JPH06510546A - 親油性オリゴ糖抗生物質塩組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 親油性オリゴ糖抗生物質塩組成物 発明の背景 本発明は、親油性オリゴ糖抗生物質を含む物質の新規の組成物、このような物質 組成物を含む製剤並びに動物、特に、人間などの哺乳動物において微生物感染を 治療するおよび／または予防するためのこのような薬剤組成物の製造法および使 用法に関する。

エバｍ＝ノミシン（ｅｖｅｒｎｉｎｏｍｉｃｉｎｓ）、キュラマイシン（ｃｕｒ ａｍｙｃｉｎｓ）、アビラマイシン（ａｖｉｌａｍｙｃｉｎｓ）およびフランバ マイシン（ｆ　ｌａｍｂａｍｙｃ　１ｎｓ）などを含む親油性オリゴ糖抗生物質 は、少なくとも１個の酸性フェノール性水素および、炭水化物残基と結合した２ 個のオルトエステル結合を有するオルトソマイシン系の抗生物質のメンバーであ る。例えば、Ａ、　Ｋ、ガングリ−（Ｇａｎｇｕｌｙ）、「カーク・オスマー科 学技術百科事典（Ｋ　ｉ　ｒ　ｋ−○ｔｈｍｅｒ、Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏ ｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ＴｅｃｈｎｏｌｏｇＹ）Ｊ、（１９７８）、２巻、２０ ５〜２０９頁、第３版、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（ＪｏｈｎＷｉｌｅ ｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ）およびＷ、　Ｄ、オリス（Ｏｌｌｉｓ）ら、Ｔｅｔｒａ ｈｅｄｒｏｎ　（１９７９）、３５巻、１０５〜１２７頁を参照されたい。これ らの親油性オリゴ糖抗生物質は、種々のインビトロ検定でのグラム陽性および若 干のグラム陰性細菌に対する広域生物学的活性およびマウスなどの動物モデルで のインビボ活性を示すが、インビボ投与に有用なこの種の抗生物質の薬学的に許 容しうる製剤が利用されたことはこれまでなかった。例えば、本発明者は、これ らの親油性オリゴ糖抗生物質の注射が副作用症候群を引起こすことを発見した。

本明細書中で用いられる「副作用症候群」という用語は、マウスなどの動物にお いて親油性オリゴ糖抗生物質を非経口投与した際に観察された以下の種類の症状 、すなわち、協酊能、運動失調、横臥、放尿、後脚硬直、苦しい呼吸および停止 を意味する。したがって、要約すると、人間などの哺乳動物を含む動物において これらの効力のある抗生物質を安全且つ有効に使用するためのこれらの親油性オ リゴ糖抗生物質の薬学的に許容しつる組成物は知られていない。

シクロデキストリンは、グルコビラノース単位から製造された修飾デンプンであ り、６個のグルコビラノース単位から成るα−シクロデキストリン、７個のグル コビラノース単位から成るβ−シクロデキストリンおよび８個のグルコビラノー ス単位から成るγ−シクロデキストリンがある。α−１β−およびγ−シクロデ キストリン並びにそれらの誘導体は、親油性である内面すなわち空洞および親水 性である外面を有する。疎水性空洞および親水性外面のこの組合せは、適当な寸 法を有する多数の疎水性および／または不安定な薬剤を分子錯体形成または封入 するためのシフロブストリンおよびそれらの誘導体の利用をもたらし、それによ ってこのような薬剤の溶解性、安定性および生物学的利用能が改良される。α− １β−およびγ−シクロデキストリンの誘導体、例えば、ヒドロキシプロピル− β−シクロデキストリンは、ジョゼフ・セチュリ（ＪｏｚｓｅｆＳｚｅｊｔｌｉ ）によってＰｈａｒｍａｃｅｕｔ　１ｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏ　、１９９１年６ 月、３６〜４０に開示されている。

α−５β−およびγ−シクロデキストリンの錯体、それらの混合物並びに誘導体 は、例えば、Ｎ、ボドー（Ｂｏｄｏｒ）の米国特許第４，９８３．５８６号明細 書に開示されている。ボドーの米国特許第４．９８３，５８６号明細書は、親油 性または水軍安定性薬剤の非経口投与後の注射部位または付近でおよび／または 肺において生じる沈降反応の発生率を、多量の、すなわち、２０〜約５０重量％ のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含む水溶液中の該薬剤を非経 口投与することによって減少させる方法を開示している。

ジョセフ・ピサ（Ｊｏｓｅｆ　Ｐｉｔｈａ）は、米国特許第４．　７２７．　０ ６キシプロビルーβ−シクロデキストリンの濃厚な、すなわち、４０〜６０重量 ％水溶液を用いて、種々の薬剤、例えば、アセトアミノフェン、性ステロイド、 強心性配糖体、例えば、ジゴキシン、更には、レチン酸およびそれらの酸塩を可 溶化することを開示している。ポリ−β−シクロデキストリンまたはヒドロキシ プロピル−β−シクロデキストリンとの錯体として性ホルモン、テストステロン 、プロゲステロンおよびエストラジオールの投与を開示しているピサの米国特許 第４．５９６，７９５号明細書も参照されたい。

ボドーおよびピサの参考文献は、フェノールまたは親油性オリゴ糖抗生物質を言 及していない。

１９８５年７月４Ｅ］ｌこ国際公開策ＷＯ３５１０２７６７号として公開された ジャンセン會フ７−マソイティカ（Ｊａｎｓｓｅｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ ａ）Ｎ、■１国際特許出願第ＰＣＴ／ＥＰ８４１００４１７号明細書は、水中に 不安定または僅かのみ可溶性である薬剤と、式（β−ＣＤ）−ＯＲ（式中、残基 Ｒは、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ジヒドロキシプロピルであり、 残基Ｒの一部分は、場合によりアルキル基、特に、メチルまたはエチルであって よい）を有する部分的にエーテル化されたβ−シクロデキストリン（「β−ＣＤ Ｊ）との錯体を含む薬剤組成物を開示している。

薬剤分子が、おそらく塩生成によって水への溶解度を増大させるのに用いること ができる塩基性基または酸性基を有する場合、ジャンセンの国際公開ＷＯ５５１ ０２７６７号明細書は、塩生成が、概して、有効性を減少させまたは化学的安定 性を損ない、したがって、水溶性に乏しい酸性および塩基性化合物を可溶化する ための塩生成は好ましくないと教示する。親油性オリゴ糖抗生物質または本発明 の組成物は開示されていない。

細菌の種々の菌株、例えば、グラム陽性球菌、例えば、連鎖球菌および腸球菌並 びに耐メチシリン性およびメチシリン感受性ブドウ球菌は、商業的に入手可能な 抗生物質、例えば、バンコマイシンに対して耐性となった。

したがって、耐メチシリン性およびメチシリン感受性ブドウ球菌並びに耐バンコ マイシン性細菌を含む細菌感染を処置するための薬学的に許容しつる組成物が必 要とされている。更に、広範囲の感受性グラム陽性およびグラム陰性細菌感染に 対して活性な親油性オリゴ糖抗生物質を含む薬学的に許容しつる組成物、特に、 副作用症候群の発症を避ける非経口使用に適応した薬剤組成物が必要とされてい る。

意外にも、本発明者は、感受性グラム陽性および／またはグラム陰性細菌感染に 対する十分な抗細菌活性を有する親油性オリゴ糖抗生物質を、感受性グラム陽性 またはグラム陰性細菌感染に苦しむ動物、特にヒトなとの哺乳動物に対して供給 して、それらの有効な治療および／または予防を提供し、同時に、副作用症候群 の発症を回避する手段を開示した。この手段は、親油性オリゴ糖抗生物質を、少 なくともほぼ化学量論的量の指定された塩基および、動物の血清に対する親油性 オリゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に、副作用症候群を回避するのに 十分な量の薬剤、例えば、ンクロデキストリン分子当り２〜１５個のヒドロキシ プロピル基を有するヒドロキシプロピル−α−１−β−または−γ−シクロデキ ストリンと混合することを含む。

発明の概要 本発明は、 Ｘ＝ＮＯＮｏ、ＮＨ２、ＮＨＣＯＣＨ３、ＮＨＯＨ，ＮＨ（Ｃ２Ｈ５）、２ゝ Ｎ　（Ｃ２Ｈ５）２、ＯＨまたはＨであり；Ｒ２＝ＣＨ３１，Ｃ０ＣＨ（ＣＨ３ ）２、ＣＯＣＨ３、Ｃ０（ＣＨ２）３ＣＨ３、ＣＯＣＨ２ＣＨ３またはＨであり ； Ｒ３＝ＣＨ３またはＨであり； Ｒ＝ＣＯＣＨ３、ＣＨ（ＯＣＨ３）（ＣＨ３）、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、ＣＨＯま たはＨであり； Ｒ６＝ＣＨ３またはＨであり； Ｒ７＝ＣＨ３またはＨであり： Ｒ８＝ＣＨ３、ＣＨ２０ＨまたはＨであり；Ｒ９＝ＣＨ３またはＨであり： Ｙ＝ＯＨＳＣＨ３またはＨであり； Ｗ＝ＣＩまたはＨであり；そして Ｚ＝ＣＩまたはＨである） によって表わされる親油性オリゴ糖抗生物質；（ｂ）式１を有する親油性オリゴ 糖抗生物質と一緒に薬学的に許容しつる塩を生成しつる少なくともほぼ化学量論 的量の塩基；（Ｃ）一定量のジメチルスルホキシド、グリセロール、ソルビタン −モノ−９−オクタデセノエートーポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）誘導 体、デキストラン、ヒドロキシプロピル−α−１−β−または−γ−シクロデキ ストリン、そこにおいて該α−１β−およびγ−シクロデキストリン上のヒドロ キシプロピル置換基の平均数は約２個〜約１５個の範囲内であり、そして該量は 、動物の血清に対する該親油性オリゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に 、副作用症候群を回避するのに十分である。および（ｄ）薬学的に許容しつる非 イオン界面活性剤０〜６．０重量％（基準、式Ｉを有する該抗生物質） を含む物質組成物を提供する。

更に好ましくは、本発明は、 （式中、 Ｘ＝ＮＯＮｏ、ＮＨＯＨ，ＮＨＮＨＣＯＣＨ３、ＮＨＣ２Ｈ５，２ゝ　２ゝ Ｎ　（Ｃ２Ｈ５）　２、ＯＨまたはＨであり；Ｙ＝ＯＨ，ＣＨ３またはＨであり ； Ｒ＝ＨまたはＣＨ３であり： Ｒ３＝Ｈであり； Ｒ＝ＨまたはＣＨ（ＯＣＨ３）（ＣＨ３）であり：そしてによって表わされる化 合物。

（ｂ）式ＩＩを有する親油性オリゴ糖抗生物質と一緒に薬学的に許容しうる塩を 生成しつる少な（ともほぼ化学量論的量の塩基１（Ｃ）一定量のヒドロキシプロ ピル−α−１−β−または一γ−シクロデキストリン、そこにおいて該α−１β −およびγ−シクロデキストリン上のヒドロキシプロピル置換基の平均数は約２ 個〜約１５個の範囲内であり、そして該量は、動物の血清に対する該親油性オリ ゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に、副作用症候群の発症を回避するの に十分である；および（ｄ）薬学的に許容しつる非イオン界面活性剤０〜６．０ 重量％（基準、式１■を有する該抗生物質） を含む物質組成物を提供する。

本発明は、更に、 （ａ）式ＩＩＩ によって表わされる抗生物質化合物； （ｂ）式ＩＩＩを有する化合物の薬学的に許容しつる塩を生成しつる少なくとも 約２当量の塩基（式ＩＩＩの化合物のモル当り）　；　（Ｃ）ヒドロキシプ口ピ ル−α−１−β−または〜γ−シクロデキストリンの分子当り約２個〜約１５個 のヒドロキシプロピル基を有する一定量のヒドロキシプロピル−α−１−β−ま たは−γ−シクロデキストリン、そこにおいて該シクロデキストリンの該量は、 動物の血清に対する該親油性オリゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に、 副作用症候群の発症を回避するのに十分である：および（ｄ）薬学的に許容しう る非イオン界面活性剤０〜６．０重量％（基瓢式ＩＩＩを有する該抗生物質）を 含む物質組成物を提供する。

更に、式ＩＳ　ＩＩまたはＩＩＩによって表わされる化合物と、その薬学的に許 容し、うる塩を生成しうる少なくともほぼ化学量論的量の塩基と、一定量のヒド ロキシプロピル−α−１−β−または一γ−シクロデキストリンとを含む物質組 成物を薬学的に許容しうる担体と混合することによって生成される薬剤組成物並 びに感受性グラム陽性およびグラム陰性細菌感染の治療または予防を必要として いる動物、特に、哺乳動物におけるこのような治療または予防に関するこのよう な薬剤組成物の使用法を提供する。

本発明の好ましい態様として、前述の薬剤組成物は、非経口投与、特に、静脈内 （ＩＶ）経路による人間に対するインビボ投与に特に適用できる。

更に、本発明は、式■、ＩＩまたはＩＩＩによって表わされる親油性オリゴ糖抗 生物質の非経口注射後の動物において副作用症候群を予防し、同時に、抗感染性 量の該抗生物質を動物に対して供給する方法であって、該動物に対してこのよう な目的に十分な一定量の本発明の物質組成物を薬学的に許容しうる担体と一緒に 非経口投与することを含む上記方法を提供する。

本発明は、更に、感受性グラム陽性およびグラム陰性細菌感染の治療または予防 を必要としている動物、特に、哺乳動物において、このような治療または予防用 の薬剤の製造に関する式！によって表わされる親油性オリゴ糖抗生物質の使用を 提供する。

図面の簡単な説明 図１は、ミクロモノスポラ・カルボネシア変種アフリカーナ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎ ｏｓｐｏｒａ　ｃａｒｂｏｎａｃｅａ、ｖａｒ。

ａ　ｆ　ｒ　１ｃａｎａ）、ＮＲＲＬ１５０９９．ＡＴＣＣ３９１４９の典型的 な発酵の時間による進行をグラフによって図示する。

本発明の詳細な説明および好ましい実施態様親油性オリゴ糖抗生物質、例えば、 エバｍ＝ノミシン抗生物質は有用なインビトロ抗細菌活性を示すが、安全且つ有 効なインビボ投与（すなわち、副作用症候群の発症を伴わない）に適当な完全な 水溶液を容易に生成しない。更に、少なくともほぼ化学量論的量の本発明におい て有用な塩基、例えば、塩基Ｎ−メチルグルカミン（「ＮＭＧＪ）を混合するこ とによって生成されるこれらの抗生物質の塩は、有用なｐＨ値で完全な水溶液を 生成しない。該塩を有用な塩濃度で水に加えた場合、本発明者は、コロイド分散 系のみが生成されたことを観察した。これらのコロイド分散系は、特に、吸収二 酸化炭素の存在下においておよびこのようなコロイド分散系のｐＨが約９．３未 満である場合に凝集しがちであり、最後にはゲル化した。本発明者は、ＮＭＧ対 式ＩＩＩの化合物のモル比を２＝１または３：１〜最大１２：１まで増加させる ことによって完全な水溶液を生成したが、このようにして生成されたモル比１２ ・１の溶液は、望ましくない高ｐＨを有し、高度に緩衝化さね、そして刺激性で あったことを観察した。したがって、本発明者は、式ＩＩＩの化合物１モル当り １２モルのＮＭＧを含む水性製剤をラットまたは高等な霊長類、例えば、サルに 非経口注射した結果、（おそらくは、式ＩＩＩの化合物のゲル化および沈殿によ って引起こされる）副作用症候群が引起こされなかったことを観察した。製剤は 注射の際に刺激を生じたが、その刺激は、おそら（、多量のＮＭＧ塩基および注 射部位で得られた高ｐＨによって引起こされる。しかしながら、式ＩＩＩの化合 物のモル当り３または５モルのＮＭＧを含む組成物の非経口投与は、副作用症候 群を引起こす。種々のデキストリン剤は具体的な薬剤溶液を得るのを助けること が知られているが（例えば、前述のボドーおよびピサの参考文献のように）、こ の種類の典型的な薬斉泪体の使用は、親油性オリゴ糖抗生物質に関する望ましい 結果を達成できなかった。したがって、例えば、式ＩＩＩのエバｍ：ノミシン類 抗生物質のモル当りの具体的なシクロデキストリン誘導体および具体的なヒドロ キシプロピル−β−シクロデキストリンの使用は、式ＩＩＩのエバｍ：ノミシン 類抗生物質のモル当り６モルの比率で具体的なヒドロキシプロピル−β−シクロ デキストリンを用いる場合、真の水溶液を生じることができなかった。意外にも 、本発明者は、式ＩＩＩの親油性オリゴ糖抗生物質と、規定量の具体的な塩基、 例えば、ＮＭＧと、具体的な薬剤、例えば、規定量でのヒドロキシプロピル−β −シクロデキストリンとを含む物質組成物が、薬学的に許容しうる担体、特に、 水と一緒に混合された場合に、インビボ投与に安全に且つ効果的に用いることが できる製剤を提供することを発見した。意外にも、本発明者は、親油性オリゴ糖 抗生物質、例えば、式ＩＩＩの化合物１モルを、少なくとも２〜約１２モルの適 当な塩基、例えば、ＮＭＧと一緒に水中で、および６モルのヒドロキシプロピル −β−シクロデキストリン、例えば、β−シクロデキストリン分子当り約３〜７ ．５個のヒドロキシプロピル基を有するものと一緒に混合した場合、錯体の透明 な水溶液洸散乱比濁分析およびプロトンＮＭＲ中の線幅測定値によって測定され る；実施例４を参照されたい）が生成され、そして動物中へのこのような錯体の 非経口注射は、このような錯体の高用量、すなわち、８００ｍｇ／ｋｇ　（体重 ）でも、副作用症候群を引起こさなかった。表４を参照されたい。

表１に要約したインビボ結果から明らかであるように、式ＩＩＩのエバｍ：ノミ シン類抗生物質の塩、例えば、ＮＭＧ塩の水性分散系をマウスおよびサルに非経 口注射することにより、副作用症候群が生じた。本発明の物質組成物の１種類、 例えば、具体的な錯体化剤、例えば、β−シクロデキストリン分子当り約３〜７ ．５個のヒドロキシプロピル基を有するヒドロキシプロピル−β−シクロデキス トリンを含むものの水溶液を式ＩＩＩ塩のＮＭＧエバー二ノミシン類抗生物質と 一緒に動物に注射した場合にのみ、副作用症候群の発症が完全に回避された。

表２は、式ＩＩＩのエバｍ：ノミシン類抗生物質のＮＭＧ塩の透明水溶液を、具 体的な、例えば、本発明のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン剤と一 緒にマウスに非経口注射することによって、副作用症候群を減少させるかまたは 完全に回避することができることを示す。

表３は、塩基対式ＩＩＩのエバｍ：ノミシン類抗生物質のモル比を２：１〜９： １まで増加させることにより、マウスへの非経口注射によって試験された全濃度 で副作用症候群の発症が完全に排除されることを例証する。

比較例 （注射されたＩＩＩの濃度：　８０ｍｇ／ｍＬ）　での副作用症候群２％ジノモ ルガスモンキー （Ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ　Ｍｏｎｋｅｙｓ）ＩＩＩ：２ＮＭＧ　５０　−　− ＩＩＩ：５ＮＭＧ　−３３５０ 表１の脚注 １、ＨＰ−β−ＣＤは、β−ＣＤ分子当り７．４個のヒドロキシプロピル基を有 するヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである。

２、副作用症候群症状は、被験動物においてＩＶ注射（単一用量）後２分間以内 に観察された。

３、ＭＰＫは、マウス（５〜１０匹の群、ＣＦ−１、平均体重２０ｇ１）１−ラ ンースプラーク・ドーリ−（Ｈａｒｌａｎ　Ｓｐｒａｑｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）、 １８時間絶食させた）の体重ｋｇ当りの薬剤ｍｇである。

４、ＩＩＩは、式ＩＩＩによって表わされるエバー二ノミシン類抗生物質化合物 である。

５、生成された錯体。実施例３および４を参照されたい。

５、ＭＰＫは、ジノモルガスモンキー（体重範囲２．９〜９．　６ｋｇ、シャー リング昏コーポレーションーコロニー（ＳｃｈｅｒｉｎｇＣｏｒｐｏｒａｔｉｏ ｎ　Ｃｏ１ｏｎｙ）、１８時間絶食させた）の体重ｋｇ当りの薬剤ｍｇである。

３頭のサルを４０ＭＰＫ、５ＮＭＧ実験で用い；２頭のサルを他の二つの実験で 用いた。

表２ （ｌ【 （ＩＬＩｔ） （叢り （濃肥 １１１１２ＮＭＧ　６％　０　９０　ＴＯＯ−−表２の脚注 ］゛　マウス（５〜１０匹の群、ＣＦ−１、平均体重２０ｇ、）Ａ−ラン・スプ ラーク・ドーリ−１１８時間絶食させた）においてＩＶ注射（単一用量）後２分 間以内に観察された副作用症候群症状。

２　ＭＰＫは、被験動物の体重ｋｇ当りの式ＩＩＩの薬剤物質ｍｇである。

３　トゥイーン（Ｔｗｅｅｎ）は、ツルパタン−モノ−９−オクタデカノエート ーポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）であるかまたはＩＣＩアメリカンズ・ インコーホレーテッド（Ａｍｅｒｉｃａｎｓ　Ｉｎｃ、）、ウイルミントン、プ ラウエア州から商品名トゥイーン８０として入手可能なポリソルベート（Ｐｏｌ ｙｓｏｒｂａｔｅ）８０としてである。

４　ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドである。

５　デキストラン（Ｄｅｘ　ｔ　ｒａｎ）４０は、ジグｖ−ケミカル（Ｓ　ｉ　 ｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ）から入手可能なグツじ−スの高分子量（４０，０００ ）ポリマーである。

６　デキストラン７０は、シグマ・ケミカルから入手可能なグリコースの高分子 量（７０，０００）ポリマーである。

７　ＨＰβＣＤは、ＣＤ分子当り７．４個のヒドロキシプロピル基を有するヒド ロキシプロピル−β−シクロデキストリンである。

Ｊ済ｊ濃り ｕ　ｉｉＱ　２１１　ｕｐ　ｔｏｉ （５０ｍｇ／ｍ１） （８０ｍｇ／ｍ１） （５０ｍｇ／ｍ１） １　マウス（５〜１０匹の群、ＣＦ−１、平均体重２０ｇ、／へ−ラン・スブラ ーク・ドーリ−１１８時間絶食させた）においてＩＶ注射（単一用量）後２分間 以内に観察された副作用症候群症状。

２　ＭＰＫは、体重ｋｇ当りの式ＩＩＩの薬剤ｍｇである。

３　ＩＩＩは、式ＩＩＩによって表わされるエバー二ノミシン類抗生物質化合物 である。

おそらくなお一層意外なことに、本発明者は、式ＩＩＩの化合物１モルおよび２ または３モルのＮＭＧとの組合せでの３〜６モルのヒドロキシプロピル−β−シ クロデキストリンの錯体のインビトロモデルにおける最小阻害濃度（ｒＭＩＣ」 ）およびインビボマウス防御モデルにおける５０％防御用量（「ＰＤ５ｏ」）値 が、該モデルにおける式ＩＩＩの化合物に関するＭＩＣおよびＰＤ５ｏ値並びに 式ＩＩＩの化合物とＨＰβＣＤとのＮＭＧ塩に関するそれらと本質的に同一であ ることを観察した。式ＩＩＩの化合物当り２または３モルのＮＭＧの６モルＨＰ βＣＤとの錯体に関するタンパク質結合値は、本発明者が式ＩＩＩの化合物と２ モルＮＭＧとの塩で観察した結合値の９６〜９８％のままであった。

したがって、本発明者は、意外にも、式■、ＩＩおよびＩＩＩの親油性オリゴ糖 抗生物質による治療に感受性の細菌感染に苦しむ動物、例えば哺乳動物、特にヒ トの血清に対して該抗生物質を有効に供給することを可能にする該親油性オリゴ 糖抗生物質を含む薬学的に許容しつる物質組成物を発見した。

本発明において有用なα−１β−およびγ−シクロデキストリンの２ヒドロキシ プロピル誘導体は、シクロデキストリン分子当り約２個〜１１個のヒドロキシプ ロピル基を有し、そしてＪ、ピサによる米国特許第４，７２７．０６４号明細Ｍ ｕｌｌｅｒ）による米国特許第４．８７０，０６０号明細書に記載されたような 多成分非晶質混合物を生成する方法で、α−１β−またはγ−シクロデキストリ ンの１種類と１．２−プロピレンオキシドとを塩基存在下で反応させることによ って容易に製造される。プロピレンオキシドの自己縮合生成物を除去し、そして 置換の程度、すなわち、シクロデキストリン分子当りのヒドロキシプロピル基の 数を、便宜上、ピサによる米国特許第４．７２７．０６４号明細書および）、７ ．（６号）６１２〜６１５に記載された方法にしたがって、プロトン核磁気共鳴 および／または質量分光分析法によって決定する。α−１β−およびγ−シクロ デキストリンの分子当り約１〜９モル個、好ましくは、約３個〜約９個、更に好 ましくは、約５個〜約７．５個のヒドロキシプロピル基を有する２−ヒドロキシ プロピル−α−１−β−および−γ−シクロデキストリンは、従来の方法によっ て容易に製造さね、そして更に、チノイン薬品化学工業有限会社（ＣＨＩＮＯＩ Ｎ、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ａｎｄ　ＣｈｅｍｉｃａｌＷｏｒｋｓ、Ｌ ｔｄ、）、ブダペスト１３２５、ハンガリーの完全所有子会社であるシクロラブ （Ｃｙｃｌｏｌａｂ）：ウォーカー・ケミ−有限会社、生物工学研究部門（Ｗａ ｌｋｅｒ−Ｃｈｅｍｉｅ　ＧｍｂＨ，Ｄｉｖｉｓｉｏｎ　Ｌ。

Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、プリンツレーゲンテンシュトラーセ２２Ｄ−８ ０００、ミュンヘン２２、西ドイツ、アメリカン・メイズ（ＡｍｅｒｉｃａｎＭ ａｉｚｅ）、ハモンド、インディアナ州：ファーマテク・インコーホレーテッド （Ｐｈａｒｍｔｅｃ　Ｉｎｃ、）、私書箱７３０１アラチユアＦＬ３２６１５お よびジャンセン・バイオチク（Ｊａｎｓｓｅｎ、Ｂｉｏｔｅｃ）Ｎ、Ｖ、ラマー ドリース５５、Ｂ−２４３０オーレン、ベルギーから商業的に入手可能である本 発明による、式■、ＩＩまたはＩＩＩの親油性オリゴ糖抗生物質と、少なくとも 化学量論的量の選択された塩基と、一定量のヒドロキシプロピル−α−１−β− または−γ−シクロデキストリンとを含む薬剤組成物の注射によって副作用症候 群を引起こすことなく、動物、特に、人間の血清に対する親油性オリゴ糖抗生物 質の有効な供給を達成するのに十分なこのようなヒドロキシプロピル−α−１− β−および−γ−シクロデキストリンの量を以下の段落に記載する。

このようなヒドロキシプロピル−α−シクロデキストリン（ｒＨＰ−α−ＣＤ」 ）の量は、式Ｉの親油性オリゴ糖抗生物質のモル当りＨＰ−α−ＣＤ約５〜１５ モルである。このようなヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ｒＨＰ −β−ＣＤＪ）の量は、式ＩＩまたはＩＩＩの親油性オリゴ糖抗生物質のモル当 りＨＰ−β−ＣＤ約１〜９モル、好ましくは、約２〜６モルであり：このような ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン（ｒＨＰ−γ−ＣＤＪ）の量は、 式１の親油性オリゴ糖抗生物質のモル当りＨＰ−γ−ＣＤ約２〜８モル、好まし くは、約３〜５モルである。式ＩＩＩによって表わされる親油性オリゴ糖抗生物 質の塩は、ＨＰ−α−ＣＤまたはＨＰ−β−ＣＤまたはＨＰ−γ−ＣＤの分子当 り約２個〜１５個のヒドロキシプロピル基を有する広範囲のヒドロキシプロピル −α−１−β−および−γ−シクロデキストリンと完全な水中溶液を生成するの に唯一適当である。表４に示したように、ＨＰ−β−ＣＤ分子当り３．９個〜７ ．５個のヒドロキシプロピル基を有する広範囲のＨＰ−β−ＣＤは、式ＩＩＩの 化合物１モルと、ＮＭＧ２モルと、ＨＰ−β−ＣＤ６モルとの錯体をマウスモデ ルに非経口注射した際の副作用症候群を本質的に予防した。

表４ 式ＩＩＩの化合物１モルとＮＭＧ２モルと、３．９個〜７．５個のヒドロキシプ ロピル基を有するＨＰ−β−ＣＤ６モルとの水性溶液錯体のマウスへの非経口注 射（８００ＭＰＫ、式ＩＩＩの化合物８０ｍｇ／ｍｌ）による副作用症候群ＩＨ Ｐ−β−ＣＤ分子当りの ヒドロキシプロピル基の数　副作用症候群％ＨＰ−β−ＣＤなし　、。

１　マウス（１０匹の群、ＣＦ−１、平均体重２０ｇ、バーラン・スプラーク・ ドーリ−１１８時間絶食させた）においてＩＶ注射（単一用量）後２分間以内に 観察された副作用症候群。

本発明の物質組成物の開発過程において、本発明者は、親油性オリゴ糖抗生物質 、例えば、式ＩＩＩによって表わされる化合物を、少なくとも化学量論的量の、 例えば、約２〜３モルの好ましい塩、Ｎ−メチルグルカミンおよび十分な量のジ メチルスルホキシドまたはグリセロールまたはソルビタン−モノ−９−オクタデ セノエートーポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）誘導体、例えば、ポリソル ベート８０若しくはトゥイーン８０、或いはデキストラン、例えば、多糖の商標 デキストラン４０または７０註としてα−Ｄ（１−６）結合したＤ−グルコース 単位の主鎖を有するスクロース基質上での細菌増殖作用によって生産された］に 対して加えることによってこのような組成物を製造した。デキストラン４０およ び７０（それぞれの平均分子量４０，０００および７０，０００）は、スクロー ス上のし、メセンテロキシデス（ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｘｉｄｅｓ）の作用によっ て生産された多糖でありｍ；のような十分な量のジメチルスルホキシド、グリセ ロール、ポリソルベート８０またはデキストランは、動物の血清に対する該親油 性オリゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に、副作用症候群の発症を減少 させるかまたは回避させることが分かった。表２の結果を論及する。ＤＭＳＯお よびグリセロールの量の増加［１０重量％までコは副作用症候群の発症を減少さ せたが；そのＤＭＳＯおよびグリセロールの十分な量は、それぞわ、約５〜１０ 重量％および約１０重量％である。デキストラン４０および７０の量の増加も副 作用症候群の発症を減少させたが：このようなデキストラン４０およびデキスト ラン７０の十分な量は、それぞわ、約２〜１０重量％および少なくとも約６重量 ％である。約０．１重量％〜約１重量％の量のトゥイーン８０は副作用症候群の 発症を増加させたが、１重量％より大の量のトゥイーン８０は副作用症候群の発 症を減少させ、そして約２〜約３重量％の量のトウィーン８０はほぼ完全に副作 用症候群の発症を回避させた。２〜約３重量％より大のトウイーン８０の量は十 分であると考えられる（重量％はいずれも組成物の全重量に基いている）。

しかしながら、ヒドロキシプロピル−α−１−β−または−γ−シクロデキスト リンの使用は、本発明の薬学的に許容しつる組成物に好適である。本明細書中前 記の表２を参照されたい。

本発明において用いるのに適していることが分かった塩基は、式１、ＩＩまたは ＩＩＩの親油性オリゴ糖抗生物質の薬学的に許容しうる塩を生成するものであり 、適当な有機塩基および無機塩基がある。適当な有機塩基としては、第一、第二 および第三アルキルアミン、アルカノールアミン、芳香族アミン、アルキル芳香 族アミンおよび環状アミンがある。典型的な有機アミンとしては、クロロプロ力 イン、プロカイン、ピペラジン、グルカミン、Ｎ−メチルグルカミン、Ｎ、Ｎ− ジメチルグルカミン、エチレンジアミン、ジェタノールアミン、ジイソプロピル アミン、ジエチルアミン、Ｎ−ベンジル−２−フェニルエチルアミン、Ｎ、Ｎ′ −ジベンジルエチレンジアミン、コリン、タレミゾール、トリス（ヒドロキシメ チル）アミノメタンまたはＤ−グルコサミンがある。好ましい有機塩基としては 、Ｎ−メチルグルカミン（ｒＮＭＧＪ　）　、ジェタノールアミンおよびトリス （ヒドロキシメチル）アミノメタン（ｒＴＲＩｓＪ）がある。本発明のおけるＮ ＭＧの使用は更に好適である。表２および３を参照されたい。適当な無機塩基と しては、アルカリ金属水酸化物、例えば、水酸化ナトリウムがある。本発明の物 質組成物の製造において有用であることが分かった塩基は、ｐＨが少なくとも約 ９．３である水溶液を生じる。リシンはｐＨが９．３未満の水溶液を生成するの で、リシンは本発明に適当な塩基ではない。二価の金属水酸化物、例えば、アル カリ土類水酸化物、水酸化カルシウムおよび水酸化バリウムは、ｐＨが少なくと も約９．３である６モルのＨＰ−β−ＣＤの存在下において式１．ＩＩまたはＩ ＩＩの親油性オリゴ糖抗生物質の水溶液を生成しなかったし、本発明において用 いるための塩基として許容されなかった。

本発明において有用な塩基に関して本明細書中で用いられる「少なくともほぼ化 学量論的量」という用語は、１個または２個または３個のフェノール性水素を有 する式■、■■またはＩＩＩの親油性オリゴ糖抗生物質の酸性フェノール性水素 と実質的に完全に反応する（すなわち、９９％を越える完全な反応を生じる）の に必要とされる塩基の量を意味する。（式ＩＩＩの化合物は３個のフェノール性 水素を有し、その２個だけが酸性である）。式ＩおよびＩＩ（式中、Ｒ５＝Ｈで ある）を有する化合物に関して、フェノール性酸性水素は分子当り１個だけ存在 し、本発明の薬学的に許容しうる塩基の化学量論的量は、このような塩基を少な くとも約１モルからこのような塩基を最大１２モルまでである。式ＩおよびＩＩ 　（式中、 である）によって表わされる化合物並びに式ＩＩＩを宵する化合物に関して、こ のような化合物のモル当り２個の酸性フェノール性水素が存在し、その２個の酸 性フェノール性水素と完全に反応するのに必要とされる塩基の化学量論的量は、 本発明において有用な薬学的に許容しつる塩基を少なくとも２〜最大約１２モル までである。式ＩおよびＩＩＣ式中、 を有する好ましい親油性オリゴ糖抗生物質並びに式ＩＩＩを有するものに関して 、薬学的に許容しつる塩基、例えば、ＮＭＧの水溶液のｐＨを、より高いｐＨを 有し且つ６〜１２モルのＮＭＧを用いた場合に溶液が高度に緩衝化された溶液に 対立するものとして約９．３の値で維持するには、それを約２〜６モル用いるの が好ましく、約２．０〜３．５モル用いるのが更に好ましく、そして約２〜約３ モル用いるのが最も好ましい。

本明細書中で用いられる「親油性オリゴ糖抗生物質」という用語は、オルトソマ イシン系の抗生物質、更に詳しくはフランバマイシン、エバｍ＝ノミシン、エバ ー二ノミシン類抗生物質、キュラマイシンおよびアビラマイシンＡ−Ｎ−抗生物 質の選択された親油性メンバーを意味する。

ストレプトミセス・ハイグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｈｙｇｒｏ ｓｃｏｐｉｃｕｓ）ＤＳ２３２３０によって生産された親油性オリゴ糖抗生物質 であるフランバマイシンは、その構造式は式Ｉ　（式中、Ｒ１＝Ｒ５＝Ｈ，Ｙ＝ ○Ｈ−Ｒ２＝ＣＨ３Ｈ（ＣＨ３）２・Ｒ３＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８＝Ｒ９＝ＣＨ３、 Ｒ４＝ＣＯＣＨ３およびＷ＝Ｚ＝ＣＩである）ををするもノテあり、Ｗ、Ｄ、オ リス（Ｏｌｌｉｓ）によってＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、（１９７９）。

３５．１０５〜１２７に開示されている。

キュラマイシンＡは、［式Ｉ　（式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、 Ｒ８、Ｒ９、ＷおよびＺは、Ｒ２＝ＣＯＣＨ３およびＹ＝Ｈを除いてフランバマ イシンの場合と同じである）によって表わされる構造式を有するコフランバマイ シン抗生物質である。Ｏ，Ｌ、ガラマリン（Ｇａ　Ｉ　ａｍａ　ｒ　１ｎｅ）ら 、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、（１９６１）、１旦、７６およびＶ、デューロファ ー（Ｄｅｕｌｏｆｅｒ）　ら、Ａｎａｌｅｓ　ｄｅ　Ｑｕｉｍｉｃａ　（１９７ ２）。

旦旦、７８９を参照されたい。

アビラマイシンＡ−Ｎ抗生物質は、微生物ストレプトミセス・ピリドクロモジェ ネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ）。

ＮＲＲＬ２８６０の培養によって生産された抗生物質錯体から単離された親油性 号）８７７〜８８７を参照されたい。アビラマイシンＡ−Ｎ抗生物質の構造式は 、式■　（式中、Ｒ＝Ｒ＝Ｈ，Ｙ＝Ｈ，Ｒ＝Ｃ０ＣＨ（ＣＨ３）　２．ＣＯＣＨ Ｃ０（ＣＨ２）３ＣＨ３、ＣｏＣＨ２ＣＨ３またｆｔＨ，Ｒ３＝ＣＨ３、Ｒ４＝ ＣＯＣＨ３、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３またはＣＨＯＳＲ６＝ＣＨ３またはＨ，Ｒ＝Ｃ ＨまたはＨ：Ｒ８＝ＣＨ３、ＣＨ２０ＨまたはＨ；Ｒ９＝ＣＨａまたはＨ，Ｗ＝ ＨまたはＣＩそしてＺ＝ＣＩである）によって表わされる本発明において有用な エバｍ；ノミシン抗生物質としては、米国特許第３，４９９．０７８号明細書に 記載の、微生物ミクロモノスポラ・カルボネシア変種カルボネシア（Ｍｉｃｒｏ ｍｏｎｏｓｐｏｒａ　ｃａｒｂｏｎａｃｅａ　ｖａｒ。

ｃａ　ｒｂｏｎａｃｅａ）ＮＲＲＬ２９７２およびその変種Ｍ、カルボネシア変 変種アラランティアカａｕｒａｎｔ　１ａｃａ）ＮＲＲＬ２９９７によって生産 された抗生物質錯体から単離されたエバｍ＝ノミシンＢ、　ＣおよびＤがある。

エバｍ＝ノミシンＢＳＣおよびＤ中のニトロ部分の代わりに、ニトロソ、ヒドロ キシルアミノまたはアミノ部分を有するエバｍ：ノミシン誘導体は、米国特許第 ４．　００６．２２５号明細書の方法にしたがってエバｍ＝ノミシンＢＸＣおよ びＤ中のニトロ部分を還元することによって得ることができる。好ましいエバー ニノミシンはＮ−アセチルアミノエバｍ＝ノミシンーＤであり且つ式ＩＩ（式中 、Ｘ＝およびＲ２；ＣＨ３である）によって表わされる。Ｎ−アセチルアミノエ バーニノミシンＤおよびそのジＮ−メチルグルカミン塩は、エバｍ＝ノミシンＢ 、ＣおよびＤのニトロ部分を還元してアミン誘導体を製造した後に、それをＮ− アシルＮ−ジアルキル、例えば、Ｎ　（Ｃ２Ｈ５）　２誘導体に変換することを 開示している米国特許第４，１２９．７２０号明細書の方法によって製造するこ とができる。Ｎ−アシル−Ｎ−ヒドロキシルアミノエバｍ＝ノミシンＢ、Ｃおよ びＤ誘導体並びに薬学的に許容しつるそれらの塩の製法も記載されている。式Ｉ Ｉ（式中、ＣＨ３である）によって表わされるエバｍ＝ノミシン７の製法は、Ａ 、　Ｋ、ガングリ−らによってＪ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、Ｃｈｅｍ、Ｃｏｍｍ、、 １９８０．５６〜５８に開示されている。

ＮＦ２、ＯＨ，ＮＨＣＯＣＨ３、ＮＨＣ２Ｈ５、Ｎ（ｃ２Ｈ５）２、ＮＨＯＨま たはＨ，Ｙ＝ＯＨ，Ｒ２＝ＣＨ３またはＨ；Ｒ３＝Ｈ，Ｒ４＝ＣＨ（ＯＣＨ３） （ＣＨ３）またはＨおよびＲ５＝Ｈまたはである）によって表わされるこのよう な親油性オリゴ糖抗生物質である。

式ＩＩＣ式中、Ｘ＝ＮＯまたはＮＦ２、Ｙ＝ＯＨＳＲ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈおであ る）を有する化合物は、微生物ミクロモノスポラ・カルボネシア変種アフリカー ナＮＲＲＬ１５０９９．ＡＴＣＣ３９１４９の発酵によって生産された抗生物質 １３−３８４錯体から単離される。米国特許第４，５９７，９６８号明細書およ び同第４．７３５，９０３号明細書に開示された抗生物質成分１（式ＩＩ、Ｘ＝ Ｎ０２であり、ＹＳＲ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５はそれぞゎ、抗生物質１３定義 された通りである）は、Ａ、Ｋ、ガングリ−らによってＨｅｔｅｒｏｃ　ｃｌｅ ｓ　（１９８４）２８巻（１号）８３〜８８頁に開示され質は、米国特許第４， ６２２，３１４号明細書および同第４．７６７．７４８号明細書に記載されてい る。

ＸＸ　両　Ｂ４　珈 ＮＯ２０ＨＣＨ（ＯＣＨ３）（ＣＨ３）　ＨＣ）−１３ＮＯ２ＨＣ１−１（ＯＣ Ｈ３）（ＣＨ３）　”である）を有する化合物がある。

最も好ましいエバー二ノミシン類抗生物質は、５６−ゾアセチルー５７−ジメチ ル−４５−〇−デ（２−メチル−１−オキソプロピル）−１２−０−（２，３， ６−ドリデオキシー３−Ｃ−メチル−４−０−メチル−３−二トローα−Ｌ−ア ラビノ−へキソピランソイル）−フランバマイシン５６−（２，４−ジヒドロキ シ−６−メチルベンゾエート）と命名さね、分子式Ｃ７ｏＨ９７Ｎ○３８”２お よび分子量１６２９を有し、そして式ＩＩＩによって表わされる。

式ＩＩＩを有する好ましい化合物は、ミクロモノスポラ・カルボネシア変種アフ リカーナＮＲＲＬ１５０９９．ＡＴＣＣ３９１４９の発酵によってまたは、更に 好ましくは、以下に記載したように得られたその改良菌株によって得られる。

培養物ＮＲＲＬ１５０９９．ＡＴＣＣ３９１４９の菌株５ＣＣ１４１３を用いる と、式ＩＩＩを有する好ましい化合物を、米国特許第４，５９７，９６８号明細 書の実施例１に概説された方法によって適切に得ることができる。具体的な実施 例において、本方法により、菌株５ＣＣ１４１３の発酵の初期段階接種材料は、 ２５０ｍ１のエレンマイヤーフラスコ中の増殖培地５０ｍ１から凍結全ブイヨン ２．５ｍｌを移すことによって調製された。増殖培地は、ビーフェキス０．　３ ％ニドリプトン０．５％：デキスロース０．１％、ジャガイモデンプン２．４％ ；酵母エキス０．５％；および炭酸カルシウム０．２％から成った。培地のｐＨ は、滅菌する前に７．５に調整された。フラスコを２５Ｏｒ、ｐ、　ｍ、での回 転シェーカー上において３０℃で４８時間インキュベートした。第二段階増殖用 に、同培地５００ｍ１が入っている２リツトルエレンマイヤーフラスコに５％容 量の第一段階増殖物を接種した。インキュベーション条件は前と同様であった。

第三接種材料段階は全撹拌槽発酵用に用いられ且つ第二段階に用いたのと同一条 件下で培養物を２４時間インキュベーションすることによって製造された。

最初に、１４リットルＮＢＳ実験室発酵槽中において、酵母エキス０．５％：カ ゼイン加水分解産物０．５％；セレローズ１％；可溶性デンプン２．０％；炭酸 カルシウム０．４％；および塩化コバルト０．２４ｍｇ％を含む発酵培地中で１ ０リツトルの発酵を実施した。培地のｐＨは滅菌前に６．７に調整さね、そして 接種前に７．０に調整される。第三段階接種材料（２，５％）は、空気０．３５ ｖｖｍおよび３５０ｒｐｍ撹拌を用いて３０℃で行なわれた発酵を開始するのに 用いられた。

発酵の経過中に、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ ）２０９Ｐ　（寒天のｐＨ７，０）および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃ ｏｌｉ）ＡＴＣＣ１０５３６（寒天のｐＨ８，０）に対する全ブイヨンの生物検 定によって抗生物質生産を２４時間毎に監視した。生産性微生物の成長快填され た細胞容積）、ｐＨおよび溶解酸素量を、更に、断続的にかまたは連続的に測定 した。典型的な１０リットル槽発酵の経過を図１に図示する。

本発明者は、５ＣＣ１４１３、ＮＲＲＬ１５０９９、ＡＴＣＣ３９１４９から、 標準的な突然変異誘発剤を用いて改良菌株を発生させ、式ＩＩＩを有する好まし いエバー二ノミシン類抗生物質を改良された収量で生産する菌株を得た。具体的 な実施例において、親菌株５ＣＣ１４１３、ＮＲＲＬ１５０９９、ＡＴＣＣ３９ １４９を、５ＣＣ１４１３、ＡＴＣＣ３９１４９、ＮＲＲＬ１５０９９の培養物 の９０％を死滅させるのに十分な量の突然変異誘発剤であるＮ−ニトロソグアニ ジン（ＮＴＧ）に対して暴露した。１５００個の生存単離物の黄色ブドウ球菌お よび大腸菌に対する増大した生物学的活性を検査して、それらの単離物が式ＩＩ ■の望ましい抗生物質の改良された生産を示すことを確認し總増大した活性を測 定するのに用いられた試験法は以下の通りである。すなわち、単一コロニー単離 物を、米国特許第４，５９７，９６８号明細書の実施例１の増殖培地１０ｍ１が 入っている試験管中で増殖させ且つ回転シェーカー上で２５０ｒ、ｐ、　ｍ。

において３０℃で４８時間振とうした。発酵実験は、発酵培地５０ｍ１が入って いる２５０ｍ１のエレンマイヤーフラスコに種を２．５ｍｌ移し且つ回転シェー カー上で２５Ｏｒ、ｐ、　ｍ、において３０℃で９６時間インキュベートするこ とによって開始された。次に、黄色ブドウ球菌および大腸菌に対する活性を評価 することによって発酵後に得られた抗生物質の改良された抗生物質生産を検定し 、そして望ましい抗生物質の改良された収量を与える単離物を膨１１ルた。本明 細書中において５ＣＣ１６３１菌株と称する典型的な改良された単離物に関する 結果を表５に記載する。

前述の菌株発生手順を、典型的な改良された単離物５ＣＣ１６３１に再度培養物 の９０％を死滅させるのに十分な量のＮＴＧに対する暴露を更に行なった後、エ バｍ；ノミシンＤ１５０μｇ／ｍｌ含有寒天プレート上の単離物を選択すること によって繰り返した。望ましい抗生物質の増大した生産を与える単離物を、黄色 ブドウ球菌および大腸菌に対するそれらの生物学的活性を評価することによって 再度選択した。次に、本明細書中において５ＣＣ１７５６菌株と称するこのよう な単離物の１種類を用いて、式ＩＩＩを有する好ましい抗生物質を生産した。

更に、５ＣＣ１７５６のＮＴＧ突然変異誘発により、本発明の生産菌株５ＣＣ２ １４６を生じた。

前述の突然変異操作において、両方の実験のプロトコルは、予め前記に記載した とおりであった。最後の二つの突然変異実験に関して、発酵ブイヨンを酢酸エチ ルで抽出し、そして濃縮物をクロロホルム・メタノール（９：１ｖ／ｖ）から成 る溶媒系においてワットマン（Ｗｈａ　ｔｍａｎ）ＬＫＧＤＦ薄層プレート上で クロマトグラフィーによって分離した後、黄色ブドウ球菌および大腸菌に対する バイオオートグラフィーを行なって、抗生物質錯体の全成分の生産を確実にした 。式ＩＩＩの化合物の増加した力価を追跡するために、シマズ（Ｓｈｉｍａｄｚ ｕ）ＣＳ−９３０ＴＬＣプレートスキヤナーを用いることによって薄層プレート を検査し、モしてＨＰＬＣを用いることによって一層高い生産性抽出物を定量し た。混合力価は、式ＩＩＩの化合物（米国特許第４．　５９７゜９６８号明細書 の抗生物質１３−３８４、成分１）および前記成分１のニトロソ類似体、すなわ ち、抗生物質１３−３８４、成分１ａの和として定義される。

初期の観察により、親菌株５ＣＣ１４１３は３４℃で速やかに成長したが、温度 が更に低い場合に抗生物質生産は最適であったことが示された。この現象を発酵 最適化の手段として研究した。温度実験の結果は、インキュベーションの２４時 間後に温度を３４℃〜３０℃まで低下させた場合に最適生産が得られたことを示 した。撹拌槽中の以後の作業は全て、発酵を３４℃で２４時間インキュベートす るプロトコルに続いて、温度を発酵実験期間中に３０℃まで低下させることによ って行なった。

培地実験は、改良された生産菌株の単離物と組合せて行なった。炭素および窒素 源置換並びに鉱物および他の複合栄養素の添加を研究した。カゼイン加水分解産 物を肉かまたは魚ペプトンで置き換え且つジャガイモデキストリン（ＰＤＰ６５ ０）を可溶性デンプンに置き換えることは、菌株５ＣＣ１４１３および５ＣＣ１ ６３１の抗生物質生産を増大させた。式ＩＩＩの化合物の生産における引続きの 増大は、菌株５ＣＣ１７５６を用いる実験においてトウモロコシ浸漬液および塩 化ニッケル（Ｉ　Ｉ）を加えることによって観察された。式ＩＩＩの化合物用に 最適化された本生産発酵培地（４１＋１／２Ｎｉ）は、グルコース２．２重量％ ；ＰＤＰ６５０デキストリン４．０重量％；酵母エキス０．５重量％；肉ペプト ン０．６重量％、トウモロコシ浸漬液０．５％容量、塩化ニッケル２．５ｘＩＱ ”−６Ｍ；および炭酸カルシウム０．４重量％を含む。培地のｐＨは、炭酸カル シウムを加える前に６．７に調整された。表６は、振とうフラスコ実験（２５０ ｍｌエレンマイヤーフラスコ中に本培地５０ｍ１，３００ｒ、ｐ、ｍ、において ３０℃で９６時間）で得られた菌株５ＣＣ１４１３，５ＣＣ１６３１，５ＣＣ１ ７５６および５ＣＣ２１４６の力価の比較を示す。顕著な力価改良恍の親である ５ＣＣ１４１３の１５倍）が明らかに実証された。力価５５５〜７５０μｇ／ｍ ！（式ＩＩＩの化合物およびそのニトロソ誘導体の和）は、１００リツトルの発 酵おいて本生産培地を本最良の生産菌株Ｓ　ＣＣ２１，４６と一緒に用いて達成 された（表７）。

式ＩＩＩの化合物およびそのニトロソ類似体を含む親油性オリゴ糖抗生物質錯体 の単離は、米国特許第４．５９７，９６８号明細書の実施例ＩＣの方法を用いる ことによって達成された。発酵ブイヨンをｐＨ７に調整し且つ発酵ブイヨン容量 の２倍の容量の酢酸エチルで２回抽出した。混合した酢酸エチル抽出物を濃縮し 、そして式ＩＩＩの化合物およびそのニトロソ頭似体の量をＨＰＬＣによって決 定した。ニトロソ類似体は、第三ブチルヒドロペルオキシド（ｔ　Ｂ　ｕ　Ｏ２ Ｈ）などの酸化剤と、非プロトン性有機溶媒中に室温で溶解したアセチルアセト ン酸バナジルとを用いることによって式ＩＩＩを有するニトロ化合物に変換され た。反応経過を、例えば、ＨＰＬＣによって監視した。反応混合物を亜リン酸ト リアルキルで急冷し、そして粗生成物を標準的なりロマトグラフィー技術、例え ば、シリカゲルカラム知マドグラフィー（アセトン／ＣＨ２Ｃｌ２）または、フ ラクトゲル（Ｆｒａｃｔｏｇｅｌ）（トーヨー・バール（Ｔｏｙｏ　Ｐｅａｒｌ ））としてトーヨー・ハース（Ｔｏｙｏ　Ｈａａｓ）、フィラデルフィア、ペン シルバニア州から入手可能なポリヒドロキシビニルポリマー含有カラムによって 精製した。

本発明の薬学的に許容しつる物質組成物は、（ａ）式１．ＩＩ、ＩＩＩを有する 抗生物質、　（ｂ）該抗生物質の薬学的に許容しつる塩を生成しつる塩基および （Ｃ）規定量の、例えば、シクロデキストリン分子当り２〜１５個のヒドロキシ プロピル基を有するヒドロキシプロピル−α−１−β−または−γ−シクロデキ ストリンに加えて、薬学的に許容しつる非イオン界面活性剤を約Ｏ〜約６．　０ 重量％（式１．ＩＩ、ＩＩＩの抗生物質基準）含むことができる。好ましい薬学 的に許容しうる非イオン界面活性剤は、用いられる場合、ソルビタン−モノ−９ −オクタデセノエートーポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）誘導体、例えば 、トウイーン８０であるが、薬学的に許容しつる組成物、すなわち、薬学的に許 容しうる担体中に溶解した場合に、標準的な分析技術、例えば、比濁分析によっ て測定されるかすみ、曇りおよび粒状物質を実質的に含まない組成物を生成する 何等かの他の非イオン界面活性剤である。本発明の特に好ましい物質組成物は、 ２．８５〜５．７０重量％のトゥイーン８０をおよび式ＩＩＩの抗生物質化合物 を生物学的活性 本発明者は、意外にも、式ＩＩＩで表わされる化合物１モル、ＮＭＧを２モルお よびβ−シクロデキストリン分子当り７．４個のヒドロキシプロピル基を有する ２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン６モルを含む本発明の好まし い物質組成物が、種々の細菌に対してほぼ同一の幾何平均ＭＩ　Ｃ（ＧＭＭ）お よび式ＩＩＩの化合物自体とほぼ同一の血清タンパク質結合値を有することを発 見した。本発明の物質組成物はいずれも同様に挙動すると予想される。

インビトロ抗細菌活性試験を、ミュラー・ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔ ｏｎ、）寒天での従来の寒天希釈法によって実施した。上記に挙げた本発明の好 ましい物質組成物に関するおよび式ＩＩＩの化合物に関するＧＭＭを、種々の細 菌、例えば、グラム陽性およびグラム陰性細菌に対して決定した。「感受性グラ ム陽性およびグラム陰性細菌感染」という用語は、耐メチシリン性およびメチシ リン感受性ブドウ球菌、連鎖球菌および腸球菌の種々の菌株などの広範囲のグラ ム陽性細菌感染並びに大腸菌、クレブシェラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｉ　Ｉａ）、サ ルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅ　ｌ　１ａ）およびシュードモナス属（Ｐｓ　ｅｕ ｄｏｍｏｎａｓ）などの若干のグラム陰性細菌感染を意味する。式ＩＩＩの化合 物は、耐メチシリン性ブドウ球Ｍ　（ＧＭＭ、０．１μｇ／ｍｌ）およびメチシ リン感受性ブドウ球菌（ＧＭＭ、０．５μｇ／ｍｌ）双方に対して優れた活性を 有した。式ＩＩＩの化合物は、更に、エンテロコツカス・フェカリス（Ｅｎｔｅ ｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ）（ＧＭＭｓ　Ｏ，４９１１ｇ／ｍｌ）に 対する十分な活性（バンコマイシンよりも２倍以上強力）および耐バンコマイシ ン性の連鎖球菌および腸球菌の種々の菌株（ＭＩＣ≧１２８μｇ／ｍｌ）に対す る十分な活性ＣＭＩＣ≦０．５μｇ／ｍＩ）を有した。式ＩＩＩの化合物は、ボ レリアリく−グドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ　ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）（Ｍ ＩＣ≦０．４９μｇ／ｍｌ）並びにレジュネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎ ｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）およびレジュネラ・ロングビーチェー（Ｌ 、Ｉｏｎｇｂｅａｃｈｅａｅ）（ＭＩＣ２，５μｇ／ｍｌ）に対して極めて活性 であったが、グラム陰性細菌（ＧＭＭ、≧７６０μｇ／ｍｌ）、腟トリコモナス （Ｔｒｊｃｈｏｍｏｎａｓ　ｖａｇｊｎａｌｉｓ）（ＭＩＣ≧１９２μｇ／ｍｌ ）およびマイコプラズマ種（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ　ｓｐ、）　（ＭＩＣ２００ μｇ／ｍｌ）に対しては僅かのみ活性であった。他の抗生物質との交差耐性は観 察されなかった。

式ＩＩＩの化合物は、ブドウ球菌の種々の臨床室および実験室菌株に対して中程 度の殺細菌活性を有した。ブドウ球菌および腸球菌に対する式ＩＩＩの化合物の 殺細菌活性は、バンコマイシンのそれと同様であった。式ＩＩＩの化合物のマウ ス中のブドウ球菌に対する活性（Ｐ　Ｄ　ｓ　ｏは０．５〜２５．０ｍｇ／ｋｇ である）は、バンコマイシンのそれ（０，７〜２８．５ｍｇ／ｋｇ）と同様に十 分であった。

式ｌ１１（７）化合物およびＮＭＧ２分子のＩＶ投与（３０ｍｇ／ｋｇ）の後に 、長血清ベータ半減期を有するラットにおいて高血清濃度（ピーク約９０μｇ／ ｍｌ）が観察された。

本発明の薬学的に許容しうる物質組成物は、上記に挙げた感受性細菌に対して、 更には、梅毒トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ　ｐａｌｌｉｄｕｍ）を含むス ピロヘータ、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｄｉｆ ｆｉｃｉｌｅ）を含む嫌気性菌に対して並びにニューモジステイス（Ｐｎｅｕｍ ｏｃｙｓ　ｔ　ｊ　ｓ）、トキソプラズマ（Ｔｏｘｏｐｌ　ａｓｍａ）　、原生 動物および嬬虫に対しても活性であると予想される。

ボレリア・バーブドルフェリおよびレジュネラ・ニューモフィラおよびレジュネ ラ・ロングビーチェーに対する式ＩＩＩの化合物の活性に基いて、本発明者は、 式ＩＩＩの化合物を含む物質組成物がライム病および在郷軍人病に対してヒトモ デルにおいて活性を示すと予想している。

本発明は、感受性グラム陽性およびグラム陰性細菌感染に苦しむ動物、特にヒト に対して、本発明の物質組成物および薬学的に許容しうる担体を有する一定量の 薬剤組成物を投与することによって動物においてこのような感染を治療するまた は予防する方法を提供する。

本発明の物質組成物は、薬学的に許容しうる担体、例えば、滅菌水、水性エタノ ール、植物油またはポリオール、例えば、ポリエチレングリコールおよびプロピ レングリコールと混合することができ、しかも、種々の製剤において経口によっ て、非経口によってまたは局所的に投与することができる。滅菌水を担体として 用いるのが好適である。滅菌水は、場合により、薬学的に許容しつる物質、例え ば、塩化ナトリウム、硝酸カリウム、グルコース、マンニトール、デキストロー ス、ソルビトール、キシリトールまたは緩衝剤、例えば、リン酸塩、酢酸塩若し くはクエン酸塩並びに防腐剤を含むことができる。

本発明の物質組成物は、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩを有する親油性オリゴ糖抗生物 質を、水などの適当な溶媒中でその薬学的に許容しつる塩を生成することができ る少なくともほぼ化学量論的量の塩基および規定量の、例えば、シクロデキスト リン分子当り約２個〜１５個のヒドロキシプロピル基を有するヒドロキシプロピ ル−α−１−β−または−γ−シクロデキストリンと混合することによって製造 される。混合する順序は重要ではないが、好ましくは、特定のシクロデキストリ ン水溶液を塩基と混合するか、或いは、塩基を親油性オリゴ糖抗生物質と混合し た後にそれを加えてよい。水溶液の生成は１５℃〜３５℃の温度で起こりつる。

そのように生成された水溶液を濾過して透明な錯体水溶液を製造し、それを蒸発 させるかまたは、好ましくは、凍結乾燥させて、水などの一定量の薬学的に許容 しうる担体を加えることによって容易に還元される凍結乾燥粉末の形で本発明の 物質組成物を生成することができる。薬学的に許容しうる非イオン界面活性剤、 例えば、トゥイーン８０は、用いられる場合、濾過および凍結乾燥の前に水溶液 に加えられるであろう。或いは、使用前に、例えば、ＩＶ用製剤として水溶液を 凍結し、解凍した後、濾過することができる。本発明の特徴は、本発明の薬剤組 成物が水溶液を生成し、更に、一定量のヒドロキシプロピル−α−１−β−また は−γ−シクロデキストリンを約２０重量％未満、好ましくは１０重量％未満、 更に好ましくは約１．０〜５．０重量％含むことである。感受性細菌感染、特に 、感受性グラム陽性およびグラム陰性細菌感染に苦しむ動物の血清に対して親油 性オリゴ糖抗生物質を安全且つ在勤に供給するのに有用な薬剤組成物を、例えば 、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを２０重量％未満用いることに よって製造することができたという発見は、ヒドロキシプロピル−β−シクロデ キストリンを２０〜５０重量％用いて薬剤のゲル化または沈殿を防止するボドー の米国特許第４．９８３，５８８号明細書の内容およびヒドロキシプ口ビル−β −シクロデキストリンを４０〜６０重量％用いて、レチン酸の塩を含む種々の薬 剤を可溶化するピサの米国特許第４．７２７．０６４号明細書の内容を考えると 特に意外である。

経口投与用に、本発明の組成物を錠剤、カプセル剤、エリキシル剤等の形で配合 することができる。錠剤およびカプセル剤はデンプンまたはラクト−などの賦形 剤を含むことができ、液体は着色剤または看香剤を含むことができる。局所用製 剤は、クリーム剤、疎水性および親水性軟膏剤または水性、非水性若しくはエマ ルジシン型ローシ町ン剤並びに腟座安ｊまたは散剤の形であってよい。このよう な製剤の典型的な担体は、水、油、グリース、ポリエステルおよびポリオールで ある。非経口製剤、例えば、注射用剤形は、通常、液剤または懸濁剤などの液体 であり、典型的な担体は蒸留水および生理食塩液である。非経口製剤が好適であ る。静脈内（ＩＶ）製剤は更に好適である。

何等かの特定の剤形で投与するための用量は、様々な因子、例えば、治療される 動物、特に、人間などの哺乳動物の体重、年齢および性別、親油性オリゴ糖抗生 物質に対する感染性微生物の感受性並びに感染の程度および苛酷さに依る。概し て、投与される式ＩＳ　ＩＩまたはＩＩＩの親油性オリゴ糖抗生物質の投薬量は 、分割量において約１．０ｍｇ〜約１５ｍｇ／キログラム（体重）、好ましくは 約５ｍｇ／キログラム（体重）７日であり、具体的な投薬量は開業医の裁量に委 ねられており、ＩＶ投与が好ましい。

ある種の患者の本発明の組成物による治療において、他の薬学的に活性な成分を 同−投薬量単位中に含むことが可能である。

本明細書中前記に記載したように改良されたミクロモノスポラ・カルボネシア変 種アフリカーナＮＲＲＬ］５０９９、ＡＴＣＣ３９１４９の菌株５ＣＣ２１４６ の１００リットル発酵は、下記の生産培地（４Ｉ＋１／２Ｎｉ）を用いたことお よび発酵を３４℃で２４時間行なった後に温度を３０℃まで発酵実験期間中、す なわち、更に７２時間（全発酵時間９６時間）低下させたことを除き、米国特許 第４．５９７．９６８号明細書の実施例ＩＢの方法にしたがって行なった。通気 および撹拌速度は、それぞれＱ、３５ｖｖｍおよび３５０ｒｐｍであっ九グルコ ース　２．２％（重ｊわ ＰＤＰ６５０デキストリン　４．０％（重量）酵母エキス　０．５％（Ｉｌｌ） 肉ペプトン　０．６％（重量） トウモロコシ浸漬液　０．５％（容量）塩化ニッケル　２．５ｘｌＯ−６Ｍ 炭酸カルシウム　０．４％（重量で） 水道水　１０１００Ｏになるまで十分にＢ、単離 実施例ＩＡの発酵ブイヨンを酢酸エチル２００リツトルで２回抽出する。酢酸エ チル抽出物を混合し且つ濃縮して、式ＩＩＩの化合物およびそのニトロソ類似体 （ＨＰＬＣによって決定される）の混合物を含む濃厚抗生物質錯体を提供する（ Ａ）実施例１に記載したように製造され且つ式ＩＩＩの化合物１モルに対してニ トロソ類似体３．４モルの混合物２９４ｇ　（３２％）を含む抗生物質錯体９１ ９ｇに対して、酢酸エチル４．６リツトル中においてＮ　ａ　ＨＣＯａ　６８． ８　ｇおよびアルドリッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ）から入手可能な２．　２．　４− トリメチルペンタン中のアセチルアセトン酸バナジル３Ｍ（０，０６当量）２． ９８ｇを溶解させ：そのように生成された混合物に対して３Ｍ　ｔ−ブチルヒド ロペルオキシド３９４ｍＬを１／２時間後に加えた。アセチルアセトン酸バナジ ル１．４５ｇ　（０，０３当ｌの一部分をそれに対して０時間に並びに１時間後 、１／２時間後、２１／２時間後、３１／２時間後および４時間後に加えること によって、０．１５当量のアセチルアセトン酸バナジルを４時間にわたって加え 總反応混合物を水浴中に浸漬し、そして亜リン酸トリエチル（Ｃ２Ｈ５ｏ）３Ｐ を２０３ｍＬ　（０，５当量）それに対して加えた。そのように生成された反応 混合物を等量の酢酸エチルで希釈し、同時に、反応混合物の温度を５３０℃で保 持した。希釈した酢酸エチル反応混合物を水で２回洗浄した。水性層に塩を加え 、それを酢酸エチルで抽出した。混合した有機抽出物をＭｇＳＯ４上で乾燥させ 、濾過し、そして濃縮した。そのように生成された残留物を最小量のアセトン中 に溶解させ且つ１　：　９　（ｖ／ｖ）のエチルエーテル／ヘキサン７リツトル 中に沈殿させた。残留物を濾過し且つ真空下で乾燥したヘキサンで洗浄し、そし て加熱して、式ＩＩＩを有するニトロ化合物を３０％（２７８ｇ）含む９２８ｇ を得た。

（Ｂ）実施例２人の残留物をカラム中のシリカゲル５ｋｇで精製した。カラムは 、順次に１０％、２０％、２５％、３０％、３５％（ｖ／ｖ）のアセトンを含エ チルエーテル／ヘキサン１０部中に沈殿させた。生成物を濾過し、そして加熱す ることなく真空下で乾燥させた。主要画分は式ＩＩＩの化合物を１４７．５ｇ含 んでいた（９８．７％純粋）。他の画分は粗生成物を含んでおり、少なくとも９ ６〜９８％純粋な生成物が得られるまで反復シリカゲルクロマトグラフィーに供 した。構造はＮＭＲおよびＭＳによって決定さね、式ＩＩＩの構造と一致するこ とが分かった。

実施例３Ａ Ｎ−メチルグルカミン（ｒＮＭＧＪ）２３．９７ｍｇおよび、２−ヒドロキシプ ロピル−β−シクロデキストリン（ｒＨＰβＣＤＪ）の分子当り７．４個のヒド ロキシプロピル基を有するＨＰβＣＤ５７０．９０ｍｇを含む水溶液を水５ｍＬ 中で製造した。

この溶液に対して、式ＩＩＩの化合物を１００ｍｇ加えた。穏やかに撹拌後、式 ＩＩＩの化合物２０ｍｇ／ｍＬを含む均一な錯体が生成された。３種類の成分の モル比は、式ＩＩＩの化合物１モル対ｒＮＭＧＪ　２モル対ＨＰβＣＤ６モルで あった。そのように生成された溶液を０，４５μｍの膜を介して濾過し且つ凍結 乾燥させ、そして水分不含環境において貯蔵した。薬剤組成物の製法には、水な どの薬学的に許容しうる担体を加えた。同様の結果が、β−シクロデキストリン のモル当り３．９個〜７．５個のヒドロキシプロピル基を有するＨＰβＣＤを用 いて得られた。

この実施例のこれらの手順にしたがって製造された均一な錯体の透明な水溶液の 生成は、標準的な技法、すなわち、光散乱比濁分析およびプロトンＮＭＲにおけ る線幅測定値によって確証される。本発明の方法によって製造された均一な錯体 の透明な水溶液の薬剤組成物の安全且つ有効な投与は、表１〜４に報告されてい るような種々のインビボ動物モデルにおいて検査された。

実施例３Ｂ 分子当り７．４個のヒドロキシプロピル基を有するＨＰβＣＤの１７５０ｍｇを ＮＭＧ１２６ｍｇおよび式ＩＩＩの化合物３５０ｍｇに対して加えることを除き 、実施例３Ａの手順を行なう。そのように生成された均一溶液中の３種類の成分 のモル比は、式ＩＩＩの化合物１モル対ＮＭＧ３モル対ＨＰβＣＤ５モルであっ た。この溶液に対して、粒状マンニトール、米国薬局方等級５００ｍｇおよびポ リソルベート８０（トゥイーン８０）国民医薬品集１０ｍｇを加えた。トウィー ン８０の重量％は、式１１１の化合物基準で２．８５％である。そのように生成 された溶液を、実施例３Ａに記載したように濾過し且つ凍結乾燥させた。

凍結乾燥組成物は、水分不含環境においてバイアル中に貯蔵される。静脈内投与 に適当な薬剤組成物の製法には滅菌水２０ｍ１を加える。

実施例４ 以下の実施例は、式１１１の化合物のＮＭＧ塩の２，４−ジヒドロキシ−６−メ チルフェニル環（非クロロ芳香族）および３，５−ジクロロ−２−メトキシ−４ −ヒドロキシ−６−メチルフェニル環（ジクロロ芳香族環）と、ＨＰβＣＤのモ ル当り７．４個および３．４個のヒドロキシプロピル基を有する２−ヒドロキシ プロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ）およびＨＰγＣＤのモル当り ４．４個のヒドロキシプロピル基を有する２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロ デキストリン（ｒＨＰγＣＤＪ）との錯体形成に関する平衡定数の決定にＮＭＲ 化学微量滴定技術を用いることを示す。測定はパリアン（Ｖａ　ｒ　ｉ　ａｎ） 　ＸＬ４００を用いて２０℃において４００Ｈｚで行なった。

Ａ１式ＩＩＩの化合物１０ｍｇ／ｍｌ　（Ｄ２０）および３当量のＮ−メチルグ ルカミン（ｒＮＭＧＪ）をむ溶液を製造した。この溶液に対して、ＨＰβＣＤの 分子当り７．４個のヒドロキシプロピル基を有するＨＰβＣＤの一部分ｍｇを加 えた。式ＩＩＩの６８メチル基および式ＩＩＩの５４メチレンプロトンの化学シ フトの変化を、増加量のＨＰβＣＤを加えながら測定した。錯体形成５０％に関 する平衡定数は、標準的な技法を用いて計算された。双方の芳香族環において９ ０％の錯体形成または結合を達成するのに必要とされるＨＰβＣＤのモルを更に 決定した。双方の芳香族部分において９０％の錯体形成を達成するのに必要とさ れるＨＰβＣＤのモルは６．６であり；５０％の錯体形成を達成するには、ＨＰ βＣＤ２モルが必要とされた。平衡定数は下記の表８に報告されている。

Ｂ、ＨＰβＣＤのモル当り３．４個のヒドロキシプロピル基を有するＨＰβＣＤ を用いることを除き、実施例４Ａの手順を行なった。結果を下記の表８に報告す る。双方の芳香族部分において９０％の錯体形成を達成するのに必要とされるＨ ＰβＣＤのモルは６．６であった。

Ｃ，ＨＰγＣＤのモル当り４．４個のヒドロキシプロピル基を有するＨＰγＣＤ を用いることを除き、実施例４Ｃの手順を行なった。双方の部分において９０％ の錯体形成を達成するのに必要とされるＨＰγＣＤのモルは４４０であり；５０ ％の錯体形成を達成するには１．４モルが必要とされ總結果を下記の表８に報告 する。

表８ １モルの化合物ＩＩＩ：３モルのＮＭＧとＨＰβＣＤおよびＨＰγＣＤとの錯体 に関する平衡定数（リットル１モル）化合物ＩＩＩ中　ＨＰｆ３ＣＤ　ＨＰβＣ Ｄ　ＨＰγＣＤの錯体形成部分　ｎ１＝７．４　ｎ１＝３．４　ｎ２＝４．４非 クロロ芳香族環　１８３±５　１８８±５　３５５±９３ジクロロ芳香族４環　 ９５３±１８　９８３±３４　３１５±２８１ｎ＝ＨＰβＣＤの分子当りのヒド ロキシプロピル基の平均数。

２ｎ＝ＨＰγＣＤの分子当りのヒドロキシプロピル基の平均数。

ＮＭＲ化学微量滴定技術を用いることによって、式ＩＩＩの抗生物質の３＝ＩＮ ＭＧ塩１モルに必要とされるＨＰβＣＤの分子当り７．４個のヒドロキシプロピ ル基を有するＨＰβＣＤの錯体形成量は、（式ＩＩＩ中の双方の芳香族基におい て）９０％の錯体形成を達成する６、６モルであり且つ式ＩＩＩ中の双方の芳香 族基において５０％の錯体形成を達成する２モルであると決定された。

（山山弧」［に刃）卓瞬］［４至■ （１山ＯＬ／１山）喜往１ｒＤｒ＊’Ｍ−手続補正書 平成　６年　４月１８黒前

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．物質組成物であって、 （ａ）式Ｉ ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ （式中、 Ｒ１＝▲数式、化学式、表等があります▼またはＨであり；Ｘ＝ＮＯ２、ＮＯ、 ＮＨ２、ＮＨＣＯＣＨ３、ＮＨＯＨ、ＮＨ（Ｃ２Ｈ５）、Ｎ（Ｃ２Ｈ５）２、Ｏ ＨまたはＨであり；Ｒ２＝ＣＨ３、ＣＯＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＯＣＨ３、ＣＯ（ ＣＨ２）３ＣＨ３、ＣＯＣＨ２ＣＨ３またはＨであり； Ｒ３＝ＣＨ３またはＨであり； Ｒ４＝ＣＯＣＨ３、ＣＨ（ＯＣＨ３）（ＣＨ３）、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、ＣＨＯ またはＨであり； Ｒ５＝▲数式、化学式、表等があります▼またはＨであり；Ｒ６＝ＣＨ３または Ｈであり； Ｒ７＝ＣＨ３またはＨであり； Ｒ８＝ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨまたはＨであり；Ｒ９＝ＣＨ３またはＨであり； Ｙ＝ＯＨ、ＨまたはＣＨ３であり； Ｗ＝ＣｌまたはＨであり；そして Ｚ＝ＣｌまたはＨである） によって表わされる親油性オリゴ糖抗生物質；（ｂ）式Ｉを有する親油性オリゴ 糖抗生物質と一緒に薬学的に許容しうる塩を生成しうる少なくともほぼ化学量論 的量の塩基；（ｃ）一定量のジメチルスルホキシド、グリセロール、ソルビタン −モノ−９−オクタデセノエート−ポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）誘導 体、デキストラン、ヒドロキシプロピル−α−、−β−または−γ−シクロデキ ストリン、そこにおいて該α−、β−およびγ−シクロデキストリン上のヒドロ キシプロピル置換基の平均数は約２個〜約１５個の範囲内であり、そして該量は 、動物の血清に対する該親油性オリゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に 、副作用症候群を回避するのに十分である；および（ｄ）薬学的に許容しうる非 イオン界面活性剤０〜６．０重量％（式Ｉを有する抗生物質基準） を含む上記物質組成物。
2. ２．物質組成物であって、 （ａ）式ＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ（式中、 Ｘ＝ＮＯ２、ＮＯ、ＮＨＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＣＯＣＨ３、ＮＨＣ２Ｈ５、Ｎ（Ｃ ２Ｈ５）２、ＯＨまたはＨであり；Ｙ＝ＯＨ、ＨまたはＣＨ３であり； Ｒ２＝ＨまたはＣＨ３であり； Ｒ３＝Ｈであり； Ｒ４＝ＨまたはＣＨ（ＯＣＨ３）（ＣＨ３）であり；そしてＲ５＝Ｈまたは▲数 式、化学式、表等があります▼である）によって表わされる化合物； （ｂ）式ＩＩを有する親油性オリゴ糖抗生物質と一緒に薬学的に許容しうる塩を 生成しうる少なくともほぼ化学量論的量の塩基；（ｃ）一定量のヒドロキシプロ ピル−α−、−β−または−γ−シクロデキストリン、そこにおいて該α−、β −またはγ−シクロデキストリン上のヒドロキシプロピル置換基の平均数は約２ 個〜約１５個の範囲内であり、そして該量は、動物の血清に対する該親油性オリ ゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に、副作用症候群の発症を回避するの に十分である；および（ｄ）薬学的に許容しうる非イオン界面活性剤０〜６．０ 重量％（式ＩＩを有する化合物基準） を含む上記物質組成物。
3. ３．（ａ）式ＩＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩによって表わされる組成物； （ｂ）式Ｉ１１を有する化合物の薬学的に許容しうる塩を生成しうる少なくとも 約２当量の塩基（式ＩＩＩの化合物のモル当り）；（ｃ）ヒドロキシプロピル− α−、−β−または−γ−シクロデキストリンの分子当り約２個〜約１５個のヒ ドロキシプロピル基を有する一定量のヒドロキシプロピル−α−、−β−または −γ−シクロデキストリン、そこにおいて該量は、動物の血清に対する該親油性 オリゴ糖抗生物質の有効な供給を達成し、同時に、副作用症候群の発症を回避す るのに十分である；および（ｄ）薬学的に許容しうる非イオン界面活性剤０〜６ ．０重量％（式ＩＩＩを有する化合物基準）を含む物質組成物。
4. ４．式Ｉによって表わされる親油性オリゴ糖抗生物質が、フランバマイシン、エ バーニノミシン、エバーニノミシン類抗生物質、キュラマイシンおよびアビラマ イシンＡ−Ｎ抗生物質から選択される請求項１に記載の組成物。
5. ５．抗感染性量の請求項１、２または３に記載の物質組成物およびそれに対する 薬学的に許容しうる担体を含む、感受性グラム陽性および／またはグラム陰性細 菌感染を治療するための薬剤組成物。
6. ６．動物において感受性グラム陽性および／またはグラム陰性細菌感染を治療す る方法であって、このような目的に有効な一定量の請求項５に記載の薬剤組成物 を投与することを含む上記方法。
7. ７．式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩによって表わされる親油性オリゴ糖抗生物質の非経 口投与後の動物において副作用症候群を予防し、同時に、抗感染性量の該抗生物 質を該動物に対して供給する方法であって、該動物に対して抗感染性量の請求項 １、２または３に記載の物質組成物をそれに対する薬学的に許容しうる担体と一 緒に非経口投与することを含む上記方法。
8. ８．前記の塩基が、クロロプロカイン、プロカイン、ピペラジン、グルカミン、 Ｎ−メチルグルカミン、Ｎ′，Ｎ−ジメチルグルカミン、エチレンジアミン、ジ エタノールアミン、ジイソプロピルアミン、ジエチルアミン、Ｎ−ベンジル−２ −フェニルエチルアミン、Ｎ，Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミン、コリン、ク レミゾール、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、Ｄ−グルコサミンまた は水酸化ナトリウムから選択される請求項１、２または３に記載の組成物。
9. ９．前記の塩基がＮ−メチルグルカミンである請求項１、２または３に記載の組 成物。
10. １０．ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが用いられる請求項１、２ または３に記載の組成物。
11. １１．（ａ）：（ｂ）：（ｃ）のモル比が１：２〜３：１〜６である請求項５に 記載の薬剤組成物。
12. １２．動物におけるグラム陽性またはグラム陰性細菌感染の治療または予防用の 薬剤の製造に関する請求項１、２または３に記載の物質組成物の使用。