JPH05294973A - 水溶性大環状ラクトン化合物およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】免疫調節作用を有する新規物質を見いだす。 【構成】一般式 【化１】 ［式中、Ｒ¹，Ｒ²及びＲ³のうち少なくとも一つは塩基
性基含有カルバモイル基を示し、他は水素又は水酸基の
保護基を示す。］で表される大環状ラクトン化合物又は
その塩。 【効果】本発明の大環状ラクトン化合物又はその塩は、
水溶性を有し、免疫抑制作用を有する新規な化合物であ
り、自己免疫疾患治療剤及び拒絶反応防止剤として有用
である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、人の自己免疫疾患及び
移植臓器に対する拒絶反応の治療剤として有用な新規化
合物に関する。

【０００２】

【従来の技術】微生物由来の免疫抑制作用を有する化合
物には環状ペプチド化合物、サイクロスポリンＡ〔J.
F. Borel ら、エイジェンツ・アンド・アクションズ(Ag
ents and Actions)、６巻、４６８頁、１９７６年；A.
Ruegger ら、ヘルベチカ・ヒミカ・アクタ(Helvetica Chimi
ca Acta)、５９巻、１０７５頁、１９７９年〕および
大環状ラクトン化合物、ＦＫ５０６〔T. Kino ら、ザ・
ジャーナル・オブ・アンチバイオチクス(The Journal
of Antibiotics)、４０巻、１２４９頁、１９８７
年；H. Tanaka ら、ジャーナル・オブ・アメリカン・ケ
ミカル・ソサエテー(Journal of American Chemical
Society)、１０９巻、５０３１頁、１９８７年〕など
が挙げられる。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】自己免疫疾患は、例え
ば前身性エリテマトーデス，慢性関節リウマチ，多発性
硬化症，悪性貧血等，広範な疾患を含み、自己抗体を生
成する。この疾患に対して様々な薬剤が治療薬として用
いられているが、満足すべき効果を発揮するものは今の
ところ得られていない。一方、臓器移植の分野では、移
植臓器の生着を助けるために拒絶反応防止剤が使用され
る。最近、従来からのアザチオプリンとプレドニソロン
の併用療法に代って、サイクロスポリンＡが多用され、
高い評価を得ている。しかし、同時にサイクロスポリン
Ａの使用に伴う腎障害の多発や自己反応性リンパ球の生
成が新たな問題となってきている〔薬局，第３９巻，３
５頁，４９頁，1988年；サイエンス(Science)２４１
巻，１６５５頁，１９８８年参照〕。これらの問題を解
決するために、当分野では免疫調節作用を有する新規な
化合物あるいはそれらの化合物を合成するための中間原
料が求められている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な現状に鑑みて、新たな観点から免疫調節物質の検索を
重ねた。その結果、土壌から分離した多数の微生物中、
ある種の微生物がマウス脾細胞のコンカナバリンＡ(以
下 Con Ａと略称)応答を抑制するとともにアロ抗原刺激
による混合リンパ球反応をも抑制する化合物を培地中に
蓄積することを知り、この化合物を単離し物理化学的お
よび生物学的性質を調べ、これが下記式(１)で示される
公知化合物ＦＫ５０６(T. Kino ら、ザ・ジャーナル・
オブ・アンチバイオチクス(The Journal of Antibiotic
s)４０巻、１２４９頁、１９８７年)であることを確か
め、またこの生産菌がストレプトミセス属に属する放線
菌であることも明らかにした。さらに、本発明者らは、
ストレプトミセス属またはアミコラトプシス属に属する
ある種の微生物が、このＦＫ５０６を基質として、ＦＫ
５０６とは異なる化合物を生成蓄積する能力を有するこ
とを見いだした。後述する参考例に示すようにこの化合
物を単離し物理化学的および生物学的性状を調べ、当該
化合物が下記式(２)で表される化合物であることを確か
めＴＡＮ−１３１３と命名した。

【化４】 次にＴＡＮ−１３１３はＦＫ５０６より水溶性が増大し
ていることに着目し、さらに水溶性を増した化合物は化
学的，生物学的にＦＫ５０６と異なる特徴を示すであろ
うと考え、ＦＫ５０６およびＴＡＮ−１３１３の水溶性
誘導体を調製し、その生物活性を調べた。本発明者ら
は、これらの知見に基づいてさらに研究を重ね、本発明
を完成するに至った。

【０００５】すなわち本発明は、 １) 一般式[Ｉ］

【化５】 ［式中、Ｒ¹，Ｒ²及びＲ³のうち少なくとも一つは塩基
性基含有カルバモイル基を示し、他は水素又は水酸基の
保護基を示す。]で表される化合物又はその塩、 ２) 一般式[II]

【化６】 [式中、Ｒ⁴，Ｒ⁵及びＲ⁶のうち少なくとも一つは活性化
されたエステル基であり、他は水素又は水酸基の保護基
を示す。]で表される化合物又はその塩、 ３) 一般式[II]で表される化合物に塩基性基含有アミン
を反応させ、要すれば水酸基の保護基を脱保護すること
を特徴とする一般式[Ｉ]で表される化合物又はその塩の
製造法及び ４) 一般式[Ｉ]で表される化合物又はその塩を含有して
なる免疫抑制剤に関する。 前記一般式[Ｉ]及び[II]中における、塩基性基含有カル
バモイル基の例としては、例えば式

【化７】 [式中、Ｒ⁷及びＲ⁸のうち少なくとも一つは塩基性基で
置換されかつ置換基を有していてもよいアルキル基であ
り、他は水素又は置換基を有していてもよいアルキル基
であるか、又はＲ⁷とＲ⁸とがそれらの結合する窒素原子
と共にさらに窒素原子を含んでいてもよい複素環基を形
成し、該複素環基は置換基を有していてもよい。]で表
される基が挙げられる。上記式[III]中における塩基性
基としては、例えばアミノ、ジメチルアミノ、ピロリジ
ニル、Ｎ−メチルピペラジニル、イミノ、ヒドラジノ、
ヒドラゾノ、アミジノ、グアニジノ、ニトリロ、アンモ
ニオ、アジリジノなどの窒素原子を１個以上含有した基
が挙げられる。上記式[III]中におけるアルキル基とし
ては、たとえば炭素数１〜１０のものが好ましく、その
例としてはたとえばメチル、エチル、n−プロピル、イ
ソプロピル、n−ブチル、イソブチル、sec−ブチル、t
−ブチル、１,１−ジメチルプロピル、n−ペンチル、イ
ソペンチル、n−ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、
オクチル、ノナニル、デカニルなどが挙げられる。

【０００６】さらに該アルキル基が有していてもよい置
換基としては、たとえばハロゲン、ニトロ、アミノ(ア
シル、アルキル、イミノメチル、イミノ(アリール置換)
メチル、アミジノ、アミノを置換基として有していても
よい。)、スルホ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、
ヒドラジノ、イミノ、アミジノ、カルバモイル、アリー
ル(ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アルキルアミ
ノ、アミノ、カルバモイル、スルホ、アルキルスルホニ
ル、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、ニトロ、アシル
オキシ、アルキルオキシ、スルホオキシを置換基として
有していてもよい。)、複素環(ニトロ、オキソ、アリー
ル、アルケニレン、ハロゲノアルキル、アルキルスルホ
ニル、アルキル、アルコキシ、アルキルアミノ、アミ
ノ、ハロゲン、カルバモイル、ヒドロキシ、シアノ、カ
ルボキシ、スルホを置換基として有していてもよい。)
などが挙げられる。Ｒ⁷とＲ⁸が、それらの結合する窒素
原子とともにさらに窒素原子を含んでいてもよい複素環
基を形成した場合、その複素環基は、少なくとも１個の
窒素原子を含有する４〜７員環を意味する。通常５〜６
員環が好ましい。該複素環が有していてもよい置換基と
しては、前述のアルキル基が有していてもよい置換基と
同様なものが挙げられる。以上述べた、式[III]で表さ
れる基の具体例としては、２−アミノエチルカルバモイ
ル、Ｎ−(２−アミノエチル)−Ｎ−メチルカルバモイ
ル、２−ジメチルアミノエチルカルバモイル、２−(ピ
ペリジン−１−イル)エチルカルバモイル、ピペラジン
カルバモイル、４−メチルピペラジンカルバモイル、ホ
モピペラジンカルボニル、３−アミノピペリジンカルバ
モイル、３−アミノピロリジンカルバモイルなどの基が
挙げられる。

【０００７】前記一般式[II]中における水酸基の保護基
としては、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、
ペンチル、ヘキシル基のような低級アルキル基、好まし
くはＣ_1-3アルキル基、例えばメチルチオメチル、エチ
ルチオメチル、プロピルチオメチル、イソプロピルチオ
メチル、ブチルチオメチル等の低級アルキルチオメチル
基のような１−(低級アルキルチオ)(低級)アルキル基、
好ましいものとしてＣ₁〜Ｃ₄アルキルチオメチル基；例
えばトリメチルシリル、トリエチルシリル、第三級ブチ
ル−ジメチルシリル、トリ第三級ブチルシリル等のトリ
(低級)アルキルシリル、例えばメチル−ジフェニルシリ
ル、エチル−ジフェニルシリル、プロピル−ジフェニル
シリル、第三級ブチル−ジフェニルシリル等の低級アル
キル−ジアリールシリル等のようなトリ置換シリル基、
さらに好ましいものとしてトリ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルシリ
ル基およびＣ₁〜Ｃ₄アルキル−ジフェニルシリル基、最
も好ましいものとして第三級ブチル−ジメチルシリル基
および第三級ブチル−ジフェニルシリル基；カルボン酸
およびスルホン酸から誘導される脂肪族アシル基、芳香
族アシル基および芳香族基で置換された脂肪族アシル基
のようなアシル基；等が挙げられる。

【０００８】脂肪族アシル基としては、例えばホルミ
ル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、ピ
バロイル、カルボキシアセチル、カルボキシプロピオニ
ル等の、カルボキシのような適当な置換基を１個以上有
していてもよい低級アルカノイル基、例えばシクロプロ
ピルオキシアセチル、シクロブチルオキシプロピオニ
ル、シクロヘプチルオキシブチリル、メンチルオキシア
セチル、メンチルオキシプロピオニル、メンチルオキシ
ブチリル等の、低級アルキルのような適当な置換基を１
個以上有していてもよいシクロ(低級)アルコキシ(低級)
アルカノイル基、カンファースルホニル基等が挙げられ
る。

【０００９】芳香族アシル基としては、例えばベンゾイ
ル、トルオイル、ナフトイル、ニトロベンゾイル、ジニ
トロベンゾイル等の、ニトロのような適当な置換基を１
個以上有していてもよいアロイル基、例えばベンゼンス
ルホニル、トルエンスルホニル、ナフタレンスルホニ
ル、フルオロベンゼンスルホニル、クロロベンゼンスル
ホニル、ブロモベンゼンスルホニル、ヨードベンゼンス
ルホニル等の、ハロゲンのような適当な置換基を１個以
上有していてもよいアレーンスルホニル基等が挙げられ
る。芳香族基で置換された脂肪族アシル基としては、例
えばフェニルアセチル、フェニルプロピオニル、フェニ
ルブチリル、２−トリフルオロメチル−２−メトキシ−
２−フェニルアセチル、２−エチル−２−トリフルオロ
メチル−２−フェニルアセチル等の、低級アルコキシお
よびトリハロ(低級)アルキルのような適当な置換基を１
個以上有していてもよいアル(低級)アルカノイル基等が
挙げられる。上記アシル基中、好ましいアシル基として
は、Ｃ₁〜Ｃ₄アルカノイル基、シクロアルキル部分に
(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルを２個有するシクロ(Ｃ₅〜 Ｃ₆)ア
ルキルオキシ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルカノイル基、カンファース
ルホニル基、ニトロを１個または２個有していてもよい
ベンゾイル基、ハロゲンを有するベンゼンスルホニル
基、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシとトリハロ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル
を有するフェニル(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルカノイル基が挙げられ
る。

【００１０】前記一般式[II]における活性化されたエス
テル基としては、例えば式

【化８】 [式中、Ｙはハロゲン原子を、Ｚは水素原子，低級アル
キル基又はトリハロゲノアルキル基を示す。]で表され
る基が挙げられる。上記式[IV]中Ｙで示されるハロゲン
原子は、例えばフッ素，塩素，臭素及びヨウ素が挙げら
れ、その中で塩素，臭素及びヨウ素が好ましい。上記式
[IV]中Ｚで示される低級アルキル基は、Ｃ_1-6の直鎖状
もしくは分枝鎖状のアルキル基であり、その具体例とし
て、メチル、エチル、n−プロピル、i−プロピル、n−
ブチル、i−ブチル、tert−ブチル、n−ペンチル、n−
ヘキシルなどが挙げられ、その中でＣ_1-4のものが好ま
しい。上記式[IV]中Ｚで示されるトリハロゲノアルキル
基は、例えばトリクロロメチル、トリブロモメチル、ト
リフルオロメチルなどが挙げられ、その中で、トリクロ
ロメチルが好ましい。次に上記各基の導入方法について
述べる。

【００１１】水酸基の保護基は、水酸基に慣用の導入剤
を反応させて導入されるが、その導入剤としては、例え
ばジメチルスルホキシド、エチルメチルスルホキシド、
プロピルメチルスルホキシド、イソプロピルメチルスル
ホキシド、ブチルメチルスルホキシド、イソブチルメチ
ルスルホキシド、ヘキシルメチルスルホキシド等の低級
アルキルメチルスルホキシドのようなジ(低級)アルキル
スルホキシド；例えば塩化トリメチルシリル、臭化トリ
エチルシリル、塩化トリブチルシリル、塩化t−ブチル
ジメチルシリル等のトリ(低級)アルキルシリルハロゲン
化物、例えば塩化メチル−ジフェニルシリル、臭化エチ
ル−ジフェニルシリル、塩化プロピル−ジトリルシリ
ル、塩化t−ブチル−ジフェニルシリル等の低級アルキ
ル−ジアリールシリルハロゲン化物のような三置換シリ
ル化合物；前記アシル基を導入することのできるカルボ
ン酸、スルホン酸および例えば酸ハロゲン化物、酸無水
物、活性アミド、活性エステルなどのこれらの反応性誘
導体のようなアシル化剤等を挙げることができる。この
ような反応性誘導体の適切な例としては、酸塩化物、酸
臭化物、例えばジアルキル燐酸、フェニル燐酸、ジフェ
ニル燐酸、ジベンジル燐酸、ハロゲン化燐酸等の置換燐
酸、ジアルキル亜燐酸、亜硫酸、チオ硫酸、硫酸、例え
ば炭酸メチル、炭酸エチル、炭酸プロピル等のアルキル
炭酸エステル、例えばピバリン酸、ペンタン酸、イソペ
ンタン酸、２−エチルブチル酸、トリクロロ酢酸、トリ
フルオロ酢酸等の脂肪族カルボン酸、例えば安息香酸等
の芳香族カルボン酸のような酸との混合酸無水物、対称
型酸無水物、イミダゾール、４−置換イミダゾール、ジ
メチルピラゾール、トリアゾール、テトラゾールのよう
なイミノ基を含有する複素環式化合物との活性酸アミ
ド、例えば p−ニトロフェニルエステル、２,４−ジニ
トロフェニルエステル、トリクロロフェニルエステル、
ペンタクロロフェニルエステル、メシルフェニルエステ
ル、フェニルアゾフェニルエステル、フェニルチオエス
テル、p−ニトロフェニルチオエステル、p−クレジルチ
オエステル、カルボキシメチルチオエステル、ピリジル
エステル、ピペリジルエステル、８−キノリルチオエス
テルまたはＮ,Ｎ−ジメチルヒドロキシル アミン、１−
ヒドロキシ−２−(１Ｈ)−ピリドン、Ｎ−ヒドロキシス
クシンイミド、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール、１−ヒドロキシ−６−クロ
ロベンゾトリアゾールのようなＮ−ヒドロキシ化合物と
のエステル等の活性エステル等が挙げられる。この反応
において、ジ(低級)アルキルスルホキシドが水酸基保護
基の導入剤として使用される場合、反応は、通常無水酢
酸のような無水低級アルカン酸の存在下に行われる。

【００１２】さらに、三置換シリル化合物が水酸基保護
基の導入剤として使用される場合、反応は、イミダゾー
ル等のような慣用の縮合剤の存在下に行うことが好まし
い。さらには、アシル化剤が水酸基保護基の導入剤とし
て使用される場合、反応は、例えばリチウム、ナトリウ
ム、カリウム等のアルカリ金属、例えばカルシウム等の
アルカリ土金属、例えば水素化ナトリウム等のアルカリ
金属水素化物、例えば水素化カルシウム等のアルカリ土
金属水素化物、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウ
ム等のアルカリ金属水酸化物、例えば炭酸ナトリウム、
炭酸カリウム等のアルカリ金属炭酸塩、例えば炭酸水素
ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属炭酸水
素塩、例えばナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキ
シド、カリウムt−ブトキシド等のアルカリ金属アルコ
キシド、例えば酢酸ナトリウム等のアルカリ金属アルカ
ン酸、例えばトリエチルアミン等のトリアルキルアミ
ン、例えばピリジン、ルチジン、ピコリン、４−Ｎ,Ｎ
−ジメチルアミノピリジン等のピリジン化合物、キノリ
ンのような有機または無機塩基の存在下に行うのが好ま
しい。

【００１３】この反応において、アシル化剤が遊離の酸
またはその塩の形で使用する場合、反応は、例えばＮ,
Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−シクロヘ
キシル−Ｎ′−(４−ジエチルアミノシクロヘキシル)カ
ルボジイミド、Ｎ,Ｎ′−ジエチルカルボジイミド、Ｎ,
Ｎ′−ジイソプロピルカルボジイミド、Ｎ−エチル−
Ｎ′−(３−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド等
のカルボジイミド化合物、例えばＮ,Ｎ′−カルボニル
ビス(２−メチルイミダゾール)、ペンタメチレンケテン
−Ｎ−シクロヘキシルイミン、ジフェニルケテン−Ｎ−
シクロヘキシルスミン等のケテンイミン化合物、例えば
エトキシアセチレン、β−シクロビニルエチルエーテル
等のオレフィンまたはアセトレン系エーテル化合物、例
えば１−(４−クロロベンゼンスルホニルオキシ)−６−
クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等のＮ−ヒドロキシ
ベンゾトリアゾール誘導体のスルホン酸エステル等の慣
用の縮合剤の存在下に行うことが好ましい。反応は、通
常、水、アセトン、ジクロロメタン、例えばメタノー
ル、エタノール等のアルコール、テトラヒドロフラン、
ピリジン、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド等またはこれ
らの混合溶媒のようなこの反応に悪影響を与えない慣用
の溶媒中で行われ、さらに、塩基またはヒドロキシ保護
基の導入剤が液体の場合は、これらも溶媒として使用す
ることができる。

【００１４】反応温度は特に限定されず、通常冷却下な
いし加熱下で行われる。また上記の水酸基の保護基は、
例えばアルカリ又は酸を用いる加水分解等、通常の手段
により脱離することも可能である。前記式[IV]で表され
る活性化されたエステル基の導入は、通常のアシル化反
応に準じた方法により行われ、その反応は自体公知の方
法あるいはそれに準じた方法により行うことができる。

【００１５】該反応に用いられる活性化されたエステル
基の導入剤としては、例えば式[IV]で表される基を含む
カーボネートハライド、酸との無水物などが挙げられ
る。上記反応剤のハライドにおけるハロゲンとしては、
臭素，塩素が特に好ましい。用いられる試薬の量として
は、当モル以上、好ましくは約１〜５モル当量である。
なお、上記活性化エステル基の導入反応において酸との
無水物を用いる場合のその使用量は、過剰量でもよい。
該反応に用いられる溶媒としては、原料化合物と該反応
試薬を溶解するものであればよいが、好ましくはジクロ
ロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、テトラヒド
ロフラン、ジオキサン、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミ
ド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキ
シド、ヘキサメチルホスホロトリアミド、ピリジンなど
が挙げられる。反応温度は約−５０℃ないし３０℃であ
り、反応時間は約０.１〜２４時間である。また本反応
系中にトリエチルアミン、ジメチルアミノピリジン、ピ
リジン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ,Ｎ−ジエチルア
ニリン等のアミン類を共存させることによって、反応時
間を短縮し、副反応を抑制して収率を向上することがで
きる。

【００１６】塩基性基含有カルバモイル基は、例えば前
述の活性化されたエステル基を導入後、該基に例えば式

【化９】 [式中、Ｒ⁷及びＲ⁸のうち少なくとも一つは塩基性基で
置換されかつ置換基を有していてもよいアルキル基であ
り、他は水素又は置換基を有していてもよいアルキル基
であるか、又はＲ⁷とＲ⁸とがそれらの結合する窒素原子
と共にさらに窒素原子を含んでいてもよい複素環基を形
成し、該複素環基は置換基を有していてもよい。]で表
されるアミン類を反応させることにより導入することが
できる。 上記式[Ｖ]中における塩基性基、アルキル
基、該アルキル基が有していてもよい置換基、複素環基
及び該複素環基が有していてもよい置換基は、式[III]
における場合と同意義を有する。該アミン類の具体例と
しては、例えば２−アミノエチルアミン、Ｎ−(２−ア
ミノエチル)−Ｎ−メチルアミン、Ｎ′,Ｎ′−ジメチル
アミノエチルアミン、２−(ピペリジン−１−イル)エチ
ルアミン、ピペラジン、４−メチルピペラジン、ホモピ
ペラジン、３−アミノピペリジン、３−アミノピロリジ
ン等が挙げられる。反応は有機溶媒中で好適に行われ
る。この際、水を共存させてもよい。有機溶媒として
は、ジクロロメタン、クロロホルム、１,２−ジクロロ
エタン、テトラヒドロフラン、１,４−ジオキサン、ア
セトニトリル、酢酸エチル、酢酸メチルなどが挙げられ
る。用いるアミン類量は活性化されたエステル基を有す
る化合物に対し、約１〜１０モル当量が好適である。反
応温度、反応時間はアミン類の種類により異なり、各々
約０℃〜１００℃、約３０分〜２４時間である。

【００１７】本発明の化合物[Ｉ]及び[II]は、例えば前
記の化合物(１)及び(２)を出発原料とし、これらの化合
物に水酸基の保護基導入反応あるいは該保護基の脱保護
反応、活性化されたエステル基の導入反応又は塩基性基
含有カルバモイル基の導入反応を適宜用い製造すること
ができる。より具体的にその製造法を以下に説明する。
即ち、例えば化合物(１)を、適当な溶媒例えばジクロロ
メタン、酢酸エチル、テトラヒドロフランなどに溶解あ
るいは懸濁させ、氷冷下、２〜４当量のピリジンあるい
はトリエチルアミン(Ｅt₃Ｎ)、２〜４当量のクロロギ酸
α−クロロエチル［α−ＣＥＣＦ，シンセシス(Synthes
is), ６２７頁，１９８６年参照］を加え、−２０℃な
いし５０℃、好ましくは−１０℃ないし１０℃で１０分
間ないし２０時間、好ましくは３０分間ないし３時間撹
拌下反応させる。生成物を単離し、前出の適当な溶媒に
溶解あるいは懸濁させ、氷冷下８〜１６当量の保護され
てもよい塩基性基を含む置換基を有する１級あるいは２
級アミン例えば、エチレンジアミン、ピペラジンなどを
加え、−２０℃ないし５０℃、好ましくは−１０℃ない
し１０℃で１０分間ないし３０時間、好ましくは３０分
間ないし３時間撹拌下反応させる。例えば化合物(１)
を、前述と同様に溶解、あるいは懸濁させ、氷冷下１〜
２当量のピリジンあるいはＥt₃Ｎ、１〜２当量のα−Ｃ
ＥＣＦを加え、前述のように反応させる。生成物を前述
のようにアミンと反応させる。例えば化合物(１)を、適
当な溶媒例えばジクロロメタン、クロロホルムなどに溶
解し、窒素雰囲気下、１〜２当量のピリジン、１〜１.
５当量のt−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタン
スルホネート(TBDMSOTf)を加え、−７８℃ないし４０
℃、好ましくは−３０℃ないし０℃で１０分ないし２０
時間、好ましくは３０分ないし２時間撹拌下反応させ
る。生成物を単離後前述と同様にして反応させる。生成
物をテトラヒドロフラン，水，酢酸の混合液に溶解し、
塩酸でpＨ１〜３好ましくは１.５〜２に調整し、−１０
℃ないし５０℃、好ましくは０℃ないし２０℃で１ない
し４８時間、好ましくは４ないし２４時間撹拌下反応さ
せる。例えば化合物(２)を、適当な溶媒例えばジクロロ
メタン、ジメチルホルムアミドなどに溶解し、１当量な
いし過剰量の２,２−ジメトキシプロパンあるいはアセ
トンを加え、触媒量の酸例えばＤ−カンファー−１０−
スルホン酸などの存在下、０℃ないし５０℃好ましくは
１０℃ないし３０℃で３０分ないし４８時間、好ましく
は２ないし２０時間撹拌下反応させる。生成物を単離
し、前述と同様の方法で反応させる。生成物を希酸例え
ば０.１Ｎ塩酸水溶液と混和させて脱保護する。

【００１８】さらに化合物[Ｉ]及び[II]が塩基性基を含
む場合、例えば酢酸、蓚酸、メタンスルホン酸などの有
機酸との塩、塩酸、硫酸、リン酸などの無機酸との塩、
塩基性アミノ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸などの
酸性アミノ酸との塩またはヘパリン、デキストリン硫酸
などの高分子多糖スルフォン酸との塩などを常法により
製造することができる。次の構造式で示される化合物に
ついては、これ以下はその化合物番号によって表示す
る。

【化１０】

【００１９】まず本発明の化合物[Ｉ]の水溶性について
述べる。即ち、化合物３，４，６，７，８及び９の水溶
性を化合物１(ＦＫ５０６)と比較した。溶解度の測定
は、以下のように行った。各サンプルを生理食塩水に加
え(２０mg／ml)、ミキサーを用いて室温で５分間かくは
んした。溶液をミリポアフィルター(＜０.４５μm)で濾
過し、濾液をＨＰＬＣに付し、溶解度を測定した。その
結果を〔表１〕に示す。

【表１】 ＊ＨＰＬＣ分析条件； 担 体；マイクロボンダパックＮＨ₂(日本ウォーター
ス社製) 移 動 相；５５％ アセトニトリル/0.01Mリン酸緩衝液
(pＨ６.３) 検 出；ＵＶ ２１４nm 表１より明らかなように、本発明の化合物はＦＫ５０６
と比較し、大幅に水溶性を増している。次に、化合物６
及び７の酸性水溶中での安定性を下記の条件でＦＫ５０
６と比較した。 条 件；サンプル濃度 １００μg/ml 溶 媒；１０％メタノール含有生理食塩水(希塩酸でp
Ｈ１.２に調整) 反応温度；３７℃ 反応時間；０〜４時間 定 量；ＨＰＬＣ分析(〔表１〕と同じ条件) その結果を〔表２〕に示す。

【表２】 〔表２〕より明らかなように、本発明の化合物はＦＫ５
０６と比較し、酸性水溶中での安定性が増大している。
以上述べた性質は、一般に生物活性の発現に寄与し、製
剤の調製時にも有利な性質と考えられている。

【００２０】次に各化合物の生物活性について調べた。
まず、マウス脾細胞の幼若化反応に対する抑制作用を
〔表３〕に示す。

【表３】 測定法：ＢＡＬＢ／cマウス脾細胞１×１０⁶／ml，コン
カナバリンＡ(以下Con Aと略称；シグマ社製，米国)１
μg／ml，フィトヘムアグルチニン(以下ＰＨＡと略称；
ディフコ社製，米国)１０μg／ml，または大腸菌由来リ
ポポリサッカライド(以下ＬＰＳと略称；ディフコ社
製，米国)１０μg／ml，５μＭ ２−メルカプトエタノ
ール，２mＭ Ｌ−グルタミン，３０μg／mlゲンタマイ
シン(フロー・ラボラトリーズ社製，スコットランド)，
１０％牛胎児血清(ウィッタカー・エム・エー・バイオ
プロダクツ社製，米国)を含むＲＰＭＩ １６４０培地
(ウィッタカー・エム・エー・バイオプロダクツ社製，
米国)に被検化合物を適宜加え、３７℃，５％炭酸ガス
下で３日間培養した後、ＭＴＴ還元法［多田ら，ジャー
ナル・オブ・イミュノロジカル・メソード(Journal of
Immunological Method)第９３巻，１５７頁，１９８
６年］で脾細胞の幼若化反応を測定した。

【００２１】次に、抗体産生細胞形成能に対する抑制作
用を〔表４〕に示す。

【表４】 抗体産生細胞形成能抑制作用 ────────────────────────────── 投与量 脾臓当りの 脾臓当りの 1×10⁶脾細胞 化合物 (mg/kg) 脾細胞数 PFC＊数 当りのPFC数 ────────────────────────────── ×10⁷ ×10⁴ ０ 7.20 8.87 1232 ３ ２０ 8.16 10.10 1238 ４ ２０ 3.41 1.45 425 ６ ２０ 2.88 0.30 104 ７ ２０ 2.77 0.14 52 ８ ２０ 7.31 13.30 1820 ９ ２０ 4.85 3.75 773 ────────────────────────────── ＊ＰＦＣ：溶血斑形成細胞［プラーク・フォーミング・
セル(Plaque formingcell)］ 測定法：ＢＡＬＢ／c雌マウス(８週令)に４×１０⁸箇の
ヒツジ赤血球を腹腔内投与し、この直後から４日間、上
記化合物の生理食塩水溶液を２０mg／kgになるように１
日１回腹腔内投与した。各化合物ごとに３匹のマウスを
用い、初回投与から５日目に脾臓を摘出した。次に脾細
胞を調製し、各３匹の脾細胞をそれぞれ混和した後、カ
ニンガムの方法［エー・ジェー・カニンガム(A. J. Cun
ningham)ら，イミュノロジー(Immunology)第１４巻，５
９９頁，１９６８年］に従い、ヒツジ赤血球溶血斑形成
を指標として抗体産生細胞形成能を測定した。以上の物
理化学的性状および生物学的性状から明らかなように、
化合物[Ｉ]は新規化合物であり、リンパ球機能抑制作用
を示すので、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデ
ス、多発性硬化症、重症筋無力症、再生不良性貧血、突
発性血小板減少性紫斑病、後天性無巨核球性血小板減少
性紫斑病、Ｉ型糖尿病、橋本甲状腺炎、ブドウ膜炎等の
自己免疫疾患や、各種臓器の移植に伴う拒絶反応あるい
は骨髄移植に伴う移植片対宿主反応等の治療用もしくは
予防用の医薬として有用である。化合物３および４の急
性毒性を調べるため、マウスを用いた腹腔内投与による
試験を行なった結果、ＬＤ₅₀値はそれぞれ２５〜１００
mg／kgおよび５０〜１００mg／kgと推定された。

【００２２】化合物[Ｉ]は、非経口的に注射または経口
投与され人に用いる場合の投与量は対象の疾患，投与経
路，治療する患者個々の年令および疾病の程度によって
変動し得るが、通常、有効成分１日成人１人当り約０.
０１〜２００mg、とりわけ０.１〜５０mgが疾患の治療
に用いられる。非経口投与に当っては、化合物[Ｉ]を慣
用の希釈剤(水性又は非水性担体)中に溶解又は懸濁し、
液剤、エマルジョン、懸濁液、坐剤およびその他の適切
な剤形として用いることができる。希釈剤としては、生
理食塩水、リンゲル液、ブドウ糖水溶液、アルコール、
グリコール類、グリセリン、脂肪酸グリセリド、植物、
動物由来の油類、パラフィン類などが含まれる。その
他、医薬製剤には、添加剤として、乳化剤，懸濁化剤、
溶解補助剤、安定剤、保存剤、無痛化剤、等張化剤、緩
衝剤、pＨ調整剤、着色剤、被覆剤などが含まれていて
もよい。又、これらの製剤は通常の方法で製造すること
ができる。

【００２３】経口投与に当っては、カプセル剤、錠剤、
顆粒剤、シロップ剤、散剤等の剤形とし、化合物[Ｉ]と
共に添加剤、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、
着色剤、矯味剤、安定剤などが含まれていてもよい。そ
れらの中には、デンプン、白糖、果糖、乳糖、ぶどう
糖、マンニトール、ソルビトール、沈降炭酸カルシウ
ム、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、デ
キストリン、ゼラチン、アラビアゴム、ステアリン酸マ
グネシウム、タルク、ヒドロキシプロピルメチルセルロ
ースなどが挙げられる。次にＴＡＮ−１３１３(化合物
２)、化合物[Ｉ]及び[II]の製造法を参考例及び実施例
により具体的に説明するが、これらにより本発明の範囲
が限定されるものではない。

【００２４】

【参考例】培地におけるパーセント(％)は、特にことわ
りのない限り重量／容量パーセントを表わす。

【００２５】参考例１ 酵母エキス・麦芽エキス斜面寒天培地に培養したストレ
プトミセス・トリポフォルスＩＦＯ １３１５１株を２
００ml容三角フラスコ内のグルコース１％，トリプトン
１％，酵母エキス０.６％ (pＨ７.０)を含む４０mlの培
地に接種し、２８℃、４８時間回転振とう機上で培養
し、種培養液を得た。得られた種培養液の１mlを２００
ml容三角フラスコ内の上記培地４０mlに移植し、２８
℃、４８時間回転振とう機上で培養した。この主培養
で、２４時間目にＦＫ５０６(化合物１)のメタノール溶
液(１０mg／ml)をフラスコ当り１ml添加した。

【００２６】参考例２ 参考例１で得られた培養液(２０リットル)をpＨ７に調
整後、酢酸エチル(１０リットル)で２回抽出した。抽出
液を水(５リットル)で洗浄後濃縮した。残渣(５.５g)を
シリカゲル６０(７０−２３０メッシュ、５０g、メルク
社製、西独)のカラムクロマトグラフィーに付し、n−ヘ
キサン：酢酸エチル(１：１，６００ml)，n−ヘキサ
ン：酢酸エチル(１：２，６００ml)及び酢酸エチル(６
００ml)で順次 溶出分画した。n−ヘキサン：酢酸エチ
ル(１：２)の溶出区分の前半溶出液を濃 縮すると原料
のＦＫ５０６(８５０mg)が回収された。上記溶出液の後
半部と酢酸エチル溶出部の活性区分を集め、濃縮し、残
渣(９７０mg)を再度シリカゲル６０(３５g)のカラムク
ロマトグラフィーに付した。クロロフォルム(１００ml)
で洗 浄後、クロロフォルム：メタノール(４９：１，２
８０ml)および(１９：１，３ ８５ml)で溶出分画した。
ＴＡＮ−１３１３(化合物２)を含む区分を濃縮し、残
渣(３１５mg)をさらにシリカゲル６０(１１g)のカラム
クロマトグラフィーに付 した。n−ヘキサン：酢酸エチ
ル(１：２，１５０ml)で洗浄後、n−ヘキサン：酢酸エ
チル(１：４，１５０ml)で溶出分画し、ＴＡＮ−１３１
３を主として含む区分を濃縮乾固した。残渣をセファデ
ックスＬＨ−２０(１００ml，ファルマシア 社製，スウ
エーデン)のカラムクロマトグラフィーに付し、メタノ
ールで溶出分 画した。活性区分を集め濃縮乾固し、n−
ヘキサンから粉末化を行ない、ＴＡＮ −１３１３の白
色粉末(２２０mg)を得た。

【００２７】

【実施例】物性データの記載中、赤外部吸収(ＩＲ)スペ
クトルは臭化カリウム錠剤中で、¹³Ｃ核磁気共鳴(ＮＭ
Ｒ)スペクトルは７５ＭＨz、重クロロホルム中で、それ
ぞれ測定した。

【００２８】実施例１ 化合物１(３.２０g)をジクロロメタン(６４ml)に溶解
し、０℃にまで冷却後、ピリジン(０.８７ml)及びクロ
ロギ酸α−クロロエチル(５０％ジクロロメタン溶液、
２.３２ml)を加え、１.５時間撹拌した。反応液にピリ
ジン(０.１０ml)を加え、さらに３０分間撹拌後、１０
％塩化アンモニウム水溶液(５０ml)を加えた。水層をn
−ヘキサン(５０ml)で２回抽出し、得られた有機層を合
わせて、１０％塩化アンモニウム水溶液(５０ml)で２
回、２％炭酸水素ナトリウム(５０ml)，水(５０ml)，飽
和食塩水(５０ml)で各々洗浄し、無水硫酸ナトリウムで
乾燥後、減圧下濃縮乾固すると、化合物１のジα−クロ
ロエトキシカルボニル体(化合物１a, ４.０３g)が白色
粉末として得られた。 元素分析：Ｃ₅₀Ｈ₇₅ＮＯ₁₆Ｃl₂・Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,58.02; Ｈ,7.50; Ｎ,1.35; Ｃl,
6.85 実測値：Ｃ,58.00; Ｈ,7.62; Ｎ,1.25; Ｃl,
7.68 ＩＲ：3440,2950,2830,1770,1640,1450,1380,1370,135
0,1260,1170,1140,1100,1070,1040,1010,990,960,930,8
90,760,740,660(cm^-1)

【００２９】実施例２ 化合物１a(１.２７g)をジクロロメタン(３０ml)に溶解
し、０℃に冷却後、エチレンジアミン(０.６７ml)を加
えて、３時間半撹拌した。反応液から溶媒を除去し、エ
チルエーテル：酢酸エチル(１：２，１００ml)で希釈
し、０.１Ｎ塩酸／１０％アンモニウム(１００ml)，２
％炭酸水素ナトリウムで２回、水、飽和食塩水で順次洗
浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮乾固して油状
物を得た。これに０.１Ｎ塩酸(２２ml)及び８％イソブ
タノール水(２０ml)を加えて溶解し、濃縮、凍結乾燥し
て化合物３の粉末(二塩酸塩,１.１０g)を得た。 元素分析：Ｃ₅₀Ｈ₈₁Ｎ₅Ｏ₁₄・２ＨＣl・０.５Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,56.75; Ｈ,8.00; Ｎ,6.62; Ｃl,
6.70 実測値：Ｃ,56.71; Ｈ,8.07; Ｎ,6.18; Ｃl,
5.83 ＩＲ：3420,2950,1720,1650,1520,1450,1380,1350,126
0,1170,1140,1100,1040,1010,930,920,780(cm^-1)¹³ Ｃ ＮＭＲ: 主／副ピーク(δppm) 208.52/208.17(Q), 197.09(Q), 169.25/168.90(Q), 16
5.15/166.34(Q), 156.57/155.81(Q), 138.89/138.24
(Q), 135.57/135.85(CH), 131.46(Q), 130.18/130.84(C
H), 122.96/123.22(CH), 116.53/116.31(CH₂), 97.52/9
8.43(Q), 80.86(CH), 78.25/79.44(CH), 76.14(CH), 7
5.33/76.69(CH), 73.79/74.07(CH), 73.26/73.60(CH),
71.80/72.20(CH), 57.19/57.39(CH₃), 57.01(CH₃), 56.
81/52.73(CH),56.32/56.17(CH₃), 53.46/52.73(CH), 4
8.65/48.13(CH₂), 43.78/42.19(CH₂),43.66(CH₂), 41.7
3(CH₂), 39.14(CH₂), 37.49/36.78(CH), 36.24/36.44(C
H₂),35.59/35.15(CH₂), 34.68/33.68(CH), 34.63(CH),
33.47/32.89(CH₂), 27.10/26.6(CH₂), 26.48/27.27(C
H), 24.28(CH₂), 20.96/20.65(CH₃), 20.31/19.57(C
H₃), 16.07(CH₃), 15.90/16.37(CH₃), 13.49(CH₃), 10.
18/10.01(CH₃). 上記( )内の記号はつぎのことを表す。(Ｑ：４級炭
素，ＣＨ：メチン，ＣＨ₂：メチレン，ＣＨ₃：メチル
(以下の場合も同様。))

【００３０】実施例３ 化合物１a(１.０６g)をジクロロメタン(２１ml)に溶解
し、０℃に冷却後、ピペラジン(７３３mg)を加えて、１
時間半撹拌した。反応液をエチルエーテル(２０ml)及び
酢酸エチル(４０ml)で希釈し、１０％塩化アンモニウム
(５０ml×２)，飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナト
リウムで乾燥後、濃縮乾固して油状物を得た。これに
０.１Ｎ塩酸 (２０ml)及びメタノール(１０ml)を加えて
溶解し、濃縮，凍結乾燥して化合物４の粉末(二塩酸塩,
０.８８g)を得た。 元素分析：Ｃ₅₄Ｈ₈₅Ｎ₅Ｏ₁₄・２ＨＣl・２.５Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,56.58; Ｈ,8.09; Ｎ,6.11; Ｃl,
6.19 実測値：Ｃ,56.58; Ｈ,8.04; Ｎ,6.01; Ｃl,
6.21 ＩＲ：3440,2950,2470,1710,1640,1430,1380,1280,126
0,1160,1080,1030,820,760(cm^-1)¹³ Ｃ ＮＭＲ：主ピーク／副ピーク(δppm) 208.11/207.99(Q), 196.73/192.35(Q), 169.25/168.85
(Q), 164.94/166.18(Q), 155.13(Q), 154.14/154.26
(Q), 138.57/139.23(Q), 135.58/135.80(CH), 131.49/1
30.36(CH), 131.39(Q), 123.14/122.82(CH), 116.53/11
6.34(CH₂), 97.25/98.49(Q), 81.12(CH), 78.80/78.5(C
H), 76.91(CH), 75.24/76.75(CH), 73.70/73.81(CH), 7
3.09(CH), 72.63/72.19(CH), 57.71(CH₃), 57.05/57.37
(CH₃), 56.51/52.75(CH), 56.33/56.18(CH₃), 53.45/5
2.81(CH), 48.79/48.11(CH₂), 45.94(CH₂), 45.84(C
H₂), 44.91(CH₂), 42.59/43.93(CH₂), 39.13/41.76(C
H₂), 37.90/36.90(CH), 36.49(CH₂), 35.63/35.21(C
H₂), 34.71(CH), 34.66/33.57(CH), 33.57(CH₂), 32.63
(CH₂), 30.28/30.41(CH₂), 30.28(CH₂), 27.43/26.26(C
H₂), 26.44/26.19(CH),24.30/24.49(CH₂), 20.98/20.70
(CH₂), 20.13/19.55(CH₃), 16.13/16.06(CH₃), 15.80/1
6.35(CH₃), 13.25/13.63(CH₃), 10.26/10.14(CH₃).

【００３１】実施例４ 化合物１a(３０５mg)をジクロロメタン(６ml)に溶解
し、０℃に冷却後、Ｎ−メチルピペラジン(０.１７ml)
を加えて１時間半撹拌した。反応液をエチルエーテル
(６ml)で希釈し、１０％塩化アンモニウム水(１０ml)と
分配し、水層を酢酸エチル(１０ml)で抽出した。有機層
を合わせて、水洗(２回)し、飽和塩化ナトリウム水で洗
い、無水硫酸ナトリウムを通して乾燥後濃縮乾固した。
残渣にメタノール少量と０.１Ｎ塩酸５.５mlを加えて濃
縮し、凍結乾燥して化合物５の白色粉末(二塩酸塩，３
１４mg)を得た。 元素分析：Ｃ₅₆Ｈ₈₉Ｎ₅Ｏ₁₄・２ＨＣl・４Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,55.99; Ｈ,8.31; Ｎ,5.83; Ｃl,
5.90 実測値：Ｃ,56.27; Ｈ,8.10; Ｎ,4.98; Ｃl,
6.36

【００３２】実施例５ 化合物１(５.０４g)をジクロロメタン(１６５ml)に溶解
し、０℃でピリジン(１.７６ml)およびクロロギ酸α−
クロロエチル(０.７１ml，５０％ジクロロメタン溶液)
を加え、１.５時間撹拌した。反応液に５％塩化アンモ
ニウム(１００ml)を加え、水層をジクロロメタン(５０m
l)で抽出した。有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウムで
乾燥後、減圧下濃縮して油状物を得た。これをシリカゲ
ル６０(メル ク社)によるカラムクロマトグラフィーに
より精製し、化合物１の３３−α−ク ロロエトキシカ
ルボニル体(化合物１b, ４.２２g)を白色粉末として得
た。 元素分析：Ｃ₄₇Ｈ₇₂ＮＯ₁₄Ｃｌ 計算値：Ｃ，６２．００； Ｈ,7.97; Ｎ,1.54;
Ｃl,3.89 実測値：Ｃ,61.94; Ｈ,8.20; Ｎ,1.47; Ｃl,
3.86 ＩＲ：3500,3080,2950,2840,1760,1720,1660,1650,145
0,1380,1370,1350,1320,1260,1200,1170,1140,1100,107
0,1040,1010,990,960,930,920,900,780,740,660(cm^-1)

【００３３】実施例６ 化合物１b(１.１５g)をジクロロメタン(３０ml)に溶解
し、０℃に冷却後、エチレンジアミン(０.６７４ml)を
加えて、２時間半撹拌した。反応液から溶媒を除去後、
酢酸エチル−ヘキサン混液(１：３，１００ml)と０.２
Ｎ塩酸を加え、pＨ２〜３に調整後分配した。水層を酢
酸エチル−ヘキサン混液(１：３，４０ml)で洗浄後、p
Ｈ７〜８に調整し、酢酸エチル(１００ml，２０ml×２)
で抽出した。抽出液を１０％塩化アンモニウム(５０ml
×２)，水，飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリ
ウムで乾燥後、濃縮乾固して油状物を得た。これに０.
１Ｎ塩酸(１２ml)及び８％イソブタノール水(２０ml)を
加えて溶解し、濃縮，凍結乾燥し て化合物６の粉末(塩
酸塩，６８３mg)を得た。 元素分析：Ｃ₄₇Ｈ₇₅Ｎ₃Ｏ₁₃・ＨＣl・１.５Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,59.20; Ｈ,8.35; Ｎ,4.41; Ｃl,
3.72 実測値：Ｃ,59.10; Ｈ,8.44; Ｎ,5.06; Ｃl:
4.50 ＩＲ：3430,2950,2850,1720,1640,1520,1450,1380,126
0,1170,1090,1060,1010,990,910,780(cm^-1)¹³ Ｃ ＮＭＲ：主ピーク／副ピーク(δppm) 212.69/212.58(Q), 196.41/192.80(Q), 169.05/168.74
(Q), 164.78/165.94(Q), 156.64(Q), 138.99/139.73
(Q), 135.61/135.41(CH), 132.60/131.99(Q), 129.23(C
H), 122.46/122.65(CH), 116.64(CH₂), 97.06/98.62
(Q), 80.87(CH), 77.00/77.60(CH), 76.22(CH), 75.19/
76.58(CH), 73.68(CH), 72.88/72.20(CH), 69.97/69.09
(CH), 57.20/57.50(CH₃), 56.98(CH₃), 56.56/52.70(C
H), 56.35/56.13(CH₃), 52.84/52.92(CH), 48.55/48.36
(CH₂), 43.20/43.90(CH₂), 42.57(CH₂),41.32(CH₂), 3
9.74/40.16(CH), 39.25/40.54(CH₂), 36.33(CH₂), 35.4
8(CH₂),35.23/35.62(CH₂), 34.64(CH), 34.64/33.61(C
H), 32.93/32.58(CH₂), 32.72(CH₂), 30.51(CH₂), 30.2
0(CH₂), 27.66/26.21(CH₂), 26.29/26.09(CH), 24.50(C
H₂),21.19/20.86(CH₂), 20.47/19.46(CH₃), 16.24/15.8
8(CH₃), 16.00(CH₃), 14.20/14.38(CH₃), 9.42/9.82(CH
₃).

【００３４】実施例７ 化合物１b(１.１５g)をジクロロメタン(３０ml)に溶解
し、０℃でピペラジン(８８８mg)を加え、１.５時間撹
拌した。反応液を約５mlまで濃縮し酢酸エチル(１００m
l)で希釈し、１０％塩化アンモニウムで２回、炭酸水素
ナトリウム、水、 および飽和食塩水(各５０ml)で洗浄
後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下濃縮して油状物
を得た。これに０.１Ｎ塩酸(１３ml)および８％イソブ
タノール水(２０ml)を加えて濃縮、凍結乾燥して、化合
物７の無色粉末(塩酸塩，１.０８g)を 得た。 元素分析：Ｃ₄₉Ｈ₇₇Ｎ₃Ｏ₁₃・ＨＣl・Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,60.63; Ｈ,8.31; Ｎ,4.33; Ｃl,
3.65 実測値：Ｃ,60.62; Ｈ,8.52; Ｎ,4.30; Ｃl,
3.28 ＩＲ：3340,2950,2830,2720,2600,2460,1710,1650,144
0,1380,1280,1260,1170,1100,1080,1040,990,920,760(c
m^-1)¹³ Ｃ ＮＭＲ: 主ピーク／副ピーク(δppm) 212.83/212.66(Q), 196.57/192.68(Q), 169.14/168.73
(Q), 164.82/165.91(Q), 154.59(Q), 139.08/139.78
(Q), 135.57/135.36(CH), 132.80/132.18(Q), 128.80(C
H), 122.47/122.64(CH), 116.69(CH₂), 97.10/98.64
(Q), 80.94(CH), 77.71/77.56(CH), 76.62(CH), 75.19/
76.56(CH), 73.69/73.60(CH), 72.96/72.20(CH), 69.99
/69.06(CH), 57.33/57.23(CH₃), 56.95/57.53(CH₃), 5
6.69/52.74(CH),56.35/56.13(CH₃), 52.86/52.91(CH),
48.53/48.38(CH₂), 43.26(CH₂), 42.95/43.90(CH₂), 4
0.69(CH₂), 39.73/40.15(CH), 39.28(CH₂), 36.24/36.0
9(CH₂), 35.35/35.65(CH₂), 34.60(CH), 34.58/33.61(C
H), 32.87/32.62(CH₂), 32.67(CH₂), 30.49(CH₂), 30.1
3(CH₂), 27.56/26.23(CH₂), 26.40/26.07(CH), 24.47(C
H₂), 21.23/20.84(CH₃), 20.55/19.45(CH₃), 16.22/15.
84(CH₃),16.01(CH₃), 14.35(CH₃), 9.43/9.81(CH₃).

【００３５】実施例８ 化合物１(１.０７g)のジクロロメタン溶液(３５ml)を−
５℃に冷却し、ピリジン(０.１４ml)及びt−ブチルジメ
チルシリルトリフルオロメタンスルホネート(０.３６７
ml)を加え、２時間撹拌した。反応液にジクロロメタン
(５０ml)を加え、１０％塩化アンモニウム(３０ml)で２
回、水(３０ml)でそれぞれ洗浄し、無水硫酸ナトリウム
で乾燥後、濃縮乾固して粗粉末(１.１５g)を得た。これ
をシリカゲル６０(メルク社，Art 7734，４０g)のカラ
ムクロマトグラフィーにより精製し、化合物１の３３−
t−ブチルジメチルシリル体の白色粉末(化合物１c,９０
４mg) を得た。 元素分析：Ｃ₅₀Ｈ₈₃ＮＯ₁₂Ｓi・Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,64.14; Ｈ,9.15; Ｎ,1.50 実測値：Ｃ,64.11; Ｈ,9.05; Ｎ,1.56 ＩＲ：3500,3080,2950,2870,2840,1750,1720,1660,145
0,1380,1360,1330,1290,1260,1200,1170,1100,1040,100
0,990,960,930,920,870,840,780,730,640(cm^-1)

【００３６】実施例９ 化合物１c(５０２mg)のジクロロメタン溶液(１６ml)を
０℃に冷却し、ピリジン(６６μl)及びクロロギ酸α−
クロロエチル(α−ＣＥＣＦ，５０％０.１５３ml)を加
え、１.５時間撹拌した。さらにピリジン(３０μl)及び
α−ＣＥＣＦ(５０μl)を加え、１.５時間撹拌した。反
応液に酢酸エチル(２０ml)を加え、約１５mlにまで濃縮
し、酢酸エチル−ヘキサン混合液(２：３，２０ml)で希
釈した。次いで０.０３Ｎ塩酸／８％塩化アンモニウム
水溶液(１５ml)，１０％塩化アンモニウム，２％炭酸水
素ナトリウム，水，飽和食塩水(各１５ml)で順次洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮乾固して化合物
１cの２４−α−クロロエトキシカルボニル体の白色粉
末(化合物１d, ５７０mg)を得た。 元素分析：Ｃ₅₃Ｈ₈₆ＮＯ₁₄ＳiＣl・０.５Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,61.58; Ｈ,8.48; Ｎ,1.35; Ｃl,
3.43 実測値：Ｃ,61.68; Ｈ,8.51; Ｎ,1.33; Ｃl,
4.07 ＩＲ：3490,3080,2950,2870,2840,1770,1720,1660,145
0,1380,1360,1260,1190,1170,1140,1100,1070,1040,101
0,990,930,870,840,780,660(cm^-1)

【００３７】実施例１０ 化合物１d(１.４１g)をジクロロメタン(４５ml)に溶解
し、０℃に冷却後エチレンジアミン(０.７３６ml)を加
え、２時間撹拌した。反応液から溶媒を除去後、水(５
０ml)及び１.０Ｎ塩酸(１１ml)を加え、pＨ７に調整
後、酢酸エチル(５０ml,４０ml×２)で抽出した。有機
層を１０％塩化アンモニウムで２回、飽和食塩 水で順
次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮乾固して
化合物８の３３−t−ブチルジメチルシリル体の白色粉
末(１.３６g)を得た。この粉末を０.１Ｎ塩酸／酢酸−
ＴＨＦ−水(１：２：２)の混合液(４５ml)に溶解し、０
℃で１９時間撹拌した。反応液からＴＨＦを留去後、水
(２０ml)を加え、酢酸エチル−ヘキサン混液(１：２，
５０ml)で２回洗浄後、pＨ７.５に調整し、酢酸エチル
(５０ml)で抽出した。さらに水層をpＨ７.８に調整し、
酢酸エチル(５０ml)で２回抽出し、得られた抽出層を合
わせて２％炭酸水素ナトリウムで２回、飽和食塩水で２
回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濃縮乾固して粗
末を得た。これに０.１Ｎ塩酸(１０ml)及び８％イソブ
タノール水(２０ml)を加えて濃縮、凍結乾燥して化合物
８の塩酸塩(８６３mg)を得た。 元素分析：Ｃ₄₇Ｈ₇₅Ｎ₃Ｏ₁₃・ＨＣl・Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,59.76; Ｈ,8.32; Ｎ,4.45; Ｃl,
3.75 実測値：Ｃ,59.95; Ｈ,8.36; Ｎ,4.20; Ｃl,
3.64 ＩＲ：3440,2950,2850,1720,1650,1510,1450,1380,125
0,1190,1170,1090,1050,1030,990,910,780(cm^-1)¹³ Ｃ ＮＭＲ: 主ピーク／副ピーク(δppm) 209.54/208.32(Q), 197.41/193.76(Q), 169.60/169.25
(Q), 165.38/166.15(Q), 156.21/156.50(Q), 138.65/13
9.24(Q), 135.60/135.76(CH), 132.72/131.74(CH), 13
0.81/131.24(Q), 123.32(CH), 116.64/116.54(CH₂), 9
7.84/98.32(Q),84.10(CH), 79.82/77.26(CH), 75.56(C
H), 73.69/73.84(CH), 73.49(CH), 73.05(CH), 72.29(C
H), 57.23/57.47(CH₃), 56.65(CH₃), 56.62/52.82(CH),
56.27/56.15(CH₃), 53.17/52.46(CH), 48.95/48.25(CH
₂), 43.80/44.14(CH₂), 42.74(CH₂),40.26(CH₂), 39.25
(CH₂), 38.54(CH₂), 38.17/37.53(CH), 35.71(CH₂), 3
4.89(CH), 34.82(CH₂), 34.22(CH₂), 33.61(CH), 32.40
/32.55(CH₂), 31.58/31.27(CH₂), 30.38/30.50(CH₂), 2
7.45(CH₂), 26.16/26.46(CH), 24.19(CH₂), 20.92(C
H₂), 19.95(CH₃), 16.40(CH₃), 16.05(CH₃), 12.88(C
H₃), 10.42(CH₃).

【００３８】実施例１１ 化合物１d(１.４１g)をジクロロメタン(４５ml)に溶解
し、０℃に冷却後ピペラジン(９６７mg)を加え、１.５
時間撹拌した。反応液から溶媒を除去後、水(１００ml)
及び１.０Ｎ塩酸(１１ml)を加え、pＨ７.３に調整後、
酢酸エチル(７０ml，５０ml×２)で抽出した。有機層を
１０％塩化アンモニウムで２回、飽和食塩水で順次洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮乾固して化合物
９の３３−t−ブチルジメチルシリル体の白色粉末(１.
３６g)を得た。この粉末を０.１Ｎ塩酸／酢酸−ＴＨＦ
−水(１：２：２)の混合液(４５ml)に溶解し、０℃で２
０時間撹拌した。反応液からＴＨＦを留去後、水(２０m
l)を加え、酢酸エチル−ヘキサン混液(１：３，５０ml)
で２回洗浄後、pＨ５.５に調整し、酢酸エチル(７０ml)
で抽出した。さらに水層をpＨ８に調整し、酢酸エチル
(５０ml)で２回抽出し、得られた抽出層を合わせて、２
％炭酸水素ナトリウムで２回、飽和食塩水で２回洗浄
後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濃縮乾固して粗末を得
た。これに０.１Ｎ塩酸(１４ml)及び８％イソブタノー
ル水(２０ml)を加えて濃縮、凍結乾燥して化合物９の塩
酸塩(１.０８g)を得た。 元素分析：Ｃ₄₉Ｈ₇₇Ｎ₃Ｏ₁₃・ＨＣl・Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,60.63; Ｈ,8.31; Ｎ,4.33; Ｃl,3.65 実測値：Ｃ,60.61; Ｈ,8.36; Ｎ,4.25; Ｃl,3.52 ＩＲ：3440,2950,2840,2720,2620,2470,1720,1650,144
0,1380,1280,1260,1170,1080,1030,980,910,760(cm^-1)¹³ Ｃ ＮＭＲ：主ピーク／副ピーク(δppm) 208.04/207.88(Q), 196.72/192.58(Q), 169.27/168.92
(Q), 164.95/166.12(Q), 154.13/154.26(Q), 138.52/13
9.19(Q), 135.56/135.79(CH), 131.40(CH), 131.31/13
2.05(Q), 123.21/122.88(CH), 116.54/116.35(CH₂), 9
7.27/98.48(Q), 84.13(CH), 79.14/78.70(CH), 75.26/7
6.79(CH), 73.69/73.82(CH), 73.48(CH), 73.06(CH), 7
2.62/72.29(CH), 57.08/57.40(CH₃), 56.57(CH₃), 56.4
9(CH), 56.31/56.15(CH₃), 53.47/52.77(CH), 48.84/4
8.09(CH₂), 45.84(CH₂), 44.83(CH₂),42.78/43.97(C
H₂), 39.13/41.88(CH₂), 38.07/37.12(CH), 35.62/35.1
8(CH₂),34.89(CH), 34.81(CH₂), 34.66/33.57(CH), 33.
66(CH₂), 32.61(CH₂), 31.36(CH₂), 30.42/30.55(CH₂),
27.45/26.27(CH₂), 26.17/26.51(CH), 24.31/24.53(CH
₂), 20.94/20.71(CH₂), 20.08/19.63(CH₃), 16.12/16.3
9(CH₃), 15.77/16.03(CH₃), 13.11/13.57(CH₃), 10.40/
10.23(CH₃).

【００３９】実施例１２ 化合物２(２００mg)をジクロロメタン(６.０ml)に溶解
し、室温で２,２−ジメトキシプロパン(４７μl)を加
え、次いでＤ−カンファースルホン酸(６mg)を加えて撹
拌した。１時間後と１時間半後に２,２−ジメトキシプ
ロパン(２０μl)を加えさらに１時間撹拌した。反応液
に酢酸エチル(１０ml)を加えて約１０mlにまで濃縮し、
酢酸エチル−ヘキサン混液(１：２，１５ml)で希釈し
た。次いで２％炭酸水素ナトリウム，水で２回及び飽和
食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮乾
固して化合物２の３２，３３−アセトニドの白色粉末
(化合物２a，１７８mg)を得た。この化合物(２a,１７８
mg)をジクロロメタン(５.８ml)に溶解し、０℃でピリジ
ン(２６μl)及びα−ＣＥＣＦ(５０％，６１μl)を加
え、１時間撹拌した。再び同量のピリジン及びα−ＣＥ
ＣＦを加え３０分撹拌した。反応液をＡcＯＥt／Ｈex
(１：２，１８ml)で希釈後、１０％ＮＨ₄Ｃl水(１０ml
×４)で洗浄し、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮乾固して化合物
２aの２４−α−クロロエトキシカルボニル体の白色粉
末(化合物２b，１９０mg)を得た。

【００４０】実施例１３ 化合物２b(８３mg)をジクロロメタン(２.５ml)に溶解
し、０℃でピペラジン(62mg)を加え１時間撹拌した。反
応液から溶媒を留去後ＡcＯＥt(２０ml)で希釈 し、０.
１Ｎ ＨＣl／１０％ＮＨ₄Ｃl水(１０ml)，１０％ＮＨ₄
Ｃl，２％ＮaＨＣＯ₃，Ｈ₂Ｏ及び飽和食塩水で順次洗浄
した。有機層をＮa₂ＳＯ₄で乾燥後濃縮乾 固して粉末
(６７mg)を得た。これを０.１Ｎ ＨＣl(０.７ml)及び８
％i−ＢuＯＨ水(５ml)で溶解し、濃縮、凍結乾燥して化
合物１０の白色粉末(６７mg)を得た。 元素分析：Ｃ₄₈Ｈ₇₅Ｎ₃Ｏ₁₃・ＨＣl・１.５Ｈ₂Ｏ 計算値：Ｃ,59.71; Ｈ,8.25; Ｎ,4.35; Ｃl,
3.67 実測値：Ｃ,59.62; Ｈ,8.32; Ｎ,4.23; Ｃl,
3.75 ＩＲ：3440,2940,2850,2720,2460,1720,1640,1440,138
0,1280,1260,1170,1100,1080,1040,990,920,770(cm^-1)¹³ Ｃ ＮＭＲ：主ピーク／副ピーク(δppm) 208.24/207.94(Q), 196.85/192.59(Q), 169.28/168.92
(Q), 165.01/166.20(Q), 154.16/154.29(Q), 138.52/13
9.25(Q), 135.51/135.78(CH), 132.47(Q), 131.11/131.
41(CH), 123.18/122.85(CH), 116.57/116.35(CH₂), 97.
28/98.47(Q), 79.51/78.70(CH), 75.29/76.85(CH), 74.
70(CH), 73.68/73.80(CH), 73.05(CH), 72.60/72.24(C
H), 57.09/57.40(CH₃), 56.46/52.75(CH), 56.32/56.16
(CH₃), 53.50/52.84(CH), 48.86/48.09(CH₂), 45.76(CH
₂), 44.80(CH₂), 43.02/43.91(CH₂), 39.13/41.82(C
H₂), 38.95/39.08(CH₂), 38.09/37.20(CH), 35.64(C
H₂), 35.00(CH), 34.66/33.53(CH), 33.76/35.14(CH₂),
32.59(CH₂), 32.07/32.00(CH₂), 30.73/30.88(CH₂), 2
7.50/26.26(CH₂), 26.13/26.41(CH), 24.26/24.49(C
H₂), 20.88/20.68(CH₂), 20.01/19.55(CH₃), 16.10/16.
03(CH₃), 15.76/16.34(CH₃), 12.92/13.58(CH₃), 10.48
/10.32(CH₃).

【００４１】

【発明の効果】本発明の大環状ラクトン化合物は、水溶
性を有し、免疫抑制作用を有する新規な化合物であり、
自己免疫疾患治療剤および拒絶反応防止剤として有用で
ある。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 [式中、Ｒ¹，Ｒ²及びＲ³のうち少なくとも一つは塩基性
   基含有カルバモイル基を示し、他は水素又は水酸基の保
   護基を示す。]で表される化合物又はその塩。
2. 【請求項２】一般式 【化２】 [式中、Ｒ⁴，Ｒ⁵及びＲ⁶のうち少なくとも一つは活性化
   されたエステル基であり、他は水素又は水酸基の保護基
   を示す。]で表される化合物又はその塩。
3. 【請求項３】一般式 【化３】 [式中、Ｒ⁴，Ｒ⁵及びＲ⁶のうち少なくとも一つは活性化
   されたエステル基であり、他は水素又は水酸基の保護基
   を示す。]で表される化合物に塩基性基含有アミンを反
   応させ、要すれば水酸基の保護基を脱保護することを特
   徴とする請求項１記載の化合物又はその塩の製造法。
4. 【請求項４】請求項１記載の化合物又はその塩を含有し
   てなる免疫抑制剤。