CN106317143B - 一种提取阿维拉霉素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从阿维拉霉素发酵液中提取阿维拉霉素的方法,其通过对阿维拉霉素发酵液进行固液分离,干燥,脱色等步骤制得阿维拉霉素,该方法具有生产效率高,成本低,环境污染少,成品质量好的优点。阿维拉霉素属于正糖霉素族的寡聚糖类抗生素。本品对多种革兰氏阳性菌有抑制作用,包括一些致病菌,如万古霉素拮抗的肠道球菌,甲氧苯青霉素拮抗的葡萄球菌以及青霉素拮抗的肺炎双球菌。此外,阿维拉霉素对大肠杆菌有一种间接作用,即它可以影响细菌鞭毛及细菌的粘附,并通过抑制细菌粘附于宿主粘膜细胞表面而达到抑制细菌的感染,从而抑制了疾病的感染。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种提取阿维拉霉素的方法。
背景技术
阿维拉霉素属于正糖霉素族的寡聚糖类抗生素。本品对多种革兰氏阳性菌有抑制作用,包括一些致病菌,如万古霉素拮抗的肠道球菌,甲氧苯青霉素拮抗的葡萄球菌以及青霉素拮抗的肺炎双球菌。此外,阿维拉霉素对大肠杆菌有一种间接作用,即它可以影响细菌鞭毛及细菌的粘附,并通过抑制细菌粘附于宿主粘膜细胞表面而达到抑制细菌的感染,从而抑制了疾病的感染。
阿维拉霉素可由发酵液经分离、提取、纯化、干燥而得。专利CN201210544526.7涉及通过结晶、硅胶柱层析、ODS柱洗脱分离、重结晶,抽滤后结晶用纯水漂洗,该方法使用硅胶柱、ODS柱和重结晶,具有成本高、生产工时过长、收率较低等缺点。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种低成本、工序短、收率高的提取阿维拉霉素的方法,解决了现有技术中阿维拉霉素提取方法成本高、工序长,所得产品收率低的问题。
为解决上述技术问题,发明人提供了以下技术方案。
一种提取阿维拉霉素的方法,包括以下操作步骤:
a.将阿维拉霉素的发酵液加碱性溶剂调节pH值为8.0~9.0,随后进行固液分离;
b.向步骤a得到的固体进行干燥得到干粉然后粉碎,向粉碎后的固体中加入有机溶剂,搅拌1~3小时,期间控制温度为40℃~50℃,过滤,所得滤液备用;
c.将步骤b得到的滤液进行活性炭脱色,所得溶液转移至非极性大孔吸附树脂进行吸附,后用展开剂对树脂柱进行解析,收集解析液;
d.将步骤c得到的解析液进行蒸发浓缩干燥,即得到阿维拉霉素。
步骤a所述碱性溶剂为2mol/L氢氧化钠水溶液。
步骤b中所述干粉粉碎的颗粒度在0.1~0.4mm。
步骤b中有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、氯仿或四氯化碳中的一种或几种的组合。
步骤b中搅拌速度为50~80rpm。
步骤b中搅拌时间为1.5~2.5小时。
步骤b中搅拌期间控制温度为40~45℃。
步骤c中活性炭加量为溶剂体积的1%~5%。
步骤c中步骤中展开剂为60%~75%的乙醇对树脂柱进行解析。
本发明所述提取阿维拉霉素方法,先向阿维拉霉素的发酵液加入氢氧化钠调节pH值,目的调至碱性后能够将碱性蛋白沉淀除去。
本发明没有使用氨水调节pH,降低了废水中的氨氮含量,为环保做出了很大的贡献,减少企业处理废水的费用,进而降低成本。
本发明所述提取阿维拉霉素方法,进行浸提及过柱得到阿维拉霉素,所需工序少,工时短,降低了企业成本。
本发明产品收率在56.15%以上,远远大于目前收率37.50%以上的水平,经济效益可观,适于推广应用。
该方法对比传统方法的优势对比
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明所述内容做进一步详细的说明。
实施例1
将阿维拉霉素发酵液50L,效价4656U/mL,产品重量233g。用氢氧化钠调节pH到8.2,随后进行固液分离;得到的固体进行干燥得到干粉然后粉碎,向粉碎后的固体中加入有机溶剂,搅拌1.5小时,期间控制温度为42℃,过滤,所得滤液备用;滤液用2%活性炭脱色,所得溶液转移至非极性大孔吸附树脂进行吸附,后用60%乙醇对树脂柱进行解析,收集解析液;解析液进行蒸发浓缩干燥,即得到阿维拉霉素成品128g,含量82.1%,收率54.9%。
实施例2
将硫酸新霉素发酵液60L,效价4832U/ml,产品重量290g。用氢氧化钠调节pH到8.5,随后进行固液分离;得到的固体进行干燥得到干粉然后粉碎,向粉碎后的固体中加入有机溶剂,搅拌2.0小时,期间控制温度为45℃,过滤,所得滤液备用;滤液用3%活性炭脱色,所得溶液转移至非极性大孔吸附树脂进行吸附,后用65%乙醇对树脂柱进行解析,收集解析液;解析液进行蒸发浓缩干燥,即得到阿维拉霉素成品165g,含量81.5%,收率56.9%。
实施例3
将硫酸新霉素发酵液70L,效价4938U/mL,产品重量346g。用氢氧化钠调节pH到8.7,随后进行固液分离;得到的固体进行干燥得到干粉然后粉碎,向粉碎后的固体中加入有机溶剂,搅拌2.5小时,期间控制温度为48℃,过滤,所得滤液备用;滤液用5%活性炭脱色,所得溶液转移至非极性大孔吸附树脂进行吸附,后用75%乙醇对树脂柱进行解析,收集解析液;解析液进行蒸发浓缩干燥,即得到阿维拉霉素成品194g,含量83.6%,收率56.1%。
Claims (3)
1.一种提取阿维拉霉素的方法,其特征在于,包括以下操作步骤:
a.将阿维拉霉素的发酵液加碱性溶剂调节 pH 值为 8.0-9.0,随后进行固液分离;
b.向步骤a得到的固体进行干燥得到干粉然后粉碎到颗粒度在0.1-0.4mm,向粉碎后的固体中加入有机溶剂,搅拌 1-3 小时,期间控制速度为 50-80rpm,控制温度为 40°C-50°C,过滤,所得滤液备用;
c.将步骤 b 得到的滤液加入溶剂体积的 1%-5%的活性炭进行脱色,所得溶液转移至非极性大孔吸附树脂进行吸附,后用 60%-75%的乙醇对树脂柱进行解析,收集解析液;
d.将步骤 c 得到的解析液进行蒸发浓缩干燥,即得到阿维拉霉素;
步骤 a 中所述碱性溶剂为 2 mol/L 氢氧化钠水溶液;
步骤 b 中所述有机溶剂为甲醇或乙醇。
2.根据权利要求 1 所述的一种提取阿维拉霉素的方法,其特征 在于,步骤 b 中搅拌时间为 1.5-2.5 小时。
3.根据权利要求 1 所述的一种提取阿维拉霉素的方法,其特征 在于,步骤 b 中搅拌期间控制温度为 40-45 ℃。
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