 （６）溶剤に体する溶解性：熱水に易溶 冷水に易溶 希酸に易溶 希アルカリに易溶 アルコール、ジメチルホキシド、クロロホルム、ヘキサ
ンに不溶 （７）構成糖及び構成糖比：グルコース／ガラクトース
／グルクロン酸＝6.34:5.55:1.0 （８）脂肪酸及びその含量：酢酸 ６〜11％（W/W） （９）旋光度:67.0［α］2 D 3DW （10）イオン性：アニオン性 1.69（meq/g） （11）極限粘度:172（溶媒：蒸留水） （12）炭化点:237〜256℃ 6.アルカリゲネス属に属する上記５記載の多糖類を産生
する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物から前
記多糖類を採取することを特徴とする前記多糖類の製造
方法。
ンに不溶 （７）構成糖及び構成糖比：グルコース／ガラクトース
／グルクロン酸＝6.34:5.55:1.0 （８）脂肪酸及びその含量：酢酸 ６〜11％（W/W） （９）旋光度:67.0［α］2 D 3DW （10）イオン性：アニオン性 1.69（meq/g） （11）極限粘度:172（溶媒：蒸留水） （12）炭化点:237〜256℃ 6.アルカリゲネス属に属する上記５記載の多糖類を産生
する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物から前
記多糖類を採取することを特徴とする前記多糖類の製造
方法。
本発明に使用される微生物は凝集物質生産能を有するア
ルカリゲネス・キュピダスに属する微生物であれば、い
ずれでもよいが、その代表菌株としてアルカリゲネス・
キュピダス KT201株が挙げられる。そして、このアルカ
リゲネス・キュピダス KT201株は工業技術院微生物工業
技術研究所にFERM P-10609として寄託されている。
ルカリゲネス・キュピダスに属する微生物であれば、い
ずれでもよいが、その代表菌株としてアルカリゲネス・
キュピダス KT201株が挙げられる。そして、このアルカ
リゲネス・キュピダス KT201株は工業技術院微生物工業
技術研究所にFERM P-10609として寄託されている。
以下、本発明に使用する菌株（FERM P-10609）の菌学的
性質を第１表に示す。
性質を第１表に示す。
この第１表に示す菌学的性質について細菌分類書である
バージー・マニュアル・システマテック・バクテリオロ
ジー第１巻（Bergey's Manual of Systematic Bacterio
logy Volume 1），（1984年）で検討した結果、同書第3
72頁に記載それているアルカリゲネス・キュピダスと一
致し、本菌をアルカリゲネス・キュピダスと同定した。
バージー・マニュアル・システマテック・バクテリオロ
ジー第１巻（Bergey's Manual of Systematic Bacterio
logy Volume 1），（1984年）で検討した結果、同書第3
72頁に記載それているアルカリゲネス・キュピダスと一
致し、本菌をアルカリゲネス・キュピダスと同定した。
なお、タイプストレイン（ATCC 27124）においては第１
表における糖より酸の生成、菌体外ポリマー生産能の記
載は無い、また酢酸での生育のみタイプストレインと異
なるが他の諸性質は本願の株とタイプストレインは一致
する。
表における糖より酸の生成、菌体外ポリマー生産能の記
載は無い、また酢酸での生育のみタイプストレインと異
なるが他の諸性質は本願の株とタイプストレインは一致
する。
本菌を用いて培養条件及び凝集剤の生産は次の通りであ
る。炭素源としては、フラクトース、ダルコース、シュ
ークロース等の単糖類、少糖類の他に、ヘミセルロー
ス、でん粉、コーンスターチ等の天然高分子等が好まし
く用いられる。
る。炭素源としては、フラクトース、ダルコース、シュ
ークロース等の単糖類、少糖類の他に、ヘミセルロー
ス、でん粉、コーンスターチ等の天然高分子等が好まし
く用いられる。
さらに硫安等の無機体窒素源、酵母エキス、ペプトン、
麦芽エキス等の有機窒素源、その他リン酸カリ、硫酸マ
グネシウム、食塩等の無機塩類が培地構成成分として使
用される。
麦芽エキス等の有機窒素源、その他リン酸カリ、硫酸マ
グネシウム、食塩等の無機塩類が培地構成成分として使
用される。
培養は液体培養でもよい。培養は初発pH4〜10、温度15
〜40℃の範囲で行われる。培養は炭素源等の種類にもよ
るが、培養１日から10日間の間で行われる。
〜40℃の範囲で行われる。培養は炭素源等の種類にもよ
るが、培養１日から10日間の間で行われる。
培養液は菌の生育にともない白濁し、粘性を有する凝集
物質の生産により粘質性となる。培養液の粘度は培養終
期で6300cps（25℃）に達する。
物質の生産により粘質性となる。培養液の粘度は培養終
期で6300cps（25℃）に達する。
培養を行うことにより凝集能を有する培養物を得る。遠
心分離により除菌した培養液に同量のエタノールを加
え、析出した凝集物質を遠心分離にて集め減圧乾燥等に
より水分をとばした凝集物質が培養処理物として得られ
る。しかしながら、本発明ではこのように分離精製した
培養物を使用するまでもなく、培養物そのものをそのま
ま使用することができる。
心分離により除菌した培養液に同量のエタノールを加
え、析出した凝集物質を遠心分離にて集め減圧乾燥等に
より水分をとばした凝集物質が培養処理物として得られ
る。しかしながら、本発明ではこのように分離精製した
培養物を使用するまでもなく、培養物そのものをそのま
ま使用することができる。
本発明の本凝集物質は白色無定形で水に溶けて無色透明
の粘性のある液体となる。本凝集物質の0.1％溶液は糖
類呈色反応としてアンスロン反応に強い陽性を示し、蛋
白呈色反応としてのキサントプロテイン反応（検出限界
は牛アルブミンで0.01％以上）に陰性、アミノ基呈色反
応としてのニンヒドリン反応（検出限界はグリシンで0.
001％以上）に陰性であった。また、本凝集物質は各種
コロイド試薬との、例えば、メチルグリコールキトサン
及びグリコールキトサンとの反応性から、アニオンポリ
マーであった。以上の結果から本凝集物質は多糖を主成
分としたアニオンポリマーと考えられる。この凝集物
質、すなわち多糖類の理化学的性質を詳細に記載すると
次の通りである。
の粘性のある液体となる。本凝集物質の0.1％溶液は糖
類呈色反応としてアンスロン反応に強い陽性を示し、蛋
白呈色反応としてのキサントプロテイン反応（検出限界
は牛アルブミンで0.01％以上）に陰性、アミノ基呈色反
応としてのニンヒドリン反応（検出限界はグリシンで0.
001％以上）に陰性であった。また、本凝集物質は各種
コロイド試薬との、例えば、メチルグリコールキトサン
及びグリコールキトサンとの反応性から、アニオンポリ
マーであった。以上の結果から本凝集物質は多糖を主成
分としたアニオンポリマーと考えられる。この凝集物
質、すなわち多糖類の理化学的性質を詳細に記載すると
次の通りである。
（１）元素分析：炭素 36.94％，水素 5.42％ （２）紫外吸収スペクトル：第１図に示した。
340〜190nmの範囲内では極大吸収はないが300nmから徐
々に吸光度が増加した。
々に吸光度が増加した。
（３）赤外吸収スペクトル：第２図に示した。
3550cm-1にOHの吸収、1720cm-1にカルボキシエステルの
吸収、1605cm-1にカルボキシル基の吸収が確認できる。
吸収、1605cm-1にカルボキシル基の吸収が確認できる。
（４）呈色反応：ニンヒドリン反応 − キサントプロテイン反応 − フェノール硫酸法 ＋ アンスロン硫酸法 ＋ カルバゾール硫酸法 ＋ Elson−Morgan反応 − （５）物質の色：白色 （６）溶剤に対する溶解性：熱水に易溶 冷水に易溶 希酸に易溶 希アルカリに易溶 アルコール、ジメチルホキシド、クロロホルム、ヘキサ
ンに不溶 （７）構成糖及び構成糖比：グルコース／ガラクトース
／グルクロン酸＝6.34:5.55:1.0 （８）脂肪酸及びその含量：酢酸 6.6〜10.3％（W/W） （９）旋光度:67.0［α］2 D 3DW （10）イオン性：アニオン性 1.69（meq/g） （11）極限粘度:172（溶媒：蒸留水） （12）炭化点:237〜256℃ （13）電気泳動：酢酸セルロース膜電気泳動により本多
糖類の脱アセチル体が均一物質と確認された。（第３
図） 本結果から、本凝集物質はグルコース、ガラクトース、
グルクロン酸及び脂肪酸を含む酸性多糖類であり、糖の
水酸基の一部はアセチル化されていると考えられる。
ンに不溶 （７）構成糖及び構成糖比：グルコース／ガラクトース
／グルクロン酸＝6.34:5.55:1.0 （８）脂肪酸及びその含量：酢酸 6.6〜10.3％（W/W） （９）旋光度:67.0［α］2 D 3DW （10）イオン性：アニオン性 1.69（meq/g） （11）極限粘度:172（溶媒：蒸留水） （12）炭化点:237〜256℃ （13）電気泳動：酢酸セルロース膜電気泳動により本多
糖類の脱アセチル体が均一物質と確認された。（第３
図） 本結果から、本凝集物質はグルコース、ガラクトース、
グルクロン酸及び脂肪酸を含む酸性多糖類であり、糖の
水酸基の一部はアセチル化されていると考えられる。
この凝集物質の凝集効果をさらに促進するために併用さ
れる無機塩としては水中でカチオンを生成し得るものが
望ましく、好ましくは２価以上の多価カチオンを生成し
得るものがよく、塩化カルシウム、硫酸アルミニウム、
硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄が効果的に用いることが
出来る。
れる無機塩としては水中でカチオンを生成し得るものが
望ましく、好ましくは２価以上の多価カチオンを生成し
得るものがよく、塩化カルシウム、硫酸アルミニウム、
硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄が効果的に用いることが
出来る。
しかし、これら併用される無機塩の添加量は凝集させる
べき対象の種類によって決められるのが望ましく一般に
特に制約されるものではない。
べき対象の種類によって決められるのが望ましく一般に
特に制約されるものではない。
本発明において、凝集の対象となるものは特に制約され
るものではない。代表的なものを例示すると、粘土の一
種であるカオリン（白とう土）懸濁液、活性炭懸濁液が
例示される。一般には各々の凝集対象に際し、好適に実
施される。
るものではない。代表的なものを例示すると、粘土の一
種であるカオリン（白とう土）懸濁液、活性炭懸濁液が
例示される。一般には各々の凝集対象に際し、好適に実
施される。
本発明の方法は一般的には各種懸濁液などに対し、本発
明によるアルカリゲネス・キュピダス菌の培養物又は培
養処理物を加えるか、あるいは各種懸濁液に本発明によ
るアルカリゲネス・キュピダス菌の培養物を加え、つい
で併用する無機塩を加えることによって実施される。こ
れらの実施方法は特に制約されるものではない。
明によるアルカリゲネス・キュピダス菌の培養物又は培
養処理物を加えるか、あるいは各種懸濁液に本発明によ
るアルカリゲネス・キュピダス菌の培養物を加え、つい
で併用する無機塩を加えることによって実施される。こ
れらの実施方法は特に制約されるものではない。
＜吸光度による凝集活性測定＞ 本活性測定法は下記のごとく行った。
すなわち、5000ppmカオリン懸濁液100mlを100mlのメス
シリンダーに採り、硫酸アルミニウム0.05ml（0.5％）
を加えた後、５倍に希釈した培養物（又は精製物）0.1m
lを加え転倒撹拌した。５分間静置し、その上清液の吸
光度を波長550nmにて分光光度計を用いて測定した。各
吸光度を測定した後、次式により凝集活性（FA）を算出
した。
シリンダーに採り、硫酸アルミニウム0.05ml（0.5％）
を加えた後、５倍に希釈した培養物（又は精製物）0.1m
lを加え転倒撹拌した。５分間静置し、その上清液の吸
光度を波長550nmにて分光光度計を用いて測定した。各
吸光度を測定した後、次式により凝集活性（FA）を算出
した。
なお、コントロールの0D550は前述の培養物の代りに培
地におき変えたものであり、他は全て前述と同じ方法を
とったものである。
地におき変えたものであり、他は全て前述と同じ方法を
とったものである。
本発明により、アルカリゲネス・キュピダスに属する微
生物が産生する新規な多糖類及びそれを用いた凝集剤を
提供することができた。そして、この凝集剤は、安全
性、生分解性が優れたものであって、二次公害を生じな
いものである。又、この凝集剤は無機塩を添加すること
により、更に優れた凝集効果が得られる。
生物が産生する新規な多糖類及びそれを用いた凝集剤を
提供することができた。そして、この凝集剤は、安全
性、生分解性が優れたものであって、二次公害を生じな
いものである。又、この凝集剤は無機塩を添加すること
により、更に優れた凝集効果が得られる。
次に、本発明を実施例により、さらに詳細に説明する。
実施例１ ＜凝集物産生菌の培養と凝集物質の精製＞ シュークロース4.0g,（NH4）2SO40.02g,MgSO4・7H2O0.0
4g,CaCl2・H2O0.004g,NaCl0.02g,FeSO4・H2O0.002g,KH2
PO40.04g,K2HPO40.32g,酵母エキス0.04gを蒸留水200ml
に溶かし、培地をpH7.1±0.1に調整した。これを500ml
三角フラスコに入れオートクレーブ殺菌（120℃,15分）
した後、アルカリゲネス・キュピダスKT201株（FERM P-
10609）を１白金耳の量でフラスコに移植し、30℃にて
回転振とう培養（回転数は180rpm）を行う。本培養時の
菌体と凝集活性の経時変化を調べた。菌体量は、その懸
度を分光光度計にて波長660nmにて吸光度を測定するこ
とにより求めた。凝集活性測定は前述の示した様に行っ
た。結果を第２表に示す。菌体の生育は培養３日間内に
対数増殖期になるが、その後も少しずつ菌体増殖が続い
た。
4g,CaCl2・H2O0.004g,NaCl0.02g,FeSO4・H2O0.002g,KH2
PO40.04g,K2HPO40.32g,酵母エキス0.04gを蒸留水200ml
に溶かし、培地をpH7.1±0.1に調整した。これを500ml
三角フラスコに入れオートクレーブ殺菌（120℃,15分）
した後、アルカリゲネス・キュピダスKT201株（FERM P-
10609）を１白金耳の量でフラスコに移植し、30℃にて
回転振とう培養（回転数は180rpm）を行う。本培養時の
菌体と凝集活性の経時変化を調べた。菌体量は、その懸
度を分光光度計にて波長660nmにて吸光度を測定するこ
とにより求めた。凝集活性測定は前述の示した様に行っ
た。結果を第２表に示す。菌体の生育は培養３日間内に
対数増殖期になるが、その後も少しずつ菌体増殖が続い
た。
しかしながら、本凝集活性は培養３日で最大となり、そ
れ以降は定常状態となった。
れ以降は定常状態となった。
この最大凝集活性を示す培養液より凝集剤の精製を行っ
た。即ち、培養液から遠心処理により菌体を除去した。
その後、同量のエタノール（アセトン、メトノール等で
もよい）を加え、析出した凝集物質を遠心分離により集
め、減圧乾燥すると白色無定形の固形凝集剤を得ること
が出来た。これらの操作により前記培地を用いることに
より、培養液200ml当り約0.6g（乾燥重量）の凝集物質
を得た。
た。即ち、培養液から遠心処理により菌体を除去した。
その後、同量のエタノール（アセトン、メトノール等で
もよい）を加え、析出した凝集物質を遠心分離により集
め、減圧乾燥すると白色無定形の固形凝集剤を得ること
が出来た。これらの操作により前記培地を用いることに
より、培養液200ml当り約0.6g（乾燥重量）の凝集物質
を得た。
実施例２ ＜部分精製凝集物質からの多糖類の調製法＞ エタノール沈澱により得られた部分精製凝集物質1.6gを
0.05M塩化ナトリウム850mlに溶解後、10％セチルピリジ
ニウムクロリド（CPC）水溶液48mlを撹拌しながら徐々
に加え、37℃で一夜静置した。その後、析出した繊維状
物質（凝集物質とCPCの複合体）を集め、蒸留水（DW）
で洗浄した。その繊維状物質に0.4M塩化ナトリウム500m
lを加え溶解させた。次に同量のエタノールを徐々に加
え析出した繊維状凝集物質を集め、エタノールで５回洗
浄後、シリカゲルを含む真空ディシケーターにて乾燥さ
せた。乾固物を0.25M塩化ナトリウム750mlに溶解後、エ
タノールを加え、析出した繊維状凝集物質を集めた。そ
れをエタノールで２回洗浄後、五酸化リンを含む真空デ
ィシケーターにて乾燥させ、多糖類1.28gを得た（収率8
0％）。
0.05M塩化ナトリウム850mlに溶解後、10％セチルピリジ
ニウムクロリド（CPC）水溶液48mlを撹拌しながら徐々
に加え、37℃で一夜静置した。その後、析出した繊維状
物質（凝集物質とCPCの複合体）を集め、蒸留水（DW）
で洗浄した。その繊維状物質に0.4M塩化ナトリウム500m
lを加え溶解させた。次に同量のエタノールを徐々に加
え析出した繊維状凝集物質を集め、エタノールで５回洗
浄後、シリカゲルを含む真空ディシケーターにて乾燥さ
せた。乾固物を0.25M塩化ナトリウム750mlに溶解後、エ
タノールを加え、析出した繊維状凝集物質を集めた。そ
れをエタノールで２回洗浄後、五酸化リンを含む真空デ
ィシケーターにて乾燥させ、多糖類1.28gを得た（収率8
0％）。
実施例３ ＜培養処理物によるカオリン懸濁液の凝集＞ 実施例１のようにして精製したところの培養処理物（精
製物）0.4mg（乾燥重量）を1ml蒸留水に溶解させ培養処
理物水溶液（0.4mg/ml）を作った。この培養処理物水溶
液0.1mlを用いて、前述のカオリン懸濁液を用いた吸光
度による凝集活性を測定した。結果を第３表に示す。第
３表に示す如く培養処理物によりカオリンは効果的に凝
集沈澱し、透明できれいな上清液が得られた。
製物）0.4mg（乾燥重量）を1ml蒸留水に溶解させ培養処
理物水溶液（0.4mg/ml）を作った。この培養処理物水溶
液0.1mlを用いて、前述のカオリン懸濁液を用いた吸光
度による凝集活性を測定した。結果を第３表に示す。第
３表に示す如く培養処理物によりカオリンは効果的に凝
集沈澱し、透明できれいな上清液が得られた。
実施例４ ＜カチオンの併用効果＞ 凝集活性測定は前述のカオリン懸濁液を用いた吸光度に
よる活性測定法に従って行った。
よる活性測定法に従って行った。
凝集反応液における硫酸アルミニウムを各種無機塩に置
き変え凝集時におけるカチオン性無機塩の併用効果を検
討し、これら添加無機水溶液の濃度、添加量は全て同じ
である。結果を第４表に示した。第４表に示す如く各種
カチオン溶液全てに添加効果が認められた。中でも塩化
カルシウム、硫酸アルミニウム、硫酸マゲネシウムに高
い併用効果が認められた。
き変え凝集時におけるカチオン性無機塩の併用効果を検
討し、これら添加無機水溶液の濃度、添加量は全て同じ
である。結果を第４表に示した。第４表に示す如く各種
カチオン溶液全てに添加効果が認められた。中でも塩化
カルシウム、硫酸アルミニウム、硫酸マゲネシウムに高
い併用効果が認められた。
実施例５ ＜活性炭粉末の凝集＞ 5000ppm活性炭粉末懸濁液100mlに実施例１で得られたと
ころの培養液の５倍希釈液0.1mlを加えpHを４〜６に調
整し、転倒撹拌した。５分静置した。その上清の懸度を
波長550nmにて吸光度を測定することにより求めた。第
５表に示す様に活性炭粉末もカオリン同様に凝集するこ
とが出来た。
ころの培養液の５倍希釈液0.1mlを加えpHを４〜６に調
整し、転倒撹拌した。５分静置した。その上清の懸度を
波長550nmにて吸光度を測定することにより求めた。第
５表に示す様に活性炭粉末もカオリン同様に凝集するこ
とが出来た。
第１図及び第２図は、それぞれ本多糖類の紫外吸収スペ
クトル及び赤外吸収スペクトル、第３図は、本多糖類の
脱アセチル体の電気泳動写真である。
クトル及び赤外吸収スペクトル、第３図は、本多糖類の
脱アセチル体の電気泳動写真である。
Claims (6)
- 【請求項１】アルカリゲネス・キュピダスに属し凝集物
質産生能を有する微生物の培養物又はその培養処理物を
主成分とする微生物産生凝集剤。 - 【請求項２】アルカリゲネス・キュピダスがアルカリゲ
ネス・キュピダスKT201株(FERM P-10609)である請求項
１記載の微生物産生凝集剤。 - 【請求項３】カチオン性無機塩の少なくとも１種以上を
含有する請求項１〜２記載の微生物産生凝集剤。 - 【請求項４】請求項１ないし３のいずれかの微生物産生
凝集剤を被処理物と接触せしめることを特徴とする凝集
方法。 - 【請求項５】下記の理化学的性質を有する多糖類。 （１）元素分析：炭素 36.94％，水素 5.42％ （２）紫外吸収スペクトル:340〜190nmの範囲内では極
大吸収はないが 300nmから徐々に吸光度が増加した。 （３）赤外吸収スペクトル:3550cm-1にOHの吸収、1720c
m-1にカルボキシエステルの吸収、1605cm-1にカルボキ
シル基の吸収が確認できる。 （４）呈色反応；ニンヒドリン反応 − キサントプロテイン反応 − フェノール硫酸法 ＋ アンスロン硫酸法 ＋ カルバゾール硫酸法 ＋ Elson−Morgan反応 − （５）物質の色：白色 （６）溶剤に対する溶解性：熱水に易溶 冷水に易溶 希酸に易溶 希アルカリに易溶 アルコール、ジメチル スルホキシド、クロロホルム、ヘキサンに不溶 （７）構成糖及び構成糖比：グルコース／ガラクトース
／グルクロン酸＝6.34:5.55:1.0 （８）脂肪酸及びその含量：酢酸 ６〜11％（W/W） （９）旋光度:67.0［α］2 D 3DW （10）イオン性：アニオン性 1.69（meq/g） （11）極限粘度:172（溶媒：蒸留水） （12）炭化点:237〜256℃ - 【請求項６】アルカリゲネス属に属する請求項５記載の
多糖類を産生する能力を有する微生物を培地に培養し、
培養物から前記多糖類を採取することを特徴とする前記
多糖類の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2044434A JPH0670084B2 (ja) | 1989-03-08 | 1990-02-27 | アルカリゲネス・キュピダスの産出する多糖類、それを用いた凝集剤及び凝集方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1-53717 | 1989-03-08 | ||
| JP5371789 | 1989-03-08 | ||
| JP2044434A JPH0670084B2 (ja) | 1989-03-08 | 1990-02-27 | アルカリゲネス・キュピダスの産出する多糖類、それを用いた凝集剤及び凝集方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0356102A JPH0356102A (ja) | 1991-03-11 |
| JPH0670084B2 true JPH0670084B2 (ja) | 1994-09-07 |
Family
ID=26384347
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2044434A Expired - Lifetime JPH0670084B2 (ja) | 1989-03-08 | 1990-02-27 | アルカリゲネス・キュピダスの産出する多糖類、それを用いた凝集剤及び凝集方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0670084B2 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3525165B2 (ja) * | 1994-12-28 | 2004-05-10 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 新規な細菌ｙ−１０４株 |
| JP4657414B2 (ja) * | 2000-03-03 | 2011-03-23 | 範之 岩淵 | ロドコッカス属に属する細菌の生産する細胞外多糖及びそれを用いた海洋環境の浄化方法 |
| JP5754769B2 (ja) * | 2011-04-13 | 2015-07-29 | 鹿島建設株式会社 | 凝集処理方法 |
| JP6810423B2 (ja) * | 2017-04-08 | 2021-01-06 | 東北環境開発株式会社 | 凝集剤とその製造方法、並びに水処理方法 |
| CN113860519B (zh) * | 2021-11-09 | 2023-05-16 | 重庆沐兰环保科技有限公司 | 一种高效微生物复合絮凝剂及其制备方法 |
-
1990
- 1990-02-27 JP JP2044434A patent/JPH0670084B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0356102A (ja) | 1991-03-11 |
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