JPH0556777A - ビタミンｂ▲１２▼要求性株の培養方法およびこれにより得られたビタミンｂ▲１２▼要求性株 - Google Patents
ビタミンｂ▲１２▼要求性株の培養方法およびこれにより得られたビタミンｂ▲１２▼要求性株Info
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- JPH0556777A JPH0556777A JP24506491A JP24506491A JPH0556777A JP H0556777 A JPH0556777 A JP H0556777A JP 24506491 A JP24506491 A JP 24506491A JP 24506491 A JP24506491 A JP 24506491A JP H0556777 A JPH0556777 A JP H0556777A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 コビンアミド、５−ヒドロキシ−ａ−ベンズ
イミダゾールコバミドおよび５−メトキシ−ａ−ベンズ
イミダゾールコバミドから選ばれた少なくとも１種のコ
リノイド化合物をビタミンＢ12要求性株であるエシェリ
ヒア属、ユーグレナ属またはオクロモナス属の微生物の
培養に用いるビタミンＢ12要求性株の培養方法。 【効果】 従来、用途の知られていなかったＦＢ、ＦII
IおよびＦIIIｍなどのビタミンＢ12以外のコリノイド類
縁体を用いてビタミンＢ12要求性の微生物を培養するこ
とができる。
イミダゾールコバミドおよび５−メトキシ−ａ−ベンズ
イミダゾールコバミドから選ばれた少なくとも１種のコ
リノイド化合物をビタミンＢ12要求性株であるエシェリ
ヒア属、ユーグレナ属またはオクロモナス属の微生物の
培養に用いるビタミンＢ12要求性株の培養方法。 【効果】 従来、用途の知られていなかったＦＢ、ＦII
IおよびＦIIIｍなどのビタミンＢ12以外のコリノイド類
縁体を用いてビタミンＢ12要求性の微生物を培養するこ
とができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ビタミンＢ12代替物質
としてビタミンＢ12以外のコリノイド類縁体を用いた微
生物の培養方法に関する。
としてビタミンＢ12以外のコリノイド類縁体を用いた微
生物の培養方法に関する。
【０００２】
【従来の技術および課題】メタン醗酵法を用いた設備の
排水処理装置に生ずる汚泥には、コリノイド類縁体であ
るコビンアミド（以下、ＦＢと略す）、あるいは５−ヒ
ドロキシ−ａ−ベンズイミダゾールコバミド（以下、Ｆ
III（ファクタースリー）と略す）が多量に含有されて
いることが従来より知られている。また、メタン生成細
菌であるメタノサルチナ(Methanosarchina）属をメタノ
ール基質で培養した場合にも効率的にＦＢ、ＦIIIが産
生されることも知られている。さらに、ホモ酢酸生成細
菌であるクロストリディウム(Clostridium）属を絶対嫌
気性条件において培養した場合には、やはりコリノイド
類縁体である５−メトキシ−ａ−ベンズイミダゾールコ
バミド(以下ＦIIIｍ；ファクタースリーエムと略す）が
効率的に産生されることも知られている。
排水処理装置に生ずる汚泥には、コリノイド類縁体であ
るコビンアミド（以下、ＦＢと略す）、あるいは５−ヒ
ドロキシ−ａ−ベンズイミダゾールコバミド（以下、Ｆ
III（ファクタースリー）と略す）が多量に含有されて
いることが従来より知られている。また、メタン生成細
菌であるメタノサルチナ(Methanosarchina）属をメタノ
ール基質で培養した場合にも効率的にＦＢ、ＦIIIが産
生されることも知られている。さらに、ホモ酢酸生成細
菌であるクロストリディウム(Clostridium）属を絶対嫌
気性条件において培養した場合には、やはりコリノイド
類縁体である５−メトキシ−ａ−ベンズイミダゾールコ
バミド(以下ＦIIIｍ；ファクタースリーエムと略す）が
効率的に産生されることも知られている。
【０００３】コリノイド類縁体であるビタミンＢ12（シ
アノコバラミン）については、核酸代謝、蛋白質代謝、
脂質代謝および糖質代謝などにおける必須の因子である
ことがよく知られており、その生産はもっぱら発酵法に
より行われている。これに対してビタミンＢ12要求性の
微生物は、培養液中にビタミンＢ12が存在しなければ生
育（増殖）できないにもかかわらずビタミンＢ12の生合
成ができない。このため、原生動物 Euglcna gracilis
strain Ｚ（ユーグレナ）などのビタミンＢ12要求株
は、古くからビタミンＢ12の微生物学的定量法（バイオ
アッセイ）に用いられてきた。
アノコバラミン）については、核酸代謝、蛋白質代謝、
脂質代謝および糖質代謝などにおける必須の因子である
ことがよく知られており、その生産はもっぱら発酵法に
より行われている。これに対してビタミンＢ12要求性の
微生物は、培養液中にビタミンＢ12が存在しなければ生
育（増殖）できないにもかかわらずビタミンＢ12の生合
成ができない。このため、原生動物 Euglcna gracilis
strain Ｚ（ユーグレナ）などのビタミンＢ12要求株
は、古くからビタミンＢ12の微生物学的定量法（バイオ
アッセイ）に用いられてきた。
【０００４】このようにビタミンＢ12についてはその生
産法、生理活性が明らかで広く利用されている。これに
対して、同じコリノイド類縁体であっても前記ＦＢ、Ｆ
IIIおよびＦIIIｍなどビタミンＢ12以外のコリノイド類
縁体の利用法はほとんど知られておらず、その生理活性
も明らかではない。
産法、生理活性が明らかで広く利用されている。これに
対して、同じコリノイド類縁体であっても前記ＦＢ、Ｆ
IIIおよびＦIIIｍなどビタミンＢ12以外のコリノイド類
縁体の利用法はほとんど知られておらず、その生理活性
も明らかではない。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らはビタミンＢ
12以外のコリノイド類縁体であるコビンアミド(ＦＢ)、
５−ヒドロキシ−ａ−ベンズイミダゾールコバミド(ＦI
II）および５−メトキシ−ａ−ベンズイミダゾールコバ
ミド(ＦIIIｍ）の利用法について鋭意研究を行った。こ
の結果、これらのコリノイド類縁体はエシェリヒア属、
ユーグレナ属またはオクロモナス属等のビタミンＢ12要
求性株においてビタミンＢ12と同等の生理活性（菌体増
殖）を示すとの知見を得て本発明を完成するに至った。
12以外のコリノイド類縁体であるコビンアミド(ＦＢ)、
５−ヒドロキシ−ａ−ベンズイミダゾールコバミド(ＦI
II）および５−メトキシ−ａ−ベンズイミダゾールコバ
ミド(ＦIIIｍ）の利用法について鋭意研究を行った。こ
の結果、これらのコリノイド類縁体はエシェリヒア属、
ユーグレナ属またはオクロモナス属等のビタミンＢ12要
求性株においてビタミンＢ12と同等の生理活性（菌体増
殖）を示すとの知見を得て本発明を完成するに至った。
【０００６】本発明はコリノイド類縁体であるコビンア
ミド（ＦＢ）、５−ヒドロキシ−ａ−ベンズイミダゾー
ルコバミド（ＦIII）および５−メトキシ−ａ−ベンズ
イミダゾールコバミド（ＦIIIｍ）から選ばれた少なく
とも１種のコリノイド類縁体をａ−（５,６−ジメチル
ベンズイミダゾール）コバミド（ビタミンＢ12）の代替
物質として、ビタミンＢ12要求性株であるエシェリヒア
(Escherichis）属、ユーグレナ(Euglena）属またはオク
ロモナス(Ochromonas）属等の微生物の培養に用いるこ
とを特徴とするビタミンＢ12要求性株の培養方法を提供
するものである。また、本発明はかかる培養方法により
得られるビタミンＢ12要求性株を提供するものである。
ミド（ＦＢ）、５−ヒドロキシ−ａ−ベンズイミダゾー
ルコバミド（ＦIII）および５−メトキシ−ａ−ベンズ
イミダゾールコバミド（ＦIIIｍ）から選ばれた少なく
とも１種のコリノイド類縁体をａ−（５,６−ジメチル
ベンズイミダゾール）コバミド（ビタミンＢ12）の代替
物質として、ビタミンＢ12要求性株であるエシェリヒア
(Escherichis）属、ユーグレナ(Euglena）属またはオク
ロモナス(Ochromonas）属等の微生物の培養に用いるこ
とを特徴とするビタミンＢ12要求性株の培養方法を提供
するものである。また、本発明はかかる培養方法により
得られるビタミンＢ12要求性株を提供するものである。
【０００７】ビタミンＢ12代替物質として使用するコリ
ノイド類縁体であるＦＢ、ＦIIIおよびＦIIIｍは、公知
の方法により微生物を用いて生産され、分離、精製を行
うことができる。
ノイド類縁体であるＦＢ、ＦIIIおよびＦIIIｍは、公知
の方法により微生物を用いて生産され、分離、精製を行
うことができる。
【０００８】例えば、メタノサリチナ・バーケリー（Me
thanosarclina berkeri）を、炭素源としてメタノール
を含み、その他窒素、リン、マグネシウム、ナトリウ
ム、カルシウム、微量ミネラルおよびビタミン類を含有
する培地中において、培養温度３０〜５０℃、ｐＨ５.
５〜７.０、絶対嫌気条件にて培養する。培養後、処理
液（培養液）に含まれるコリノイドをシアン抽出し、更
に両親媒性樹脂（例えば、商品名アンバーライトＸＡＤ
−２）により脱塩操作およびイオン交換セルロースによ
るコリノイド類縁体の分離、精製を行うことにより、Ｆ
ＢおよびＦIIIが得られる。
thanosarclina berkeri）を、炭素源としてメタノール
を含み、その他窒素、リン、マグネシウム、ナトリウ
ム、カルシウム、微量ミネラルおよびビタミン類を含有
する培地中において、培養温度３０〜５０℃、ｐＨ５.
５〜７.０、絶対嫌気条件にて培養する。培養後、処理
液（培養液）に含まれるコリノイドをシアン抽出し、更
に両親媒性樹脂（例えば、商品名アンバーライトＸＡＤ
−２）により脱塩操作およびイオン交換セルロースによ
るコリノイド類縁体の分離、精製を行うことにより、Ｆ
ＢおよびＦIIIが得られる。
【０００９】また、クロストリディウム・サーモアセチ
カム（Clostridium thermoaceticum）を、炭素、窒素、
カリウム、リン、イオウ、マグネシウム、微量ミネラル
およびビタミン類を含有する培地中において、培養温度
４７〜６５℃、ｐＨ４.５〜８.０、絶対嫌気条件にて培
養する。培養後、処理液を上記の方法にてコリノイド類
縁体の分離、精製を行いＦＢ、ＦIIIｍを得る。
カム（Clostridium thermoaceticum）を、炭素、窒素、
カリウム、リン、イオウ、マグネシウム、微量ミネラル
およびビタミン類を含有する培地中において、培養温度
４７〜６５℃、ｐＨ４.５〜８.０、絶対嫌気条件にて培
養する。培養後、処理液を上記の方法にてコリノイド類
縁体の分離、精製を行いＦＢ、ＦIIIｍを得る。
【００１０】これらＦＢ、ＦIIIまたはＦIIIｍをビタミ
ンＢ12代替物質として培地に用いてエシェリヒア・コリ
（Escherichia coli．）２１５などのエシェリヒア属、
ユーグレナ・グラチリス（Euglena gracilis）などのユ
ーグレナ属またはオクロモナス・マルハメンシス（Ochr
omonas malhamensis）、オクロモナス・ダニカ（Ochrom
onas danica）などのオクロモナス属の微生物の培養に
用いると、ビタミンＢ12を用いた場合と同等に菌体の増
殖を行うことができる。
ンＢ12代替物質として培地に用いてエシェリヒア・コリ
（Escherichia coli．）２１５などのエシェリヒア属、
ユーグレナ・グラチリス（Euglena gracilis）などのユ
ーグレナ属またはオクロモナス・マルハメンシス（Ochr
omonas malhamensis）、オクロモナス・ダニカ（Ochrom
onas danica）などのオクロモナス属の微生物の培養に
用いると、ビタミンＢ12を用いた場合と同等に菌体の増
殖を行うことができる。
【００１１】ＦＢ、ＦIII、ＦIIIｍの培地への添加量
は、通常１ｐＭ〜４μＭである。例えば、オクロモナス
属の場合ＦＢを２０〜５００ｎＭ（好ましくは５００ｎ
Ｍ）、エシェリヒア属の場合ＦＢは１〜２００ｐＭ（好
ましくは２００ｐＭ）、ＦIII２０〜５０００ｐＭ（好
ましくは２００ｐＭ）、また、ユーグレナ属の場合ＦＢ
０.２〜４μＭ（好ましくは４μＭ）、ＦIII０.００５
〜０.５ｍＭ（好ましくは０.２μＭ）、ＦIIIｍ０.００
５〜０.８ｎＭ（好ましくは０.８ｎＭ）である。
は、通常１ｐＭ〜４μＭである。例えば、オクロモナス
属の場合ＦＢを２０〜５００ｎＭ（好ましくは５００ｎ
Ｍ）、エシェリヒア属の場合ＦＢは１〜２００ｐＭ（好
ましくは２００ｐＭ）、ＦIII２０〜５０００ｐＭ（好
ましくは２００ｐＭ）、また、ユーグレナ属の場合ＦＢ
０.２〜４μＭ（好ましくは４μＭ）、ＦIII０.００５
〜０.５ｍＭ（好ましくは０.２μＭ）、ＦIIIｍ０.００
５〜０.８ｎＭ（好ましくは０.８ｎＭ）である。
【００１２】コリノイド類縁体以外の他の培地成分はビ
タミンＢ12を用いた前記各ビタミンＢ12要求性株の培地
の場合と同様でよい。例えば、オクロモナス属の場合
は、炭素源としてグルコースを含み、その他アミノ酸
類、窒素、リン、マグネシウムおよびカルシウム等を含
有する培地成分を用いる。また、エシェリヒア属の場合
は、炭素、窒素、リン、カリウムおよびナトリウム等を
含有する培地成分を用いる。さらに、ユーグレナ属の場
合は、炭素、窒素、リン、カリウム、カルシウム、マン
ガンおよび亜鉛等を含有する培地成分でよい。
タミンＢ12を用いた前記各ビタミンＢ12要求性株の培地
の場合と同様でよい。例えば、オクロモナス属の場合
は、炭素源としてグルコースを含み、その他アミノ酸
類、窒素、リン、マグネシウムおよびカルシウム等を含
有する培地成分を用いる。また、エシェリヒア属の場合
は、炭素、窒素、リン、カリウムおよびナトリウム等を
含有する培地成分を用いる。さらに、ユーグレナ属の場
合は、炭素、窒素、リン、カリウム、カルシウム、マン
ガンおよび亜鉛等を含有する培地成分でよい。
【００１３】また、培養条件も従来のビタミンＢ12を用
いた場合と同様の培養条件を用いてよく、例えばｐＨ３
〜７において、温度２０〜４０℃にて行う。
いた場合と同様の培養条件を用いてよく、例えばｐＨ３
〜７において、温度２０〜４０℃にて行う。
【００１４】
【実施例】つぎに本発明を実施例にもとづきさらに具体
的に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定さ
れるものではない。
的に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定さ
れるものではない。
【００１５】［実施例１］表１に示す培地に、各々ビタ
ミンＢ12０.５〜１０ｐＭ、またはＦＢ２０〜５００ｎ
Ｍを添加してビタミンＢ12要求性株であるオクロモナス
・マルハメンシス(Ochromonas malhamensis）を培養し
た。対照としてコリノイド類縁体（ビタミンＢ12、Ｆ
Ｂ、ＦIII、ＦIIIｍ）を添加しない培養も行った。培養
は５００ｍｌ容坂口フラスコを用い、３０℃にて静地培
養を行い、藻体濃度の増加（増殖）は、ＯＤ570にて測
定した。
ミンＢ12０.５〜１０ｐＭ、またはＦＢ２０〜５００ｎ
Ｍを添加してビタミンＢ12要求性株であるオクロモナス
・マルハメンシス(Ochromonas malhamensis）を培養し
た。対照としてコリノイド類縁体（ビタミンＢ12、Ｆ
Ｂ、ＦIII、ＦIIIｍ）を添加しない培養も行った。培養
は５００ｍｌ容坂口フラスコを用い、３０℃にて静地培
養を行い、藻体濃度の増加（増殖）は、ＯＤ570にて測
定した。
【００１６】図１より明らかなごとく、コリノイド類縁
体を含有しない培地では、藻体は増殖しなかった。これ
に対してビタミンＢ12またはＦＢを含む培地では、藻体
の増殖が認められた。ビタミンＢ12、ＦＢの添加濃度が
増加すると藻体の増殖速度も速くなり、ＦＢを５００ｎ
Ｍ添加した場合、ビタミンＢ12を１０ｐＭ添加した場合
と同等の藻体の増殖が認められた。
体を含有しない培地では、藻体は増殖しなかった。これ
に対してビタミンＢ12またはＦＢを含む培地では、藻体
の増殖が認められた。ビタミンＢ12、ＦＢの添加濃度が
増加すると藻体の増殖速度も速くなり、ＦＢを５００ｎ
Ｍ添加した場合、ビタミンＢ12を１０ｐＭ添加した場合
と同等の藻体の増殖が認められた。
【００１７】
【００１８】
【００１９】［実施例２］表２に示す培地に各々ビタミ
ンＢ12５〜１００ｐＭ、ＦＢ１〜２００ｐＭ、またはＦ
III２０〜５０００ｐＭを添加してエシェリヒア・コリ
（Escherichia coli）215の培養を行った。対照として
コリノイド類縁体（ビタミンＢ12、ＦＢ、ＦIII、ＦIII
ｍ）を添加しない培養も行った。なお、培養にあたって
は表２に示した培地組成にD,L-メチオニンを０.０３g/l
添加して培養した菌体を、生理食塩水により５〜６回洗
浄してできるだけコリノイドを除去した接種菌体を用い
た。また、培養には、大型試験管（２００mmφ×200m
m）を用い、３７℃にて静地培養により行った。菌体の
増殖は、ＯＤ570で測定した。
ンＢ12５〜１００ｐＭ、ＦＢ１〜２００ｐＭ、またはＦ
III２０〜５０００ｐＭを添加してエシェリヒア・コリ
（Escherichia coli）215の培養を行った。対照として
コリノイド類縁体（ビタミンＢ12、ＦＢ、ＦIII、ＦIII
ｍ）を添加しない培養も行った。なお、培養にあたって
は表２に示した培地組成にD,L-メチオニンを０.０３g/l
添加して培養した菌体を、生理食塩水により５〜６回洗
浄してできるだけコリノイドを除去した接種菌体を用い
た。また、培養には、大型試験管（２００mmφ×200m
m）を用い、３７℃にて静地培養により行った。菌体の
増殖は、ＯＤ570で測定した。
【００２０】図２より明らかなごとく、コリノイド類縁
体（ビタミンＢ12、ＦＢ、ＦIII）を含まない培地を用
いた場合、菌体は増殖しなかった。これに対しコリノイ
ド類縁体を含む培地では菌体の増殖が認められ、添加濃
度を増加するに従い増加も速くなった。ビタミンＢ12を
１００ｐＭ添加した場合が最も増殖が良好であり、同等
の増殖を示すＦＢおよびＦIII濃度は約２００ｐＭであ
った。
体（ビタミンＢ12、ＦＢ、ＦIII）を含まない培地を用
いた場合、菌体は増殖しなかった。これに対しコリノイ
ド類縁体を含む培地では菌体の増殖が認められ、添加濃
度を増加するに従い増加も速くなった。ビタミンＢ12を
１００ｐＭ添加した場合が最も増殖が良好であり、同等
の増殖を示すＦＢおよびＦIII濃度は約２００ｐＭであ
った。
【００２１】
【００２２】［実施例３］表３に示した培地に、各々ビ
タミンＢ12１ｎＭ、ＦＢ０.２〜４μｍ、ＦIII０.００
５〜０.５μｍ、またはＦIIIｍ０.０５〜０.８ｎＭを添
加してユーグレナ・グラチリス(Euglena gracilis)zの
培養を行った。対照としてコリノイド類縁体（ビタミン
Ｂ12、ＦＢ、ＦIII、ＦIIIｍ）を添加しない培養も行っ
た。なお、培養は２００ml容三角フラスコを用い、２８
℃、暗所にて静地培養を行った。また、藻体の増殖は、
Thomaの血球計数板を用いた計数法により行った。
タミンＢ12１ｎＭ、ＦＢ０.２〜４μｍ、ＦIII０.００
５〜０.５μｍ、またはＦIIIｍ０.０５〜０.８ｎＭを添
加してユーグレナ・グラチリス(Euglena gracilis)zの
培養を行った。対照としてコリノイド類縁体（ビタミン
Ｂ12、ＦＢ、ＦIII、ＦIIIｍ）を添加しない培養も行っ
た。なお、培養は２００ml容三角フラスコを用い、２８
℃、暗所にて静地培養を行った。また、藻体の増殖は、
Thomaの血球計数板を用いた計数法により行った。
【００２３】図３より明らかなごとく、コリノイド類縁
体を含有しない培地では、藻体は増殖しなかった。これ
に対してビタミンＢ12１ｎＭを含有する培地では良好に
増殖し、これと同等の増殖を示すＦＢ、ＦIII、ＦIIIｍ
の各濃度は、４μｍ、０.２μｍ及び０.８ｎｍであっ
た。
体を含有しない培地では、藻体は増殖しなかった。これ
に対してビタミンＢ12１ｎＭを含有する培地では良好に
増殖し、これと同等の増殖を示すＦＢ、ＦIII、ＦIIIｍ
の各濃度は、４μｍ、０.２μｍ及び０.８ｎｍであっ
た。
【００２４】
【００２５】
【００２６】
【発明の効果】従来、用途の知られていなかったＦＢ、
ＦIIIおよびＦIIIｍなどのビタミンＢ12以外のコリノイ
ド類縁体を用いてエシェリヒア属、ユーグレナ属、オク
ロモナス属などのビタミンＢ12要求性の微生物を培養す
ることができる。
ＦIIIおよびＦIIIｍなどのビタミンＢ12以外のコリノイ
ド類縁体を用いてエシェリヒア属、ユーグレナ属、オク
ロモナス属などのビタミンＢ12要求性の微生物を培養す
ることができる。
【図１】オクロモナス・マルハメンシスの増殖を示すグ
ラフである。
ラフである。
【図２】エシェリヒア・コリ２１５の増殖を示すグラフ
である。
である。
【図３】ユーグレナ・グラチリスＺの増殖を示すグラフ
である。
である。
フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:89） (Ｃ１２Ｎ 1/10 Ｃ１２Ｒ 1:90） (72)発明者 永井 史郎 広島県広島市西区己斐本町３丁目１−６− 1101 (72)発明者 西尾 尚道 広島県東広島市八本松町飯田388−10 (72)発明者 山口 高俊 兵庫県姫路市林田町六九谷681番地 ヤヱ ガキ醗酵技研株式会社内 (72)発明者 タパン・クマル・マズムダル 兵庫県姫路市林田町六九谷681番地 ヤヱ ガキ醗酵技研株式会社内
Claims (2)
- 【請求項１】 コビンアミド、５−ヒドロキシ−ａ−ベ
ンズイミダゾールコバミドおよび５−メトキシ−ａ−ベ
ンズイミダゾールコバミドから選ばれた少なくとも１種
のコリノイド化合物をエシェリヒア属、ユーグレナ属ま
たはオクロモナス属の微生物の培養に用いることを特徴
とするビタミンＢ12要求性株の培養方法。 - 【請求項２】 請求項１記載の培養方法により培養され
たビタミンＢ12要求性株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24506491A JPH0556777A (ja) | 1991-08-29 | 1991-08-29 | ビタミンｂ▲１２▼要求性株の培養方法およびこれにより得られたビタミンｂ▲１２▼要求性株 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24506491A JPH0556777A (ja) | 1991-08-29 | 1991-08-29 | ビタミンｂ▲１２▼要求性株の培養方法およびこれにより得られたビタミンｂ▲１２▼要求性株 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0556777A true JPH0556777A (ja) | 1993-03-09 |
Family
ID=17128056
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24506491A Pending JPH0556777A (ja) | 1991-08-29 | 1991-08-29 | ビタミンｂ▲１２▼要求性株の培養方法およびこれにより得られたビタミンｂ▲１２▼要求性株 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0556777A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017122368A1 (ja) * | 2016-01-15 | 2017-07-20 | 三島光産株式会社 | 酸素発生型光合成を行う生物の増殖促進方法 |
-
1991
- 1991-08-29 JP JP24506491A patent/JPH0556777A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017122368A1 (ja) * | 2016-01-15 | 2017-07-20 | 三島光産株式会社 | 酸素発生型光合成を行う生物の増殖促進方法 |
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