JPH05178759A

JPH05178759A - 免疫賦活剤・感染症治療剤・免疫賦活性食品

Info

Publication number: JPH05178759A
Application number: JP2139681A
Authority: JP
Inventors: Kunio Ando; 邦夫安藤; Tetsuo Nakamura; 徹雄中村
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1990-05-31
Filing date: 1990-05-31
Publication date: 1993-07-20

Abstract

(57)【要約】電子出願以前の出願であるので要約・選択図及び出願人の識別番号は存在しない。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、免疫賦活剤、病原微生物感染症の治療剤、予防剤、ならびに免疫賦活性食品に関する。

（従来の技術）病原微生物感染症は、かつては人類死亡原因の大半を占めていたが、その後抗生物質を含む化学療法剤の飛躍的な発展によってあたかも完全に克服されたかのような印象を与えている。しかし、現実には、病原微生物感染症は今日でもいぜんとして死亡原因の大きな割合を占める疾患である。

とりわけ、免疫能が低下した状況、すなわち、ｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄｈｏｓｔｓと称される状態にあっては、病原菌感染症は重篤化しやすく、ときには致命的でさえある。例えば典型的なｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄｈｏｓｔｓである担癌状態では直接的に癌で死亡する患者よりも、体内に常在する弱毒性病原菌（日和見感染菌）による感染症で死亡する患者の方がはるかに多いとされている。健常状態であるならば日和見感染菌は免疫系機作によって容易に排除されるので、体内に侵入し重篤な感染症をひき起こすことは極めてまれであるが、免疫能が低下するとこれを排除できなくなるためである。感染症によって死亡する癌患者がどの位の割合に達するかについては正確な統計がないが、多い場合には７〜８割、通常でも５割以上に達するとの報告が多い。担癌状態に限らず、老人、とりわけ寝たきり状態の老人が肺炎などの感染症を起すと、強力な抗生物質の大量投与が実施されるが、しかし救命することはむずかしい。

さらに、手術後、とくに腹部や胸部等の外科手術後には、消毒技術の発達や抗生物質の予防的大量投与にもかかわらず、感染症に罹患し、ときには致命的である。手術前には正常の免疫能を有する患者であっても、手術の侵襲によって免疫能が大巾に低下するのが避けられないためである。また、白血病の場合には、強力な化学療法剤を使用して白血病細胞を体内から除去しなければならないので、化学療法剤を投与する前に患者を無菌室に隔離し、病原微生物を体表面および消化管等から排除したのちに治療を開始するが、このように注意を払っても腸内細菌に起因する感染症は１００％の患者に発症することが知られている。

以上述べたｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄｈｏｓｔｓに発症する病原菌感染症は通常の健康人には影響を与えない弱毒性病原菌（日和見菌）の感染症が容易に発症すること、ひとたび感染すると重症に陥いることが多く、治療に際しても抗生物質が決定打にならないという特徴を有する。

これら病原微生物感染症が起りやすい状態を一般的には免疫能が低下している状態と称しているが、その科学的実態は必ずしも明らかではない。

一般的に言って、病原菌の侵害を阻止するうえで最も大きな役割を果すのは、好中球およびマクロファージ（単球）などの貧食細胞、および抗体＋補体であるとされている。白血病あるいは悪性腫瘍患者に化学療法剤を投与して明らかな白血病減少症を起させた場合を別として、癌患者や寝たきり老人であっても、感染防御に最も関係があるとされている血液中の「好中球＋単球」数および「抗体＋補体」数は、健常人に比して有意差が認められない場合が多い。ほとんどのｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄｈｏｓｔｓにあっても、非特異的感染防御系の能力低下は、貧食細胞の数が減少したためよりは、むしろその機能的な低下に原因が求められる。

かくて、抗生物質の大量投与療法は、病原菌感染症、特に日和見菌感染症に対する予防および治療に関して部分的には有効であるが、問題の根本的な解決にはほど遠いのが現状である。

（発明が解決しようとする課題）本発明は、病原菌感染症の予防および治療の根本的解決に資するために、患者自身の免疫機能を向上させる物質、とりわけ好中球の貧食機能を向上させる物質を提供するものである。

（課題を解決するための手段）本発明者らは多年にわたり病原菌感染症の治療を研究した結果、病原菌感染症の成立には好中球の貧食機能が重要な関わりを持つこと、ヒトを含む動物乳汁から得たラクトフェリンの経口投与が生体内における好中球の病原菌貧食能を昂進させること。好中球の病原菌貧食能を昂進させることは、病原菌感染症の治療および予防にとって非常に有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。

本発明は、ラクトフェリンを有効成分とする免疫賦活剤、ラクトフェリンを有効成分とする病原微生物感染症の治療剤または予防剤、ラクトフェリンを１５０mg／kg以上含有する免疫賦活性食品の発明であり、本発明で使用されるラクトフェリンは鉄飽和のもの、不飽和のもの、鉄を含有しないもののいずれをも含む。また、ラクトフェリンを治療剤または予防剤として使用する場合には、これを単独で投与してもよく、また抗生物質やその他の化学療法剤と併用してもよい。

ラクトフェリンは、ウシ、ヤギ、ヒツジなどの反芻動物をはじめ、ヒトを含む各種動物の乳汁に主として含まれ、これらから得ることができる。

ラクトフェリンは、２個の３価鉄イオンとキレートとして錯体を形成する性質を有する分子量７〜９万の塩基性糖蛋白質であって、化学構造上の分類からは血中に存在するトランスフェリンに近縁の鉄蛋白質である。

ラクトフェリンは、前記のように哺乳動物の乳汁に主として含まれるほか、成熟好中球の顆粒、各種分泌液、唾液、涙、気管支粘液、胆汁、腸液、などに含まれているが、その量は好中球１００万箇あたり５μｇ程度である。人体における一日当りの好中球産出量が１０^１２個であることから計算すると、ラクトフェリンは毎日５ｇ合成されていることとなり、人体にとって主要な生理活性蛋白の一つであると解される。このように生体内におけるラクトフェリンの分布が非常に広いにも拘らず、その役割は必ずしも明確ではない。

本発明者らは、当初ラクトフェリンの抗菌活性を試験管内において種々の病原菌を使用して検討した。ところが、ラクトフェリンは４０００μｇ／ ml以下の濃度で病原菌の成育を全く阻止できなかった。このような結果は、鉄を全く含まないアポラクトフェリンから１００％鉄飽和のホロラクトフェリンに至るまで全く同様であった（実験例１）。この実験結果から、ラクトフェリンは正体内においても病原微生物に対する直接的な抗菌活性は有していないと結論した。

ところが、マウスの腹腔内に種々の病原性細菌を感染させ、経口用β−ラクタム系抗生物質を投与して治療する実験系において、抗生物質とともにラクトフェリンを同時に経口併用投与すると、 β−ラクタム系抗生物質の効果が２〜１０倍も上昇するという、おどろくべき結果を見い出した。

しかも、この効力増強作用は、１種類の病原菌に特異なものではなく、大腸菌、プロテウス菌、肺炎捍菌等のグラム陰性細菌、ならびに黄色ぶどう球菌、肺炎菌等のグラム陽性細菌に対しても認められる現象であった（実施例３．４）。

つぎに、マウスの実験的感染症を用い、ラクトフェリンと種々の注射用β−ラクタム系抗生物質とを併用し、抗菌活性に及ぼす影響を検討した。

いずれの注射用抗生物質を使用した場合であっても、経口用セフェム剤の場合と同様に、実験的感染症に対するβ−ラクタム系抗生物質の有効性は２〜５倍に上昇することが確認された。

注目すべきことは、ラクトフェリンの効力増強作用は、セファロスポリン系抗生物質に止らず、アンピシリン等のペニシリン系抗生物質でも認められることであって、この現象は広くβ−ラクタム系抗生物質一般を網羅すると考えられることである。

さらに、β−ラクタム系抗生物質以外の合成抗菌剤を含む抗菌性物質とラクトフェリンとの併用効果を検討したところ、次のことが明らかになった。

すなわち、ラクトフェリンは、静菌的に作用するテトラサイクリン系抗生物質の効力を増強する。しかし、強く殺菌的に作用するアミノ配糖体抗生物質ならびにキノロン系合成抗菌剤の効力は増強しない（実施例５）。この事実は、殺菌的なアミノ配糖体抗生物質ならびにキノロン系合成抗菌剤のように、病原微生物の細胞内における濃度が一定の水準を越えると、菌が必然的に死滅する場合にはラクトフェリンは併用効果を示さないが、β−ラクタム系抗生物質およびテトラサイクリン抗生物質のようにｉｎｖｉｖｏでは病原菌を弱らせ、免疫系によって処理されやすくする作用を有するが、それ単独では病原菌を死滅させる効果を有しない抗菌物質の作用を選択的に増強することを示唆する。すなわち、ラクトフェリンは病原菌の最終的な処理と体外への除去を非特異的免疫系に依存する抗菌物質に対して相乗的作用を有し、その効力を増強することを示唆しているのである。かかる事実は、ラクトフェリンの作用機作が、病原菌に対する非特異的な処理機構に働きかけ、その処理能力を高める点にあることを意味している。

ラクトフェリンの最小有効量は０．１〜２．５ mg／kgの範囲にあり、通常は１〜５０mg／kg程度の投与が適当である。投与方法は経口でも直腸内投与その他でもよい。

ラクトフェリンの投与がこのように少量でも有効であることは、ラクトフェリンが消化管内で蛋白分解酵素の作用を受け難いこと、および腸管粘膜にはラクトフェリンが特異的に結合する部位（受容体）があり、ラクトフェリンがこれに結合することでβ−ラクタム系抗生物質の効力を増強すること、特異的な結合部位である受容体が飽和すると、ラクトフェリンの活性増強作用はピークとなり、それ以上投与しても増強効果がないことを示唆している。

ラクトフェリン投与の最適スケジュールを求めるために、病原菌攻撃の５〜０日前にわたりラクトフェリンを１日１回だけ経口投与し、感染１時間後にセファレキシンを経口投与し、前もって投与したラクトフェリンが抗菌活性にどのような影響を与えるかを検討した。その結果、ラクトフェリンを攻撃１日前までに投与した場合には、セファレキシンの効力を有意に増強するが、２日前またはそれ以前に投与した場合には補強効果が完全に失われることが判明した。このことは、ラクトフェリンがいったん腸管粘膜の受容体に結合すると、非特異的免疫系に対するその刺激効果は２４時間程度は持続するが、これより相当以上の時間が経過すれば失われることを意味する。病原菌処理の主役である好中球は半減期が６時間の著しく短命な細胞であって、同じ貧食系の細胞であるマクロファージ（単球）とは著しく性質が異なる。

予め投与されたラクトフェリンの効果が１日程度しか持続しない事実は、ラクトフェリンの作用が好中球を活性化することにあることを示唆している（実施例７）。

他方、ラクトフェリンのβ−ラクタム系抗生物質に対する作用機作は、抗菌物質の腸管吸収速度を増大させることにはないことも確認された。すなわち、４種類の経口セフェム剤を用い、ラクトフェリンを同時に経口投与した。その結果、セファレキシン、セファクロール、セフロキサジンおよびセフィキシムについて血中濃度および持続時間に何等の影響も及ばなかった。（実施例２）。

ラクトフェリンを注射用β−ラクタム系抗生物質と併用しても、有意にその効力を増強させるが、このこともラクトフェリンの作用機作に関する前記結論を支持するものである。

また、マウス好中球（多形核白血球ＰＭＮ）を体外にとり出し、ｉｎｖｉｔｒｏでラクトフェリンを作用させて大腸菌の存在下に貧食能および活性酵素の発生を対照と比較したが、予期した活性の昂進は生じなかった。さらに、ラクトフェリンを経口投与したマウスの腹腔内にペプトンを注射して浸出した好中球を使い、貧食能および活性酵素発生能を調べたが、対照に比して有意な貧食能の昂進は認められなかった。

他方、末梢血から集めた好中球は、ラクトフェリン投与により貧食能および活性酵素発生能に関して２倍ほどの昂進が認められた。

これらの結果から、ラクトフェリン経口投与による抗菌剤の効力増強は、好中球の貧食能昂進に由来すること、免疫賦活性食品としても有力であることが確認された。

本発明の医薬品を製剤化するには、変性を避けながら、ぶどう糖、麦芽糖、ソルビトール、デキストリン、澱粉などと混合して常法に従って顆粒剤とすればよく、また適宜に防腐処理を施してシロップ剤とすることもできる。さらに微結晶セルロース、ハイドロキシ・プロピルセルロース、ステアリン酸マグネシウム等と混合して錠剤化することもできる。

また、ラクトフェリンを所定濃度以上含有する本発明の免疫賦活性食品を製造するためには、ラクトフェリンの変性を避けながら、飲料、ヨーグルト、プリン、その他の食品に加工してもよい。

ラクトフェリンは含有量は、食品中１５０mg／kg 以上、飲料として摂取するときは３０mg／２００ ml以上であることを要し、好ましくは各々２５０ mg／kg以上、５０mg／２００ml以上である。

なお、ウシの常乳中の含量は６０〜９０mg／kg （１２〜１８mg／２００ml）である。

（作用効果）本発明においては、有効成分であるラクトフェリンが好中球の貧食機能を活性化し、これにより病原微生物に対する免疫性、抗菌作用を増強させるので、本発明の物質は免疫賦活剤、病原微生物感染症治療剤、予防剤ならびに免疫賦活性食品として使用することができる。

（実施例）以下に本発明の実施例を述べるが、もとより本発明がこれら実施例に限定されるのではない。

実施例１（カプセル剤の製造）冷凍乾燥したラクトフェリン２００ｇをメッシュ幅０．８mmのふるいを通した後、リン酸水素カルシウム６０ｇ、ステアリン酸マグネシウム４ｇ、高分散性二酸化珪素（アエロジル２００、デグッサ社）１ｇ、および変性デンプン（Ｓｔａｒｃｈ１５００、コロルコン社）４０ｇと混合した。該混合物をそれぞれ１５０mgずつ、大きさ３の硬質ゼラチンカプセル中に無菌的に充填した。本カプセル剤はラクトフェリン１００mgを含有する。

実施例２（錠菓の製造）冷凍乾燥したラクトフェリン４５ｇを、ショ糖８０ｇ、乳糖１００ｇと混合し水５０mlを加えて、常法により造粒した後４５℃で通気乾燥した。ショ糖３１０ｇ、アスコルビン酸７５ｇおよびレモン香料０．１mlを水８０mlとともに混合し、法により造粒した後６０℃で通気乾燥した。乾燥した顆粒はそれぞれメッシュ幅０．８mmのふるいを通した。得られた２種の顆粒を変性デンプン６５ｇとともに均一に混合した後、重さ１．８ｇの円形錠剤に打錠した。本錠菓は１錠中に１２０mgのラクトフェリンを含有し、これは６７ｇ／kgに相当する。

実施例３４週令の雄性ＤＤＹ系マウス（ｎ＝６）を使用し、その腹腔内に、大腸菌（Ｅｓｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｃｈ−７）を５％ムチンに懸濁したものを感染させた。接種菌量は１×１０^６ｃｅ１１ｓ／ｍｏｕｓｅとした。感染１時間後にセファロスポリン系抗生物質とラクトフェリン（１．０mg／ｍｏｕｓｅ）を併用してマウスに経口投与した。対照としてラクトフェリンを併用せず、セファロスポリンのみを経口投与したものを用いた。

マウスは感染１週間後まで観察し、１週間後でも生存している個体を完全治癒と判定し、ＥＤ_５０は常法に従って算出した。その結果は表１に示すとおりであり、ラクトフェリンを併用することによって、ＥＤ_５０はセファレキシンでは約６分の１に、セフィキシムでは約４分の１に、セフロキサジンでは約３分の１に、セファクロールでは約２分の１に各々減少した。このように、ラクトフェリンを経口併用投与することにより、大腸菌に対するセファロスポリン系抗生物質の抗菌活性を増強できることが確認された。

実施例４ラクトフェリンによるβ−ラクタム系抗生物質の効力増強効果を大腸菌を用いて調べた。

４週令の雄性ＤＤＹ系マウス（ｎ＝６）を使用し、これに変形菌ＰｒｏｔｅｕｓｖｕｌｇａｒｉｓＯＸ８を５％ムチンに懸濁したものを、接種菌量２×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとして腹腔内感染させた。感染１時間後にセファロスポリン系抗生物質とラクトフェリン（０．５mg／ｍｏｕｓｅ）とをマウスに併用経口投与した。

マウスは感染１週間後まで観察し、１週間後でも生存している個体を完全治癒と判定した。実験結果は表２に示す通りである。

この実験系においても、ラクトフェリンの経口併用投与は、セファレキシンのＥＤ_５０を約２分の１、セフィキシムを約３分の１、セフロキサジンを約２分の１、セファクロールを約３分の１、アミノベンジルペニシリンを約２分の１に減少させる効果が認められた。

このように、ラクトフェリンによるβ−ラクタム系抗生物質に対する効力増強効果は、大腸菌に止まらず、変形菌でも認められる一般的な現象であることが確認された。

実施例５本発明のラクトフェリンをキノロン系合成抗菌剤、アミノ配糖体抗生物質およびミノサイクリンと併用して経口投与した場合の効果を試験した。

４週令の雄性ＤＤＹ系マウス（ｎ＝６）を使用し、病原菌としては５％ムチンに懸濁したＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｃｈ−７を用い、腹腔内に１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅを感染させた。

抗菌剤等は感染１時間後に経口投与し、ゲンタミンのみは経口投与で吸収されないので、感染１時間後に皮下に注射した。ラクトフェリンは感染１時間後に０．５mg／ｍｏｕｓｅを経口投与した。

その結果は、表３に示すとおりであって、細菌に対し、殺菌的に働くキノロン系抗菌剤およびアミノ配糖体抗生物質に対しては、ラクトフェリンは効力増強作用を有しない。これに対し、細菌に対し静菌的に働くテトラサイクリン系抗生物質であるミノサイクリンのＥＤ_５０を約３分の１に減少させた。

本実験の結果はラクトフェリンの作用機作に関して重大な示唆を与える。すなわち、ラクトフェリンはβ−ラクタム系抗生物質やテトラサイクリン系抗生物質のように静菌的に作用する抗菌物質に対してはその抗菌作用を増強するが、殺菌的に働くキノロン系抗菌剤およびアミノ配糖体抗生物質の効力をまったく増強しない。このことは病原菌が静菌性抗菌剤の働きで増殖が抑制され非特異的免疫系により処理されやすくなった場合に、ラクトフェリンが非特異的免疫系による病原菌の除去過程を昂進させる作用機作を有することを示唆している。

実施例６雄性ＤＤＹ系マウス（４週令）（ｎ＝６）を使用し、ラクトフェリンの投与量について検討した。

セファロスポリン系抗生物質としてセファクロールを選び、５％ムチンに懸濁した病原菌Ｅｓｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｃｈ−７を２×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅづつマウス腹腔内に感染させ、その１時間後にラクトフェリンとセファクロールを同時に経口投与した。

感染１週間後にも生存している個体を完全治癒と判定した。

その結果を表４に示すが、これから明らかなように、ラクトフェリンは０．０５〜５０mg／ｍｏｕｓｅの全範囲にわたって同程度の効力増強効果を示した。この事実は、ラクトフェリンが腸管粘膜表面の受容体に結合することによって抗菌活性増強作用を発揮すること、受容体がラクトフェリンで飽和されることにより活性がピークに達することを示している。

実施例７ラクトフェリン投与時期による影響の差異を検討した。

実験動物として雄性ＤＤＹ系マウス４週令を使用（ｎ＝６）し、病原菌としてＥｓｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｃｈ−７を用いた。セファロスポリン系抗生物質としてセファクロールを使用し、病原菌感染１時間後に経口投与した。

ラクトフェリン（０．５mg／ｍｏｕｓｅ）は、感染５日前ないし１日前に投与し、セファクロールと同時に投与したものと比較した。この結果は、表５に示すとおりであって、ラクトフェリンは感染１日前に投与すれば同時投与の場合と同様に効力増強効果があるが、２日以上前に投与された場合には増強効果が認められなかった。

この結果は、ラクトフェリンの効果が比較的短期間に消滅することを意味し、ラクトフェリンが好中球の免疫機能を活性化していることを示唆している。

実験例１液体希釈法によって、ｉｎｖｉｔｒｏにおけるラクトフェリンの抗菌活性を測定した。

培地はｎｕｔｒｉｅｎｔｂｒｏｔｈを使用し、細菌の接種量は１０^４ｃｅｌｌｓ／mlとした。

ラクトフェリンはアポラクトフェリンおよびホロラクトフェリンとも４０００μｇ／mlの濃度で細菌の生育を全く阻害しなかった。

実験した病原性細菌は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓｃｈ−１、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓｃｈ−２、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ、ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＮＩＨＪＣ−３、ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＣ−１１、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ、Ｓｈｉｇｅｌｌａｓｏｎｎｅｉ、Ｓｈｉｇｅｌｌａｔｙｐｈｉ、Ｖｉｂｒｉｏｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｐｒｏｔｅｕｓｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓｍｏｒｇａｎｉｉ、Ｐｒｏｔｅｕｓｒｅｔｔｇｅｒｉ、Ｐｒｏｔｅｕｓｉｎｃｏｎｓｔａｎｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏｃａｅ、Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａである。

実験例２実験動物としてＤＤＹ系５週令雄性マウス（ｎ＝５）を使用し、β−ラクタム系抗生物質の経口吸収量に及ぼすラクトフェリンの影響を調べた。

β−ラクタム系抗生物質としてはセファレキシン、セフィキシム、セファクロールおよびセフロキサジンを用い、経口吸収量は抗生物質の血中濃度により測定した。β−ラクタム系抗生物質およびラクトフェリンは各０．５mg／ｍｏｕｓｅ経口投与した。結果は第１図〜第４図に示すとおりで、ラクトフェリン同時投与は、β−ラクタム系抗生物質の血中濃度を何ら増加させるものではなかった。

実験例３実験動物として５週令のＤＤＹ系マウスを使用した。マウスの腹腔内に澱粉を注入して浸出する腹腔内細胞を集め、常法に従ってマクロファージを除去した。数回洗浄した浮遊細胞液に大腸菌ｃｈ−７株を加え、３７℃、２時間インキュベートして貧食されて減少する細胞数を測定した。結果は第５図に示すとおりであって、大腸菌を同数の好中球と２時間インキュベートすると、対照群（好中球無添加）の生存菌数に比して５０分の１以下に減少した。

他方、上記で採取した好中球にラクトフェリンをｉｎｖｉｔｒｏで添加（１０μｇ／ml、１００ μｇ／ml、１０００μｇ／ml）しても生存菌数の有意な減少は見られなかった（第５図）。

実施例８５週令のＤＤＹ系マウスにラクトフェリン（０．５mg／ｏｍｕｓｅ）を連続５日間経口投与し、５日後に屠殺して末梢血を採取し、全血を使って大腸菌ｃｈ−７株に対する貧食能を貧食法によって測定した。結果は第６図に示すように、ラクトフェリン投与群マウスの末梢血に含まれる好中球の貧食能は、対照群（ラクトフェリン非投与）に比べ２倍以上の有意な昂進が認められた。

実施例９健康な成人男子からなる８名のボランティアー（年令４７．５±５．３才、平均値±標準偏差）を２群に分け（ｎ＝４）、一方に鉄飽和度２６％の天然型ウシ・ラクトフェリン（５００mg／ｄａｙ）を１日１回３日間連続経口投与し、他方の群には偽薬として脱脂粉乳を与えた。４日後に採血して末梢血中の好中球を分離し、大腸菌Ｃ−１１株に対する貧食能を測定し、偽薬群と比較した。

さらに３日後、今度は前回の偽薬群にラクトフェリン（５００mg／ｄａｙ）を１日１回３日間連続経口投与し、もう一方の群には偽薬として脱脂粉乳を与えた。４日後に採血して前回と同様に好中球の貧食能を測定した。

貧食能は、末梢血中の好中球と大腸菌Ｃ−１１株をそれぞれ１０^６ｃｅｌｌｓ／mlになるように調整し、３７℃でインキュベートし、減少した大腸菌の割合を％で表示した。

結果は、表６に示すとおりであって、ラクトフェリン投与は、ボランティアーの好中球貧食能を有意に昂進させた。

【図面の簡単な説明】

第１図〜第４図は、ラクトフェリン同時投与による抗生物質の血中濃度。○はラクトフェリン投与群、●は対照群。第１図はセファレキシン、第２図はセフィキシム、第３図はセファクロール、第４図はセフロキサジン（実験例２）。第５図は大腸菌ｃｈ−７株に好中球を添加し、これにｉｎｖｉｔｒｏでラクトフェリンを添加した場合の生存菌数。●は好中球無添加（対照）。 ○は好中球添加（ラクトフェリン不添加−対照）、 ■はｉｎｖｉｔｒｏでラクトフェリン１０μｇ／１００μｇ／ml添加、□はｉｎｖｉｔｒｏでラクトフェリン１０００μｇ／ml添加（実験例３）。第６図はラクトフェリンの経口投与によるマウスの末梢血好中球の貧食能に対する影響。●は好中球無添加（対照）、○はラクトフェリンを添加しない好中球の貧食能（対照）、□はｉｎｖｉｖｏでラクトフェリンを添加した好中球の貧食能（実施例８）。

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【手続補正書】

【提出日】平２．９．２７（１）別紙添付のとおり適正な図面（第１図、第４図、
第６図）を提出する。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ラクトフェリンを有効成分とする免疫賦
活剤。
【請求項２】ラクトフェリンを有効成分とする病原微
生物感染症の治療薬または予防薬。
【請求項３】抗生物質または化学療法剤と併用する特
許請求の範囲第２項記載の治療薬または予防薬。
【請求項４】ラクトフェリンが鉄飽和ラクトフェリ
ン、鉄不飽和ラクトフェリンまたは鉄非含有ラクトフェリンである特許請求の範囲第１項ないし第３項記載の免疫賦活剤、治療薬または予防薬。
【請求項５】ラクトフェリンを１５０mg／kg以上含有
する免疫賦活性食品。