JPH06294797A

JPH06294797A - デルタアミノレブリン酸類の微量定量法

Info

Publication number: JPH06294797A
Application number: JP12223792A
Authority: JP
Inventors: Tetsuichi Shibata; 柴田徹一; Mitsuhiro Nanzaki; 南崎光宏; Takayuki Tezuka; 手塚隆之; Kazuyuki Ozaki; 尾崎和行
Original assignee: N O K Ii G & G Oputo Electron; N O K Ii G & G Oputo Electron Kk
Current assignee: N O K Ii G & G Oputo Electron; N O K Ii G & G Oputo Electron Kk
Priority date: 1992-05-14
Filing date: 1992-05-14
Publication date: 1994-10-21

Abstract

(57)【要約】【目的】全血または部分血または尿等の検体中の微量
のデルタアミノレブリン酸類をフローインジェクション
法で定量測定するデルタアミノレブリン酸類の微量定量
法を提供する。【構成】ポンプ２で緩衝液１を連続的に送液し、この
送液された緩衝液１にオートサンプラー３によって所定
のタイミングでデルタアミノレブリン酸などのα−アミ
ノケトン類が含有され、かつ、あらかじめβ−ジケトン
またはβ−ケトエステル類が添加された検体（Ａ）と蒸
留水を同じ比率添加された検体（Ｂ）を別々に注入し、
この後、所定の温度となっている恒温槽４内の加熱縮合
管５で加熱縮合し、このものを混合ジョイント９で、他
のポンプ６で送られるエールリッヒ試薬７と混合したの
ち発色管８で色素化合物に変換し、こののち、検出部１
０でデルタアミノレブリン酸類の含有量を検出し、さら
にＡからＢの含有量を差し引くようにしたことを特徴と
するデルタアミノレブリン酸類の微量定量法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明はデルタアミノレブリン
酸類の微量定量法に関し、特に、微量のデルタアミノレ
ブリン酸類を迅速に定量測定することができるデルタア
ミノレブリン酸類の微量定量法に関するものである。

【０００２】

【従来技術および解決しようとする課題】環境汚染によ
る鉛中毒、たとえば、自動車に用いる鉛電池工場の従業
員における鉛中毒に代表されるような鉛中毒では、血中
や尿中の鉛含有量と並んで、血中や尿中のデルタアミノ
レブリン酸の含有量が指標として重要視されている。そ
して、近年、労働環境整備の観点から従業員の健康管理
上この指標を有効に活用して鉛中毒を初期の段階で防ぐ
ため、尿中デルタアミノレブリン酸の測定を労働省が義
務づけたことにより、鉛中毒初期の尿中のデルタアミノ
レブリン酸含有量を測定する感度の良い微量迅速定量法
が求められている。

【０００３】現在用いられている代表的な定量法として
は、１９５６年に開発されたマウツェラル／グラニック
（Ｍａｕｚｅｒａｌｌ／Ｇｒａｎｉｃｋ）法である。こ
のマウツェラル／グラニック法は、２種類のイオン交換
樹脂で分離精製したデルタアミノレブリン酸類とβ−ジ
ケトンまたはβ−ケトエステル類とを熱縮合し、これに
エールリッヒ試薬を作用させ、比色定量したものであ
る。しかし、この方法の問題点は、複数のアミノケトン
類が分離されないまま定量されてしまうということと、
分離操作など一検体当たりの分析時間が長すぎるという
ことであった。その他、その変動係数（ＣＶ値）は原法
では２．７〜１３％で、ベルリン（Ｂｅｒｌｉｎ）らの
報告では５．６〜３２．２％と誤差が幅広く、個人の手
技や施設の違いで極端に異なった値が出てくるという問
題点も有していた。

【０００４】１９６７年にグラベッキ（Ｇｒａｂｅｃｋ
ｉ）は分離操作を除きアセチルアセトン無添加のブラン
ク｛主にポルフォビリノーゲン（ＰＢＧ）｝を差し引い
て簡素化したが、加熱縮合反応と比色定量操作を用手法
でこなすには一人で一日数十検体までで、処理能力にも
問題があった。

【０００５】また、１９７２年にルウェリー（Ｌｏｕｗ
ｅｒｙｓ）らは、ペリスタ型の比例ポンプ（ｐｒｏｐｏ
ｒｔｉｏｎｉｎｇｐｕｍｐ）に１１本のシリコーンチ
ューブを接続して自動分析器を試作したが、２０μｇ／
ｍｌ以下の薄い濃度の尿では測定できないので既知のデ
ルタアミノレブリン酸を添加した５点を測定して、これ
を外挿して原液中の含量を算出した。この自動化は１９
７４年にビアンコ（Ｂｉａｎｃｏ）らが、また、１９７
５年にセキ（Ｓｅｋｉ）らがテクニコンのオートアナラ
イザーに組み込んだ。そして、１９８１年にバルデェイ
ック−アオウアディ（Ｂａｌｄｕｙｃｋ−Ａｏｕａｄ
ｉ）らが更に６μＭ（１μｇ／ｍｌ）まで感度を上げた
と報告したが追試では５μｇ／ｍｌでも再現性が困難と
されている。

【０００６】一方、１９６０年代からクロマトグラフィ
ー｛ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）と、高速液体クロ
マトグラフィー（ＨＰＬＣ）｝と、これに質量分析器と
連動など、さらにポストラベルやプレラベル技術ととも
に多くの研究者がこれらアミノケトン類の精密な分析に
挑戦した結果、デルタアミノレブリン酸の尿中含有量が
５μｇ／ｍｌ以上では殆どがデルタアミノレブリン酸で
あり、その以下の濃度では検体中にアミノアセトンの混
入が確かめられた。このアミノアセトンも鉛中毒で増加
するので鉛中毒の指標としては大きな間違いにはならな
いとされてきた。

【０００７】但し、これらクロマトグラフィーの文献に
おける１検体当たりの分析時間は、少なくても２０分、
長くて１時間以上を要していたので健康管理など多数検
体の処理には到底実用化は無理であった。

【０００８】以上述べた文献上の知見から次のような見
通しが得られた。すなわち、エールリッヒ試薬でβ−ジ
ケトンやβ−ケトエステル類なしでも発色するポルフォ
ビリノーゲン（ＰＢＧ）類に基づく吸光度をブランクと
して測定しておいて、一方、β−ジケトンやβ−ケトエ
ステル類を添加して吸光度を測定し、この吸光度から先
のブランクの吸光度を引けば鉛中毒の指標としてのデル
タアミノレブリン酸類の量が算出可能と推定できた。

【０００９】この発明の目的は、少なくとも一検体当た
りの測定時間を３分以下とするとともに、０．５μｇ／
ｍｌ以下を測定限界に設定でき、変動係数（ＣＶ値）を
約５％以下の測定精度とすることができ、しかも、安価
に測定することのできるデルタアミノレブリン酸類の微
量定量法を提供することにある。

【００１０】

【問題点を解決するための手段】上記の目的を達成する
ためにこの発明は、デルタアミノレブリン酸などのα−
アミノケトン類、およびβ−ジケトンまたはβ−ケトエ
ステル類からなる熱縮合成績体（ピロール誘導体）と、
エールリッヒ試薬との発色色素による比色定量法をフロ
ーインジェクション分析法で行うようにした。

【００１１】また、この発明は、全血または部分血また
は尿である検体中のデルタアミノレブリン酸などのα−
アミノケトン類を定量測定するデルタアミノレブリン酸
類の微量定量法であって、ポンプで緩衝液を連続的に送
液し、この送液された緩衝液にオートサンプラーによっ
て所定のタイミングでデルタアミノレブリン酸などのα
−アミノケトン類が含有し、かつ、あらかじめβ−ジケ
トンまたはβ−ケトエステル類が添加された検体を注入
し、この後、所定の温度となっている恒温槽内の加熱縮
合管で加熱縮合し、このものを混合ジョイントで、他の
ポンプで送られるエールリッヒ試薬と混合したのち発色
管で色素化合物に変換し、こののち、検出部でデルタア
ミノレブリン酸類を検出するようにした。この場合、β
−ジケトンまたはβ−ケトエステル類は、好ましくはア
セチルアセトンである。

【００１２】また、この発明は、全血または部分血また
は尿である検体中のデルタアミノレブリン酸などのα−
アミノケトン類を定量測定するデルタアミノレブリン酸
類の微量定量法であって、ポンプで緩衝液を連続的に送
液し、この送液された緩衝液にオートサンプラーによっ
て所定のタイミングでデルタアミノレブリン酸などのα
−アミノケトン類が含有し、かつ、あらかじめβ−ジケ
トンまたはβ−ケトエステル類が添加された検体を注入
し、この後、所定の温度となっている恒温槽内の加熱縮
合管で加熱縮合し、このものを混合ジョイントで、他の
ポンプで送られるエールリッヒ試薬と混合したのち発色
管で色素化合物に変換し、こののち、バックプレッシャ
ーが作用されている検出部でデルタアミノレブリン酸類
を検出するようにした。この場合、前記恒温槽の温度を
１００℃〜１４０℃とした。

【００１３】

【作用】この発明は上記の手段を採用したことにより、
検体中のデルタアミノレブリン酸類はβ−ジケトンまた
はβ−ケトエステル類が混入した状態で緩衝液とともに
所定の温度となっている加熱縮合管に送られ、この加熱
縮合管で加熱縮合され、送液されるエールリッヒ試薬と
混合ジョイントで混合されて発色管で発色され、このの
ち、検出部でデルタアミノレブリン酸類が検出されるこ
とになる。

【００１４】

【実施例】以下、図面に示すこの発明の実施例について
説明する。図１および図２にはこの発明によるデルタア
ミノレブリン酸類の微量定量法を実施するための装置が
示されている。

【００１５】この装置において、熱縮合用の緩衝液（キ
ャリアー液）１はポンプ２によってオートサンプラー３
に送られ、このオートサンプラー３において試料（検
体）が自動注入される。

【００１６】また、試料が自動注入された緩衝液１はさ
らにヒーターを有する油浴またはアルミブロック恒温槽
４に送られ、この油浴またはアルミブロック恒温槽４の
内部の加熱縮合管５で加熱縮合反応される。

【００１７】一方、ポンプ６によって送られるエールリ
ッヒ試薬７は発色管８に至る過程で混合ジョイント９に
おいて前記加熱縮合反応された緩衝液１に混入され、こ
の後、検出器１０である比色定量装置で定量分析され、
分析した結果がレコーダに、またはＡ／Ｄコンバーター
１２を介してコンピューターに入力され、さらに、コン
ピューターの出力は前記オートサンプラー３に試料を自
動注入する信号に利用されるようになっている。

【００１８】また、測定後の廃液は前記検出器１０から
廃液タンク１３に排出されるようになっており、前記加
熱縮合管５を１００℃以上に加熱する場合はＨＰＬＣ
（液体クロマトグラフィ）用のバックプレッシャーチュ
ーブ１１を前記検出器１０と廃液タンク１３との間に接
続して気泡が検出器１０に混入することで生じるノイズ
を防止するようにした。

【００１９】上記が装置の概略であり、以下、さらに詳
細に説明する。まず、熱縮合用の緩衝液（キャリアー
液）１を液送するためのポンプ２としてマイクロボリュ
ーム化したダブルプランジャー型液送ポンプを使用して
いる。

【００２０】熱縮合用の緩衝液１は、酢酸／酢酸ソーダ
緩衝液の他に弱酸性ばかりでなく中性や弱塩基性でも良
く、広い範囲で縮合は可能である。

【００２１】検体に添加される縮合試薬のβ−ジケトン
やβ−ケトエステル類は、それぞれアセチルアセトンや
アセト酢酸メチルエステルまたはアセト酢酸エチルエス
テルを用いたが、本来検体中に存在している阻害物質の
値を検知するために縮合試薬が無い状態、すなわち、ブ
ランクで測定する必要があり、このブランクの測定を配
慮して検体の中に１０％添加した。

【００２２】熱縮合反応を行うヒーターを有する恒温槽
４は、油浴またはアルミブロック型としたので１００℃
〜１４０℃の間の安定性は±０．１℃となって、加熱と
ともに測定感度も上昇したが、測定者の安全等をも考慮
して上記温度範囲で行うのが適当である。

【００２３】一方、ポンプ６で送液されるエールリッヒ
試薬７は、一般的にはパラ・ジメチルアミノベンズアル
デヒドの強酸溶液を言い、過塩素酸、塩酸、および硫酸
を用いるが、この発明においては界面活性剤｛ポリエチ
レングリコールパラ・イソオクチルフェニールエーテル
（トリトンｘ−１００ローム・アンド・ハース）（Ｒ
ｏｈｍ＆Ｈａａｓ）製｝を用いた。

【００２４】前記検出器１０の波長を決定するために、
検体よりも高濃度のデルタアミノレブリン酸の標準サン
プル（８０μｇ）にβ−ジケトンまたはβ−ケトエステ
ルと緩衝液を添加して１ｍｌとし、これを加熱縮合し、
これに等量のエールリッヒ試薬を加えて発色させ、その
吸収波長と、その生成と、減衰曲線とを描いてその時定
数を求めた（図３および図４参照）。

【００２５】一方、前記ブランクの測定用としてポルフ
ォビリノーゲンの標準サンプル（８０μｇ／ｍｌ）に同
じく等量のエールリッヒ試薬を加え、同様の吸収波長
と、その生成と、減衰曲線とを描き、同様に時定数を求
めた（図５および図６参照）。

【００２６】前記オートサンプラー３で自動注入する検
体の注入量は２０μｌ〜１ｍｌまでとして検体の濃度に
対応できるようにした。

【００２７】なお、検体の注入間隔はパーソナルコンピ
ューターと連結し、吸光度測定の検体番号との対応を付
けて一覧表に打ち出せるようなプログラムを作成した。

【００２８】前記検出器１０における吸光度はＡ／Ｄ変
換器１２を介してパーソナルコンピューターに送られ、
画面上で各検体番号毎のピークをリアルタイム表示し、
同時に演算し、吸収面積（μｍ2 ）、吸光度（高さ；μ
ｍ）を求め、その他データ処理を行うようにした。

【００２９】また、各機器を０．２５〜１．５ｍｍのス
テンレスチューブ、またはピーク（ＰＥＥＫ）チューブ
で連結した。接合部の混合ジョイント９としては通常の
ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ）用の二方混合器
を用いた。前記加熱縮合管５は１０ｍ〜４０ｍ、発色管
８は２ｍ〜１５ｍの範囲での条件を検討した。

【００３０】なお、前記したように検出器１０に設定す
る吸収波長と発色管の長さとを決定するための具体的な
測定は用手法で以下のように行った。すなわち、デルタ
アミノレブリン酸（δ−ＡＬＡ）８０μｇにアセチルア
セトンを１０％含む緩衝液を１ｍｌ加え、沸騰水浴上で
２０分加熱縮合し、これにエールリッヒ試薬を１ｍｌ混
合し、直ちに吸収曲線｛１０倍希釈を図３に示す（極大
波長５５５ｎｍ、ε＝１．８５４×１０4 ）｝と、原液
の発色（減衰）曲線を描き、その時定数を求めた（図
４）。

【００３１】この発色物質は１時間に１３．５％減衰し
た。同時に尿中含量測定の際、ブランクとして測定され
るポルフォビリノーゲンを８０μｇに上で述べたのと同
様にアセチルアセトンを１０％含む緩衝液を１ｍｌ加
え、沸騰水浴上で２０分加熱縮合し、これにエールリッ
ヒ試薬を１ｍｌ混合し、直ちに吸収曲線｛１０倍希釈を
図５に示す（極大波長５５６ｎｍ、ε＝１．４４４×１
０4 ）｝と、発色（減衰）曲線とを描き、その時定数を
求めた（図６）。この場合は減衰が早く１時間に４９．
７％も減衰していた。

【００３２】したがって、上記のことを参照して前記検
出器１０に設定する吸収波長と発色管８の長さとを決定
した。

【００３３】〔実施例−１〕緩衝液１に酢酸／酢酸ナト
リウム（０．１Ｍ、ｐＨ４．６）を用い、ダブルプラン
ジャー型液送ポンプ２（島津製ＬＣ−９Ａ）で２．０
０ｍｌ／ｍｉｎの流速で送液し、オートサンプラー３
（協和精密製ＫＭＴ−２００ＦＩＡ）でサンプル溶液
（尿０．４５ｍｌ＋アセチルアセトン０．５ｍｌ）を５
０μｌ注入し、加熱縮合管５は内径０．８ｍｍのステン
レスチューブを４０ｍ巻いてまたは内径０．７５ｍｍの
ＰＥＥＫチューブ２５ｍを巻いてシリコン油浴の恒温槽
４中に浸し温度を１００±０．０１℃に設定した。

【００３４】一方、エールリッヒ試薬７として、パラ・
ジメチルアミノベンズアルデヒドを１０２．６ｇと、２
０％トリトンＸ−１００を５００ｍｌと、２０％硫酸水
溶液を５００ｍｌとの混合溶液またはその４倍希釈液を
０．５μｍの滅菌フィルタで濾過したものを使用し、ダ
ブルプランジャー型液送ポンプ６（島津製ＬＣ−９
Ａ）で２．００ｍｌ／ｍｉｎの流速で送液して、加熱縮
合管５で１００±０．０１℃で加熱縮合した緩衝液１と
混合ジョイント９において混合した。

【００３５】また、混合発色には、ステンレス（０．８
ｍｍ）またはＰＥＥＫチューブ（０．７５ｍｍ）の発色
管８を５ｍ用いて検出器１０に接続し、検出器１０で設
定波長を５５５ｎｍで検出した。そして、３分間隔で２
００検体を測定すると約１０時間で完了したので、１日
２回自動運転して４００検体を処理できた。

【００３６】さらに、濃度２．５μｇ／ｍｌ、５μｇ／
ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍ
ｌ、８０μｇ／ｍｌで、各３回測定した結果、変動係数
は、それぞれ、９．８９％、６．０５％、９．６０％、
０．６４％、３．２６％、３．７１％となり、さらに、
検量線の相関係数はｒ＝０．９９７８であった。

【００３７】〔実施例−２〕実施例−１と同様に、ダブ
ルプランジャー型液送ポンプ２（島津製ＬＣ−９Ａ）
で酢酸ナトリウム（０．１Ｍ、ｐＨ７．８）を、ダブル
プランジャー型液送ポンプ６（島津製ＬＣ−９Ａ）で
エーリッヒ試薬をそれぞれ送液した。

【００３８】オートサンプラー３（ＧＩＬＳＯＮＭｏ
ｄｅｌ２０１）でサンプル溶液（デルタアミノレブリ
ン酸標準液４５μｌ＋アセチルアセトン５μｌ）を注入
し、加熱縮合管５を内径０．８ｍｍのステンレスチュー
ブまたはＰＥＥＫチューブ２０ｍをアルミブロック製の
恒温槽４に入れ、温度を１２０℃に設定した。

【００３９】ダブルプランジャー型液送ポンプ２、６の
流量はそれぞれ１．５ｍｌ／ｍｉｎである。

【００４０】発色管８には内径０．７５ｍｍ、長さ６ｍ
のピーク（ＰＥＥＫ）チューブを用い、エーリッヒ試薬
を混合して発色した試料は検出器１０（島津製ＬＣ−９
ＡＶ）で上記したような方法で決定した設定波長５６０
ｎｍで検出した。

【００４１】そして、図７に示すように、濃度２．５μ
ｇ／ｍｌ、５μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌで、各３回測
定を行った結果、相関係数ｒ＝０．９９９７という非常
に良いリニアリティが得られた。また、ＣＶ値は２％以
下と良好であった。１検体あたり２分で測定できたの
で、１日あたり７００検体の処理が可能になった。

【００４２】〔参考例−１〕濃度２．５μｇ／ｍｌ、
５．０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌのデルタアミノレブ
リン酸溶液（含１０％アセチルアセトン）のアセチルア
セトンとの混合時間を変化させた。

【００４３】この試料を実施例−２の方法で測定した結
果、４０℃で３時間、７０℃で１時間または９５℃で１
５分混合させた試料では、吸光度の変化はなく安定した
測定が期待できる結果となった（図８および図９参
照）。

【００４４】〔参考例−２〕参考例−１の測定で加熱縮
合管５を収納したアルミブロック製の恒温槽４の温度を
１００℃〜１４０℃までの範囲で１０℃おきに変えて吸
光度の変化を見た。濃度を５μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍ
ｌ、２０μｇ／ｍｌで行ったが、いずれも温度が高い時
ほど吸光度が大きくなる傾向が出た（図１０）が、装置
および物質の安定性から反応温度は１２０℃が好まし
い。

【００４５】上記のように従来使用されていた測定法と
の相関性、再現性そしてデルタアミノレブリン酸類の測
定法として、アセチルアセトン添加の有無の差をパーソ
ナルコンピューター上で算出して求めることができる。

【００４６】なお、実施例−１、実施例−２において
は、サンプル溶液の中に、β−ジケトンまたはβ−ケト
エステル類であるアセチルアセトンを注入し、加熱後こ
れをオートサンプラーで緩衝液の中に混入したが、あら
かじめ、緩衝液にアセチルアセトンを添加注入し、この
緩衝液の中にオートランプラーでサンプル溶液を混入し
ても良いものである。

【００４７】

【発明の効果】この発明は前記のようなので検体である
血中または尿中のデルタアミノレブリン酸類の微量定量
測定を精度良く行うことができ、しかも、従来のものと
比較して検出限界を小さくできるとともに、変動係数を
小さくして測定誤差を少なくできる。さらに、測定時間
を短くすることができるので１日の測定検体数を大幅に
多くすることができるので測定に要するランニングコス
トを低減することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】この発明によるデルタアミノレブリン酸類の微
量定量法を実施するための装置を示す図である。

【図２】この発明によるデルタアミノレブリン酸類の微
量定量法を説明するための図である。

【図３】デルタアミノレブリン酸を用手法で発色させ測
定した時の吸収曲線を示す図である。

【図４】デルタアミノレブリン酸を用手法で発色し測定
した時の５６０ｎｍに於ける吸光度の経時変化を示す図
である。

【図５】ブランクとして使用するポリフォビリノーゲン
の吸収曲線を示す図である。

【図６】ブランクとして使用するポリフォビリノーゲン
の発色後、５６０ｎｍに於ける吸光度の経時変化を示す
図である。

【図７】実施例−２で求められたデルタアミノレブリン
酸濃度と吸光度との関係を示す図である。

【図８】異なる濃度及び温度でのデルタアミノレブリン
酸とアセチルアセトンとの混合時間と吸光度との関係を
示す図である。

【図９】デルタアミノレブリン酸−アセチルアセトン反
応、およびデルタアミノレブリン酸−アセト酢酸メチル
反応における混合時間と吸光度との関係を示す図であ
る。

【図１０】異なる濃度のデルタアミノレブリン酸の加熱
温度と吸光度との関係を示す図である。

【符号の説明】

１……緩衝液２、６……ポンプ３……オートサンプラー４……油浴またはアルミブロックの恒温槽５……加熱縮合管７……エールリッヒ試薬８……発色管９……混合ジョイント１０……検出器１１……バックプレッシャーチューブ１２……Ａ／Ｄコンバータ１３……廃液タンク

【手続補正書】

【提出日】平成５年４月８日

【手続補正２】

【補正対象書類名】図面

【補正対象項目名】図１０

【補正方法】変更

【補正内容】

【図１０】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者南崎光宏神奈川県藤沢市辻堂新町４ー３ー１エヌオーケーイージーアンドジーオプトエレクトロニクス株式会社内 (72)発明者手塚隆之神奈川県藤沢市辻堂新町４ー３ー１エヌオーケーイージーアンドジーオプトエレクトロニクス株式会社内 (72)発明者尾崎和行神奈川県藤沢市辻堂新町４ー３ー１エヌオーケーイージーアンドジーオプトエレクトロニクス株式会社内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】デルタアミノレブリン酸などのα−アミ
ノケトン類、およびβ−ジケトンまたはβ−ケトエステ
ル類からなる熱縮合成績体（ピロール誘導体）と、エー
ルリッヒ試薬との発色色素による比色定量法をフローイ
ンジェクション分析法で行うことを特徴とするデルタア
ミノレブリン酸類の微量定量法。
【請求項２】全血または部分血または尿である検体中
のデルタアミノレブリン酸などのα−アミノケトン類を
定量測定するデルタアミノレブリン酸類の微量定量法で
あって、ポンプ（２）で緩衝液（１）を連続的に送液
し、この送液された緩衝液（１）にオートサンプラー
（３）によって所定のタイミングでデルタアミノレブリ
ン酸などのα−アミノケトン類が含有され、かつ、あら
かじめβ−ジケトンまたはβ−ケトエステル類が添加さ
れた検体を注入し、この後、所定の温度となっている恒
温槽（４）内の加熱縮合管（５）で加熱縮合し、このも
のを混合ジョイント（９）で、他のポンプ（６）で送ら
れるエールリッヒ試薬（７）と混合したのち発色管
（８）で色素化合物に変換し、こののち、検出部（１
０）でデルタアミノレブリン酸類を検出するようにした
ことを特徴とするデルタアミノレブリン酸類の微量定量
法。
【請求項３】前記β−ジケトンまたはβ−ケトエステ
ル類は、好ましくはアセチルアセトンである請求項２記
載のデルタアミノレブリン酸類の微量定量法。
【請求項４】全血または部分血または尿である検体中
のデルタアミノレブリン酸などのα−アミノケトン類を
定量測定するデルタアミノレブリン酸類の微量定量法で
あって、ポンプ（２）で緩衝液（１）を連続的に送液
し、この送液された緩衝液（１）にオートサンプラー
（３）によって所定のタイミングでデルタアミノレブリ
ン酸などのα−アミノケトン類が含有され、かつ、あら
かじめβ−ジケトンまたはβ−ケトエステル類が添加さ
れた検体を注入し、この後、所定の温度となっている恒
温槽（４）内の加熱縮合管（５）で加熱縮合し、このも
のを混合ジョイント（９）で、他のポンプ（６）で送ら
れるエールリッヒ試薬（７）と混合したのち発色管
（８）で色素化合物に変換し、こののち、バックプレッ
シャーが作用されている検出部（１０）でデルタアミノ
レブリン酸類を検出するようにしたことを特徴とするデ
ルタアミノレブリン酸類の微量定量法。
【請求項５】前記恒温槽（４）の温度は室温から１４
０℃またはそれ以上の温度、のぞましくは１００℃〜１
４０℃である請求項４記載のデルタアミノレブリン酸類
の微量定量法。
【請求項６】あらかじめβ−ジケトンまたはβ−ケト
エステル類の添加の代り等量の蒸留水を添加した測定値
をブランクとして差し引いてデルタアミノレブリン酸値
とする測定法。