JPH06157593A - 環状ペプチドの製造方法 - Google Patents
環状ペプチドの製造方法Info
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- JPH06157593A JPH06157593A JP4339821A JP33982192A JPH06157593A JP H06157593 A JPH06157593 A JP H06157593A JP 4339821 A JP4339821 A JP 4339821A JP 33982192 A JP33982192 A JP 33982192A JP H06157593 A JPH06157593 A JP H06157593A
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
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- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 環状ペプチド、特にカルシトニン誘導体であ
るエルカトニンを収率よく製造する。 【構成】 下記式（Ｉ）で表される開環ペプチド−樹脂
を、蛋白分解酵素を用いることなく、固相反応樹脂上で
環化反応に供し、環化したペプチドを樹脂から脱離さ
せ、環状ペプチドを得る。 Ｂ−Ａｓｕ［−Ａ］−Ｘ−Resin （Ｉ） （式中、Ａｓｕはα−Ｌ−アミノスベリン酸残基を示
し、Ａ及びＢは環化反応によりＡｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ
−Ｔｈｒを形成する。但し、ＡはＡｓｕの側鎖カルボキ
シル基に結合したアミノ酸残基またはペプチド残基を示
す。ＸはResin に対する直接結合、アミノ酸残基又はペ
プチド残基、Resin は固相反応樹脂を示す）Ａｓｕの側
鎖カルボキシル基にアミノ酸又はペプチド残基が縮合し
たペプチドを、固相法により環化させると、ラセミ化を
抑制しつつ、高い環化収率で環状ペプチドが得られる。
るエルカトニンを収率よく製造する。 【構成】 下記式（Ｉ）で表される開環ペプチド−樹脂
を、蛋白分解酵素を用いることなく、固相反応樹脂上で
環化反応に供し、環化したペプチドを樹脂から脱離さ
せ、環状ペプチドを得る。 Ｂ−Ａｓｕ［−Ａ］−Ｘ−Resin （Ｉ） （式中、Ａｓｕはα−Ｌ−アミノスベリン酸残基を示
し、Ａ及びＢは環化反応によりＡｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ
−Ｔｈｒを形成する。但し、ＡはＡｓｕの側鎖カルボキ
シル基に結合したアミノ酸残基またはペプチド残基を示
す。ＸはResin に対する直接結合、アミノ酸残基又はペ
プチド残基、Resin は固相反応樹脂を示す）Ａｓｕの側
鎖カルボキシル基にアミノ酸又はペプチド残基が縮合し
たペプチドを、固相法により環化させると、ラセミ化を
抑制しつつ、高い環化収率で環状ペプチドが得られる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、合成カルシトニン誘導
体（エルカトニン）などの環状ペプチドの製造方法に関
する。
体（エルカトニン）などの環状ペプチドの製造方法に関
する。
【０００２】
【従来の技術】強力な血清カルシウムおよびリン低下、
骨形成促進作用および骨吸収抑制作用、尿中リン排泄促
進作用などの優れた薬理作用を有するポリペプチドとし
て、カルシトニンが知られている。カルシトニンは、ヒ
トなどの各種哺乳動物の甲状腺や、魚類、円口類、鳥類
の鰓後体から抽出採取され、そのアミノ酸の一次配列が
明らかにされている。この配列に基づき類似構造の合成
カルシトニンも多く報告されている。
骨形成促進作用および骨吸収抑制作用、尿中リン排泄促
進作用などの優れた薬理作用を有するポリペプチドとし
て、カルシトニンが知られている。カルシトニンは、ヒ
トなどの各種哺乳動物の甲状腺や、魚類、円口類、鳥類
の鰓後体から抽出採取され、そのアミノ酸の一次配列が
明らかにされている。この配列に基づき類似構造の合成
カルシトニンも多く報告されている。
【０００３】これら動物由来カルシトニンは、いずれも
３２個の構成アミノ酸からなるポリペプチドであって、
その１番目と７番目のアミノ酸がＬ−システインであ
り、両者のメルカプト基がジスルフィド結合を形成し、
カルボキシル末端がプロリンアミドである点で全て共通
している。
３２個の構成アミノ酸からなるポリペプチドであって、
その１番目と７番目のアミノ酸がＬ−システインであ
り、両者のメルカプト基がジスルフィド結合を形成し、
カルボキシル末端がプロリンアミドである点で全て共通
している。
【０００４】これらの天然型カルシトニンは、分子内に
ジスルフィド結合を有するため、溶液中での安定性が十
分でない。そこで、合成カルシトニンとして、１番目及
び７番目のＬ−システインを、 2ＮＨＣＨ［−（Ｃ
Ｈ2 ）5 ＣＯＯＨ］ＣＯＯＨで示されるα−Ｌ−アミノ
スベリン酸Ａｓｕで置換するポリペプチドの製造法が知
られている。
ジスルフィド結合を有するため、溶液中での安定性が十
分でない。そこで、合成カルシトニンとして、１番目及
び７番目のＬ−システインを、 2ＮＨＣＨ［−（Ｃ
Ｈ2 ）5 ＣＯＯＨ］ＣＯＯＨで示されるα−Ｌ−アミノ
スベリン酸Ａｓｕで置換するポリペプチドの製造法が知
られている。
【０００５】この方法では、次式： Ｈ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−ＮＨＣＨ［−（ＣＨ2 ）5 Ｃ ＯＯＨ］ＣＯ−Ｘ （式中、Ｘは、水酸基、カルボキシル基の保護基、カル
シトニンに相当するアミノ酸残基又はくはペプチド残基
を表し、各アミノ酸残基は保護基で保護されていてもよ
い）で示されるペプチドを液相中で環化反応に付し、各
フラグメントを液相中で更にカップリング（以下、「液
相合成法」という。）させることにより、目的とするカ
ルシトニン誘導体を合成している（特公昭５３−４１６
７７号公報、特開昭６３−２０３６９９号公報、特開平
２−２８６６９７号公報）。
シトニンに相当するアミノ酸残基又はくはペプチド残基
を表し、各アミノ酸残基は保護基で保護されていてもよ
い）で示されるペプチドを液相中で環化反応に付し、各
フラグメントを液相中で更にカップリング（以下、「液
相合成法」という。）させることにより、目的とするカ
ルシトニン誘導体を合成している（特公昭５３−４１６
７７号公報、特開昭６３−２０３６９９号公報、特開平
２−２８６６９７号公報）。
【０００６】特公昭５７−６１７３０号公報、特開昭６
１−１１２０９９号公報、特開昭６２−１２９２９７号
公報、特開昭６３−２５８４９０号公報には、環状部の
構成アミノ酸が異なるものの、前記と同様に、カルシト
ニンアナログを液相合成法により製造する方法が開示さ
れている。
１−１１２０９９号公報、特開昭６２−１２９２９７号
公報、特開昭６３−２５８４９０号公報には、環状部の
構成アミノ酸が異なるものの、前記と同様に、カルシト
ニンアナログを液相合成法により製造する方法が開示さ
れている。
【０００７】しかし、これらの方法では、アミノ酸の数
が増すにつれて、ペプチドの溶解度が微妙に変化するの
で、適当な溶媒を見出すのが次第に困難となる。また、
このことに起因して、目的とするポリペプチドと、未反
応物や副生成物との分離の困難さも増大する。特に、環
化反応では、分子間の二量化や三量化などの多量化が生
じ易いので、副反応物の生成を極力押さえる必要があ
る。また、副反応を抑制するためには、極めて低い濃度
でペプチドを環化反応に供する必要がある。従って、液
相合成法による従来の合成カルシトニン誘導体の製造方
法は、収率が低く、工業的に十分満足できる製法とは言
い難い。
が増すにつれて、ペプチドの溶解度が微妙に変化するの
で、適当な溶媒を見出すのが次第に困難となる。また、
このことに起因して、目的とするポリペプチドと、未反
応物や副生成物との分離の困難さも増大する。特に、環
化反応では、分子間の二量化や三量化などの多量化が生
じ易いので、副反応物の生成を極力押さえる必要があ
る。また、副反応を抑制するためには、極めて低い濃度
でペプチドを環化反応に供する必要がある。従って、液
相合成法による従来の合成カルシトニン誘導体の製造方
法は、収率が低く、工業的に十分満足できる製法とは言
い難い。
【０００８】特表昭６３−５０２３４３号公報には、環
状部のアミノ酸が異なるアミノ酸で構成されたカルシト
ニンアナログを液相合成法により環化し、環状ペプチド
とペプチド残基とを、固相合成法により縮合させる方法
が開示されている。
状部のアミノ酸が異なるアミノ酸で構成されたカルシト
ニンアナログを液相合成法により環化し、環状ペプチド
とペプチド残基とを、固相合成法により縮合させる方法
が開示されている。
【０００９】さらに、国際公開番号ＷＯ／９０／１２８
０９には、固相樹脂にＣ端側から順次アミノ酸を結合し
た後、環化し、環状ペプチドを樹脂から脱離させるカル
シトニンアナログの製造方法が記載されている。
０９には、固相樹脂にＣ端側から順次アミノ酸を結合し
た後、環化し、環状ペプチドを樹脂から脱離させるカル
シトニンアナログの製造方法が記載されている。
【００１０】これらの先行文献は、いずれもＳｅｒ1 と
Ａｓｕ6 との間でペプチドを縮合環化する。しかし、Ｓ
ｅｒ1 とＡｓｕ6 との間でペプチドを環化すると、環化
収率がさほど向上しない。
Ａｓｕ6 との間でペプチドを縮合環化する。しかし、Ｓ
ｅｒ1 とＡｓｕ6 との間でペプチドを環化すると、環化
収率がさほど向上しない。
【００１１】特開平２−２１９５８９号公報には、Ｌｅ
ｕ3 とＳｅｒ4 との間が解裂したペプチドフラグメント
を、蛋白分解酵素を用いて、液相合成法や固相合成法に
より環化させてカシトニンアナログを製造する方法が開
示されている。しかし、蛋白分解酵素を用いても、環化
収率がさほど向上しない。
ｕ3 とＳｅｒ4 との間が解裂したペプチドフラグメント
を、蛋白分解酵素を用いて、液相合成法や固相合成法に
より環化させてカシトニンアナログを製造する方法が開
示されている。しかし、蛋白分解酵素を用いても、環化
収率がさほど向上しない。
【００１２】本出願人は、国際公開番号ＷＯ／９１／０
７４３３において、開環したペプチドフラグメントのう
ちＳｅｒ1 とＡｓｕ6 との間を除く他の部位で液相中で
環化させることにより、カルシトニンアナログを製造す
る方法について提案した。この方法では、環状ペプチド
を高い環化収率で製造できる。
７４３３において、開環したペプチドフラグメントのう
ちＳｅｒ1 とＡｓｕ6 との間を除く他の部位で液相中で
環化させることにより、カルシトニンアナログを製造す
る方法について提案した。この方法では、環状ペプチド
を高い環化収率で製造できる。
【００１３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、環状
ペプチド、特にカルシトニン誘導体であるエルカトニン
をさらに収率よく製造でき、工業的に有用な環状ペプチ
ド又はその酸付加塩もしくは錯体の製造方法を提供する
ことにある。
ペプチド、特にカルシトニン誘導体であるエルカトニン
をさらに収率よく製造でき、工業的に有用な環状ペプチ
ド又はその酸付加塩もしくは錯体の製造方法を提供する
ことにある。
【００１４】
【発明の構成】本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭
意検討した結果、（１）α−Ｌ−アミノスベリン酸Ａｓ
ｕの少なくとも側鎖カルボキシル基にアミノ酸またはペ
プチドが縮合した開環ペプチド−樹脂を用い、（２）Ｃ
端のカルボキシル基とＮ端のアミノ基との環化反応を固
相法により行なうと、副反応を伴なうことなく、高い環
化収率で環状ペプチドが得られること見いだし本発明を
完成した。
意検討した結果、（１）α−Ｌ−アミノスベリン酸Ａｓ
ｕの少なくとも側鎖カルボキシル基にアミノ酸またはペ
プチドが縮合した開環ペプチド−樹脂を用い、（２）Ｃ
端のカルボキシル基とＮ端のアミノ基との環化反応を固
相法により行なうと、副反応を伴なうことなく、高い環
化収率で環状ペプチドが得られること見いだし本発明を
完成した。
【００１５】すなわち、本発明は、下記式（Ｉ）
【００１６】
【化７】 ［式中、Ａは、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅ
ｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−
Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1
）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ
−Ｘ2 、またはＳｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 を示し、ＢはＸ3
、Ｘ3 −Ｔｈｒ（Ｘ1 ）、Ｘ3 −Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔ
ｈｒ（Ｘ1 ）、Ｘ3 −Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ
（Ｘ1 ）、またはＸ3 −Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1
）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）を示す。
ｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−
Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1
）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ
−Ｘ2 、またはＳｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 を示し、ＢはＸ3
、Ｘ3 −Ｔｈｒ（Ｘ1 ）、Ｘ3 −Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔ
ｈｒ（Ｘ1 ）、Ｘ3 −Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ
（Ｘ1 ）、またはＸ3 −Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1
）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）を示す。
【００１７】Ｘ1 は水素原子又は水酸基の保護基を示
し、Ｘ2 は水酸基又はカルボキシル基の保護基を示し、
Ｘ3 は水素原子又はアミノ基の保護基を示す。
し、Ｘ2 は水酸基又はカルボキシル基の保護基を示し、
Ｘ3 は水素原子又はアミノ基の保護基を示す。
【００１８】Ｘは、Resin に対する直接結合、アミノ酸
残基又はペプチド残基を示す。
残基又はペプチド残基を示す。
【００１９】Resin は固相反応樹脂を示す。各アミノ酸
残基は保護基で保護されていてもよい］で表される開環
ペプチド−樹脂を、蛋白分解酵素を用いることなく環化
反応に供し、次いで環化したペプチドを樹脂から脱離さ
せ、下記式（ＩＩ）
残基は保護基で保護されていてもよい］で表される開環
ペプチド−樹脂を、蛋白分解酵素を用いることなく環化
反応に供し、次いで環化したペプチドを樹脂から脱離さ
せ、下記式（ＩＩ）
【００２０】
【化８】 （式中、Ｘ′は水酸基、アミノ基、アミノ酸残基または
ペプチド残基を示し、各アミノ酸残基は保護基で保護さ
れていてもよい）で表される環状ペプチドまたはその酸
付加塩もしくは錯体を製造する方法。
ペプチド残基を示し、各アミノ酸残基は保護基で保護さ
れていてもよい）で表される環状ペプチドまたはその酸
付加塩もしくは錯体を製造する方法。
【００２１】好ましい方法では、下記式（Ｉａ）で表さ
れる開環ペプチド−樹脂を、蛋白分解酵素を用いること
なく環化反応に供し、次いで環化したペプチドを樹脂か
ら脱離させ、下記式（ＩＩａ）で表される環状ペプチド
またはその酸付加塩もしくは錯体を製造する。
れる開環ペプチド−樹脂を、蛋白分解酵素を用いること
なく環化反応に供し、次いで環化したペプチドを樹脂か
ら脱離させ、下記式（ＩＩａ）で表される環状ペプチド
またはその酸付加塩もしくは錯体を製造する。
【００２２】
【化９】 （式中、Ａ、ＢおよびResin は前記に同じ。Ａ1 〜Ａ22
は、下記のアミノ酸残基を示す。各アミノ酸残基は保護
基で保護されていてもよい。
は、下記のアミノ酸残基を示す。各アミノ酸残基は保護
基で保護されていてもよい。
【００２３】 Ａ1 ：ＶａｌまたはＭｅｔ Ａ2 ：ＳｅｒまたはＧｌｙ Ａ3 ：Ｌｙｓ、ＴｈｒまたはＡｌａ Ａ4 ：ＬｅｕまたはＴｙｒ Ａ5 ：Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＴｒｐ Ａ6 ：Ｇｌｎ、ＬｙｓまたはＡｒｇ Ａ7 ：Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＡｓｎ Ａ8 ：ＬｅｕまたはＰｈｅ Ａ9 ：ＨｉｓまたはＡｓｎ Ａ10：ＬｙｓまたはＡｓｎ Ａ11：Ｌｅｕ、ＰｈｅまたはＴｙｒ Ａ12：ＧｌｎまたはＨｉｓ Ａ13：ＴｈｒまたはＡｒｇ Ａ14：ＴｙｒまたはＰｈｅ Ａ15：ＰｒｏまたはＳｅｒ Ａ16：Ａｒｇ、ＧｌｙまたはＧｌｎ Ａ17：ＴｈｒまたはＭｅｔ Ａ18：Ａｓｐ、Ａｌａ、ＡｓｎまたはＧｌｙ Ａ19：Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ＴｈｒまたはＰｈｅ Ａ20：Ａｌａ、Ｖａｌ、ＰｒｏまたはＳｅｒ Ａ21：ＧｌｙまたはＧｌｕ Ａ22：ＴｈｒまたはＡｌａ
【００２４】
【化１０】 （式中、Ａ1 〜Ａ22は前記に同じ。各アミノ酸残基は保
護基で保護されていてもよい）また、好ましい方法で
は、下記式（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂を環
化反応に供する。
護基で保護されていてもよい）また、好ましい方法で
は、下記式（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂を環
化反応に供する。
【００２５】
【化１１】 また、前記式（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）で表される開環ペ
プチド−樹脂は、下記式（ＩＩＩ）で表される環状ペプ
チド前駆体と、式（Ｖ）で表される鎖状ペプチド−樹脂
とを固相法により縮合させて得るのが好ましい。
プチド−樹脂は、下記式（ＩＩＩ）で表される環状ペプ
チド前駆体と、式（Ｖ）で表される鎖状ペプチド−樹脂
とを固相法により縮合させて得るのが好ましい。
【００２６】
【化１２】 ［式中、ＡおよびＢは前記に同じ。Ｘａは水酸基、カル
ボキシル基の保護基、アミノ酸残基または下記式（Ｉ
Ｖ） −Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −Ｘ4 （ＩＶ） （Ａ1 およびＡ2 は前記と同じ。Ｘ4 は水酸基またはカ
ルボキシル基の保護基）で表されるペプチド残基を示
す］ Ｙ−Ａ3 −Ａ4 −Ａ5 −Ａ6 −Ａ7 −Ａ8 −Ａ9 −Ａ10−Ａ11−Ａ12−Ａ13 −Ａ14−Ａ15−Ａ16−Ａ17−Ａ18−Ａ19−Ｇｌｙ−Ａ20−Ａ21−Ａ22−Ｐｒｏ− Resin （Ｖ） ［式中、Ｙは水素原子、アミノ基の保護基またはＸ5 −
Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −（Ｘ5 は水素原子またはアミノ基
の保護基）を示す。ただし、Ｘが水酸基またはカルボキ
シル基の保護基であるとき、ＹはＸ5 −Ａ1 −Ｌｅｕ−
Ａ2 −であり、Ｘが−Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −であると
き、Ｙは水素原子またはアミノ基の保護基である。Resi
n 、Ａ1 〜Ａ22は、前記に同じ。各アミノ酸残基は保護
基で保護されていてもよい］なお、前記式（Ｉ）（ＩＩ
Ｉ）で表されるペプチドは、ＡｓｕからＡが分岐してい
ることを簡便に示すため、Ｂ−Ａｓｕ［−Ａ］−Ｘ、Ｂ
−Ａｓｕ［−Ａ］−Ｘａで表す場合がある。また、その
他のペプチドについても、Ａｓｕから分岐するアミノ酸
残基やペプチド残基を、上記に準じて表わす場合があ
る。
ボキシル基の保護基、アミノ酸残基または下記式（Ｉ
Ｖ） −Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −Ｘ4 （ＩＶ） （Ａ1 およびＡ2 は前記と同じ。Ｘ4 は水酸基またはカ
ルボキシル基の保護基）で表されるペプチド残基を示
す］ Ｙ−Ａ3 −Ａ4 −Ａ5 −Ａ6 −Ａ7 −Ａ8 −Ａ9 −Ａ10−Ａ11−Ａ12−Ａ13 −Ａ14−Ａ15−Ａ16−Ａ17−Ａ18−Ａ19−Ｇｌｙ−Ａ20−Ａ21−Ａ22−Ｐｒｏ− Resin （Ｖ） ［式中、Ｙは水素原子、アミノ基の保護基またはＸ5 −
Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −（Ｘ5 は水素原子またはアミノ基
の保護基）を示す。ただし、Ｘが水酸基またはカルボキ
シル基の保護基であるとき、ＹはＸ5 −Ａ1 −Ｌｅｕ−
Ａ2 −であり、Ｘが−Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −であると
き、Ｙは水素原子またはアミノ基の保護基である。Resi
n 、Ａ1 〜Ａ22は、前記に同じ。各アミノ酸残基は保護
基で保護されていてもよい］なお、前記式（Ｉ）（ＩＩ
Ｉ）で表されるペプチドは、ＡｓｕからＡが分岐してい
ることを簡便に示すため、Ｂ−Ａｓｕ［−Ａ］−Ｘ、Ｂ
−Ａｓｕ［−Ａ］−Ｘａで表す場合がある。また、その
他のペプチドについても、Ａｓｕから分岐するアミノ酸
残基やペプチド残基を、上記に準じて表わす場合があ
る。
【００２７】本明細書において、アミノ酸、ペプチド、
保護基、溶媒、その他の成分に関して略号で表示する場
合には、ＩＵＰＡＣ（International Union of Pure an
d Applied Chemistry ）、ＩＵＢ（International Unio
n of Biochemistry ）の規定、又は当該分野における慣
用の記号に従うものとする。以下に、それらの例を挙げ
る。また、アミノ酸などに関し光学異性体がある場合
は、特に明示がない限り、Ｌ体を示すものとする。
保護基、溶媒、その他の成分に関して略号で表示する場
合には、ＩＵＰＡＣ（International Union of Pure an
d Applied Chemistry ）、ＩＵＢ（International Unio
n of Biochemistry ）の規定、又は当該分野における慣
用の記号に従うものとする。以下に、それらの例を挙げ
る。また、アミノ酸などに関し光学異性体がある場合
は、特に明示がない限り、Ｌ体を示すものとする。
【００２８】 Ａｌａ：アラニン Ａｒｇ：アルギニン Ａｓｎ：アスパラギン Ａｓｐ：アスパラギン酸 Ｇｌｎ：グルタミン Ｇｌｕ：グルタミン酸 Ｇｌｙ：グリシン Ｈｉｓ：ヒスチジン Ｉｌｅ：イソロイシン Ｌｅｕ：ロイシン Ｌｙｓ：リジン Ｍｅｔ：メチオニン Ｐｈｅ：フェニルアラニン Ｐｒｏ：プロリン Ｓｅｒ：セリン Ｔｈｒ：スレオニン Ｔｙｒ：チロシン Ｖａｌ：バリン Ａｓｕ：α−Ｌ−アミノスベリン酸 Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル Ｂｚｌ：ベンジル Ｚ ：ベンジルオキシカルボニル Ｔｏｓ：トシル Ｃｌ−Ｚ：２−クロロベンジルオキシカルボニル Ｂｒ−Ｚ：２−ブロモベンジルオキシカルボニル ＯＭｅ：メチルエステル ＯＰａｃ：フェナシルエステル ＯＢｚｌ：ベンジルエステル ＯＳｕ：Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル ＨＯＳｕ：Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド ＨＯＮＢ：Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３
−ジカルボン酸イミド ＥＤＣ：Ｎ−エチル−Ｎ′−ジメチルアミノプロピルカ
ルボジイミド ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリ
ス（ジメチルアミノ）−フォスホニウムヘキサフルオロ
フォスフェート ＨＢＴＵ：Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，
Ｎ′−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロフォ
スフェート ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸 ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリドン 本発明の第１の特徴は、固相法による環化収率を高める
ため、前記式（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）及び（ＩＩＩ）の
ペプチドにおいて、α−Ｌ−アミノスベリン酸の少なく
とも側鎖カルボキシル基にアミノ酸またはペプチドが縮
合している点にある。
−ジカルボン酸イミド ＥＤＣ：Ｎ−エチル−Ｎ′−ジメチルアミノプロピルカ
ルボジイミド ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリ
ス（ジメチルアミノ）−フォスホニウムヘキサフルオロ
フォスフェート ＨＢＴＵ：Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，
Ｎ′−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロフォ
スフェート ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸 ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリドン 本発明の第１の特徴は、固相法による環化収率を高める
ため、前記式（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）及び（ＩＩＩ）の
ペプチドにおいて、α−Ｌ−アミノスベリン酸の少なく
とも側鎖カルボキシル基にアミノ酸またはペプチドが縮
合している点にある。
【００２９】前記一般式（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）及び
（ＩＩＩ）で表されるペプチドにおけるＡとＢの組合せ
は環状ペプチドの種類に応じて選択できる。ＡとＢの好
ましい組合せは、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓ
ｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 )で表されるペプチドを形
成する。ＡとＢの好ましい組合せは、次の通りである。
（ＩＩＩ）で表されるペプチドにおけるＡとＢの組合せ
は環状ペプチドの種類に応じて選択できる。ＡとＢの好
ましい組合せは、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓ
ｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 )で表されるペプチドを形
成する。ＡとＢの好ましい組合せは、次の通りである。
【００３０】（１）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅ
ｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1）−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 （２）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ
（Ｘ1 ）−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ｔｈｒ（Ｘ1 ） （３）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ） （４）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ） （５）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ
（Ｘ1 ） （式中、Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 は前記に同じ）前記式
（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂
は、慣用の固相法、例えば、固相反応樹脂にアミノ酸を
１個ずつ順次結合させる逐次延長（stepwise elongatio
n ）法、２個以上のアミノ酸で構成されたペプチドフラ
グメントを結合させるフラグメント縮合（fragment con
densation ）法やこれらの方法を組合せた方法により得
ることができる。
ｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1）−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 （２）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ
（Ｘ1 ）−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ｔｈｒ（Ｘ1 ） （３）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ） （４）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ） （５）Ａ：Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 Ｂ：Ｘ3 −Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ
（Ｘ1 ） （式中、Ｘ1 、Ｘ2 およびＸ3 は前記に同じ）前記式
（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂
は、慣用の固相法、例えば、固相反応樹脂にアミノ酸を
１個ずつ順次結合させる逐次延長（stepwise elongatio
n ）法、２個以上のアミノ酸で構成されたペプチドフラ
グメントを結合させるフラグメント縮合（fragment con
densation ）法やこれらの方法を組合せた方法により得
ることができる。
【００３１】式（Ｉ）においてＸがペプチド残基である
場合、好ましい方法は、環状ペプチド部分に相当するペ
プチドを含む前駆体ペプチドと、固相反応樹脂を用いて
合成した鎖状ペプチド−樹脂とを反応させる方法であ
る。この樹脂に結合した鎖状ペプチドは、前記式（Ｉ）
（Ｉａ）（Ｉｂ）で表されるペプチド−樹脂のＣ末端側
ペプチド部分に相当する。
場合、好ましい方法は、環状ペプチド部分に相当するペ
プチドを含む前駆体ペプチドと、固相反応樹脂を用いて
合成した鎖状ペプチド−樹脂とを反応させる方法であ
る。この樹脂に結合した鎖状ペプチドは、前記式（Ｉ）
（Ｉａ）（Ｉｂ）で表されるペプチド−樹脂のＣ末端側
ペプチド部分に相当する。
【００３２】さらに好ましくは、Ｘがペプチド残基であ
る式（Ｉ）で表される開環ペプチド−樹脂や、式（Ｉ
ａ）（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂は、式（Ｉ
ＩＩ）で表される環状ペプチドの前駆体ペプチドと、前
記式（Ｖ）で表される鎖状ペプチド−樹脂とを固相法に
より縮合することにより得ることができる。また、前記
式（ＩＩＩ）で表される環状ペプチドの前駆体ペプチド
は、固相法により調製してもよいが、液相合成法により
調製する場合が多い。
る式（Ｉ）で表される開環ペプチド−樹脂や、式（Ｉ
ａ）（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂は、式（Ｉ
ＩＩ）で表される環状ペプチドの前駆体ペプチドと、前
記式（Ｖ）で表される鎖状ペプチド−樹脂とを固相法に
より縮合することにより得ることができる。また、前記
式（ＩＩＩ）で表される環状ペプチドの前駆体ペプチド
は、固相法により調製してもよいが、液相合成法により
調製する場合が多い。
【００３３】前記式（ＩＩＩ）において、Ｘａで表され
るカルボキシル基の保護基は、カルボキシル基の保護基
としてペプチド化学に常用のものであれば特に制限され
ず、例えば、「ペプチド合成の基礎と実験」（泉屋ら、
丸善（株）、昭和６０年１月発行）に記載の保護基を参
照できる。
るカルボキシル基の保護基は、カルボキシル基の保護基
としてペプチド化学に常用のものであれば特に制限され
ず、例えば、「ペプチド合成の基礎と実験」（泉屋ら、
丸善（株）、昭和６０年１月発行）に記載の保護基を参
照できる。
【００３４】カルボキシル基の保護基としては、例え
ば、メトキシ基、エトキシ基、トリクロロエトキシ基、
プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブ
トキシ基、 sec−ブトキシ基、tert−ブトキシ基などの
アルコキシ基；シクロヘキシルオキシ基などのシクロア
ルキルオキシ基；ベンジルオキシ基、ｐ−メトキシベン
ジルオキシ基、ｐ−ニトロベンジルオキシ基、ｐ−クロ
ロベンジルオキシ基、ｐ−ブロモベンジルオキシ基、ベ
ンズヒドリルオキシ基、ジフェニルメトキシ基、９−フ
ルオレニルメトキシ基などの置換基を有していてもよい
アラルキルオキシ基；カルボベンゾキシヒドラジノ基、
tert−ブトキシカルボニルヒドラジノ基、トリチルヒド
ラジノ基などの置換ヒドラジノ基；フェナシル基；ピコ
リル基などが挙げられる。
ば、メトキシ基、エトキシ基、トリクロロエトキシ基、
プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブ
トキシ基、 sec−ブトキシ基、tert−ブトキシ基などの
アルコキシ基；シクロヘキシルオキシ基などのシクロア
ルキルオキシ基；ベンジルオキシ基、ｐ−メトキシベン
ジルオキシ基、ｐ−ニトロベンジルオキシ基、ｐ−クロ
ロベンジルオキシ基、ｐ−ブロモベンジルオキシ基、ベ
ンズヒドリルオキシ基、ジフェニルメトキシ基、９−フ
ルオレニルメトキシ基などの置換基を有していてもよい
アラルキルオキシ基；カルボベンゾキシヒドラジノ基、
tert−ブトキシカルボニルヒドラジノ基、トリチルヒド
ラジノ基などの置換ヒドラジノ基；フェナシル基；ピコ
リル基などが挙げられる。
【００３５】前記一般式（ＩＩＩ）において、Ｘａで表
されるアミノ酸残基のうち、カルシトニンを構成するア
ミノ酸残基としては、例えば、Ｖａｌ−ＯＨ、Ｍｅｔ−
ＯＨが挙げられる。Ｘａで表されるペプチド残基は、所
望する環状ペプチドの残基、例えば、カルシトニンを構
成するペプチド残基であれば特に制限されない。
されるアミノ酸残基のうち、カルシトニンを構成するア
ミノ酸残基としては、例えば、Ｖａｌ−ＯＨ、Ｍｅｔ−
ＯＨが挙げられる。Ｘａで表されるペプチド残基は、所
望する環状ペプチドの残基、例えば、カルシトニンを構
成するペプチド残基であれば特に制限されない。
【００３６】Ｘａで表されるペプチド残基としては、例
えば、下記式（ＶＩ）で表される低級ペプチド残基； −Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −ＯＨ （ＶＩ） 下記式（ＶＩＩ）で示されるペプチド残基又はそのフラ
グメントが挙げられる。
えば、下記式（ＶＩ）で表される低級ペプチド残基； −Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −ＯＨ （ＶＩ） 下記式（ＶＩＩ）で示されるペプチド残基又はそのフラ
グメントが挙げられる。
【００３７】 −Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −Ａ3 −Ａ4 −Ａ5 −Ａ6 −Ａ7 −Ａ8 −Ａ9 −Ａ10− Ａ11−Ａ12−Ａ13−Ａ14−Ａ15−Ａ16−Ａ17−Ａ18−Ａ19−Ｇｌｙ−Ａ20−Ａ21 −Ａ22−Ｐｒｏ−ＯＨ （ＶＩＩ） （式中、Ａ1 〜Ａ22は、前記に同じ）上記カルシトニン
を構成するアミノ酸残基、式（ＶＩ）で表されるペプチ
ド残基や、式（ＶＩＩ）で表されるペプチド残基のフラ
グメントを有するペプチドは、カルシトニン合成用の中
間体として好適である。
を構成するアミノ酸残基、式（ＶＩ）で表されるペプチ
ド残基や、式（ＶＩＩ）で表されるペプチド残基のフラ
グメントを有するペプチドは、カルシトニン合成用の中
間体として好適である。
【００３８】前記式（ＶＩ）で表される低級ペプチド残
基において、カルシトニンを構成する好ましいペプチド
残基は、−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨである。
基において、カルシトニンを構成する好ましいペプチド
残基は、−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨである。
【００３９】また、前記式（ＶＩＩ）で表されるペプチ
ド残基において、カルシトニンを構成する好ましいペプ
チド残基は、下記の通りである。 −Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ −Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ −Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＯＨ 前記式（Ｉ）〜（ＶＩＩ）で示されるペプチドにおい
て、各アミノ酸残基を保護する保護基には、ペプチド化
学に常用の保護基が使用できる。アミノ酸残基の保護基
についても、「ペプチド合成の基礎と実験」（泉屋ら、
丸善（株）、昭和６０年１月発行）に記載の保護基を参
照できる。
ド残基において、カルシトニンを構成する好ましいペプ
チド残基は、下記の通りである。 −Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ −Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ −Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＯＨ 前記式（Ｉ）〜（ＶＩＩ）で示されるペプチドにおい
て、各アミノ酸残基を保護する保護基には、ペプチド化
学に常用の保護基が使用できる。アミノ酸残基の保護基
についても、「ペプチド合成の基礎と実験」（泉屋ら、
丸善（株）、昭和６０年１月発行）に記載の保護基を参
照できる。
【００４０】ペプチド化学に常用の保護基のうち、カル
ボキシル基の保護基としては、前記Ｘａで表されるカル
ボキシル基の保護基と同様の基が挙げられる。
ボキシル基の保護基としては、前記Ｘａで表されるカル
ボキシル基の保護基と同様の基が挙げられる。
【００４１】アミノ基の保護基としては、例えば、Ｂｏ
ｃ基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、tert−ア
ミルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメトキシカ
ルボニル基（Ｆｍｏｃ）、メチルスルホニルエトキシカ
ルボニル基、トリクロロエトキシカルボニル基、２−
（トリメチルシリル）エトキルカルボニル基、ピリジン
−４−メトキシカルボニル基などの置換基を有していて
もよいアルコキシカルボニル基；シクロペプチルオキシ
カルボニル基、シクロヘキシルオキシカルボニル基など
の置換基を有していてもよいシクロアルキルオキシカル
ボニル基；Ｚ基、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニ
ル基、Ｃｌ−Ｚ基、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニ
ル基、Ｂｒ−Ｚ基、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニ
ル基、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、アダマ
ンチルオキシカルボニル基、２−フェニルイソプロピル
オキシカルボニル基、ｐ−メチルフェニルイソプロピル
オキシカルボニル基、ｐ−ビフェニルイソプロピルオキ
シカルボニル基、３，５−ジメトキシ−α，α−ジメチ
ルベンジルオキシカルボニル基などの置換基を有してい
てもよいアラルキルオキシカルボニル基；イソボルニル
オキシカルボニル基；Ｂｚ１基、ベンズヒドリル基、ト
リチル基などの置換基を有していてもよいアラルキル
基；トリフルオロアセチル基、フタロイル基、ホルミル
基、ベンゼンスルホニル基，Ｔｏｓ基、ｏ−ニトロフェ
ニルスルフェニル基、２，４−ジニトロフェニルスルフ
ェニル基、３−ニトロ−２−ピリジルスルフェニル基な
どの置換基を有していてもよいアシル基など；ジチアス
クシノイル基；２−ニトロフェニルチオ基、ジフェニル
ホスフィニル基、ジフェニルホスフィノチオイル基、ジ
メチルホスフィノチオイル基などが挙げられる。
ｃ基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、tert−ア
ミルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメトキシカ
ルボニル基（Ｆｍｏｃ）、メチルスルホニルエトキシカ
ルボニル基、トリクロロエトキシカルボニル基、２−
（トリメチルシリル）エトキルカルボニル基、ピリジン
−４−メトキシカルボニル基などの置換基を有していて
もよいアルコキシカルボニル基；シクロペプチルオキシ
カルボニル基、シクロヘキシルオキシカルボニル基など
の置換基を有していてもよいシクロアルキルオキシカル
ボニル基；Ｚ基、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニ
ル基、Ｃｌ−Ｚ基、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニ
ル基、Ｂｒ−Ｚ基、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニ
ル基、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、アダマ
ンチルオキシカルボニル基、２−フェニルイソプロピル
オキシカルボニル基、ｐ−メチルフェニルイソプロピル
オキシカルボニル基、ｐ−ビフェニルイソプロピルオキ
シカルボニル基、３，５−ジメトキシ−α，α−ジメチ
ルベンジルオキシカルボニル基などの置換基を有してい
てもよいアラルキルオキシカルボニル基；イソボルニル
オキシカルボニル基；Ｂｚ１基、ベンズヒドリル基、ト
リチル基などの置換基を有していてもよいアラルキル
基；トリフルオロアセチル基、フタロイル基、ホルミル
基、ベンゼンスルホニル基，Ｔｏｓ基、ｏ−ニトロフェ
ニルスルフェニル基、２，４−ジニトロフェニルスルフ
ェニル基、３−ニトロ−２−ピリジルスルフェニル基な
どの置換基を有していてもよいアシル基など；ジチアス
クシノイル基；２−ニトロフェニルチオ基、ジフェニル
ホスフィニル基、ジフェニルホスフィノチオイル基、ジ
メチルホスフィノチオイル基などが挙げられる。
【００４２】Ａｒｇのグアニジノ基は、例えば、ニトロ
基、Ｚ基、Ｔｏｓ基、ｐ−メトキシベンゼンスルホニル
基（Ｍｂｓ）、４−メトキシ−２，６−ジメチルベンゼ
ンスルホニル基（Ｍｄｓ）、４−メトキシ−２，３，６
−トリメチルベンゼンスルホニル基（Ｍｔｒ）、メシチ
レン−２−スルホニル基（Ｍｔｓ）、２，３，４，５，
６−ペンタメチルベンゼンスルホニル基（Ｐｍｅ）、
２，４，６−トリメトキシベンゼンスルホニル基（Ｍｔ
ｂ）などで保護できる。このグアニジノ基は、保護しな
くてもよい。
基、Ｚ基、Ｔｏｓ基、ｐ−メトキシベンゼンスルホニル
基（Ｍｂｓ）、４−メトキシ−２，６−ジメチルベンゼ
ンスルホニル基（Ｍｄｓ）、４−メトキシ−２，３，６
−トリメチルベンゼンスルホニル基（Ｍｔｒ）、メシチ
レン−２−スルホニル基（Ｍｔｓ）、２，３，４，５，
６−ペンタメチルベンゼンスルホニル基（Ｐｍｅ）、
２，４，６−トリメトキシベンゼンスルホニル基（Ｍｔ
ｂ）などで保護できる。このグアニジノ基は、保護しな
くてもよい。
【００４３】Ｈｉｓのイミダゾリル基は、保護しなくて
もよいが、例えば、Ｂｚｌ基、Ｔｏｓ基、Ｚ基、フェナ
シル基（Ｐａｃ）、ベンジルオキシメチル基（Ｂｏ
ｍ）、トリチル基、アダマンチルオキシカルボニル基、
２，２，２−トリフルオロ−１−tert−ブトキシカルボ
ニルアミノエチル基、２，２，２−トリフルオロ−１−
ベンジルオキシカルボニルアミノエチル基などで保護で
きる。
もよいが、例えば、Ｂｚｌ基、Ｔｏｓ基、Ｚ基、フェナ
シル基（Ｐａｃ）、ベンジルオキシメチル基（Ｂｏ
ｍ）、トリチル基、アダマンチルオキシカルボニル基、
２，２，２−トリフルオロ−１−tert−ブトキシカルボ
ニルアミノエチル基、２，２，２−トリフルオロ−１−
ベンジルオキシカルボニルアミノエチル基などで保護で
きる。
【００４４】Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒのヒドロキシル基
は、例えば、Ｂｚｌ基、４−メトキシベンジル基、３，
４−ジメチルベンジル基、４−クロロベンジル基、２，
６−ジクロロベンジル基、４−ニトロベンジル基、ベン
ズヒドリル基、Ｚ基、Ｃｌ−Ｚ基、Ｂｒ−Ｚ基、テトラ
ヒドロピラニル基、Ｂｏｃ基などで保護できる。ヒドロ
キシ基は保護されていなくてもよい。
は、例えば、Ｂｚｌ基、４−メトキシベンジル基、３，
４−ジメチルベンジル基、４−クロロベンジル基、２，
６−ジクロロベンジル基、４−ニトロベンジル基、ベン
ズヒドリル基、Ｚ基、Ｃｌ−Ｚ基、Ｂｒ−Ｚ基、テトラ
ヒドロピラニル基、Ｂｏｃ基などで保護できる。ヒドロ
キシ基は保護されていなくてもよい。
【００４５】前記式（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）及び式（Ｉ
ＩＩ）のペプチドは、ペプチド合成の常法に従って、保
護基の着脱、縮合反応を繰返すことにより得ることがで
きる。すなわち、本発明で使用される原料及び中間体の
保護基としては、ペプチド合成で公知の手段、例えば、
加水分解、酸分解、還元、アミノリシス、ヒドラジノリ
シスなどにより容易に脱離する保護基が使用される。
ＩＩ）のペプチドは、ペプチド合成の常法に従って、保
護基の着脱、縮合反応を繰返すことにより得ることがで
きる。すなわち、本発明で使用される原料及び中間体の
保護基としては、ペプチド合成で公知の手段、例えば、
加水分解、酸分解、還元、アミノリシス、ヒドラジノリ
シスなどにより容易に脱離する保護基が使用される。
【００４６】前記式（ＩＩＩ）で表されるペプチドのう
ち、Ｘａが水酸基またはカルボキシル基の保護基である
ペプチドは、例えば、Ｌ−アミノスベリン酸−α−低級
アルキルエステルの側鎖カルボキシル基及び／又はアミ
ノ基に、対応するアミノ酸を１個ずつ順次縮合する逐次
延長法、２〜５個のアミノ酸からなるペプチドを縮合す
るフラグメント縮合法や、これらの縮合法を組合せた方
法により得ることができる。但し、式（ＩＩＩ）で表さ
れるペプチドにおいて、Ｂが水素原子である場合には、
Ｌ−アミノスベリン酸−α−低級アルキルエステルのア
ミノ基を保護しておく必要がある。
ち、Ｘａが水酸基またはカルボキシル基の保護基である
ペプチドは、例えば、Ｌ−アミノスベリン酸−α−低級
アルキルエステルの側鎖カルボキシル基及び／又はアミ
ノ基に、対応するアミノ酸を１個ずつ順次縮合する逐次
延長法、２〜５個のアミノ酸からなるペプチドを縮合す
るフラグメント縮合法や、これらの縮合法を組合せた方
法により得ることができる。但し、式（ＩＩＩ）で表さ
れるペプチドにおいて、Ｂが水素原子である場合には、
Ｌ−アミノスベリン酸−α−低級アルキルエステルのア
ミノ基を保護しておく必要がある。
【００４７】より具体的には、前記式（ＩＩＩ）で表さ
れるペプチドのうち、下記式で表されるペプチドは、例
えば、次のようにして合成することができる。
れるペプチドのうち、下記式で表されるペプチドは、例
えば、次のようにして合成することができる。
【００４８】 Ｘ3 −Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｘ1 ） −Ａｓｎ−Ｘ2 ］−Ｘ （式中、Ｘ1 は対応するアミノ酸残基の保護基、Ｘ2 は
カルボキシル基の保護基、Ｘ3 はアミノ基の保護基、Ｘ
はカルボキシル基の保護基、アミノ酸残基またはペプチ
ド残基を示す）すなわち、Ｌ−アミノスベリン酸−α−
低級アルキルエステルに、Ｎ−保護スレオニン、Ｎ−保
護セリン、およびＮ−保護ロイシンを順次縮合し、次い
でＬ−アミノスベリン酸の側鎖カルボキシル基を活性化
させた後、Ｃ端カルボキシル基が保護されたセリルアス
パラギンを縮合させることにより得られる。
カルボキシル基の保護基、Ｘ3 はアミノ基の保護基、Ｘ
はカルボキシル基の保護基、アミノ酸残基またはペプチ
ド残基を示す）すなわち、Ｌ−アミノスベリン酸−α−
低級アルキルエステルに、Ｎ−保護スレオニン、Ｎ−保
護セリン、およびＮ−保護ロイシンを順次縮合し、次い
でＬ−アミノスベリン酸の側鎖カルボキシル基を活性化
させた後、Ｃ端カルボキシル基が保護されたセリルアス
パラギンを縮合させることにより得られる。
【００４９】前記式（ＩＩＩ）で表されるペプチドのう
ち、Ｘａがアミノ酸残基またはペプチド残基であるペプ
チドは、例えば、上記のようにして得られたペプチドに
対してアミノスベリン酸のカルボキシル基を活性化した
後、Ｘに対応するアミノ酸又は２個以上のアミノ酸から
成るペプチドを逐次延長法やフラグメント縮合法により
縮合することにより得ることができる。また、Ｌ−アミ
ノスベリン酸−α−低級アルキルエステルに、Ｎ−保護
スレオニン、Ｎ−保護セリンおよびＮ−保護ロイシンを
順次縮合し、次いで、Ｘに対応するアミノ酸やペプチド
を逐次延長法及び／又はフラグメント縮合法により縮合
させ、Ｌ−アミノスベリン酸の側鎖カルボキシル基を活
性化させた後、前記と同様にして、セリルアスパラギン
を縮合させることにより得ることができる。
ち、Ｘａがアミノ酸残基またはペプチド残基であるペプ
チドは、例えば、上記のようにして得られたペプチドに
対してアミノスベリン酸のカルボキシル基を活性化した
後、Ｘに対応するアミノ酸又は２個以上のアミノ酸から
成るペプチドを逐次延長法やフラグメント縮合法により
縮合することにより得ることができる。また、Ｌ−アミ
ノスベリン酸−α−低級アルキルエステルに、Ｎ−保護
スレオニン、Ｎ−保護セリンおよびＮ−保護ロイシンを
順次縮合し、次いで、Ｘに対応するアミノ酸やペプチド
を逐次延長法及び／又はフラグメント縮合法により縮合
させ、Ｌ−アミノスベリン酸の側鎖カルボキシル基を活
性化させた後、前記と同様にして、セリルアスパラギン
を縮合させることにより得ることができる。
【００５０】縮合反応では、（ａ）活性化された末端カ
ルボキシル基及び保護基で保護されたα−アミノ基を有
するアミノ酸やペプチドと、遊離のα−アミノ基及び保
護基で保護されたカルボキシル基を有するアミノ酸やペ
プチドとを反応させてもよく、（ｂ）活性化されたα−
アミノ基及び保護されたカルボキシル基を有するアミノ
酸やペプチドと、遊離のカルボキシル基及び保護された
α−アミノ基を有するアミノ酸やペプチドとを反応させ
てもよい。
ルボキシル基及び保護基で保護されたα−アミノ基を有
するアミノ酸やペプチドと、遊離のα−アミノ基及び保
護基で保護されたカルボキシル基を有するアミノ酸やペ
プチドとを反応させてもよく、（ｂ）活性化されたα−
アミノ基及び保護されたカルボキシル基を有するアミノ
酸やペプチドと、遊離のカルボキシル基及び保護された
α−アミノ基を有するアミノ酸やペプチドとを反応させ
てもよい。
【００５１】ペプチド結合生成反応は、慣用の方法、例
えば、Ｃ端活性化法、カップリング試薬を用いるカップ
リング法などにより行なうことができる。Ｃ端活性化法
には、活性エステル法、混合酸無水物法、アジド法、酸
塩化物法、対称無水物法などが含まれる。
えば、Ｃ端活性化法、カップリング試薬を用いるカップ
リング法などにより行なうことができる。Ｃ端活性化法
には、活性エステル法、混合酸無水物法、アジド法、酸
塩化物法、対称無水物法などが含まれる。
【００５２】活性エステルとしては、例えば、シアノメ
チルエステルなどのアルキルエステル；チオフェニルエ
ステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、ｐ−メタン
スルホニルフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエス
テル、２，４−ジニトロフェニルエステル、２，４，６
−トリクロロフェニルエステル、ペンタクロロフェニル
エステルなどのフェニルエステル；ＯＳｕ、Ｎ−ヒドロ
キシフタル酸イミドエステル、ＨＯＮＢなどのジカルボ
ン酸イミドエステル；８−ヒドロキノリンエステルまた
はＮ−ヒドロキシピペリジンエステル、２−ヒドロキシ
ピリジンエステルなどのヒドロキシルアミン誘導体など
が挙げられる。
チルエステルなどのアルキルエステル；チオフェニルエ
ステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、ｐ−メタン
スルホニルフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエス
テル、２，４−ジニトロフェニルエステル、２，４，６
−トリクロロフェニルエステル、ペンタクロロフェニル
エステルなどのフェニルエステル；ＯＳｕ、Ｎ−ヒドロ
キシフタル酸イミドエステル、ＨＯＮＢなどのジカルボ
ン酸イミドエステル；８−ヒドロキノリンエステルまた
はＮ−ヒドロキシピペリジンエステル、２−ヒドロキシ
ピリジンエステルなどのヒドロキシルアミン誘導体など
が挙げられる。
【００５３】混合酸無水物法においては、塩化エチルオ
キシカルボニル、塩化イソブチルオキシカルボニル、イ
ソ吉草酸、ピバル酸などを用いることができる。
キシカルボニル、塩化イソブチルオキシカルボニル、イ
ソ吉草酸、ピバル酸などを用いることができる。
【００５４】カップリング試薬を用いるカップリング法
としては、例えば、ＤＣＣ、水溶性カルボジイミド（Ｗ
ＳＣ）などを用いるカルボジイミド法；ＤＣＣ−アディ
ティブ法；カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）法；ウ
ッドワード（Woodward）反応剤（Ｎ−エチル−５−フェ
ニルイソオキサゾリウム−３′−スルホン酸塩）、Ｎ−
エチル−２′−ヒドロキシベンズイソオキサゾリウムト
リフルオロホウ酸塩などのイソオキゾリウム塩、１−エ
トキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキ
シキノリン（ＥＥＤＱ）、１−エトキシカルボニル−２
−イソブトキシ−１，２−ジヒドロキシキノリン（ＩＩ
ＤＱ）、ＢＯＰ、ＨＢＴＵ、ジフェニルホスホリルアジ
ド（ＤＰＰＡ）を用いる方法；向山らの酸化還元法；４
成分合成法（Ｕｇｉ）法などが例示される。
としては、例えば、ＤＣＣ、水溶性カルボジイミド（Ｗ
ＳＣ）などを用いるカルボジイミド法；ＤＣＣ−アディ
ティブ法；カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）法；ウ
ッドワード（Woodward）反応剤（Ｎ−エチル−５−フェ
ニルイソオキサゾリウム−３′−スルホン酸塩）、Ｎ−
エチル−２′−ヒドロキシベンズイソオキサゾリウムト
リフルオロホウ酸塩などのイソオキゾリウム塩、１−エ
トキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキ
シキノリン（ＥＥＤＱ）、１−エトキシカルボニル−２
−イソブトキシ−１，２−ジヒドロキシキノリン（ＩＩ
ＤＱ）、ＢＯＰ、ＨＢＴＵ、ジフェニルホスホリルアジ
ド（ＤＰＰＡ）を用いる方法；向山らの酸化還元法；４
成分合成法（Ｕｇｉ）法などが例示される。
【００５５】ＤＣＣ−アディティブ法には、例えば、Ｄ
ＣＣ−ＨＯＳｕ法、ＤＣＣ−ＨＯＢｔ法、ＤＣＣ−ＨＯ
ＮＢ法、ＤＣＣ−２−ヒドロキシイミノ−２−シアノ酢
酸エチルエステル法；ＷＳＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳＣ−Ｈ
ＯＢｔ法などが含まれる。
ＣＣ−ＨＯＳｕ法、ＤＣＣ−ＨＯＢｔ法、ＤＣＣ−ＨＯ
ＮＢ法、ＤＣＣ−２−ヒドロキシイミノ−２−シアノ酢
酸エチルエステル法；ＷＳＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳＣ−Ｈ
ＯＢｔ法などが含まれる。
【００５６】水溶性カルボジイミド（ＷＳＣ）には、例
えば、ＥＤＣ、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ′−モルホリノ
エチルカルボジイミド、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ′−
（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）シクロヘキシルカルボジイ
ミドなどが含まれる。水溶性カルボジイミドは、塩酸塩
などの塩であってもよい。
えば、ＥＤＣ、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ′−モルホリノ
エチルカルボジイミド、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ′−
（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）シクロヘキシルカルボジイ
ミドなどが含まれる。水溶性カルボジイミドは、塩酸塩
などの塩であってもよい。
【００５７】好ましいペプチド結合生成反応（縮合反
応）には、カルボジイミド法、アジド法、活性エステル
法及び混合酸無水物法である。さらに好ましい縮合反応
は、ラセミ化を抑制する方法、例えば、活性エステル
法、ＤＣＣ−アディティブ法（例えば、ＤＣＣ−ＨＯＢ
ｔ法、ＤＣＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳ
Ｃ−ＨＯＢｔ法など）などが含まれる。
応）には、カルボジイミド法、アジド法、活性エステル
法及び混合酸無水物法である。さらに好ましい縮合反応
は、ラセミ化を抑制する方法、例えば、活性エステル
法、ＤＣＣ−アディティブ法（例えば、ＤＣＣ−ＨＯＢ
ｔ法、ＤＣＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳ
Ｃ−ＨＯＢｔ法など）などが含まれる。
【００５８】前記式（Ｖ）で表される鎖状ペプチド−樹
脂は、アール・ビー・メリーフィールド（R. B. Merrif
ield, J. Am. Chem. Soc., 85, 2149 (1963)）により開
発された固相法に従って得ることができる。すなわち、
式（Ｖ）で表される鎖状ペプチド−樹脂は、対称酸無水
物法、活性エステル法、ＤＣＣ法などのカルボジイミド
法、ＤＣＣ−アディティブ法などを利用して、官能基を
適当な保護基で保護した保護アミノ酸やフラグメント
を、カルボキシル末端から逐次延長法やフラグメント縮
合法により順次縮合させることにより合成できる。
脂は、アール・ビー・メリーフィールド（R. B. Merrif
ield, J. Am. Chem. Soc., 85, 2149 (1963)）により開
発された固相法に従って得ることができる。すなわち、
式（Ｖ）で表される鎖状ペプチド−樹脂は、対称酸無水
物法、活性エステル法、ＤＣＣ法などのカルボジイミド
法、ＤＣＣ−アディティブ法などを利用して、官能基を
適当な保護基で保護した保護アミノ酸やフラグメント
を、カルボキシル末端から逐次延長法やフラグメント縮
合法により順次縮合させることにより合成できる。
【００５９】担体としての樹脂は、特に限定されない
が、目的ペプチドのカルボキシル末端が酸アミドである
ことから、例えば、アミノメチル樹脂、ベンズヒドリル
アミン樹脂、ｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂、４
−アミノフェノキシメチル樹脂、およびｐ−ヒドロキシ
安息香酸樹脂などが挙げられる。
が、目的ペプチドのカルボキシル末端が酸アミドである
ことから、例えば、アミノメチル樹脂、ベンズヒドリル
アミン樹脂、ｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂、４
−アミノフェノキシメチル樹脂、およびｐ−ヒドロキシ
安息香酸樹脂などが挙げられる。
【００６０】式（Ｉ）（Ｉａ）（Ｉｂ）で表される開環
ペプチド−樹脂は、式（ＩＩＩ）で表される環状ペプチ
ドの前駆体ペプチドを、固相法により調製した式（Ｖ）
で表される鎖状ペプチド−樹脂の固相樹脂上で反応させ
て得るのが好ましい。
ペプチド−樹脂は、式（ＩＩＩ）で表される環状ペプチ
ドの前駆体ペプチドを、固相法により調製した式（Ｖ）
で表される鎖状ペプチド−樹脂の固相樹脂上で反応させ
て得るのが好ましい。
【００６１】固相樹脂上での環化ペプチド前駆体の反応
は、通常の固相法に準じて行なうことができる。式（Ｉ
ＩＩ）で表される環化ペプチド前駆体の使用量は、固相
反応樹脂に対して、例えば、１．０〜３．０当量程度で
ある。
は、通常の固相法に準じて行なうことができる。式（Ｉ
ＩＩ）で表される環化ペプチド前駆体の使用量は、固相
反応樹脂に対して、例えば、１．０〜３．０当量程度で
ある。
【００６２】本発明の第２の特徴は、式（Ｉ）（Ｉａ）
（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂から式（ＩＩ）
（ＩＩａ）（ＩＩｂ）で示される環状ペプチドを製造す
る際、蛋白分解酵素を用いることなく、固相樹脂上で、
鎖状ペプチドを分子内で環化させることにある。
（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂から式（ＩＩ）
（ＩＩａ）（ＩＩｂ）で示される環状ペプチドを製造す
る際、蛋白分解酵素を用いることなく、固相樹脂上で、
鎖状ペプチドを分子内で環化させることにある。
【００６３】通常、鎖状ペプチドを分子内で環化させる
場合、分子間反応により多量体が生成するのを抑制する
ため、希薄な溶液中で環化反応を行なう方法が利用され
ている。このため、必ずしも満足のいく環化収率で環状
ペプチドが得られない場合が多い。一方、前記式（Ｉ）
（Ｉａ）（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂から式
（ＩＩ）（ＩＩａ）（ＩＩｂ）で示される環状ペプチド
を得る反応は、フラグメント縮合による環化反応に対応
するが、フラグメント縮合法によりペプチド結合を生成
させると、特に構成アミノ酸数が多くなるにつれて、ラ
セミ化を伴なうことが知られている。さらに、環状ペプ
チドのペプチド前駆体を、蛋白分解酵素の存在下、固相
反応樹脂上で環化させると、環化収率が極めて低い。
場合、分子間反応により多量体が生成するのを抑制する
ため、希薄な溶液中で環化反応を行なう方法が利用され
ている。このため、必ずしも満足のいく環化収率で環状
ペプチドが得られない場合が多い。一方、前記式（Ｉ）
（Ｉａ）（Ｉｂ）で表される開環ペプチド−樹脂から式
（ＩＩ）（ＩＩａ）（ＩＩｂ）で示される環状ペプチド
を得る反応は、フラグメント縮合による環化反応に対応
するが、フラグメント縮合法によりペプチド結合を生成
させると、特に構成アミノ酸数が多くなるにつれて、ラ
セミ化を伴なうことが知られている。さらに、環状ペプ
チドのペプチド前駆体を、蛋白分解酵素の存在下、固相
反応樹脂上で環化させると、環化収率が極めて低い。
【００６４】しかし、本発明の方法においては、前駆体
鎖状ペプチドが溶液中に均一に溶解している場合とは異
なり、前駆体鎖状ペプチドが溶媒などに不溶な樹脂の網
目構造の表面に化学的に結合し、かつそれぞれの前駆体
鎖状ペプチドが独立して存在している状態と類似の環境
にあるため、分子間の反応の可能性が少なく、高い環化
収率で環状ペプチドを得ることができる。特に前駆体鎖
状ペプチドの環化部位が、アミノスベリン酸の側鎖カル
ボキシル基とＳｅｒ間以外の部位であるため、ラセミ化
を抑制できるだけでなく、環化収率が極めて高くなる。
なお、井上らは、アミノスベリン酸の側鎖カルボキシル
基とＳｅｒとの部位で前駆体鎖状ペプチドを液相合成法
により環化させると、他の部位での環化に比べて環化収
率が著しく低くなることを報告している（T.Inoue, S.K
ishida, M.Ohsaki, H.Kimura, Bull. Chem. Soc. Japa
n, 65 1728 (1992)）。
鎖状ペプチドが溶液中に均一に溶解している場合とは異
なり、前駆体鎖状ペプチドが溶媒などに不溶な樹脂の網
目構造の表面に化学的に結合し、かつそれぞれの前駆体
鎖状ペプチドが独立して存在している状態と類似の環境
にあるため、分子間の反応の可能性が少なく、高い環化
収率で環状ペプチドを得ることができる。特に前駆体鎖
状ペプチドの環化部位が、アミノスベリン酸の側鎖カル
ボキシル基とＳｅｒ間以外の部位であるため、ラセミ化
を抑制できるだけでなく、環化収率が極めて高くなる。
なお、井上らは、アミノスベリン酸の側鎖カルボキシル
基とＳｅｒとの部位で前駆体鎖状ペプチドを液相合成法
により環化させると、他の部位での環化に比べて環化収
率が著しく低くなることを報告している（T.Inoue, S.K
ishida, M.Ohsaki, H.Kimura, Bull. Chem. Soc. Japa
n, 65 1728 (1992)）。
【００６５】固相樹脂上での環化反応には、通常のフラ
グメント縮合法が利用でき、蛋白分解酵素を含まない化
学的な縮合法が利用される。好ましい環化反応には、ラ
セミ化を伴なうことなく環化収率の高い方法、例えば、
アジド法、活性エステル化法、ＤＰＰＡ法、カルボジイ
ミドと活性エステルとを組合せた方法などが含まれる。
特に好ましい環化反応には、ＤＣＣ−アディティブ法
（例えば、ＤＣＣ−ＨＯＢｔ法、ＤＣＣ−ＨＯＳｕ法、
ＷＳＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳＣ−ＨＯＢｔ法など）、ＢＯ
Ｐ試薬やＴＢＴＵ試薬を用いる方法が含まれる。
グメント縮合法が利用でき、蛋白分解酵素を含まない化
学的な縮合法が利用される。好ましい環化反応には、ラ
セミ化を伴なうことなく環化収率の高い方法、例えば、
アジド法、活性エステル化法、ＤＰＰＡ法、カルボジイ
ミドと活性エステルとを組合せた方法などが含まれる。
特に好ましい環化反応には、ＤＣＣ−アディティブ法
（例えば、ＤＣＣ−ＨＯＢｔ法、ＤＣＣ−ＨＯＳｕ法、
ＷＳＣ−ＨＯＳｕ法、ＷＳＣ−ＨＯＢｔ法など）、ＢＯ
Ｐ試薬やＴＢＴＵ試薬を用いる方法が含まれる。
【００６６】環化反応は、温和な条件、例えば、−２０
℃〜４０℃程度で行なうことができる。
℃〜４０℃程度で行なうことができる。
【００６７】固相反応樹脂上で合成された保護基を有す
るペプチドを、慣用の保護基の脱離方法及び樹脂からの
ペプチドの脱離方法、好ましくは酸による脱離反応、例
えば、臭化水素、特にフッ化水素による脱離反応に供す
ることにより、環状ペプチドやエルカトニンが得られ
る。
るペプチドを、慣用の保護基の脱離方法及び樹脂からの
ペプチドの脱離方法、好ましくは酸による脱離反応、例
えば、臭化水素、特にフッ化水素による脱離反応に供す
ることにより、環状ペプチドやエルカトニンが得られ
る。
【００６８】なお、保護基の脱離と、固相反応樹脂から
の環状ペプチドの脱離は、個別に行なってもよく、フッ
化水素などを用いて同時に行なってもよい。
の環状ペプチドの脱離は、個別に行なってもよく、フッ
化水素などを用いて同時に行なってもよい。
【００６９】反応生成物は、例えば、ゲル濾過法、イオ
ン交換クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィー、
高速液体クロマトグラフィー、逆相高速液体クロマトグ
ラフィー、電気泳動法などの慣用の分離精製手段によ
り、単離精製できる。
ン交換クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィー、
高速液体クロマトグラフィー、逆相高速液体クロマトグ
ラフィー、電気泳動法などの慣用の分離精製手段によ
り、単離精製できる。
【００７０】本発明の方法により得られる環状ペプチド
やエルカトニンは、反応条件により、遊離のペプチドま
たはその塩の形態で得られる。遊離のペプチドとその塩
は、慣用の方法により相互に変換可能である。遊離のペ
プチドを、薬理的に許容できる塩とする場合には、例え
ば、塩酸、硫酸、臭化水素酸、リン酸などの無機酸；ギ
酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビ
ン酸、シュウ酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン
酸、安息香酸、サリチル酸、ベンゼンスルホン酸、トル
エンスルホン酸などの有機酸と反応させればよい。
やエルカトニンは、反応条件により、遊離のペプチドま
たはその塩の形態で得られる。遊離のペプチドとその塩
は、慣用の方法により相互に変換可能である。遊離のペ
プチドを、薬理的に許容できる塩とする場合には、例え
ば、塩酸、硫酸、臭化水素酸、リン酸などの無機酸；ギ
酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビ
ン酸、シュウ酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン
酸、安息香酸、サリチル酸、ベンゼンスルホン酸、トル
エンスルホン酸などの有機酸と反応させればよい。
【００７１】ペプチド及び合成エルカトニンは、無機ま
たは有機物質と錯体を形成する。このような物質として
は、例えば、カルシウム、マグネシウム、アルミニウ
ム、コバルト、亜鉛などの金属から誘導される無機化合
物、特にこれらの金属のリン酸塩、ピロリン酸塩、ポリ
リン酸塩などのように僅かに可溶性の塩、水酸化物、ア
ルカリ金属のポリリン酸塩などが挙げられる。
たは有機物質と錯体を形成する。このような物質として
は、例えば、カルシウム、マグネシウム、アルミニウ
ム、コバルト、亜鉛などの金属から誘導される無機化合
物、特にこれらの金属のリン酸塩、ピロリン酸塩、ポリ
リン酸塩などのように僅かに可溶性の塩、水酸化物、ア
ルカリ金属のポリリン酸塩などが挙げられる。
【００７２】また、環状ペプチドや合成エルカトニン
は、薬理作用を長期に亘り発揮させるため、有機物質と
併用してもよい。有機物質としては、例えば、非抗原性
ゼラチン、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸の
スルホン酸エステルまたはリン酸エステル、デキストラ
ン、ポリエチレングリコールなどのグリコール、フィチ
ン酸、ポリグルタミン酸、プロタミンなどが挙げられ
る。
は、薬理作用を長期に亘り発揮させるため、有機物質と
併用してもよい。有機物質としては、例えば、非抗原性
ゼラチン、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸の
スルホン酸エステルまたはリン酸エステル、デキストラ
ン、ポリエチレングリコールなどのグリコール、フィチ
ン酸、ポリグルタミン酸、プロタミンなどが挙げられ
る。
【００７３】本発明の方法により得られる環状ペプチ
ド、特にエルカトニンは、高カルシウム血症、骨粗鬆症
の治療などに使用できる。
ド、特にエルカトニンは、高カルシウム血症、骨粗鬆症
の治療などに使用できる。
【００７４】
【発明の効果】本発明の方法によれば、環状ペプチド、
特にカルシトニン誘導体であるエルカトニンを、工業的
にさらに収率よく製造できる。
特にカルシトニン誘導体であるエルカトニンを、工業的
にさらに収率よく製造できる。
【００７５】
【実施例】以下に、本発明の実施例及び参考例を示す
が、本発明は、これらの実施例に限定されるものではな
い。
が、本発明は、これらの実施例に限定されるものではな
い。
【００７６】実施例及び参考例におけるアミノ酸分析
は、いずれも、被検体を６Ｎ塩酸を用いて１１０℃で、
２４時間加水分解し、減圧乾固した後、行なった。
は、いずれも、被検体を６Ｎ塩酸を用いて１１０℃で、
２４時間加水分解し、減圧乾固した後、行なった。
【００７７】実施例１
【００７８】
【化１３】 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌ
ｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈ
ｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂６２０ｍｇに、５０
％ＴＦＡのジクロロメタン溶液２０ｍｌを加え、室温で
３０分間撹拌した。
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌ
ｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈ
ｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂６２０ｍｇに、５０
％ＴＦＡのジクロロメタン溶液２０ｍｌを加え、室温で
３０分間撹拌した。
【００７９】樹脂を、ジクロロメタン溶液２０ｍｌで５
回、１０％ＤＩＥＡのＤＭＦ溶液２０ｍｌで２回、次い
で、ＤＭＦ２０ｍｌで６回、それぞれ洗浄し、Ｈ−Ｌｅ
ｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ［−
Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＨ］−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂ
ｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−
Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂を得
た。
回、１０％ＤＩＥＡのＤＭＦ溶液２０ｍｌで２回、次い
で、ＤＭＦ２０ｍｌで６回、それぞれ洗浄し、Ｈ−Ｌｅ
ｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ［−
Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＨ］−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂ
ｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−
Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂を得
た。
【００８０】上記樹脂をＮＭＰ２０ｍｌに加え、さらに
ＨＯＢｔ・Ｈ2 Ｏ １８ｍｇおよびＤＣＣ２５ｍｇを加
え、室温で２４時間撹拌した。反応終了後、樹脂をＮＭ
Ｐ、ＤＭＦ、メタノール、ジクロロメタンの順で洗浄し
た後、減圧乾燥し、表記目的物である環状ペプチド−樹
脂６１０ｍｇを得た。
ＨＯＢｔ・Ｈ2 Ｏ １８ｍｇおよびＤＣＣ２５ｍｇを加
え、室温で２４時間撹拌した。反応終了後、樹脂をＮＭ
Ｐ、ＤＭＦ、メタノール、ジクロロメタンの順で洗浄し
た後、減圧乾燥し、表記目的物である環状ペプチド−樹
脂６１０ｍｇを得た。
【００８１】実施例２
【００８２】
【化１４】 下記の６１０ｍｇの環状ペプチド−樹脂
【００８３】
【化１５】 に、アニソール６．０ｍｌとフッ化水素０．６ｍｌを加
え、０℃で１時間撹拌した後、残存するフッ化水素を減
圧留去した。残渣をジエチルエーテルで洗浄した後、１
Ｍ酢酸水溶液３０ｍｌで抽出し、凍結乾燥することによ
り、粗エルカトニン２６０ｍｇを得た。
え、０℃で１時間撹拌した後、残存するフッ化水素を減
圧留去した。残渣をジエチルエーテルで洗浄した後、１
Ｍ酢酸水溶液３０ｍｌで抽出し、凍結乾燥することによ
り、粗エルカトニン２６０ｍｇを得た。
【００８４】得られた粗エルカトニン２６０ｍｇを、イ
オン交換クロマトグラフィーおよびＴＳＫ Ｇｅｌ Ｏ
ＤＳ−１２０Ｔカラム（東ソー（株）製、２．１５×３
０ｃｍ）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーにて
精製し、塩交換操作後、エルカトニン酢酸塩の粉末５６
ｍｇを得た。
オン交換クロマトグラフィーおよびＴＳＫ Ｇｅｌ Ｏ
ＤＳ−１２０Ｔカラム（東ソー（株）製、２．１５×３
０ｃｍ）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーにて
精製し、塩交換操作後、エルカトニン酢酸塩の粉末５６
ｍｇを得た。
【００８５】 ｍｐ ：２４０℃（分解） ［α］20：−９３．１°（Ｃ＝０．２５、０．１Ｍ酢酸
水溶液） Ｒｆ ：０．３９（ｌ−ブタノール：酢酸：水＝４：
１：５の上層） アミノ酸分析値 Ａｓｐ（２）２．０５、Ｔｈｒ（４）３．８６、Ｓｅｒ
（３）２．６７、Ｇｌｕ（３）３．００、Ｇｌｙ（３）
３．０３、Ｐｒｏ（２）１．９８、Ａｌａ（１）１．０
４、Ｖａｌ（２）２．０３、Ａｓｕ（１）１．０１、Ｌ
ｅｕ（５）５．１７、Ｔｙｒ（１）１．０４、Ｌｙｓ
（２）２．０２、Ｈｉｓ（１）１．００、Ａｒｇ（１）
１．０３ 参考例１ Ｂｏｃ−Ａｓｕ−ＯＭｅの製造 Ｈ−Ａｓｕ−ＯＭｅ６．１ｇをＨ2 Ｏ ５０ｍｌに溶解
し、氷冷下、トリエチルアミン４．２ｍｌおよび（Ｂｏ
ｃ）2 ０ ７．２ｇの冷ジオキサン溶液５０ｍｌを加
え、１５分撹拌し、次いで、室温で３０分撹拌した。反
応終了後、ジオキサンを減圧留去し、残液に氷冷下、６
Ｎクエン酸水溶液を加えてｐＨを２に調整した。
水溶液） Ｒｆ ：０．３９（ｌ−ブタノール：酢酸：水＝４：
１：５の上層） アミノ酸分析値 Ａｓｐ（２）２．０５、Ｔｈｒ（４）３．８６、Ｓｅｒ
（３）２．６７、Ｇｌｕ（３）３．００、Ｇｌｙ（３）
３．０３、Ｐｒｏ（２）１．９８、Ａｌａ（１）１．０
４、Ｖａｌ（２）２．０３、Ａｓｕ（１）１．０１、Ｌ
ｅｕ（５）５．１７、Ｔｙｒ（１）１．０４、Ｌｙｓ
（２）２．０２、Ｈｉｓ（１）１．００、Ａｒｇ（１）
１．０３ 参考例１ Ｂｏｃ−Ａｓｕ−ＯＭｅの製造 Ｈ−Ａｓｕ−ＯＭｅ６．１ｇをＨ2 Ｏ ５０ｍｌに溶解
し、氷冷下、トリエチルアミン４．２ｍｌおよび（Ｂｏ
ｃ）2 ０ ７．２ｇの冷ジオキサン溶液５０ｍｌを加
え、１５分撹拌し、次いで、室温で３０分撹拌した。反
応終了後、ジオキサンを減圧留去し、残液に氷冷下、６
Ｎクエン酸水溶液を加えてｐＨを２に調整した。
【００８６】得られた油状成分を酢酸エチルで抽出し、
１Ｎクエン酸水溶液で３回、飽和食塩水で５回洗浄し
た。芒硝で乾燥した後、減圧濃縮し、残渣にｎ−ヘキサ
ンを加えて固化させ、酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再
沈澱して、上記目的物８．７ｇ（収率９６％）を得た。
１Ｎクエン酸水溶液で３回、飽和食塩水で５回洗浄し
た。芒硝で乾燥した後、減圧濃縮し、残渣にｎ−ヘキサ
ンを加えて固化させ、酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再
沈澱して、上記目的物８．７ｇ（収率９６％）を得た。
【００８７】 ｍｐ ：５０−５１℃ ［α］20：−１７．６°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．３８（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例２ Ｂｏｃ−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅの製造 Ｂｏｃ−Ａｓｕ−ＯＭｅ３．０３ｇおよび臭化フェナシ
ル１．９９ｇを酢酸エチル５０ｍｌに溶解し、氷冷下、
トリエチルアミン１．４ｍｌを加え、１時間撹拌し、次
いで、室温で４時間撹拌した。反応混合物を飽和重曹
水、次いで飽和食塩水で洗浄し、芒硝で乾燥した後、減
圧濃縮した。残渣をｎ−ヘキサンで洗浄し、減圧乾燥し
た後、目的とする油状物３．６１ｇ（収率８６％）を得
た。
０：１０：１） 参考例２ Ｂｏｃ−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅの製造 Ｂｏｃ−Ａｓｕ−ＯＭｅ３．０３ｇおよび臭化フェナシ
ル１．９９ｇを酢酸エチル５０ｍｌに溶解し、氷冷下、
トリエチルアミン１．４ｍｌを加え、１時間撹拌し、次
いで、室温で４時間撹拌した。反応混合物を飽和重曹
水、次いで飽和食塩水で洗浄し、芒硝で乾燥した後、減
圧濃縮した。残渣をｎ−ヘキサンで洗浄し、減圧乾燥し
た後、目的とする油状物３．６１ｇ（収率８６％）を得
た。
【００８８】Ｒｆ ：０．８５（クロロホルム：メタノ
ール：水＝９０：１０：１） 参考例３ Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭ
ｅの製造 Ｂｏｃ−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅ３．６１ｇに、氷
冷下、ＴＦＡ５ｍｌを加えて溶解し、室温で１時間放置
した。溶液を再度氷冷し、４Ｎ塩酸／ジオキサン６．４
ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、ｎ−ヘキサンを加え
た。生成した油状物をｎ−ヘキサンで洗浄し、水酸化カ
リウム上で減圧乾燥した。得られた油状物をＤＭＦ１０
ｍｌに溶解し、−１０℃以下の氷冷下で、Ｎ−メチルモ
ルホリン０．８７ｍｌを加えて中和した。この溶液に、
Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ２．６５ｇおよびＨＯ
Ｂｔ・Ｈ2 Ｏ １．４４ｇの冷ＤＭＦ溶液２０ｍｌおよ
びＷＳＣ・ＨＣｌ １．８１ｇの冷ＤＭＦ懸濁液４０ｍ
ｌを順次添加し、−１５℃〜−１０℃で２時間、次いで
４℃で１５時間撹拌した。
ール：水＝９０：１０：１） 参考例３ Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭ
ｅの製造 Ｂｏｃ−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅ３．６１ｇに、氷
冷下、ＴＦＡ５ｍｌを加えて溶解し、室温で１時間放置
した。溶液を再度氷冷し、４Ｎ塩酸／ジオキサン６．４
ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、ｎ−ヘキサンを加え
た。生成した油状物をｎ−ヘキサンで洗浄し、水酸化カ
リウム上で減圧乾燥した。得られた油状物をＤＭＦ１０
ｍｌに溶解し、−１０℃以下の氷冷下で、Ｎ−メチルモ
ルホリン０．８７ｍｌを加えて中和した。この溶液に、
Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ２．６５ｇおよびＨＯ
Ｂｔ・Ｈ2 Ｏ １．４４ｇの冷ＤＭＦ溶液２０ｍｌおよ
びＷＳＣ・ＨＣｌ １．８１ｇの冷ＤＭＦ懸濁液４０ｍ
ｌを順次添加し、−１５℃〜−１０℃で２時間、次いで
４℃で１５時間撹拌した。
【００８９】反応終了後、反応混合液を減圧濃縮し、残
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を、１Ｎクエン酸水
溶液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順
にそれぞれ５回洗浄し、芒硝で乾燥した後、減圧濃縮し
た。残渣に、ｎ−ヘキサンを加えて、固化させ、酢酸エ
チル−ｎ−ヘキサンより再沈澱し、目的物４．３ｇ（収
率８２％）を得た。
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を、１Ｎクエン酸水
溶液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順
にそれぞれ５回洗浄し、芒硝で乾燥した後、減圧濃縮し
た。残渣に、ｎ−ヘキサンを加えて、固化させ、酢酸エ
チル−ｎ−ヘキサンより再沈澱し、目的物４．３ｇ（収
率８２％）を得た。
【００９０】 ｍｐ ：６３−６５℃ ［α］24：−４．５°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．６０（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例４ Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ２９．５ｇおよび臭化
フェナシル１９．９ｇを酢酸エチル２００ｍｌに溶解
し、氷冷下、トリエチルアミン１４ｍｌを加え、１時
間、次いで、４℃で１５時間撹拌した。反応混合物を飽
和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄し、芒硝で乾燥した
後、減圧濃縮した。残渣をｎ−ヘキサンで処理して固化
させ、酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再沈澱し、目的物
３８．０ｇ（収率９２％）を得た。前記操作を繰返すこ
とにより、７６．０ｇのＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｏ
Ｐａｃを得た。
０：１０：１） 参考例４ Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ２９．５ｇおよび臭化
フェナシル１９．９ｇを酢酸エチル２００ｍｌに溶解
し、氷冷下、トリエチルアミン１４ｍｌを加え、１時
間、次いで、４℃で１５時間撹拌した。反応混合物を飽
和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄し、芒硝で乾燥した
後、減圧濃縮した。残渣をｎ−ヘキサンで処理して固化
させ、酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再沈澱し、目的物
３８．０ｇ（収率９２％）を得た。前記操作を繰返すこ
とにより、７６．０ｇのＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｏ
Ｐａｃを得た。
【００９１】 ｍｐ ：６７−６８℃ ［α］24：−９．８°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．８７（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例５ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃ５５ｇに、氷冷
下、ＴＦＡ５０ｍｌを加えて溶解し、室温で１時間放置
した。溶液を減圧濃縮して再度氷冷し、４Ｎ塩酸／ジオ
キサン１００ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、ｎ−ヘキ
サンを加えた。析出した沈澱を瀘取し、水酸化カリウム
上で減圧乾燥した。得られた油状物をＤＭＦ１５０ｍｌ
に溶解し、−１０℃以下の氷冷下、Ｎ−メチルモルホリ
ン１３．６ｍｌを加えて中和した。この溶液にＢｏｃ−
Ｌｅｕ−ＯＨ・Ｈ2 Ｏ ３９．８ｇおよびＨＯＢｔ・Ｈ
2 Ｏ ２６．９ｇの冷ＤＭＦ溶液１００ｍｌおよびＷＳ
Ｃ・ＨＣｌ ３３．７ｇの冷ＤＭＦ懸濁液１００ｍｌを
順次添加し、−１５℃〜−１０℃で２時間、次いで４℃
で１５時間撹拌した。
０：１０：１） 参考例５ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃ５５ｇに、氷冷
下、ＴＦＡ５０ｍｌを加えて溶解し、室温で１時間放置
した。溶液を減圧濃縮して再度氷冷し、４Ｎ塩酸／ジオ
キサン１００ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、ｎ−ヘキ
サンを加えた。析出した沈澱を瀘取し、水酸化カリウム
上で減圧乾燥した。得られた油状物をＤＭＦ１５０ｍｌ
に溶解し、−１０℃以下の氷冷下、Ｎ−メチルモルホリ
ン１３．６ｍｌを加えて中和した。この溶液にＢｏｃ−
Ｌｅｕ−ＯＨ・Ｈ2 Ｏ ３９．８ｇおよびＨＯＢｔ・Ｈ
2 Ｏ ２６．９ｇの冷ＤＭＦ溶液１００ｍｌおよびＷＳ
Ｃ・ＨＣｌ ３３．７ｇの冷ＤＭＦ懸濁液１００ｍｌを
順次添加し、−１５℃〜−１０℃で２時間、次いで４℃
で１５時間撹拌した。
【００９２】反応終了後、反応混合液を減圧濃縮し、残
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を１Ｎクエン酸水溶
液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順に
それぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。
残渣に、ｎ−ヘキサンを加えて、固化させ、酢酸エチル
−ｎ−ヘキサンより再沈澱し、目的物６５．０ｇ（収率
９３％）を得た。
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を１Ｎクエン酸水溶
液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順に
それぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。
残渣に、ｎ−ヘキサンを加えて、固化させ、酢酸エチル
−ｎ−ヘキサンより再沈澱し、目的物６５．０ｇ（収率
９３％）を得た。
【００９３】 ｍｐ ：１００−１０１℃ ［α］24：−１７．１°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．６６（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例６ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃ９．７４
ｇを９０％酢酸水溶液１００ｍｌに溶解し、氷冷下、亜
鉛末３６．１ｇを加え、室温で３時間撹拌した。反応終
了後、反応混合液を瀘過し、瀘液を濃縮した後、酢酸エ
チルで抽出した。抽出液を、１Ｎクエン酸水溶液で５
回、飽和食塩水で５回洗浄し、芒硝で乾燥した後、減圧
濃縮した。残渣に、石油エーテルを加えて、固化させ、
酢酸エチル−石油エーテルで再沈澱し、上記目的物６．
９７ｇ（収率９３％）を得た。
０：１０：１） 参考例６ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＰａｃ９．７４
ｇを９０％酢酸水溶液１００ｍｌに溶解し、氷冷下、亜
鉛末３６．１ｇを加え、室温で３時間撹拌した。反応終
了後、反応混合液を瀘過し、瀘液を濃縮した後、酢酸エ
チルで抽出した。抽出液を、１Ｎクエン酸水溶液で５
回、飽和食塩水で５回洗浄し、芒硝で乾燥した後、減圧
濃縮した。残渣に、石油エーテルを加えて、固化させ、
酢酸エチル−石油エーテルで再沈澱し、上記目的物６．
９７ｇ（収率９３％）を得た。
【００９４】 ｍｐ ：７３−７５℃ ［α］24：３．０°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．３１（クロロホルム：メタノール：水＝８
５：１５：１） 参考例７ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅの製造 Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭ
ｅ２．０ｇに、氷冷下、ＴＦＡ５ｍｌを加えて溶解し、
室温で３０分間放置した。溶液を再度氷冷し、４Ｎ塩酸
／ジオキサン２．４ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、石
油エーテルを加えた。生じた油状物を石油エーテルで洗
浄し、水酸化カリウム上で減圧乾燥した。得られた油状
物をＤＭＦ１５ｍｌに溶解し、−１０℃以下の氷冷下、
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）０．
５７ｍｌを加えて中和した。この溶液にＢｏｃ−Ｌｅｕ
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ １．６ｇおよびＨＯＢｔ・
Ｈ2 Ｏ ０．６６ｇの冷ＤＭＦ溶液１５ｍｌおよびＷＳ
Ｃ・ＨＣｌ １．８１ｇの冷ＤＭＦ懸濁液１５ｍｌを順
次添加し、−１５℃〜−１０℃で２時間、次いで４℃で
１６時間撹拌した。
５：１５：１） 参考例７ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅの製造 Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭ
ｅ２．０ｇに、氷冷下、ＴＦＡ５ｍｌを加えて溶解し、
室温で３０分間放置した。溶液を再度氷冷し、４Ｎ塩酸
／ジオキサン２．４ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、石
油エーテルを加えた。生じた油状物を石油エーテルで洗
浄し、水酸化カリウム上で減圧乾燥した。得られた油状
物をＤＭＦ１５ｍｌに溶解し、−１０℃以下の氷冷下、
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）０．
５７ｍｌを加えて中和した。この溶液にＢｏｃ−Ｌｅｕ
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ １．６ｇおよびＨＯＢｔ・
Ｈ2 Ｏ ０．６６ｇの冷ＤＭＦ溶液１５ｍｌおよびＷＳ
Ｃ・ＨＣｌ １．８１ｇの冷ＤＭＦ懸濁液１５ｍｌを順
次添加し、−１５℃〜−１０℃で２時間、次いで４℃で
１６時間撹拌した。
【００９５】反応終了後、反応混合液を減圧濃縮し、残
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を１Ｎクエン酸水溶
液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順に
それぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。
残渣に、ジエチルエーテル／石油エーテル（１／１混合
液）を加えて固化させ、メタノール−ジエチルエーテル
／石油エーテル（１／１混合液）より再沈澱し、目的物
２．１５ｇ（収率７３％）を得た。
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を１Ｎクエン酸水溶
液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順に
それぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。
残渣に、ジエチルエーテル／石油エーテル（１／１混合
液）を加えて固化させ、メタノール−ジエチルエーテル
／石油エーテル（１／１混合液）より再沈澱し、目的物
２．１５ｇ（収率７３％）を得た。
【００９６】 ｍｐ ：６９−７１℃ ［α］24：−１１．６°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．７２（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例８ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−ＯＭｅの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅ２．１ｇを９０％酢酸水
溶液７０ｍｌに溶解し、氷冷下、亜鉛末４．５ｇを加
え、室温で１４時間撹拌した。反応終了後、反応混合液
を瀘過し、瀘液を濃縮した後、酢酸エチルで抽出した。
抽出液を、５０ｍＭのＥＤＴＡ含有重曹水（ｐＨ８）、
飽和食塩水、１Ｎクエン酸水溶液、および飽和食塩水の
順にそれぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥した後、減圧濃
縮した。残渣に、石油エーテルを加えて固化させ、酢酸
エチル−石油エーテルで再沈澱し、上記目的物１．５６
ｇ（収率８６％）を得た。
０：１０：１） 参考例８ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−ＯＭｅの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ（ＯＰａｃ）−ＯＭｅ２．１ｇを９０％酢酸水
溶液７０ｍｌに溶解し、氷冷下、亜鉛末４．５ｇを加
え、室温で１４時間撹拌した。反応終了後、反応混合液
を瀘過し、瀘液を濃縮した後、酢酸エチルで抽出した。
抽出液を、５０ｍＭのＥＤＴＡ含有重曹水（ｐＨ８）、
飽和食塩水、１Ｎクエン酸水溶液、および飽和食塩水の
順にそれぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥した後、減圧濃
縮した。残渣に、石油エーテルを加えて固化させ、酢酸
エチル−石油エーテルで再沈澱し、上記目的物１．５６
ｇ（収率８６％）を得た。
【００９７】 ｍｐ ：５８−６０℃ ［α］24：−１２．３°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．３６（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例９ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−ＮＨＮＨ2の製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−ＯＭｅ１．５６ｇをメタノール３０ｍｌに溶
解し、氷冷下、ヒドラジン一水和物１．０ｍｌを加え
て、室温で１９時間放置した。反応液を減圧濃縮し、１
−ブタノール飽和５％酢酸水溶液で抽出した。１−ブタ
ノール飽和５％酢酸水溶液で１０回、１−ブタノール飽
和水で５回洗浄し、減圧濃縮後、ジエチルエーテルを加
えて固化させた。メタノール−ジエチルエーテルより再
沈澱し、目的物１．１３ｇ（収率７２％）を得た。
０：１０：１） 参考例９ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−ＮＨＮＨ2の製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−ＯＭｅ１．５６ｇをメタノール３０ｍｌに溶
解し、氷冷下、ヒドラジン一水和物１．０ｍｌを加え
て、室温で１９時間放置した。反応液を減圧濃縮し、１
−ブタノール飽和５％酢酸水溶液で抽出した。１−ブタ
ノール飽和５％酢酸水溶液で１０回、１−ブタノール飽
和水で５回洗浄し、減圧濃縮後、ジエチルエーテルを加
えて固化させた。メタノール−ジエチルエーテルより再
沈澱し、目的物１．１３ｇ（収率７２％）を得た。
【００９８】 ｍｐ ：１８２−１８４℃ ［α］24：−１４．８°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．４１（クロロホルム：メタノール：水＝８
５：１５：１） 参考例１０ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの製造 Ｈ−Ｇｌｙ−ＯＨ１．５ｇをＨ2 Ｏ ７５ｍｌに溶解
し、氷冷下、トリエチルアミン５．６ｍｌおよびＢｏｃ
−Ｌｅｕ−Ｏｓｕ６．６ｇの冷ＴＨＦ溶液７５ｍｌを加
え、２時間、次いで、室温で１７時間撹拌した。ＴＨＦ
を減圧留去し、残渣を酢酸エチルで洗浄した後、氷冷
下、６Ｎクエン酸水溶液でｐＨ３に調整した。生成した
油状物を酢酸エチルで抽出し、１Ｎクエン酸水溶液で１
回、飽和食塩水で５回洗浄した。芒硝で乾燥後、減圧濃
縮し、残渣に、石油エーテルを加えて固化させた。酢酸
エチル−イソプロピルエーテル／石油エーテル（１／１
混合液）より再沈澱し、目的物４．８ｇ（収率８３％）
を得た。
５：１５：１） 参考例１０ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの製造 Ｈ−Ｇｌｙ−ＯＨ１．５ｇをＨ2 Ｏ ７５ｍｌに溶解
し、氷冷下、トリエチルアミン５．６ｍｌおよびＢｏｃ
−Ｌｅｕ−Ｏｓｕ６．６ｇの冷ＴＨＦ溶液７５ｍｌを加
え、２時間、次いで、室温で１７時間撹拌した。ＴＨＦ
を減圧留去し、残渣を酢酸エチルで洗浄した後、氷冷
下、６Ｎクエン酸水溶液でｐＨ３に調整した。生成した
油状物を酢酸エチルで抽出し、１Ｎクエン酸水溶液で１
回、飽和食塩水で５回洗浄した。芒硝で乾燥後、減圧濃
縮し、残渣に、石油エーテルを加えて固化させた。酢酸
エチル−イソプロピルエーテル／石油エーテル（１／１
混合液）より再沈澱し、目的物４．８ｇ（収率８３％）
を得た。
【００９９】 ｍｐ ：１２２−１２４℃ ［α］24：−２８．０°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．６０（クロロホルム：メタノール：水＝５
０：５０：１） 参考例１１ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨ３．５ｇおよび臭化フェ
ナシル２．４ｇを酢酸エチル１００ｍｌに溶解し、氷冷
下、トリエチルアミン１．７ｍｌを加え、１時間、次い
で、４℃で４時間撹拌した。反応混合物を飽和重曹水で
５回、次いで飽和食塩水で５回洗浄し、芒硝で乾燥後、
減圧濃縮した。残渣をイソプロピルエーテルで処理して
固化させ、酢酸エチル−イソプロピルエーテルより再沈
澱し、目的物３．８８ｇ（収率７９％）を得た。
０：５０：１） 参考例１１ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨ３．５ｇおよび臭化フェ
ナシル２．４ｇを酢酸エチル１００ｍｌに溶解し、氷冷
下、トリエチルアミン１．７ｍｌを加え、１時間、次い
で、４℃で４時間撹拌した。反応混合物を飽和重曹水で
５回、次いで飽和食塩水で５回洗浄し、芒硝で乾燥後、
減圧濃縮した。残渣をイソプロピルエーテルで処理して
固化させ、酢酸エチル−イソプロピルエーテルより再沈
澱し、目的物３．８８ｇ（収率７９％）を得た。
【０１００】 ｍｐ ：１１２−１１３℃ ［α］24：−２８．４°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．６０（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例１２ Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ３．８ｇに、氷冷
下、ＴＦＡ１０ｍｌを加えて溶解し、室温で３０分間放
置した。溶液を再度氷冷し、４Ｎ塩酸／ジオキサン７．
０ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、イソプロピルエーテ
ルを加えた。析出物を瀘取し、水酸化カリウム上で減圧
乾燥した。得られた乾燥物をＤＭＦ２０ｍｌに溶解し、
−１０℃以下の氷冷下、ＤＩＥＡ１．６２ｍｌを加えて
中和した。
０：１０：１） 参考例１２ Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ３．８ｇに、氷冷
下、ＴＦＡ１０ｍｌを加えて溶解し、室温で３０分間放
置した。溶液を再度氷冷し、４Ｎ塩酸／ジオキサン７．
０ｍｌを添加し、撹拌振盪した後、イソプロピルエーテ
ルを加えた。析出物を瀘取し、水酸化カリウム上で減圧
乾燥した。得られた乾燥物をＤＭＦ２０ｍｌに溶解し、
−１０℃以下の氷冷下、ＤＩＥＡ１．６２ｍｌを加えて
中和した。
【０１０１】この溶液にＢｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ ２．４
２ｇおよびＨＯＢｔ・Ｈ2 Ｏ １．８８ｇの冷ＤＭＦ溶
液２０ｍｌおよびＷＳＣ・ＨＣｌ ２．３５ｇの冷ＤＭ
Ｆ懸濁液３０ｍｌを順次添加し、−１５℃〜−１０℃で
２時間、次いで４℃で１８時間撹拌した。
２ｇおよびＨＯＢｔ・Ｈ2 Ｏ １．８８ｇの冷ＤＭＦ溶
液２０ｍｌおよびＷＳＣ・ＨＣｌ ２．３５ｇの冷ＤＭ
Ｆ懸濁液３０ｍｌを順次添加し、−１５℃〜−１０℃で
２時間、次いで４℃で１８時間撹拌した。
【０１０２】反応終了後、反応混合液を減圧濃縮し、残
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を１Ｎクエン酸水溶
液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順に
それぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。
残渣に、イソプロピルエーテルを加えて、固化させ、酢
酸エチル−イソプロピルエーテルより再沈澱し、目的物
４．１ｇ（収率８７％）を得た。
渣を酢酸エチルで抽出した。抽出液を１Ｎクエン酸水溶
液、飽和食塩水、飽和重曹水、および飽和食塩水の順に
それぞれ、５回洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。
残渣に、イソプロピルエーテルを加えて、固化させ、酢
酸エチル−イソプロピルエーテルより再沈澱し、目的物
４．１ｇ（収率８７％）を得た。
【０１０３】 ｍｐ ：１５３−１５４℃ ［α］24：−５１．４°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．５７（クロロホルム：メタノール：水＝９
０：１０：１） 参考例１３ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ１．０８ｇ
に、氷冷下、ＴＦＡ５ｍｌを加えて溶解し、室温で３０
分間放置した。溶液を再度氷冷し、イソプロピルエーテ
ルを加え、析出した沈澱を瀘取し、水酸化カリウム上で
減圧乾燥した。得られた乾燥物をＤＭＦ１０ｍｌに溶解
し、−１５℃以下の氷冷下、トリエチルアミン０．３０
ｍｌを加えて中和した。
０：１０：１） 参考例１３ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ１．０８ｇ
に、氷冷下、ＴＦＡ５ｍｌを加えて溶解し、室温で３０
分間放置した。溶液を再度氷冷し、イソプロピルエーテ
ルを加え、析出した沈澱を瀘取し、水酸化カリウム上で
減圧乾燥した。得られた乾燥物をＤＭＦ１０ｍｌに溶解
し、−１５℃以下の氷冷下、トリエチルアミン０．３０
ｍｌを加えて中和した。
【０１０４】Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈ
ｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ−ＮＨＮＨ2１．４ｇをＤＭＦ３
０ｍｌに溶解し、−１５℃以下の氷冷下、４Ｎ塩酸／ジ
オキサン１．３４ｍｌ、次いで、亜硝酸イソアミル０．
２４ｍｌを添加した。ヒドラジド陰性を確認した後、溶
液にトリエチルアミン０．７５ｍｌの冷ＤＭＦ溶液１０
ｍｌを加えてｐＨを７に調整した。この溶液を、先のＤ
ＭＦ溶液に添加し、−２０℃〜−１５℃で２時間、次い
で、氷冷下で２時間、さらに４℃で１８時間撹拌した。
ｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｕ−ＮＨＮＨ2１．４ｇをＤＭＦ３
０ｍｌに溶解し、−１５℃以下の氷冷下、４Ｎ塩酸／ジ
オキサン１．３４ｍｌ、次いで、亜硝酸イソアミル０．
２４ｍｌを添加した。ヒドラジド陰性を確認した後、溶
液にトリエチルアミン０．７５ｍｌの冷ＤＭＦ溶液１０
ｍｌを加えてｐＨを７に調整した。この溶液を、先のＤ
ＭＦ溶液に添加し、−２０℃〜−１５℃で２時間、次い
で、氷冷下で２時間、さらに４℃で１８時間撹拌した。
【０１０５】反応終了後、反応混合液を減圧濃縮し、残
渣に１Ｎクエン酸水溶液を加えて固化させた。ＤＭＦ−
ジエチルエーテルより再沈澱し、上記目的物１．７４ｇ
（収率８５％）を得た。
渣に１Ｎクエン酸水溶液を加えて固化させた。ＤＭＦ−
ジエチルエーテルより再沈澱し、上記目的物１．７４ｇ
（収率８５％）を得た。
【０１０６】 ｍｐ ：２２７−２２９℃（分解点） ［α］24：−９．９°（Ｃ＝１、ＤＭＦ） Ｒｆ ：０．５４（クロロホルム：メタノール：水＝８
５：１５：１） 参考例１４ Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔの製造 Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ２．０ｇ、ＨＯＢｔ
・Ｈ2 Ｏ ０．８２ｇ及びＨＣｌ・Ｈ−Ａｓｎ−ＯＢｕ
ｔ１．０ｇをＤＭＦ５０ｍｌに溶解し、−１０℃以下に
冷却した。この溶液にＷＳＣ・ＨＣｌ １．０２ｇの冷
ＤＭＦ懸濁液２０ｍｌを添加し、−１５℃〜−１０℃で
１時間、次いで４℃で１５時間撹拌した。反応終了後、
反応混合液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチルで抽出し
た。抽出液を１Ｎクエン酸水溶液、飽和食塩水、飽和重
曹水、および飽和食塩水の順にそれぞれ、５回洗浄し、
芒硝で乾燥した後、減圧濃縮した。残渣に、ジエチルエ
ーテルを加えて固化させ、メタノール−ジエチルエーテ
ルより再沈澱し、目的物２．０５ｇ（収率７９％）を得
た。
５：１５：１） 参考例１４ Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔの製造 Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ２．０ｇ、ＨＯＢｔ
・Ｈ2 Ｏ ０．８２ｇ及びＨＣｌ・Ｈ−Ａｓｎ−ＯＢｕ
ｔ１．０ｇをＤＭＦ５０ｍｌに溶解し、−１０℃以下に
冷却した。この溶液にＷＳＣ・ＨＣｌ １．０２ｇの冷
ＤＭＦ懸濁液２０ｍｌを添加し、−１５℃〜−１０℃で
１時間、次いで４℃で１５時間撹拌した。反応終了後、
反応混合液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチルで抽出し
た。抽出液を１Ｎクエン酸水溶液、飽和食塩水、飽和重
曹水、および飽和食塩水の順にそれぞれ、５回洗浄し、
芒硝で乾燥した後、減圧濃縮した。残渣に、ジエチルエ
ーテルを加えて固化させ、メタノール−ジエチルエーテ
ルより再沈澱し、目的物２．０５ｇ（収率７９％）を得
た。
【０１０７】 ｍｐ ：１５８−１６０℃ ［α］24：−１．６°（Ｃ＝１、メタノール） Ｒｆ ：０．５５（クロロホルム：メタノール：水＝８
５：１５：１） 参考例１５ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ０．９
７ｇをＤＭＦ５ｍｌに溶解し、氷冷下、４０％ピペリジ
ンの冷ＤＭＦ溶液５ｍｌを加えて３０分間撹拌後、減圧
濃縮した。残渣にｎ−ヘキサンを加え、生成した油状物
をｎ−ヘキサンで洗浄し、減圧乾燥した。得られた油状
物をＤＭＦ１５ｍｌに溶解し、−１０℃以下に冷却した
後、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ａｓｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ１．
６ｇおよびＨＯＢｔ・Ｈ2 Ｏ ０．２５ｇの冷ＤＭＦ溶
液３０ｍおよびＷＳＣ・ＨＣｌ ０．３２ｇの冷ＤＭＦ
懸濁液２０ｍｌを順次添加し、−１５℃〜−１０℃で２
時間、次いで４℃で４８時間撹拌した。
５：１５：１） 参考例１５ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃの製造 Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ０．９
７ｇをＤＭＦ５ｍｌに溶解し、氷冷下、４０％ピペリジ
ンの冷ＤＭＦ溶液５ｍｌを加えて３０分間撹拌後、減圧
濃縮した。残渣にｎ−ヘキサンを加え、生成した油状物
をｎ−ヘキサンで洗浄し、減圧乾燥した。得られた油状
物をＤＭＦ１５ｍｌに溶解し、−１０℃以下に冷却した
後、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ａｓｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ１．
６ｇおよびＨＯＢｔ・Ｈ2 Ｏ ０．２５ｇの冷ＤＭＦ溶
液３０ｍおよびＷＳＣ・ＨＣｌ ０．３２ｇの冷ＤＭＦ
懸濁液２０ｍｌを順次添加し、−１５℃〜−１０℃で２
時間、次いで４℃で４８時間撹拌した。
【０１０８】反応終了後、反応混合液を減圧濃縮し、残
渣に１Ｎクエン酸水溶液を加えて固化させた。ＤＭＦ−
メタノールより再沈澱し、上記目的物１．９ｇ（収率９
０％）を得た。
渣に１Ｎクエン酸水溶液を加えて固化させた。ＤＭＦ−
メタノールより再沈澱し、上記目的物１．９ｇ（収率９
０％）を得た。
【０１０９】 分解点：２３６℃ ［α］24：−１２．０°（Ｃ＝１、ＤＭＦ） Ｒｆ ：０．６１（クロロホルム：メタノール：水＝８
５：１５：１） 参考例１６ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ１．６ｇを７０％酢
酸のＤＭＦ溶液２００ｍｌに溶解し、氷冷下、亜鉛末
４．２ｇを加え、４時間撹拌した。
５：１５：１） 参考例１６ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの製造 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＰａｃ１．６ｇを７０％酢
酸のＤＭＦ溶液２００ｍｌに溶解し、氷冷下、亜鉛末
４．２ｇを加え、４時間撹拌した。
【０１１０】反応終了後、反応混合液を瀘過し、瀘液を
濃縮した後、Ｈ2 Ｏを加えて固化させた。析出物を瀘取
し、Ｈ2 Ｏ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ含有酢酸アンモニウム
水溶液（ｐＨ８）、Ｈ2 Ｏ、１Ｎクエン酸水溶液および
Ｈ2 Ｏの順で洗浄し乾燥した。ＤＭＦ−酢酸エチルで再
沈澱し、目的物１．４ｇ（収率９５％）を得た。
濃縮した後、Ｈ2 Ｏを加えて固化させた。析出物を瀘取
し、Ｈ2 Ｏ、５０ｍＭ ＥＤＴＡ含有酢酸アンモニウム
水溶液（ｐＨ８）、Ｈ2 Ｏ、１Ｎクエン酸水溶液および
Ｈ2 Ｏの順で洗浄し乾燥した。ＤＭＦ−酢酸エチルで再
沈澱し、目的物１．４ｇ（収率９５％）を得た。
【０１１１】 分解点：２３５℃ ［α］24：−１２．３°（Ｃ＝１、ＤＭＦ） Ｒｆ ：０．５１（クロロホルム：メタノール：水＝７
０：３０：１） 元素分析値 計算値 Ｃ71Ｈ106 Ｎ10Ｏ18・３／２Ｈ2 Ｏ： Ｃ Ｈ Ｎ ６０．２８％ ７．７７％ ９．９０％ 実測値 ６０．０６％ ７．８０％ １０．１５％ アミノ酸分析値 Ａｓｐ（１）１．０１、Ｔｈｒ（１）１．００、Ｓｅｒ
（２）１．７３、Ｇｌｙ（１）１．００、Ｖａｌ（１）
０．９８、Ａｓｕ（１）０．９９、Ｌｅｕ（２）２．０
３ 参考例１７ Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ
（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−
Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−
Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂の製造 ｐ−メチルベンズヒドリルアミンポリスチレン樹脂
（０．４２ミリモル／ｇ樹脂、１％ジビニルベンゼン架
橋、１００〜２００メッシュ：（株）ペプチド研究所
製）１．１９ｇを出発担体として、固相法により、下記
アミノ酸誘導体（いずれも（株）ペプチド研究所製）
を、順次、縮合・脱Ｂｏｃ反応に付し、ペプチド鎖を構
築した。
０：３０：１） 元素分析値 計算値 Ｃ71Ｈ106 Ｎ10Ｏ18・３／２Ｈ2 Ｏ： Ｃ Ｈ Ｎ ６０．２８％ ７．７７％ ９．９０％ 実測値 ６０．０６％ ７．８０％ １０．１５％ アミノ酸分析値 Ａｓｐ（１）１．０１、Ｔｈｒ（１）１．００、Ｓｅｒ
（２）１．７３、Ｇｌｙ（１）１．００、Ｖａｌ（１）
０．９８、Ａｓｕ（１）０．９９、Ｌｅｕ（２）２．０
３ 参考例１７ Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ
（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−
Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−
Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂の製造 ｐ−メチルベンズヒドリルアミンポリスチレン樹脂
（０．４２ミリモル／ｇ樹脂、１％ジビニルベンゼン架
橋、１００〜２００メッシュ：（株）ペプチド研究所
製）１．１９ｇを出発担体として、固相法により、下記
アミノ酸誘導体（いずれも（株）ペプチド研究所製）
を、順次、縮合・脱Ｂｏｃ反応に付し、ペプチド鎖を構
築した。
【０１１２】 Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ ４３０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ ６１８ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ ３５０ｍｇ Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ ３７８ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ ３５０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ ４３４ｍｇ Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ ６４７ｍｇ Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ ６１８ｍｇ Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ １００８ｍｇ
×２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ ４３０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−ＯＨ ９８９ｍｇ Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ ６１８ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ ４９２ｍｇ
×２ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ ５００ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ ８３０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−ＯＨ ８１８ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ ５００ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ ６７４ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ ４９２ｍｇ
×２ Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ ５９０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ ５００ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ ８３０ｍｇ これらのアミノ酸誘導体のうち、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏ
ｓ）−ＯＨ及びＢｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨの縮合は、ＨＯＢ
ｔを用いる活性エステル法により縮合反応を行った。こ
れらの縮合反応は２回繰返した。その他のアミノ酸誘導
体については対称酸無水物法により縮合反応に供した。
このようにして、標記のペプチド−樹脂２．１８ｇを得
た。
×２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ ４３０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−ＯＨ ９８９ｍｇ Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ ６１８ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ ４９２ｍｇ
×２ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ ５００ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ ８３０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−ＯＨ ８１８ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ ５００ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ ６７４ｍｇ Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ ４９２ｍｇ
×２ Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ ５９０ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ ５００ｍｇ Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ ８３０ｍｇ これらのアミノ酸誘導体のうち、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏ
ｓ）−ＯＨ及びＢｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨの縮合は、ＨＯＢ
ｔを用いる活性エステル法により縮合反応を行った。こ
れらの縮合反応は２回繰返した。その他のアミノ酸誘導
体については対称酸無水物法により縮合反応に供した。
このようにして、標記のペプチド−樹脂２．１８ｇを得
た。
【０１１３】参考例１８ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌ
ｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐ
ｒｏ−ＮＨ−樹脂の製造 Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ
（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−
Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−
Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂６２５ｍｇに５０％ＴＦＡのジクロ
ロメタン溶液２０ｍｌを加え、室温で３０分間撹拌し
た。樹脂をジクロロメタン２０ｍｌで５回、１０％ＤＩ
ＥＡのＤＭＦ溶液２０ｍｌで２回、次いで、ＤＭＦ２０
ｍｌで６回、それぞれ洗浄して、Ｈ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂ
ｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−
Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂を得
た。
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌ
ｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ
−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐ
ｒｏ−ＮＨ−樹脂の製造 Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ
（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−
Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−
Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂６２５ｍｇに５０％ＴＦＡのジクロ
ロメタン溶液２０ｍｌを加え、室温で３０分間撹拌し
た。樹脂をジクロロメタン２０ｍｌで５回、１０％ＤＩ
ＥＡのＤＭＦ溶液２０ｍｌで２回、次いで、ＤＭＦ２０
ｍｌで６回、それぞれ洗浄して、Ｈ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−
Ｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂ
ｒ−Ｚ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−
Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ−樹脂を得
た。
【０１１４】上記樹脂をＮＭＰ２０ｍｌに加え、さらに
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨ１６７ｍｇ、ＨＯＢｔ・
Ｈ2 Ｏ ２２ｍｇおよびＤＣＣ３０ｍｇを加え、室温で
４８時間撹拌した。
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｕ［−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｎ−ＯＢｕｔ］−
Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨ１６７ｍｇ、ＨＯＢｔ・
Ｈ2 Ｏ ２２ｍｇおよびＤＣＣ３０ｍｇを加え、室温で
４８時間撹拌した。
【０１１５】反応終了後、樹脂をＮＭＰ、ＤＭＦ、メタ
ノール、ジクロロメタンの順で洗浄した後、減圧乾燥
し、標記の開環ペプチド−樹脂６２０ｍｇを得た。
ノール、ジクロロメタンの順で洗浄した後、減圧乾燥
し、標記の開環ペプチド−樹脂６２０ｍｇを得た。
Claims (4)
- 【請求項１】 下記式（Ｉ） 【化１】 ［式中、Ａは、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅ
ｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−
Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1
）−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｘ2 、Ｓｅｒ（Ｘ1 ）−Ａｓｎ
−Ｘ2 、またはＳｅｒ（Ｘ1 ）−Ｘ2 を示し、 ＢはＸ3 、Ｘ3 −Ｔｈｒ（Ｘ1 ）、Ｘ3 −Ｓｅｒ（Ｘ1
）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）、Ｘ3 −Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｘ1 ）
−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）、またはＸ3 −Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅ
ｒ（Ｘ1 ）−Ｔｈｒ（Ｘ1 ）を示す。Ｘ1 は水素原子又
は水酸基の保護基を示し、Ｘ2 は水酸基又はカルボキシ
ル基の保護基を示し、Ｘ3 は水素原子又はアミノ基の保
護基を示す。Ｘは、Resin に対する直接結合、アミノ酸
残基又はペプチド残基を示す。Resin は固相反応樹脂を
示す。各アミノ酸残基は保護基で保護されていてもよ
い］で表される開環ペプチド−樹脂を、蛋白分解酵素を
用いることなく環化反応に供し、次いで環化したペプチ
ドを樹脂から脱離させ、下記式（ＩＩ） 【化２】 （式中、Ｘ′は水酸基、アミノ基、アミノ酸残基または
ペプチド残基を示し、各アミノ酸残基は保護基で保護さ
れていてもよい）で表される環状ペプチドまたはその酸
付加塩もしくは錯体を製造する方法。 - 【請求項２】 下記式（Ｉａ） 【化３】 （式中、Ａ、ＢおよびResin は前記に同じ。Ａ1 〜Ａ22
は下記のアミノ酸残基を示す。各アミノ酸残基は保護基
で保護されていてもよい。 Ａ1 ：ＶａｌまたはＭｅｔ Ａ2 ：ＳｅｒまたはＧｌｙ Ａ3 ：Ｌｙｓ、ＴｈｒまたはＡｌａ Ａ4 ：ＬｅｕまたはＴｙｒ Ａ5 ：Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＴｒｐ Ａ6 ：Ｇｌｎ、ＬｙｓまたはＡｒｇ Ａ7 ：Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＡｓｎ Ａ8 ：ＬｅｕまたはＰｈｅ Ａ9 ：ＨｉｓまたはＡｓｎ Ａ10：ＬｙｓまたはＡｓｎ Ａ11：Ｌｅｕ、ＰｈｅまたはＴｙｒ Ａ12：ＧｌｎまたはＨｉｓ Ａ13：ＴｈｒまたはＡｒｇ Ａ14：ＴｙｒまたはＰｈｅ Ａ15：ＰｒｏまたはＳｅｒ Ａ16：Ａｒｇ、ＧｌｙまたはＧｌｎ Ａ17：ＴｈｒまたはＭｅｔ Ａ18：Ａｓｐ、Ａｌａ、ＡｓｎまたはＧｌｙ Ａ19：Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ＴｈｒまたはＰｈｅ Ａ20：Ａｌａ、Ｖａｌ、ＰｒｏまたはＳｅｒ Ａ21：ＧｌｙまたはＧｌｕ Ａ22：ＴｈｒまたはＡｌａ で表される開環ペプチド−樹脂を、蛋白分解酵素を用い
ることなく環化反応に供し、次いで環化したペプチドを
樹脂から脱離させ、下記式（ＩＩａ） 【化４】 （式中、Ａ1 〜Ａ22は前記に同じ。各アミノ酸残基は保
護基で保護されていてもよい）で表される環状ペプチド
またはその酸付加塩もしくは錯体を製造する請求項１記
載の方法。 - 【請求項３】 下記式（Ｉｂ）で表される開環ペプチド
−樹脂を、環化反応に供する請求項１又は２記載の環状
ペプチドまたはその酸付加塩もしくは錯体の製造方法。 【化５】 （式中、Ａ、ＢおよびResin は前記に同じ。各アミノ酸
残基は保護基で保護されていてもよい） - 【請求項４】 下記式（ＩＩＩ） 【化６】 ［式中、ＡおよびＢは前記に同じ。Ｘａは水酸基、カル
ボキシル基の保護基、アミノ酸残基または下記式（Ｉ
Ｖ） −Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −Ｘ4 （ＩＶ） （Ａ1 およびＡ2 は前記に同じ。Ｘ4 は水酸基またはカ
ルボキシル基の保護基を示す）で表されるペプチド残基
を示す］で表される環状ペプチド前駆体と、下記式
（Ｖ） Ｙ−Ａ3 −Ａ4 −Ａ5 −Ａ6 −Ａ7 −Ａ8 −Ａ9 −Ａ10−Ａ11−Ａ12−Ａ13− Ａ14−Ａ15−Ａ16−Ａ17−Ａ18−Ａ19−Ｇｌｙ−Ａ20−Ａ21−Ａ22−Ｐｒｏ−Re sin （Ｖ） ［式中、Ｙは、水素原子、アミノ基の保護基又はＸ5 −
Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −（Ｘ5 は水素原子またはアミノ基
の保護基）を示す。ただし、Ｘが水酸基またはカルボキ
シル基の保護基であるとき、ＹはＸ5 −Ａ1 −Ｌｅｕ−
Ａ2 −であり、Ｘが−Ａ1 −Ｌｅｕ−Ａ2 −であると
き、Ｙは水素原子またはアミノ基の保護基である。Resi
n 、Ａ1 〜Ａ22は前記に同じ。各アミノ酸残基は保護基
で保護されていてもよい］で表される鎖状ペプチド−樹
脂とを縮合させ、式（Ｉ）で表される開環ペプチド−樹
脂を得る請求項１記載の環状ペプチドまたはその酸付加
塩もしくは錯体の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4339821A JPH06157593A (ja) | 1992-11-25 | 1992-11-25 | 環状ペプチドの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4339821A JPH06157593A (ja) | 1992-11-25 | 1992-11-25 | 環状ペプチドの製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06157593A true JPH06157593A (ja) | 1994-06-03 |
Family
ID=18331144
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4339821A Pending JPH06157593A (ja) | 1992-11-25 | 1992-11-25 | 環状ペプチドの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06157593A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5962270A (en) * | 1996-02-06 | 1999-10-05 | Bionebraska, Inc. | Recombinant preparation of calcitonin fragments and use thereof in the preparation of calcitonin and related analogs |
-
1992
- 1992-11-25 JP JP4339821A patent/JPH06157593A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5962270A (en) * | 1996-02-06 | 1999-10-05 | Bionebraska, Inc. | Recombinant preparation of calcitonin fragments and use thereof in the preparation of calcitonin and related analogs |
| US6251635B1 (en) | 1996-02-06 | 2001-06-26 | Bionebraska, Inc. | Recombinant preparation of calcitonin fragments and use thereof in the preparation of calcitonin and related analogs |
| US6410707B2 (en) | 1996-02-06 | 2002-06-25 | Bionebraska, Inc. | Recombinant preparation of calcitonin fragments and use thereof in the preparation of calcitonin and related analogs |
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