JPH06343477A - 医薬的および診断的使用のための組み換えフオーミーウイルスベクター、および組み換えフオーミーウイルスベクターの作製方法 - Google Patents
医薬的および診断的使用のための組み換えフオーミーウイルスベクター、および組み換えフオーミーウイルスベクターの作製方法Info
- Publication number
- JPH06343477A JPH06343477A JP6137880A JP13788094A JPH06343477A JP H06343477 A JPH06343477 A JP H06343477A JP 6137880 A JP6137880 A JP 6137880A JP 13788094 A JP13788094 A JP 13788094A JP H06343477 A JPH06343477 A JP H06343477A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- foamy virus
- virus vector
- cells
- vector
- gene
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000013598 vector Substances 0.000 title claims abstract description 154
- 241000714192 Human spumaretrovirus Species 0.000 title claims abstract description 135
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 67
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 35
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 6
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 77
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 abstract description 13
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 5
- 230000006798 recombination Effects 0.000 abstract description 5
- 238000005215 recombination Methods 0.000 abstract description 5
- 238000012856 packing Methods 0.000 abstract 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 23
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 20
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 18
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 16
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 15
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 15
- 241000713673 Human foamy virus Species 0.000 description 14
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 12
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 12
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 10
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 10
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 10
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 10
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 10
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 9
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 8
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 8
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 7
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 7
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 7
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 7
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 6
- 102400001282 Atrial natriuretic peptide Human genes 0.000 description 6
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 6
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 6
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 5
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 4
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 4
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 4
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 4
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 4
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000001566 pro-viral effect Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 241000713869 Moloney murine leukemia virus Species 0.000 description 3
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 3
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 3
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 3
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 2
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 2
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 2
- 102100038132 Endogenous retrovirus group K member 6 Pro protein Human genes 0.000 description 2
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 2
- 101000867232 Escherichia coli Heat-stable enterotoxin II Proteins 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 2
- 108010070875 Human Immunodeficiency Virus tat Gene Products Proteins 0.000 description 2
- 241000598436 Human T-cell lymphotropic virus Species 0.000 description 2
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 108010035766 P-Selectin Proteins 0.000 description 2
- 102100023472 P-selectin Human genes 0.000 description 2
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 2
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 2
- 241000713675 Spumavirus Species 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000012224 gene deletion Methods 0.000 description 2
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N prometryn Chemical compound CSC1=NC(NC(C)C)=NC(NC(C)C)=N1 AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 2
- UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 1-[1-[2-[[5-amino-2-[[1-[5-(diaminomethylideneamino)-2-[[1-[3-(1h-indol-3-yl)-2-[(5-oxopyrrolidine-2-carbonyl)amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbon Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C1CCC(=O)N1 UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000014303 Amyloid beta-Protein Precursor Human genes 0.000 description 1
- 108010079054 Amyloid beta-Protein Precursor Proteins 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108010041397 CD4 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 206010007269 Carcinogenicity Diseases 0.000 description 1
- 108010035563 Chloramphenicol O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 108010009685 Cholinergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 108010073254 Colicins Proteins 0.000 description 1
- 206010010099 Combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 102100026662 Delta and Notch-like epidermal growth factor-related receptor Human genes 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 206010013801 Duchenne Muscular Dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- 101710177291 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 102100034353 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 108700041567 MDR Genes Proteins 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 1
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 206010028470 Mycoplasma infections Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000004270 Peptidyl-Dipeptidase A Human genes 0.000 description 1
- 108090000882 Peptidyl-Dipeptidase A Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101710150344 Protein Rev Proteins 0.000 description 1
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 description 1
- 108010087776 Proto-Oncogene Proteins c-myb Proteins 0.000 description 1
- 102000009096 Proto-Oncogene Proteins c-myb Human genes 0.000 description 1
- 108020005067 RNA Splice Sites Proteins 0.000 description 1
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 241001529481 Simian retrovirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 1
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 108700022715 Viral Proteases Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 1
- 102000034337 acetylcholine receptors Human genes 0.000 description 1
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 201000009628 adenosine deaminase deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 210000001557 animal structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 208000036556 autosomal recessive T cell-negative B cell-negative NK cell-negative due to adenosine deaminase deficiency severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 101150077466 bel gene Proteins 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000260 carcinogenicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007670 carcinogenicity Effects 0.000 description 1
- 101150055766 cat gene Proteins 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 244000079386 endoparasite Species 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 108010078428 env Gene Products Proteins 0.000 description 1
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150030339 env gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700004026 gag Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150098622 gag gene Proteins 0.000 description 1
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002743 insertional mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 231100001223 noncarcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 108010089520 pol Gene Products Proteins 0.000 description 1
- 108700004029 pol Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150088264 pol gene Proteins 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000004777 protein coat Anatomy 0.000 description 1
- 230000029865 regulation of blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000007502 viral entry Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/17011—Spumavirus, e.g. chimpanzee foamy virus
- C12N2740/17022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/17011—Spumavirus, e.g. chimpanzee foamy virus
- C12N2740/17041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/17043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
- C12N2840/20—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron
- C12N2840/203—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron having an IRES
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
- C12N2840/44—Vectors comprising a special translation-regulating system being a specific part of the splice mechanism, e.g. donor, acceptor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
- C12N2840/80—Vectors comprising a special translation-regulating system from vertebrates
- C12N2840/85—Vectors comprising a special translation-regulating system from vertebrates mammalian
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
Abstract
性核酸の、遺伝子工学を用いる試験管内組み換えによっ
て作出され、そして適切な宿主細胞もしくは組み換え的
に改変されたパッケージング(ゲノム詰め込み)細胞系
によって作出される新規なベクター系。 【効果】 上記フォーミーウイルスベクター系は、治療
的およびその他の遺伝子の真核細胞中への安全かつ効果
的な導入を可能にする。
Description
酸および外因性核酸の、遺伝子工学を用いる試験管内組
み換えによって作出され、そして適切な宿主細胞もしく
は組み換え的に改変されたパッケージング(ゲノム詰め
込み)細胞系によって産生される新規なベクター系の作
製に関する。特に好適なパッケージング細胞系の組み換
え的作製は、同様に本発明の構成をなす。本発明は、フ
ォーミーウイルスベクターによる、治療的およびその他
の遺伝子の真核細胞中への安全かつ効果的な伝達を特徴
とする。
範なスペクトルの真核細胞にわたり:それらは非常に幅
広い種の哺乳動物細胞を変換する;それらは、特に、ヒ
トにおける多くの異なる体細胞中に遺伝子を導入するた
めに使用することができる。フォーミーウイルスベクタ
ーは、外因性DNA断片に対して大きな受容能を有する
ことを特徴とする。
Aの発現は、例えば、もし外因性のプロモーターが、そ
のベクター中に用いられない場合には、ウイルスのトラ
ンスアクチベーターbel−1によって、厳格に調節す
ることができる。
ミーウイルスベクターは、ヒトには病原性はなく、それ
ゆえに使用上安全である。ヒトのフォーミーウイルスが
人間に対して病理学的作用を引き起こすという証拠はな
い。ヒトのフォーミーウイルスが、神経学的疾病、グレ
ーヴス病、その他の自己免疫症状、カーベーンの甲状腺
炎もしくは筋委縮性側索硬化症に関与していることを推
論するこれまでの報告は、現在では、そのような臨床例
のおけるフォーミーウイルスに関する徹底的解析を基
に、明白に否定することができる。フォーミーウイルス
の使用に関する安全性は、また、フォーミーウイルスベ
クターと細胞DNAの相同組み換えを起こし得る相同な
DNA配列が、ヒト染色体DNAには存在しないという
事実に由来する。フォーミーウイルスは、他のレトロウ
イルスとは系統発生的に区別されるものである。
クターは、発癌性をもたないことが知られている。
ベクターは、ウイルス遺伝子bel−2およびbel−
3を欠失させることによって作製される。
OV−1、pFOV−2およびpFOV−3は、通常、
bel−1遺伝子に隣接する3’方向に約420塩基対
の欠失を有する。
れるパッケージング細胞系において生産することができ
るところの、例えば、pFOV−4のような複製不能の
フォーミーウイルスベクターが作製された。
に活性なタンパク質もしくはアンチセンスRNAもしく
はデコイ(decoy)RNAを形成するために、ヒト
もしくは動物細胞において外因性DNAを発現させるの
に適している。フォーミーウイルスベクターは、体液性
免疫および/または細胞性免疫をつくるために、ヒトも
しくは動物において外因性DNAを発現させるのに適し
ている。
により、フォーミーウイルスベクターは、相同組み換え
によって、ヒトもしくは動物における標的細胞の染色体
DNAにおける望ましくない遺伝子を不活化するため
に、または遺伝子欠損を相補するために適切に使用する
ことができる。
することによって、またはその他の遺伝子構築によっ
て、フォーミーウイルスベクターは、診断薬として使用
するために適切である。
トロウイルスのスプーマウイルス・ファミリーに属して
いる。レトロウイルスのスプーマウイルスファミリー
は、他のレトロウイルスとは明らかに異なる[R.M. Fue
gel et al., EMBO J. 6, 2077-2084 (1987); B. Maurer
et al., J. Virol, 62, 1590-1597 (1988); A. Rethwi
lm et al., Nucleic AcidS Res. 18, 733-738 (1990)
]。
原性が見出されていないことは、本発明のために特に重
要なことである。さらにまた、HFVは、ヒト組織に各
種型の多重性を導入するので、ベクターは、“遺伝子送
達系”として開発されたものであって、それは感染性分
子クローンpHSRV[A. Rethwilm et al., Nucleic
Acid Research 18, 733-738 1990)]から得られ、そし
て本発明の主題である。“遺伝子送達”のためのベクタ
ーとしてのその使用において、フォーミーウイルスは新
規である。
(モロニー・マウス白血症ウイルス)、それからは広く
普及されたN2ベクター[A.D. Miller et al., Biotec
hniques 7, 980-990 (1989)]が得られるが、HFVは
いかなる発癌性ももたず、HFVベクターは使用上安全
であると考えられる点で、そのような他のレトロウイル
スベクターとは根本的に異なる。そのうえ、フォーミー
ウイルスは、繊維芽様細胞、上皮様細胞およびリンパ細
胞を含む非常に広範な宿主スペクトルに感染する。さら
に、もしフォーミーウイルスのLTR(ロング・ターミ
ナル・リピート)が転写活性をもつならば、ウイルスの
トランスアクチベーターbel−1の存在が、命令とな
るという事実のゆえに、HFV誘導体は安全なベクター
を代表するものとなる。しかしながら、もしそのベクタ
ーが、bel−1トランスアクチベーターに関する遺伝
情報を有していなければ、移動可能な複製能のある、例
えば発癌性をもつHFVベクターは、LTR塩基配列
が、トランスアクチベーターbel−1遺伝子なしでは
転写を活性化しないので、その細胞内に産生することは
できない。挿入変異誘発による細胞のがん遺伝子の活性
化は、同様にありそうにもない。ベクターとしてHFV
誘導体を使用することについて、さらに安全なファクタ
ーは、フォーミーウイルスの内因的相同性が知られてお
らず、それゆえ、内因性レトロウイルスとのいかなる組
み換えの問題も起き得ないことである。この考察は、ま
た、使用にさいしてフォーミーウイルスベクターの遺伝
的安定性を特に高度にするためにも重要である。
FOV−4に関する構築実施例において記載するよう
に、組み換えフォーミーウイルスは、遺伝子材料を、永
久的な動物もしくはヒトの細胞系に、またはヒトもしく
は動物の体細胞に伝達するために好適である。それら
は、代々遺伝する情報を真核細胞中に導入するためのベ
クターを表していて、可能な応用範囲、標的細胞への遺
伝子導入の効率性および操作上の安全性において、通常
の遺伝子伝達系(MoMLV、アデノ随伴ウイルスもし
くはシンビスウイルス、またはアデノウイルス粒子、界
面活性剤およびその他の添加剤、または物理的方法を用
いるDNAの形成)よりも優位性をもっている。
る、そしてbel−1もしくはbel−2遺伝子の領域
に、外因性核酸を挿入するための多重クローニング配列
を有しているフォーミーウイルスベクターは、以下に述
べる目的のために使用することができる。しかしなが
ら、多重クローニング配列を挿入し、それによって別の
フォーミーウイルスベクターを構築するために、pHF
VのプロウイルスDNAもしくはその他のフォーミーウ
イルス分離株において他の欠失をつくることもまた可能
である。
クターは、長さで1700塩基対を容易に越えるところ
の外因性核酸(DNA断片)を受け入れることができる
ので、そのようなフォーミーウイルスベクターは、可能
な多数の応用のための発現可能な外因性DNAを、生産
目的のための細胞系に、または医薬的もしくは診断的目
的のための体細胞に導入され得る: I. 予防接種のためのフォーミーウイルスベクター 組み換えフォーミーウイルスベクター中の外因性核酸
は、1種もしくはそれ以上のポリペプチドを発現するた
めに1種もしくはそれ以上の完全な遺伝子を含有するこ
とができる。そのようなペプチドは、ヒトもしくは動物
において液性および/または細胞性免疫を引き出すため
に、好適であり、導入された標的細胞中のこのフォーミ
ーウイルスベクターによってそれらの発現を継続して起
こすことができる。細胞内で形成されたペプチドは、特
殊なポリペプチドであり、細胞性免疫を引き出すために
重要なものであることが、既に分かっている(J.B. Ulm
er et al., Science 259, 1745-1749 (1993))。
体細胞において、HIV,HTLV,B型肝炎,C型肝
炎,ヒトパピローマウイルス、シトメガロウイルス、H
SVもしくはインフルエンザウイルス、または、例え
ば、PRV,BHVもしくはEHVのような動物ヘルペ
スウイルス等のウイルスタンパク質を発現するフォーミ
ーウイルスベクターは、予防的に、または病原性ウイル
スによるヒトもしくは動物の継続する感染の治療手段と
して使用される強力なワクチンを代表するものである。
は、バクテリア感染に対して、マイコプラズマ感染に対
して、またはプラズモジウムもしくは他の内部寄生虫に
よる感染に対して、同じ原理による予防接種のために使
用することができる。そのような予防接種のためには、
複製不能であるが、感染性のフォーミーウイルスベクタ
ー粒子、バッファー溶液ml当たり103〜107タイタ
ーもしくはそれ以上の粒子が、生体内での細胞導入のた
めに皮下もしくは筋肉内に注射される。さもなくば、繊
維芽細胞、筋芽細胞もしくはその他の体細胞が、そのよ
うな細胞とフォーミーウイルスを産生している細胞とを
混合培養することによって、または目的の体細胞を、m
l当たり103〜107タイターのフォーミーウイルスベ
クターもしくはそれ以上の粒子を含有するバッファー水
懸濁液とともに培養することによって、生体外で導入さ
れる。
疾患の治療に関して、治療用RNAを発現するためのフ
ォーミーウイルスベクター 組み換えフォーミーウイルスベクターにおける外因性核
酸は、標的細胞で望ましくないRNA分子の配列と相補
的な(アンチセンス)ヌクレオチド塩基配列を保持する
か、またはほかにヌクレアーゼ活性のあるリボザイムR
NAを保持するRNAを、導入細胞中で発現する1個な
いしそれ以上の遺伝子を包含している。これらの望まし
くないRNA分子は、レンチウイルスもしくはその他の
RNAウイルスのゲノムRNAであり得る。それらはま
た、レンチウイルス(中でも、HIV、HTLV)、B
型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、ヒト乳頭腫ウイル
ス、シトメガロウイルス、エプスタイン・バールウイル
ス、単純ヘルペスウイルス、動物のヘルペスウイルス
(例えばPRV,BHVおよびEHV)、またはその他
の病原ウイルスもしくはマイコプラズマ、または細胞内
で複製する原核生物、のような細胞内病原体のメッセン
ジャーRNA分子でもあり得る。
は、また、体細胞の悪性増殖の原因となるがん遺伝子も
しくはその他の遺伝子のmRNA転写物でもあり得る。
したがって、c−mycRNA転写物に対するアンチセ
ンスRNAを発現するフォーミーウイルスベクターは、
例えば、バーキットリンパ腫のような悪性障害の場合に
使用されるであろう。望ましくないRNA分子はまた、
自己免疫障害もしくは代謝障害の遺伝もしくは発現に、
原因として関与しているタンパク質をコードしているこ
ともある。組み換えフォーミーウイルスベクターによっ
てコードされ得る相補的アンチセンスRNAを用いて、
そのような望ましくないRNA分子は、導入細胞におい
て、ワトソン−クリック塩基対による配列選択的方法で
不活化することができる。フォーミーウイルスベクター
は、それゆえ、感染されたもしくは病理学的に変性した
細胞において、アンチセンスRNA発現を用いて、細
菌、ウイルスおよびその他の生物による感染病、および
がん性もしくは自己免疫疾患の治療のために使用するこ
とができる。
されたアンチセンスRNAもしくはリボザイムRNAは
また、代謝障害もしくは神経変性障害に関与しているそ
の他の遺伝子に対しても使用することができる。したが
って、フォーミーウイルスベクターによって発現された
アンチセンスRNAもしくはリボザイムRNAを用い
て、アルツハイマーβ−アミロイドタンパク質前駆体も
しくは神経組織のアセチルコリンエステラーゼをコード
しているmRNAを不活化することは、また治療上価値
をもつものである。
性核酸の代わりに、デコイRNAをコードする外因性核
酸が、治療的に使用される組み換えフォーミーウイルス
ベクター中に挿入されることもある。
示すことができ、例えば、ウイルス感染の治療のために
使用される。
病原ウイルスの複製に不可欠なウイルスタンパク質を、
それらの部分に対して、結合する特殊なヌクレオチド塩
基配列を有する。したがって、デコイRNA配列は、例
えば、TARヌクレオチド塩基配列およびHIV由来の
REV応答要素ヌクレオチド塩基配列(RRE)の多重
コピーを含有し、HIVのtatおよびrev調節タン
パク質と拮抗的に結合し、それによって感染細胞中での
HIVの複製速度を低下させる。これは、治療的抗ウイ
ルス作用を表している。
HIVに関して記載したようにレンチウイルス由来のパ
ッケージング配列を、例えば、5’−LTRおよびga
g配列中への伸長との間のゲノムRNA中に含有してい
る。
めにフォーミーウイルスベクターを用いることは、生体
外もしくは生体内フォーミーウイルスの応用に関して2
種の異なる方法が、適用できる、一般に:導入されるべ
き細胞を含む体細胞のあるサンプルの生体外導入のため
には、これらの細胞は、適切な細胞培養培地中で、一定
培養時間、フォーミーウイルスベクター産生細胞系とと
もに混合培養される。通常、生体外導入に対する培養時
間は、4〜36時間である。混合培養の条件は、標的細
胞の効率的導入を許し、また導入される体細胞に再注射
するかまたは再注入するために、培養後、標的細胞とフ
ォーミーウイルスベクター産生細胞系の分別ができるよ
うに選択される。臨床適用のための体細胞の生体外導入
の技術は、レトロウイルス遺伝子伝達の場合に、十分確
立されている。科学文献に詳細に報告されているそのよ
うな技術は、また、フォーミーウイルスベクターによる
細胞の形質導入にも応用することができる(概観のため
に以下を参照、Richard C. Mulligan:“遺伝子治療の基
礎科学",Science. Vol. 260, 926-932, 1993; W. Frec
h Anderson:“ヒトの遺伝子治療", Science、 Vol. 256,
808-813, 1992; A. Dusty Miller:“ヒトの遺伝子治療
の到来", Nature, Vol. 357, 455-460, 1992)。
胞の生体内導入のために、ml当たり103〜107もし
くはそれ以上のフォーミーウイルスベクター粒子を含む
バッファー水懸濁液が、導入されるべき標的細胞を有す
る組織に注射される。容量1μl〜1mlもしくはそれ
以上の懸濁液からなるフォーミーウイルスベクターが、
生体内で種々の組織に注射することができる。中でも、
それは、骨髄、肝臓、血液、リンパ節、骨格筋、皮膚表
皮組織、皮膚繊維芽組織、脳、胸腺、もしくはその他の
器官である。生体内導入は、ペースト剤もしくはクリー
ム剤の製剤を含有するフォーミーウイルスベクターの局
所投与のような非侵入性フォーミーウイルスベクターに
よって、または吸入用の、エアゾル、泡沫もしくは粉末
製剤によって実施されてもよい。
ーウイルスベクターの産出のために、これらのベクター
粒子のいわゆる偽性タイプが使用できることも、また述
べる必要がある。偽性フォーミーウイルスベクターは、
遺伝的に改変されたパッケージング細胞系によるか、あ
るいは水泡性口内炎ウイルスに似たウイルスまたはエン
ベロープ糖タンパク質様タンパク質を発現している複製
不能HIVもしくはその他のウイルスによって意図的に
感染された生産細胞系を用いることによって、産生され
る。これらの外来のウイルスタンパク質は、そのベクタ
ーの異種構成分をもつエンベロープを形成するように、
フォーミーウイルスベクタータンパク質コート中に取り
入れられる。そのような偽性タイプベクターは、ある種
の応用に対して優位性を発揮する。それらは、パッケー
ジング細胞の上澄液中のフォーミーウイルスベクター粒
子濃度を増加させるために使用できる。それらは、また
フォーミーウイルスベクター粒子の宿主範囲を拡大する
ためにも使用できる。特に、HIVエンベロープタンパ
ク質を保持する偽性フォーミーウイルスベクターは、そ
のベクターをCD4受容体を発現する標的細胞に特異的
に指向させるために、興味が深い。同様に、異種エンベ
ロープタンパク質によって、例えば、標的とするICA
M−1発現細胞に対する肝炎ウイルスタンパク質もしく
はライノウイルスタンパク質を用いる肝細胞類似の他の
細胞に、優先的に向けられた偽性フォーミーウイルスベ
クターは、興味が深い。
ルスベクター中のHIVエンベロープタンパク質類似の
異種タンパク質は、望ましい免疫応答を発揮する。
免疫性疾患の治療に関する発現ポリペプチドのためのフ
ォーミーウイルスベクター 組み換えフォーミーウイルスベクター中の外因性核酸
は、発現ポリペプチドのための1個ないしそれ以上の遺
伝子を包含することがでできる。もしこれらのポリペプ
チドが、そのベクターを導入された標的細胞中で発現さ
れるならば、それらは、トランスドミナントに負に働
き、病原ウイルスの複製速度を減退させ、それ故、抗ウ
イルス作用を有する調節タンパク質となることができ
る。トランスドミナントに負に働く調節タンパク質は、
例えば、ウイルス粒子の構築を妨害するか、またはHI
Vの改変されたtatタンパク質もしくはrevタンパ
ク質を表すタンパク質である。
RNAのTARもしくはRRE配列になお結合するの
で、それらの生物学的機能、すなわち抗転写終結(ta
t機能)またはrevのRNAプロセシング機能は、そ
のタンパク質の非結合部分における変異によってもはや
発現されない。
の抗ウイルスポリペプチドは、ウイルス結合部位におい
て病原ウイルスを取り込むための受容体に類似している
ものである。ウイルスが細胞の受容体に結合するために
重要な病原ウイルスの結合部位に結合するポリペプチド
が、フォーミーウイルスベクターを用いて、生物体にお
いて発現され、分泌され、その結果、細胞中へのウイル
スの取り込みを妨げる。この関係において、HIV g
p120への結合によって、HIVによるヒト細胞の新
規な感染を防ぐCD4ポリペプチド断片を発現するフォ
ーミーウイルスベクターは、治療上有効なものとなろ
う。
ベクターの力を借りて形成されたそのペプチドは、増殖
因子受容体の可溶性部分であってもよく、そして悪性の
細胞増殖へ導きつつある発現された増殖因子を捕捉する
ことにもなる。これらの意味によって、フォーミーウイ
ルスベクターは、抗腫瘍性を発現することになる。
めに使用することもできるであろう。2つの例が、この
関連で述べられる: 1. 免疫抑制の目的で、そして臓器移植拒絶を防ぐた
めに、外因性核酸によって標的組織中に分泌される抗イ
ンターロイキン2抗体を発現するフォーミーウイルスベ
クターが、使用される。
は、標的組織に分泌されるポリペプチドを発現し、その
ポリペプチドは、アセチルコリン受容体のα−サブユニ
ットのペプチド断片を有し、そして重症性筋無力症にか
かっている患者において抗体を結合し、不活化すること
ができる。
いて発現されるその他のポリペプチドは、がん免疫療法
のために、新生物性に形質転換されるが、化学的もしく
は物理的手段によって増殖を妨げられる細胞中の、例え
ば、インターロイキン2のようなリンホカインであって
もよい。この場合には、免疫療法のために使用されるそ
の細胞は、フォーミーウイルスベクターを用いて生体外
で導入される。同様に、がんの免疫療法は、実施例II
に概説したようなフォーミーウイルスベクターによる腫
瘍細胞の生体内形質導入によって実施することもでき
る。
り、標的組織での1種以上のインターフェロンの発現
は、また抗ウイルス治療および/またはがん治療の手段
として考えられる。
またはレンチウイルスもしくは肝炎ウイルスに感染した
細胞は、標的組織において、そのベクターが毒素もしく
は細胞内の病原体によるか、または新生物性に転換され
た細胞の特別な代謝により細胞毒性のポリペプチドに変
換されるその他のポリペプチドを発現させることによっ
て、組み換えフォーミーウイルスベクターを用いて治療
的に処置することができる。フォーミーウイルスベクタ
ーは、リシンAもしくはジフテリア毒素もしくはスタフ
ィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)
エンテロトキシンBもしくはコリシンE、またはその
他の毒素を発現するために構築されてもよい。細胞もし
くは器官に特異的なそのような生産物の発現を確実にす
るために、細胞特異性もしくは器官特異性であるプロモ
ーターの調節下の細胞毒ポリペプチドを形成するフォー
ミーウイルスベクターが、構築されることもある。
細胞中に内生的に発現され得るその他の治療用タンパク
質は、例えば、病原性レンチウイルスもしくは肝炎ウイ
ルスのウイルスプロテアーゼに対するプロテアーゼ阻害
剤である。それらはまた、エラスターゼおよび/または
トリプシン、およびその他のプロテアーゼに対するプロ
テアーゼ阻害剤でもあり、それは、成人呼吸困難症候群
および気腫、およびその他の病状を防ぐことになる。そ
れらはまた、例えば、腫瘍壊死因子(TNF)のような
タンパク質でもよく、それは、フォーミーウイルスベク
ターを用いてがん治療のために使用される。さらに、腫
瘍抑制遺伝子を見落とすことが、フォーミーウイルスベ
クターの力で発現させることもできる。
のさらなる例は、細胞静止性の化学療法剤、又は骨髄を
損なうようなその他の薬剤を用いる腫瘍治療の間に、骨
髄細胞(骨髄幹細胞、CD34−始原細胞およびその他
の造血細胞)を保護する目的で、多剤耐性遺伝子(MD
R)を造血細胞に伝達するために、このベクターを使用
することである。
えのためのフォーミーウイルスベクター 望ましくない遺伝子、例えば、レンチウイルスのプロウ
イルスDNA、増幅されたがん遺伝子、遺伝病を引き起
こす遺伝子、およびその他の遺伝子は、望ましくない遺
伝子に相同であるDNA配列を有する外因性核酸を保持
しているフォーミーウイルスベクターによって不活化す
ることができる。この目的のために、フォーミーウイル
スベクターの外因性核酸が、高頻度で、適切な方法で、
相同組み換えによる対応する細胞遺伝子の破壊へ導くよ
うな方向において選択される。しかしながら、欠陥遺伝
子は、フォーミーウイルスベクターの外因性核酸の、完
全な遺伝子との組み換えによって、遺伝子座においてこ
の手段で修正されることもあり得る。
フォーミーウイルスベクター 例えば、血液凝固因子VIIIもしくはIXにおける欠
損、アデノシンデアミナーゼ欠損、ヘモグロビン異常
症、嚢胞性繊維症、家族性高ステロール血症、デュシェ
ン・筋ジストロフィー、もしくはその他の遺伝病のよう
な遺伝病は、フォーミーウイルスベクターを用いて、体
細胞中へ適切な修正遺伝子を導入することによって治療
することができる。
ミーウイルスベクター 組み換えフォーミーウイルスベクターは、その外因性核
酸が、血圧調節効果をもつポリペプチドを発現させるた
めの1個以上の遺伝子を保持するように構築され得る。
したがって、そのポリペプチドは、例えば、トランスド
ミナントに負に作用する調節心房性ナトリウム利尿ペプ
チドであってもよい。それらは、循環するANP(心房
性ナトリウム利尿ペプチド)もしくはANF(心房性ナ
トリウム利尿因子)に結合し、不活化するためのポリペ
プチドである。これらのポリペプチドは、例えば、抗体
類似タンパク質であるか、または、例えば、ANPもし
くはANF結合受容体の可溶性受容体誘導体である。そ
れらは、数種の例を挙げると、レニンの阻害剤、または
アンジオテンシン変換酵素の阻害剤であってもよい。
性核酸の遺伝子は、また、動脈硬化もしくはその他の心
臓血管疾患の進展を阻止する生産物をコードすることも
できる。これらの生産物は、内皮細胞もしくは平滑筋細
胞の増殖を阻止する物質、例を挙げると、c−mybの
mRNAもしくはTGF−βのmRNAに対するアンチ
センスRNAである。
ターにより生成される治療用生産物は、また、LDL受
容体であってもよい。
EセレクチンもしくはPセレクチンのような粘着タンパ
ク質に対するアンチセンスRNAもしくはリボザイムR
NAを発現するように構築することができる。相補性R
NAによって、選択された粘着タンパク質のmRNAの
翻訳を阻害するほかに、そのフォーミーウイルスベクタ
ーは、また、血液循環中に分泌され、血液細胞間の(例
えば、血小板凝集)、または血液細胞と内皮細胞との相
互作用を、例えば、EセレクチンもしくはPセレクチン
のような粘着タンパク質に選択的に結合することによっ
て阻止するポリペプチドを発現する外因性核酸を保持す
ることもできる。
質の阻止は、血管の病理学的変化および炎症疾患に関し
ての治療原理として重要である。
ーウイルスベクター 組み換えフォーミーウイルスベクターの外因性核酸は、
検出されるべきある物質によって細胞内で活性化され、
そしてそのために、特異的に、しかも増幅可能なシグナ
ルを用いて、その物質を高い感度で検出可能にする遺伝
子もしくは遺伝子断片を保持することもできる。
スアクチベータータンパク質を、生検材料、体液、細胞
系、生産細胞系もしくはその他の細胞から検出すること
は、例を挙げて本明細書で述べることができる。トラン
ス活性可能な遺伝子配列を、例えば、ルシフェラーゼ、
β−ガラクトシダーゼもしくはペルオキシダーゼのよう
な下流のレポーター遺伝子に共役させることによって、
感染の存在を確認できるそのようなトランスアクチベー
タータンパク質が、検査下の細胞内のフォーミーウイル
スベクターによって、感度よく検出できる。
るフォーミーウイルスベクターの構築 感染性分子クローンpHSRV−2(図1および2)
は、pHSRV−1の誘導体である。pHSRV−1
は、ヒト・フォーミーウイルスベクターのcDNAクロ
ーニングおよび組み込まれていないウイルスDNAのク
ローニングによって得られた(A. Rethwilm et al., Ge
ne 59, 19-28 (1987), A. Rethwilm et al.,Nucleic ac
ids Res. 18, 733-738 (1990))。pHSRV−1にお
いては、約500塩基対が、5’LTRのU3領域から
欠失し、約350塩基対が、3’LTRのU3領域から
欠失している(A. Rethwilm et al., 未発表)。pHS
RV−2においては、500塩基対が、両LTRで欠失
している。このことは、pHSRV−1の3’LTRに
おけるAflII/XbaI断片を、5’LTRの対応
する断片により置換することによって容易になされた。
両プラスミドは、感受性細胞へのトランスフェクション
の後、感染性ウイルスを誘発する。図3−8に描かれた
pFOVベクターを得るために、bel−2/bel−
3における欠失が、制限エンドヌクレアーゼAccIお
よびHindIIIによって、pHSRV−2の、それ
ぞれヌクレオチド位置10420および10844の間
に導入された。EcoRV、SmaIおよびNruIに
対する切断部位を有する多重クローニング配列が、pF
OV−1におけるこの欠失中に挿入された。pFOV−
1において、外来のDNA配列は、C−末端を切り取ら
れたBetタンパク質の融合タンパク質として発現され
る。pFOV−2においては、内部リボソームランディ
ングパッド(landing pad)が、AccI/
HindIII欠失中に挿入された。その上、2個の終
止コドンが、bel−2の読み枠中に導入された(G. B
aunach et al., J. Virol. 67, 5411-5418,(1993))。
pFOV−3、pFOV−5およびpFOV−6は、p
FOV−2の誘導体であり、そこには、bel−1読み
枠中のスプライス供与部位(pFOV−3)、bel−
2読み枠のスプライス受容部位(pFOV−5)、また
は両方(pFOV−6)が、変異を受けている。pFO
V−2,pFOV−3,pFOV−5およびpFOV−
6は、これらのベクター中に挿入された外来DNAによ
ってコードされた真のタンパク質を生じる。
性核酸を発現するために(例えば、CAT遺伝子(クロ
ラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ)を発現
するために)引き続いて使用された。
6)は、EcoRI(ヌクレオチド位置9529)およ
びHindIII(ヌクレオチド位置10844)制限
部位の間でプロウイルスDNAを欠失させることにより
作製された。このフォーミーウイルスベクターは、複製
能をもたない。
産 複製能のあるフォーミーウイルスベクター、例えば、p
FOV−1ないしpFOV−3は、細胞系、例えばHE
L299(ATCC CCL137)ヒト胎児性肺繊維
芽細胞、BHK−21(C−13)(ATCC CCL
10)ハムスター腎細胞、CF2TH(ATCC CR
L1430)イヌ胸腺細胞系、MRC5(ATCC C
CL171)ヒト肺細胞系、CHOチャイニーズ・ハム
スター卵巣細胞系、VERO(ATCC CCL81)
アフリカミドリザル腎細胞系、3TS−TK-(ATC
C CCL92)マウス繊維芽細胞系、およびその他の
細胞系、または一次組織培養もしくは感染動物において
増殖させられる。感染性フォーミーウイルスベクター粒
子を含む細胞培養上澄液もしくは感染動物からの液は、
感染させる標的細胞に対して使用できる。
ターは、組み換え的に改変されたパッケージング細胞系
を用いて生産される。その複製能のないフォーミーウイ
ルスベクターは、複製能のあるフォーミーウイルスによ
って感染されない体細胞において、そのベクターの複製
を排除する遺伝子欠失をもっている。bel遺伝子に加
えて、これらの遺伝子欠失は、gag遺伝子領域および
/またはpol遺伝子領域および/またはenv遺伝子
領域を含むことができる。
伝達(例えば、エレクトロポレーションもしくはCaP
O4沈殿)によってパッケージング細胞系中にトランス
フェクションされた1個もしくはそれ以上のフォーミー
ウイルス遺伝子によって産生される。パッケージング細
胞系の特徴は、それが、外因性核酸を包含するベクター
のゲノムRNAを、感染性フォーミーウイルス粒子中に
詰め込むことを可能とするgag、polおよび/また
はenvタンパク質のような1個もしくはそれ以上のフ
ォーミーウイルスタンパク質を発現することである、何
故ならば、これらのタンパク質は、パッケージング細胞
系においてトランスに供給されるからである。
イルスベクター粒子は、安全性の理由からこの方法で生
産される。パッケージング細胞系は、前記細胞系もしく
はその他の適切な細胞系のひとつであり得る。
研究に関して特別な生理学的性質を有する組織培養およ
び動物(細胞および動物モデル)を作出するためのフォ
ーミーウイルスベクター 組織培養(生体外)の細胞、または動物における組織細
胞(生体内)は、そのベクターを用いて、これらの細胞
に特殊な遺伝子の発現を起こさせるために、フォーミー
ウイルスベクターによって形質導入される。これらの方
法によって、特殊な生理学的状態、特殊な代謝効果、ま
たは細胞の特殊な生化学的性質が、生体外もしくは生体
内で作り出される。この方法で改変されたこれらの細胞
は、生理学的、薬理学的、または医学的研究のために大
きな価値をもつことができる。例えば、それらは、生体
外もしくは生体内で、遺伝子の機能を決定するため、ま
たは研究中の活性化合物もしくは薬物の効果を決定する
ために試験される。さらに、そのような導入細胞(その
ベクターによって遺伝的に改変された細胞)は、生体外
細胞試験もしくは生体内動物実験によって、薬物として
さらに開発するために適切な活性化合物(化学合成的も
しくは生物学的に作製された物質)に関する研究(活性
化合物のスクリーニング)において、非常に価値ある助
けとなり得る。具体的な例は、遺伝的に改変された細胞
中のがん遺伝子のがん遺伝子的能力を研究するため、が
ん遺伝子依存性の腫瘍発生を研究するため、そして腫瘍
発生を阻害するための活性に関して生体内で活性化合物
を試験するために、選ばれた動物器官中にc−myc、
ras,bcr−abl,もしくはHIV−tatのよ
うながん遺伝子を伝達すべきそのベクターの使用によっ
て提供される。
系は、HIV−LTR−レポーター遺伝子構成物を保持
するpFOV−4−ベクターを作製するために使用され
る。このベクターは、ヒト一次マクロファージ、神経細
胞およびその他の体細胞に感染する。そのような導入マ
クロファージもしくは他の一次細胞は、実施例VIIに
概説したように、HIV汚染に関して分析されるべきサ
ンプルとの混合培養によって、感受性のHIV検出ため
の診断目的に対して使用することができる。何故なら
ば、狭い宿主領域に限定され、それゆえ、抹消の血液リ
ンパ球サンプルで培養できない臨床関連HIV分離株が
あるからである。
ロファージもしくはその他の細胞は、また、HIVの阻
害物である。さらに、もしpVOF−4のレポーター遺
伝子が、ブドウ球菌エンテロトキシンBもしくはリシン
Aのような潜在的suizide遺伝子、または細胞毒
性産物をコードしているその他の遺伝子によって置換さ
れるならば、pVOF−4は、そのような一次体細胞の
HIV感染において活性化されるsuizide遺伝子
のスクリーニングに使用される。
クチン)は、フォーミーウイルスベクターを用いて種々
の動物の体細胞において発現され、それによって、動物
(例えば、マウス)において抗炎症性、セレクチン結合
性の、活性化合物のスクリーニングを可能とする。これ
らには、動物においてヒトのタンパク質を用いて、フォ
ーミーウイルスベクターの力で実現されつつある“分子
薬理学”に関する2例の試験モデルがある。
ある。
を有する1個ないしそれ以上の遺伝子産物を発現するた
めの外因性核酸を含むフォーミーウイルスベクター。
クターであって、そのフォーミーウイルスベクターは、
外因性核酸を挿入するためのbel−1、bel−2お
よび/またはbel−3遺伝子の領域に欠失を有するヒ
ト・フォーミーウイルス(ヒト・スプーマレトロウイル
スHSRV−1もしくはHSRV−2の感染性もしくは
非感染性DNA)の誘導体であることを特徴とする。
イルスベクターであって、その外因性核酸は、液性およ
び/または細胞性免疫化に関するポリペプチドを発現す
るための1個の完全な遺伝子、または数個の完全な遺伝
子を含むことを特徴とする。
イルスベクターであって、その外因性核酸は、アンチセ
ンスRNA、リボザイムRNAもしくはデコイRNAを
発現するための遺伝子を含むことを特徴とする。
イルスベクターであって、その外因性核酸は、腫瘍形成
を阻害するための遺伝子産物を発現することを特徴とす
る。
イルスベクターであって、その外因性核酸は、標的生物
において遺伝子欠損を償う遺伝子産物を発現することを
特徴とする。
瘍、ウイルス性疾患もしくは遺伝子欠損を治療するため
の上記1ないし6記載のフォーミーウイルスベクター。
イルスベクターであって、それは、診断的使用のための
産物を発現する外因性核酸配列を含んでいる。
イルスベクターを含有する医薬品。
イルスベクターを産生するための、真核生物細胞系もし
くは組み換え真核生物細胞系。
SRV−2の感染性プロウイルスDNA)、およびAc
cIおよびHindIII切断部位(それぞれ、ヌクレ
オチド位置10420および10844)における欠失
によって、それから作出されるフォーミーウイルスベク
ターpFOV−1、pFOV−2およびpFOV−3の
ゲノム構造の図式表示。複製不能ベクターpFOV−4
は、EcoRI(ヌクレオチド位置9529)およびH
indIII(ヌクレオチド位置10844)の間に、
より大きい欠失を有する。多重クローニング部位、例え
ば、ここに示されたEcoRV、SmaIおよびNru
I切断部位は、その欠失の場所に挿入された。
る一方の部分を示す図である。
限酵素切断地図。
限酵素切断地図。
限酵素切断地図。
限酵素切断地図。
限酵素切断地図。
限酵素切断地図。
Claims (3)
- 【請求項1】 治療的、免疫的もしくは診断的効果を有
する1個ないしそれ以上の遺伝子産物を発現するための
外因性核酸を含むフォーミーウイルスベクター。 - 【請求項2】 請求項1記載のフォーミーウイルスベク
ターを含有する医薬品。 - 【請求項3】 請求項1ないし2記載のフォーミーウイ
ルスベクターを産生するための、真核生物細胞系もしく
は組み換え真核生物細胞系。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE4318387A DE4318387A1 (de) | 1993-06-03 | 1993-06-03 | Rekombinante Foamy Virus Vektoren für medizinische und diagnostische Anwendungen sowie Verfahren zur Herstellung von rekombinanten Foamy Virus Vektoren |
DE4318387.5 | 1993-06-03 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006343352A Division JP2007082562A (ja) | 1993-06-03 | 2006-12-20 | 医薬的および診断的使用のための組み換えフオーミーウイルスベクター、および組み換えフオーミーウイルスベクターの作製方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH06343477A true JPH06343477A (ja) | 1994-12-20 |
Family
ID=6489499
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP6137880A Pending JPH06343477A (ja) | 1993-06-03 | 1994-05-30 | 医薬的および診断的使用のための組み換えフオーミーウイルスベクター、および組み換えフオーミーウイルスベクターの作製方法 |
JP2006343352A Pending JP2007082562A (ja) | 1993-06-03 | 2006-12-20 | 医薬的および診断的使用のための組み換えフオーミーウイルスベクター、および組み換えフオーミーウイルスベクターの作製方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006343352A Pending JP2007082562A (ja) | 1993-06-03 | 2006-12-20 | 医薬的および診断的使用のための組み換えフオーミーウイルスベクター、および組み換えフオーミーウイルスベクターの作製方法 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5646032A (ja) |
EP (1) | EP0632129B1 (ja) |
JP (2) | JPH06343477A (ja) |
AT (1) | ATE237693T1 (ja) |
CA (1) | CA2124769C (ja) |
DE (2) | DE4318387A1 (ja) |
DK (1) | DK0632129T3 (ja) |
ES (1) | ES2196014T3 (ja) |
PT (1) | PT632129E (ja) |
SI (1) | SI0632129T1 (ja) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2707091B1 (fr) | 1993-06-30 | 1997-04-04 | Cohen Haguenauer Odile | Vecteur rétroviral pour le transfert et l'expression de gènes dans des cellules eucaryotes. |
FR2727429B1 (fr) * | 1994-11-30 | 1997-11-28 | Haguenauer Odile Cohen | Lignees d'encapsidation et vecteurs d'expression pour la transcomplementation de vecteurs retroviraux defectifs |
DE19503082A1 (de) * | 1995-02-01 | 1996-08-08 | Univ Ludwigs Albert | Gegenstand und Verfahren zur bevorzugt transienten Expression und möglichen Translation spezifischer RNA im cytoplasmatischen Bereich höherer eukaryontischer Zellen |
US5888767A (en) * | 1996-11-27 | 1999-03-30 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Method of using a conditionally replicating viral vector to express a gene |
CA2279675A1 (en) | 1995-12-15 | 1997-06-16 | Enzo Therapeutics, Inc. | Property effecting and/or property exhibiting constructs for localizing a nucleic acid construct within a cell for therapeutic and diagnostic uses |
US6492165B1 (en) | 1997-02-12 | 2002-12-10 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Retrovirus isolated from humans |
US5882912A (en) * | 1997-02-12 | 1999-03-16 | Center For Disease Control And Prevention | Retrovirus isolated from humans |
US5929222A (en) * | 1997-03-14 | 1999-07-27 | Transgene S.A. | Expression of a foamy virus envelope protein |
AU1325300A (en) | 1998-10-27 | 2000-05-15 | Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The | New retrovirus isolated from humans |
DE19858441C2 (de) * | 1998-12-17 | 2001-02-15 | Deutsches Krebsforsch | FV-Vektoren zur Expression von Fremdgenen in Säugern und deren Verwendung |
US6333194B1 (en) * | 1999-01-19 | 2001-12-25 | The Children's Hospital Of Philadelphia | Hydrogel compositions for controlled delivery of virus vectors and methods of use thereof |
US6800475B1 (en) | 1999-06-14 | 2004-10-05 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Isolation of a human retrovirus |
EP1572942A2 (en) * | 2002-06-27 | 2005-09-14 | The Government of the USA represented by The Department of Health and Human Services Centers for Disease Control & Prevention | Live replicating spumavirus vector |
AU2003268531A1 (en) | 2002-09-06 | 2004-03-29 | University Of South Florida | Materials and methods for treatment of allergic diseases |
US20080214437A1 (en) * | 2002-09-06 | 2008-09-04 | Mohapatra Shyam S | Methods and compositions for reducing activity of the atrial natriuretic peptide receptor and for treatment of diseases |
WO2005094420A2 (en) * | 2004-02-17 | 2005-10-13 | University Of South Florida | Materials and methods for treatment of inflammatory and cell proliferation disorders |
US20090202488A1 (en) * | 2004-06-04 | 2009-08-13 | Deutsches Krebsforschungczentrum | Use Of The Foamy Virus Bet Protein For Inactivating APOBEC |
WO2007127487A2 (en) * | 2006-04-28 | 2007-11-08 | University Of South Florida | Materials and methods for reducing inflammation by inhibition of the atrial natriuretic peptide receptor |
US10184942B2 (en) | 2011-03-17 | 2019-01-22 | University Of South Florida | Natriuretic peptide receptor as a biomarker for diagnosis and prognosis of cancer |
WO2019056015A2 (en) * | 2017-09-18 | 2019-03-21 | Children's Hospital Medical Center | STRONG ISOLATOR AND ITS USES IN GENE ADMINISTRATION |
-
1993
- 1993-06-03 DE DE4318387A patent/DE4318387A1/de not_active Withdrawn
-
1994
- 1994-05-24 DK DK94107918T patent/DK0632129T3/da active
- 1994-05-24 SI SI9430447T patent/SI0632129T1/xx unknown
- 1994-05-24 EP EP94107918A patent/EP0632129B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-24 DE DE69432500T patent/DE69432500T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-24 PT PT94107918T patent/PT632129E/pt unknown
- 1994-05-24 ES ES94107918T patent/ES2196014T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-24 AT AT94107918T patent/ATE237693T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-05-30 JP JP6137880A patent/JPH06343477A/ja active Pending
- 1994-05-31 CA CA002124769A patent/CA2124769C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-11-28 US US08/345,278 patent/US5646032A/en not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-12-20 JP JP2006343352A patent/JP2007082562A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ATE237693T1 (de) | 2003-05-15 |
DE4318387A1 (de) | 1994-12-08 |
US5646032A (en) | 1997-07-08 |
DE69432500T2 (de) | 2003-11-20 |
ES2196014T3 (es) | 2003-12-16 |
JP2007082562A (ja) | 2007-04-05 |
DK0632129T3 (da) | 2003-08-04 |
SI0632129T1 (en) | 2003-08-31 |
EP0632129B1 (en) | 2003-04-16 |
EP0632129A1 (en) | 1995-01-04 |
CA2124769A1 (en) | 1994-12-04 |
DE69432500D1 (de) | 2003-05-22 |
PT632129E (pt) | 2003-08-29 |
CA2124769C (en) | 2007-07-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2007082562A (ja) | 医薬的および診断的使用のための組み換えフオーミーウイルスベクター、および組み換えフオーミーウイルスベクターの作製方法 | |
US4797368A (en) | Adeno-associated virus as eukaryotic expression vector | |
EP0704534B1 (en) | Recombinant DNA viral vector for transfecting animal cells | |
JP3343357B2 (ja) | レトロウイルスによる標的細胞への遺伝子導入方法 | |
US5686278A (en) | Methods for enhanced retrovirus-mediated gene transfer | |
JP2726641B2 (ja) | 形質転換脊椎動物細胞の製造方法およびその細胞 | |
JP2837407B2 (ja) | 生物学的に活性なpdgf類似因子の真核生物細胞内での発現 | |
Perkins et al. | Design of a retrovirus-derived vector for expression and transduction of exogenous genes in mammalian cells | |
EP0927263A1 (en) | Recombinase-mediated generation of adenoviral vectors | |
WO1997025446A9 (en) | Recombinase-mediated generation of adenoviral vectors | |
JP2002510199A (ja) | レンチウイルスをベースにした遺伝子転移ベクター | |
JP2002537844A (ja) | ヘルパーウイルス無しで安定な組換えインフルエンザウイルス | |
US4599308A (en) | Protein from SV40 recombinants | |
JP4214239B2 (ja) | 二機能性レトロウイルス/アデノウイルス系 | |
JP2000514652A (ja) | 産生能力の高いカプシド化系 | |
AU753809B2 (en) | Recombinant adenoviral vectors comprising a splicing sequence | |
US5576201A (en) | Retroviral vector particles for transducing non-proliferating cells | |
WO2024000223A1 (zh) | 经改造的病毒包膜蛋白及其用途 | |
CN114480505B (zh) | 间充质干细胞及其抗炎应用 | |
JP2003508057A (ja) | 改変アデノウイルスファイバーおよび用途 | |
JP2001506854A (ja) | Ehv−1ベクター | |
US5580766A (en) | Retroviral vector particles for transducing non-proliferating cells | |
EP0162319B1 (en) | Method of joining heterologous genes | |
Bold et al. | Biologically active mutants with deletions in the v-mos oncogene assayed with retroviral vectors | |
CN114934070A (zh) | 间充质干细胞及其抗炎应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050510 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20050810 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20050815 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20051110 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20060822 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20061220 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070206 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20070209 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20070309 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20080328 |