JPH06507602A

JPH06507602A - ペプチド

Info

Publication number: JPH06507602A
Application number: JP4504782A
Authority: JP
Inventors: タイラー，マイケル・ジェームス; ボウイ，ジョージ・ハミルトン; ストーン，デビッド・ジュームス・ムーア
Original assignee: ルミニス　ピーティーワイ　リミテッド
Priority date: 1991-02-12
Filing date: 1992-02-12
Publication date: 1994-09-01
Also published as: CA2103703A1; EP0579611A4; EP0579611A1; WO1992013881A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】ペプチド［発明の背景］両生類の皮膚はペプチドの供給源として知られており、その数種類は補乳類の消化管及び脳の生物学的活性ペプチドと相同性を有する。特に、マガイニン（ｍａｇａｉｎｉｎｓ）として知られる抗菌性ペプチド群が、アフリカッメカエル（Ａｆｒｉｃａｎ　ｃｌａｗｅｄ　ｆｒｏｇ）であるキセノブス　ラエビス（Ｘｅｎｏｐｕｓ　１ａｅｖｉｓ）から分離され得ることが知られている（Ｂ、Ｗ、Ｇｉｂｓｏｎ、　Ｌ、Ｐｏｕｔｅｒ、　Ｄ、Ｈ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ及びＪ、Ｅ、Ｍａｇｇｉｏ。

Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ。１９８６．２６１．５３４１；　Ｍ、Ｇ、Ｇｉｏｖａｎｎｉｎｉ、　Ｌ、Ｐ。

ｕｌｔｅｒ、　Ｂ、Ｗ、Ｇｉｂｓｏｎ及びり、Ｈ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｊ、１９８７，２４３．１１３　；　Ｍ、Ｚａｓｌｏｆｆ、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、　Ｕ、Ｓ、Ａ、　１９８７゜８４．５４４９　；　Ｍ　Ｚａｓｌｏｆｆ、　Ｂ、Ｍａｒｔｉｎ及びＨ，Ｃ，Ｃｈｅｎ、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、　Ｕ、Ｓ、Ａ、　１９８８，８５，９１０；　Ａ、Ｓ、Ｔｅｒｒｙ、　Ｌ、Ｐｏｕｌｔｅｒ、　Ｄ、Ｈ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ、　Ｊ、Ｃ，Ｎｕｔｗｉｎｇ、　Ｍ、Ｇ、Ｇｉｏｖａｎｎｉｎｉ、　Ｃ，Ｈ。

Ｍｏｏｒｅ及びＢ、Ｗ、Ｇｉｂｓｏｎ、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、１９８８，２６３，５７４５；　０ｎｉｔｅｄ　５ｔａｔｅｓ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｈｅａｌｔｈ　ａｎｄ　Ｈｕｍａｎ　５ｅｒｖｉｃｅＳ、米国特許出願Ｎｏ、２１．４９３　１９８７年８月１５日）。

マガイニンＩＩは次の構造を有する。

Ｈ２Ｎ−Ｇ　ｌ　ｙ−１１ｅ−Ｇ　１ｙ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｈｉ　５− ３ｅｒ−Ａ　１　ａ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇ　１　ｙ−Ｌｙｓ−Ａ　ｌ　ａ−Ｐｈｅ−Ｖａ　１−Ｇ　１　ｙ−Ｇ　ｌ　ｕ−１１ｅ−Ｍｅ　ｔ−Ａｓｎ− ５ｅｒ−ＯＨこの新規な生物学的に活性なペプチドは、二種のオーストラリア種のカエルの表皮あるいは腺に生じることが明かとされた。ｉ）リトリアスプレンディダ（Ｌｉｔｏｒｉａ　ｓｐ１ｅｎｄｉｄａ）　？グニフィセント　ツリー　カエル（Ｍａｇｎｉｆｉｃｅｎｔ　Ｔｒｅｅ　Ｆｒｏｇ）　この種は、１９７７年にアゾレイド及びメルボルンの大学からきた動物学者のグループにより発見され、彼等により命名されたＣＭ、Ｊ、Ｔｙｌｅｒ、　Ｍ、Ｄａｖｉｅｓ及びＡ、Ａ、Ｍａｒｔｉｎ、　Ｔｒａｎｓ、Ｒ，Ｓｏｃ、Ｓ、Ａｕ５ｔ、１９７７、ＩＯＬ、１３３）及びｉｉ）リドリア　カエルレア（Ｌｉｔｏｒｉａ　ｃａｅｒｕｌｅａ）。

［発明の要約］本発明の第一の特徴は、カニリン（Ｃａｅｒｉｎｓ）として知られているペプチド群で、一般に２３００から２７００の分子量をもつものを提供する。このペプチド群の代表的なものは、リドリア　スプレンディダ及びリトリアカエルレアの表皮ないし腺から単離される。同様に、カニリジン（Ｃａｅｒｉｄｉｎｓ）として知られる第２グループは、一般に１１００〜１６００の分子量を有する。この第２グループのペプチド群の代表的なものは、前記同様にリドリア　スプレンディダ及びリドリア　カエルレアから単離される。

本発明の第２の特徴は、前記ペプチドを、（ａ）カエルの表皮及び／または腺から抽出し、（ｂ）一般的なペプチド合成法により、あるいは（ｃ）　Ｄ　Ｎ　Ａ組替え技術により、調製する方法を提供する。

本発明の第３の特徴は、本発明にかかるペプチドの少なくとも一つを投与することにより、ヒトまたは動物を処理する方法を提供する。

本発明の第４の特徴は、本発明にかかるペプチドの少なくとも一つを含む薬学的または獣医学的組成物を提供する。

［詳細な説明］Ａ）本発明にかかるペプチドの第１グループは、カニリンとして知られている。

これらのペプチドは次の構造を有する。

Ｗ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｘ−Ｚ　。

ここで、Ｗは水素、ｃＬ−８のアルキル基、Ｃ１１−□。の。

アリル基、Ｃｖ−ｔｓのアラルキル基あるいはＣ１−、。のアシル基；Ｘは２０〜２３のアミノ酸残基より構成されるペプチド鎖；Ｚは水酸基、アミノ基、Ｃ１ −６のアルキルアミノ基、ジー（Ｃ，、アルキル）−アミノ基、Ｃ１−Ｌ＠のアルコキシ基あるいはｃｖ−ｉｓのアラルコキシ基である。

好ましくは、Ｗは水素で、Ｚはアミノ基あるいは水酸基である。

一般的にカニリンは、２３００〜２７００の分子量を有する。

このペプチド群の代表的なものは、リドリア　スブレンディダ及びリドリア　カエルレアの表皮あるいは腺から単離される。

特に、カニリン１は、次の構造を有する。

Ｈ−Ｇ　１　ｙ−Ｌｅｕ−Ｌｅ　ｕ−５ｅｒ−Ｖａ　ｌ　−Ｌｅ　ｕ　−Ｇ　ｌ　ｙ−５ｅｒ−Ｖａ　ｌ−Ａ　１ａ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ −Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−１１ｅ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ −Ｌｅｕ−ＮＨｚカニリン２は、次の構造を有する。

Ｈ−Ｇ　１ｙ−Ｌｅｕ−Ｖａ　ｌ−５ｅｒ−５ｅｒ−１１ｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ− Ａ　１　ａ−Ｌｅｕ−Ｇｌ　ｙ−Ｇ　１　ｙ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａ　１　ａ−Ａｓｐ−Ｖａ　１−Ｖａ　１−Ｌｙｓ−３ｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇ　１ｙ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−ＯＨカニリン３は、次の構造を有する。

Ｈ−Ｇ　１　ｙ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ｇ　１　ｎ−Ｌｙｓ−Ｉ　１ｅ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａ　１ａ−５ｅｒ−Ｇ　１　ｕ−Ｌｅｕ−Ｖａ　ｌ−５ｅｒ−Ｇ　ｌｙ−１１ｅ−Ｖａ　ｌ−Ｇ　１ｕ−Ｇ　１　ｙ−Ｖａ　１−ＬＹＳ−ＮＨカニリジンは、次の構造を有する。

Ｈ−Ｇｌ　ｙ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ｇ　１　ｎ−Ｌｙｓ−１１ｅ−Ｌｙｓ−５ｅｒ −Ａ　ｌ　ａ−Ａ　１　ａ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ａ　１ａ−３ｅ　ｒ−Ｇ　ｌｙ−１１ｅ−Ｖａ　ｌ−Ｇ　１ｕ−Ｇｌｙ−Ｔｉｅ−Ｌｙｓ−３ｅｒ−ＮＨ。

他のペプチドは、カニリン１〜４に関連した構造を有する。

Ｂ）本発明にかかるペプチドの第２グループは、カニリジンとして知られている。これらのペプチドは、次の構造を有する。

Ｗ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｙ−Ｚここで、Ｗは水素、ｃｌ−６のアルキル基、Ｃ，−、。のアリル基、Ｃ７−８６のアラルキル基あるいはＣｔ−Ｚ。のアシル基；Ｙは８〜１３のアミノ酸残基より構成されるペプチド鎖；Ｚは水酸基、アミノ基、Ｃ□−６のアルキルアミノ基、ジー（Ｃｔ−。アルキル）−アミノ基、Ｃ１−１ｓのアルコキシ基あるいはＣ７−□、のアラルコキシ基である。

一般的にカニリジンは、１１００〜１６００の分子量を有する。

このペプチド群の代表的なものは、リドリア　スプレンディダ及びリドリア　カエルレアの表皮あるいは腺から単離される。

特に、カニリジン１は、次の構造を有する。

Ｈ−Ｇ　１　ｙ　−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｇ　１ｙ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇ　１　ｙ−Ｔｈ　ｒ−Ｌｅｕ−ＮＨｚカニリジン２は、次の構造を有する。

Ｈ−Ｇ　１　ｙ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇ　１　ｙ−Ｍｅ　ｔ−Ｖａ　ｌ　−Ｇ　ｌ　ｙ−３ｅ　ｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇ　１ｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ −ＮＨｚ他のペプチドは、カニリジン１及び２に関連した構造を有する。

Ｃ）両グループＡ）及びＢ）のペプチドは、リドリア　スブレンディダあるいはりドリア　カエルレア種のカエルの表皮及び／または線材料からメタノール／水抽出され、その抽出物中に存在する各種ペプチドのＨＰＬＣ分離により単離される。このペプチドの構造は、たとえば高速原子衝撃マススペクトル法（ｆｉｒｓｔ　ａｔｏｍ　ｂｏｍｂａｒｄｍｅｎｔ　ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）と分解法（Ｅｄｔｎａｎ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ、　ｅｎｚｙｗｉｃｄｉｇｅｓｔｉｏｎ）の組合せにより決定される。

このペプチドは一般的な合成法によっても調製することができる。この場合、必要により保護基とともにアミノ酸を用いて、正確な順番に結合させ、あるいはより小さなペプチドをより大きなユニットを形成するように結合させる。合成後、存在する保護基は一般的な方法により除去される。

ペプチドは、通常次のように調製される。

ａ）保護されたα−アミノ基と活性化末端カルボキシル基を有するアミノ酸あるいはペプチドを、α−アミノ基がフリーなアミノ酸あるいはペプチドと縮合する。

ｂ）活性化α−アミノ基と保護されたカルボキシル基を有するアミノ酸あるいはペプチドを、自由末端カルボキシル基と保護されたα−アミノ基を有するアミノ酸あるいはペプチドと縮合する。

Ｃ）自由なカルボキシル基と保護されたα−アミノ基を有するアミノ酸またはペプチドを、フリーのα−アミノ基及び保護されたカルボキシル基を有するアミノ酸またはペプチドと縮合する。

カルボキシル基の活性化は、たとえば、カルボキシル基を酸ハライド、アジド、アンハイドライドあるいはイミダゾリドに置換し、あるいはシアノメチルエステルあるいはｐ−ニトロ−フェニルエステル等の活性化エステルに置換する。

アミノ基は、たとえばアミノ基をリン酸アミドに置換することにより活性化できる。

一般的に用いられるアミノ酸あるいはペプチドの縮合方法としては、カルボジイミド法、アジド法、アンハイドライド法及び活性化エステル法等、たとえばＥ、５ｃｈｒｏｄｅｒ及びに、Ｌｕｂｋｅｉ″ＴＨＥ　ＰＥＰＴＩＤＥＳ″Ｖｏｌｕｍｅ　１．１９６５　（アカデミツクプレス）に記載されている方法を用いることができる。さらに、メリフィールドの”固相法”とよばれる、Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、８５．２１４９（１９６３）に記載されている方法を本ペプチドの製造に用いることができる。

縮合反応に関与すべきでないアミノ酸あるいはペプチドのフリー機能基は、保護基とよばれる、加水分解あるいは還元によりきわめて容易に除去できる基により効率的に保護される。従って、たとえばカルボキシル基を、たとえばメタノール、エタノール、四級ブタノール、ベンジルアルコールあるいはｐ−ニトロベンジルアルコールによりエステル化し、あるいはアミドを形成することにより、効果的に保護することができる。しかしながら、後者の基は除去することが非常に困難であるので、最終ペプチドの末端水酸基の保護にのみ用いることが好ましい。

Ｎ−保護基は一般的にアシル基であり、たとえば酢酸、クロロ酢酸、酪酸、安息香酸、フェニル酢酸あるいはピリジン−カルボン酸等の脂肪族、芳香族、アラリファティック（ａｒａｌｉｐｈａｔｉｃ）あるいはへテロサイクリック酸から誘導されたアシル基、エトキシ−カルボニル、ベンジロキシ−カルボニル、ｔ−ブトキシカルボニルあるいはｐ−メトキシ−ベンジロキシ−カルボニル等のカルボン酸から誘導されたアシル基、ベンゼンスルホン酸あるいはｐ−１ルエンスルホン酸等のスルホン酸から誘導されたアシル基等が挙げられるが、たとえばベンジル及びトリフェニル−メチル等の置換あるいは非置換アリルあるいはアラルキル基のような他の基を用いることも可能である。

アルギニンのグアニジン基は、ニトロ基により保護されることが好ましい。ヒスチジンのイミノ基はベンジルあるいはトリチル基により保護されることが好ましい。

一般的に、四級ブチルエステルをカルボニル基の保護に用い、ブトキシカルボニル、ベンジロキシカルボニルあるいはトシル基をアミノ基の保護に用いることが好ましい。

保護基は各種一般的な方法により切り離すことが可能であり、保護基の性質に基づき、たとえばトリフルオロ酢酸により、あるいは水素と触媒としてのパラジウムまたは氷酢酸中のＨＢｒのような温和な還元により、処理すればよい。

Ｎ−末端アミノ基がアルキル化、アリル化、アラアルキル化あるいはアシル化されたペプチドは、一般的方法により調製することができる。Ｃ−末端アミドとエステルは適当なアミンあるいはアルコールあるいはそれらの活性化誘導体との反応により調製することができる。

組替えＤＮＡ技術も、本ペプチドを合成するために用いることができる。カニリンあるいはカニリジンをエンコードしたｍＲＮＡ鎖をカエルから単離し、これから対応するｃＤＮＡ鎖を調製し、適当な発現系でそのｃＤＮＡ順列を発現させる。また、カニリンあるいはカニリジンをエンコードした合成りＮＡ順列を用いることもできる。

本ペプチドの幾つかは強い生理学的活性を有する。たとえばカニリン１は、様々なバクテリアに対して強い抗生活性を有する。ペプチドの幾つかは、抗ウィルス活性を有し、また抗菌性を有することがある。

このため、本発明はこれらのペプチドの少なくとも一つを、そのままあるいは薬学的ないし獣医学的組成物の形態でヒトないし動物に投与する方法に関する。

このペプチドは食品の保存にも用いることができる。

また、本発明はこれらの少なくとも一つのペプチドを含む薬学的あるいは獣医学的組成物に関する。このペプチドはそのまま、あるいは（好ましくは）適当な担体、アジュバントあるいは補助剤とともに用いることができる。組成物は錠剤、糖衣剤、カプセル、坐剤、シロップ、乳化物、分散物あるいは溶液の形態とすることができる。

好ましい賦形剤としては、溶剤、ゲル化剤、抗酸化剤、分散剤、乳化剤、消泡剤、賦香ないし着色剤、保存料及び可溶化剤が挙げられる。

組成物は、経口、非経口及び直腸投与することができる。

本発明にかかる組成物の経口投与における好適な投与単位は、活性薬剤をラクトース、シュークロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン（ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプンあるいはアミロペクチン等）、セルロース誘導体、あるいはゼラチン等の固形粉末担体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムあるいはポリエチレングリコールワックスなどの滑剤とともに混合することで調製できる。混合物は錠剤形態に圧縮成型される。被覆錠剤は、このような錠剤を、場合によりアラビアガム、ゼラチン、タルカムあるいは二酸化チタンを含む濃縮ショ糖溶液により被覆し、あるいは前記錠剤を易揮発性有機溶媒に溶解したラッカーにより被覆することで調製することができる。

ソフトゼラチンカプセルは、活性物質を植物性オイルに混合し、ソフトゼラチンシェルに封入することで調製できる。ハードゼラチンカプセルは、活性物質を、ラクトース、シュークロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン（ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプンあるいはアミロペクチン等）、セルロース誘導体、あるいはゼラチン等の固形粉末担体に混合し、包含させて得られる。

直腸投与用の投与単位の調製は、活性物質を油脂ベースに混合して坐剤の形態とし、あるいは活性物質を植物性オイルあるいはパラフィンオイルに混合してゼラチンカプセルの形態として調製することができる。

経口投与用の液状調製物は、活性物質のシロップ、溶液、乳化物、懸濁物とすることができる。砂糖、香料及び着色剤が添加可能で、溶剤はたとえばエタノール、水、グリセロール、プロピレングリコールあるいはこれらの混合物が用いられる。

注射による非経口投与用の組成物は、活性物質の水溶液として調製することができる。このような溶液は安定化剤及び／または緩衝剤を含有することができ、利便のため適正量単位のアンプルとして供給することができる。

以上、本発明の実施例について説明した。貼付されたクレームにより定義されるように、本発明の概念から単離しない範囲で当業者が改変ないし変更を行なうことができることは明らかである。

フロントページの続き（５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号ＣＯ７Ｋ　７１０８／／　Ｃ０７Ｋ　９９：００（７２）発明者　ボウイ、ジョージ・ハミルトンオーストラリア国　サウス　オーストラリア　５０００、アゾレイド、プルトニー　ストリート１０−２０、キャピタ　タワー、ファースト　フローア（７２）発明者　ストーン、デビット・ジュームス・ムーアオーストラリア国　サウス　オーストラリア　５０００、アゾレイド、プルトニー　ストリート　１０−２０、キャピタ　タワー、ファースト　フローア

Claims

【特許請求の範囲】

１．次の構造を有するペプチド。Ｗ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｘ−Ｚ，ここで、Ｗは水素、Ｃ１−５のアルキル基、Ｃ６−１０のアリル基、Ｃ７−１６のアラルキル基あるいはＣ１−２０のアシル基；Ｘは２０〜２３のアミノ酸残基より構成されるペプチド鎖；Ｚは水酸基、アミノ基、Ｃ１−６のアルキルアミノ基、ジ−（Ｃ１−６アルキル）−アミノ基，Ｃ１−１８のアルコキシ基あるいはＣ７−１８のアラルコキシ基である。
２．請求項１記載のペプチドにおいて、Ｗが水素であることを特徴とするペプチド。
３．請求項１または２記載のペプチドにおいて、Ｚはアミノ基または水酸基であることを特徴とするペプチド。
４．請求項１ないし３のいずれかに記載のペプチドにおいて、分子量が２３００〜２７００であることを特徴とするペプチド。
５．次の構造を有することを特徴とするペプチド。【配列があります】
６．次の構造を有することを特徴とするペプチド。【配列があります】
７．次の構造を有することを特徴とするペプチド。【配列があります】
８．次の構造を有することを特徴とするベプヂド。【配列があります】
９．次の一段式で表されるペプチド。Ｗ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｙ−Ｚここで、Ｗは水素、Ｃ１−６のアルキル基、Ｃ６−１０のアリル基、Ｃ７−１６のアラルキル基あるいはＣ１−２０のアシル基；Ｙは８〜１３のアミノ酸残基より構成されるペプチド鎖；Ｚは水酸基、アミノ基、Ｃ１−６のアルキルアミノ基、ジ−（Ｃ１−６アルキル）−アミノ基，Ｃ１−１８のアルコキシ基あるいはＣ７−１８のアラルコキシ基である。
１０．請求項９記載のペプチドにおいて、Ｗが水素であることを特徴とするペプチド。
１１．請求項９または１０記載のペプチドにおいて、Ｚはアミノ基または水酸基であることを特徴とするペプチド。
１２．請求項９ないし１１のいずれかに記載のペプチドにおいて、分子量が１１００〜１６００であることを特徴とするペプチド。
１３．次の構造を有することを特徴とするペプチド。【配列があります】
１４．次の構造を有することを特徴とするペプチド。【配列があります】
１５．請求項１〜１４のいずれかに記載のペプチドを製造する方法であって、前記ペプチドをカエルの表皮及び／または腺から抽出することを特徴とするペプチドの製造方法。
１６．請求項１５記載の方法において、カエルはリトリア　スプレンディダまたはリトリア　カエルレアであることを特徴とするペプチドの製造方法。
１７．請求項１５または１６記載の方法において、（ａ）表皮及び／または腺材料をメタノール／水抽出し、（ｂ）該抽出物中に存在する各種ペプチドをＨＰＬＣで分離し、（ｃ）所望のペプチドを単離することを特徴とするペプチドの製造方法。
１８．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチドの製造方法において、適正な順列に構成アミノ酸またはペプチドサブユニットを結合させることを特徴とするペプチドの製造方法。
１９．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチドの製造方法において、ＤＮＡ組替え技術を用いることを特徴とするペプチドの製造方法。
２０．請求項１９記載の方法において、前記ペプチドをエンコードしたｍＲＮＡ鎖をカエルから単離し、それから対応するｃＤＮＡ順列を製造し、該ｃＤＮＡを適当な発現系で発現させることを特徴とするペプチドの製造方法。
２１．請求項２０記載の方法において、前記カエルはリトリア　スプレンディダまたはリトリア　カエルレアであることを特徴とするペプチドの製造方法。
２２．請求項１９記載の方法において、前記ペプチドをエンコードしたＤＮＡ順列を合成し、該ＤＮＡ順列を適当な発現系で発現させることを特徴とするペプチドの製造方法。
２３．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチドを含む薬学的ないし獣医学的組成物において、該ペプチドに適当な担体を共存させたことを特徴とする組成物。
２４．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチドを含み、抗生、抗バクテリア、抗ウィルスあるいは抗菌活性を有し、該ペプチドに適当な担体と共存させたことを特徴とする組成物。
２５．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチドを含み、該ペプチドに適当な担体を共存させたことを特徴とする食品保存組成物。
２６．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチド、あるいは請求項２３ないし２４記載の組成物をヒトまたは動物に投与し、ヒトまたは動物のバクテリア、ウイルス、及び菌性疾病を治療しあるいは予防する方法。
２７．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチド、あるいは請求項２５記載の組成物を添加して、食品を保存する方法。
２８．請求項１ないし１４のいずれかに記載のペプチドが実質的に本願明細書に記載されたものであることを特徴とするペプチド。
２９．請求項１５ないし２２のいずれかに記載のペプチドの調製方法が、実質的に本願明細書に記載されたものであることを特徴とするペプチドの調製方法。
３０．請求項２３ないし２４記載の薬学的ないし獣医学的組成物が、実質的に本願明細書に記載されたものであることを特徴とするペプチドの製造方法。
３１．請求項２５記載の食品保存組成物が、実質的に本願明細書に記載されたものであることを特徴とするペプチドの製造方法。
３２．請求項２６に記載されたヒトまたは動物のバクテリア、ウイルス及び菌性疾病の治療ないし予防方法が、実質的に本願明細書に記載されたものであることを特徴とする治療ないし処理方法。
３３．請求項２７記載の食品の保存方法が、実質的に本願明細書に記載されたものであることを特徴とする食品の保存方法。