JPH0538293A

JPH0538293A - トリプトフアン含有出発媒体に基づくインドールの製造方法、製造されたインドール、問題のインドールを各々含有する香料組成物及び風味剤、並びにそれらによつて芳香付け又は風味付けされた製品

Info

Publication number: JPH0538293A
Application number: JP3045737A
Authority: JP
Inventors: Grinsven Adrianus M Van; バン・グリンスベン・アドリアヌス・マルテイヌス; Alfons L J Peters; ピータース・アルフオンス・ロデウイーク・ヨゼフ; Robert Roos; ルース・ロベルト
Original assignee: Quest International BV
Current assignee: Givaudan Nederland Services BV
Priority date: 1990-02-20
Filing date: 1991-02-18
Publication date: 1993-02-19
Also published as: EP0443211A1; CA2036234A1; US5112747A

Abstract

(57)【要約】［目的］食品中での使用に適するように、インドール
を天然の原材料から天然的方法を用いて工業的規模で製
造する。［構成］天然由来のトリプトファンを含有する発酵媒
体中で、トリプトファンをインドールに転換できる微生
物を培養し、その後、得られたインドールを発酵媒体か
ら食品級抽出剤を用いて単離する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、トリプトファン含有出
発媒体に基づくインドールの調製方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】アークタンダー（Arctander ）のパーフ
ューム・アンド・フレーバ・ケミカルズ（Perfume and
Flavor Chemicals）、１９６９年、１７７２号から、イ
ンドール化合物は、花ような特徴を有する香料（purfum
e ）組成物用の香料成分及び風味化合物（flavouring c
ompound ）として知られている。前述の抄録１７７２号
に示されているように、食品中のインドール濃度が０．
２ｐｐｍより低くても非常に好ましい風味を示すが、そ
の効果はその他の風味物質の存在及びそれらの性質に大
きく依存する。

【０００３】しかしながら、インドールの主要な源はコ
ールタールであり［ウルマンズ・エンシクロペディー・
デア・テクニッヒェン・ケミー（ Ullman's Encyclopad
ieder technichen Chemie ）第１３巻、１９７７年、２
０７頁、及びカーク−オスマー（Kirk-Othmer ）、エン
サイクロペディア・オブ・ケミカル・テクノロジー（En
cyclopedia of Chemical Technology ）、第１３巻、２
１３頁］、このタールは、多くの発癌性化合物を含有す
る［エル・エフ・フィーザー及びエム・フィーザー、有
機化学（Organic Chemistry ）、第３版、５３０頁、こ
の文献はコールタール化合物がインドールと同様な沸点
を有していることを示している）。このような理由によ
り、コールタールからのインドール生成物は、恐らく発
癌性であるか又は少なくともこの点で疑わしい不純物を
微量含有していると考えられる。これと同様な欠点は合
成されたインドールにも関連し、合成インドールもまた
未知の生理学的性質を有する微量の不純物で汚染されて
いる可能性がある。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】インドールが風味剤
中、即ち食品中で使用されているという観点から、この
化合物を天然の原材料からこれもまた天然的であると考
えられる方法を用いて工業的規模で製造することは有利
であると考えられる。

【０００５】

【課題を解決するための手段】従って、本発明は、トリ
プトファン含有出発媒体に基づいてインドールを「自然
的（natural ）」に製造する方法であって、（ａ）天然
由来のトリプトファンを含有する発酵媒体中で、トリプ
トファンをインドールに転換できる微生物を培養する工
程、及び（ｂ）得られたインドールを発酵媒体から「食
品級（food grade）」抽出剤を用いて単離する工程、を
含む方法に関する。

【０００６】上記の点で、トリプトファンのインドール
への微生物的転換それ自体は従来技術から公知であるこ
とを示す。アプライド・マイクロバイオロジー（ Appli
edMicrobiology）、１９７４年３月、５４０〜５４８
頁、第２７巻、Ｎｏ．３によれば、トリプトファンのＤ
及びＬ異性体と２２の関連したインドール化合物をガラ
ス容器中でルミナル（ruminal ）微生物と一緒に保温し
た。Ｄトリプトファンはそれ以上インドール化合物に分
解しなかったが、トリプトファンのＬ異性体はインドー
ル、スカトール、及び少量のインドールを有するインド
ールアセテートの錯混合物に転換された。前記転換は以
下に示した式化１に従って起こる可能性が最も高い。

【０００７】

【化１】

【０００８】「メソッズ・イン・エンザイモロジー（Me
thods in Enzymology ）」、第２巻、エス・コロウィッ
ク（S. Colowick ） c.s. 編集、ニューヨーク・アカデ
ミック・プレス（New York Academic Press ）、１９５
５年、２３８〜２４２頁には、酵素トリプトファナーゼ
によるトリプトファンの開裂が科学的目的のために研究
されている。トリプトファナーゼ酵素は乾燥した未同定
株のエッシェリチア・コリ（Escherichia coli）細胞の
形態で使用されたか、又は前記乾燥細胞から抽出され
た。開裂生成物は、インドール、アンモニア、及びピル
ビン酸であった。インドールは抽出剤トルエンで抽出さ
れており、食品業界では許容できないものと見なされ
る。

【０００９】上述の引用文献の結果とは反対に、バイオ
テクノロジー・アンド・バイオエンジニアリング（Biot
echnology and Bioengineering）、第 XXV巻、９９９〜
１０１１頁（１９８３年）には、高いトリプトファン合
成酵素含有率を有し、トリプトファナーゼ活性を示さな
いＥ．コリ（E.coli）Ｂ１０株の全細胞が、先駆体とし
てのその他のインドールの中からＬ−トリプトファンを
製造するための酵素源として適用されている。即ち、こ
の文献は本発明の目的から見ると反対の結果をもたらす
方法に関するものである。

【００１０】上述したように、本発明は、天然トリプト
ファンそのもの又は天然由来のトリプトファン含有物質
を微生物的にインドールに転換することに基づく。この
種の物質の例は、カゼイン加水分解物［例えば、オラン
ダ、ツウィンドレヒトのクエスト・インターナショナル
社の市販製品であるハイプロール（Hyprol）８０５２及
びハイプロール８０５４］、大豆蛋白加水分解物（例え
ば、ドイツのメルク社の製品７２１２、オランダ、ツウ
ィンドレヒトのクエスト・インターナショナル社の製品
ハイプロール８００９及びハイプロール８１１１）、及
びホエー蛋白加水分解物（例えば、オランダ、ツウィン
ドレヒトのクエスト・インターナショナル社の製品ハイ
プロール８０８０及びハイプロール８０８７）などのよ
うな加水分解された蛋白質物質である。また、イースト
自己分解物［例えば、市販製品であるタイプ・カット
（Type Kat）（オーリー（Ohly））、及びタイプ・エキ
ストラ（Type Extra）／ＬＳ（オランダのテフコ・フー
ズ・ビー・ブイ(Tefco FoodsB.V. ）］のようなその他
の蛋白質物質を酵素によって加水分解して、それをトリ
プトファン含有出発物質として使用してもよい。

【００１１】遊離のトリプトファンを含有する得られた
加水分解物及びトリプトファンそのものは水性サスペン
ジョンの形態で使用するのが好ましい。

【００１２】トリプトファンのインドールへの微生物的
転換用としては、イースト、バクテリア、原生動物、そ
の他のような多くの種類の微生物が適切である。好まし
い微生物は、トリプトファンに比べてインドールを大幅
にゆっくりと代謝するか又はインドールを代謝できない
ものである。例えば、バクテリアの適する属の例は、エ
ッシェリチア（Escherichia ）、セラティア（Serrati
a）、シトロバクテル（Citrobacter ）、プロテウス（P
roteus ）、プロビデンシア（Providencia ）、クレブ
シエラ（Klebsiella）、ハロバクテリウム・サリナリウ
ム（Halobacterium salinarium）のようなハロバクテリ
ウム（Halobacterium ）、フラボバクテリウム・インド
テイチクム（Flavobavterium indotheiticum）のような
フラボバクテリウム（Flavobavterium）、アエロモナス
（Aeromonas ）、ビブリオ（Vibrio）、パステウレラ
（Pasteulla ）、クロストル・サッカロリチクム（Clos
tr. sacchrolyticum）、クロストル・スカトリゲヌム
（Clostr. scatoligenum）、及びクロストル・インドリ
ゲネス（Clostr. indoligenes ）のようなクロストリジ
ウム（Clostridium ）、及びバシルス・アルベイ（Baci
llus alvei）のようなバシルス（Bacillus）である。こ
れらの属の株の特定の例は、Ｅ．コリＡＴＣＣ８７３
９及びセラティア・オドリフェラ（Serratia odrifera
）ＡＴＣＣ３３１４３である。

【００１３】本発明による微生物的転換は、使用される
微生物に応じて好気的又は嫌気的の両方で行うことがで
きる。発酵ブイヨン即ち媒体中の温度は使用される微生
物に依存するが、通常１５乃至５０℃、好ましくは２５
乃至３５℃の間で変化できる。しかし、好熱性微生物の
場合には５０乃至７０℃の間で変化できる。発酵ブイヨ
ンのｐＨは、通常１乃至１１の範囲の値、好ましくは５
乃至８の範囲の値を有する。

【００１４】微生物的転換が好気的に行われる場合、空
気、酸素に富んだ空気、又は酸素そのもののいずれを使
用してもよく、その量は使用する微生物が必要とする量
を越えてもよい。例えば、空気流量は０．０１ｖｖｍ
（体積／体積・分）を越えてもよく、発酵ブイヨンのｐ
Ｏ_２を飽和より１０％高く保つために、０．０５乃至１
０ｖｖｍの範囲で変化するのが好ましい。

【００１５】微生物的転換が嫌気的に行われる場合、発
酵ブイヨンを窒素ガスでフラッシュしてもよい。例え
ば、発酵ブイヨンのｐＯ_２を０％に保つために、窒素ガ
ス流量が０．０５乃至１０ｖｖｍの間で変化させてもよ
い。また、ニトレートのような適する電子受容体を発酵
媒体中に導入すべきである。

【００１６】発酵ブイヨンに、そこに含まれている微生
物の十分な成長に必要な栄養素、即ち、炭素源、窒素
源、無機塩、成長因子、及び微量元素を添加してもよ
い。この点に関して、よくバランスの取れた培地は少な
くとも少量（即ち、０．１重量％）のイーストエキスを
含むのが好ましく、これはほとんどの場合ビタミン、無
機塩類、微量元素などを別個に添加する必要性をなくす
ということが認められた。

【００１７】発酵ブイヨンには少なくとも１０００細胞
／ｇを接種するのが好ましい。基質として使用されるト
リプトファン含有生成物は、唯一の炭素源として簡便に
添加できる。トリプトファン含有生成物は、供給バッチ
式操作（fedbatch-type op-ration）において徐々に添
加できる。

【００１８】所望により、ヨーロピアン・ジャーナル・
オブ・アプライド・マイクロバイオロジー・アンド・バ
イオテクノロジー（Eur. J. App.Mic. & Biotech.）、
１５、（１９８２）、１４７〜１５２頁、及びバイオテ
クノロジー・アンド・バイオエンジニアリング、１９、
（１９７７）、３８７〜３８８頁に記載されているよう
な通常の技術を用いて、使用される微生物を担持体上に
不動化してもよい。

【００１９】問題の微生物的転換のスムーズな進行を保
護するために、トリプトファン含有出発物質を、転換処
理に施す前に、滅菌するのが一般的である。この滅菌
は、出発物質を１１０乃至１２１℃の温度で蒸熱（stea
ming）するか又は加熱するかによって行うことができ
る。

【００２０】トリプトファンのインドールへの微生物的
転換が終了した後、ブイヨンを７０乃至９５℃の範囲の
温度、好ましくは約８０℃で０．１乃至０．５時間低温
殺菌するのが有利である。

【００２１】その後、低温殺菌されたブイヨンを水蒸気
蒸留（即ち、「食品級」抽出剤である水）にさらし、こ
れによってインドールが揮発性化合物としてブイヨンか
ら単離される。最後に、インドール含有蒸留物を、必要
であれば、問題の生成物を回収し濃縮するためにさらに
処理する。例えば、インドール含有蒸留物をマルトデキ
ストリン又はその他の澱粉誘導体のようなキャリヤーと
混合して、噴霧乾燥してもよい。

【００２２】その他の一般的に知られている適する単離
方法は、逆浸透圧法、クロマトグラフィー、及び「食品
級」抽出剤を使用する抽出法である。

【００２３】上記の「食品級（food grade）」抽出剤と
いう用語は、以下の群の許容可能な溶媒を包含する。

【００２４】ａ）水、ｂ）溶媒的特性を有する食用物質（例えば、エタノー
ル、オリーブ油その他のような脂肪油）、及びｃ）風味剤用のキャリヤー溶媒として認められている
溶媒、即ち、プロパン、ブタン、ブチルアセテート、エ
チルアセテート、エタノール、二酸化炭素、アセトン、
亜酸化窒素、ジエチルエーテル、イソブタン、ヘキサ
ン、シクロヘキサン、メチルアセテート、ブタン−１−
オール、ブタン−２−オール、エチルメチルケトン、ジ
ククロメタン、及びメチル−プロパン−１−オール。

【００２５】インドールは、トリプトファンのインドー
ルへの微生物的転換の進行に対して悪影響を与えるので
（メソッズ・イン・エンザイモロジー、上記引用部分
中、２４１頁、第５パラグラフ、及びバイオテクノロジ
ー・アンド・バイオエンジニアリング、上記引用部分
中、１００２頁、４〜５行）、水不混和性の「好インド
ール性（indole-philic ）」媒体（水溶解性が一般に＜
２．５重量％、好ましくは＜１重量％）、例えば「食品
級」油状製品をブイヨンに導入するのが本発明の実施態
様の１つである。このような油状製品の適する例は、オ
リーブ油、大豆油、アラキド油、アボカド油、菜種油、
綿実油、コーン油、ヒマワリ油、ダイナミット・ノーベ
ル（Dynamit Nobel ）Ａ．Ｇ．の製品「ミグリオール
（Miglyol ）８１２」、エチルラウレート、エチルオレ
エート、イソプロピルミリステート、及びイソプロピル
パルミテートである。この処置の結果として、調製され
たインドールは油相中に吸収され、一方トリプトファン
はその溶解性のために水性相中に残る。油／水比率は使
用される材料と微生物の性質に依存するが、１：１乃至
１：２０の間で変化するのが好ましい。得られたインド
ールを含有するブイヨンは上述した方法でさらに処理す
ることができ、或いは油をブイヨンから分離してもよ
い。

【００２６】本発明によるインドールは、香料組成物及
び芳香付けが必要な製品及び材料中において良好に使用
できる。

【００２７】「香料組成物（purfume composition ）」
いう用語は、芳香成分（fragrance）と所望により補助
物質とから成る混合物であって、適当な溶媒中に溶解で
きるか又は粉末状物質と混合でき、皮膚及び／又は様々
な製品に所望の匂いを付けるために使用できるものを意
味する。このような香料組成物並びに本発明による化合
物そのものが製品類を芳香付けするために使用できる。
このような芳香付けされる製品の例は、石鹸、シャワー
及び浴用製品、洗浄剤、食器用洗浄剤、空気清涼剤及び
室内用スプレー、ポマンダー（pommander ）、ろうそ
く、及びクリーム、軟膏、ローション、コロン、髭剃り
の前後用ローション、タルカムパウダー、整髪料、体臭
防止剤、及び発汗防止剤のような化粧品である。

【００２８】本発明によるインドールと組み合わせて香
料組成物を調製するのに使用できる芳香成分及びそれら
の混合物は、精油、アブソリュート（absolute）、レジ
ノイド、樹脂、コンクリート（concrete）、その他のよ
うな天然産生成物、特に、飽和及び不飽和化合物、脂肪
族、炭環式、及び複素環式化合物を含む、炭化水素、ア
ルコール、アルデヒド、ケトン、エーテル、酸、エステ
ル、アセタール、ケタール、ニトリル、その他のような
合成芳香成分である。

【００２９】本発明による化合物と組み合わせて使用で
きる芳香成分の例は、ゲラニオール、ゲラニルアセテー
ト、リナロール、リナリルアセテート、テトラヒドロリ
ナロール、シトロネロール、シトロネリルアセテート、
ジヒドロミルセノール、ジヒドロミルセニルアセテー
ト、テトラヒドロミルセノール、テルピネオール、テル
ピニルアセテート、ノポール、ノピルアセテート、２−
フェニルエタノール、２−フェニルエチルアセテート、
ベンジルアルコール、ベンジルアセテート、ベンジルサ
リチレート、スチラリルアセテート、ベンジルベンゾエ
ート、アミルサリチレート、ジメチルベンジルカルビノ
ール、トリクロロメチルフェニルカルビニルアセテー
ト、ｐ−ｔ−ブチルシクロヘキシルアセテート、イソノ
ニルアセテート、ベチベリルアセテート、ベチベロー
ル、α−ヘキシルシンナムアルデヒド、２−メチル−３
−（ｐ−ｔ−ブチルフェニル）−プロパナール、２−メ
チル−３−（ｐ−イソプロピルフェニル）−プロパナー
ル、３−（ｐ−ｔ−ブチルフェニル）−プロパナール、
トリシクロデセニルアセテート、トリシクロデセニルプ
ロピオネート、４−（４−ヒドロキシ−４−メチルペン
チル）−３−シクロヘキセンカルボアルデヒド、４−
（４−メチル−３−ペンテニル）−３−シクロヘキセン
カルボアルデヒド、４−アセトキシ−３−ペンチル−テ
トラヒドロピラン、３−カルボキシメチル−２−ペンチ
ル−シクロペンタン、２−ｎ−ヘプチルシクロペンタノ
ン、３−メチル−２−ペンチル−２−シクロペンタノ
ン、ｍ−デカナール、ｎ−ドデカナール、デク−９−エ
ン−１−オール、フェノキシエチルイソブチレート、フ
ェニルアセトアルデヒドジメチルアセタール、フェニル
−アセトアルデヒドジエチルアセタール、ゲラニルニト
リル、シトロネリルニトリル、セドリルアセテート、３
−イソカンフィルシクロヘキサノール、セドリルメチル
エーテル、イソロンギホルアノン、オーベピンニトリ
ル、オーベピン、ヘリオトロピン、クマリン、オイゲノ
ール、バニリン、ジフェニルオキシド、ヒドロキシシト
ロネラール、イオノン、メチルイオノン、イソメチルイ
オノン、イトロン、シス−３−ヘキサノール及びそのエ
ステル、インダンムスク芳香成分、テトラリンムスク芳
香成分、イソクロマンムスク芳香成分、マクロ環式ケト
ン、マクロラクトンムスク芳香成分、エチレンブラシレ
ート、芳香族ヌトリムスク（nutri-musk）芳香成分であ
る。

【００３０】本発明によるインドール生成物を含有する
香料組成物中に配合できる補助成分及び溶媒は、例え
ば、エタノール、イソプロパノール、ジエチレングリコ
ールモノエチルエーテル、ジエチルフタレート、その他
である。

【００３１】香料組成物又は芳香付けされた製品中で使
用できる本発明によるインドール生成物の量は広い範囲
内で変化することができ、例えば、芳香成分が使用され
る製品、香料組成物のその他の成分の性質及び量、並び
に所望の臭気効果に依存する。従って、非常に広い範囲
しか示すことができないが、それで当業者が本発明によ
る化合物を独立して使用するのに十分な情報を与える。
ほとんどの場合、芳香組成物中わずか０．００１重量％
の量で、明らかに知覚できる臭気効果を得るのに十分で
ある。一方、特殊な臭気効果を得るためには、組成物中
１重量％以上の量で使用することも可能である。

【００３２】本発明による香料組成物によって芳香付け
された製品においては、その濃度は比例して低くなり、
製品中に使用される組成物の量に依存する。

【００３３】本発明の方法によって得られたインドール
生成物は、風味組成物又は食品、例えば、マーガリン、
チーズ、及びその他の乳製品にも添加できる。本発明に
よるインドール生成物と併用できる風味成分は本技術分
野において公知であり、例えば、エス・アークタンダー
（S. Arctander）の「天然由来の芳香及び風味材料（Re
rfume and Flavor Materials of Natural Origin）」
（米国、ニュージャージー、エリザベス、１９６９）、
ティー・イー・フリア（T. E. Furia ）らの「シー・ア
ール・シー・フェナロリの風味成分のハンドブック（CR
C Fenaroli'sHandbook of Flavor Ingredients ）」、
第２版、［クリーブランド、シー・アール・シー・プレ
ス・インク（CRC Press Inc.）、１９７５］、及びエイ
チ・ビー・ヒース（H. B. Heath ）の「風味剤の源の本
（Source Book of Flavors）」［ジ・アビ・パブリッシ
ング・カンパニー・インク（ The Avi PublishingCo
mpany Inc.）、コネチカット、ウェストポイント、１９
８１）などに記載されている。

【００３４】本発明を以下の実施例によって説明する
が、本発明はそれらに限定されるものではない。

【００３５】

【実施例】実施例１１００リットルの発酵槽に７ｋｇの酵素的に加水分解し
たカゼイン（オランダ、ツウィンドレヒトのクエスト・
インターナショナル社の製品ハイプロール８０５２）と
６３ｋｇの水を装填した。混合物を１２１℃で２０分間
水蒸気滅菌した後、混合物を３０℃まで冷却した。その
後、１０Ｅ８（１０⁸）細胞／ｍｌのエッシェリチア・
コリＡＴＣＣ８７３９株を含有する前培養液（prec
ulture）の０．７ｋｇを用いて、混合物を無菌的に接種
した。

【００３６】混合物を攪拌し、０．１ｖｖｍの流量で通
気し、温度を３０℃で一定に保った。サンプルを定期的
に採取しトリプトファンとインドールの濃度を測定し
た。遊離のトリプトファンの量をもはや測定できなくな
ったら（約１乃至２日後）、ブイヨンを８０℃で２０分
間加熱することによって低温殺菌した。その時のインド
ール含有率は約０．０５重量％であった。続いて、イン
ドールを完全に回収するのに十分な時間水蒸気蒸留する
ことによってインドールを混合物から単離した。得られ
た蒸留物１ｋｇ当たり１ｋｇのマルトデキストリン［パ
セリ（Paselli ）ＭＤ２０、オランダのＡＶＥＢＥ
製）を添加することによって、蒸留物を噴霧乾燥した。
０．０５重量％のインドールを含有する噴霧乾燥生成物
をチーズ中の成分及び乳製品型風味剤として使用した。

【００３７】実施例２実施例１と同様であるが、Ｅ．コリＡＴＣＣ８７３
９株の代わりにセラティア・オドリフェラ（Serratia o
dorifera）ＡＴＣＣ３３１４３株を使用した。噴霧
乾燥生成物は０．０５重量％のインドールを含有してい
た。

【００３８】実施例３実施例１と同様であるが、７ｋｇの大豆蛋白加水分解物
（７２１２、ドイツ、ダルムスタットのＭＥＲＣＫ製）
と６３ｋｇの水を発酵混合物として使用した。１乃至２
日後、遊離のトリプトファンが完全に消費され、発酵プ
ロセスを停止した。その時のインドール含有率は約０．
０２乃至０．０２５重量％であった。

【００３９】実施例４実施例１と同様であるが、７ｋｇのカゼイン（オラン
ダ、ツウィンドレヒトのクエスト・インターナショナル
社の製品）と６３ｋｇの水を発酵混合物として使用し
た。遊離のトリプトファンを得るために、カゼインをパ
ンクレアチン（pancreatine ）酵素［ヤン・デッカー(J
an Dekker）、オランダ、ボルメルビーア］を用いて酵
素的に加水分解した。滅菌後、実施例１と同様の発酵と
それ以降の手順を行った。噴霧乾燥生成物は０．０５重
量％のインドールを含有していた。

【００４０】実施例５実施例１と同様であるが、１７．５ｋｇのカゼイン加水
分解物（オランダ、ツウィンドレヒトのクエスト・イン
ターナショナル社の製品ハイプロール８０５２）、７Ｋ
ｇのアラキド油［オランダのスミルボエト（Smilvoet）
Ｂ．Ｖ．製］、と４５．５ｋｇの水を発酵混合物として
使用した。

【００４１】遊離のトリプトファンを完全に転換させた
後、混合物を８０℃で２０分間低温殺菌した。インドー
ルを水蒸気蒸留によって単離し、吸着クロマトグラフィ
ーを使用して濃縮した結果、エタノール中０．６重量％
のインドールを含む溶液を得た。

【００４２】実施例６実施例１と同様であるが、０．３５ｋｇの純粋天然Ｌ−
トリプトファン（ドイツ、デュッセルドルフの協和発酵
製）、１．４ｋｇのカゼイン加水分解物（オランダ、ツ
ウィンドレヒトのクエスト・インターナショナル社の製
品ハイプロール８０５２）、６１．２５ｋｇの水、及び
７Ｋｇのアラキド油［オランダのスミルフード（Smilfo
od）Ｂ．Ｖ．製］を発酵ブイヨンとして使用した。

【００４３】２乃至３日後、トリプトファンは完全に消
費され、約２５００乃至３０００ｐｐｍのインドールが
形成された。インドールを水蒸気蒸留によって単離し
た。１４０リットルの蒸留物を３５リットルのブチルア
セテートで抽出した。その後、溶媒のブチルアセテート
を蒸発させると、残留生成物は＞９９重量％のインドー
ル（＝２６０ｇ）を含有していた。

【００４４】実施例７実施例１と同様であるが、同じ基質に２ｋｇのデキスト
ロース（オランダのＡＶＥＢＥ製）を添加して使用し
た。実施例１と同じ発酵条件を用いたが、空気流は除外
した。噴霧乾燥生成物は０．０５重量％のインドールを
含有していた。

【００４５】実施例８実施例１と同様であるが、同じ基質に０．５ｋｇのＫＮ
Ｏ３（ドイツ、ダルムスタットのＭＥＲＣＫ製）を添加
して使用した。実施例７と同じ発酵条件を用いた。噴霧
乾燥生成物は０．０２重量％のインドールを含有してい
た。

【００４６】実施例９「ホワイトソース」に配合するのに適する風味剤を以下
の成分を混合することによって調製した。

【００４７】重量部酪酸３０ヘキサン酸１０デカン酸５オクタン酸５ジアセチル５酢酸１０エチルヘキサノエート０．５インドール（6000ppm ）（実施例５の生成物）１大豆油３３

【００４８】この風味剤を「ホワイトソース」（標準的
組成）に０．５重量％の投与量で配合した。得られた風
味はバランスがよく取れておりクリーミーであった。

【００４９】実施例１０香料組成物「ジャスミンアブソリュート」を以下の表の
成分を混合することによって調製した。

【００５０】表重量部ジャシリン（Jasylin ）（オランダ、ナーデンの１４０クエスト・インターナショナル）ジャスモピラン（Jasmopyrane ）１４０ベンジルアセテート１２０インドール（実施例６の生成物）５インドレン［フランス、アルジェンチュールのロエル・１ベルトラン・デュ・ポン（Roere Bertrand du Pont）］パラ−クレゾール＊５ラクトン（Lacton）Ｃ１１ガンマ１丁子（clove ）葉油蒸留物１０スチラックス（Styrax）樹脂１０ナルドキシル（Nardoxyl）（オランダ、ナーデンの５クエスト・インターナショナル）ブチュリーフ（Buchuleaf ）油＊５キャリクソール（Calyxol ）（オランダ、ナーデンの５０クエスト・インターナショナル）メチルジヒドロジャスモネート５０ジヒドロジャスモン１０マルトール＊２ノナジエン−２，６−アールトランス／シス＊＊１％１イラング（Ylang ）Ｐ９１．３８５（オランダ、ナーデンの３０クエスト・インターナショナル）イランゴイル・エキストラ・バンバオ（Ylangoil extra Bambao ）２（オランダ、ナーデンのクエスト・インターナショナル）メチルアントラニレート１０ミルレ（Myrrhe）樹脂１０表（続）重量部アミルシンナムアルデヒド２３０ヘキシルシンナムアルデヒド１００ジャスモンシス＊２ダマスコン（Damascon）アルファ＊１リナロール６０＊ジプロピレングリコール中１０％溶液として＊＊ジプロピレングリコール中１％溶液として。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 17/10 Ｃ１２Ｒ 1:20） (Ｃ１２Ｐ 17/10 Ｃ１２Ｒ 1:63） (Ｃ１２Ｐ 17/10 Ｃ１２Ｒ 1:145） (Ｃ１２Ｐ 17/10 Ｃ１２Ｒ 1:07） (72)発明者バン・グリンスベン・アドリアヌス・マルテイヌスオランダ国、5348 ジエイアール・オズ、ドーレンストラート１ (72)発明者ピータース・アルフオンス・ロデウイーク・ヨゼフオランダ国、1402 ブイケイ・ブツサム、ジエイ・エイチ・バン・ホフウエグ 24 (72)発明者ルース・ロベルトオランダ国、1402 シーテイー・ブツサム、ゲンテイアンストラート 46 (54)【発明の名称】トリプトフアン含有出発媒体に基づくインドールの製造方法、製造されたインドール、問題のインドールを各々含有する香料組成物及び風味剤、並びにそれらによつて芳香付け又は風味付けされた製品

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】トリプトファンからインドールを製造す
る方法であって、ａ）天然由来のトリプトファンを含有する発酵媒体中
で、トリプトファンをインドールに転換できる微生物を
培養する工程、及びｂ）得られたインドールを発酵媒体から食品級抽出剤を
用いて単離する工程、を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】工程（ａ）において、大豆蛋白加水分解
物、カゼイン加水分解物、又はホエー蛋白加水分解物を
天然由来のトリプトファンを含有生成物として使用する
こと特徴とする請求項１の方法。
【請求項３】工程（ａ）において使用される天然由来
のトリプトファンを水性分散体の形態で使用すること特
徴とする請求項１又は請求項２の方法。
【請求項４】工程（ａ）を好気的に行うこと特徴とす
る請求項１乃至３のいずれか１請求項の方法。
【請求項５】工程（ａ）を嫌気的に行うこと特徴とす
る請求項１乃至３のいずれか１請求項の方法。
【請求項６】エッシェリチア及びセラティアの属の株
を工程（ａ）において使用すること特徴とする請求項１
乃至５のいずれか１請求項の方法。
【請求項７】Ｅ．コリＡＴＣＣ８７３９株又はセ
ラティア・オドリフェラＡＴＣＣ３３１４３株を工
程（ａ）において使用することを特徴とする請求項６の
方法。
【請求項８】工程（ａ）を３０乃至４０℃の範囲の温
度で行うことを特徴とする請求項１乃至７のいずれか１
請求項の方法。
【請求項９】インドールを発酵ブイヨンから回収する
ための単離工程を行う前に、インドール含有発酵ブイヨ
ンを低温殺菌することを特徴とする請求項１乃至８のい
ずれか１請求項の方法。
【請求項１０】発酵ブイヨンの低温殺菌を７０乃至９
５℃の範囲の温度で０．５乃至０．１時間行うことを特
徴とする請求項９の方法。
【請求項１１】インドール含有発酵ブイヨンに水蒸気
蒸留工程を施すことを特徴とする請求項１乃至１０のい
ずれか１請求項の方法。
【請求項１２】水蒸気蒸留の蒸留物に噴霧乾燥処理を
施すことを特徴とする請求項１１の方法。
【請求項１３】工程（ａ）を油／水分散体媒体中で行
うことを特徴とする請求項１乃至１２のいずれか１請求
項の方法。
【請求項１４】工程（ａ）の媒体中で、アラキド油又
は大豆油を使用することを特徴とする請求項１３の方
法。
【請求項１５】油を１：１乃至１：２０の油／水比率
で使用すること特徴とする請求項１３又は請求項１４の
方法。
【請求項１６】請求項１乃至１５のいずれか１請求項
の方法のによって得られたインドール生成物。
【請求項１７】風味剤として有効量の請求項１乃至１
５のいずれか１請求項の方法のによって得られたインド
ール生成物を含む風味組成物。
【請求項１８】風味剤として有効量の請求項１６のイ
ンドール生成物又は請求項１７の風味組成物を含む乳製
品様の食品。
【請求項１９】発臭剤として有効量の請求項１乃至１
５のいずれか１請求項の方法のによって得られたインド
ール生成物を含む香料組成物。
【請求項２０】発臭剤として有効量の請求項１６のイ
ンドール生成物又は請求項１９の香料組成物を含む芳香
付けされた製品。