JPH05260950A - コラーゲンコート細胞培養器具およびその製造方法 - Google Patents
コラーゲンコート細胞培養器具およびその製造方法Info
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- JPH05260950A JPH05260950A JP6236992A JP6236992A JPH05260950A JP H05260950 A JPH05260950 A JP H05260950A JP 6236992 A JP6236992 A JP 6236992A JP 6236992 A JP6236992 A JP 6236992A JP H05260950 A JPH05260950 A JP H05260950A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 コラーゲンをコートした培養器具は、接着系
細胞の培養に優れた特性を有しているが、コラーゲンが
不安定で失活し易いため、保存がきかず、また滅菌も出
来ない。このような欠点をなくし、コート後の長期保存
と滅菌が可能なコラーゲンコート細胞培養器具を提供す
ることを目的とする。 【構成】 表面の接触角が４０度以下、または低温プラ
ズマ処理等により接触角が４０度以下とした基材表面
に、コラーゲンの薄膜（0.２〜2.０μｇ／cm2 ）をコー
トする。
細胞の培養に優れた特性を有しているが、コラーゲンが
不安定で失活し易いため、保存がきかず、また滅菌も出
来ない。このような欠点をなくし、コート後の長期保存
と滅菌が可能なコラーゲンコート細胞培養器具を提供す
ることを目的とする。 【構成】 表面の接触角が４０度以下、または低温プラ
ズマ処理等により接触角が４０度以下とした基材表面
に、コラーゲンの薄膜（0.２〜2.０μｇ／cm2 ）をコー
トする。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、コラーゲンをコートし
た細胞培養器具及びその製造方法に関するものである。
た細胞培養器具及びその製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】シャーレ、フラスコ、マルチプレートな
どの細胞培養器具は、主としてポリスチレン成形品の表
面に低温プラズマ処理、コロナ放電処理等を施し、親水
性を付与したものが市販されている。これらの細胞培養
器具は、足場依存性の細胞では、株化細胞、初代細胞を
問わず、線維芽細胞、平滑筋細胞、血管内皮細胞、角膜
細胞などの培養に広く用いられている。また、血液系細
胞として、株化したリンパ球であるＮＳ−１、ＭＯＬＴ
−４、ＨＵＴ ７８、ＭＴ−４、Ｊｕｒｋａｔなどのい
わゆる足場非依存性の浮遊細胞等にも広く使用されてい
る。
どの細胞培養器具は、主としてポリスチレン成形品の表
面に低温プラズマ処理、コロナ放電処理等を施し、親水
性を付与したものが市販されている。これらの細胞培養
器具は、足場依存性の細胞では、株化細胞、初代細胞を
問わず、線維芽細胞、平滑筋細胞、血管内皮細胞、角膜
細胞などの培養に広く用いられている。また、血液系細
胞として、株化したリンパ球であるＮＳ−１、ＭＯＬＴ
−４、ＨＵＴ ７８、ＭＴ−４、Ｊｕｒｋａｔなどのい
わゆる足場非依存性の浮遊細胞等にも広く使用されてい
る。
【０００３】しかし、細胞の種類によって、これらの細
胞培養器具上では細胞の増殖は認められるものの、細胞
の増殖が不十分だったり、細胞の増殖形態が悪かったり
する。特に、初代培養においてはそれが顕著である。そ
こで、コラーゲン、ゼラチンといった細胞外マトリック
スやファイブロネクチン、ラミニン、ヒドロネクチンと
いった接着因子などを培養面にコートし、細胞の接着
性、増殖性を高めることにより対処されることが多い。
胞培養器具上では細胞の増殖は認められるものの、細胞
の増殖が不十分だったり、細胞の増殖形態が悪かったり
する。特に、初代培養においてはそれが顕著である。そ
こで、コラーゲン、ゼラチンといった細胞外マトリック
スやファイブロネクチン、ラミニン、ヒドロネクチンと
いった接着因子などを培養面にコートし、細胞の接着
性、増殖性を高めることにより対処されることが多い。
【０００４】なかでも、コラーゲンは全体由来の細胞外
マトリックスとして広く使用されている。コラーゲンを
コートすることにより、細胞の接着及び伸展が向上す
る。ＰＣ−１２などの株化神経系細胞では神経突起の伸
長度合が良く、又、血管内皮細胞の初代培養において
は、増殖性が向上し、細胞の形態も良好である。又、ラ
ット肝実質細胞の初代培養においても増殖性が良好であ
る。
マトリックスとして広く使用されている。コラーゲンを
コートすることにより、細胞の接着及び伸展が向上す
る。ＰＣ−１２などの株化神経系細胞では神経突起の伸
長度合が良く、又、血管内皮細胞の初代培養において
は、増殖性が向上し、細胞の形態も良好である。又、ラ
ット肝実質細胞の初代培養においても増殖性が良好であ
る。
【０００５】このように、コラーゲンは接着系の細胞の
培養に良好な特性を有しているが、難点として不安定な
ことが挙げられる。そのため、上記の一般の培養器具に
コートして滅菌を施すと言うことが出来ない。従って、
コラーゲンをコートした培養器具を使用するためには、
予め滅菌してある培養器具に、無菌的操作という面倒な
方法でコラーゲンをコートしなければならないという欠
点があった。
培養に良好な特性を有しているが、難点として不安定な
ことが挙げられる。そのため、上記の一般の培養器具に
コートして滅菌を施すと言うことが出来ない。従って、
コラーゲンをコートした培養器具を使用するためには、
予め滅菌してある培養器具に、無菌的操作という面倒な
方法でコラーゲンをコートしなければならないという欠
点があった。
【０００６】従来、一般に行われてきたコラーゲンのコ
ートの１例を挙げると次のようになる。まず、無菌的に
調整された市販の0.３％コラーゲン溶液を希塩酸で１０
倍希釈して、これを培養器具内に表面をカバーする十分
量を入れ、２０〜３０分間、時によっては２４時間静置
し、コラーゲン溶液を除いた後、無菌純水で洗い室温で
乾燥させる。
ートの１例を挙げると次のようになる。まず、無菌的に
調整された市販の0.３％コラーゲン溶液を希塩酸で１０
倍希釈して、これを培養器具内に表面をカバーする十分
量を入れ、２０〜３０分間、時によっては２４時間静置
し、コラーゲン溶液を除いた後、無菌純水で洗い室温で
乾燥させる。
【０００７】このように、コラーゲンを一般の培養器具
にコートしようとした場合、かなりの手間がかかる。そ
の理由の１つが、コート後のコラーゲンの不安定さであ
り、これに加えて、操作をクリーンベンチなどの無菌環
境下で行わねばならない煩雑さがあった。従って、コラ
ーゲンをあらかじめコートした細胞培養器具を市販しよ
うとした場合、上記のような無菌環境下の多くの工程が
必要であり、またコート後の保存管理も難しく、コスト
が高くつくことになる。
にコートしようとした場合、かなりの手間がかかる。そ
の理由の１つが、コート後のコラーゲンの不安定さであ
り、これに加えて、操作をクリーンベンチなどの無菌環
境下で行わねばならない煩雑さがあった。従って、コラ
ーゲンをあらかじめコートした細胞培養器具を市販しよ
うとした場合、上記のような無菌環境下の多くの工程が
必要であり、またコート後の保存管理も難しく、コスト
が高くつくことになる。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、接着系細胞
の培養用として、コラーゲンをコートした均一で安価な
細胞培養器具を供給するため、コート後の長期保存およ
び滅菌が可能な性能を賦与し、これにより比較的簡単な
工程で、しかも必ずしも無菌的操作を必要としない、コ
ラーゲンをコートした細胞培養器具およびその製造方法
の開発を目的とするものである。
の培養用として、コラーゲンをコートした均一で安価な
細胞培養器具を供給するため、コート後の長期保存およ
び滅菌が可能な性能を賦与し、これにより比較的簡単な
工程で、しかも必ずしも無菌的操作を必要としない、コ
ラーゲンをコートした細胞培養器具およびその製造方法
の開発を目的とするものである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
めに鋭意研究の結果、本発明者らは、基材表面に強い親
水性を付与した後、その表面にコラーゲンをコートする
ことにより、コラーゲンは安定化し、長期にわたって保
存してもコラーゲンの効果が持続し、かつ、電子線、ガ
ンマー線、エックス線などの放射線滅菌を施してもコラ
ーゲンの効果が失われないことを見いだし、本発明を完
成するに至った。
めに鋭意研究の結果、本発明者らは、基材表面に強い親
水性を付与した後、その表面にコラーゲンをコートする
ことにより、コラーゲンは安定化し、長期にわたって保
存してもコラーゲンの効果が持続し、かつ、電子線、ガ
ンマー線、エックス線などの放射線滅菌を施してもコラ
ーゲンの効果が失われないことを見いだし、本発明を完
成するに至った。
【００１０】即ち、本発明は、空気中での水滴滴下によ
り測定した基材表面の接触角が４０度以下である器具、
もしくは表面処理により基材表面の接触角を４０度以下
とした器具の表面に、コラーゲンを、0.２〜2.０μｇ／
cm2 の範囲でコートしたことを特徴とするコラーゲンコ
ート細胞培養器具、およびその製造方法であり、さらに
は、前記器具を形成する基材がプラスチックであり、該
基材の表面を低温酸素プラズマもしくは低温空気プラズ
マで処理し、基材表面の接触角を４０度以下とする工程
や、前記基材表面にコラーゲン溶液を接触させ、洗浄、
乾燥した後、さらに放射線照射により滅菌する工程を含
む。
り測定した基材表面の接触角が４０度以下である器具、
もしくは表面処理により基材表面の接触角を４０度以下
とした器具の表面に、コラーゲンを、0.２〜2.０μｇ／
cm2 の範囲でコートしたことを特徴とするコラーゲンコ
ート細胞培養器具、およびその製造方法であり、さらに
は、前記器具を形成する基材がプラスチックであり、該
基材の表面を低温酸素プラズマもしくは低温空気プラズ
マで処理し、基材表面の接触角を４０度以下とする工程
や、前記基材表面にコラーゲン溶液を接触させ、洗浄、
乾燥した後、さらに放射線照射により滅菌する工程を含
む。
【００１１】本発明における細胞培養器具は、コラーゲ
ンコート前の基材表面の、空気中での水滴滴下により測
定した接触角が４０度以下であることが特徴である。接
触角が４０度を越えると、コラーゲンの保存や放射線滅
菌における安定性が損なわれる。その理由は十分には解
明されていないが、親水性化による表面の極性が、コー
トされたコラーゲンの構造的な要因に関連するものと推
測される。また、基材表面の接触角が４０度より大きい
場合は、予め表面処理を施して親水化した後、コラーゲ
ンをコートしてもよい。基材表面の親水化処理の方法と
しては、低温プラズマ処理、コロナ放電処理、化学的処
理などがあるが、接触角４０度以下の親水性が必要なこ
と、処理後その親水性を長く維持する必要があること、
処理の簡便性等から低温酸素プラズマおよび低温空気プ
ラズマによる処理が適当である。
ンコート前の基材表面の、空気中での水滴滴下により測
定した接触角が４０度以下であることが特徴である。接
触角が４０度を越えると、コラーゲンの保存や放射線滅
菌における安定性が損なわれる。その理由は十分には解
明されていないが、親水性化による表面の極性が、コー
トされたコラーゲンの構造的な要因に関連するものと推
測される。また、基材表面の接触角が４０度より大きい
場合は、予め表面処理を施して親水化した後、コラーゲ
ンをコートしてもよい。基材表面の親水化処理の方法と
しては、低温プラズマ処理、コロナ放電処理、化学的処
理などがあるが、接触角４０度以下の親水性が必要なこ
と、処理後その親水性を長く維持する必要があること、
処理の簡便性等から低温酸素プラズマおよび低温空気プ
ラズマによる処理が適当である。
【００１２】本発明に於て使用する細胞培養基材の種類
は特に限定しないが、ハンドリングなどを考慮した場
合、プラスチックであることが望ましい。また、細胞培
養の課程で顕微鏡により観察する必要があることから、
透明であることが必要で、このような条件に適したプラ
スチック材料としては、ポリスチレン樹脂、ポリカーボ
ネート樹脂、ポリエステル樹脂、ＴＰＸ樹脂などが挙げ
られる。
は特に限定しないが、ハンドリングなどを考慮した場
合、プラスチックであることが望ましい。また、細胞培
養の課程で顕微鏡により観察する必要があることから、
透明であることが必要で、このような条件に適したプラ
スチック材料としては、ポリスチレン樹脂、ポリカーボ
ネート樹脂、ポリエステル樹脂、ＴＰＸ樹脂などが挙げ
られる。
【００１３】本発明に於て使用するコラーゲンとして
は、どんなタイプのコラーゲンを用いても差しつかえな
い。また、コラーゲンの溶解に用いる溶媒としては、特
に制限はないが、コラーゲンが溶解し、コラーゲンを変
質させるものでなければ、何でも使用することができる
が、コート対象がポリスチレンなどのプラスチックであ
ることを考慮すると、水、メチルアルコール、エチルア
ルコール、燐酸緩衝液、およびこれらを混合したものが
よい。
は、どんなタイプのコラーゲンを用いても差しつかえな
い。また、コラーゲンの溶解に用いる溶媒としては、特
に制限はないが、コラーゲンが溶解し、コラーゲンを変
質させるものでなければ、何でも使用することができる
が、コート対象がポリスチレンなどのプラスチックであ
ることを考慮すると、水、メチルアルコール、エチルア
ルコール、燐酸緩衝液、およびこれらを混合したものが
よい。
【００１４】コラーゲンのコートの厚さは、0.２〜2.０
μｇ／cm2 が適切であり、これより薄いと目的表面が十
分にコートされず、コラーゲンコートの効果が不十分で
ばらつきも大きくなる。また、この厚さより厚いと、基
材表面の極性のコラーゲンへの効果がおよばなくなり、
安定性、耐放電線滅菌性が得られなくなる。
μｇ／cm2 が適切であり、これより薄いと目的表面が十
分にコートされず、コラーゲンコートの効果が不十分で
ばらつきも大きくなる。また、この厚さより厚いと、基
材表面の極性のコラーゲンへの効果がおよばなくなり、
安定性、耐放電線滅菌性が得られなくなる。
【００１５】コラーゲン溶液と基材表面の接触時間は特
に限定しないが、基材表面の接触角が４０度以下であれ
ば、数十秒から数分で十分である。また、コラーゲンを
基材表面に結合させた後の洗浄は、コラーゲン溶液を溶
解するのに用いたのと同一の溶媒を用いるのが基本であ
るが、純水を用いてもよい。洗浄後の乾燥工程は、室温
で実施することが基本であり、４０℃をこえるとコラー
ゲンが変性する恐れがある。
に限定しないが、基材表面の接触角が４０度以下であれ
ば、数十秒から数分で十分である。また、コラーゲンを
基材表面に結合させた後の洗浄は、コラーゲン溶液を溶
解するのに用いたのと同一の溶媒を用いるのが基本であ
るが、純水を用いてもよい。洗浄後の乾燥工程は、室温
で実施することが基本であり、４０℃をこえるとコラー
ゲンが変性する恐れがある。
【００１６】最後の滅菌は、ガンマー線滅菌、電子線滅
菌、エックス線滅菌などの放射線による滅菌により実施
する。ＥＯＧ滅菌（エチレン−オキサイドガス滅菌）な
どの化学的滅菌や、高圧蒸気滅菌のような高熱をかける
滅菌法では、コラーゲンを変性させる恐れがあるので実
施しないほうがよい。このようにして得られたコラーゲ
ンコート細胞培養器具は、滅菌後室温保存でも、長期に
わたって、コラーゲンの効果を維持することが出来る。
菌、エックス線滅菌などの放射線による滅菌により実施
する。ＥＯＧ滅菌（エチレン−オキサイドガス滅菌）な
どの化学的滅菌や、高圧蒸気滅菌のような高熱をかける
滅菌法では、コラーゲンを変性させる恐れがあるので実
施しないほうがよい。このようにして得られたコラーゲ
ンコート細胞培養器具は、滅菌後室温保存でも、長期に
わたって、コラーゲンの効果を維持することが出来る。
【００１７】
【実施例】次に実施例により、本発明をより具体的に説
明する。 実施例１ 射出成形した直径３５mmのポリスチレン樹脂製シャーレ
に低温酸素プラズマ処理を施し、表面の接触角が３５度
のシャーレを得た。これに、Ｉ型コラーゲン0.３％酸性
溶液を純水に溶解して、0.０３％濃度に調製したコラー
ゲン溶液を１ml入れ、３分間放置した。その後、溶液を
捨て、純水で１回洗浄し、室温で乾燥させた後、ガンマ
ー線滅菌を施して、培養試験に供した。 実施例２ 実施例１で得られたコラーゲンコートシャーレを、室温
で６ヶ月間保存し試験に供した。
明する。 実施例１ 射出成形した直径３５mmのポリスチレン樹脂製シャーレ
に低温酸素プラズマ処理を施し、表面の接触角が３５度
のシャーレを得た。これに、Ｉ型コラーゲン0.３％酸性
溶液を純水に溶解して、0.０３％濃度に調製したコラー
ゲン溶液を１ml入れ、３分間放置した。その後、溶液を
捨て、純水で１回洗浄し、室温で乾燥させた後、ガンマ
ー線滅菌を施して、培養試験に供した。 実施例２ 実施例１で得られたコラーゲンコートシャーレを、室温
で６ヶ月間保存し試験に供した。
【００１８】比較例１ 住友ベークライト（株）製の培養用シャーレ（ＭＳ−１
０３５０、接触角６０度）に、無菌的操作により0.０３
％コラーゲン溶液を２ml入れ、３０分間放置した後、溶
液をあけ、無菌純水により洗浄し、クリーンベンチ内で
乾燥して得たコラーゲンコートシャーレを、培養試験に
供した。 比較例２ 比較例１で得られたコラーゲンコートシャーレを、６ヶ
月間室温保存した後、試験に供した。
０３５０、接触角６０度）に、無菌的操作により0.０３
％コラーゲン溶液を２ml入れ、３０分間放置した後、溶
液をあけ、無菌純水により洗浄し、クリーンベンチ内で
乾燥して得たコラーゲンコートシャーレを、培養試験に
供した。 比較例２ 比較例１で得られたコラーゲンコートシャーレを、６ヶ
月間室温保存した後、試験に供した。
【００１９】比較例３ 比較例１で得られたコラーゲンコートシャーレに、ガン
マー線滅菌を施した後、試験に供した。 比較例４ 比較例３で得られたコラーゲンコートシャーレを、６ヶ
月間室温保存した後、試験に供した。 比較例５ 比較例１で使用した、住友ベークライト（株）製の培養
用シャーレ。
マー線滅菌を施した後、試験に供した。 比較例４ 比較例３で得られたコラーゲンコートシャーレを、６ヶ
月間室温保存した後、試験に供した。 比較例５ 比較例１で使用した、住友ベークライト（株）製の培養
用シャーレ。
【００２０】上記実施例および比較例の試料シャーレを
用いて、ＰＣ−１２細胞（神経系株化細胞の１つ）につ
いて、細胞の増殖形態（伸展度合）、および神経突起の
伸長度合を調べた。 細胞の伸展度合の観察 ダルベッコ変性ＭＥＭ培地（フローラボラトリー社製）
５００mlに、牛胎児血清５０ml、馬血清２５mlを添加し
たものを用い、１×１０4 個／mlの濃度で２mlずつ各シ
ャーレに播種し、培養３日での細胞の増殖形態を倒立顕
微鏡により観察した。 神経突起の伸長度合の観察 用いた培地は、ダルベッコ変性ＭＥＭ培地（フローラボ
ラトリー社製）５００mlに、牛胎児血清５０ml、馬血清
２５ml及びＮＧＦ0.５ng／mlを添加し、１×１０4 個／
mlの濃度で２mlずつ各シャーレに播種し、培養７日での
神経突起の伸長度合を倒立顕微鏡により観察した。
用いて、ＰＣ−１２細胞（神経系株化細胞の１つ）につ
いて、細胞の増殖形態（伸展度合）、および神経突起の
伸長度合を調べた。 細胞の伸展度合の観察 ダルベッコ変性ＭＥＭ培地（フローラボラトリー社製）
５００mlに、牛胎児血清５０ml、馬血清２５mlを添加し
たものを用い、１×１０4 個／mlの濃度で２mlずつ各シ
ャーレに播種し、培養３日での細胞の増殖形態を倒立顕
微鏡により観察した。 神経突起の伸長度合の観察 用いた培地は、ダルベッコ変性ＭＥＭ培地（フローラボ
ラトリー社製）５００mlに、牛胎児血清５０ml、馬血清
２５ml及びＮＧＦ0.５ng／mlを添加し、１×１０4 個／
mlの濃度で２mlずつ各シャーレに播種し、培養７日での
神経突起の伸長度合を倒立顕微鏡により観察した。
【００２１】さらに、上記実施例および比較例の試料シ
ャーレを用いて、Ｈｅｐ Ｇ２細胞（肝癌由来株細胞）
について、細胞の増殖形態（伸展度合）を調べた。用い
た培地は、ダルベッコ変性ＭＥＭ培地（フローラボラト
リー社製）５００mlに、牛胎児血清５０mlを添加したも
のを用い、１×１０4 個／mlの濃度で２mlずつ各シャー
レに播種し、培養３日での細胞の増殖形態を倒立顕微鏡
により観察した。
ャーレを用いて、Ｈｅｐ Ｇ２細胞（肝癌由来株細胞）
について、細胞の増殖形態（伸展度合）を調べた。用い
た培地は、ダルベッコ変性ＭＥＭ培地（フローラボラト
リー社製）５００mlに、牛胎児血清５０mlを添加したも
のを用い、１×１０4 個／mlの濃度で２mlずつ各シャー
レに播種し、培養３日での細胞の増殖形態を倒立顕微鏡
により観察した。
【００２２】各測定、観察の結果は表１に示した通り
で、本発明におけるコラーゲンコート細胞培養器具は、
コート後にガンマー線滅菌を施してもコラーゲンの効果
は失活せず、長期間保存してもコラーゲンの効果が変わ
らず維持されていることが明白である。
で、本発明におけるコラーゲンコート細胞培養器具は、
コート後にガンマー線滅菌を施してもコラーゲンの効果
は失活せず、長期間保存してもコラーゲンの効果が変わ
らず維持されていることが明白である。
【００２３】
【表１】
【００２４】
【発明の効果】本発明に従うと、コート後の滅菌が可能
で、製造工程においては無菌的操作の必要がなく、特別
な無菌的環境をつくる必要がなく、設備的に簡便なもの
ですむため低コストでの生産が可能である。又、室温で
も長期にわたる保存ができるため、輸送や保管の際に冷
蔵庫などの特別な設備を必要とせず、流通的にみてもコ
ストを低く抑えることができ、量産し広く供給できるコ
ラーゲンコート細胞培養器具として好適である。
で、製造工程においては無菌的操作の必要がなく、特別
な無菌的環境をつくる必要がなく、設備的に簡便なもの
ですむため低コストでの生産が可能である。又、室温で
も長期にわたる保存ができるため、輸送や保管の際に冷
蔵庫などの特別な設備を必要とせず、流通的にみてもコ
ストを低く抑えることができ、量産し広く供給できるコ
ラーゲンコート細胞培養器具として好適である。
Claims (4)
- 【請求項１】 空気中での水滴滴下により測定した基材
表面の接触角が４０度以下である器具、もしくは表面処
理により基材表面の接触角を４０度以下とした器具の表
面に、コラーゲンを、0.２〜2.０μｇ／cm2 の範囲でコ
ートしたことを特徴とするコラーゲンコート細胞培養器
具。 - 【請求項２】 空気中での水滴滴下により測定した基材
表面の接触角が４０度以下である器具、もしくは表面処
理により基材表面の接触角を４０度以下とした器具に、
水、メチルアルコール、エチルアルコール、燐酸緩衝
液、もしくはこれらの２種以上からなる混合液にコラー
ゲンを溶解させた溶液を注入して基材表面に接触させ、
該溶液を排出し、洗浄した後、４０℃以下の温度で乾燥
することを特徴とするコラーゲンコート細胞培養器具の
製造方法。 - 【請求項３】 請求項２において器具を形成する基材が
プラスチックであり、該基材の表面を低温酸素プラズマ
もしくは低温空気プラズマで処理し、基材表面の接触角
を４０度以下とすることを特徴とするコラーゲンコート
細胞培養器具の製造方法。 - 【請求項４】 前記基材表面にコラーゲン溶液を接触さ
せ、洗浄、乾燥した後、さらに放射線照射により滅菌す
ることを特徴とする、請求項２もしくは請求項３に記載
のコラーゲンコート細胞培養器具の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6236992A JPH05260950A (ja) | 1992-03-18 | 1992-03-18 | コラーゲンコート細胞培養器具およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6236992A JPH05260950A (ja) | 1992-03-18 | 1992-03-18 | コラーゲンコート細胞培養器具およびその製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05260950A true JPH05260950A (ja) | 1993-10-12 |
Family
ID=13198139
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6236992A Pending JPH05260950A (ja) | 1992-03-18 | 1992-03-18 | コラーゲンコート細胞培養器具およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05260950A (ja) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002142751A (ja) * | 2000-11-13 | 2002-05-21 | Asahi Techno Glass Corp | コラーゲンコート細胞培養容器及び培養部材 |
| WO2003035126A1 (fr) * | 2001-10-09 | 2003-05-01 | Techno Network Shikoku Co., Ltd. | Procede de production de materiau biologique, medicament, aliment, instrument medical, instrument de culture cellulaire et materiau a induction tissulaire |
| JP2005034060A (ja) * | 2003-07-15 | 2005-02-10 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | 生化学研究用器具 |
| JP2006204232A (ja) * | 2005-01-31 | 2006-08-10 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | 細胞培養容器の製造方法および細胞培養容器 |
| WO2007046450A1 (ja) | 2005-10-18 | 2007-04-26 | Fujimori Kogyo Co., Ltd. | 血栓観測装置および血栓観測方法 |
| WO2009069656A1 (ja) | 2007-11-26 | 2009-06-04 | Fujimori Kogyo Co., Ltd. | マイクロチップおよび血液観測装置 |
| JP2011041552A (ja) * | 2009-08-24 | 2011-03-03 | Asahi Glass Co Ltd | リン酸カルシウムの沈着を抑制したコラーゲンビトリゲル |
| WO2011099569A1 (ja) | 2010-02-10 | 2011-08-18 | 藤森工業株式会社 | 血小板検査用マイクロチップ及びそれを用いた血小板検査装置 |
| JP2015508696A (ja) * | 2012-02-29 | 2015-03-23 | コラーゲン マトリックス インコーポレイテッドＣｏｌｌａｇｅｎ Ｍａｔｒｉｘ，Ｉｎｃ． | コラーゲン被覆組織ベース膜 |
| US11149252B2 (en) | 2016-01-29 | 2021-10-19 | National Cerebral And Cardiovascular Center | Cell mass, cell structure, and three-dimensional tissue body |
| WO2022114129A1 (ja) | 2020-11-27 | 2022-06-02 | 藤森工業株式会社 | 血液凝固検査用マイクロチップの製造方法 |
| US11697797B2 (en) | 2016-01-29 | 2023-07-11 | National Cerebral And Cardiovascular Center | Manufacturing method of a cell structure |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63198980A (ja) * | 1987-02-13 | 1988-08-17 | Sumitomo Electric Ind Ltd | 細胞培養用基材 |
-
1992
- 1992-03-18 JP JP6236992A patent/JPH05260950A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63198980A (ja) * | 1987-02-13 | 1988-08-17 | Sumitomo Electric Ind Ltd | 細胞培養用基材 |
Cited By (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002142751A (ja) * | 2000-11-13 | 2002-05-21 | Asahi Techno Glass Corp | コラーゲンコート細胞培養容器及び培養部材 |
| WO2003035126A1 (fr) * | 2001-10-09 | 2003-05-01 | Techno Network Shikoku Co., Ltd. | Procede de production de materiau biologique, medicament, aliment, instrument medical, instrument de culture cellulaire et materiau a induction tissulaire |
| JP2005034060A (ja) * | 2003-07-15 | 2005-02-10 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | 生化学研究用器具 |
| JP2006204232A (ja) * | 2005-01-31 | 2006-08-10 | Sumitomo Bakelite Co Ltd | 細胞培養容器の製造方法および細胞培養容器 |
| US8372342B2 (en) | 2005-10-18 | 2013-02-12 | Fujimori Kogyo Co., Ltd. | Apparatus for monitoring thrombus formation and method of monitoring thrombus formation |
| WO2007046450A1 (ja) | 2005-10-18 | 2007-04-26 | Fujimori Kogyo Co., Ltd. | 血栓観測装置および血栓観測方法 |
| US9039972B2 (en) | 2005-10-18 | 2015-05-26 | Fujimori Kogyo Co., Ltd. | Apparatus for monitoring thrombus formation |
| US9182416B2 (en) | 2005-10-18 | 2015-11-10 | Fujimori Kogyo Co., Ltd. | Method for monitoring thrombus formation |
| WO2009069656A1 (ja) | 2007-11-26 | 2009-06-04 | Fujimori Kogyo Co., Ltd. | マイクロチップおよび血液観測装置 |
| JP2011041552A (ja) * | 2009-08-24 | 2011-03-03 | Asahi Glass Co Ltd | リン酸カルシウムの沈着を抑制したコラーゲンビトリゲル |
| WO2011099569A1 (ja) | 2010-02-10 | 2011-08-18 | 藤森工業株式会社 | 血小板検査用マイクロチップ及びそれを用いた血小板検査装置 |
| JP2015508696A (ja) * | 2012-02-29 | 2015-03-23 | コラーゲン マトリックス インコーポレイテッドＣｏｌｌａｇｅｎ Ｍａｔｒｉｘ，Ｉｎｃ． | コラーゲン被覆組織ベース膜 |
| US10071184B2 (en) | 2012-02-29 | 2018-09-11 | Collagen Matrix, Inc. | Collagen-coated tissue-based membranes |
| US10279077B2 (en) | 2012-02-29 | 2019-05-07 | Collagen Matrix, Inc. | Collagen-coated tissue-based membranes |
| US11149252B2 (en) | 2016-01-29 | 2021-10-19 | National Cerebral And Cardiovascular Center | Cell mass, cell structure, and three-dimensional tissue body |
| US11697797B2 (en) | 2016-01-29 | 2023-07-11 | National Cerebral And Cardiovascular Center | Manufacturing method of a cell structure |
| WO2022114129A1 (ja) | 2020-11-27 | 2022-06-02 | 藤森工業株式会社 | 血液凝固検査用マイクロチップの製造方法 |
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