JPH0517888B2 - - Google Patents
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- JPH0517888B2 JPH0517888B2 JP59199412A JP19941284A JPH0517888B2 JP H0517888 B2 JPH0517888 B2 JP H0517888B2 JP 59199412 A JP59199412 A JP 59199412A JP 19941284 A JP19941284 A JP 19941284A JP H0517888 B2 JPH0517888 B2 JP H0517888B2
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
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Description
(1) 産業上の利用分野
本発明は海産クロレラから得られる免疫賦活化
作用成分に係る。 (2) 従来の技術 これまでに多数の免疫賦活化作用物質が報告さ
れており、その主要なものは、細菌類、菌体成分
キノコ等に含まれるものである。淡水産クロレラ
から抽出される多糖類を含む画分にも同様な効果
が明らかにされている(特開昭58−15920号公
報)。また海産生物である牡蛎においても免疫賦
活化作用物質の存在が確認されている(Proc.
Symp.WAKAN−YAKU15(1982)192−198)。
これに対し海産微生物等の薬理効果は現在までに
あまり検討されていない。 (3) 発明が解決しようとする問題点 本発明者らはこれらの海産微生物中にもいくつ
かの免疫賦活化作用物質があるのではないかと考
え研究を行つた結果、海産クロレラの多糖類成分
が淡水産クロレラのそれよりも強い上記作用を持
つことを見出し、本発明を完成した。 (4) 問題を解決するための手段および発明の効果 即ち本発明は海産クロレラに含有される多糖類
をゲル濾過して得られる高分子画分を有効成分と
する免疫賦活化作用成分である。 本発明でいう海産クロレラとは、とくに種属等
を限定するものではないが、通常はクロレラ・ミ
ニユテイシマ(Chlorella minutissima)等に分
類されるものをいう。上記の免疫賦活化作用成分
は、例えば次のようにして取得できるが、本発明
は、これに限定されるものではない。 海産クロレラ粉末に5〜10倍量の水を加え、80
〜100℃に30分間加熱し、濾別することにより、
熱水抽出物を得る。このものを凍結乾燥し粉末と
した後エタノールを添加して1時間還流・洗浄す
る。濾過後、沈でん物を集め、少量の水にとかし
セフアデツクスG−50(フアルマシア社商品名)
等によるゲル濾過にかけ、低分子物質の除去を行
う。得られた高分子画分のフラクシヨンを集め凍
結乾燥し、試料を得る。 免疫賦活作用の判定方法としては、リンパ球分
裂促進活性、抗体産生増強活性、カーボンクリア
ランス能亢進活性の測定等があるが、本発明者ら
はマウス脾臓における抗体産生増強活性を指標に
上記試料の免疫賦活化作用を検討したところ効果
が認められたので、さらに抗腫瘍効果についても
in vivoの系で検討を行なつた。 腫瘍増殖抑制効果を検討するに当たり、様々な
腫瘍細胞に対する増殖抑制作用の検討が現在まで
に行なわれて来たがここではマウス腫瘍
Sarcoma180における抗腫瘍活性を検討したとこ
ろ抑制効果が認められた。 以上の点より海産クロレラから得られた前記の
成分には免疫賦活化作用が認められた。これを用
いることで抗腫瘍効果やかぜなどのウイルス感染
の防御が期待できることが示された。 実施例 1 海産クロレラ(Chlorella minutissima)およ
び淡水産クロレラ(Chlorella regularis)の粉末
各々1Kgに10の水を加え混合し、これを80〜
100℃で30分間熱処理した後濾別により菌体を除
去した。得られた上澄液を凍結乾燥し、粉末とし
た後、1の95%エタノールと混合し、2時間還
流することにより不純物の除去を行つた。次にエ
タノールを除去した後、残渣を少量の水にとかし
た。この溶液の一部(固形分1g)を、セフアデ
ツクスG−5(あらかじめ水で良く洗浄した後カ
ラムに詰めたもの)のカラム(φ2.0cm×50cm)に
かけ、ゲル濾過を行つた。展開溶媒は水又は
0.01Mのリン酸緩衝液とし、得られた各フラクシ
ヨンはその一部を取りエタノール沈殿物含量を調
べた。その結果エタノールの沈澱物の多いフラク
シヨンを集めることにより、低分子物質の大部分
が除去された。このフラクシヨン溶液を凍結乾燥
することにより多糖類の高分子画分を主成分とす
る物質を得た(海産クロレラからのものを試料
A、淡水産クロレラからのものを試料Bとする)。 次に此の乾燥粉末を用い、抗体産生能の促進活
性を調べた。 ICRマウス(6週令 雄)を用い1匹当り1×
108個の羊赤血球を静注し免疫した。同時に腹腔
に以下に示す量の試料AまたはBを投与し、4日
後マウス脾リンパ球の羊赤血球に対する抗体産生
能(PFC活性)を測定した。結果を表−1に示
す。 このように、Aの30mg/Kg以上の投与において
免疫賦活化現象の一つの指標となる抗体産生能の
上昇が認められた。またBとの比較でも明らかに
Aの作用の強さが認められた。 実施例 2 実施例1の試料AおよびBを用いて次のような
in vivoの抗腫瘍性試験を行つた。 腹水型で継代培養している腫瘍細胞
Sarcoma180を生理的食塩水に懸濁し、ICRマウ
スに一匹あたり5×106個の細胞をソケイ部皮内
に移植した。移植と同時に腹腔に試料A、Bを以
下に示す量で10日間連続投与を行う。腫瘍細胞移
植の4週間後マウスより腫瘍を取り出しその重量
を測定した。結果は表−2の通り。 以上の結果よりAにBより強い腫瘍増殖抑制効
果が認められた。
作用成分に係る。 (2) 従来の技術 これまでに多数の免疫賦活化作用物質が報告さ
れており、その主要なものは、細菌類、菌体成分
キノコ等に含まれるものである。淡水産クロレラ
から抽出される多糖類を含む画分にも同様な効果
が明らかにされている(特開昭58−15920号公
報)。また海産生物である牡蛎においても免疫賦
活化作用物質の存在が確認されている(Proc.
Symp.WAKAN−YAKU15(1982)192−198)。
これに対し海産微生物等の薬理効果は現在までに
あまり検討されていない。 (3) 発明が解決しようとする問題点 本発明者らはこれらの海産微生物中にもいくつ
かの免疫賦活化作用物質があるのではないかと考
え研究を行つた結果、海産クロレラの多糖類成分
が淡水産クロレラのそれよりも強い上記作用を持
つことを見出し、本発明を完成した。 (4) 問題を解決するための手段および発明の効果 即ち本発明は海産クロレラに含有される多糖類
をゲル濾過して得られる高分子画分を有効成分と
する免疫賦活化作用成分である。 本発明でいう海産クロレラとは、とくに種属等
を限定するものではないが、通常はクロレラ・ミ
ニユテイシマ(Chlorella minutissima)等に分
類されるものをいう。上記の免疫賦活化作用成分
は、例えば次のようにして取得できるが、本発明
は、これに限定されるものではない。 海産クロレラ粉末に5〜10倍量の水を加え、80
〜100℃に30分間加熱し、濾別することにより、
熱水抽出物を得る。このものを凍結乾燥し粉末と
した後エタノールを添加して1時間還流・洗浄す
る。濾過後、沈でん物を集め、少量の水にとかし
セフアデツクスG−50(フアルマシア社商品名)
等によるゲル濾過にかけ、低分子物質の除去を行
う。得られた高分子画分のフラクシヨンを集め凍
結乾燥し、試料を得る。 免疫賦活作用の判定方法としては、リンパ球分
裂促進活性、抗体産生増強活性、カーボンクリア
ランス能亢進活性の測定等があるが、本発明者ら
はマウス脾臓における抗体産生増強活性を指標に
上記試料の免疫賦活化作用を検討したところ効果
が認められたので、さらに抗腫瘍効果についても
in vivoの系で検討を行なつた。 腫瘍増殖抑制効果を検討するに当たり、様々な
腫瘍細胞に対する増殖抑制作用の検討が現在まで
に行なわれて来たがここではマウス腫瘍
Sarcoma180における抗腫瘍活性を検討したとこ
ろ抑制効果が認められた。 以上の点より海産クロレラから得られた前記の
成分には免疫賦活化作用が認められた。これを用
いることで抗腫瘍効果やかぜなどのウイルス感染
の防御が期待できることが示された。 実施例 1 海産クロレラ(Chlorella minutissima)およ
び淡水産クロレラ(Chlorella regularis)の粉末
各々1Kgに10の水を加え混合し、これを80〜
100℃で30分間熱処理した後濾別により菌体を除
去した。得られた上澄液を凍結乾燥し、粉末とし
た後、1の95%エタノールと混合し、2時間還
流することにより不純物の除去を行つた。次にエ
タノールを除去した後、残渣を少量の水にとかし
た。この溶液の一部(固形分1g)を、セフアデ
ツクスG−5(あらかじめ水で良く洗浄した後カ
ラムに詰めたもの)のカラム(φ2.0cm×50cm)に
かけ、ゲル濾過を行つた。展開溶媒は水又は
0.01Mのリン酸緩衝液とし、得られた各フラクシ
ヨンはその一部を取りエタノール沈殿物含量を調
べた。その結果エタノールの沈澱物の多いフラク
シヨンを集めることにより、低分子物質の大部分
が除去された。このフラクシヨン溶液を凍結乾燥
することにより多糖類の高分子画分を主成分とす
る物質を得た(海産クロレラからのものを試料
A、淡水産クロレラからのものを試料Bとする)。 次に此の乾燥粉末を用い、抗体産生能の促進活
性を調べた。 ICRマウス(6週令 雄)を用い1匹当り1×
108個の羊赤血球を静注し免疫した。同時に腹腔
に以下に示す量の試料AまたはBを投与し、4日
後マウス脾リンパ球の羊赤血球に対する抗体産生
能(PFC活性)を測定した。結果を表−1に示
す。 このように、Aの30mg/Kg以上の投与において
免疫賦活化現象の一つの指標となる抗体産生能の
上昇が認められた。またBとの比較でも明らかに
Aの作用の強さが認められた。 実施例 2 実施例1の試料AおよびBを用いて次のような
in vivoの抗腫瘍性試験を行つた。 腹水型で継代培養している腫瘍細胞
Sarcoma180を生理的食塩水に懸濁し、ICRマウ
スに一匹あたり5×106個の細胞をソケイ部皮内
に移植した。移植と同時に腹腔に試料A、Bを以
下に示す量で10日間連続投与を行う。腫瘍細胞移
植の4週間後マウスより腫瘍を取り出しその重量
を測定した。結果は表−2の通り。 以上の結果よりAにBより強い腫瘍増殖抑制効
果が認められた。
【表】
Claims (1)
- 1 海産クロレラに含有される多糖類をゲル濾過
して得られる高分子量画分を有効成分とする免疫
賦活化作用成分。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP59199412A JPS6178729A (ja) | 1984-09-26 | 1984-09-26 | 免疫賦活化作用成分 |
US06/777,169 US4831020A (en) | 1984-09-26 | 1985-09-18 | Ingredient effective for activating immunity obtained from Chlorella minutissima |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP59199412A JPS6178729A (ja) | 1984-09-26 | 1984-09-26 | 免疫賦活化作用成分 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6178729A JPS6178729A (ja) | 1986-04-22 |
JPH0517888B2 true JPH0517888B2 (ja) | 1993-03-10 |
Family
ID=16407371
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP59199412A Granted JPS6178729A (ja) | 1984-09-26 | 1984-09-26 | 免疫賦活化作用成分 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4831020A (ja) |
JP (1) | JPS6178729A (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3855525T2 (de) * | 1987-06-18 | 1997-04-10 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Verwendung eines Protein gebundenen Polysaccharid Zur Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung von AIDS. |
JPH0825894B2 (ja) * | 1987-06-18 | 1996-03-13 | 呉羽化学工業株式会社 | 抗ウイルス剤 |
US7205284B2 (en) * | 2000-07-10 | 2007-04-17 | University Of Mississippi | Potent immunostimulants from microalgae |
CA2354832C (en) | 2000-08-10 | 2002-05-14 | Ocean Nutrition Canada Ltd. | Chlorella preparations exhibiting immunomodulating properties |
JP4952273B2 (ja) * | 2007-01-31 | 2012-06-13 | 井関農機株式会社 | トラクタ |
US20110104189A1 (en) * | 2008-05-06 | 2011-05-05 | Ocean Nutrition Canada Limited | Compositions obtained from chlorella extract having immunomodulating properties |
CN116655817B (zh) * | 2023-04-25 | 2024-06-25 | 河南澳爱丝生物科技有限公司 | 一种酶解耦合深共熔溶剂提取极微小球藻多糖的方法及应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5815920A (ja) * | 1981-07-23 | 1983-01-29 | Kurorera Kogyo Kk | リンパ球増加剤 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3939279A (en) * | 1969-08-22 | 1976-02-17 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | Feed and method of aquianimals cultivation |
US4254257A (en) * | 1979-02-21 | 1981-03-03 | The Lubrizol Corporation | Amine salts of acidic microbial polysaccharides and their use in recovery of such polysaccharides |
JPS5896025A (ja) * | 1981-12-02 | 1983-06-07 | Kitasato Inst:The | 新規生理活性物質ch−1およびその製造法 |
JP3104277B2 (ja) * | 1991-04-16 | 2000-10-30 | ブラザー工業株式会社 | 画像記録方法 |
-
1984
- 1984-09-26 JP JP59199412A patent/JPS6178729A/ja active Granted
-
1985
- 1985-09-18 US US06/777,169 patent/US4831020A/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5815920A (ja) * | 1981-07-23 | 1983-01-29 | Kurorera Kogyo Kk | リンパ球増加剤 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS6178729A (ja) | 1986-04-22 |
US4831020A (en) | 1989-05-16 |
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