JPH0559707B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

産業上の利用分野 この発明は醗酵技術を用いて、食物、チユーイ
ンガム、歯みがきペースト、医薬品、咬みたば
こ、喫煙たばこ、香料成分、コロン水、或いは固
形、液体の陰イオン系、陽イオン系、非イオン
系、両性イオン系洗剤、付香高分子製品、繊維ソ
フトナー成分、繊維ソフトナー製品、化粧品、整
髪用製品などの着香製品の香り又は味を増加、或
いは強化するのに、官能的に有用な性質を持つと
知られている或る種の天然に存在するエステルを
生成し、回収する製法に関するものである。 問題点を解決するための手段 本発明のエステルは式 〔式中R₁，R₂及びR₃は水素又はメチル基を表
わし、R′はC₂−C₅低級アルキル基、点線は炭素
−炭素一重結合又は炭素−炭素二重結合であり、
さらにR₁，R₂及びR₃の内少なくとも１つはメチ
ル基である〕で表わされる。 これらのエステルは式、 （式中、R₁，R₂およびR₃は上記と同意義であ
る） で表わされるアミノ酸とC₂−C₅低級アルコール
との反応式 で表わされる酵素反応で生成される。 勿論、上記反応によつて得られた混合物には、 式、 （式中、R₁，R₂，R₃およびR′は上記と同意義
である） で表わされるエステルの他に多くのエステルが含
まれることは、以上のさらに詳しく説明及び実施
例に記載される如く明らかである。 反応式 で示される反応は、例えばゲオトリチユム フラグランス …ATCC 11247 （Geotrichum fragrans） 別名オースボラ フラグランス （Oospora fragrans）ゲオトリチユム ペニシラタウム …CBS 62774 （Geotrichum penicillatum）ゲオトリチユム スアベオレンス …CBS 38236 （Geotrichum suaveolens） 〔注〕 CBSはセントラルブラウ フオル シユメル
カルチアーズ（Centraalbureau Voor
Schimmelcultures）（オランダ）である。等の微
生物が反応混合物中に存在することにもたらされ
るものである。 反応は式、 で表わされる例えば、Ｌ−ロイシン、Ｌ−イソロ
イシン、又はＬ−バリンの様なアミノ酸の１つ又
はこれらの混合物と、デキストロース、マルトー
ス、ラクトース、フラクトース、サクロース、黒
糖密、コーンシラツプ、固形コーンシラツプ、コ
ーンスターチ及びエチルアルコール等の炭素源と
を入れた醗酵槽に空気を通すことにより行なわれ
る。醗酵槽中のアミノ酸又は混合アミノ酸の濃度
は、醗酵槽中の総量の0.1重量％から1.0重量％で
ある。又醗酵槽中の炭素源の濃度は醗酵槽中の総
量の0.5％から0.8％である。 用いられる他の物質としては、イソブタノー
ル、バター油、ココナツツ油等があげられる。 醗酵反応は、酸性度はPH4.0から約7.5で、反応
温度は20℃から35℃の間で行なわれる。好ましく
は、PHは4.75から7.0の間で、反応温度は22℃か
ら28℃である。醗酵反応の時間は、20時間から約
100時間で、醗酵温度、空気流通速度、醗酵ブロ
ス酸性度、炭素源の注入速度等の醗酵条件により
異なる。又、エチルアルコールをその濃度が、例
えば醗酵ブロス全量の0.8重量％から0.9重量％に
保つように加えることが望ましい。 本発明で重要な点は、反応式 で表わされる醗酵反応より生じた式、 で表わされるエステル生成物を、生成されると同
時に採取されることである。 醗酵中、式、 で表わされるエステル及び詳しく後述される如く
他の有用なエステルが共に、醗酵ブロス中に通じ
た空気により取り出される。このエステルを含む
空気流はフイルター及びコンデンサーを経て冷却
され、冷却された空気流は１つ又はそれ以上の活
性炭ベツドを通り、式、 で表わされるエステル及び他の有効なエステルが
採取される。飽和又はほぼ飽和された活性炭は活
性炭ベツドの容器より外され、適当な蒸留溶剤と
混合される。活性炭と蒸留溶剤の混合物は、個別
又は同時に蒸留カラムとコンデンサーの備えた槽
に入れられ、蒸留により、活性炭、蒸留溶剤及び
エステルの混合物よりエステルが採取される。 得られたエステルは、さらに分画蒸留又は分離
精製ガスクロマトグラフイーにより精製される。 本発明の製法により生成される種々の有用な天
然に存在するエステルとしては、式、 で表わされるチグリン酸エチル、式、 で表わされる２−メチル酪酸エチル、式 で表わされる酢酸エチル、式、 で表わされるイソ酪酸エチル、式 で表わされるプロピオン酸エチル、式、 で表わされるイソバレリアン酸エチル、式、 で表わされるイソバレリアン酸イソアミル、式、 で表わされるセネシオ酸エチル、式、 で表わされる２−メチル酪酸イソブチル、及び
式、 で表わされるチグリン酸イソブチル等が挙げられ
る。 さらに詳しく本発明を添附図面を用いて説明す
ると第１図において反応式、 で表わされる反応は、醗酵槽１０で行なわれる。
ここでR₁，R₂及びR₃は水素又はメチル基を表わ
し、Ｒは低級アルキル基を表わし、但しR₁，R₂
及びR₃の内少なくとも１つはメチル基である。 タンク５８に貯蔵された式、 で表わされるアミノ酸は、ポンプ６２によりバル
ブ６４を経て、ライン６０を通り槽１０に入れら
れる。タンク５０に貯蔵されたエチルアルコール
は、ポンプ５４によりバルブ５６を経てライン５
２２を通り醗酵槽１０に入れられる。 例えば第１リン酸カリウム、又は硫酸マグネシ
ウム７水和物の乾燥塩又はそれらを含む水溶液
は、タンク７４により直接又はポンプ７８により
バルブ８０を経てライン７６を通り醗酵槽１０に
入れられる。 槽４２に貯蔵される接種材料を含む培養液、例
えばゲオトリチユム フラグランス
（Geotrichum fragrans）（AHCC 11247）の生
長細胞の懸濁液はポンプ４６によりバルブ４８を
経て醗酵槽１０に入れられる。 炭水源、例えばデキストロース水溶液は、貯蔵
タンク３４よりポンプ３８によりバルブ４０を経
て醗酵槽１０に入れられる。醗酵槽はプロペラ１
４を持つ撹拌機１２で150rpmから50rpmの速さ
でかき混ぜられる。又タンク４２より接種材料を
入れる前に、醗酵混合物に消泡剤を加えることが
望ましい。タンク２４より空気はフイルター装置
２２に、バルブ２６を経てライン２８より送られ
る。空気の一部はバルブ３２を経わラインン３０
を通り、スパージヤー１６９により醗酵バツチ１
３に注入される。又空気の一部はバルブ２０を経
てライン１８を通り、スパージヤー１６Ｂにより
醗酵槽１０に１１の高さまで入れられた醗酵バツ
チ１３に注入される。上部の空気層は醗酵バツチ
よりポンプ８４（必要とする場合）により、ライ
ン８２を通りバルブ８６を経て空気フイルター８
８を通り、ライン９０により冷却器９２の冷却コ
イル９４に至る。熱交換器９２は溶媒９６をライ
ン９８を通し、バルブ１００を経て冷却コイル９
４に通し、さらにライン１０２を通し、保持タン
ク１０４に入れることにより操作される。 熱交換器９２より出る空気は式、 （式中R₁，R₂及びR₃はそれぞれ水素又はメチ
ル基を示し、点線は炭素−炭素一重結合又は炭素
−炭素二重結合を示し、又R′はC₂−C₅アルキル
基であり、R₁，R₂及びR₃の内少なくとも１つは
メチル基である）で表わされるエステルを含み、
ライン１０６を通りバルブ１０８を経てポンプ１
１０（必要とする場合）によりトラツプ１１２に
通され、水分が空気中より除かれ液１１８として
集められる。エステルを含む気体は孔１２２より
出され、上層部１２０を経て孔１２４よりライン
１２６を通り、バルブ１２８を経てポンプ１３０
（必要とする場合）により活性炭ベツド１５６及
び１６４に送り込まれる。活性炭ベツド１５６の
みに醗酵エステル生成物が送り込まれる場合は、
バルブ１６２が閉じられ、ライン１３２に入らな
い様にされポンプ１３８（必要とする場合）でも
つて、ライン１３４を通りバルブ１３６を経て送
り込まれる。エステルは活性炭ベツド１５６の中
の活性炭により吸着される。反応に活性炭ベツド
１６４のみが使用される場合には、バルブ１３６
が閉じられ、エステルはライン１３２を通り、バ
ルブ１６２を経てポンプ１６０（必要とする場
合）で送り込まれる。エステルは活性炭ベツド１
５６に飽和するまで送り込み、さらに活性炭ベツ
ド１６４に飽和するまで送り込むことも出来る。
活性炭ベツド１６４にエステルと空気の混合物が
通される間に、活性炭ベツド１５６は容器１４８
より出され、コンベヤー１５８／１８４により槽
１９６に送り込むことも出来る。ライン１３４を
通りベツド１５６に送られたエステルと空気の混
合物からエステルが吸着される間、非吸着物質と
空気は、活性炭ベツド１５６よりバルブ１５４を
経てライン１５０を通り、外界１５２に出され
る。 ライン１３２より入るエステルと空気の混合物
から全てのエステルが容器１６６中にある活性炭
ベツド１６４に吸着されると、容器１６６は開け
られエステルの吸着した活性炭は、固体コンベヤ
ーライン１８２と１８４でもつて槽１９６に入れ
られる。活性炭ベツド１６４を通り抜けた非吸着
の気体と空気は、ライン１７６を通りバルブ１７
４を経て孔１７８より外界１８０に出される。 槽１９６に入れられたエステルの吸着した固形
活性炭は蒸留溶剤、例えばプロピレングリコール
等を、貯蔵タンク１８８よりライン１９０を通り
バルブ１９４を経てポンプ１９２でもつて槽１９
６に入れることにより混合される。又は、同時に
プロピレングリコール等の蒸留溶剤を、貯蔵タン
ク１４０によりライン１４２を通りバルブ１４４
を経てポンプ１４６でもつて容器１４８に入れ
て、槽１４８中の活性炭ベツド１５６と容器１４
８中で混合することも出来る。得られたエステル
を吸着した活性炭と蒸留溶剤を含むスラリーは、
ポンプでもつてライン１５８と１８４を通りバル
ブ２０７を経てスラリーコンベヤで孔２１６より
槽１９６に入れられる。代りに、貯蔵タンク１６
８に入れられた蒸留溶剤をバルブ１７０を経てポ
ンプ１７２でもつて容器１６６に入れることによ
り、エステルを吸着した活性炭ベツド１６４と蒸
留溶剤とを混合することも出来る。得られた溶剤
とエステルを吸着した活性炭からなる容器１６６
中のスラリーは、ポンプによりスラリーコンベヤ
ーでもつてライン１８２と１８４を通りバルブ２
０７を経て、孔１８６と２１６より槽１９６に入
れられる。 タンク１９６に入れられたスラリー２０８は、
モーター２００で作動するプロペラ２０６を備え
た撹拌器２０２と、任意に用いられるバツフル１
９８でもつて撹拌され同時に蒸留される。タンク
１９６及び内容物は、加熱コイル２０１と加熱器
１９９により加熱される。又タンク１９６は蒸留
カラム２１８を備えた蓋２０４とアジテーター２
０８及び、示されていないが温度コントロール装
置等が備え付けられている。 蒸留においては、エステルは蒸気層２１０より
ライン２１４を通り、蒸留カラム２１８を通り、
さらにライン２２０を通り熱交換器２２２、さら
にコイル２２４（熱交換器の一部）とライン２３
０を経てポンプ２３６（ライン２４０のバルブ２
４２を閉じた状態で）でもつて、ライン２３２を
通りバルブ２３４を経て、受容器２３８に入れら
れることも出来る。 熱交換器２２２は２２８より入り２２６より出
る冷媒により、対流熱交換でもつて冷却される。
又は、バルブ２３４を閉じて得られたエステル混
合物をポンプ２４４でもつてライン２４０よりバ
ルブ２４２を経て、分留カラム２４６に通すこと
も出来る。こうしてエステルの混合物を分留し、
低沸点エステル（例えば、プロピオン酸エチル）
はライン２４８を通り、還流分離器２５０でもつ
て還流部分は蒸留カラムの上層部に、ライン２５
２を通り戻され、残りの低沸点部はライン２５４
を通りポンプ２６０でもつてバルブ２６２を経
て、保持タンク２５６に入れられる。同じ様に高
沸点部は、蒸留カラムよりライン２５８を通りポ
ンプ２６４によりバルブ２６６を経て、保持タン
ク２６８に入れられる。 第２図は、第１図の装置の断面図であり、濃縮
トラツプ１１２及び活性炭ベツド１５６と１６４
を入れる活性炭ベツド溶器１４８と１６６を詳し
く示したものである（ここでは任意に用いられる
混合溶剤を加える装置は示されていない）。 第３図は、第１図の装置の断面図であり、エス
テルを吸着した固体分１５６と１６４とは、それ
らを混合したものをボツパー１８７に入れ、注入
ライン１８９より孔１８６、ライン１９１を通
り、孔２１６より蒸留槽に入れられる状態を詳し
く示したものである。スラリー２０８は、活性炭
ベツド１５６と１６４と、タンク１８８よりポン
プ１９２によりライン１９０を通りバルブ１９４
を経て入れられる蒸留溶剤と混合する事により得
られる。蒸留カラム２１８ａは蓋２０４ａに蒸留
出来る様に備えつけてある。 エステルの吸着された活性炭５５６及び１６４
に入れるのに使用したホツパー１８７を除いた
後、孔１８６、バルブ２０９を持つライン２８６
に置き換える。バルブは閉じた状態で、撹拌モー
ター２００を作動し、プロペラ２０６によりスラ
リー２０８を撹拌する。このように蒸留を蒸留カ
ラム２１８ｂを用いて、第４図に示す如くに行な
う。蒸留中はバルブ１９４及び２０９は閉じた状
態で、モーターは作動したままである。 第５図は、この発明の製法を行なうに当り、よ
り望ましい装置の設置を示す。 醗酵槽３３３は、バツフル３２９と撹拌器３２
８を備えている。醗酵槽３３３への全ての添加
は、殺菌ラインでもつて行なわれる。 貯蔵タンク３０４の無菌デキストロース（50パ
ーセント水溶液）とタンク３００の原培養液はそ
れぞれ、ライン３０５及びライン３０１を通りバ
ルブ３０６及びバルブ３０２を経て、ポンプ３０
３によりライン３０７に合流され、バルブ３０８
を経て、醗酵槽３３３に入れられる。75パーセン
トエチルアルコール水溶液は、ポンプ３１９によ
り貯蔵タンク３１７よりバルブ３１８を経てライ
ン３２０より醗酵槽３３３に入る。 貯蔵タンク２９０からは、式、 で表わされるアミノ酸、イーストエキス、食塩、
及び乳化剤（例えばTWEEN 80）を個々に、
或いは混合物として、ライン２９１を通り、バル
ブ２９２を経てポンプ２９３により、孔２９４よ
り醗酵バツチ３３４に入れられる。空気は槽３２
１よりライン３２２を通り、無菌フイルター３２
３を経て、ライン３２４を通りバルブ３２５を経
て、スパージヤー３２６と３２７により醗酵バツ
チ３３４に注入される（空気泡が番号３３２で示
してある）。醗酵中、水酸化ナトリウム（例えば
50パーセント水溶液）が貯蔵タンク３０９よりバ
ルブ３１０を経て、PH検知装置（３３１）でコン
トロールされるポンプ３１１でもつて醗酵槽３３
３に注入され、消泡剤（例えばシリコン消泡剤）
が貯蔵タンク３１３よりバルブ３１４を経てライ
ン３１６より泡検知装置４００をコントロールラ
イン４０１につながれたポンプ３１５でもつて加
えられる。 醗酵中、主として生成するエステルは式、 で表わされ、ここでR₁，R₂及びR₃はそれぞれ水
素又はエチル基を示し、点線は炭素−炭素一重結
合又は炭素−炭素二重結合を示し、又はR′はC₂
−C₅低級アルキル基であり、又R₁，R₂及びR₃の
内少なくとも１つはメチル基を示す。これらのエ
ステルは醗酵混合物３３４より、気泡３３２の中
に含まれ“蒸留”される。 エステルと空気との混合物は、フイルター３３
７を経てライン３３６より熱交換器３４０のコイ
ル３３９に入る。熱交換器は、例えば３４１から
入り３４２に出る冷媒の対流熱交換により冷却さ
れる。冷却されたエステルと空気の気体混合物
は、ライン３４３を通り、凝縮トラツプ３４４に
孔３４５より入り、凝縮物は３４７に集められ
る。エステルと空気の混合物は、さらにライン３
４８に孔３４６から入り、容器３５３Ａに入れら
れた活性炭ベツド３５３、又は容器３５２Ａに入
れられた活性炭ベツド３５２に送り込まれる。エ
ステルと空気の混合気体が、活性炭ベツド３５２
のみに送り込まれる場合は、バルブ３５１は閉じ
られ、ライン３５１Ａに入らぬようにする。こう
してエステルと空気の混合物は、バルブ３５０を
経てライン３４９より活性炭ベツド３５２に入れ
られ、エステルが吸着されたあとの非吸着気体は
３５４より出される。 容器３５３Ａに入れられた活性炭ベツド３５３
が使用される場合は、バルブ３５１が開かれ、バ
ルブ３５０が閉じられる。こうして、エステル−
空気の混合物はバルブ３５１を経て、ライン３５
１Ａより活性炭ベツド３５３に入る。非吸着気体
と空気は３５５で出る。 活性炭ベツドが飽和した時、活性炭は槽３５３
Ａよりライン３５６、例えば固体コンベヤーでも
つて蒸留装置３５９に入れられる。又は、エステ
ルを吸着した活性炭３５２は槽３５２Ａより、ラ
イン３５８を通り、固体コンベヤー３５７でもつ
て蒸留装置３５９に入れられる。又蒸留器３５９
には、貯蔵タンク３６３よりライン３６４を通
り、ポンプ３６６（必要とする場合）には蒸留溶
剤（例えばプロピレングリコール）が加えられ
る。作動中の蒸留器は加熱コイル３６２で加熱さ
れる。エステル蒸留物は、ライン３６８を通りコ
ンデンサー３６９を通る。コンデンサーは、例え
ば冷却溶剤を対流的に３７１より入れ、３７０よ
り出すことにより冷却することが出来る。 コンデンサー（３６９及び３７２で示される）
は、出口３７３に接続されている。凝縮したエス
テルは、ポンプ３７５により、ライン３７３を通
り、バルブ３７４を経て、生成物受容器３７６に
入れられ、さらに精製又は分留する為にライン３
７７で送られる。 無菌のデキストロース炭素源は、好ましくは、
３００から原培養液で接続する直前に一度に加え
ることも出来る。 貯蔵タンク３００の原培養液は、醗酵槽に貯蔵
タンク３０４からデキストロースを加えるのに用
いたポンプ、即ち３０３とラインを用いて加える
のが好ましい。又好ましい設置状態は第５図に示
す如くである。 エチルアルコールおよびPHを調整する水酸化ナ
トリウム溶液は、もともと無菌であるので無菌に
する必要はない。しかしそれらの入る口は無菌に
する必要がある。 第６図は、第５図に示された装置の部分の詳細
図で活性炭ベツド３５２及び３５３の設置状態を
示す。 ここでエステルと空気との混合物は、ライン３
４８より、同時に活性炭ベツド３５２及び３５３
にそれぞれバルブ３５０，３５１を経て、ライン
３４９を通り送り込まれる。その様な場合には、
ライン４５６のバルブ４５７及びライン４５８の
バルブ４５９は閉じられ、エステルを含まない空
気は、ライン３５４と３５５を通りバルブ４５２
と４５５を経て、ライン４５３と４５４で外界４
６２と４６３に出される（バルブ４５１は閉じた
状態である）。 代りに活性炭ベツド３５３と３５２とは、連続
的に操作することが出来、エステルと空気の混合
物を先ず活性炭ベツド３５２に通し、その後活性
炭ベツド３５３に通すことによりより効果的に吸
着をさせることが出来、全体の操作を能率よくす
ることが出来る。従つて例えば、バルブ３５１を
閉じた状態にし、バルブ３５０を開けておく。さ
らにバルブ４５９を閉じバルブ４５７を開き、バ
ルブ４５５と４５２とを閉じ、バルブ４５１を開
けておく。こうするとエステルと空気の混合物
は、ライン３４８を通り、バルブ３５０を経てラ
イン３４９より活性炭ベツド３５２に入る。ここ
でエステルと空気の混合物中の70パーセントのエ
ステルが吸着される。残りのエステルと空気の混
合物は、ライン３５４及び４５６を通り、バルブ
４５１を経てライン３５５より活性炭ベツド３５
３に入り、残りのエステルがエステルと空気混合
物より吸着される。空気と吸着されなかつたガス
は、ライン４５６よりバルブ４５７を経て外界４
６１に出される。 その後、第５図に示した如くエステルの吸着し
た活性炭３５２と３５３とは３５６３５７とで取
り出され、さらにスラリー化されて蒸留に供され
る。 第６図の装置は第５図のさらなる変形であり、
上記の代りに、活性炭ベツド３５２と３５３は、
第２図の活性炭ベツドで示した如く交互に操作す
ることが出来る。最初にバルブ３５１と４５９、
並びに４５１を閉じておく。エステルと空気の混
合物は、ライン３４８より、ライン３４９を通り
バルブ３５０を経てベツド３５２に入る。非吸着
ガスと空気からなる不要ガスはライン３５４を通
り、バルブ４５２を経てライン４５３より外界４
６２に出る。飽和時、即ち活性炭が吸着エステル
で飽和した時、バルブ３５０とバルブ４５７が閉
じられ、バルブ４５１は閉じたままにして、バル
ブ３５１を開ける。エステルと空気の混合物は、
ライン３４８、ライン３５１Ａを経て活性炭ベツ
ド３５３に入る。非吸着ガスと空気はライン３５
５を通り、バルブ４５４を経て、ライン４５５よ
り外界４６３に出る。 実施例 以下に掲げる実施例は、この発明に従つて製法
を実施したものを記述したものである。特定の使
用される物質の量、使用される原料の種類、イー
ストを含む微生物の種類や菌株等は、この発明を
説明するものであり、制限するものではない。 実施例 １ 第１図の装置において醗酵槽１０に、接種材料
として１のゲオトリチユム フラグランス
（Geotrichum fragrans）（ATCC11247）、0.3％
溶液にするに充分なイソロイシン、６％デキスト
ロース水溶液、0.05％硫酸マグネシウム７水和物
と、0.02％トウイーン （TWEEN 〔80ポリオ
キシエチレンと20ソルビタンモノオレエートとの
混合物）を入れる。 醗酵槽を400rpmで撹拌し、温度を25℃に保つ。
空気注入速度は１分間16とする。PHの値は5.05
から5.25の間に調整する。 反応は基本的には次に示す通りである。 エチルアルコールを反応混合物に１時間10mlの
割合で加える（25時間に総量250mlのエチルアル
コールを加える）。 エステルの吸着した活性炭は水蒸気で処理し、
エステルを含む凝縮分を得る。10ｇのこのエステ
ルを含む凝縮分を10mlの蒸留水と混ぜ、15mlのフ
レオン 11（FREON 11）で抽出する。得られ
たフレオン抽出層は無水硫酸マグネシウムで乾燥
し、窒素気流で0.5ｇまで濃縮する。得られた濃
縮液は、ガスクロマトグラフイー質量分析
（GCMS）で分析し、その結果は次の通りであつ
た。

【表】 ン

【表】 ＊ 抽出に用いた溶媒

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式 〔式中R₁，R₂およびR₃はメチル基又は水素で
   ある〕 で表わされるアミノ酸とC₂−C₅アルコールとを
   ゲオトリチユム（Geotrichum）属に属する上記
   エステルの少なくとも１つを生産できる微生物の
   存在下に反応させることにより 式 〔式中R₁，R₂およびR₃は前記と同意義を有し、
   点線は炭素−炭素一重結合又は炭素−炭素二重結
   合を示し、又R′はC₂−C₅アルキル基である〕で
   表わされる天然に存在するC₄−C₅カルボン酸の
   C₂−C₅アルキルエステルを製造することを特徴
   とする天然に存在するC₄−C₅カルボン酸のC₂−
   C₅アルキルエステルの製法。 ２ 上記微生物は、 ゲオトリチユム フラグランス （Geotrichum fragrans） ゲオトリチユム ペニシラタウム （Geotrichum Penicillatum） および ゲオトリチユム スアベオレンス （Geotrichum suaveolens） の中から選ばれる特許請求の範囲第１項記載の製
   法。 ３ 式 （式中R₁，R₂およびR₃はメチル基又は水素で
   あり、又R₁，R₂及びR₃の内少なくとも１つはメ
   チル基である）で表わされるアミノ酸とC₂−C₅
   アルカノールとの反応を行なう装置、反応混合物
   に通気する装置、通気により生成物を活性炭ベツ
   ドに運ぶ装置、スラリー溶媒により活性炭をスラ
   リーにする装置、得られたスラリーを蒸留装置に
   運ぶ装置、及び活性炭ベツドより分離されて得ら
   れた生成物を採取する装置からなることを特徴と
   する天然に存在するC₄−C₅カルボン酸のC₂−C₅
   アルキルエステルを製造する装置。