JPH05230387A - ファフィア色素の製造法 - Google Patents
ファフィア色素の製造法Info
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- JPH05230387A JPH05230387A JP7021092A JP7021092A JPH05230387A JP H05230387 A JPH05230387 A JP H05230387A JP 7021092 A JP7021092 A JP 7021092A JP 7021092 A JP7021092 A JP 7021092A JP H05230387 A JPH05230387 A JP H05230387A
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- phaffia
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 酵母菌体を特別な前処理に付することなく、
エタノール等の有機溶媒でより簡便かつ効果的に抽出で
きるファフィア色素の製造法を提供する。 【構成】 酵母菌株ファフィア・ロードザイマ（Phaffi
a rhodozyma)の培養菌体から有機溶媒でカロチノイドを
抽出してファフィア色素を抽出するにあたり、該酵母菌
株を、窒素源として天然有機窒素源と無機酸のアンモニ
ウム塩とを含む培地で培養することを特徴とするファフ
ィア色素の製造法。
エタノール等の有機溶媒でより簡便かつ効果的に抽出で
きるファフィア色素の製造法を提供する。 【構成】 酵母菌株ファフィア・ロードザイマ（Phaffi
a rhodozyma)の培養菌体から有機溶媒でカロチノイドを
抽出してファフィア色素を抽出するにあたり、該酵母菌
株を、窒素源として天然有機窒素源と無機酸のアンモニ
ウム塩とを含む培地で培養することを特徴とするファフ
ィア色素の製造法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、赤色系天然着色料とし
て有用なファフィア色素の製造法に関する。ファフィア
色素は酵母ファフィア・ロードザイマ培養菌体から有機
溶媒で抽出して得られる色素であり、その主成分はカロ
チノイド系のアスタキサンチンである。
て有用なファフィア色素の製造法に関する。ファフィア
色素は酵母ファフィア・ロードザイマ培養菌体から有機
溶媒で抽出して得られる色素であり、その主成分はカロ
チノイド系のアスタキサンチンである。
【０００２】
【従来の技術】ファフィア・ロードザイマ酵母は、アス
タキサンチンを主成分とするカロチノイドを菌体内部に
蓄積する。この酵母菌体から直接エタノール等の有機溶
媒でカロチノイドを抽出してファフィア色素を製造する
方法は、その抽出効率が悪いため実用化に至っていな
い。このため、ファフィア色素の製造に際しては、エタ
ノール等の有機溶媒による抽出効率を高めることを目的
として、菌体を物理的手法あるいは酵素による生物的手
法により前処理する必要があった。
タキサンチンを主成分とするカロチノイドを菌体内部に
蓄積する。この酵母菌体から直接エタノール等の有機溶
媒でカロチノイドを抽出してファフィア色素を製造する
方法は、その抽出効率が悪いため実用化に至っていな
い。このため、ファフィア色素の製造に際しては、エタ
ノール等の有機溶媒による抽出効率を高めることを目的
として、菌体を物理的手法あるいは酵素による生物的手
法により前処理する必要があった。
【０００３】物理的手法としては、例えばガラスビーズ
による磨砕、フレンチプレスによる加圧磨砕、超音波破
砕等がある。また酵素処理法としては、リゾチーム等の
細胞壁を溶解できる酵素を常法により菌体に接触させて
行う方法がある。しかしこれらの方法はいずれも操作が
煩雑であるため、ファフィア色素の経済的な製造法とは
言いがたく、そのうえ細胞破壊物をも抽出の対象とする
ため、核酸等の不純物が多いという欠点を有していた。
による磨砕、フレンチプレスによる加圧磨砕、超音波破
砕等がある。また酵素処理法としては、リゾチーム等の
細胞壁を溶解できる酵素を常法により菌体に接触させて
行う方法がある。しかしこれらの方法はいずれも操作が
煩雑であるため、ファフィア色素の経済的な製造法とは
言いがたく、そのうえ細胞破壊物をも抽出の対象とする
ため、核酸等の不純物が多いという欠点を有していた。
【０００４】本発明は、酵母菌体を特別な前処理に付す
ることなく、エタノール等の有機溶媒でより簡便かつ効
果的に抽出できるファフィア色素の製造法の提供を目的
とする。
ることなく、エタノール等の有機溶媒でより簡便かつ効
果的に抽出できるファフィア色素の製造法の提供を目的
とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、酵母菌株ファ
フィア・ロードザイマ（Phaffia rhodozyma)の培養菌体
から有機溶媒でカロチノイドを抽出してファフィア色素
を抽出するにあたり、該酵母菌株を、窒素源として天然
有機窒素源と無機酸のアンモニウム塩とを含む培地で培
養することを特徴とするファフィア色素の製造法を提供
する。
フィア・ロードザイマ（Phaffia rhodozyma)の培養菌体
から有機溶媒でカロチノイドを抽出してファフィア色素
を抽出するにあたり、該酵母菌株を、窒素源として天然
有機窒素源と無機酸のアンモニウム塩とを含む培地で培
養することを特徴とするファフィア色素の製造法を提供
する。
【０００６】本発明者は、上記の課題を解決すべく鋭意
研究に努めた結果、ファフィア・ロードザイマ酵母菌体
からのエタノール等の有機溶媒によるカロイド抽出効率
が、該酵母菌株を培養するときに用いる培地の成分によ
り異なることを見いだした。ファフィア・ロードザイマ
を培養する培地の成分については従来、主色素のアスタ
キサンチン生産量の向上を目的として主に炭素源につい
て検討されてきた。例えば、バイオテクノロジー・レタ
ーズ（Biotechnology Letters)１０巻６０９頁、１９８
８年には、グルコースよりも糖蜜を含む培地で培養する
方がアスタキサンチン生産量が高くなることが報告され
ている。ジャーナル・オブ・ゼネラル・ミクロバイオロ
ジー（Journal of General Microbiology)１１５巻１７
３頁、１９７９年には炭素源としてセロビオースがアス
タキサンチン生産に有効なことが報告されている。
研究に努めた結果、ファフィア・ロードザイマ酵母菌体
からのエタノール等の有機溶媒によるカロイド抽出効率
が、該酵母菌株を培養するときに用いる培地の成分によ
り異なることを見いだした。ファフィア・ロードザイマ
を培養する培地の成分については従来、主色素のアスタ
キサンチン生産量の向上を目的として主に炭素源につい
て検討されてきた。例えば、バイオテクノロジー・レタ
ーズ（Biotechnology Letters)１０巻６０９頁、１９８
８年には、グルコースよりも糖蜜を含む培地で培養する
方がアスタキサンチン生産量が高くなることが報告され
ている。ジャーナル・オブ・ゼネラル・ミクロバイオロ
ジー（Journal of General Microbiology)１１５巻１７
３頁、１９７９年には炭素源としてセロビオースがアス
タキサンチン生産に有効なことが報告されている。
【０００７】一方窒素源としては、硫酸アンモニウム、
リン酸アンモニウム等の無機酸のアンモニウム塩（特表
平２−５０４１０１）、あるいは酵母エキス、麦芽エキ
ス、カゼイン酵素加水分解物等の天然有機窒素源（アプ
ライド・アンド・エンバイロメンタル・ミクロバイオロ
ジ−（Applied and Enviromental Miclobiology)５５巻
１１６頁、１９８９年）をそれぞれ単独に添加した例が
報告されている。しかしアスタキサンチン生産に有効な
窒素源については明確な結果は得られていない。まして
酵母菌体からのエタノール等の有機溶媒によるカロチノ
イドの抽出効率が、酵母を培養するときに用いる培地中
の窒素源の組合わせにより変化することについては、従
来全く知られていなかった。
リン酸アンモニウム等の無機酸のアンモニウム塩（特表
平２−５０４１０１）、あるいは酵母エキス、麦芽エキ
ス、カゼイン酵素加水分解物等の天然有機窒素源（アプ
ライド・アンド・エンバイロメンタル・ミクロバイオロ
ジ−（Applied and Enviromental Miclobiology)５５巻
１１６頁、１９８９年）をそれぞれ単独に添加した例が
報告されている。しかしアスタキサンチン生産に有効な
窒素源については明確な結果は得られていない。まして
酵母菌体からのエタノール等の有機溶媒によるカロチノ
イドの抽出効率が、酵母を培養するときに用いる培地中
の窒素源の組合わせにより変化することについては、従
来全く知られていなかった。
【０００８】本発明者は、ファフィア・ロードザイマの
培養において、無機酸のアンモニウム塩よりも天然有機
窒素源の方が酵母の成育や、培養液あたりのアスタキサ
ンチン生産に有効であることを経験していた。しかしな
がら、天然有機窒素源だけを含む培地で培養した酵母菌
体からのカロチノイドの抽出効率は、無機酸のアンモニ
ウム塩を窒素源としたときと同様に低いものであった。
一方、天然有機窒素源と無機酸のアンモニウム塩とを窒
素源として併用したところ、培養菌体からの抽出効率が
著しく向上するという驚くべき事実を見いだし、本発明
を完成するに至った。
培養において、無機酸のアンモニウム塩よりも天然有機
窒素源の方が酵母の成育や、培養液あたりのアスタキサ
ンチン生産に有効であることを経験していた。しかしな
がら、天然有機窒素源だけを含む培地で培養した酵母菌
体からのカロチノイドの抽出効率は、無機酸のアンモニ
ウム塩を窒素源としたときと同様に低いものであった。
一方、天然有機窒素源と無機酸のアンモニウム塩とを窒
素源として併用したところ、培養菌体からの抽出効率が
著しく向上するという驚くべき事実を見いだし、本発明
を完成するに至った。
【０００９】本発明に使用されるファフィア・ロードザ
イマ菌株としては、アスタキサンチンを主成分とするカ
ロチノイド系成分を生産するものであればいずれでもよ
く、例えばファフィア・ロードザイマＡＴＣＣ２４２０
２，ＡＴＣＣ２４２０３、ＡＴＣＣ２４２３０等の菌株
あるいはこれらの菌株から誘導されたアスタキサンチン
生産性向上株が挙げられる。
イマ菌株としては、アスタキサンチンを主成分とするカ
ロチノイド系成分を生産するものであればいずれでもよ
く、例えばファフィア・ロードザイマＡＴＣＣ２４２０
２，ＡＴＣＣ２４２０３、ＡＴＣＣ２４２３０等の菌株
あるいはこれらの菌株から誘導されたアスタキサンチン
生産性向上株が挙げられる。
【００１０】本発明で使用される天然有機窒素源として
は、通常の培養に用いられるものであればいずれでもよ
く、例えば脱脂大豆、脱脂とうもろこし、グルテンミー
ル、綿実粕、魚粉、乾燥酵母、カゼイン、肉エキス、酵
母エキス、麦芽エキス、コーンスティープリカー、大豆
粉、あるいはカゼインの酸または酵素加水分解物等が挙
げられる。好適には、脱脂大豆、脱脂とうもろこし、カ
ゼイン加水分解物、肉エキスが挙げられる。これらの天
然窒素源の培地中濃度は、０.３〜１０重量％の範囲が
適当で、さらに好適には０.５〜３重量％の範囲であ
る。
は、通常の培養に用いられるものであればいずれでもよ
く、例えば脱脂大豆、脱脂とうもろこし、グルテンミー
ル、綿実粕、魚粉、乾燥酵母、カゼイン、肉エキス、酵
母エキス、麦芽エキス、コーンスティープリカー、大豆
粉、あるいはカゼインの酸または酵素加水分解物等が挙
げられる。好適には、脱脂大豆、脱脂とうもろこし、カ
ゼイン加水分解物、肉エキスが挙げられる。これらの天
然窒素源の培地中濃度は、０.３〜１０重量％の範囲が
適当で、さらに好適には０.５〜３重量％の範囲であ
る。
【００１１】天然有機窒素源と併用される無機酸のアン
モニウム塩としては、通常培養に用いられるものであれ
ばいずれでもよく、例えば塩化アンモニウム、硫酸アン
モニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、臭
化アンモニウム、ヨウ化アンモニウム、亜硫酸アンモニ
ウム等が挙げられる。好適には、塩化アンモニウム、硫
酸アンモニウム、硝酸アンモニウムが挙げられる。無機
酸のアンモニウム塩の培地中濃度は０.０５〜５重量％
の範囲がよく、好適には０.２５〜１.５重量％である。
モニウム塩としては、通常培養に用いられるものであれ
ばいずれでもよく、例えば塩化アンモニウム、硫酸アン
モニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、臭
化アンモニウム、ヨウ化アンモニウム、亜硫酸アンモニ
ウム等が挙げられる。好適には、塩化アンモニウム、硫
酸アンモニウム、硝酸アンモニウムが挙げられる。無機
酸のアンモニウム塩の培地中濃度は０.０５〜５重量％
の範囲がよく、好適には０.２５〜１.５重量％である。
【００１２】天然有機窒素源と無機酸のアンモニウム塩
との培地への添加比は、１：０.１〜１：５が適当で、
さらに好適には１：０.２〜１：２である。
との培地への添加比は、１：０.１〜１：５が適当で、
さらに好適には１：０.２〜１：２である。
【００１３】窒素源以外の培地成分については特に限定
されることはなく、通常微生物の培養に用いられるもの
であればいずれでもよい。例えば炭素源としては上記酵
母の利用可能なものであれば、いずれも使用できる。具
体的には、グルコース、フルクトース、シュクロース、
デキストリン等の糖類、グリセロール、ソルビトール等
の糖アルコール、フマル酸、クエン酸等の有機酸等であ
る。これらの炭素源の培地中濃度は、通常１〜２０重量
％が好ましい。
されることはなく、通常微生物の培養に用いられるもの
であればいずれでもよい。例えば炭素源としては上記酵
母の利用可能なものであれば、いずれも使用できる。具
体的には、グルコース、フルクトース、シュクロース、
デキストリン等の糖類、グリセロール、ソルビトール等
の糖アルコール、フマル酸、クエン酸等の有機酸等であ
る。これらの炭素源の培地中濃度は、通常１〜２０重量
％が好ましい。
【００１４】無機塩類としては、例えばリン酸カリウ
ム、リン酸ナトリウム等のリン酸アルカリ金属、塩化カ
リウム、塩化ナトリウム等の塩化アルカリ金属、硫酸マ
グネシウム、硫酸第一鉄等の硫酸金属塩等が使用され
る。無機塩類の培地中濃度は０.００１〜１重量％が好
ましい。
ム、リン酸ナトリウム等のリン酸アルカリ金属、塩化カ
リウム、塩化ナトリウム等の塩化アルカリ金属、硫酸マ
グネシウム、硫酸第一鉄等の硫酸金属塩等が使用され
る。無機塩類の培地中濃度は０.００１〜１重量％が好
ましい。
【００１５】ビタミン・核酸等の栄養素を補うため、酵
母エキスを培地中に０.０１〜０.２重量％程度添加する
のが菌体収量の面で好ましい。ファフィア・ロードザイ
マの培養は、１５〜２８℃、好ましくは２０〜２４℃、
ｐＨ約３〜８、好ましくはｐＨ３.５〜５.５の好気条件
下で実施すればよい。
母エキスを培地中に０.０１〜０.２重量％程度添加する
のが菌体収量の面で好ましい。ファフィア・ロードザイ
マの培養は、１５〜２８℃、好ましくは２０〜２４℃、
ｐＨ約３〜８、好ましくはｐＨ３.５〜５.５の好気条件
下で実施すればよい。
【００１６】
【実施例】以下本発明を実施例によりさらに詳細に説明
する。以下の各例において、％は特にことわりのない限
り重量％を意味する。 実施例１ 基本培地としてグルコース１２％、リン酸カリウム０.
２％、硫酸マグネシウム０.０５％、塩化カルシウム０.
０１％および酵母エキス０.０５％を含むマックイルイ
ン緩衝液（ｐＨ４）を用い、これに表１に記載した天然
有機窒素源（１％）と無機酸のアンモニウム塩（０.５
％）とを添加したものを生産培地とした。また、対照の
培地には無機酸のアンモニウム塩を添加せずに天然有機
窒素源（１.５％）だけを添加した。
する。以下の各例において、％は特にことわりのない限
り重量％を意味する。 実施例１ 基本培地としてグルコース１２％、リン酸カリウム０.
２％、硫酸マグネシウム０.０５％、塩化カルシウム０.
０１％および酵母エキス０.０５％を含むマックイルイ
ン緩衝液（ｐＨ４）を用い、これに表１に記載した天然
有機窒素源（１％）と無機酸のアンモニウム塩（０.５
％）とを添加したものを生産培地とした。また、対照の
培地には無機酸のアンモニウム塩を添加せずに天然有機
窒素源（１.５％）だけを添加した。
【００１７】ファフィア・ロードザイマＡＴＣＣ２４２
０２をＹＭ寒天培地（ペプトン０.５％、酵母エキス０.
３％、麦芽エキス０.３％、グルコース１％、ｐＨ５.
６）で培養して得られた前培養液０.５ミリリットルを
２５ミリリットルの上記生産培地を含む２５０ミリリッ
トル容量の振盪フラスコに移し、２２℃で５日間培養し
た。
０２をＹＭ寒天培地（ペプトン０.５％、酵母エキス０.
３％、麦芽エキス０.３％、グルコース１％、ｐＨ５.
６）で培養して得られた前培養液０.５ミリリットルを
２５ミリリットルの上記生産培地を含む２５０ミリリッ
トル容量の振盪フラスコに移し、２２℃で５日間培養し
た。
【００１８】各々のフラスコから培養液５ミリリットル
づつを２本の遠心分離用の試験管に分注し、遠心分離操
作で酵母菌体を集め、蒸留水で洗浄した。一方の菌体
は、細胞壁溶解酵素である明治メイセラーゼＰ−４０を
１％濃度で含む５ミリリットルの０.１モル酢酸ナトリ
ウム−塩酸緩衝液（ｐＨ３）で再懸濁した。両方の酵母
菌体懸濁液を２８℃で１６時間培養した後、再度、遠心
分離操作で菌体を集め、５ミリリットルのエタノールに
よりカロチノイドを抽出した。
づつを２本の遠心分離用の試験管に分注し、遠心分離操
作で酵母菌体を集め、蒸留水で洗浄した。一方の菌体
は、細胞壁溶解酵素である明治メイセラーゼＰ−４０を
１％濃度で含む５ミリリットルの０.１モル酢酸ナトリ
ウム−塩酸緩衝液（ｐＨ３）で再懸濁した。両方の酵母
菌体懸濁液を２８℃で１６時間培養した後、再度、遠心
分離操作で菌体を集め、５ミリリットルのエタノールに
よりカロチノイドを抽出した。
【００１９】総カロチノイド量は、４７８ｎｍの吸光度
により測定した。またカロチノイド中のアスタキサンチ
ンの割合は、ＨＰＬＣを用いて測定した。 ＨＰＬＣの測定条件： カラム；ＹＭＣ Ａ３１２ ＯＤＳ（４.６ｍｍ×１５
０ｍｍ） 移動相；ＣＨ3ＣＮ／ＣＨ3ＯＨ／Ｈ2Ｏ＝７５／１５／
１０ 流速；２ミリリットル／分 カラム温度；４０℃ 検出；Ａ474
により測定した。またカロチノイド中のアスタキサンチ
ンの割合は、ＨＰＬＣを用いて測定した。 ＨＰＬＣの測定条件： カラム；ＹＭＣ Ａ３１２ ＯＤＳ（４.６ｍｍ×１５
０ｍｍ） 移動相；ＣＨ3ＣＮ／ＣＨ3ＯＨ／Ｈ2Ｏ＝７５／１５／
１０ 流速；２ミリリットル／分 カラム温度；４０℃ 検出；Ａ474
【００２０】表１に溶菌酵素処理の有無によるカロチノ
イドの抽出効率を示した。表１から窒素源として天然有
機窒素源と無機酸のアンモニウム塩とを併用した場合に
のみ、酵母菌体を溶菌酵素で処理しなくてもエタノール
によりカロチノイドが効率的に抽出されることが明らか
である。なおカロチノイド中のアスタキサンチン含量
は、全ての試験区で７５〜８５％であった。
イドの抽出効率を示した。表１から窒素源として天然有
機窒素源と無機酸のアンモニウム塩とを併用した場合に
のみ、酵母菌体を溶菌酵素で処理しなくてもエタノール
によりカロチノイドが効率的に抽出されることが明らか
である。なおカロチノイド中のアスタキサンチン含量
は、全ての試験区で７５〜８５％であった。
【００２１】 表１ 生産培地の窒素源 カロチノイド アスタキサンチン天然有機窒素源 無機酸のアンモニウム塩 抽出効率（％） 含量（％） エスサンミート 1.5% 無添加 １０.９ ８４.０エスサンミート 1.0% 硫酸アンモニウム0.5% ９３.７ ７６.１エスサンミート 1.0% 硫酸アンモニウム0.5% ７９.９ ７６.７エスサンミート 1.0% 硝酸アンモニウム0.5% ７９.５ ８５.０ファルマメテ゛ィア 1.5% 無添加 ３３.６ ８３.６ファルマメテ゛ィア 1.0% 硫酸アンモニウム0.5% ８２.８ ７７.０カサ゛ミノ 酸 1.5% 無添加 ２５.９ ７９.３カサ゛ミノ 酸 1.0% 硫酸アンモニウム0.5% ５７.６ ８２.１ヘ゜フ゜トン 1.5% 無添加 ２７.２ ８１.３ヘ゜フ゜トン 1.0% 硫酸アンモニウム0.5% ７４.６ ８０.９ 肉エキス 1.5% 無添加 ２９.７ ７８.３ 肉エキス 1.0% 硫酸アンモニウム0.5% ８５.４ ７９.４ 注： カロチノイド抽出効率＝Ａ／Ｂ×１００（％） Ａ；溶解酵素で処理しない菌体から抽出された総カロチ
ノイド量 Ｂ：溶解酵素で処理した菌体から抽出された総カロチノ
イド量 アスタキサンチン含量＝総カロチノイドに対するアスタ
キサンチンの割合（％）
ノイド量 Ｂ：溶解酵素で処理した菌体から抽出された総カロチノ
イド量 アスタキサンチン含量＝総カロチノイドに対するアスタ
キサンチンの割合（％）
【００２２】実施例２ 実施例１において、生産培地の天然窒素源と無機酸のア
ンモニウム塩とを、表２の配合で変化させた他は実施例
１と同様に操作して、カロチノイドの抽出効率を測定し
た。
ンモニウム塩とを、表２の配合で変化させた他は実施例
１と同様に操作して、カロチノイドの抽出効率を測定し
た。
【００２３】 表２ 生産培地の窒素源 カロチノイド エスサンミート 硫酸アンモニウム 抽出効率（％） １.５ ０ １０.８ １.２５ ０.２５ ７９.０ １.０ ０.５ ９４.２ ０.７５ ０.７５ ８３.５ ０.５ １.０ ７１.３ ０.２５ １.２５ ６２.４ ０ １.５ ４６.９
【００２４】
【発明の効果】本発明によれば、ファフィア色素を効率
よく、かつ安価に製造できるファフィア色素の製造法が
提供される。
よく、かつ安価に製造できるファフィア色素の製造法が
提供される。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成４年５月６日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１６】
【実施例】以下本発明を実施例によりさらに詳細に説明
する。以下の各例において、％は特にことわりのない限
り重量％を意味する。 実施例１ 基本培地としてグルコース１２％、リン酸カリウム０．
２％、硫酸マグネシウム０．０５％、塩化カルシウム
０．０１％および酵母エキス０．０５％を含むマックイ
ルベイン緩衝液（ｐＨ４）を用い、これに表１に記載し
た天然有機窒素源（１％）と無機酸のアンモニウム塩
（０．５％）とを添加したものを生産培地とした。ま
た、対照の培地には無機酸のアンモニウム塩を添加せず
に天然有機窒素源（１．５％）だけを添加した。
する。以下の各例において、％は特にことわりのない限
り重量％を意味する。 実施例１ 基本培地としてグルコース１２％、リン酸カリウム０．
２％、硫酸マグネシウム０．０５％、塩化カルシウム
０．０１％および酵母エキス０．０５％を含むマックイ
ルベイン緩衝液（ｐＨ４）を用い、これに表１に記載し
た天然有機窒素源（１％）と無機酸のアンモニウム塩
（０．５％）とを添加したものを生産培地とした。ま
た、対照の培地には無機酸のアンモニウム塩を添加せず
に天然有機窒素源（１．５％）だけを添加した。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１８】各々のフラスコから培養液５ミリリットル
づつを２本の遠心分離用の試験管に分注し、遠心分離操
作で酵母菌体を集め、蒸留水で洗浄した。一方の菌体
は、細胞壁溶解酵素である明治メイセラーゼＰ−４０を
１％濃度で含む５ミリリットルの０．１モル酢酸ナトリ
ウム−塩酸緩衝液（ｐＨ３）で再懸濁した。他方はメイ
ラーゼを含まない緩衝液で懸濁した。両方の酵母菌体懸
濁液を２８℃で１６時間培養した後、再度、遠心分離操
作で菌体を集め、５ミリリットルのエタノールによりカ
ロチノイドを抽出した。
づつを２本の遠心分離用の試験管に分注し、遠心分離操
作で酵母菌体を集め、蒸留水で洗浄した。一方の菌体
は、細胞壁溶解酵素である明治メイセラーゼＰ−４０を
１％濃度で含む５ミリリットルの０．１モル酢酸ナトリ
ウム−塩酸緩衝液（ｐＨ３）で再懸濁した。他方はメイ
ラーゼを含まない緩衝液で懸濁した。両方の酵母菌体懸
濁液を２８℃で１６時間培養した後、再度、遠心分離操
作で菌体を集め、５ミリリットルのエタノールによりカ
ロチノイドを抽出した。
Claims (1)
- 【請求項１】 酵母菌株ファフィア・ロードザイマ（Ph
affia rhodozyma)の培養菌体から有機溶媒でカロチノイ
ドを抽出してファフィア色素を抽出するにあたり、該酵
母菌株を、窒素源として天然有機窒素源と無機酸のアン
モニウム塩とを含む培地で培養することを特徴とするフ
ァフィア色素の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7021092A JPH05230387A (ja) | 1992-02-20 | 1992-02-20 | ファフィア色素の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7021092A JPH05230387A (ja) | 1992-02-20 | 1992-02-20 | ファフィア色素の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05230387A true JPH05230387A (ja) | 1993-09-07 |
Family
ID=13424937
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7021092A Pending JPH05230387A (ja) | 1992-02-20 | 1992-02-20 | ファフィア色素の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05230387A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007319015A (ja) * | 2006-05-30 | 2007-12-13 | Asahi Kasei Pharma Kk | カロテノイドの製造方法 |
| KR100923105B1 (ko) * | 2007-10-19 | 2009-10-22 | 한국생명공학연구원 | 아스타잔틴 추출이 용이한 파피아 로도지마 돌연변이주 및그 추출법 |
| US8097761B2 (en) | 2006-03-28 | 2012-01-17 | Jx Nippon Oil & Energy Corporation | Process for production of carotenoid |
| CN104195208A (zh) * | 2014-09-02 | 2014-12-10 | 青岛大学 | 用于噬夏孢欧文氏菌发酵玉米黄素二葡萄糖苷的培养基 |
| US10701957B2 (en) | 2007-08-29 | 2020-07-07 | Jxtg Nippon Oil & Energy Corporation | Method for production of carotenoid |
-
1992
- 1992-02-20 JP JP7021092A patent/JPH05230387A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8097761B2 (en) | 2006-03-28 | 2012-01-17 | Jx Nippon Oil & Energy Corporation | Process for production of carotenoid |
| JP2007319015A (ja) * | 2006-05-30 | 2007-12-13 | Asahi Kasei Pharma Kk | カロテノイドの製造方法 |
| US10701957B2 (en) | 2007-08-29 | 2020-07-07 | Jxtg Nippon Oil & Energy Corporation | Method for production of carotenoid |
| KR100923105B1 (ko) * | 2007-10-19 | 2009-10-22 | 한국생명공학연구원 | 아스타잔틴 추출이 용이한 파피아 로도지마 돌연변이주 및그 추출법 |
| CN104195208A (zh) * | 2014-09-02 | 2014-12-10 | 青岛大学 | 用于噬夏孢欧文氏菌发酵玉米黄素二葡萄糖苷的培养基 |
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