JPH05339268A - 新規メトトレキセート誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 〔構 成〕 〔Ｒ^１；炭素数１乃至４の低級アルキル基、Ｒ^２；炭素
数１乃至４の低級アルキル基またはトリフルオロメチル
基、Ｒ^３；水素原子または炭素数１乃至４の低級アルキ
ル基またはトリフルオロメチル基、Ｒ^４；水素原子また
は炭素数１乃至４の低級アルキル基、ｎ；１から４まで
の整数、Ｒ^５；ＣＯＯＲ^６またはＳＯ_３Ｈ〕で示される
化合物。 〔効 果〕この化合物は強い抗リウマチ作用があるので
抗リウマチ剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明は、新規なメトトレキセー
ト誘導体、更に詳しくは、抗リウマチ剤として有用な新
規なメトトレキセート誘導体に関する。 【０００２】 【従来の技術・発明が解決しようとする課題】メトトレ
キセートは古くより白血病の治療薬として用いられてき
たが、１９５１年Ｇｕｂｎｅｒらが慢性関節リウマチ
（ＲＡ）や乾癬に用いて有効性を報告して以来ＲＡの治
療薬として欧米で使用されてきた。比較的最近になっ
て、用法、用量の詳細な検討が実施され、低用量メトト
レキセート療法が比較的副作用が少なく、しかも優れた
有効性を発揮することが明らかになってきた。しかしメ
トトレキセート服用により生ずる肝障害や肺繊維化等の
副作用も無視できないため、さらに副作用が少なく、か
つ効力の優れた薬物の登場が望まれている。 【０００３】本発明者らは、メトトレキセート誘導体に
おいて抗リウマチ作用面でより優れた化合物を求めて鋭
意研究をし、本発明をなすに至った。 【０００４】 【課題を解決するための手段】本発明は、下記一般式
（Ｉ） 【化２】 式中、Ｒ^１は、炭素数１乃至４の低級アルキル基を示
し；Ｒ^２は炭素数１乃至４の低級アルキル基またはトリ
フルオロメチル基を示し；Ｒ^３は水素原子または炭素数
１乃至４の低級アルキル基またはトリフルオロメチル基
を示し；Ｒ^４は水素原子または炭素数１乃至４の低級ア
ルキル基を示し；ｎは１から４までの整数を示し；Ｒ^５
は一般式ＣＯＯＲ^６（ここでＲ^６は水素原子または炭素
数１乃至４の低級アルキル基を示す）で表される基また
は式ＳＯ_３Ｈで表される基を示す；で示されるメトトレ
キセート誘導体を提供するものである。 【０００５】本発明の化合物は、いずれも文献未載の新
規化合物であり、たとえば以下の様にして合成される。 （方法Ａ） 【化３】【０００６】（方法Ｂ） 【化４】（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５およびｎは前記
と同じ意味を示し、Ｒ′は炭素数１乃至４の低級アルキ
ル基を示し、Ａ^１およびＡ^２は保護基を示し、Ｘはハロ
ゲン原子を示す。） 【０００７】方法Ａにおいて、一般式（１）の化合物か
ら一般式（２）の化合物を得る反応は、例えば炭酸水素
ナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸カリウム等の共存
下、水−メタノール、水−エタノール、水−プロパノー
ル等の混合溶媒中、一般式（１）の化合物と式Ｘ_２で示
されるハロゲンを反応させることにより行う。一般式Ｘ
_２としてはフッ素、塩素、臭素、ヨウ素等が挙げられる
が、一般式（１）の化合物においてＲ^２またはＲ^３がト
リフルオロメチルである場合、反応させるハロゲンはヨ
ウ素が好ましい。 【０００８】一般式（２）の化合物から一般式（３）の
化合物を得る反応は、一般式（２）の化合物と無水酢酸
を、トルエン、ベンゼン、キシレン、ジオキサン、ピリ
ジン等の溶媒中反応させることにより行う。尚、一般式
（１）の化合物から一般式（２）の化合物を得るまでの
工程と、一般式（２）の化合物から一般式（３）の化合
物を得るまでの工程は逆になっていてもよい。 【０００９】一般式（３）の化合物から一般式（４）の
化合物を得る反応は、一般式（３）の化合物とシアン化
銅を例えば、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルホルムア
ミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルプロピレンウレ
ア、ヘキサメチルホスホリックトリアミド等の溶媒中反
応させることにより行う。 【００１０】一般式（４）の化合物から一般式（５）の
化合物を得る反応は、一般式（４）の化合物と１２Ｎ−
塩酸、５０％−水酸化ナトリウム水溶液等を反応させる
ことにより行う。 【００１１】一般式（５）の化合物と一般式（６）の化
合物から一般式（７）の化合物を得る反応は、メタノー
ル、エタノール等のアルコール中、塩酸または硫酸の共
存下で反応させることにより行う。また、アルコール中
塩化チオニルの共存下で行ってもよい。式中Ｒ′で示さ
れるアルキル基としては、メチル基、エチル基等が好ま
しい。 【００１２】一般式（７）の化合物と一般式（８）の化
合物から一般式（９）の化合物を得る反応は、一般式
（７）の化合物をピリジン等の溶媒に溶解または水素化
ナトリウムの共存下、テトラヒドロフラン、ジメチルホ
ルムアミド、ジメトキシエタン、ジオキサン、トルエン
等に懸濁させ、一般式（８）の化合物を加え、攪拌する
ことにより行う。式中Ａ^１で示される保護基としては、
例えばｐ−トルエンスルホニル基、ベンジルオキシカル
ボニル基、アセチル基等が挙げられる。 【００１３】一般式（９）の化合物と一般式（１０）の
化合物から一般式（１１）の化合物を得る反応は、一般
式（９）の化合物を例えば無水ジメチルホルムアミド、
テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン、ジオキサン等
に溶解させ、氷冷下、例えば水素化ナトリウムを加え１
０℃〜１２０℃、好ましくは室温で攪拌した後、一般式
（１１）の化合物を加え、１０℃〜１２０℃、好ましく
は室温で攪拌することにより行う。 【００１４】一般式（１１）の化合物から一般式（１
２）の化合物を得る反応は、一般式（１１）の化合物を
メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン等の溶媒
中、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム水溶液等の共存
下、１０℃〜１００℃、好ましくは室温で反応させるこ
とにより行う。 【００１５】一般式（１２）の化合物から一般式（１
３）の化合物を得る反応は、一般式（１２）の化合物を
塩化チオニル、オキサリルクロリド等の酸ハロゲン化剤
に懸濁し、触媒量のジメチルホルムアミド等の共存下、
室温で撹拌することにより行う。 【００１６】一般式（１３）の化合物と一般式（１４）
の化合物から一般式（１５）の化合物を得る反応は、一
般式（１３）の化合物をジクロロメタン等の溶媒に溶解
したものを、氷冷下または水冷下で一般式（１４）の化
合物の水溶液に加え、炭酸カリウム、水酸化ナトリウ
ム、炭酸水素ナトリウム等の無機塩基の共存下、室温で
撹拌することにより行う。 【００１７】一般式（１５）の化合物から一般式（１
６）の化合物を得る反応は、アニソールやフェノール等
を臭化水素−酢酸溶液に溶解した溶液に一般式（１５）
の化合物を加え、１０℃〜６０℃好ましくは室温で撹拌
することにより行う。また、Ａ^１がカルボベンゾキシ基
の場合、この一般式（１５）の化合物から一般式（１
６）の化合物を得る反応は、一般式（１５）の化合物を
メタノールやエタノール、酢酸等の溶媒に溶解させ、パ
ラジウム−炭素を加えた後、水素雰囲気下室温にて撹拌
することにより行ってもよい。 【００１８】一般式（１６）の化合物と一般式（１７）
の化合物から一般式（Ｉ）の化合物を得る反応は、一般
式（１６）の化合物と一般式（１７）の化合物をジメチ
ルアセトアミド、ジメチルホルムアミド等の溶媒中、０
℃〜１００℃好ましくは５０℃〜６０℃で撹拌して行
う。特にＲ^４が水素原子である場合は、さらにメタノー
ルやエタノール、テトラヒドロフラン等の溶媒に１Ｎ−
水酸化ナトリウム水溶液を加え、０℃〜６０℃好ましく
は３５℃で撹拌して目的物を得る。 【００１９】方法Ｂにおいて、一般式（５）の化合物と
一般式（１８）の化合物から一般式（１９）の化合物を
得る反応は、一般式（５）の化合物と一般式（１８）の
化合物の懸濁液を０℃〜１００℃好ましくは室温で反応
させることにより行う。式中、Ａ^２で示される保護基と
しては、トリフルオロアセチル基、アセチル基等が挙げ
られる。 【００２０】一般式（１９）の化合物と一般式（２０）
の化合物から一般式（２１）の化合物を得る反応は、一
般式（１９）の化合物と一般式（２０）の化合物のアセ
トン溶液に水酸化カリウムを加え、０℃〜５５℃、好ま
しくは４５℃〜５３℃で撹拌することにより行う。 【００２１】一般式（２１）の化合物から一般式（２
２）の化合物を得る反応は、一般式（２１）の化合物を
水中で水酸化カリウムまたは水酸化ナトリウムと反応さ
せることにより行う。ここで一般式（２１）の化合物の
かわりに前述の一般式（１１）の化合物を用いてもよ
い。 【００２２】一般式（２２）の化合物と一般式（１７）
の化合物から一般式（２３）の化合物を得る反応は、一
般式（２２）の化合物と一般式（１７）の化合物をジメ
チルアセトアミドやジメチルホルムアミド等の溶媒中、
０℃〜１００℃、好ましくは４０℃〜５５℃で撹拌する
ことにより行う。 【００２３】一般式（２３）の化合物と一般式（１４）
の化合物から一般式（Ｉ）の化合物を得る反応は、一般
式（２３）の化合物をジエチルリン酸シアニドやジシク
ロヘキシルカルボジイミドと１−ヒドロキシベンゾトリ
アゾール等の共存下、ジメチルホルムアミド、ジメチル
アセトアミド、Ｎ−メチルピロリジノン等の溶媒中撹拌
し、それぞれ活性エステル、混合酸無水物を調製した後
に、一般式（１４）の化合物を加え、０℃〜２００℃、
好ましくは１０℃〜８０℃で撹拌することにより行う。
または、一般式（２３）の化合物にトリエチルアミンを
加え、次いでクロルギ酸イソブチルを加え、ジメチルホ
ルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリ
ジノン等の溶媒中撹拌し、一般式（１４）の化合物を加
え、−２０℃〜５０℃、好ましくは−１０℃〜０℃で撹
拌することにより行う。特にＲ^４が水素原子である場合
は、更にメタノールやエタノール等の溶媒中、１Ｎ−水
酸化ナトリウム水溶液を加え、０℃〜６０℃、好ましく
は室温で撹拌して目的物を得る。 【００２４】 【作 用】本発明により得られた一般式（Ｉ）で示され
る化合物は、抗リウマチ作用を持つ。この作用は、以下
に示す実験例「ヒト末梢血を用いたリンパ球の増殖抑制
作用」を調べることにより確認した。 【００２５】 【実施例】 「ヒト末梢血由来リンパ球の増殖抑制作用」 （方法）ヒト末梢血よりＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ^Ｒを
用いてリンパ球を分離し、適度に希釈した薬物とそのリ
ンパ球１０^５個をＰＨＡ（０．３μｇ／ｍｌ）とともに
２日間９６穴ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｌａｔｅ中で培養し
た。培養終了後の５時間前に^３Ｈ−ＵｄＲ（１μＣｉ／
ｗｅｌｌ）を加えリンパ球への^３Ｈ−ＵｄＲの取り込み
をシンチレーションカウンターにて測定した。（ここで
ＰＨＡはｐｈｙｔｏｈａｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ、Ｕ
ｄＲはｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅを示す。）なお、用い
た薬物は下記のものである。 【化５】 【００２６】（結果、考察）図１に、薬剤非添加ＰＨＡ
刺激リンパ球の^３Ｈ−ＵｄＲ取り込みを１００％とした
割合を示した。図１から明らかなように、本発明の化合
物は対照化合物より優れたリンパ球の増殖抑制作用（抗
リウマチ作用）を持つことが確認された。 【００２７】 【実施例】 【参考例１】Ｎ−カルボベンゾキシ−４−アミノ−３−メチル安息香
酸の合成 【００２８】４−アミノ−３−メチル安息香酸（５．０
ｇ）を水（８０ｍｌ）に懸濁させた後、この懸濁液に氷
冷下カルボベンゾキシクロライド（３．７ｇ）のエーテ
ル溶液（２０ｍｌ）と炭酸水素ナトリウム（３．６ｇ）
を交互に加えた。２．５時間室温にて攪拌を続けた後、
更にカルボベンゾキシクロライド（３．７ｇ）のエーテ
ル溶液（９５ｍｌ）と炭酸水素ナトリウム（７．２ｇ）
を氷冷下交互に加え１．５時間室温にて攪拌した。反応
液を４Ｎ−塩酸で酸性にした後、析出した不溶物を濾取
した。得られた固形物を真空乾燥した後、目的物（２．
８ｇ）を得た。^１ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：２．３８（３Ｈ，
ｓ），５．２０（２Ｈ，ｓ），７．４１（５Ｈ，ｍ），
７．９７（３Ｈ，ｍ） 【００２９】 【参考例２】Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｎ−メチル−４−アミノ−３−
メチル安息香酸メチルエステルの合成 【００３０】水素化ナトリウム（１．４ｇ）をジメチル
ホルムアミド（１０ｍｌ）に懸濁させた後、この懸濁液
に参考例１の化合物（２．８ｇ）のジメチルホルムアミ
ド溶液（１０ｍｌ）を０℃にてゆっくりと加えた。反応
液を１時間室温にて攪拌した後、更にヨウ化メチルをゆ
っくりと加え、室温にて２時間攪拌した。次いで反応液
を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液にあけ、トルエンを用
いて抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下に
溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーに付し、溶出溶媒としてクロロホルムを
用い目的物（１．８ｇ）を得た。^１ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：２．１９（３Ｈ，
ｓ），３．１９（３Ｈ，ｓ），３．８７（３Ｈ，ｓ），
５．０９（２Ｈ，ｓ）７．２１（６Ｈ，ｍ），７．８５
（２Ｈ，ｍ） 【００３１】 【参考例３】Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｎ−メチル−４−アミノ−３−
メチル安息香酸の合成 参考例２の化合物（１．８ｇ）のエタノール（１５ｍ
ｌ）溶液に２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍｌ）
を加え、２時間還流した。次いで反応液を減圧下に濃縮
し１０ｍｌとした。４Ｎ−塩酸て酸性にした後クロロホ
ルムを用いて抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒
を減圧下に留去し目的物（１．５ｇ）を得た。^１ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：２．０２（３Ｈ，
ｓ），３．０４（３Ｈ，ｓ），４．６９（２Ｈ，ｓ），
７．０８（６Ｈ，ｍ）７．７７（２Ｈ，ｍ） 【００３２】 【参考例４】Ｎ−（Ｎ’−カルボベンゾキシ−Ｎ’−メチル−４−ア
ミノ−３−メチルベンゾイル）−Ｌ−グルタミン酸ジエ
チルエステルの合成 参考例３の化合物（８２０ｍｇ）を塩化チオニル（５ｍ
ｌ）に加えた後、更に、触媒量のジメチルホルムアミド
を添加し室温にて２時間攪拌した。次に反応液を減圧下
に濃縮乾固した。得られた固形物をジクロロメタン（２
０ｍｌ）に溶解させ、この溶液にグルタミン酸ジエチル
エステル塩酸塩（７００ｍｇ）と炭酸カリウム（１．４
ｇ）を加え、さらに水（２０ｍｌ）を加え、室温にて激
しく１２時間攪拌した。次に反応液を水にあけクロロホ
ルムを用い抽出し、１Ｎ−塩酸で洗浄した後硫酸ナトリ
ウムで乾燥した。溶媒を減圧下に留去した。得られた残
渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付し、溶出溶媒と
してクロロホルム：メタノール＝１００：３の混合溶媒
を用い目的物（７００ｍｇ）を得た。 【００３３】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
１−１．５（６Ｈ，ｍ），２．０−２．７（４Ｈ，
ｍ），２．１８（３Ｈ，ｓ），３．１９（３Ｈ，ｓ），
３．９−４．４（４Ｈ，ｍ），４．８０（１Ｈ，ｍ），
５．１０（２Ｈ，ｓ），７．０−７．５（６Ｈ，ｍ），
７．６３（２Ｈ，ｍ） 【００３４】 【参考例５】Ｎ−〔Ｎ’−メチル−（４−アミノ−３−メチルベンゾ
イル）〕−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの合成 アニソール（７００ｍｇ）を含む３０％−臭化水素−酢
酸（７ｍｌ）溶液に参考例４の化合物（７００ｍｇ）を
加え室温にて４時間攪拌した。次に反応液にエーテル
（２００ｍｌ）を加えたところ赤褐色の油状物質が沈殿
した。大部分のエーテル層を除き油状物質をクロロホル
ムに懸濁させ、この懸濁液を飽和炭酸水素ナトリウム溶
液で洗浄し、有機層を分取した。有機層を硫酸ナトリウ
ムで乾燥した後、減圧下に溶媒を留去し目的物（３６０
ｍｇ）を得た。 【００３５】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
０−１．５（６Ｈ，ｍ），２．１１（３Ｈ，ｓ），２．
９０（３Ｈ，ｓ），２．１−２．７（４Ｈ，ｍ），３．
９−４．４（４Ｈ，ｍ），４．８０（１Ｈ，ｍ），６．
５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），６．８０（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝７Ｈｚ），７．６１（２Ｈ，ｍ） 【００３６】 【実施例１】Ｎ−｛４−〔Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ’−メチルアミノ〕−３−メチルベン
ゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの合成 参考例５の化合物（３６０ｍｇ）と６−ブロモメチル−
２，４−ジアミノプテリジン臭化水素酸塩イソプロパノ
ール付加物（４０７ｍｇ）をジメチルアセトアミド（６
ｍｌ）に懸濁し５５−６０℃で４時間攪拌した。冷却
後、反応液にトリエチルアミン（２４８ｍｇ）を含む水
（３０ｍｌ）を加え攪拌し、次にクロロホルムで抽出し
た。クロロホルム層を硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を
減圧にて留去し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグ
ラフィーに付し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノ
ール＝１０：１の混合溶媒を用い目的物（２８０ｍｇ）
を得た。 【００３７】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
２−１．４（６Ｈ，ｍ），２．０−２．６（４Ｈ，
ｍ），２．４１（３Ｈ，ｓ），２．７３（３Ｈ，ｓ），
４．０−４．３（４Ｈ，ｍ），４．３２（２Ｈ，ｓ），
４．７６（１Ｈ，ｍ），７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．
３Ｈｚ），７．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），
７．６５（２Ｈ，ｍ），８．７９（１Ｈ，ｓ） 【００３８】 【実施例２】Ｎ−｛４−〔Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ’−メチルアミノ〕−３−メチルベン
ゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸（化合物１）の合成 実施例１の化合物（２８０ｍｇ）のエタノール（２０ｍ
ｌ）溶液に１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（１．６ｍ
ｌ）を加え３５℃で４時間攪拌した。次いで２５℃で２
０時間攪拌した後、反応液に水（２ｍｌ）を加え減圧下
にこの反応液を乾固した。このとき外温は３０℃を越え
ないようにした。得られた黄色固形物を水（１０ｍｌ）
に溶解し、１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３．７に調整し冷蔵庫の
中で２時間放置した。析出した沈殿物を濾取し目的物
（１８０ｍｇ）を得た。 【００３９】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ値）：
１．９−２．２（２Ｈ，ｍ），２．３５（２Ｈ，ｔ，Ｊ
＝８．０Ｈｚ），２．４２（３Ｈ，ｓ），２．７３（３
Ｈ，ｓ），４．３４（２Ｈ，ｓ），４．４１（１Ｈ，
ｍ），７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．７
２（２Ｈ，ｍ），８．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈ
ｚ），８．６５（１Ｈ，ｓ） 【００４０】 【参考例６】Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｎ−エチル−４−アミノ−３−
メチル−安息香酸エチルエステルの合成 窒素雰囲気下、ジメチルホルムアミド（２ｍｌ）に水素
化ナトリウム（１６４ｍｇ）を懸濁させ０℃とした。こ
の懸濁液にＮ−ベンジルオキシカルボニル−４−アミノ
−３−メチル安息香酸（６５０ｍｇ）のジメチルホルム
アミド溶液（２ｍｌ）をゆっくり加えた後、更に０℃に
て、ヨウ化エチル（７３０μｌ）をゆっくり加えた。室
温にて２．５時間攪拌を行った後、反応溶液で飽和炭酸
水素ナトリウム溶液中にあけ、トルエンで抽出した。ト
ルエン層を硫酸マグネシウムで乾燥させ減圧にて溶媒を
留去し、目的物（６８０ｍｇ）を得た。 【００４１】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：０．
９１−１．６３（６Ｈ，ｍ），２．１６（３Ｈ，ｓ），
３．３５−３．９０（２Ｈ，ｍ），４．１０−４．５５
（２Ｈ，ｍ），５．０７（２Ｈ，ｂｓ），６．９５−
７．３５（６Ｈ，ｍ），７．６８−７．９５（２Ｈ，
ｍ） 【００４２】 【参考例７】Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｎ−エチル−４−アミ
ノ−３−メチル安息香酸の合成 参考例６の化合物（６８０ｍｇ）のエタノール（５ｍ
ｌ）溶液に、２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（５ｍｌ）
を加え２時間還流した。次いで、室温まで冷却し、減圧
にて反応溶液を乾固した。得られた残渣を少量の水に溶
解させ、エーテルで洗浄した後、濃塩酸を用いｐＨ＝３
とした。析出した沈殿物をクロロホルムを用い抽出し、
硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧にて留去し、目
的物（５４０ｍｇ）を得た。 【００４３】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
１６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），１．２０（３Ｈ，
ｓ），３．３８−３．９４（２Ｈ，ｍ），５．１２（２
Ｈ，ｂｓ），６．９３−７．４４（６Ｈ，ｍ），７．７
２−８．０８（２Ｈ，ｍ） 【００４４】 【参考例８】Ｎ−〔Ｎ’−エチル−３−メチル−（４−アミノベンゾ
イル）〕−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの合成 参考例７の化合物（５００ｍｇ）を塩化チオニル（３ｍ
ｌ）に加えた後、更に触媒量のジメチルホルムアミドを
添加し、室温にて２時間攪拌した。次いで、反応液を減
圧にて濃縮乾固した。得られた固形物をジクロロメタン
（１３ｍｌ）に溶解させ、この溶液にグルタミン酸ジエ
チルエステル（３８２ｍｇ）、炭酸カリウム（４４８ｍ
ｇ）を加え、さらに水（１３ｍｌ）を加え、室温にて激
しく１２時間攪拌した。反応液を飽和炭酸水素ナトリウ
ム水溶液にあけ、クロロホルムで抽出し、１Ｎ−塩酸で
洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧にて留
去し、無色の油状物質（８３０ｍｇ）を得た。次いで、
この得られた残渣（８３０ｍｇ）に、３０％臭化水素−
酢酸（１０ｍｌ）とアニソール（８３０ｍｇ）との混合
溶液を加え、室温で３時間攪拌した。反応後、大量のエ
ーテルを反応液に加えたところ暗褐色の油状物質が沈殿
した。大部分のエーテル層を除き、油状物質をクロロホ
ルムに懸濁させ、この懸濁液を飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液で洗浄した。有機層を分取し、硫酸マグネシウム
で乾燥後、減圧にて溶媒を留去し、目的物（３６０ｍ
ｇ）を得た。 【００４５】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
０３−１．４８（９Ｈ，ｍ），１．８３−２．６２（７
Ｈ，ｍ），２．９６−３．４３（２Ｈ，ｍ），３．８３
−４．４０（４Ｈ，ｍ），４．４８−４．９８（１Ｈ，
ｍ），６．３３−６．９２（２Ｈ，ｍ），７．３４−
７．７３（２Ｈ，ｍ） 【００４６】 【実施例３】Ｎ−｛４−〔Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ’−エチルアミノ〕−３−メチルベン
ゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの合成 参考例８の化合物（３６０ｍｇ）と６−ブロモメチル−
２，４−ジアミノプテリジン臭化水素酸塩・イソプロパ
ノール付加物（３４２ｍｇ）のジメチルアセトアミド懸
濁液（１０ｍｌ）を６０℃で４時間攪拌した後、さらに
６−ブロモメチル−２，４−ジアミノプテリジン臭化水
素酸塩・イソブロパノール付加物（３４２ｍｇ）を加え
７０℃で１．５時間攪拌した。次いで反応液を飽和炭酸
水素ナトリウム水溶液にあけ、クロロホルムで抽出し
た。クロロホルム層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒
を減圧にて留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィーに付し、溶出溶媒として、クロロホル
ム：メタノール＝１０：１の混合溶媒を用い目的物（１
６７ｍｇ）を得た。 【００４７】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
０６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），１．１５−１．４
２（６Ｈ，ｍ），１．７６（３Ｈ，ｓ），２．３７−
２．５４（４Ｈ，ｍ），３．０８（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．
０Ｈｚ），４．１０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），
４．２４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．３８（２
Ｈ，ｓ），４．７０−４．８８（１Ｈ，ｍ），５．３２
（２Ｈ，ｂｓ），６．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈ
ｚ），７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．５
６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），７．６７（１Ｈ，ｂ
ｓ），８．８０（１Ｈ，ｓ） 【００４８】 【実施例４】Ｎ−｛４−〔Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ’−エチルアミノ〕−３−メチルベン
ゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸（化合物２）の合成 実施例３の化合物（１５０ｍｇ）のエタノール（１１ｍ
ｌ）溶液に１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（０．８４ｍ
ｌ）を加え３５℃で４時間攪拌した。更に２５℃で２０
時間攪拌した後、反応液に水（１ｍｌ）を加え減圧下に
この反応液を乾固した。このとき、外温は３０℃を越え
ないようにした。得られた黄色固形物を水（５ｍｌ）に
溶解し、１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３．７に調整し冷蔵庫の中
で２時間放置した。析出した沈殿物を濾取し目的物（１
２１ｍｇ）を得た。 【００４９】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
０４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．８５−２．２
８（２Ｈ，ｍ），２．３０−２．４８（５Ｈ，ｍ），
３．０４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），４．３９（２
Ｈ，ｓ），６．５７（２Ｈ，ｂｓ），７．１０（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．
３Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｓ），８．３４（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．５７（ＩＨ，ｓ） 【００５０】 【参考例９】Ｎ−（Ｎ’−カルボベンゾキシ−Ｎ’−メチル−４−ア
ミノ−３−メチルベンゾイル）−Ｌ−２−アミノアジビ
ン酸ジメチルエステルの合成 参考例３の化合物（８．４ｇ）を塩化チオニル（２９ｍ
ｌ）に加えた後、さらに、触媒量のジメチルホルムアミ
ドを添加し室温にて２時間攪拌した。次いで反応液を減
圧下に濃縮乾固した。得られた固形物をジクロロメタン
（１５０ｍｌ）に溶解させ、この溶液にＬ−２−アミノ
アジピン酸ジメチルエステル塩酸塩（６．６ｇ）、炭酸
カリウム（１０ｇ）を加え、さらに水（１５０ｍｌ）を
加え、室温にて激しく１２時間攪拌した。反応液を水に
あけクロロホルムを用いて抽出し、１Ｎ−塩酸で洗浄
後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下に留去し
た。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーに付し溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール＝１
００：３を用い目的物（９．７ｇ）を得た。 【００５１】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
４５−２．５５（９Ｈ，ｍ），３．１５（３Ｈ，ｓ），
３．６０（３Ｈ，ｓ），３．７２（３Ｈ，ｓ），４．４
５−４．９５（１Ｈ，ｍ），５．０５（２Ｈ，ｂｓ），
６．８０−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．４５−７．９５
（２Ｈ，ｍ） 【００５２】 【参考例１０】Ｎ−〔Ｎ’−メチル−（４−アミノ−３−メチルベンゾ
イル）〕−Ｌ−２−アミノアジピン酸ジメチルエステル
の合成 アニソール（９．５ｇ）を含む３０％−臭化水素−酢酸
（１００ｍｌ）溶液に参考例９の化合物（９．５ｇ）を
加え室温にて４時間攪拌した。次に反応液に大量のエー
テルを加えたところ赤褐色の油状物質が沈殿した。大部
分のエーテル層を除き油状物質をクロロホルムに懸濁さ
せ、この懸濁液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄
し、クロロホルムで抽出した。クロロホルム層を硫酸ナ
トリウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去し目的物（４．
０ｇ）を得た。^１ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．４３−２．０
０（４Ｈ，ｍ），２．０３（３Ｈ，ｓ），２．３４（２
Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ），２．９０（３Ｈ，ｓ），３．６
５（３Ｈ，ｓ），３．７５（３Ｈ，ｓ），４．５３−
５．０３（１Ｈ，ｍ），６．３３−６．８０（２Ｈ，
ｍ），７．３８−７．６８（２Ｈ，ｍ） 【００５３】 【実施例５】Ｎ−｛４−〔Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ’−メチルアミノ〕−３−メチル｝ベ
ンゾイル−Ｌ−２−アミノアジピン酸ジメチルエステル
の合成 参考例１０の化合物（３．８３ｇ）と６−ブロモメチル
−２，４−ジアミノプテリジン臭化水素酸塩イソプロパ
ノール付加物（４．０６ｇ）をジメチルアセトアミド
（７５ｍｌ）に懸濁し５５−６０℃で４時間攪拌した。
冷却後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液にあけ
クロロホルムで抽出した。クロロホルム層を硫酸ナトリ
ウムで乾燥後、溶媒を減圧にて留去し、得られた残渣を
シリカゲルクロマトグラフィーに付し、溶出溶媒として
クロロホルム：メタノール＝１０：１の混合溶媒を用い
目的物（３．４１ｇ）を得た。 【００５４】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
５５−１．９５（４Ｈ，ｍ），２．２６−２．４６（５
Ｈ，ｍ），２．７４（３Ｈ，ｓ），３．６７（３Ｈ，
ｓ），３．７９（３Ｈ，ｓ），４．３３（２Ｈ，ｓ），
４．７０−４．８５（１Ｈ，ｍ），５．３４（２Ｈ，ｂ
ｓ），６．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），７．０
５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．６１（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．６８（１Ｈ，ｓ），８．８
５（１Ｈ，ｓ） 【００５５】 【実施例６】 Ｎ−｛４−〔Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ’−メチルアミノ〕−３−メチル｝ベ
ンゾイル−Ｌ−２−アミノアジピン酸（化合物−）の合
成 実施例５の化合物（３．０ｇ）のエタノール（１６０ｍ
ｌ）溶液に１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（１８ｍｌ）
を加え３５℃で４時間攪拌した。更に２５℃で２０時間
攪拌した後、反応液に水（２０ｍｌ）を加え減圧下にこ
の反応液を乾固した。このとき外温は３０℃を越えない
ようにした。得られた黄色固形物を水（５０ｍｌ）に溶
解し、１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３．７に調整し冷蔵庫の中で
２時間放置した。析出した沈殿物を濾取し、目的物
（２．３ｇ）を得た。 【００５６】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ値）：
１．４０＝１．８８（４Ｈ，ｍ），２．２４（２Ｈ，
ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），２．４１（３Ｈ，ｓ），２．７
２（３Ｈ，ｓ），４．２３−４．４３（４Ｈ，ｍ），
６．６４（２Ｈ，ｂｓ），７．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８．８Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈ
ｚ），７．７４（１Ｈ，ｓ），８．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝８．２Ｈｚ），８．６４（１Ｈ，ｓ） 【００５７】 【参考例１１】４−２，４−〔Ｎ’−（ジアミノ−６−プテリジニル）
メチル〕−Ｎ’−メチルアミノ−３−メチル安息香酸の
合成 窒素雰囲気下６−ブロモメチル−２，４−ジアミノプテ
リジン臭化水素酸塩イソプロパノール付加物（３．８
ｇ）と、４−メチルアミノ−３−メチル安息香酸（４．
８ｇ）をジメチルアセトアミド（５０ｍｌ）に懸濁さ
せ、４０℃で４日間攪拌した後、５５℃で２時間攪拌し
た。反応を水（５００ｍｌ）にあけ、１Ｎ−水酸化ナト
リウム水溶液でｐＨ＝５に調整し、生じた沈殿を濾取
し、水、アセトンで洗浄することにより目的物（３．３
ｇ）を得た。^１ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ値）：２．４０（３
Ｈ，ｓ），２．７４（３Ｈ，ｓ），４．３６（２Ｈ，
ｓ），７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．６
−７．８（２Ｈ，ｍ），８．６４（１Ｈ，ｓ） 【００５８】 【実施例７】Ｎ−｛４−〔Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ’−メチルアミノ〕−３−メチル｝ベ
ンゾイル−Ｌ−ホモシステイン酸アンモニウム塩の合成 窒素雰囲気下参考例１１の化合物（２．４ｇ）のジメチ
ルアセトアミド（２５０ｍｌ）懸濁液に、０℃でトリエ
チルアミン（２．７ｍｌ）とクロルギ酸イソブチル
（０．８５ｍｌ）とを加え、５分間撹拌後、更にクロル
ギ酸イソブチル（０．１２ｍｌ）を加え５分間撹拌し
た。この溶液にＬ−ホモシステイン酸メチルエステル塩
酸塩（１．５ｇ）を加え３０分間撹拌した後トリエチル
アミン（１．３５ｍｌ）、クロルギ酸イソブチル（０．
４２ｍｌ）、Ｌ−ホモシステイン酸メチル塩酸塩（０．
７５ｇ）を同様に加え３０分間撹拌した。徐々に室温ま
で昇温し、４５分間撹拌した後、浴温が４０℃をこえな
いように減圧下溶媒を留去し、残渣に０．１Ｎ−水酸化
ナトリウム水溶液（４００ｍｌ）を加え室温で２時間撹
拌した後、更に１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（８ｍ
ｌ）を加え２０分間撹拌した。反応液を凍結乾燥し、得
られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付
し、溶出溶媒としてクロロホルム：メタノール：アンモ
ニア水＝５：４：１を用い溶出し、得られた粗生成物を
さらにＤＥＡＥセルロースカラムに付し、水で洗浄した
後、３％重炭酸アンモニウム水溶液で溶出し目的物
（１．１ｇ）を得た。 【００５９】^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，δ値）：２．１５
−２．２５（１Ｈ，ｍ），２．３−２．４（１Ｈ，
ｍ），２．４（３Ｈ，ｓ），２．８（３Ｈ，ｓ），２．
９−３．１（２Ｈ，ｍ），４．４−４．５（１Ｈ，
ｍ），４．５（２Ｈ，ｓ）７．１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．
５Ｈｚ），７．６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．
７（１Ｈ，ｍ），８．６（１Ｈ，ｓ） 【００６０】 【参考例１２】Ｎ−ｐ−トルエンスルホニル−４−アミノ−３−エチル
安息香酸メチルエステルの合成 ３−エチル−４−アミノ安息香酸メチルエステル（１．
８６ｇ）のピリジン（３０ｍｌ）溶液に、ｐ−トルエン
スルホニルクロライド（３ｇ）を加え、室温にて３時間
撹拌した。反応後減圧下に溶媒を留去し、残渣にクロロ
ホルムと１Ｎ−塩酸を加え撹拌した後、有機層を分取し
た。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧で溶媒を
留去し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー
に付し、溶出溶媒としてヘキサン：酢酸エチル４：１の
混合溶媒を用いて目的物（３ｇ）を得た。 【００６１】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
１０（３Ｈ，ｔ），２．４０（３Ｈ，ｓ），２．１−
２．６（２Ｈ，ｍ），３．９０（３Ｈ，ｓ），６．６−
７．９（７Ｈ，ｍ） 【００６２】 【参考例１３】Ｎ−ｐ−トルエンスルホニル−Ｎ−メチル−４−アミノ
−３−エチル安息香酸メチルエステルの合成 参考例１２の化合物（３ｇ）の無水ジメチルホルムアミ
ド（５０ｍｌ）溶液に、氷冷下水素化ナトリウム（１．
３ｇ）を加え、１０分間室温で撹拌した。次いでこの反
応液にヨウ化メチル（３．８ｇ）を加え、室温に戻した
後２時間撹拌した。反応後、この反応液に水を加え、酢
酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を硫酸マグネシウム
で乾燥した後、減圧下にて溶媒を留去し、得られた残渣
をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、溶出溶
媒としてクロロホルムを用いて目的物（１．５６ｇ）を
得た。 【００６３】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
２５（３Ｈ，ｔ），２．４５（３Ｈ，ｓ），２．７−
３．１（２Ｈ，ｍ）３．１５（３Ｈ，ｓ），３．９０
（３Ｈ，ｓ），６．６−８．１（７Ｈ，ｍ） 【００６４】 【参考例１４】Ｎ−ｐ−トルエンスルホニル−Ｎ−メチル−４−アミノ
−３−エチル安息香酸の合成 参考例１３の化合物（１．５６ｇ）のメタノール（６０
ｍｌ）溶液に、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（６０ｍ
ｌ）を加え、還流させながら２時間撹拌した。水浴の温
度を３０℃以下に保ちながら、減圧下で溶媒を濃縮し
た。この反応液に１Ｎ−塩酸を加えｐＨ＝２．５に調整
し、析出した沈澱物を濾取し、目的物（１．３３ｇ）を
得た。 【００６５】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
２５（３Ｈ，ｔ），２．４５（３Ｈ，ｓ），２．７−
３．１（２Ｈ，ｍ），３．１５（３Ｈ，ｓ），６．６−
８．２（７Ｈ，ｍ） 【００６６】 【参考例１５】Ｎ−（Ｎ′−ロートルエンスルホニル−Ｎ′−メチル−
４−アミノ−３−エチルベンゾイル）−Ｌ−グルタミン
酸ジエチルエステルの合成 参考例１４の化合物（１．３３ｇ）を塩化チオニル（５
ｍｌ）に加えた後、更に触媒量のジメチルホルムアミド
を添加し、室温にて２時間撹拌した。次に反応液を減圧
下にて濃縮乾固した。得られた固形物をジクロロメタン
（３５ｍｌ）に溶解させ、この溶液にグルタミン酸ジエ
チルエステル塩酸塩（９００ｍｇ）、炭酸カリウム
（１．４ｇ）を加え、さらに水（１５ｍｌ）を加え、室
温にて激しく一夜撹拌した。反応液を水にあけ、クロロ
ホルムで抽出した後、クロロホルム層を飽和炭酸水素ナ
トリウム水溶液、１Ｎ−塩酸で洗浄し、硫酸マグネシウ
ムで乾燥した。溶媒を減圧下にて留去し、目的物（１．
５ｇ）を得た。 【００６７】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
０−１．４（９Ｈ，ｍ），２．０−３．０（６Ｈ，
ｍ），２．４５（３Ｈ，ｓ），３，１０（３Ｈ，ｓ），
３．９−４．４（４Ｈ，ｍ），４．５−５．０（１Ｈ，
ｍ），６．５−７．９（７Ｈ，ｍ） 【００６８】 【参考例１６】 Ｎ−（Ｎ’−メチル−４−アミノ−３−エチルベンゾイ
ル）−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの合成 【００６９】アニソール（１．５ｇ）の３０％臭化水素
−酢酸（１５ｍｌ）溶液に参考例１５化合物（１．５
ｇ）を加え、室温にて４．５時間撹拌した。次に反応液
にエーテル（３００ｍｌ）を加えたところ赤褐色の油状
物質が沈澱した。大部分のエーテル層を除き、油状物質
をクロロホルムに懸濁させ、次いでこの懸濁液を飽和炭
酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、有機層を分取し
た。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下にて溶
媒を留去し、目的物（１．０ｇ）を得た。 【００７０】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
０−１．４（９Ｈ，ｍ），２．０−３．０（６Ｈ，
ｍ），２．８５（３Ｈ，ｓ），３．７−４．３（４Ｈ，
ｍ），４．５−４．９（１Ｈ，ｍ），６．４−７．７
（３Ｈ，ｍ） 【００７１】 【実施例８】Ｎ−｛４−〔Ｎ′−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ′−メチルアミノ〕−３−エチルベン
ゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの合成 【００７２】参考例１６の化合物（１．０ｇ）と６−ブ
ロモメチル−２，４−ジアミノプテリジン臭化水素酸塩
・イソプロパノール付加物（１．１ｇ）をジメチルアセ
トアミド（１０ｍｌ）に懸濁させ、６０℃で６時間撹拌
した。冷却後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液
にあけ、クロロホルムで抽出した。有機層を硫酸マグネ
シウムで乾燥後、溶媒を減圧下で留去した。得られた残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、溶出
溶媒としてクロロホルム：メタノール＝１０：１の混合
溶媒を用い目的物（６７１ｍｇ）を得た。 【００７３】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，δ値）：１．
０−１．４（９Ｈ，ｍ），２．０−３．０（６Ｈ，
ｍ），２．７５（３Ｈ，ｓ），３．９−４．７（７Ｈ，
ｍ），７．１−７．８（３Ｈ，ｍ），８．７０（１Ｈ，
ｓ） 【００７４】 【実施例９】Ｎ−｛４−〔Ｎ′−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ′−メチルアミノ〕−３−エチルベン
ゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸（化合物４）の合成 【００７５】実施例８の化合物（６４０ｍｇ）のエタノ
ール（２２ｍｌ）溶液に、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶
液（１．７８ｍｌ）を加え、３５℃で４．５時間撹拌し
た。更に２５℃で２０時間撹拌を続けた後、反応液に水
（２ｍｌ）を加え、次いで水−氷冷下、反応液を１Ｎ−
塩酸でｐＨ＝３．７に調整し、冷所で一夜放置した。析
出した沈澱物を濾取し、目的物（３４０ｍｇ）を得た。 【００７６】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，δ値）：
１．２６（３Ｈ，ｍ），１．９−２．５（４Ｈ，ｍ），
２．６９（３Ｈ，ｓ），２．８０（２Ｈ，ｍ），４．２
９（２Ｈ，ｓ），４．３９（１Ｈ，ｍ），７．２２（１
Ｈ，ｍ），７．７１（２Ｈ，ｍ），８．６４（１Ｈ，
ｓ） 【００７７】 【参考例１７】Ｎ−カルボベンゾキシ−４−アミノ−３，５−ジメチル
安息香酸エチルエステルの合成 【００７８】窒素雰囲気下水素化ナトリウム（０．８２
ｇ）のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）懸濁液中に、４−
アミノ−３，５−ジメチル安息香酸エチルエステル
（２．０ｇ）を加え、室温で３０分間撹拌した。次いで
懸濁液にカルボベンゾキシクロライド（４．４ｍｌ）を
加え、一夜撹拌した。反応液に少量の水を加えた後、氷
水中にあけ、酢酸エチルで抽出した。水洗、乾燥（硫酸
マグネシウム）後、減圧下に溶媒を留去した。析出した
結晶をエタノールを加えて濾取し、真空乾燥した後、目
的物（３．２ｇ）を得た。 【００７９】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
３９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），２．０５（６Ｈ，
ｓ），４．３５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．１５
（２Ｈ，ｓ），７．２３（５Ｈ，ｍ），７．７５（２
Ｈ，ｓ） 【００８０】 【参考例１８】Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｎ−メチル−４−アミノ−３，
５−ジメチル安息香酸エチルエステルの合成 【００８１】窒素雰囲気下水素化ナトリウム（１．２
ｇ）をジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）に懸濁させ撹
拌した。懸濁液に参考例１７の化合物（３．２ｇ）を室
温で加え、３０分間撹拌した後にヨウ化メチル（１．８
ｍｌ）を加え、さらに室温で一夜撹拌した。次いで数滴
の水を氷冷下反応液に加え、反応液を氷水中にあけた。
酢酸エチルを用いて抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥し
た。減圧下に溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲル
カラムクロマトグラフィーに付し、溶出溶媒としてヘキ
サン：酢酸エチル＝９：１を用い目的物（１．４７ｇ）
を得た。 【００８２】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
３８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），２．２１（６Ｈ，
ｓ），３．１７（３Ｈ，ｓ），４．４２（２Ｈ，ｑ，Ｊ
＝７Ｈｚ），５．１３（２Ｈ，ｓ），７．０−７．６，
（５Ｈ，ｍ），７．８０（２Ｈ，ｓ） 【００８３】 【参考例１９】Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｎ−メチル−４−アミノ−３，
５−ジメチル安息香酸の合成 【００８４】参考例１８の化合物（１．４７ｇ）のＴＨ
Ｆ（３０ｍｌ）溶液に１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液
（１２ｍｌ）を加え、６０℃で６時間加熱し、更に室温
で一夜撹拌した。次いで反応液を３Ｎ−塩酸でｐＨを約
５とし、減圧下に濃縮した。ｐＨを約２とした後ＴＨＦ
を用いて抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を
減圧下に留去し目的物（１．３４ｇ）を得た。 【００８５】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：２．
１８（６Ｈ，ｓ），３．１４（３Ｈ，ｓ），５．０４
（２Ｈ，ｓ），６．９−７．５（５Ｈ，ｍ），７．７６
（２Ｈ，ｓ） 【００８６】 【参考例２０】Ｎ−（Ｎ′−カルボベンゾキシ−Ｎ′−メチル−４−ア
ミノ−３，５−ジメチルベンゾイル）−Ｌ−グルタミン
酸ジエチルエステルの合成 【００８７】参考例１９の化合物（１．３４ｇ）を塩化
チオニル（１０ｍｌ）を加えた後、更に触媒量のジメチ
ルホルムアミドを添加し室温にて３時間撹拌した。次に
反応液を減圧下に濃縮乾固した。得られた固形物をジク
ロロメタン（２５ｍｌ）に溶解させ、この溶液にグルタ
ミン酸ジエチルエステル塩酸塩（１．０ｇ）の水溶液
（２５ｍｌ）と炭酸カリウム（１．２ｇ）を加え、さら
に炭酸カリウムを用い反応液のｐＨを約１０とした後、
室温にて激しく一夜撹拌した。ジクロロメタン層を分取
し、１Ｎ−塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和
食塩水の順で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒
を減圧下に留去し、目的物（２．１４ｇ）を得た。 【００８８】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
２３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．３１（３Ｈ，ｔ，
Ｊ＝７Ｈｚ），２．１−２．７（４Ｈ，ｍ），２．１７
（６Ｈ，ｓ），３．１３（３Ｈ，ｓ），４．１３（２
Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．２５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ），４．７３（１Ｈ，ｍ），５．０７（２Ｈ，ｓ），
６．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．１−７．５
（５Ｈ，ｍ），７．５１（２Ｈ，ｓ） 【００８９】 【参考例２１】 Ｎ−〔Ｎ′−メチル−（４−アミノ−３，５−ジメチル
ベンゾイル）〕−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの
合成 【００９０】参考例２０の化合物（２．１ｇ）のアニソ
ール（２．４ｍｌ）溶液に、３０％−臭化水素−酢酸
（２４ｍｌ）溶液を加え室温にて３時間撹拌した。次に
反応液に約２００ｍｌのエーテルを加えたところ赤褐色
の油状物質が沈澱した。大部分のエーテル層を除き油状
物質をクロロホルムに懸濁させ、この懸濁液を飽和炭酸
水素ナトリウム水溶液で洗浄し、有機層を分取した。有
機層を硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下に溶媒を留
去し目的物（１．２ｇ）を得た。 【００９１】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：１．
２１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．２９（３Ｈ，ｔ，
Ｊ＝７Ｈｚ），２．０−２．８（４Ｈ，ｍ），２．２９
（６Ｈ，ｓ），２．８７（３Ｈ，ｓ），３．１１（１
Ｈ，ｓ），４．１１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．２
３（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．８３（１Ｈ，ｍ），
６．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．４３（２Ｈ，
ｓ） 【００９２】 【実施例１０】Ｎ−｛４−〔Ｎ′−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ′−メチルアミノ〕−３，５−ジメチ
ルベンゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステルの
合成 【００９３】参考例２１の化合物（１．２ｇ）と６−ブ
ロモメチル−２，４−ジアミノプテリジン臭化水素酸塩
イソプロパノール付加物（１．０ｇ）をジメチルアセト
アミド（２０ｍｌ）に懸濁し、６０℃で１２時間撹拌し
た。冷却後、反応液に水を加え撹拌し、次にクロロホル
ムで抽出した。クロロホルム層を硫酸ナトリウムで乾燥
後、溶媒を減圧下に留去し、得られた残渣をシリカゲル
クロマトグラフィーに付し、溶出溶媒としてクロロホル
ムメタノール＝９９：１〜９５：５の混合溶媒を用い目
的物（０．６４ｇ）を得た。 【００９４】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，＋ＣＤ_３Ｏ
Ｄ，δ値）：１．２５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．
３２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），２．０−２．７（４
Ｈ，ｍ），２．４２（６Ｈ，ｓ），２．８２（３Ｈ，
ｓ），４．１８（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．２８
（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．４２（２Ｈ，ｓ），
４．７８（１Ｈ，ｍ），７．５３（２Ｈ，ｓ），８．８
９（１Ｈ，ｓ） 【００９５】 【実施例１１】Ｎ−｛４−〔Ｎ′−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチル−Ｎ′−メチルアミノ〕−３，５−ジメチ
ルベンゾイル｝−Ｌ−グルタミン酸（化合物５）の合成 【００９６】実施例１０の化合物（０．５９ｇ）をエタ
ノール（４０ｍｌ）とＴＨＦ（２０ｍｌ）の混合溶媒に
溶解し、さらに１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（３．５
ｍｌ）を加え室温で一夜撹拌した。減圧下に溶媒を留去
し、得られた黄色固形物を水（２０ｍｌ）に溶解し、氷
冷下１Ｎ−塩酸でｐＨ＝３．７に調整し、析出した沈殿
物を濾取した。水、アセトンの順で洗浄後、真空乾燥し
て目的物（０．４７ｇ）を得た。 【００９７】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，δ値）：
１．８−２．２（２Ｈ，ｍ），２．３−２．５（２Ｈ，
ｍ），２．３４（６Ｈ，ｓ），２．７３（３Ｈ，ｓ），
４．３−４．５（１Ｈ，ｍ），４．３６（２Ｈ，ｓ），
６．６６（２Ｈ，ｓ），７．５５（２Ｈ，ｓ），８．４
０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ），８．７４（１Ｈ，ｓ） 【００９８】 【参考例２２】４−メチルアミノ−３−トリフルオロメチル安息香酸の
合成 ４−アミノ−３−トリフルオロメチル安息香酸（３．６
ｇ）を無水トリフルオロ酢酸（９０ｍｌ）に懸濁し、一
晩攪拌した。減圧下で溶媒を留去し、得られた残渣をア
セトン（３０ｍｌ）に溶解した。この溶液にヨウ化メチ
ル（９．９ｇ）を加え、４５℃に加熱し、激しく撹拌し
ながら粉末水酸化カリウム（６．８ｇ）を徐々に加え
た。この温度でさらに１時間攪拌を続けた後、減圧下で
溶媒を留去した。得られた残渣を水（５０ｍｌ）に溶解
し、２時間加熱還流した。氷冷下、１Ｎ−塩酸を用い
て、ｐＨ＝３．５に調節した。白色沈殿物を濾取し、少
量の水で洗浄した後、真空乾燥し目的物（２．２ｇ）を
得た。^１ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３：ＣＤ_３ＯＤ＝１：１，δ
値）：２．９５（３Ｈ，ｓ），６．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝９．０Ｈｚ），７．９６−８．１２（２Ｈ，ｍ） 【００９９】 【参考例２３】４−メチルアミノ−３−トリフルオロメチル安息香酸メ
チルエステルの合成 参考例２２の化合物（２．２ｇ）のメタノール溶液（２
５ｍｌ）に、氷冷下、塩化水素ガスを吹き込み、室温
で、４時間攪拌を続けた。減圧下で溶媒を留去し、得ら
れた残渣を酢酸エチルに溶解した。この溶液を飽和炭酸
水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウム
で乾燥した後、減圧下で溶媒を留去した。得られた残渣
をシリカゲルクロマトグラフィーに付し、溶出溶媒とし
て酢酸エチル：ノルマルヘキサン＝１：３を用いて、目
的物（１．３ｇ）を得た。^１ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，δ値）：２．９１（３Ｈ，
ｓ），３．８３（３Ｈ，ｓ），４．６３（１Ｈ，ｂ
ｓ），６．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．９
２−８．９９（２Ｈ，ｍ） 【０１００】 【参考例２４】４−［Ｎ−（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メ
チル−Ｎ−メチル］アミノ−３−トリフルオロメチル安
息香酸の合成 参考例２３の化合物（１．３ｇ）のヘキサメチルフォス
フォリックトリアミド溶液（２０ｍｌ）に、氷冷、窒素
雰囲気下、水素化ナトリウム（０．２６ｇ）を加え３０
分撹拌した。この反応液に、６−ブロモメチル−２，４
−ジアミノプテリジン臭化水素酸塩１／３イソプロパノ
ール付加物（２．８ｇ）を加えた後３０分攪拌し、さら
に７０℃で６時間、室温で２旦間攪拌した。反応液を希
塩酸にあけ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、
得られた褐色沈殿物を濾取した。真空乾燥した後、クロ
ロホルム：メタノール＝１：１混合溶媒に懸濁し、１時
間加熱還流した。不溶物を濾去し、濾液を減圧下で濃縮
乾固した。得られた残渣をメタノール（５０ｍｌ）に溶
解し、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を加
え、６０℃で１時間撹拌した。減圧下でメタノールを留
去した後、不溶物を濾取した。氷冷下、１Ｎ−塩酸を用
いてｐＨ＝４に調節した。橙色沈殿物を濾取し、真空乾
燥した後、シリカゲルクロマトグラフィーに付した。溶
出溶媒として酢酸エチル、次いで、クロロホルム：メタ
ノール：２８％アンモニア水＝５：４：１を用いて分離
した。目的画分を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を
水に溶解した。氷冷下、１Ｎ−塩酸を用いてｐＨ＝４に
調節した後、黄色沈殿物を濾取し、真空乾燥して目的物
（１０２ｍｇ）を得た。 【０１０１】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６＝ＣＤＣｌ
_３＝７：１，δ値）：２．７９（３Ｈ，ｓ），４．４２
（２Ｈ，ｓ），７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈ
ｚ），８．１１−８．１７（２Ｈ，ｍ），８．６９（１
Ｈ，ｓ） 【０１０２】 【実施例１２】Ｎ−｛４−［Ｎ’−（２，４−ジアミノ−６−プテリジ
ニル）メチルーＮ’−メチル］アミノ−３−トリフルオ
ロメチルベンゾイル｝−Ｌ−２−アミノアジピン酸の合
成 （Ｌ−２−｛Ｎ−［４−［Ｎ’−（２，４−ジアミノ−
６−プテリジニル）メチル−Ｎ’−メチル］アミノ−３
−トリフルオロメチルベンゾイル］｝アミノアジピン酸
の合成） 【０１０３】参考例２４の化合物（８８ｍｇ）のヘキサ
メチルフォスフォリックトリアミド溶液（２ｍｌ）に、
氷冷、窒素雰囲気下、ヒドロキシベンゾトリアゾール
（３６ｍｇ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（５５
ｍｇ）を加え３０分攪拌した。次いで、Ｌ−２−アミノ
アジピン酸ジメチルエステル塩酸塩（６３ｍｇ）、Ｎ−
メチルモルホリン（３４ｍｇ）を加えた後、徐々に室温
に戻し２日間攪拌した。反応液をシリカゲルクロマトグ
ラフィーに付し、溶出溶媒としてクロロホルム、次いで
クロロホルム：メタノール＝１９：１を用いて精製し
た。目的画分を減圧下で濃縮乾固し、メタノール（２ｍ
ｌ）に溶解した。氷冷、窒素雰囲気下、１Ｎ−水酸化ナ
トリウム水溶液（０．４ｍｌ）を加え５時間攪拌した。
減圧下で溶媒を留去し、得られた残渣を水に溶解した。
不溶物を濾去した後、１Ｎ−塩酸を用いてｐＨ＝３．５
に調節した。黄色沈殿物を濾取し、少量の水で洗浄した
後、真空乾燥した。この粗生成物を分取用薄層クロマト
グラフィー（シリカゲル）に付し、展開溶媒として、ク
ロロホルム：メタノール：２８％アンモニア水＝５：
４：１を用いて分離した。溶出液を減圧下で濃縮乾固し
た後、炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解した。不溶物を
濾去した後、１Ｎ−塩酸を用いてｐＨ＝３．５に調節し
た。淡黄色沈殿物を濾取し、真空乾燥して目的物（１８
ｍｇ）を得た。 【０１０４】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６＝ＣＤＣｌ
_３＝７：１，δ値）：１．５３−１，９３（４Ｈ，
ｍ），２．２５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），２．７
５（３Ｈ，ｓ），４．３４−４．４５（３Ｈ，ｍ），
６．９１（２Ｈ，ｂｓ），７．６３−７．６７（２Ｈ，
ｍ），７．９５（１Ｈ，ｂｓ），８．１６（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．２２（１Ｈ，ｓ），８．７２
（１Ｈ，ｓ），８．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）

【図面の簡単な説明】 図１は、被験薬物のそれぞれの濃度における^３Ｈ−Ｕｄ
Ｒの取り込み量（割合）を表す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 辻 敬一郎 静岡県御殿場市駒門１丁目135番地 中外 製薬株式会社内

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式（Ｉ） 【化１】 式中、Ｒ^１は、炭素数１乃至４の低級アルキル基を示
   し；Ｒ^２は炭素数１乃至４の低級アルキル基またはトリ
   フルオロメチル基を示し；Ｒ^３は水素原子または炭素数
   １乃至４の低級アルキル基またはトリフルオロメチル基
   を示し；Ｒ^４は水素原子または炭素数１乃至４の低級ア
   ルキル基を示し；ｎは１から４までの整数を示し；Ｒ^５
   は一般式ＣＯＯＲ^６（ここでＲ^６は水素原子または炭素
   数１乃至４の低級アルキル基を示す）で表される基また
   は式ＳＯ_３Ｈで表される基を示す；で示される化合物。