JPH06502495A - 超臨界流体クロマトグロフィーを取り扱う多量の注入を行うオンライン多次元クロマトグラフィーシステム - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １９、前記の多孔性のセラミックフリットは、移送導管の一端で形成され、そし て前記の第一の通路手段は、該移送導管に同軸的に配置されたリストリクタ−導 管を含む請求項Ｉ８の発明。

２帆該リストリクタ−導管は、１０−２４μｍの範囲の内径及び＋５−２０ｃｍ の範囲の長さを有し、そして該移送導管は、３−５ｃｍの範囲の長さを有する請 求項１９の発明。

明細書 超臨界流体クロマトグラフィーを取り扱う多量の注入を行うオンライン多次元ク ロマトグラフィーシステム 技術分野 本発明は、一般に、多次元クロマトグラフィーに間し、そして特に超臨界流体ク ロマトグラフィーを取り扱う大量の注入容量の流体を含むやり方で、液体クロマ トグラフィーを超臨界流体クロマトグラフィーに組み合せたオンラインシステム 及び方法に間する。

背景技術 複雑なマトリックス例えば重合体添加物の分析は１通常１分析前に望ましくない コンポーネントを除くために１手動のクリーンアップ段階を必要とする。この点 に関し、多次元クロマトグラフィーは９手動の介入なしに、必要なサンプルの調 製又はクリーンアップ段階を急速に達成する可能性をもたらす、多次元クロマト グラフィーでは、２種以上の分離技術が、直列で働き、それ故、最初の分離段階 は、前の分離段階により生成した関心のある特別な部分又はフラクションに対す る次の分離技術を伴う０例えば、一つの液体クロマトグラフ（ｒＬＣＪ　）は。

他のＬＣと組み合わされで、多次元の分層をもたらす、同様に、液体クロマトグ ラフ（ｒＬｃＪ）は、ガスクロマトグラフ（ｒＧＣＪ　）と組み合わされて、多 次元分離の池の形を提供する。しかしながら、ＬＣ−ＬＣ多次元クロマトグラフ ィーは、感度の点でしかも溶媒の不混和性により制限される。さらに、ＬＣ−Ｇ Ｃ多次元クロマトグラフィーは、気体状の可動相で移送可能な分析物について使 用して成功でさたが、ＧＣにより分析されるには十分に揮発性でない余りに多数 の化合物が存在する。

対照的に、超臨界８ｉ体クロマトグラフィー（ｒＳＦＣＪ）は、ＧＣにより分析 されるには十分に揮発性でない化合物をして分析せしめ、これら物質は、比較的 高い分子量を有する。ＳＦＣは、又感度の高いしかも普遍的な検出を行うために 、フレームイオン化検出器（ｒＦｒＤＪ）を利用する能力を有する。従って、Ｌ Ｃ−ＳＦＣ多次元クロマトグラフィーシステムの剖製は、非揮発性化合物の非常 に感度の高い分析を提供する可能性をもたらす、しかしながら、ＳＦＣでは１毛 管カラム（例えば内径５０μｍ）は、概して適切な性能を得ることを要求する。

分離のためにこの小さい直径のカラムを使用する必要があるため２注入容積は。

又非常に小さくなければならない、この点に間し、注入容積は、一般に、１ナノ リツトルより少ない量から数ナノリットルの範囲に制限される。この制限は、比 較的多量の溶媒の容積が、概して、必要な分離をもたらすためにＬＣで使用され るので、有効な「オンラインＪ　ＬＣ−５ＦＣ組み合せシステムの開発に実質的 な障害を示す、これに関連して、用語「オンライン」は、分析工程が１手動の採 取段階に頼ることな（、連続的なベースで行われ得るように、システムのコンポ ーネントの間に流体の連絡を提供する多次元システムに関する。

発明の開示 従って、超臨界流体クロマトグラフへの多量の流体の容積の実際の導入を要する ことなく、多量の溶媒の容積をＬＣ分離の目的のために使用させる。オンライン ＬＣ−５ＦＣ多次元クロマトグラフィーシステム及び方法を提供するのが５本発 明の主な目的である。

先ずＬＣ溶媒を除き１次に分析物が、超臨界流体クロマトグラフに導入される前 に分析物を捕捉する、オンラインＬＣ−５ＦＣ多次元クロマトグラフィーシステ ム及び方法を提供するのが、本発明の池の目的である。

次のＳＦＣ段階のクロマトグラフィーのピークのバンドの広がりを最小限にする ために１局限された領域で分析物を捕捉できるシステムに間するインターフェー スを提供するのが１本発明の他の目的である。

前記の目的を達成するために、本発明は、液体クロマトグラフから溶離する関心 のあるフラクションを溶着するためのインレフト（ｉ　ｎ　ｌ　ｅ　ｔｌカラム 、超臨界ａｆｔ−をして分析物として溶着したフラクションを抽出させるための ポンプ、分析物を超臨界流体クロマトグラフ中に導入する前に分析物を捕捉する ための、インレットカラムと超臨界流体クロマトグラフとの間に挾まれたインタ ーフェース、及びシステム全体で流体の流れをコントロールするためのバルブ配 置を含むオンラインＬＣ−５ＦＣ多次元クロマトグラフィーシステムを提供する ０本発明の方法によれば、液体クロマトグラフは、液体クロマトグラフの溶媒流 中に注入されたサンプル物質から関心のあるフラクションを分離且つ検出するの に使用される。一度間心のあるフラクションが検出されると、液体クロマトグラ フから溶着する流体の流れは、インレットカラムに導かれそしてそれを通り、少 なくとも一部のフラクションは、インレフトカラムの内部の表面に溶着する。溶 媒は１次に不活性気体流をしてインレフトカラムを通過させることによりインレ ットカラムから除去される。溶着されたフラクション又は分析物は１次にインレ フトカラムから抽出され、そして超臨界流体の流れによりインターフェースに運 ばれる。インターフェースは、超臨界流体を気体に減圧しそしてインターフェー スから減圧された超臨界流体を通気する間、局限された領域で分析物を捕捉する ０次の超臨界流体の流れは０次にインターフェースから捕捉された分析物を除き そして分析物を超臨界流体クロマトグラフ中に導入するのに使用される。

従って１本発明のシステム及び方法は、インレットカラム及びバルブ配置が。

ＳＦＣ段階が生ずる前に溶媒をしてシステムから除かせるとき、多い容積の溶媒 をＬＣ分離段階に使用させる。従って１本発明のインターフェースは、インレッ トカラムからの溶着された分析物を抽出するのに使用される超臨界流体をして。

又分析物を予定された表面上に捕捉しそしてシステムからこの超臨界流体を通気 することにより、システムから除かせることになる。従って、最終的にｆｉｆｆ ｌされた分析物を超臨界流体クロマトグラフ中に導入するのに必要な超臨界８ｉ 体の容積は、極めて少ない。

インターフェースは、インレットカラムから分析物を運ぶ超臨界流体流を受容す るための制限された直径の通路、超臨界流体をして減圧させそしてシステムから 通気させるための移送通路、及び超臨界流体が減圧するとき分析物を捕捉するた めの予定された表面を提供するための、＃ｌ限された直径の通路と移送通路との 結合点に位置するインバクタを含む、インターフェースは、又捕捉された分析物 をして超臨界流体クロマトグラフの分析カラム中に直接導入させるためのインパ クタと結合したアウトプット通路を含む６本発明の一つの形態では、インパクタ は、移送通路の移送導管の末端でその場で形成される多孔性のセラミックフリッ トよりなる。イン７１クタに基づくインターフェースは、バンドの広がりを最小 限にしそして鋭いクロマトグラフのピークを提供するように、超臨界流体の減圧 及び分析物の沈殿をコントロールするために働く。

本発明の他の利点及び特徴は、以下の図に関してなされる好ましい態様の詳細な 記述を読んで明らかになるだろう。

図面の簡単な説明 図１は１本発明で利用されることのできる一つの例示の流体の超臨界流体範囲を 説明するための二酸化炭素の状態図である。

図２は、溶離モードの１本発明によるオンライン多次元クロマトグラフィーシス テムのブロックダイアグラムである。

図３は、サンプリングモードの、本発明によるオンライン多次元クロマトグラフ ィーシステムのブロックダイアグラムである。

図４は、溶媒除去モードの１本発明によるオンライン多次元クロマトグラフィー システムのブロックダイアグラムである。

図５は、移送モードの１本発明によるオンライン多次元クロマトグラフィーシス テムのブロックダイアグラムである。

図６は１図２−５で示されたリストリクタ−インターフェースの図である。

発明を実施するための最良の形態 図１に間し、二ｒＪａｔと炭素の状１１図が超臨界流体の例示をするために示さ れる。

図■に示されるように、固体、液体及び気体の状態が、十分に規定される。しか し、臨界温度（Ｔｃ）を越える）ｚ度では、液体及び蒸気の密度は、同じであり 。

そして流体は　圧力の増大では液化できない、状態図の斜線の９Ｉ４域は、超臨 界領域を示す、この領域では、流体は液体でもな（又は気体でもないので、相の 変化は生じない、むしろ、温度が一定の圧力で上昇するにつれ、液体から超臨界 流体への転移が生じ、そして、圧力が一定の温度で上昇するにつれ、気体から超 臨界流体への転移が生ずる。

二酸化炭素は、比較的安価で容易に入手でき、そして超臨界領域でそれを使用す るのを容易且つ実際的にする厳密な温度及び圧力の性質を有するので、超臨界流 体として特に有用である。しかしながら、二酸化炭素の不利輩の一つは。分子レ ベルでそれが極性を欠如することである。従って、適切な応用により極性の高い 材料又は化合物を抽出するためのｌｆｉ臨界流体混合物を提供するために、他の 流体例えばメタノールを、二酸化炭素に加えることができる。以下の記述から分 るように、超臨界流体の流れは９本発明によるシステム内の二つの異なる位置か ら分析物の溶着物を抽出又は回収するのに使用される。二酸化炭素は、好ましい 超臨界流体であるが、他の流体（例えばアンモニア、アセトニトリル、テトラヒ ドロフラン）が、研究中の目標化合物を抽出するのに好適な超臨界流体を提供す るために、それ単独又は池の８１＃−と組み合せて使用できることは、ＥＭ解さ れるべきくそしてさらに＃、率的である。超臨界抽出は、超臨界流体中の目標化 合物の溶解度に基づき、そしてこの溶解性は、特定の超臨界流体の密度を変える ことにより変化できる。換言すれば、気体の特性に近付く低い密度の超臨界流体 は、ｖ１シて液体の密度に近付くものほど良好な抽出流体ではない、従って、超 臨界流体の抽出力は、その密度をｇＲ節することによりコントロールでき、それ は９次に流体の温度及び圧力によりコントロールされる１例えば、超臨界流体の 圧縮性は、臨界温度より高い温度で大きいので、流体に適用される圧力の小さい 変化は、流体の密度に大きな変化をもたらすだろう。

超臨界流体の密度は、気体のそれらより大きい２−３のオーダーの大きさである 。この大きい密度の結果、超臨界流体中の分子の相互反応は、短い分子間距離に より増大する。一方、超臨界流体の粘度及び物質移送の性質は、気体のそれらと 似たままである。超臨界流体の気体襟／液体様の性質は、改善された物質移送時 に提供するので、それらは、！速な抽出速度及びさらに能率的な抽出の可能性を もたらす、超臨界流体抽出のより詳細な説明は、ｒＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＭＩ ｃｒｏｃｏｌｕｍｎ　５ｅｐａｒａｔｊｏｎＪ　１巻、６号、１９８９年、３０ ２−３０８ページ中のＲｏｂｅｒｔ　Ｍ、Ｃａｍｐｂｅｌｌ、Ｄａｖｉｄ　Ｍ。

Ｍｅｕｎｉｅｒ及びＨｅｒｎａｎ　Ｊ、Ｃｏｒｔｅｓによるｒｓｕｐｅｒｃｒｉ ｔｉｃａｌ　Ｆｌｕｉｄ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆ ｏｓ　Ｍｅｔｈｙｌ　ｆｒｏｍ　Ｗｈｅａｔ　ａｔ　Ｐａｒｔ　ｐｅｒ　Ｂｔｌ ｌｉｏｎ　ＬｅｖｅｌｓＪに見出すことができる。

図２−５に関し１本発明によるオンラインＬＣ−５ＦＣ多次元クロマトグラフィ ーシステム［０は、４種の異なる操作モードで示される。この点に関し９図２の システムを示す、これらの４種のモードのそれぞれは、本発明による方法を行う ためのシステムｌＯの興なる流体の流れの構成を示す。

特に図２に関し、システム１０は、注入器１４から分析すべきサンプルを受容す る液体クロマトグラフ１２を含むように示される１本発明の一つの形態では。

液体クロマトグラフ１２は１分子サイズにより注入器１４から受容したサンプル 材料を分離するためのミクロカラムを使用するサイズ排除クロマトグラフである 、この点について、注入器１４は、予定された容積のサンプル材料を液体クロマ トグラフ１２の溶媒流中に導入する。液体クロマトグラフィー条件の例示として 、ミクロカラムは、ＰＬ−Ｇｅｌ混合混合ベッドｌ用μｍバッキング填した３０ ｃｍＸ２５Ｑａｍ融解石英カラムよりなる。溶媒の流れ又は溶離液は、３．０μ Ｌ／分で流れるテトラヒドロフラン（ｒＴＨＦＪ　）よりなる、注入器Ｉ４は、 １５０ｎＬ　（５００ｎＬローター、タイム−スプリット）の注入容積の、Ｖａ ｌｃＯｒｔｉｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴｅｘａｓからのＶａｌｃ 。

Ｍｏｄｅｌ　Ｎｒ４Ｗ注入バルブよりなる。液体クロマトグラフ１２は、又Ｊａ ｓｃｏ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、ＪａｐａｎからのＪａｓｃｏ　Ｕｖｔｄ ｅｃＶ検出器（２５４ｎｍ、６−ｎＬセル）である、検出器を含む。

液体クロマトグラフ検出器は、溶媒の流れ中の液体クロマトグラフのミクロカラ ムから溶離する関心のある特別の部分又はフラクションを検出するのに使用され る６図２の溶離モードでは、液体クロマトグラフ１２かも溶離する流体の流れは 、関心のあるフラクションが検出されるまで、廃物収集器１６に向けられる。

この点について、システム１０は、液体クロマトグラフ１２からの流体の流れの 方向をコントロールするためのマルチ−ボートスイッチングバルブ１８を含む。

本発明の一つの形態では、バルブ１８は、ＶａｌｃｏＩＯボートバルブモデルＮ １１０ＷＴである。

バルブ１８は、三つの異なる源からの流体の流れをコントロールするためのシス テム１０に設けられる４１ｍのバルブの一つであり、液体クロマトグラフから溶 離する流体の流れは、これらの源の一つである。システムＩＯの他のバルブは。

バルブ２０．２２及び２４と名付けられる。これらのバルブのそれぞれはマルチ −ボートスイッチングバルブであり、各バルブのポートの数は、システム中のそ れらの操作に必要な導管の数及びスイッチング位置に依存する。従って１例えば 、バルブ１８及び２０は５同じＩＯボートＶａｌｃｏバルブであり、一方バルブ ２２及び２４は、４ボートＶａｌｃｏバルブ（例えばモデルＡＣ４Ｗ）である。

バルブ＋８−２４は、別々のバルブであると示されているが、これらのバルブの １個以上は、適切な応用で単一のバルブ構造に組み合わされることを理解すべき である。上述から明らかなように、バルブ１８−２４の数個又は全部は、同時に スイッチングされで、一つの操作モードから他のモードに変化しなければならな い、このスイッチング作用は９手動で達成できるが、システム■０は、完全に自 動化でき１手動の介荘は、バルブ位置を変えるのに必要ではない。

溶離モードでは、バルブ１８は、液体クロマトグラフから溶離する流体を廃物収 集器１６に向ける。この流体の連絡は、導管部分２６−２８及びバルブ部分３０ の斜線掛は又はハツチングにより図２に示される。流体の流れを示すためのこの やり方は、これらのモードのそれぞれに設けられた流体の連絡と操作の種々のモ ードとの間の差を明確に示すために１図２−５を通して利用される。この点につ いて、斜線掛は又はハツチングの異なる形は、システム１０の３種の流体の源の それぞれ、即ち液体クロマトグラフ１２．不活性気体源３２及び超臨界流体の流 れをもたらすためのポンプ３４について縄供される。

溶離モードの記述を続けると、気体源３２からの不活性気体は、インレットカラ ム３６を通って流れるように向けられ、そしてバルブ１８．２０及び２２の指図 の下に通気へ外へでる。この流体の流れの回路は、バルブ２０のボート４０をバ ルブ１８のボート４２に接続するのに使用される導管３８を含む、この気体の流 れの目的は、インレフトカラム３６に存在するかもしれない全ての流体を除くた めである。インレットカラム３６を乾燥するのに使用される気体は、システムに 使用される化学物及び物質に不活性である任意の好適な気体である。従って。

例えば、気体のｗ、３２は、システムに窒素を供給するガスシリンダーであって もよい、インレフトカラム３６に存在する全ての流体が急速に除かれることを確 実にするために、源３２からの気体の流れが比較的高い気体圧（例えば２−２０ ０ｐｓｉ　（１４−１４００ｋＰａ））に維持されることが好ましい、従って、 導管３８は、これら圧力に抵抗ししかも維持できなければならない、事実、シス テムのコンポーネントに流体を送るのに使用される導管のそれぞれ例えば導管３ ８は、システムに使用されるＭｉ臨界流体を運ぶのに使用される圧力（例えば１ ０００−１ｏ０００ｐｓ　ｆ　（７−７０ＭＰａ＞）に抵抗ししかも！！持でき なければならない０本発明による一つの態様では、これらの輸送導管のそれぞれ は、好ましくは融解石英（内径２５０ｕｍＸ外径４００μｍ）から作られる。し かし、他の好適な材料が適切な応用に使用できることは、理解すべきである。

システムｌＯは、又超臨界流体例えば二酸化炭素の流れを生じさせるための手動 ポンプ３４を含む０本発明による一つの態様では１手動ポンプは、Ｖａｒｆａｎ 　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、５ｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡからのＶａｒｉａｎ８５ ００手動ポンプである。この手動ポンプは、超臨界流体の圧力（そして従って密 度）の手動のコントロールを行うが、自動化されたコントロールも使用されて、 超臨界流体の圧力をコントロールする。この点について、ポンプ３４によりもた らされた圧力は、プログラム化されて、定常状態の輸送条件（例えば１００気圧 （Ｉ　ＯＭＰａ））から抽出に使用される操作条件（例えば４００気圧（４０Ｍ Ｐａｌ）に増大する。

ポンプ３４からの超臨界流体は、Ｖａｌｃｏ　Ｉｎｃ、からのステンレス縛モフ Ｉ２から溶離する流体の流れは、インレットカラム３６を経て移送し、バルブす るこの位置の変化は、又気体の源３２からの気体の流れをブロックする。バルブ ２２の位置は、又インレットカラム３６からの流体の流れをこのインターフェー スのリストリクタ−導管６４を経てインターフェース５４に入らせるために、シ タ−フェース５４中に関心のある分析物を運び、そこで分析物は２局限された領 域で溶着又は捕捉されるだろう、この工程は、検出器６０により生ずるクロマト グラムのピークが説くなるように、超臨界流体のクロマトグラフの分析カラム５ ６中への導入前に　１！１以上の分析物を濃縮するために用いられる。

インターフェース５４は、超臨界流体を気体に減圧しそして導管５２を経てイン ターフェースから通気させることにより分析物を捕捉する。この点について。

バルブ２４は、導管５２を通気ボート６６に組み合せる移送モードに位置する。

別に、導管５２は、別のクロマトグラフィーシステムに接続できる。この別のク ロマトグラフィーシステムは、インターフェース５４に溶着されていないサンプ ターフエース５４中への超臨界８１＃、の流れが、捕捉された分析物をクロマト グラフ５８の分析カラム５６中へ導入させるので、分析モードと呼ぶこともでき る。

換言すれば、超臨界流体は、インターフェース５４から分析物を洗浄しそしてそ れらを分析カラム５６に運び、そこで他の分離及び検出段階が開始される。特に 、分析カラム５６は、分析物力・ら関心のある１種以上の成分を分離し、これら の成分は、クロマトグラフ５８の検出器６０により検出且つ定量される。

−組の例示のクロマトグラフィー条件を説明するために、分析カラム５６は、Ｄ ｉｏｎｅｘ／Ｌｅｅ　５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、５ａｌｔ　Ｌａｋｅ　Ｃ１ｔｙ、 Ｕｔａｈからの０２２５μｍのフェニル−メチルシリコーンフィルムを有する３ 、０ｍＸ５０μｍのカラムからなる。同様に、検出器６０は、ＨｅｗｌｅｔｔＰ ａｃｋａｒｄ　Ｉｎｃ、、Ｂｅ１ａｆｏｎｔｅ、ＰＡからのフレームイオン化検 出器（３７０°Ｃに設定）よりなる、超臨界流体として二酸化炭素を用いると、 ポンプ３４により生ずる圧力は、１５気圧／分（１，５ＫＰａ／分）の速度で、 １００気圧（１０ＭＰａｌから４００気圧（４０ＭＰａ）に増大しなければな超 臨界流体抽出工程及び分析工程の温度をコントロールするために、オーブン７０ は、好ましくはインレフトカラム３６．バルブ２２及びクロマトグラフ５８を囲 むように設けられる。この点について、温度は、ポンプ３４により生じた圧るよ うに設定される。この温度条件は、又溶媒が上昇した温度で蒸発しがちであるの で、溶媒除去モードでインレフトカラム３６から溶媒を除く工程で、助けになる ように働く。

図６に関し、好ましいｔｍ樟のインターフェース５４は、移送導管７２に同軸的 に配置されたリストリクタ−導管６４を含むことを示す、リストリクタ−導管６ ４及び移送導管７２の両方は、好ましくはＰｏｌｙｍｆｃｒｏ　Ｔｅｃｈｎｏｌ ｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ、からの融解石英の毛管である６リストリクター導営６４の 場合では、内径は、好ましくは、外径が移送導管７２の内径に密接に関連してい る一方、超臨界流体を徐々に減圧するために、１０μｍ−２５μｍの範囲にある 、例えば、リストリクタ−導管６４について２５０μｍの外径であれば、移送導 管の内径は、約３００−４００μｍでなければならない、同様に、内径１５μｍ 及び外径１５０μｍを有するリストリクタ−導管については、移送導管の内径は 、＋６０−２００μｍであり、外径は、３５０μｍでなければならない、換言す ると、移送導管の内径は、リストリクタ−導管と移送導管との間に支持をもたら すことなく、リストリクタ−導管をして移送導管７２に滑り込ませそして保持さ れる捏十分に大きくなければならないが、市販されているものの中で最小のサイ ズでなければならない、リストリクタ−及び移送の導管の部分の長さに関して、 移送導管７２は、各端の接続を行うことができる程長いことを要するに過ぎない （例えば３ｃｍ）、対照的に、線状のりクストリクター導管６４の長さは、超臨 界流体の減圧をコントロールするのを助けるに十分な程長くなければならない（ 例えば＋５−２５−２Ｏ。

図６に示されるように、好ましいｔ１様のリストリクタ−インターフェース５４ は、又超臨界ＦＩＬ体が気体に減圧しそして移送導管７２を通って逃れるとき、 目標化合物又は分析物を捕捉するためのインバクタフ４を含む、この点について 、インハクタフ４は、超臨界流体の減圧中存在できる全ての運動エネルギーを発 散し、そしてその上に目標ｆヒ合物が溶着又は沈殿する表面を提供するのに使用 される、特に、インバクタフ４は、目標化合物の過剰の移送又は広がりを最小限 にし。

そのため挟い／説いクロマトグラフィーのバンドがクロマトグラフ５８により生 成するように、構成される０本発明の一つの形態では、インバクタフ４は、米国 特許嬉４７９３９２０号により移送導管７２の末端でその場で形成される多孔性 のセラミックフリットである。この特許でさらに詳しく述べられているが、移送 導管７２の末端は、触媒を含む液体の珪酸カリウムに浸され、毛管作用が、液体 を管に入れさせる（例えばＯｌＩ　１．０ｍｍ１．管は１次に加熱されて材料を 重合して、５０００オングストローム（５００ｎｍｌのオーダーの孔度を有する フリットを生じ、そして所望の長さに切断される。インバクタフ４は、もし所望 ならば次に不活性化される。インバクタフ４は、移送導管７２の末端に配置され た又は押し込まれた物質（例えば石英）の固体のブロックよりなるが（流体の流 れのための隙間を残す）、この構成は、制限された領域に目標化合物の沈殿を集 中するために５その場でキャストされた多孔性のセラミックフリットはど有効で はないと考えられるに の好ましいＵ欅では、減圧された超臨界流体は、それが、リストリクタ−導管６ ４から移送導管７２により形成される環状ア１１１１域に移送するとき、その線 流の方向を逆転する。この流れの逆転は、さらに運動エネルギーの除去に役立つ 。

リストリクタ−導管６４の末端は、好ましくはインバクタフ４に非常に近く配置 されて、リストリクタ−導管６４とインハクタフ４との間には最小限の距離が存 在する。このやり方で、目標化合物は、一般にインバクタフ４の前面７６に溶着 するだろう１図６に示されるように、移送導管７２の末端は、°ガラス被覆ステ ンレス網ユニオン７８を経て突き合わせ接続で分析カラム５６の末端に結合する 、そのため、ユニオン７８は、リストリクタ−導管６４．移送導管７２及び分析 カラム５６の間の結合に配置され、インバクタフ４は、この結合のこれらの導管 のそれぞれの間に挾まれる、この構成は、有利に減圧の点と分析カラム５６との 間の距離を最小にすることを理解すべきである２本発明の一つの形態では、ユニ オン７８は、５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｇｌａｓｓ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（ｒ ＳＧＥＪ）、Ａｕ５ｔｉｎ、ＴＸ、ＵＳＡからのガラス被覆モデルＶＳＵ１００ ４ユニオンである。

図６は、又移送導管７２の逆の末端が三方同ガラス被覆ステンレスｔＲ丁管継手 ８０であることを示す、移送導管５２は、Ｔ管継手８０の横又は縦方向に延在↑ 　−る１１８２に接続して、減圧した超臨界流＃−（例えば気体状の二酸化炭素 ）をしてリストリクタ−インターフェースから逃しシステムから通気させる。Ｔ 管継手８０は、又移送導管７２と同軸の関係で脚８４でリストリクタ−導管６４ を支持する６本発明の一つの形態では、Ｔ管継手８０は、ＳＧＥがものガラス被 覆モデルＶＳＵＴＯＯ４Ｔ管継手である。この特別なＴ管継手は、Ｔ管継手８０ と管との間にシールを設けるために、グラファイトーヴエスペル　フェルール及 びコネクタを備える。不活性化融解石英スリーブ８６（例えば移送導管の外径が １５０μｍのとき３．５ｃｍＸ２００μｍ）は、又Ｔ管継手８０中のデッドスペ ースを最小限にするために、同軸的に配置される。

さらに、目標ｆヒ金物の全ての捕捉を助けそしてｗｌ＃窒素又は二酸化炭素を通 すことによりクロマトグラムのピークの全ての広がりを最小にするために、リス トリクタ−インターフェースを冷却する方法を提供することが、Ｓ切な溶層では 望ましい、この点に関し、超臨界流体から気体への転移は、冷却効果（Ｊｕｏｕ ｌｐ　−Ｔｈ　ｏｍｐ　ｓ　ａ　ｎ）を生じ、それは、分析物を狭いバンドに保 つのに役立つことを注意する必要がある。何れにしても、追加の冷却の必要性は ５その大きな表面積によるインパクタのための多孔性のセラミックフリットの使 用により実質的に最小にされる。

インバクタフ４は、輸送導管７２に形成されるが、分析カラム５６の前にインハ クタを形成することもできる。この構成では、輸送導管７２は、不必要であろう 、開環に、単一のハウジングが、Ｔ管継手８０及びユニオン７８に使用される別 々のコンポーネントを置換するために構成できることを理解すべきである。

上記の１！！帰は１本発明の前記の目的を達成するために十分に計算されたもの であることが理解されるだろう、さらに、当業者は、一度前記の記述の利輩を得 たならば、本発明の趣旨を離れることなくここに記載された特定のｆｌ様の修飾 を行うことが出来ることは、明らかである。これらのｒｉｊｌｉは　請求の範囲 の趣旨の範囲によってのみ制限される本発明の範囲内で考えられるべきである。

ニ＝＝＝＝＝・已・ 国際調査報告 フロントページの続き （７２）発明者　ハイムズ、アール６．ボールアメリカ合衆国ミシガン州　４８ ６１５　ブレラケンリッジ　ルート１　ウェスト　ラポート　ロード　１８４６ （７２）発明者　プファイファー、　カーティス、ディ。

アメリカ合衆国ミシガン州　４８６４０　ミドランド　ゾール　コート５００１

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. １．多量の溶媒容積のサンブルのオンラインＳＦＣクロマトグラフィー分析を提 供する方法において、 少なくとも一部のサンブルを溶媒の流体流からインレットカラム手段中に溶着さ せる段階、 該インレットカラム手段から該溶媒の少なくとも一部を除く段階、超臨界流体を して該インレットカラム手段中を流れさせて前記の溶着されたサンブルから分析 物を抽出し、そして該分析物をインターフェースに捕捉しその間該インターフェ ースから該超臨界流体を減圧且つ通気させる段階、そして前記の捕捉された分析 物を超臨界流体クロマトグラフ中に導入して該分析物の関心のある成分を分離且 つ分析する段階 よりなる方法。
2. ２．前記の捕捉された分析物が、該超臨界流体をして該インターフェース中を流 させることにより該超臨界流体クロマトグラフ中に導入される請求項１の方法。
3. ３．該インターフェースは、該超臨界流体の減圧の付近に配置された表面上に該 分析物を捕捉するためのインバクタ手段を含む請求項１の方法。
4. ４．該インレットカラム手段は、被覆されていない不活性化融解石英カラムであ る請求項１の方法。
5. ５．該インレットカラム手段は、固定相により被覆された融解石英カラムである 請求項１の方法。
6. ６．インターフェースから通気された減圧された超臨界流体は、インターフェー スにより捕捉されない関心のある全ての成分を検出及び分析するために、クロマ トグラフィー手段に向けられる請求項１の方法。
7. ７．オンラインＬＣ−ＳＦＣ多次元クロマトグラフィー分析を提供する方法にお いて、 サンブル材料を液体クロマトグラフの溶媒の流れ中に導入して液体クロマトグラ フィーにより該サンブルから関心のあるフラクションを分離且つ検出する段階、 前記の関心のあるフラクションが検出されるとき、該液体クロマトグラフから溶 離する流体の流れをインレットカラム手段中へ向かわせ、そして関心のある該フ ラクションの少なくとも一部を該インレットカラム手段に溶着させる段階、該融 着段階後、気体の流れを該インレットカラム中に向かわせて該インレットカラム 手段から溶離流体の少なくとも一部を除く段階、前記の気体の流れの除去段階後 、超臨界流体流を該インレットカラム手段中に向かわせて該溶着物から分析物を 抽出し、そして該インターフェースからの該超臨界流体を減圧且つ通気している 間、インターフェースの該分析物を捕捉する段階、前記の捕捉した分析物を超臨 界流体クロマトグラフ中に導入して該超臨界流体流を該インターフェースを通る ように向かわせることにより、該分析物から関心のある成分を分離且つ分析する 段階 よりなる方法。
8. ８．該インターフェースは、該超臨界流体の減圧の付近に配置されたインターフ ェース上に該分析物を捕捉するためのインバクタ手段を含む請求項７の方法。
9. ９．該インレットカラム手段は、被覆されていないしかも不活性化融解石英カラ ムである請求項８の方法。
10. １０．該インレットカラム手段は、固定相により被覆された融解石英カラムであ る請求項８の方法。
11. １１．インターフェースから通気する減圧された超臨界流体を、クロマトグラフ ィー手段に向かわせて、インターフェースにより捕捉されなかった関心のある全 ての成分を検出且つ分析する請求項７の方法。
12. １２．オンラインＬＣ−ＳＦＣ多次元クロマトグラフィーシステムにおいて、液 体クロマトグラフ手段の溶媒流れ中に導入されるサンブルから関心のあるフラク ションを分離且つ検出するための液体クロマトグラフ手段、前記の関心のあるフ ラクションを受容しそして該インレットカラム手段の内表面上に前記の関心のあ るフラクションの少なくとも一部を溶着させるためのインレットカラム手段、 該液体クロマトグラフと該インレットカラム手段との間の流体の連絡をコントロ ールするための第一のバルブ手段、 インターフェース、 該インレットカラム手段と該インターフェースとの間の流体の連絡をコントロー ルし、そして該インレットカラム手段と通気アウトプツトとの間の流体の連絡を コントロールするための第二のバルブ手段、気体の流れを提供するための気体状 の流体輸送手段、超臨界流体流を提供するための超臨界流体輸送手段、前記の気 体状の流体輸送手段と前記の第一のバルブ手段と結合した該インレットカラム手 段との間の流体の連絡をコントロールし、そして該超臨界流体輸送手段と前記の 第一のバルブ手段と結合した該インレットカラム手段との間の流体の連絡をコン トロールするための第三のバルブ手段、該超臨界流体輸送手段とインターフェー スとの間の流体の連絡をコントロールするための第四のバルブ手段、及び 該インターフェースに接続した超臨界流体クロマトグラフよりなるシステム。
13. １３．該インターフェースは、前記の第二のバルブ手段と流体で連絡しているリ ストリクター通路、前記の第四のバルブ手段と流体で連絡している移送通路、並 びに該超臨界流体クロマトグラフの分析カラムと流体で連絡しているアウトプツ ト通路を含む請求項１２の発明。
14. １４．該インターフェースは、該超臨界流体が該移送通路を経て該インターフェ ースから通気する間、該超臨界流体流により該インレットカラムから該インター フェースに運ばれる分析物を捕捉するための該リストリクター通路のアウトプツ ト末端と結合したインバクタ手段を含む請求項１３の発明。
15. １５．該インバクタ手段は、該移送通路の一端に位置する多孔性のセラミックフ リットを含み、そして該リストリクター通路は、該移送通路内に同軸的に配置さ れている請求項１４の発明。
16. １６．該超臨界流体クロマトグラフの該分析カラムは、該インバクタ手段に隣接 して配置されている請求項１５の発明。
17. １７．システム内で分析物を抽出且つ移送するために超臨界流体流を使用するオ ンラインクロマトグラフィーシステムのためのインターフェースにおいて、該超 臨界流体旅中の該分析物を受容するための第一の通路手段、該超臨界流体の減圧 に付随して該分析物を捕捉するための前記の第一の通路手段のアウトプツト末端 に結合したインバクタ手段、該超臨界流体をして減圧させそして該インターフェ ースから通気させるための前記の第一の通路手段の前記のアウトプツト末端と流 体で連絡している第二の通路手段、及び 該インターフェースから前記の捕捉された分析物を運ぶためのアウトプツトを提 供するための該インバクタ手段と流体で連絡している第三の通路手段よりなるイ ンターフェース。
18. １８．該インバクタ手段は、多孔性のセラミックフリットを含む請求項１７の発 明。
19. １９．前記の多孔性のセラミックフリットは、移送導管の一端で形成され、そし て前記の第一の通路手段は、該移送導管に同軸的に配置されたリストリクター導 管を含む請求項１８の発明。
20. ２０．該リストリクター導管は、１０−２４μｍの範囲の内径及び１５−２０ｃ ｍの範囲の長さを有し、そして該移送導管は、３−５ｃｍの範囲の長さを有する 請求項１９の発明。