JPH0564291B2 - - Google Patents

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JPH0564291B2
JPH0564291B2 JP59189055A JP18905584A JPH0564291B2 JP H0564291 B2 JPH0564291 B2 JP H0564291B2 JP 59189055 A JP59189055 A JP 59189055A JP 18905584 A JP18905584 A JP 18905584A JP H0564291 B2 JPH0564291 B2 JP H0564291B2
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JP
Japan
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light
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flow cell
wavelength
wall
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JP59189055A
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JPS6166947A (ja
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Bunro Kawaguchi
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Canon Inc
Original Assignee
Canon Inc
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Publication of JPS6166947A publication Critical patent/JPS6166947A/ja
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers
    • G01N15/1456Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals
    • G01N15/1459Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals the analysis being performed on a sample stream
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers
    • G01N15/1434Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers using an analyser being characterised by its optical arrangement
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/645Specially adapted constructive features of fluorimeters
    • G01N2021/6482Sample cells, cuvettes

Description

【発明の詳細な説明】 (技術分野) 本発明は高速で流れる粒子に光を照射しその散
乱光及び螢光を検出して粒子解析を行なうフロー
サイトメータのごとき粒子解析装置に関する。
(従来技術) フローサイトメータとはフローセル内を高速で
流れる細胞粒子浮遊溶液に例えば、レーザ光を照
射し、その散乱光及び螢光を検出し、細胞粒子の
性質、構造を解明する装置であり、細胞化学、免
疫学、血液学、腫瘍学、遺伝学等の分野で使用さ
れている。
ここで散乱光とは細胞粒子からの放射光のう
ち、照明光と同一の波長の光であつて、一方螢光
はある波長分布をもつた光である。散乱光のうち
フローサイトメータで一般に検出されるものとし
て前方散乱光及び側方散乱光があり、前者は照明
光の入射側と相対向する側へ散乱される光であ
り、後者は照明光の入射側と直交する側へ散乱さ
れる光である。
斯かるフローサイトメータに用いられる従来の
フローセルの壁面は反射防止のための薄膜コーテ
イングが設けられていないか、或いは設けられて
いるものにあつても全壁面が同一の薄膜コーテイ
ングが設けられていた。
この為、フローセルの内面における光の反射に
よるゴーストの発生や、螢光の波長分布に適さな
い薄膜コーテイングによる検出光量の低下があ
り、検出精度に限界が存在していた。
(目的) 本発明は上記従来例の欠点を除去すべくなされ
たもので、照明光・散乱光・螢光に対応した反射
防止処理を行ない高精度検出を可能にする粒子解
析装置を提供することを目的とする。
(実施例) 1図は本発明を用いた粒子解析装置の光学系を
示す。
1はフローセルであり、細胞粒子は紙面に垂直
な方向にフロー部2を流れる。図中左方より照明
光Lがフロー部2を照射し、フロー部2からの放
射光は前方散乱光検出部A、側方散乱光検出部
B、螢光検出部Cで各々検出される。
なお3a,3b,3cは集光レンズ、4a,4
b,4cは光検出器、5は螢光のみ透過(散乱光
は不透過)する波長選択性のバンドパスフイルタ
である。
ここでフローセル1の各壁面S1〜S4には反
射防止のための薄膜コーテイングが施されてお
り、照明光の照射する側の壁面S1、前方散乱光
を検出する側の壁面S2、側方散乱光を検出する
側の壁面S3には照明光の波長に対し反射防止効
果の大きい薄膜コーテイングが、一方螢光を検出
する側の壁面S4には螢光の所定の波長幅に対し
反射防止効果の大きい薄膜コーテイングが施され
ている。
本実施例において、照明光をアルゴンレーザ
(例として波長を488nmとする)とした場合、フ
ローセル1の壁面S1,S2,S3には488nm用
Vコートが施されており、一方壁面S4には螢光
検出の為に所定波長幅に渡つて透過率が均一な薄
膜コーテイングが施されている。
第2図は散乱光測定の為の照明光L1にヘリウ
ムネオンレーザ(632.8nm)を用い、一方螢光測
定の為の照明光L2にアルゴンイオンレーザ(例
として波長を488nmとする)を用いた実施例であ
る。
本実施例では、散乱光検出と螢光検出の為の照
明光を別の位置にて検体粒子に照射している為、
照明光の入射面であるフローセル1の壁面S1を
2つの区域に分割し、各々の照明光の波長に適し
たVコートを施してある。
ここで壁面S2,S3には632.8nm用Vコート
が施してあり、ヘリウムネオンレーザにより照射
された検体粒子からの散乱光が壁面S2,S3で
反射されないようにしている。
また壁面S4には第1図の実施例と同様、螢光
の所定波長幅に渡つて透過率が均一な薄膜コーテ
イングが施されている。
なお本実施例では波長が異なる照明光を2つ用
いているが、互いに波長の異なる3つ以上の照明
光としても良く、その場合、照明光の数だけ壁面
S1を区分し、各々の領域に入射する照明光の波
長に適したVコートを施せば良い。
なお以上、角型のフローセルを示したが、側面
が円柱型のフローセルにも本発明は適用可能であ
る。
その場合、側面を照明光の入射領域と、散乱光
の射出領域と、螢光の射出領域と適宜区分して各
領域に既述した所定の薄膜コーテイングを施せば
良い。
(効果) 以上、本発明によれば、フローセルの外壁面の
各領域に照射光・散乱光・螢光のそれぞれの波長
に適した反射防止処理を施すことにより、ゴース
トの発生や検出光量の低下を防ぎ、精度の高い粒
子解析が可能となる。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明を用いた粒子解析装置の光学系
を示す図、第2図は異なる実施例の図、 図中、1はフローセル、2はフロー部、3a〜
3cは集光レンズ、4a〜4cは光検出器、5は
バンドパスフイルタ、S1〜S4は壁面、Aは前
方散乱光検出部、Bは側方散乱光検出部、Cは螢
光検出部である。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 内部の流通路に粒子が流れるフローセルと、 前記フローセル外壁の第1領域から前記流通路
    に向けて第1照明光束を照射する第1照射系と、 前記フローセル外壁の第2領域から前記流通路
    に向けて第2照明光束を照射する第2照射系と、 前記第1照明光束の照射によつて粒子から発す
    る散乱光を、前記フローセル外壁の第3領域を経
    て検出する散乱光検出系と、 前記第2照明光束の照射によつて粒子から発す
    る螢光を、前記フローセル外壁の第4領域を経て
    検出する螢光検出系と、 を有し、前記フローセル外壁の前記第1領域には
    前記第1照明光束の波長に適した反射防止処理が
    施され、前記フローセル外壁の前記第2領域には
    前記第2照明光束の波長に適した反射防止処理が
    施され、前記フローセル外壁の前記第3領域には
    前記第1照明光束の波長に適した反射防止処理が
    施され、前記フローセル外壁の前記第4領域には
    前記螢光の波長に適した反射防止処理が施された
    ことを特徴とする粒子解析装置。
JP59189055A 1984-09-10 1984-09-10 粒子解析装置 Granted JPS6166947A (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP59189055A JPS6166947A (ja) 1984-09-10 1984-09-10 粒子解析装置

Applications Claiming Priority (1)

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JP59189055A JPS6166947A (ja) 1984-09-10 1984-09-10 粒子解析装置

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Publication Number Publication Date
JPS6166947A JPS6166947A (ja) 1986-04-05
JPH0564291B2 true JPH0564291B2 (ja) 1993-09-14

Family

ID=16234531

Family Applications (1)

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JP59189055A Granted JPS6166947A (ja) 1984-09-10 1984-09-10 粒子解析装置

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Families Citing this family (10)

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Also Published As

Publication number Publication date
JPS6166947A (ja) 1986-04-05

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