JPH06165684A - ４−ケトゼアキサンチンの製造法及びその用途 - Google Patents
４−ケトゼアキサンチンの製造法及びその用途Info
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- JPH06165684A JPH06165684A JP5070335A JP7033593A JPH06165684A JP H06165684 A JPH06165684 A JP H06165684A JP 5070335 A JP5070335 A JP 5070335A JP 7033593 A JP7033593 A JP 7033593A JP H06165684 A JPH06165684 A JP H06165684A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 フラボバクテリウム属、アルカリゲネス属、
シュードモナス属、アルテロモナス属、ヒポモナス属又
はカリオファノン属に属し、４−ケトゼアキサンチンを
生産する能力を有する細菌を培地に培養し、培養物から
４−ケトゼアキサンチンを採取することを特徴とする４
−ケトゼアキサンチンの製造法、及び４−ケトゼアキサ
ンチンを有効成分とする養殖魚介類の色調改善剤。 【効果】 従来入手が困難であった４−ケトゼアキサン
チンを、極く一般的な培養装置により、高収率で容易に
得ることができる。本発明の色調改善剤は、エビ、マダ
イ等の養殖魚介類における色揚げ成分、及びキンギョ、
ニシキゴイ等の鑑賞魚の色調改善成分として有用であ
る。
シュードモナス属、アルテロモナス属、ヒポモナス属又
はカリオファノン属に属し、４−ケトゼアキサンチンを
生産する能力を有する細菌を培地に培養し、培養物から
４−ケトゼアキサンチンを採取することを特徴とする４
−ケトゼアキサンチンの製造法、及び４−ケトゼアキサ
ンチンを有効成分とする養殖魚介類の色調改善剤。 【効果】 従来入手が困難であった４−ケトゼアキサン
チンを、極く一般的な培養装置により、高収率で容易に
得ることができる。本発明の色調改善剤は、エビ、マダ
イ等の養殖魚介類における色揚げ成分、及びキンギョ、
ニシキゴイ等の鑑賞魚の色調改善成分として有用であ
る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、微生物を利用した４−
ケトゼアキサンチンの製造法、及び４−ケトゼアキサン
チンを有効成分とする養殖魚介類の色調改善剤に関する
ものである。
ケトゼアキサンチンの製造法、及び４−ケトゼアキサン
チンを有効成分とする養殖魚介類の色調改善剤に関する
ものである。
【０００２】
【従来の技術】従来より、エビ、マダイ等の養殖魚介類
の色揚げや、キンギョ、ニシキゴイ等の鑑賞魚の色調改
善は、その商品価値を高めるために水産養殖業及び餌料
製造業等の関係者の間で鋭意研究開発が進められてい
る。一方、体表色素の構成成分であるカロテノイドの代
謝、蓄積についても、水産学、化学、生化学の分野の研
究者によって明らかにされている。秦ら (水産動物のカ
ロテノイド、日本水産学会編、恒星社厚生閣、p.60、19
78) は、キンギョ及びニシキゴイが、ゼアキサンチンを
４−ケトゼアキサンチンを経由し、４−ケトゼアキサン
チンに代謝し、体表に蓄積すると報告している。また、
エビやマダイにおいても同様の代謝系を有することが報
告 (水産動物のカロテノイド、日本水産学会編、恒星社
厚生閣、p.41、1978) されている。
の色揚げや、キンギョ、ニシキゴイ等の鑑賞魚の色調改
善は、その商品価値を高めるために水産養殖業及び餌料
製造業等の関係者の間で鋭意研究開発が進められてい
る。一方、体表色素の構成成分であるカロテノイドの代
謝、蓄積についても、水産学、化学、生化学の分野の研
究者によって明らかにされている。秦ら (水産動物のカ
ロテノイド、日本水産学会編、恒星社厚生閣、p.60、19
78) は、キンギョ及びニシキゴイが、ゼアキサンチンを
４−ケトゼアキサンチンを経由し、４−ケトゼアキサン
チンに代謝し、体表に蓄積すると報告している。また、
エビやマダイにおいても同様の代謝系を有することが報
告 (水産動物のカロテノイド、日本水産学会編、恒星社
厚生閣、p.41、1978) されている。
【０００３】しかし、４−ケトゼアキサンチンの入手に
ついては、高含量で蓄積している生物からの抽出、高効
率で生産する微生物培養物からの抽出、効率的な有機合
成法等が考えられるが、現在までそのいずれも報告され
ていない。また、４−ケトゼアキサンチンは次式：
ついては、高含量で蓄積している生物からの抽出、高効
率で生産する微生物培養物からの抽出、効率的な有機合
成法等が考えられるが、現在までそのいずれも報告され
ていない。また、４−ケトゼアキサンチンは次式：
【０００４】
【化１】
【０００５】で示される公知化合物であるが (Int. J.
Biochem., 1, 438-444(1970)) 、産業上の用途は知られ
ていない。
Biochem., 1, 438-444(1970)) 、産業上の用途は知られ
ていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、従来入手が
困難であった４−ケトゼアキサンチンを簡便に製造する
ことができる方法を提供すると共に、その産業上の用途
を提供することを目的とする。
困難であった４−ケトゼアキサンチンを簡便に製造する
ことができる方法を提供すると共に、その産業上の用途
を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、４−ケト
ゼアキサンチンを生産する微生物について鋭意研究を行
ったところ、特定の属に属する細菌が４−ケトゼアキサ
ンチンを生産することを見出し、更に、４−ケトゼアキ
サンチンがエビ、マダイ等の養殖魚介類の色揚げ、及び
キンギョ、ニシキゴイ等の観賞魚の色調改善に有効であ
ることを見出し本発明を完成するに至った。
ゼアキサンチンを生産する微生物について鋭意研究を行
ったところ、特定の属に属する細菌が４−ケトゼアキサ
ンチンを生産することを見出し、更に、４−ケトゼアキ
サンチンがエビ、マダイ等の養殖魚介類の色揚げ、及び
キンギョ、ニシキゴイ等の観賞魚の色調改善に有効であ
ることを見出し本発明を完成するに至った。
【０００８】即ち、本発明の第一は、フラボバクテリウ
ム(Flavobacterium)属、アルカリゲネス(Alcaligenes)
属、シュードモナス(Pseudomonas) 属、アルテロモナス
(Alteromonas) 属、ヒポモナス(Hyphomonas)属又はカリ
オファノン(Caryophanon) 属に属し、４−ケトゼアキサ
ンチンを生産する能力を有する細菌を培地に培養し、培
養物から４−ケトゼアキサンチンを採取することを特徴
とする４−ケトゼアキサンチンの製造法であり、本発明
の第二は、４−ケトゼアキサンチンを有効成分として含
有することを特徴とする養殖魚介類の色調改善剤であ
る。
ム(Flavobacterium)属、アルカリゲネス(Alcaligenes)
属、シュードモナス(Pseudomonas) 属、アルテロモナス
(Alteromonas) 属、ヒポモナス(Hyphomonas)属又はカリ
オファノン(Caryophanon) 属に属し、４−ケトゼアキサ
ンチンを生産する能力を有する細菌を培地に培養し、培
養物から４−ケトゼアキサンチンを採取することを特徴
とする４−ケトゼアキサンチンの製造法であり、本発明
の第二は、４−ケトゼアキサンチンを有効成分として含
有することを特徴とする養殖魚介類の色調改善剤であ
る。
【０００９】以下、本発明を詳細に説明する。まず、４
−ケトゼアキサンチンの製造法について説明する。４−
ケトゼアキサンチン生産菌株としては、前記属に属し、
４−ケトゼアキサンチン生産能を有する菌株であれば、
いずれの菌株でも用いることができる。また、これらの
菌株の人工的変異方法、例えば紫外線照射、Ｘ線照射、
変異誘起剤処理等あるいは自然発生による変異株、また
遺伝子操作、細胞融合による変異株でも、４−ケトゼア
キサンチンを生産するものであれば、いずれも本発明に
用いることができる。
−ケトゼアキサンチンの製造法について説明する。４−
ケトゼアキサンチン生産菌株としては、前記属に属し、
４−ケトゼアキサンチン生産能を有する菌株であれば、
いずれの菌株でも用いることができる。また、これらの
菌株の人工的変異方法、例えば紫外線照射、Ｘ線照射、
変異誘起剤処理等あるいは自然発生による変異株、また
遺伝子操作、細胞融合による変異株でも、４−ケトゼア
キサンチンを生産するものであれば、いずれも本発明に
用いることができる。
【００１０】代表的菌株を挙げれば、フラボバクテリウ
ム(Flavobacterium)属細菌として Flavobacterium sp.
N-81106 株、アルカリゲネス(Alcaligenes) 属細菌とし
て Alcaligenes sp. PC-2 株、シュードモナス(Pseudom
onas) 属細菌として Pseudomonas sp. PC-3 株、アルテ
ロモナス(Alteromonas) 属細菌として Alteromonas sp.
SD-402 株、ヒポモナス(Hyphomonas)属細菌として Hyp
homonas sp. PC-4株、カリオファノン(Caryophanon) 属
細菌として Caryophanon sp. PC-5 株が挙げられる。
ム(Flavobacterium)属細菌として Flavobacterium sp.
N-81106 株、アルカリゲネス(Alcaligenes) 属細菌とし
て Alcaligenes sp. PC-2 株、シュードモナス(Pseudom
onas) 属細菌として Pseudomonas sp. PC-3 株、アルテ
ロモナス(Alteromonas) 属細菌として Alteromonas sp.
SD-402 株、ヒポモナス(Hyphomonas)属細菌として Hyp
homonas sp. PC-4株、カリオファノン(Caryophanon) 属
細菌として Caryophanon sp. PC-5 株が挙げられる。
【００１１】Flavobacterium sp. N-81106株の菌学的性
質を以下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.9μm×1.2μm 運動性：あり 鞭毛：周毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性 （２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：穿刺孔を中心に表面に生育す
る。
質を以下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.9μm×1.2μm 運動性：あり 鞭毛：周毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性 （２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：穿刺孔を中心に表面に生育す
る。
【００１２】（３）生理学的性質 硝酸塩の還元：陽性 脱窒反応：陰性 インドールの生成：陰性 クエン酸の利用：陰性 色素の生成：脂溶性の赤橙色色素 ウレアーゼ活性：陰性 オキシダーゼ活性：陽性 カタラーゼ活性：陽性 β−グルコシダーゼ活性（エスクリン分解性）：陽性 β−ガラクトシダーゼ活性：陽性 生育の範囲：pH５〜９、温度10〜40℃ 酸素に対する態度：好気性 海水耐性：陽性 Ｏ−Ｆテスト：酸化 糖類の同化能： 陽性：Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクト
ース、Ｄ−フルクトース、乳糖、麦芽糖、ショ糖、グリ
コーゲン、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 陰性：Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンニトール、イノシト
ール、Ｌ−ラムノース、Ｄ−ソルビトール 有機酸の同化能： 陽性：乳酸塩 陰性：クエン酸塩、リンゴ酸塩、グルコン酸塩、カプリ
ン酸塩、コハク酸塩、アジピン酸塩 他の有機物の資化能 陽性：イノシン、ウリジン、グルコース−１−リン酸、
グルコース−６−リン酸 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン、ＤＮＡ、カゼイン
ース、Ｄ−フルクトース、乳糖、麦芽糖、ショ糖、グリ
コーゲン、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 陰性：Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンニトール、イノシト
ール、Ｌ−ラムノース、Ｄ−ソルビトール 有機酸の同化能： 陽性：乳酸塩 陰性：クエン酸塩、リンゴ酸塩、グルコン酸塩、カプリ
ン酸塩、コハク酸塩、アジピン酸塩 他の有機物の資化能 陽性：イノシン、ウリジン、グルコース−１−リン酸、
グルコース−６−リン酸 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン、ＤＮＡ、カゼイン
【００１３】Alcaligenes sp. PC-2株の菌学的性質を以
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.4μm×1.7μm 運動性：あり 鞭毛：周毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性 （２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：穿刺孔を中心に表面に生育す
る。
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.4μm×1.7μm 運動性：あり 鞭毛：周毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性 （２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：穿刺孔を中心に表面に生育す
る。
【００１４】（３）生理学的性質 硝酸塩の還元：陰性 脱窒反応：陰性 インドールの生成：陰性 クエン酸の利用：陰性 色素の生成：脂溶性の赤橙色色素 ウレアーゼ活性：陰性 オキシダーゼ活性：陽性 カタラーゼ活性：陽性 β−グルコシダーゼ活性（エスクリン分解性）：陽性 β−ガラクトシダーゼ活性：陽性 生育の範囲：pH５〜９、温度10〜40℃ 酸素に対する態度：好気性 海水耐性：陽性 Ｏ−Ｆテスト：酸化、発酵のいずれも示さない。 糖類の同化能： 陽性：Ｄ−グルコース、麦芽糖 陰性：Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンノース、Ｄ−マンニ
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陽性：リンゴ酸塩 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、ク
エン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陽性：リンゴ酸塩 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、ク
エン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン
【００１５】Pseudomonas sp. PC-3株の菌学的性質を以
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.6μm×1.3μm 運動性：あり 鞭毛：極毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.6μm×1.3μm 運動性：あり 鞭毛：極毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性
【００１６】（２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：ほとんど生育しない。 肉汁寒天斜面培養：ほとんど生育しない。 肉汁液体培養：ほとんど生育しない。 肉汁ゼラチン穿刺培養：ほとんど生育しない。 マリンアガー（Difco社製）平板培養：非拡散性で光沢
を有する、橙色の円形コロニーを形成する。 マリンアガー（Difco社製）斜面培養：非拡散性で光沢
を有する、橙色の帯状に生育する。 マリンブロス（Difco社製）培養：培地全体に均一に生
育し、橙色を示す。
を有する、橙色の円形コロニーを形成する。 マリンアガー（Difco社製）斜面培養：非拡散性で光沢
を有する、橙色の帯状に生育する。 マリンブロス（Difco社製）培養：培地全体に均一に生
育し、橙色を示す。
【００１７】（３）生理学的性質 硝酸塩の還元：陰性 脱窒反応：陰性 インドールの生成：陰性 クエン酸の利用：陰性 色素の生成：脂溶性の赤橙色色素 ウレアーゼ活性：陰性 オキシダーゼ活性：陽性 カタラーゼ活性：陽性 β−グルコシダーゼ活性（エスクリン分解性）：陽性 β−ガラクトシダーゼ活性：陰性 生育の範囲：pH５〜９、温度10〜40℃ 酸素に対する態度：好気性 海水耐性：陽性 Ｏ−Ｆテスト：酸化、発酵のいずれも示さない。 糖類の同化能： 陽性：Ｄ−グルコース、麦芽糖 陰性：Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンノース、Ｄ−マンニ
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、リ
ンゴ酸塩、クエン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、リ
ンゴ酸塩、クエン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン
【００１８】Alteromonas sp. SD-402株の菌学的性質を
以下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.4μm×1.6μm 運動性：あり 鞭毛：周毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性 （２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：ゼラチンを液化し、穿刺孔を中
心に表面に生育する。
以下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.4μm×1.6μm 運動性：あり 鞭毛：周毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性 （２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：ゼラチンを液化し、穿刺孔を中
心に表面に生育する。
【００１９】（３）生理学的性質 硝酸塩の還元：陰性 脱窒反応：陰性 インドールの生成：陰性 クエン酸の利用：陰性 色素の生成：脂溶性の赤橙色色素 ウレアーゼ活性：陰性 オキシダーゼ活性：陰性 カタラーゼ活性：陰性 β−グルコシダーゼ活性（エスクリン分解性）：陽性 β−ガラクトシダーゼ活性：陰性 生育の範囲：pH５〜９、温度10〜40℃ 酸素に対する態度：好気性 海水耐性：陽性 Ｏ−Ｆテスト：酸化、発酵のいずれも示さない。 糖類の同化能： 陽性：Ｄ−グルコース、麦芽糖 陰性：Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンノース、Ｄ−マンニ
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陽性：リンゴ酸塩 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、ク
エン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陽性：ゼラチン 陰性：Ｌ−アルギニン
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陽性：リンゴ酸塩 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、ク
エン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陽性：ゼラチン 陰性：Ｌ−アルギニン
【００２０】Hyphomonas sp. PC-4 株の菌学的性質を以
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：球から短桿状、0.4μm 運動性：あり 鞭毛：付着柄あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：球から短桿状、0.4μm 運動性：あり 鞭毛：付着柄あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陰性
【００２１】（２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：ほとんど生育しない。 肉汁寒天斜面培養：ほとんど生育しない。 肉汁液体培養：ほとんど生育しない。 肉汁ゼラチン穿刺培養：ほとんど生育しない。 マリンアガー（Difco社製）平板培養：非拡散性で光沢
を有する、橙色の不定形コロニーを形成する。 マリンアガー（Difco社製）斜面培養：非拡散性で光沢
を有する、橙色の帯状に生育する。 マリンブロス（Difco社製）培養：培地全体に均一に生
育し、橙色を示す。
を有する、橙色の不定形コロニーを形成する。 マリンアガー（Difco社製）斜面培養：非拡散性で光沢
を有する、橙色の帯状に生育する。 マリンブロス（Difco社製）培養：培地全体に均一に生
育し、橙色を示す。
【００２２】（３）生理学的性質 硝酸塩の還元：陰性 脱窒反応：陰性 インドールの生成：陰性 クエン酸の利用：陰性 色素の生成：脂溶性の赤橙色色素 ウレアーゼ活性：陰性 オキシダーゼ活性：陽性 カタラーゼ活性：陽性 β−グルコシダーゼ活性（エスクリン分解性）：陰性 β−ガラクトシダーゼ活性：陰性 生育の範囲：pH５〜９、温度10〜40℃ 酸素に対する態度：好気性 海水耐性：陽性 Ｏ−Ｆテスト：酸化、発酵のいずれも示さない。 糖類の同化能： 陰性：Ｄ−グルコース、麦芽糖、Ｌ−アラビノース、Ｄ
−マンノース、Ｄ−マンニトール、Ｎ−アセチル−Ｄ−
グルコサミン 有機酸の同化能： 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、リ
ンゴ酸塩、クエン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン
−マンノース、Ｄ−マンニトール、Ｎ−アセチル−Ｄ−
グルコサミン 有機酸の同化能： 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、リ
ンゴ酸塩、クエン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン
【００２３】Caryophanon sp. PC-5株の菌学的性質を以
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.5μm×2.5μm 運動性：あり 鞭毛：側毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陽性
下に示す。 （１）形態 菌の形・大きさ：桿状、0.5μm×2.5μm 運動性：あり 鞭毛：側毛あり 細胞の多形成：なし 胞子の形成：なし グラム染色：陽性
【００２４】（２）各培地における生育状況 肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：穿刺孔を中心に表面に生育す
る。
形コロニーを形成する。 肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の帯
状に生育する。 肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。 肉汁ゼラチン穿刺培養：穿刺孔を中心に表面に生育す
る。
【００２５】（３）生理学的性質 硝酸塩の還元：陰性 脱窒反応：陰性 インドールの生成：陰性 クエン酸の利用：陰性 色素の生成：脂溶性の赤橙色色素 ウレアーゼ活性：陰性 オキシダーゼ活性：陽性 カタラーゼ活性：陽性 β−グルコシダーゼ活性（エスクリン分解性）：陽性 β−ガラクトシダーゼ活性：陰性 生育の範囲：pH５〜９、温度10〜40℃ 酸素に対する態度：好気性 海水耐性：陽性 Ｏ−Ｆテスト：酸化、発酵のいずれも示さない。 糖類の同化能： 陽性：Ｄ−グルコース、麦芽糖 陰性：Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンノース、Ｄ−マンニ
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陽性：リンゴ酸塩 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、ク
エン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン なお、前記の菌学的性質の決定は清水らの方法 (門田
元、多賀信夫編、海洋微生物研究法、学会出版センター
発行、pp.229、1985年) に従った。形態学的検討は、光
学顕微鏡を用い、特に胞子表面の形態については走査型
電子顕微鏡によった。
トール、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン 有機酸の同化能： 陽性：リンゴ酸塩 陰性：グルコン酸塩、カプリン酸塩、アジピン酸塩、ク
エン酸塩、酢酸フェニル 他の有機物の分解・同化能 陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン なお、前記の菌学的性質の決定は清水らの方法 (門田
元、多賀信夫編、海洋微生物研究法、学会出版センター
発行、pp.229、1985年) に従った。形態学的検討は、光
学顕微鏡を用い、特に胞子表面の形態については走査型
電子顕微鏡によった。
【００２６】前記の菌学的性質について、エヌ・アール
・クリーグ (N. R. Krieg)、ジェイ・ジイ・ホルト (J.
G. Holt) 編、バージーズ・マニュアル・オブ・システ
マチック・バクテリオロジー (Bergey's Manual of Sys
tematic Bacteriology) をもとに検索を行った結果、 N
-81106株をフラボバクテリウム(Flavobacterium)属に帰
属させるのが適当であったが、種を特定することは困難
であり、 N-81106株をFlavobacterium sp. N-81106
（微工研菌寄第12782 号 (FERM P-12782))として工業技
術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託日：平
成４年２月19日)。
・クリーグ (N. R. Krieg)、ジェイ・ジイ・ホルト (J.
G. Holt) 編、バージーズ・マニュアル・オブ・システ
マチック・バクテリオロジー (Bergey's Manual of Sys
tematic Bacteriology) をもとに検索を行った結果、 N
-81106株をフラボバクテリウム(Flavobacterium)属に帰
属させるのが適当であったが、種を特定することは困難
であり、 N-81106株をFlavobacterium sp. N-81106
（微工研菌寄第12782 号 (FERM P-12782))として工業技
術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託日：平
成４年２月19日)。
【００２７】PC-2株も同様に検索を行った結果、PC-2株
をアルカリゲネス(Alcaligenes) 属に帰属させるのが適
当であったが、種を特定することは困難であり、PC-2株
を Alcaligenes sp. PC-2 (FERM P-13488)として工業技
術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託日：平
成５年３月２日) 。PC-3株も同様に検索を行った結果、
PC-3株をシュードモナス(Pseudomonas) 属に帰属させる
のが適当であったが、種を特定することは困難であり、
PC-3株を Pseudomonas sp. PC-3 (FERM P-13487)として
工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託
日：平成５年３月２日) 。
をアルカリゲネス(Alcaligenes) 属に帰属させるのが適
当であったが、種を特定することは困難であり、PC-2株
を Alcaligenes sp. PC-2 (FERM P-13488)として工業技
術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託日：平
成５年３月２日) 。PC-3株も同様に検索を行った結果、
PC-3株をシュードモナス(Pseudomonas) 属に帰属させる
のが適当であったが、種を特定することは困難であり、
PC-3株を Pseudomonas sp. PC-3 (FERM P-13487)として
工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託
日：平成５年３月２日) 。
【００２８】SD-402株も同様に検索を行った結果、SD-4
02株をアルテロモナス(Alteromonas) 属に帰属させるの
が適当であったが、種を特定することは困難であり、SD
-402株を Alteromonas sp. SD-402 (FERM P-13489)とし
て工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄
託日：平成５年３月２日) 。PC-4株も同様に検索を行っ
た結果、PC-4株をヒポモナス(Hyphomonas)属に帰属させ
るのが適当であったが、種を特定することは困難であ
り、PC-4株を Hyphomonas sp. PC-4 (FERM P-13486) と
して工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原
寄託日：平成５年３月２日) 。
02株をアルテロモナス(Alteromonas) 属に帰属させるの
が適当であったが、種を特定することは困難であり、SD
-402株を Alteromonas sp. SD-402 (FERM P-13489)とし
て工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄
託日：平成５年３月２日) 。PC-4株も同様に検索を行っ
た結果、PC-4株をヒポモナス(Hyphomonas)属に帰属させ
るのが適当であったが、種を特定することは困難であ
り、PC-4株を Hyphomonas sp. PC-4 (FERM P-13486) と
して工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原
寄託日：平成５年３月２日) 。
【００２９】PC-5株も同様に検索を行った結果、PC-5株
をカリオファノン(Caryophanon) 属に帰属させるのが適
当であったが、種を特定することは困難であり、PC-5株
を Caryophanon sp. PC-5 (FERM P-13485)として工業技
術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託日：平
成５年３月２日) 。本発明の製造法においては、前記微
生物を一般に微生物の培養に用いられる培地で培養し、
産生される４−ケトゼアキサンチンを常法により採取す
る。
をカリオファノン(Caryophanon) 属に帰属させるのが適
当であったが、種を特定することは困難であり、PC-5株
を Caryophanon sp. PC-5 (FERM P-13485)として工業技
術院生命工学工業技術研究所に寄託した (原寄託日：平
成５年３月２日) 。本発明の製造法においては、前記微
生物を一般に微生物の培養に用いられる培地で培養し、
産生される４−ケトゼアキサンチンを常法により採取す
る。
【００３０】まず培養法について述べる。前記微生物の
培養には通常の培養方法を用いることができる。培地と
しては、資化可能な炭素源、窒素源、無機物及び必要な
生育、生産促進物質を程よく含有する培地であれば、合
成培地、天然培地いずれでも使用可能である。炭素源と
しては、グルコース、澱粉、デキストリン、マンノー
ス、フルクトース、シュクロース、ラクトース、キシロ
ース、アラビノース、マンニトール、糖蜜等が単独又は
組み合わせて用いられる。更に、菌の資化能によっては
炭化水素、アルコール類、有機酸類等も用いられる。窒
素源としては、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、
硝酸ナトリウム、尿素、ペプトン、肉エキス、酵母エキ
ス、乾燥酵母、コーン・スチープ・リカー、大豆粉、カ
ザミノ酸等が単独又は組み合わせて用いられる。そのほ
か、食塩、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カル
シウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウ
ム、硫酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸
亜鉛、硫酸銅等の無機塩類や海水又は天然海水中に存在
する無機塩類を必要に応じて加える。また、４−ケトゼ
アキサンチン生合成上の前駆体と考えられる代謝マップ
(日本生化学会編、東京化学同人発行、1980年) 123〜1
25 頁記載のカロテン類又はその前駆体、エキネノン、
カンタキサンチン、ゼアキサンチン、イドキサンチン、
ベータ−カロテントリオール等のキサントフィル類等を
添加することができる。更に、使用菌の生育や４−ケト
ゼアキサンチンの生産を促進する微量成分を適当に添加
することができる。
培養には通常の培養方法を用いることができる。培地と
しては、資化可能な炭素源、窒素源、無機物及び必要な
生育、生産促進物質を程よく含有する培地であれば、合
成培地、天然培地いずれでも使用可能である。炭素源と
しては、グルコース、澱粉、デキストリン、マンノー
ス、フルクトース、シュクロース、ラクトース、キシロ
ース、アラビノース、マンニトール、糖蜜等が単独又は
組み合わせて用いられる。更に、菌の資化能によっては
炭化水素、アルコール類、有機酸類等も用いられる。窒
素源としては、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、
硝酸ナトリウム、尿素、ペプトン、肉エキス、酵母エキ
ス、乾燥酵母、コーン・スチープ・リカー、大豆粉、カ
ザミノ酸等が単独又は組み合わせて用いられる。そのほ
か、食塩、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カル
シウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウ
ム、硫酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸
亜鉛、硫酸銅等の無機塩類や海水又は天然海水中に存在
する無機塩類を必要に応じて加える。また、４−ケトゼ
アキサンチン生合成上の前駆体と考えられる代謝マップ
(日本生化学会編、東京化学同人発行、1980年) 123〜1
25 頁記載のカロテン類又はその前駆体、エキネノン、
カンタキサンチン、ゼアキサンチン、イドキサンチン、
ベータ−カロテントリオール等のキサントフィル類等を
添加することができる。更に、使用菌の生育や４−ケト
ゼアキサンチンの生産を促進する微量成分を適当に添加
することができる。
【００３１】培養法としては、液体培養法、特に深部攪
拌培養法が最も適している。培養温度は16〜40℃、特に
20〜30℃が適当であり、培養中の培地のpHはアンモニア
水や炭酸アンモニウム溶液等を添加して、４〜10、特に
６〜８に維持することが望ましい。液体培養で通常１〜
７日培養を行うと、目的物質の４−ケトゼアキサンチン
が菌体中に生成蓄積される。培養物中の生成量が最大に
達したときに培養を停止する。
拌培養法が最も適している。培養温度は16〜40℃、特に
20〜30℃が適当であり、培養中の培地のpHはアンモニア
水や炭酸アンモニウム溶液等を添加して、４〜10、特に
６〜８に維持することが望ましい。液体培養で通常１〜
７日培養を行うと、目的物質の４−ケトゼアキサンチン
が菌体中に生成蓄積される。培養物中の生成量が最大に
達したときに培養を停止する。
【００３２】培養物からの４−ケトゼアキサンチンの単
離精製は、微生物代謝生産物をその培養物から単離精製
するために常用される方法に従って行われる。例えば、
培養物をろ過や遠心分離により培養ろ液と菌体に分け、
菌体を有機溶剤 (例えばヘキサン、ベンゼン、クロロホ
ルム、アセトン、エーテル、酢酸エチル、エタノール又
は以上の有機溶剤の含水物等) で抽出する。また、培養
ろ液中に４−ケトゼアキサンチンが存在する場合には、
酢酸エチルやジエチルエーテル等の有機溶剤による抽出
や、吸着型樹脂 (Amberlite XAD-2 等) に吸着後、適当
な有機溶剤にて抽出物を得ることが可能である。ついで
抽出液を濃縮後、シリカゲル、化学結合型シリカゲル、
ゲルろ過剤等を用いた液体クロマトグラフィーにより、
４−ケトゼアキサンチンを分離、精製する。なお、培
養、精製操作中の４−ケトゼアキサンチンの動向は薄層
クロマトグラフィーによる４−ケトゼアキサンチンの橙
色を目安として追跡することができる。
離精製は、微生物代謝生産物をその培養物から単離精製
するために常用される方法に従って行われる。例えば、
培養物をろ過や遠心分離により培養ろ液と菌体に分け、
菌体を有機溶剤 (例えばヘキサン、ベンゼン、クロロホ
ルム、アセトン、エーテル、酢酸エチル、エタノール又
は以上の有機溶剤の含水物等) で抽出する。また、培養
ろ液中に４−ケトゼアキサンチンが存在する場合には、
酢酸エチルやジエチルエーテル等の有機溶剤による抽出
や、吸着型樹脂 (Amberlite XAD-2 等) に吸着後、適当
な有機溶剤にて抽出物を得ることが可能である。ついで
抽出液を濃縮後、シリカゲル、化学結合型シリカゲル、
ゲルろ過剤等を用いた液体クロマトグラフィーにより、
４−ケトゼアキサンチンを分離、精製する。なお、培
養、精製操作中の４−ケトゼアキサンチンの動向は薄層
クロマトグラフィーによる４−ケトゼアキサンチンの橙
色を目安として追跡することができる。
【００３３】次に、４−ケトゼアキサンチンの養殖魚介
類の色調改善剤としての用途について説明する。本発明
における該有効成分は化学的に合成された４−ケトゼア
キサンチンでも、また前記細菌を培養して得られる培養
物の乾燥粉末、又は培養物を精製して得ることのできた
４−ケトゼアキサンチンの抽出物であってもよい。また
必要により適宜精製して使用することも可能である。
類の色調改善剤としての用途について説明する。本発明
における該有効成分は化学的に合成された４−ケトゼア
キサンチンでも、また前記細菌を培養して得られる培養
物の乾燥粉末、又は培養物を精製して得ることのできた
４−ケトゼアキサンチンの抽出物であってもよい。また
必要により適宜精製して使用することも可能である。
【００３４】本発明の色調改善剤において、有効成分と
して培養物の粗抽出エキスあるいは精製した４−ケトゼ
アキサンチンを使用する場合、常法に従って前記有効成
分を大豆油等に溶解して用いることができる。４−ケト
ゼアキサンチンを有効成分として含有する本発明の色調
改善剤は、その安全性、色揚げ能及び色調改善能により
主にエビ、マダイ等の養殖魚介類における色揚げ成分、
並びにキンギョ、ニシキゴイ等の観賞魚の色調改善成分
として有用である。
して培養物の粗抽出エキスあるいは精製した４−ケトゼ
アキサンチンを使用する場合、常法に従って前記有効成
分を大豆油等に溶解して用いることができる。４−ケト
ゼアキサンチンを有効成分として含有する本発明の色調
改善剤は、その安全性、色揚げ能及び色調改善能により
主にエビ、マダイ等の養殖魚介類における色揚げ成分、
並びにキンギョ、ニシキゴイ等の観賞魚の色調改善成分
として有用である。
【００３５】４−ケトゼアキサンチンの色調改善剤とし
ての使用量は添加する対象魚介類により異なるが、例え
ばクルマエビに対しては５mg／餌料100g、ワキンに対し
ては２mg／餌料100gである。
ての使用量は添加する対象魚介類により異なるが、例え
ばクルマエビに対しては５mg／餌料100g、ワキンに対し
ては２mg／餌料100gである。
【００３６】
【実施例】以下、実施例により本発明を更に具体的に説
明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定される
ものではないことはいうまでもない。 （実施例１）種菌として Flavobacterium sp. N-81106
（微工研菌寄第12782 号 (FERM P-12782))を用いた。前
培養及び本培養には、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説
明書記載の方法により調製した培地を適宜培養槽に分注
し殺菌後用いた。前培養として、 500ml容量の三角フラ
スコ中の150ml の培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25
℃で48時間振とう (100rpm) 培養した。このようにして
得られた種培養液を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と
同一の組成の培地３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で
通気攪拌方式 (回転数100rpm、通気量１L/分) により本
培養を行った。培養中、培地のpHは特に制御しないで、
120時間培養した。
明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定される
ものではないことはいうまでもない。 （実施例１）種菌として Flavobacterium sp. N-81106
（微工研菌寄第12782 号 (FERM P-12782))を用いた。前
培養及び本培養には、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説
明書記載の方法により調製した培地を適宜培養槽に分注
し殺菌後用いた。前培養として、 500ml容量の三角フラ
スコ中の150ml の培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25
℃で48時間振とう (100rpm) 培養した。このようにして
得られた種培養液を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と
同一の組成の培地３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で
通気攪拌方式 (回転数100rpm、通気量１L/分) により本
培養を行った。培養中、培地のpHは特に制御しないで、
120時間培養した。
【００３７】培養液を遠心分離 (10,000rpm)して菌体画
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン1.20mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン1.20mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
【００３８】（実施例２）種菌として Alcaligenes sp.
PC-2 (FERM P-13488)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
PC-2 (FERM P-13488)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
【００３９】培養液を遠心分離 (10,000rpm)して菌体画
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.30mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.30mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
【００４０】（実施例３）種菌として Pseudomonas sp.
PC-3 (FERM P-13487)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
PC-3 (FERM P-13487)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
【００４１】培養液を遠心分離 (10,000rpm)して菌体画
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.15mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.15mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
【００４２】（実施例４）種菌として Alteromonas sp.
SD-402 (FERM P-13489)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、20℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
SD-402 (FERM P-13489)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、20℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
【００４３】培養液を遠心分離 (10,000rpm)して菌体画
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.67mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.67mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
【００４４】（実施例５）種菌として Hyphomonas sp.
PC-4 (FERM P-13486) を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、20℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
PC-4 (FERM P-13486) を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、20℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
【００４５】培養液を遠心分離 (10,000rpm)して菌体画
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン1.05mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン1.05mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
【００４６】（実施例６）種菌として Caryophanon sp.
PC-5 (FERM P-13485)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
PC-5 (FERM P-13485)を用いた。前培養及び本培養に
は、DIFCO 社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法に
より調製した培地を適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。
前培養として、 500ml容量の三角フラスコ中の150ml の
培地に、該菌株を一白金耳植菌し、25℃で48時間振とう
(100rpm)培養した。このようにして得られた種培養液
を、10Ｌ容量の培養槽中の前記組成と同一の組成の培地
３Ｌに５％v/v の割合で移し、25℃で通気攪拌方式 (回
転数100rpm、通気量１L/分）により本培養を行った。培
養中、培地のpHは特に制御しないで、 120時間培養し
た。
【００４７】培養液を遠心分離 (10,000rpm)して菌体画
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.76mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
分を得、アセトン200ml を添加し攪拌し、沈澱物をろ別
し、抽出液を乾固した。これを更にシリカゲルカラム
(ナカライテスク社製シリカゲル60) を用い、ヘキサ
ン：アセトン＝７：３で展開した。溶出された画分Ａを
濃縮し４−ケトゼアキサンチン0.76mgを得た。このよう
にして得られた４−ケトゼアキサンチンは、水素核磁気
共鳴スペクトル、可視部吸光スペクトル、質量分析にお
いて、公知のものと一致した。
【００４８】（実施例７）実施例１で得られた４−ケト
ゼアキサンチンについて、ワキンを用いた飼育試験を行
った。試験飼料としては、市販されているテトラフィン
(ドイツ、テトラベルケ社製) に対して、実施例１で得
られた４−ケトゼアキサンチンの 0.1％アセトン溶液
を、４−ケトゼアキサンチンが２mg／飼料100gとなるよ
うに噴霧し、60℃の恒温乾燥器にて乾燥したものを用い
た。コントロール餌料には、テトラフィンを用いた。
ゼアキサンチンについて、ワキンを用いた飼育試験を行
った。試験飼料としては、市販されているテトラフィン
(ドイツ、テトラベルケ社製) に対して、実施例１で得
られた４−ケトゼアキサンチンの 0.1％アセトン溶液
を、４−ケトゼアキサンチンが２mg／飼料100gとなるよ
うに噴霧し、60℃の恒温乾燥器にて乾燥したものを用い
た。コントロール餌料には、テトラフィンを用いた。
【００４９】体長約２cmのワキン10匹を５匹ずつＡ、Ｂ
の２群に分け、各々縦27cm横16cm深さ16cmの水槽 (水深
12cm) で、昼光色蛍光灯 (12時間点灯、12時間消灯)
下、室温で飼育した。最初の１週間は、両群ともにテト
ラフィン0.2g／日を投与した。２週目以降、Ａ群には４
−ケトゼアキサンチン含有のテトラフィン0.2g／日を、
Ｂ群にはコントロール餌料のテトラフィン0.2g／日を投
与した。その結果、Ａ群は投与開始後２週間 (飼育開始
後３週間) 頃より、コントロールと比較し体表の赤味が
増し、投与開始後４週間 (飼育開始後５週間) 目では、
コントロールであるＢ群と比較し、Ａ群は有意に鮮やか
な赤色になった。
の２群に分け、各々縦27cm横16cm深さ16cmの水槽 (水深
12cm) で、昼光色蛍光灯 (12時間点灯、12時間消灯)
下、室温で飼育した。最初の１週間は、両群ともにテト
ラフィン0.2g／日を投与した。２週目以降、Ａ群には４
−ケトゼアキサンチン含有のテトラフィン0.2g／日を、
Ｂ群にはコントロール餌料のテトラフィン0.2g／日を投
与した。その結果、Ａ群は投与開始後２週間 (飼育開始
後３週間) 頃より、コントロールと比較し体表の赤味が
増し、投与開始後４週間 (飼育開始後５週間) 目では、
コントロールであるＢ群と比較し、Ａ群は有意に鮮やか
な赤色になった。
【００５０】
【発明の効果】本発明によれば、従来入手が困難であっ
た４−ケトゼアキサンチンを、極く一般的な培養装置に
より、高収率で容易に得ることができる。本発明の色調
改善剤は、エビ、マダイ等の養殖魚介類における色揚げ
成分、及びキンギョ、ニシキゴイ等の鑑賞魚の色調改善
成分として有用である。
た４−ケトゼアキサンチンを、極く一般的な培養装置に
より、高収率で容易に得ることができる。本発明の色調
改善剤は、エビ、マダイ等の養殖魚介類における色揚げ
成分、及びキンギョ、ニシキゴイ等の鑑賞魚の色調改善
成分として有用である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:05） (Ｃ１２Ｐ 7/26 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｐ 7/26 Ｃ１２Ｒ 1:01）
Claims (2)
- 【請求項１】 フラボバクテリウム(Flavobacterium)
属、アルカリゲネス(Alcaligenes) 属、シュードモナス
(Pseudomonas) 属、アルテロモナス(Alteromonas) 属、
ヒポモナス(Hyphomonas)属又はカリオファノン(Caryoph
anon) 属に属し、４−ケトゼアキサンチンを生産する能
力を有する細菌を培地に培養し、培養物から４−ケトゼ
アキサンチンを採取することを特徴とする４−ケトゼア
キサンチンの製造法。 - 【請求項２】 ４−ケトゼアキサンチンを有効成分とし
て含有することを特徴とする養殖魚介類の色調改善剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5070335A JPH06165684A (ja) | 1992-10-01 | 1993-03-29 | ４−ケトゼアキサンチンの製造法及びその用途 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26392992 | 1992-10-01 | ||
| JP4-263929 | 1992-10-01 | ||
| JP5070335A JPH06165684A (ja) | 1992-10-01 | 1993-03-29 | ４−ケトゼアキサンチンの製造法及びその用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06165684A true JPH06165684A (ja) | 1994-06-14 |
Family
ID=26411493
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5070335A Pending JPH06165684A (ja) | 1992-10-01 | 1993-03-29 | ４−ケトゼアキサンチンの製造法及びその用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06165684A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001022833A1 (fr) * | 1999-09-30 | 2001-04-05 | Nippon Mitsubishi Oil Corporation | Matieres contenant des pigments ajoutees a des aliments |
-
1993
- 1993-03-29 JP JP5070335A patent/JPH06165684A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001022833A1 (fr) * | 1999-09-30 | 2001-04-05 | Nippon Mitsubishi Oil Corporation | Matieres contenant des pigments ajoutees a des aliments |
| US6706278B1 (en) | 1999-09-30 | 2004-03-16 | Nippon Mitsubishi Oil Corporation | Pigment- containing materials to be added to feeds |
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