JPH05155779A - 細菌毒素性ショックの予防・治療薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 インターロイキン６を有効成分とする細菌毒
素性ショックの予防・治療薬。 【効果】 インターロイキン６は、効率よく細菌毒素性
ショックを治療もしくは予防する活性を有し、また生体
由来の生理活性物質であるため、優れた細菌毒素性ショ
ックの治療および予防薬として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は新規な細菌毒素性ショッ
クの予防・治療薬に関する。

【０００２】

【従来の技術】細菌毒素性ショックは悪寒・発熱・発汗
などとともに急激な血圧降下・末梢循環不全から始ま
り、全身ショックにより肺・腎臓・肝臓・心臓・消化管
の障害、さらには中枢神経系等の障害が同時にまたは続
発し、その治療は難しく、しばしば重要臓器障害により
死亡する疾患である。さらに、細菌毒素性ショックが引
き金となり播種性血管内凝固症候群が誘発され、予後は
非常に悪くなる。そして、このような細菌毒素性ショッ
クは内科領域では劇症肝炎、化膿性胆管炎、肝硬変、輸
血後重症肝炎、悪性腫瘍、外科領域では熱傷、腹膜炎、
腸管循環不全等の疾病が原因となって起こる。

【０００３】このような細菌毒素性ショックの原因は、
大腸菌をはじめとするグラム陰性菌の細胞膜成分をなす
内毒素や、黄色ブドウ球菌をはじめとするグラム陽性菌
の産生する外毒素であることが知られている。この内毒
素のうち、リポポリサッカライド（LPS ）の生物活性は
きわめて多彩で、前述した発熱・血圧低下をはじめとし
て体重減少・低血糖・血清鉄減少反応・白血球減少・血
小板減少・インターフェロン産生作用のほかショックに
より死にいたらしめることが報告されている（本間ら、
内毒素,141-391,1982 ）。

【０００４】このような重症な症状を引き起こす細菌毒
素性ショックに対する治療法としては原因となる感染巣
の制御および除去である。そのため、抗生物質投与・オ
プソニン活性物質の投与・副腎皮質系ホルモン剤の投与
等が行われている。また、近年では内毒素ショックの治
療としてインターロイキン１レセプターアンタゴニスト
の投与(Alexander,H.et.al.,J.Exp.Med.,173,1029-103
2,1991)や抗TNF 抗体の投与(Exley,A.R.et.al.,Lancet,
335,1275-1277,1990)といったことがことが試みられて
いる。しかしながら、いったん細菌毒素性ショックにな
るとその治療はむずかしく、しばしば多臓器不全により
死亡する。このため、細菌毒素性ショックの治療方法
は、細菌毒素によるショックが起こる前に治療を開始
し、播種性血管内凝固症候群や多臓器不全に陥らないよ
うにすることが重要である。

【０００５】従って、事前に生体防御機能を高めること
ができれば、感染症や外科手術によって引き起こされ
る、細菌毒素性ショックを回避できるものと期待でき
る。患者へ投与することにより、患者自身の生体防御機
能を高め、細菌毒素性ショックを防ぐ生理活性物質とし
てインターロイキン１（ＩＬ−１）や腫瘍壊死因子（Ｔ
ＮＦ）が知られている。しかしながら、ＩＬ−１を大量
に投与した場合では敗血症ショック類似の病態を招来
し、ＴＮＦ大量投与ではショックによる死亡がみられ、
医薬品として生体内投与した場合、安全性に大いに問題
がある（斎藤ら、外科治療、65,156-164,1991 ）。

【０００６】本来、生体内に存在し、目的の機能を有し
ている物質を医薬として応用することは、生体のリズム
を乱さない点においてより望ましいと言えるが、生体由
来の生理活性物質で細菌毒素性ショックの治療および予
防薬として安全かつ有用なものはまだ開発されていな
い。

【０００７】一方、インターロイキン６（以下、ＩＬ−
６と略す）は、インタ−フェロンβ₂ （Zilberstein,A.
et.at., EMBO J. 5,2529-2537,1986）、Ｂ細胞分化因子
（ＢＳＦ−２）:(Hirano,T. et.al.,Nature,324,73-76,
1986) 、２６−ＫＤａプロテイン（Hageman,G.et.al.,E
ur.J.Biochem., 159,625-632, 1986）、ハイブリド−マ
／プラズマサイト−マ増殖因子（VanDamme,J.et.al.,
J.Exp.Med., 165,914-919,1987 ）、肝細胞刺激因子
（ＨＳＦ）：（Andus,T.et.al.,FEBS Lett.,221,18-22,
1987；Gauldie,J.et.al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,84,7
251-7255,1987 ）、など、別々に研究されてきた生理活
性物質が同一分子であることが分かり、その生理活性の
多様性からＩＬ−６と呼ぶことが提唱され、その名称が
定着している。このようにＩＬ−６については多くの生
理活性が報告されているが、このうちラットにＬＰＳと
ＩＬ−６を同時に気管内投与したところ、気管支肺胞洗
浄液中の好中球数が対照に対して半減し、ＩＬ−６の抗
炎症作用が示唆されている（Ulich, T. R. et al., Am.
J. Pathol., 138, 1097-1101, 1991 ）。しかしなが
ら、現在までのところ細菌毒素性ショックに対するＩＬ
−６の明確な効果は示されていない。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明で解決しようと
するのは、本来生体内で作用を有する生理活性物質を医
薬として提供することにある。なかんずく本発明の目的
は、生体内で効率よく細菌毒素性ショックを治療および
予防する作用を有する生体内生理活性物質を提供するこ
とにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】前記目的は以下の本発明
により達成される。すなわち本発明は、インターロイキ
ン６を有効成分とする細菌毒素性ショックの予防、治療
および細菌毒素性ショックにともなう諸症状の緩和薬に
関する。本発明は、ＩＬ−６が効率良く血中細菌毒素の
増加による細菌毒素性ショックを予防・治療、および播
種性血管内凝固症候群をはじめとする細菌毒素性ショッ
クにともなう諸症状を緩和することを見出し、ＩＬ−６
が、従来得られなかった新規な細菌毒素性ショックの予
防および治療薬として有用であることを示すものであ
る。

【００１０】本発明で使用するＩＬ−６にはとくに制限
はなく、既知の方法で得られるＩＬ−６が好適に使用さ
れる。例えばＩＬ−６産生細胞を培養して得られたも
の、あるいは遺伝子組換え法により得られた組換え型Ｉ
Ｌ−６でも良い。より好ましくは、ＩＬ−６産生ヒト細
胞を培養して得られるものが使用される。

【００１１】培養ヒト細胞から取得したＩＬ−６は、ヒ
ト以外の種由来の不純物の混入を避けることができ、得
られるＩＬ−６は本来生体内で働くＩＬ−６に近いもの
となるため好ましい。すなわち糖鎖および微細修飾を含
んだ構造がヒト生体内ＩＬ−６に近いものとなるため
に、ヒトに医薬として投与したときに抗体産生を相対的
に排除することができるため好ましい。したがって、ヒ
ト培養細胞が産生するＩＬ−６は生体内でのより効率的
な有効性を期待することができる。

【００１２】本発明の培養ヒト細胞が産生するＩＬ−６
とは、ヒト由来の細胞を培養することによって得られる
ＩＬ−６を意味し、さらに特定すれば、正常細胞すなわ
ち、癌化（極端な形質転換）していない、あるいは癌細
胞由来でない付着性ヒト細胞を培養することによって得
られるＩＬ−６が好ましい。これらの条件によって得ら
れるＩＬ−６は通常糖鎖の付加した構造を有する。癌細
胞由来でない正常ヒト細胞としては、特に線維芽細胞、
内皮細胞、ストロ−マ細胞などが生体内でのＩＬ−６の
源の一つと考えられており、その一部は正常細胞に近い
形で培養できるので特に好適に用いられるが、特にこれ
らに限定されるものではない。

【００１３】本発明で好ましく用いられる正常ヒト細胞
のうち、特に好適な細胞は付着性であるので、一般的な
細胞培養条件にて培養できる。一般的な培養フラスコ、
ロ−ラ−ボトル、マイクロキャリア（微粒子）を用いる
培養法などが好適に用いられるがこれに限定されるもの
ではない。こうしてヒト細胞の培養によって得られた培
養液から通常の精製法により、ほぼ純粋なＩＬ−６を得
ることができる。これら培養および精製法については実
施例でその一例を示すが勿論これに限定されるものでは
ない。

【００１４】一方、組換え型ＩＬ−６は、既知の方法に
より製造することができる。一例として、大腸菌を宿主
とした例を実施例として示したが、これ以外でも広く知
られた遺伝子操作法を用いることによって製造すること
ができる。たとえば、ハムスター細胞、マウス細胞、サ
ル細胞などの動物細胞や昆虫細胞あるいは酵母に、ＩＬ
−６遺伝子をその宿主で機能するプロモーターなどの下
流に連結して導入することによっても調製することがで
きる。

【００１５】本発明の予防・治療薬は前述した方法で製
造されるヒトＩＬ−６を主成分として含有する。他の成
分としては、一般的な医薬添加物が選ばれる。もちろん
添加物が無くとも本発明の目的は達成される。一般的に
は主として安定化のために添加物が加えられる。そのよ
うな医薬添加物としては、通常、局法に記載された、医
薬添加物として使えるタンパク質および／または糖類の
中から選ばれる。特に好適にはヒト血清アルブミン（Ｈ
ＳＡ）、ゼラチン、マンニト−ル、ソルビト−ル、ラク
ト−スなどの中から適宜あるいは組み合わせて選ばれる
が、もちろんこれらに限定するものではない。

【００１６】本発明の目的である細菌毒素性ショックの
治療および予防活性を具体的に達成するためには、こう
して得られたＩＬ−６を主成分とする組成物を生体に投
与する。投与対象は、細菌毒素性ショックの発症が予測
される場合、あるいは既に発症している場合であるが特
に限定されるものではない。具体的には外科手術施行の
前後、各種肝疾患状態、感染症、熱傷、播種性血管内凝
固症候群などが対象となる。しかしながら、細菌毒素性
ショック状態は患者個々の状態により様々な臨床症状を
示すことから、細菌毒素の関与を疑わせる患者は、全て
本発明の予防・治療薬の対象となり得る。

【００１７】投与方法としては、特に限定するものでは
ないが、一般的な注射、すなわち静脈注射、皮下注射、
筋肉注射、点滴静脈内注入などの内適当な一つが選ばれ
る。経口、経鼻、経肺、経腸のような経粘膜投与法も場
合により、好適に実施される。また、他のサイトカイン
類のある種のものと組合わせて投与することによっても
本発明の目的は達成される。

【００１８】有効投与量としては、１日につき体重１Ｋ
ｇ当たり０．０００１から１００００μｇの範囲で選ば
れる。好適には体重１Ｋｇ当たり０．００１−１０００
μｇの範囲で選ばれる。前述の投与量は症状によっても
異なり、これらの値に限定されるものでは勿論ない。投
与回数としては通常１日１ないし２回、もしくは２ない
し数日に１回の範囲で選ばれるがこれに限定されるもの
ではない。

【００１９】

【実施例】以下に本発明を実施例によって、より詳細
に、より具体的に説明するが、もちろんこれによって本
発明が制限されるものではない。なお、ＩＬ−６の活性
評価法は以下の方法により行なった。

【００２０】生物活性の評価法：株細胞７ＴＤ１（ＩＬ
−６依存ハイブリド−マ細胞（J. van Snick et al., E
uropean J. Immunol., 18, 193-197(1988)）を用いて、
それに適当量のＩＬ−６を添加することにより、７ＴＤ
１の細胞増殖をＭＴＴ法により測定し、別途標準ＩＬ−
６の段階希釈サンプルについての増殖活性との比較によ
り、ＩＬ−６の生物活性評価を行った。標準ＩＬ−６と
しては、下記に示す東レ株式会社ヒトＩＬ−６ＥＬＩＳ
Ａキットに添付されているのと同じものを使用した。

【００２１】ＥＬＩＳＡ（酵素免疫評価法）法：抗ＩＬ
−６抗体(N.Ida et al.、Biochem.Biophys.Res.Commun.,
165,728-734,(1989)) を用いたＥＬＩＳＡ法で測定し
た。東レ株式会社製造、ト−レ・フジバイオニクス販
売、ヒトＩＬ−６ＥＬＩＳＡキットを用いてＩＬ−６の
評価を行った。

【００２２】実施例１ 大腸菌由来ＩＬ−６の調製：既知文献（T. Hirano ら、
Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３２４，７３（１９８６））と
同じ遺伝子配列を持つＩＬ−６ｃＤＮＡを骨格とするＩ
Ｌ−６発現ベクタ−を下記の方法で作成した。

【００２３】甲状腺癌由来細胞株ＮＩＭ−１細胞（通山
薫ら、日本血液学会雑誌、５３巻、８０５（１９９
０））を培養して通常の方法で調製したｍＲＮＡから、
逆転写酵素で合成したｃＤＮＡ混合物から下記２本のＤ
ＮＡオリゴマ− ＣＣＧＡＴＣＧＡＴＧＣＣＡＧＴＡＣＣＣＣＣＡＧＧＡ および ＧＣＣＡＣＧＧＡＴＣＣＴＡＣＡＴＴＴＧＣＣＧＡＡＧ をプライマ−としてＰＣＲ反応を行った。得られた増幅
ＤＮＡを制限酵素ＣｌａＩとＢａｍＨＩで消化した後、
得られたＤＮＡ断片を大腸菌発現ベクタ−ｐＫＭ６(Tan
aka et al., J. Interferon Res., 6,429-35(1986)) の
ＣｌａＩ部位とＢｇｌＩＩ部位の間に挿入して、発現Ｉ
Ｌ−６ベクタ−ｐＫＭＩＬ−６を得た。このｐＫＭＩＬ
−６を大腸菌ＨＢ１０１に導入し、組換え体を得た。こ
の組換え体を下記のように培養して大腸菌組換え型ＩＬ
−６を調製した。

【００２４】ヒトインターロイキン−６発現プラスミド
を保持する大腸菌ＨＢ１０１／ｐＫＭＩＬ−６を、３０
Ｌ容ジャーを用いて培養した。３０Ｌの増殖用培地（リ
ン酸１カリウム０．３％、リン酸２ナトリウム０．６
％、塩化ナトリウム０．５％、塩化アンモニウム０．１
％、グルコース０．５％、カザミノ酸０．５％、硫酸マ
グネシウム１ｍＭ、硫酸第１鉄３μＭ、ビタミンＢ1 ６
μｇ／ｍｌ、アンピシリン５０μｇ／ｍｌ）を３０Ｌ容
ジャーに仕込み、上記組換え体を植菌した。ジャーは、
攪拌数３００ｒｐｍ、通気量１ＶＶＭ、２５℃の条件で
運転した。トリプトファンオペロンの誘導物質であるイ
ンドールアクリル酸を加え、グルコースとカザミノ酸を
添加しながら６０時間培養した。培養菌体を１０，００
０×ｇ、２０分間の遠心分離操作により集めた。菌体
は、約８９５ｇ得られた。集めた菌体を１ｍＭＥＤＴ
Ａ、１００ｍＭＮａＣｌを含む５０ｍＭトリス塩酸バッ
ファーｐＨ８．０にＯＤ550nm が２０となるように懸濁
した。菌体をマントンゴーリンにより破砕し、遠心分離
を行い、破砕抽出物を回収した。抽出液中の蛋白量は２
３５ｇ、インターロイキン−６は４９５ｍｇであった。
ここでＩＬ−６の量は、前記のＥＬＩＳＡ法で測定した
（以下同じ）。

【００２５】抽出液をシリカカラム５．５Ｌに吸着さ
せ、酸性溶液で溶出した。ＩＬ−６は４６２ｍｇ回収し
た。溶出液に硫酸アンモニウムを終濃度１．３３Ｍ添加
して、遠心により、不溶性不純物を除去した。次にブチ
ルカラム（ブチルトヨパール東ソー社製）２００ｍｌに
吸着させ、低塩中性溶液で溶出した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ
純度検定法により純度８４％のＩＬ−６を２３７ｍｇ得
た。溶出したＩＬ−６をそのままヘパリンカラム（ＡＦ
ヘパリントヨパール 東ソー社製）８０ｍｌに吸着させ
た。中性塩バッファーで溶出した。純度９１％のＩＬ−
６を１１４ｍｇ得た。溶出液をさらにブチルカラム（ブ
チルトヨパール 東ソー社製）２００ｍｌで再度精製し
て、ＩＬ−６を６６ｍｇ得た。上記で調製したＩＬ−６
の純度は逆相ＨＰＬＣ法で９５％以上であった。上記Ｉ
Ｌ−６は実施例１に記載した評価法で活性を持ったＩＬ
−６であることを確認した。

【００２６】実施例２ ヒト細胞由来ＩＬ−６の調製：本発明のＩＬ−６は一例
として次の方法で調整された。２Ｌのガラス製培養槽に
１Ｌの５％のＮＣＳを含むイーグルＭＥＭ培地中で、細
胞数が１０⁶ ／mlになるようにヒト線維芽細胞をビーズ
培養した（ビーズ：“サイトデックス１”、（ファルマ
シア社）、３７℃）。その後、培地を少量のカルボキシ
メチルセルロースを含む無血清イーグルＭＥＭ培地１Ｌ
に交換し、プライミングとして１０万単位／Ｌのヒト天
然型インターフェロンβを添加した。翌日さらにポリ
Ｉ：ポリＣ５０mg／Ｌ、シクロヘキシミド１０mg／Ｌ添
加した。その４時間後、アクチノマイシンＤを４mg／Ｌ
投入し、そして、さらに１時間後、産生培地として少量
のメチルセルロースを含むイーグルＭＥＭ培地に置換
し、スーパーインダクション処理を行なった。その後２
日間そのまま培養を続けた（３７℃）。

【００２７】撹拌を停止し、マイクロキャリアを沈降さ
せた後、上清および産生培地での洗液をろ過し、１Ｌを
別の撹拌装置付き容器に移した。この産生液に滅菌した
“ブル−セファロ−スＣＬ−６ＢＦＦ”（ファルマシア
社）を投入し、１５℃，４日間撹拌しながらバッチ吸着
させた。撹拌停止後、ブル−担体を沈降させ上清を別の
容器に移した。シリカ担体は、リン酸ナトリウム緩衝液
中で高圧蒸気滅菌（１２１℃、３０分）したのち、４ｍ
ｌずつ２本のカラムに充填して直列に接続させた。これ
に、ブル−担体の素通り上清を流速２０ｍｌ／ｈｒで流
した。全量流した後、２本のカラムを別々に精製した。
それぞれリン酸ナトリウム緩衝液２５ｍｌを流した後、
２０ｍＭ塩酸を流してインターロイキン−６含有画分１
０ｍｌを回収した。この塩酸回収液にさらに硫酸アンモ
ニウムを１．３３Ｍになるように添加し、４℃、１晩ゆ
るやかに撹拌した。沈殿物を３０００ｒｐｍ，３０分遠
心分離（４℃）、除去した。

【００２８】分離した上清を疎水性クロマトグラフィ−
用担体であるブチルトヨパ−ル６５０Ｍ”１ｍｌ（東ソ
−社）を充填したカラムに流し、吸着させた。このカラ
ムを１．３３Ｍの硫酸アンモニウムを含む２０ｍＭ塩
酸、１．３３Ｍの硫酸アンモニウムを含む５０ｍＭリン
酸ナトリウム緩衝液で洗浄した後、５０ｍＭリン酸ナト
リウム緩衝液で回収した。その後、逆相系のクロマトグ
ラフィ−であるＯＤＳカラム（Ｃ₁₈）（ＹＭＣ−Ｐａｃ
ｋ ＯＤＳ Ａ−３１２ Ｓ−５ １２０Ａ，ＹＭＣ
社）を装着した高速液体クロマトグラフィ−（島津ＬＣ
−４Ａ）を用いて、０．１％トリフロロ酢酸を含有する
水と０．１％トリフロロ酢酸を含有するアセトニトリル
でグラジエント溶出させヒト天然型インターロイキン−
６ピ−クを分取した。こうして得られたヒト天然型イン
ターロイキン−６を“セファデックスＧ−２５”（ファ
ルマシア社）で５ｍＭギ酸を溶媒としてゲルろ過しアセ
トニトリルを含まないインターロイキン−６溶液を得
た。

【００２９】上記で調製したＩＬ−６の純度は逆相ＨＰ
ＬＣ法で９５％以上であった。上記ＩＬ−６は前記に示
す評価法で活性を持ったＩＬ−６であることを確認し
た。

【００３０】実施例３ ＩＬ−６皮下投与による細菌毒素性ショックの予防効
果：ＩＬ−６を生理食塩水で100ug/mlに希釈し、BALB/c
マウス（雄性、７週令、日本チャールズリバー）12匹に
各100ul を皮下投与した。対照群は生理食塩水のみを皮
下投与した。ＩＬ−６または生理食塩水投与１時間後
に、細菌毒素として生理食塩水で1.9mg/mlに溶解したＬ
ＰＳ E.coli 055:B5(DIFCO) をマウスの尾静脈より100u
l 投与した。また、ＩＬ−６もＬＰＳも全く投与しない
ＬＰＳ，ＩＬ−６未投与群（６匹）を設けた。測定はＬ
ＰＳ投与後、24時間ごとに６日間マウスの生死判定を行
った。結果を表１に示す。

【００３１】

【表１】 表１に示すようにＩＬ−６を投与した群では対照群に比
し、細菌毒素性ショックにより死にいたるマウスの数が
減少し、ＩＬ−６は生体内投与により細菌毒素性ショッ
クを予防する作用が認められた。

【００３２】実施例４ ＩＬ−６皮下投与により細菌毒素性ショックにともなう
諸症状の緩和：実施例３で実験に使用したマウスを、Ｉ
Ｌ−６投与開始前および開始後６日目に体重測定し、細
菌毒素性ショックにともなう体重変動を計測した。結果
を表２に示す。

【００３３】

【表２】 表２に示すようにＩＬ−６を投与することにより、細菌
毒素性ショックでみられる体重減少を抑制することがで
きた。

【００３４】次に体重測定したマウスをエーテル麻酔
下、えき下静脈より採血し、抗凝固剤としてＥＤＴＡ・
２Ｋを添加し血小板数を自動血球計測装置（東亜医用電
子）で測定した。結果を表３に示す。

【００３５】

【表３】 表３で示すように細菌毒素性ショックによりみられる血
小板減少をＩＬ−６により抑制することができた。すな
わち生理食塩水を投与した対照群と比し、ＩＬ−６を投
与した群では血小板数減少を有意差をもって抑制した。

【００３６】実施例５ ＩＬ−６静脈内投与による細菌毒素性ショックの治療お
よび予防効果：ＩＬ−６を生理食塩水で100ug/mlに希釈
し、BALB/cマウス（雄性、７週令、日本チャールズリバ
ー）6 匹に各100ul を静脈内投与した。ＩＬ−６投与
後、16時間、1 時間目に細菌毒素として生理食塩水で1.
9mg/mlに溶解したＬＰＳ E.coli055:B5(DIFCO) をマウ
スの尾静脈より100ul 投与した。また、ＬＰＳのみを投
与した対照群、ＩＬ−６もＬＰＳも全く投与しないＬＰ
Ｓ・ＩＬ−６未投与群、ＬＰＳを投与した直後にＩＬ−
６を静脈内投与したＬＰＳ・ＩＬ−６同時投与群を設け
た。測定はＬＰＳ投与後、24時間ごとに６日間マウスの
生死判定を行った。結果を表４に示す。

【００３７】

【表４】 表４に示すようにＩＬ−６を投与した群では対照群に比
し、細菌毒素性ショックにより死にいたるマウスの数が
減少し、ＩＬ−６は静脈内投与により細菌毒素性ショッ
クを予防および治療する作用が認められた。

【００３８】実施例６ ＩＬ−６皮下投与による細菌毒素性ショックの治療およ
び予防効果：細菌毒素として生理食塩水で3.5mg/mlに溶
解したＬＰＳ、E.coli 055:B5 (DIFCO) をC3H/HeN マウ
ス（雄性、８週令、日本エスエルシ−）11〜12匹に各10
0ulを腹腔内投与した。ＬＰＳ投与前または同時に、生
理食塩水で100ug/mlに希釈したＩＬ−６を、マウスの皮
下に100ul 投与した。また、対照群としてＩＬ−６のか
わりに生理食塩水を100ul 皮下投与する群を設けた。測
定はＬＰＳ投与後、24時間ごとに10日間マウスの生死判
定を行った。結果を表５に示す。

【００３９】

【表５】 表５に示すようにＩＬ−６を24時間前、 4時間前、 1時
間前または同時に投与した群では対照群に比し、細菌毒
素性ショックにより死にいたるマウスの数が減少し、Ｉ
Ｌ−６には皮下投与により細菌毒素性ショックを予防お
よび治療する作用が認められた。

【００４０】実施例７ ＩＬ−６皮下投与による細菌毒素性ショックの予防効
果：0 〜10ugのＩＬ−６を1%同種血清を含む生理食塩水
で希釈し、C3H/HeNマウス（雄性、８週令、日本エスエ
ルシ−）12匹に各100ul を皮下投与した。ＩＬ−６また
は1%同種血清のみを含む生理食塩水を投与して４時間後
に、細菌毒素として生理食塩水で3.5mg/mlに溶解したＬ
ＰＳ、E.coli 055:B5 (DIFCO) をマウスへ100ul 腹腔内
投与した。測定はＬＰＳ投与後、24時間ごとに8日間マ
ウスの生死判定を行った。結果を表６に示す。

【００４１】

【表６】 表６に示すように1.0 および10ugのＩＬ−６を投与した
群では、細菌毒素性ショックにより死にいたるマウスの
数が減少し、ＩＬ−６には生体内投与により細菌毒素性
ショックの致死作用を防ぐことが認められた。

【００４２】

【発明の効果】本発明によって、生体内で効率よく細菌
毒素性ショックを治療もしくは予防する活性を有する治
療薬を得ることができる。また、ＩＬ−６は生体内に存
在するものであるため、合成医薬に比べより生体と調和
するという優れた細菌毒素性ショックの治療および予防
薬が期待できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 井田 亘隆 神奈川県鎌倉市手広1111番地 東レ株式会 社基礎研究所内 (72)発明者 岡本 将 神奈川県鎌倉市手広1111番地 東レ株式会 社基礎研究所内

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 インターロイキン６を有効成分とする細
   菌毒素性ショックの予防・治療薬。
2. 【請求項２】 インターロイキン６が培養ヒト細胞が産
   生するものである請求項１記載の細菌毒素性ショックの
   予防・治療薬。