JPH0613499U - 培養容器 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 培養容器内部の有効容積が自在に変えら
れ、培養液を追加するだけで簡単に大量培養に移行で
き、かつ無菌性が保持できる。 【構成】 ガス透過性合成樹脂製の袋状可撓性容器１
の少なくとも片面の外表面に貼着、剥離可能な貼着部
６，７が設けられ、該可撓性容器１の一端部８に少なく
とも二つの筒状体２，３が取付けられ、各筒状体２，３
の内部は可撓性容器１の内部と連通されている。

Description

【考案の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】

本考案は、細胞を培養液と接触させて培養する培養容器に関する。

【０００２】

【従来の技術】

細胞を培養液と接触させて培養する培養容器としては、二枚の可撓性プラスチ ックシートを重ね合わせて袋状に形成した容器本体に、第１の接続部材と第２の 接続部材とを取付けた細胞培養容器が特開昭６３−２１４１７８号公報に開示さ れている。

【０００３】

【考案が解決しようとする課題】

ところで生体の細胞を培養する場合、始めから目的の細胞を多く集めるのは困 難であり、このため、小容器のウェルタイプのシャーレから培養を始め、細胞が 増えるに従って、シャーレ、フラスコへと徐々に大きな容器に移していく方法が 一般的に行われている。このためかなりの手間を要し、また、細胞溶液を次の容 器に移す毎に、微生物汚染の危険に曝されていた。

【０００４】 また、上記公報に記載のある培養容器は容量が一定であるため、小容量の培養 容器を用いた場合には、大量培養に移行するときに他の容器に移さねばならず、 手間を要し、微生物汚染の危険に曝される等の欠点がある。又逆に大容量の培養 容器を用いた場合には、培養する細胞数が少ないと容器内の細胞濃度が薄くなり 、成長までに通常の数倍の時間を要し、このため当初に相当数の細胞数を必要と する等の欠点があった。

【０００５】 本考案は、上記欠点に鑑み、培養容器内部の有効容積が自在に変えられ、培養 液を追加するだけで簡単に大量培養に移行することができ、かつ無菌性が保持で きる培養容器を提供することを目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】

本考案で使用される袋状可撓性容器はガス透過性合成樹脂より製されるが、そ の透過性は酸素ガスは６００〜３０００ｍｌ／ｍ² ・２４Ｈｒ・ａｔｍが好まし く、炭酸ガスは１０００〜３０，０００ｍｌ／ｍ² ・２４Ｈｒ・ａｔｍが好まし い。 合成樹脂としては、軟質塩化ビニル樹脂、エチレン酢酸ビニル樹脂、ポリエチ レン、ポリプロピレン、ポリブタジエン、四弗化エチレン、シリコーンゴム等が 挙げられ、塩化ビニル樹脂、又は塩化ビニル−エチレン共重合体１００重量部と エチレン−一酸化炭素−ｎ−ブチルアクリレート共重合体（重量比５０〜８０： ５〜３０：１５〜６０）１００〜２００重量部との混合物が好ましい。

【０００７】 本考案において、貼着部は、可撓性容器のガス透過性を妨げないように、可撓 性容器の周縁部或いは溶着シール部に設けるのが望ましい。

【０００８】 また貼着部に用いる材料としては、両面接着テープ、マジックテープ（登録商
標）等が挙げ られる。両面接着テープはそのまま接着し、マジックテープは粘着剤で接着して 使用する。

【０００９】 また筒状体の材質は、可撓性容器と溶着可能な合成樹脂製とするのが望ましく 、可撓性容器と同一の材質を用いるのが好ましい。 筒状体は、細胞と培養液を注入する注入口、培養後内容物を取出す取出口とし て用いることができる。また筒状体の先端に、培養液を入れ易いようにルアー式 のコネクター、或いは培養液をサンプリングしたり薬液を注入したりするための 混注口などを設けてもよく、筒状体の途中に押圧により流路を遮断することがで きるクランプ等を挿入するようにしてもよい。

【００１０】 また可撓性容器の溶着方法としては、高周波、超音波或いはヒートシールによ る溶着等が挙げられる。好ましくは高周波で溶着するのがよい。

【００１１】 また可撓性容器の少なくとも片面に透明な部分を設けておけば、外部から内部 を観察することができるので望ましい。

【００１２】

【作用】

本考案においては、ガス透過性合成樹脂製の袋状可撓性容器の少なくとも片面 の外表面に相互に貼着、剥離可能な貼着部が設けられ、該可撓性容器の一端部に 少なくとも二つの筒状体が取付けられ、各筒状体内部は可撓性容器の内部と連通 されており、可撓性容器は折畳まれ、その折畳み面が貼着部で貼着されて、可撓 性容器が複数の有効容積を有する容器（例えば三折りの場合は三個の容器）に実 質的に分離される。 この実質的に分離された容器の一つに細胞と培養液とを注入して培養した後、 順次折畳み面の貼着部を剥がし折畳みを解消して、分離された容器同士を接続さ せ、容器の有効面積を拡大し、必要な培養液をこの容器に追加注入する。 これにより、培養液を追加するだけで簡単に大量培養への移行が可能となる。

【００１３】 また一つの培養容器のみで、大量培養への移行が可能となり、細胞溶液を次の 容器に移す必要がないので、無菌性が保持される。

【００１４】

【実施例】

以下、本考案の培養容器を図面を用いて説明する。 図１は本考案の培養容器の一実施例を示す斜視図である。 １は塩化ビニル−エチレン共重合体（重量比９６：４、平均重合度１３００） １００重量部とエチレン−一酸化炭素−ｎ−ブチルアクリレート共重合体（重量 比５７：１０：３３）１６０重量部よりなる組成物を押出成形して得られたフィ ルム（厚み０．１５ｍｍ、酸素ガス透過性１６８０ｍｌ／ｍ² ・２４Ｈｒ・ａｔ ｍ、炭酸ガス透過性１２，４３０ｍｌ／ｍ² ・２４Ｈｒ・ａｔｍ）で製された可 撓性容器であり、その周縁は高周波溶着されている。 可撓性容器１の一端部である上端部８には、培養液を注入するための軟質塩化 ビニル樹脂製の筒状体２と、内容物を取出すための軟質塩化ビニル樹脂製の筒状 体３とが溶着され、筒状体２，３の内部は可撓性容器１の内部と連通されている 。 筒状体３の端末は溶封して使用し、（予め溶封しておいてもよい）、培養後内 容物を取出すときに針孔をあけ、内容物を取出す。 ４は培養途中に内容液をサンプリングしたり、薬液を注入したりするための混 注口、５は筒状体２の流路を押込むことにより遮断することができるクランプで ある。 ６，７はそれぞれ可撓性容器１の上端部８及び下端部９の周縁に沿って各二箇 所に設けられた貼着部で、この貼着部６，７に両面接着テープが貼着されている 。この貼着部６，７はさらに周縁の溶着シール部１０，１１に設けてもよい。

【００１５】 次にこの培養容器の使用方法を説明する。 図２は本考案の培養容器の使用方法の一例を示す斜視図である。 この培養容器を使用するには、先ず下端部９の貼着部７と上端部８の貼着部６ の両面テープの剥離紙を取り、図２に示すように、可撓性容器１を三折りに折畳 み、折畳み面を両面接着テープで貼着する。 これにより可撓性容器１がａ，ｂ，ｃの三つの部分に実質上分離される。 先ず最初にａの部分を培養容器Ａとして使用し、筒状体２から細胞と培養液と を容器Ａ内に注入し、培養する。 次いで貼着部５の両面接着テープを剥がして折畳み面の一つを解消し、ａ部分 とｂ部分とを同一平面上にしてａ＋ｂの有効容積の培養容器Ｂとして使用し、こ れに培養液を追加してより大量の培養を行う。 次いで貼着部６の両面接着テープを剥がして最後の折畳み面を解消し、可撓性 容器１を一つの平面としたａ＋ｂ＋ｃの有効容積の培養容器Ｃとして使用し、さ らに培養液を追加して大量培養する。

【００１６】 なお貼着部と貼着位置とは任意に変えることができるので、培養容器内部の有 効容積を自在に変えることができ、一つの培養容器で小量の培養から培養液を追 加するだけで簡単に大量培養に移行させることができる。

【００１７】 次に使用例を説明する。 上記のように三折りにした培養容器の培養液注入筒状体２からマウスミエロー マ細胞Ｐ３Ｕ１ (ATCC CRL 1597 ; 5 ×10⁶ cells)、牛胎児血清 (10%)を含む培 養液 (RPM1 1640 ; 100ml)を入れ、３７℃の炭酸ガスインキュベータ内で培養し た。２日後 (細胞数 ; 5×10⁷ cells)に上端部の両面接着テープを剥がして可撓 性容器を広げ、牛胎児血清を含む培養液 (200ml)を加えた。３日後に下端部の両 面接着テープを剥がし、培養液 (300ml)を更に追加し、４日間培養した後筒状体 ３に針孔をあけて取出した。最終日の細胞数は３．８×１０⁹ 個であった。

【００１８】

【考案の効果】

本考案の培養容器は、ガス透過性合成樹脂製の袋状可撓性容器の少なくとも片 面の外表面に相互に貼着、剥離可能な貼着部が設けられているので、培養容器内 部の有効容積を折畳みと貼着とにより自在に変えることができ、培養液追加注入 の操作だけで、一つの培養容器で簡単に培養規模を拡大することができる。

【００１９】 また一つの培養容器のみで、大量培養に移行することができるので、細胞溶液 を次の容器に移す必要がなく、無菌性が保持され、微生物に汚染されることがな い。

【００２０】 また自在に有効容積が変えられる袋状可撓性容器のため、培養に適した細胞濃 度で細胞を培養することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本考案の培養容器の一実施例を示す斜視図であ
る。

【図２】本考案の培養容器の使用方法の一例を示す斜視
図である。

【符号の説明】

１ 可撓性容器 ２，３ 筒状体 ４ 混注口 ６，７ 貼着部 ８ 上端部 ９ 下端部

Claims (1)

【実用新案登録請求の範囲】
1. 【請求項１】 ガス透過性合成樹脂製の袋状可撓性容
   器の少なくとも片面の外表面に相互に貼着、剥離可能な
   貼着部が設けられ、該可撓性容器の一端部に少なくとも
   二つの筒状体が取付けられ、各筒状体内部は可撓性容器
   の内部と連通されていることを特徴とする培養容器。