JPH0459728A - 肝障害抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、オキサゾピロロキノリン類を有効成分とする
新規な肝障害抑制剤に関する。

［従来の技術および問題点］ 肝臓は、生体における物質代謝とその調節の大部分を担
う重要な臓器であり、糖質、タンパク質、脂質、核酸、
ビタミン、ホルモンなどの代謝、ビリルビンの産生、胆
汁の分泌および内因性・外因性物質の酸化、還元、抱合
などによる解毒と胆汁内への排泄、あるいは水溶化して
尿中への排泄を助けている。これらの機能は、毒物、薬
物、アルコール、放射線、ウィルスなどの原因により障
害を受け、薬物性肝疾患、アルコール性肝障害、ウィル
ス性肝炎、脂肪肝、黄痕などの病気として現れ、障害が
長期にわたると肝硬変、肝癌に至る場合もある。

しかしながら、これら肝障害に対する有効な薬剤は開発
されておらず、現在では食事療法および安静療法に頼ら
ざる得ない状態である一方、近年、酸化還元酵素の新し
い補酵素として見出されたピロロキノリンキノンあるい
はピロロキノリンキノン塩（これらを総称して以下ＰＱ
Ｑ類と記す）が肝障害を抑制する作用を示すことが報告
されている（特開昭６３−１９２７１７）が、このＰＱ
Ｑは、腎毒性を有することが近年明らかにされている（
渡辺ら、Ｈｉｒｏｓｈｉｍａ　Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｓｃｉ
、　、第３８巻、第１号、第４９〜５１頁（１９８９年
））。

そこで毒性および腎毒性が低く、かつ、肝障害抑制作用
を示す薬剤の開発が望まれている。

［問題点を解決するための手段、作用］肝障害になると
、血液中のクルタミン酸−オキサロ酢酸トランスアミナ
ーセ（以下ＧＯＴと略す）、グルタミン酸−ピルビン酸
トランスアミナ〜ゼ（以下ＧＰＴと略す）などの肝臓の
酵素の増加、血清のビリルビンの上昇、肝細胞の壊死な
ど生化学的および組織学的に特徴ある変化が現れる。

肝障害の研究のために、実験的な肝炎のモデルが開発さ
れている。その中で、ラットを用いる四塩化炭素あるい
はＤ−ガラクトサミンによる肝障害モデルがよく利用さ
れている。四塩化炭素による肝障害は、四塩化炭素がチ
トクロ−ムＰ−４５０によりフリーラジカル（・ＣＣト
）に変換し、このフリーラジカルが肝細胞膜蛋白に結合
し、細胞活性を抑制するため、および、膜脂質の過酸化
反応を促進し、膜構造を変化させることにより引き起こ
されると考えられている。一方、Ｄ−ガラクトサミンに
よる肝障害の発生機序はまだ明らかではないが、ＵＤＰ
−へキサミンの形成およびＵＴＰの欠乏により引き起こ
されるとの報告もある。

本発明者らは、ラットを用いる四塩化炭素あるいはＤ−
ガラクトサミンによる肝障害モデルを用いて、毒性が低
く、かつ肝障害抑制作用を有する薬剤を開発すべく鋭意
研究を進めたところ、オキサゾピロロキノリン類および
その塩が毒性が低く、かつ肝障害によるＧＯＴ、ＧＰＴ
および総ビリルビンの上昇を著しく抑制することを見い
出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。

オキサゾピロロキノリン類とは、別名５位置換２．８．
１０−）リカルボキシ−１［（−オキサゾ［５，４−ｈ
コーピロロ［２，３−ｆ　］キノリン（以下総称してＯ
ＰＱ類と記す）であり、化学構造式は以下のごとくであ
る。

〔Ｒは一般伐Ｒ’　−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨで示さ
れるα−アミノ酸のＲ゛と同じ。〕すなわち、本発明は
、オキサゾピロロキノリン類を有効成分として含有する
肝障害抑制剤である。

本発明において使用されるＯＰＱ類は、ピロロキノリン
キノンまたは、ピロロキノリンキノン塩と各種のα−ア
ミノ酸、メチルアミンなどとを酸素存在下で反応させる
ことにより、容易に製造することが可能である。

本発明におけるＯＰＱ類としては、ＰＱＱ類とグリシン
、スレオニン、プロリン、トリプトファンおよびモノメ
チルアミンのいずれか１種とから得られるＯＰＱ　（Ｒ
＝Ｈ）　　（特願平１−２９２４５９号）、ＰＱＱ類と
セリンから得られるヒドロキシメチルＯＰＱ　（Ｒ＝Ｃ
Ｈ２０Ｈン　（特願平１−２５８７９１号）、ＰＱＱ類
とバリンから得られる１−メチルエチルＯＰＱ　（Ｒ＝
ＣＨ（ＣＨ３Ｌ　）（特願平１−３０９４７９号）、Ｐ
ＱＱ類とイソロイシンから得られる１メチルプロピルＯ
ＰＱ　（Ｒ，＝ＣＨ（ＣＨ３）　ＣＨ２ＣＨ３）（特願
平１−３０９４８０号）、ＰＱＱ類とロイシンから得ら
れる２−メチルプロピルＯＰＱ　（Ｒ＝ＣＨ２ＣＨ（Ｃ
Ｈ，）２　）（特願平１−３０９４８１号）、ＰＱＱ類
とアラニンから得られるメチル０ＰＱ（Ｒ＝ＣＨ３）（
特願平１−３２７３４７号）、ＰＱＱ類とグルタミン酸
から得られる２−カルホキジエチルＯＰＱ　（Ｒ＝ＣＨ
２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ）（特願平１３２７３５１号）、ＰＱ
Ｑ類とクルクミンから得られる２−カルバモイルエチル
ＯＰＱ　（Ｒ＝ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２）（特願平１−
３２７３４８号）、ＰＱＱ類とメチオニンから得られる
２−メチルチオエチルＯＰＱ　（Ｒ＝ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ
Ｈ３）（特願平１−３２７３４９号）、ＰＱＱ類とフェ
ニルアラニンから得られるペンシルＯＰ　Ｑ　（Ｒ＝　
ＣＨ２Ａ）　）（特願平１３２７３５０号）、ＰＱＱ類
とチロシンから得られる４−ヒドロキシフェニルメチル
ＯＰＱ　（Ｒ＝　　ＣＨ２−Ｑ−ＯＨ）（特願平２−１
０７３５７号）、ＰＱＱ類とアスパラギン酸から得られ
るｌ−カルホキジメチルＯＰＱ　（Ｒ＝ＣＨ２ＣＯ２Ｈ
）　、ＰＱＱとアスパラキンから得られる１−カルバモ
イルメチルＯＰ　Ｑ　（Ｒ＝　ＣＨ２ＣＯＮ　Ｈ２）お
よびＰＱＱ類とヒスチジンから得られる１−（４−イミ
ダリール）メチルＯＰＱ　（Ｒ＝ＣＨ２−〔＝１　　）
などがある。また、゛それぞれのＯＰＱの塩、すなわち
アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩
および置換アンモニウム塩なども有効であり、その代表
例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム
塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、トリメチルアンモ
ニウム塩、トリエチルアンモニウム塩、トリエタノール
アンモニウム塩などがある。

本発明のＯＰＱ類とその塩は、経口および非経口のいず
れの投与形態も可能である。経口投与の場合は、カプセ
ル剤、錠剤、粉剤などの通常の方法で投与することがで
きる。また非経口投与の場合には、注射剤、液剤などで
投与される。さらに徐放剤も効果的である。本発明の一
有効成分を製剤化するには、界面活性剤、賦形剤、着色
料、保存料、コーティング助剤などを適宜使用される。

また、他の薬剤との併用も行うことが出来る。

［ＰＱＱおよびＯＰＱの急性毒性および腎毒性試験］ （１）急性毒性試験 ５ＰＦ−ＩＣＲマウス　雄　５週齢（日本チャールズリ
バー（株）より購入）に、ＰＱＱ・２ＮａおよびＯＰＱ
類をマウス１ｋｇ当り２０，４０゜８０．１６０．およ
び２００ｍｇのそれぞれを腹腔投与し、１４日間、２５
℃で飼育した。ＯＰＱ類としては、ＯＰＱ、１−メチル
プロピル０ＰＱ２−メチルチオエチルＯＰＱおよびベン
ジルＯＰＱを用いた。なお、−群は８匹とした。その結
果、ＰＱＱ２Ｎａ　　２０ｍｇ／ｋｇ投与および４０ｍ
ｇ／ｋｇ投与ではマウスは死亡しなかったか、８０ｍｇ
投与で５匹、１６０ｍｇ投与および２００ｍｇ投与で８
匹全部死亡した。一方ＯＰＱ類では全てのマウスが死亡
しなかった。

これにより、ＯＰＱはＰＱＱに比べて毒性が著しく低下
していることが判る。

（２）尿検査による腎毒性 急性毒性試験と同様にして、ＰＱＱ・２ＮａおよびＯＰ
Ｑ類を投与し、マウスを飼育した。毎日、マウスの尿を
採取し、臨床検査試薬（商品名；ウリステックス■、マ
イルス・三共製）を用いてグルコース濃度を調べた。第
１表に示すように、ＰＱＱ・２Ｎａを投与したマウスの
尿からは糖が検出されたが、ＯＰＱ類を投与したマウス
の尿からは糖が検出されなかった。すなわち、ＰＱＱは
腎毒性が認められたが、ＯＰＱでは腎毒性が認められな
かった。

第１表（そのｌ） （以下余白） 第１表（その２） 第２表 （３）血液検査による腎毒性 急性毒性試験と同様にして、ＰＱＱ・２ＮａおよびＯＰ
Ｑ類を投与し、マウスを飼育した。

投与１日後に絶食（水は与える）し、さらに１８時間後
に採血して血清を得た。血清中のグルコース、尿素態窒
素およびクレアチニン（Ｃｒｅａ−ｔｉｎｉｎｅ）を臨
床検査試薬（商品名；富±トライケムスライド、富士写
真フィルム製）を用いて調べた。なお、各々の値は８匹
の平均値で示した。結果を第２表に示す。ＰＱＱ・２Ｎ
ａ投与では、グルコースの大幅な減少、尿素およびクレ
アチニンの大幅な増加がみられ、腎毒性が認められた。

これに対してＯＰＱ類投与では、グルコース。

尿素およびクレアチニンのそれぞれの含有量は、「無投
与」の場合と大差はなく、腎毒性は認められなかった。

（以下余白） ［実施例］ 以下に、本発明に係わるＯＰＱ類の肝障害抑制効果を示
した実施例を示すが、本発明はこれらの実施例に限定さ
れるものではない。

実施例１ 四塩化炭素（ＣＣＬ）誘発肝障害に対するＯＰＱ類の薬
理効果（１） ＳＤラット（雄、　７週令１体重約２２０ｇ、　　日本
チャールズリバー（株）より購入）を２５匹用意し、５
匹づつ５群（Ａ−Ｅ）に分けた。

全てのラットを１６時間絶食させ、０群にＯＰＱを０．
４ｍｇ／ｍｌ含む液を１．１ｍｌ　、Ｄ群にＯＰＱを１
．０ｍｇ／ｍｌ含む液を１．１ｍｌおよびＥ群にＯＰＱ
を２．０ｍｇ／ｍｌ含む液を１．１ｍｌ、それぞれのラ
ットの腹腔内投与し、さらに４０分後にそれぞれ同量の
ＯＰＱを腹腔内へ投与した。ＯＰＱは生理食塩水に溶解
して用いた。なお、Ｂ群には生理食塩水を１．１ｍｌ、
ＯＰＱ液の代わりに腹腔内投与した。

さらに２０分後に、Ｂ−Ｅ群のラットに１０％四塩化炭
素溶液（オリーブ油に溶解）を胃内へ２．２ｍｌづつ投
与した。Ａ群のラットは、ＯＰＱおよび四塩化炭素を投
与しなかった。

四塩化炭素を投与してから２４時間後に、全てのラット
について腹大動脈から採血を行い、遠心分離により血清
を得た。

血清中のＧＰＴ、ＧＯＴおよび総ビリルビン量を臨床検
査試薬（商品名；富士ドライケムスライド、富士写真フ
ィルム製）を用いて測定した。その結果を第３表に示す
。なお、それぞれの値は５匹のラットの平均値である。

四塩化炭素投与により、増加したＧＰＴ、ＧＯＴおよび
総ビリルビン量がＯＰＱ投与によりいずれも大幅に減少
しており、ＯＰＱは肝障害抑制効果があることがわかる
。

（以下余白） 実施例２ 四塩化炭素（ＣＣ１４）誘発肝障害に対するＯＰＱ類の
薬理効果（２） ＯＰＱの代わりに、１−メチルプロピル０ＰＱ２−メチ
ルチオエチルＯＰＱあるいはベンジルＯＰＱを５ｍｇ／
ｋｇ　ラフ）の投与量で２回投与した以外は実施例１と
同様にして、ＯＰＱ類の四塩化炭素誘発肝障害に対する
薬理効果を調べた。その結果を第４表に示す。

四塩化炭素投与により増加したＧＰＴ、ＧＯＴおよび総
ビリルビン量が、ｌ−メチルプロピルＯＰＱ、２−メチ
ルチオエチルＯＰＱあるいはベンジルＯＰＱの投与によ
り、いずれも大幅に減少しており、ＯＰＱ類は肝障害抑
制効果があることがわかる。

（以下余白） 第３表 第４表 実施例３ Ｄ−カラクトサミン誘発肝障害に対するＯＰＱ類の薬理
効果 ＳＤクラット雄、７退会１体重約２４０ｇ、　　日本チ
ャールズリバー（株）より購入）を３０匹用意し、５匹
づつ６群（Ａ−Ｆ）に分けた。全てのラットを１８時間
絶食させ、０群にＯＰＱを０．４ｍｇ／ｍｌ含む液を１
．２ｍｌ、Ｄ群にＯＰＱを１．０ｍｇ／ｍｌ含む液を１
．２ｍｌ　、　Ｅ群にＯＰＱを２．０ｍｇ／ｍｌ含む液
を１．２ｍｌおよびＦ群にＯＰＱを３．０ｍｇ／ｍｌ含
む液を１．２ｍｌ、それぞれのラットの腹腔内へ投与し
、さらに４０分後にそれぞれ同量のＯＰＱを腹腔内へ投
与した。

ＯＰＱは生理食塩に溶解して用いた。なお、Ｂ群には生
理食塩水１．２ｍｌをＯＰＱ液の代わりに腹腔内投与し
た。

さらに２０分後に、Ｂ−Ｆ群のラットにＤ−ガラクトサ
ミンを０．２ｍｇ／ｍｌ含む液を１．２ｍｌづつ皮下投
与した。Ａ群のラットは、ＯＰＱおよびＤ−ガラクトサ
ミンを投与しなかった。

Ｄ−ガラクトサミンを投与してから２３時間後に全ての
ラットについて、腹大動脈から採血を行い、遠心分離に
より血清を得た。

血清中のＧＰＴ、ＧＯＴおよび総ビリルビン量を臨床検
査試薬（商品名；富士ドライケムスライド、富士写真フ
ィルム製）を用いて測定した。その結果を第５表に示す
。なお、それぞれの値は５匹のラットの平均値である。

Ｄ−ガラクトサミンの投与により増加したＧＰＴ、ＧＯ
Ｔおよび総ビリルビン量がいずれもＯＰＱ投与により減
少しており、ＯＰＱは肝障害抑制効果があることがわか
る。

（以下余白） 第５表 ［発明の効果］ ＯＰＱ類およびその塩が肝障害抑制作用を有することか
ら、肝障害の予防および治療薬として利用される。

特許出願人　三菱瓦斯化学株式会社 代表者　画用　禮二 代　理　人　弁理士　小板　貞文

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式 I で示されるオキサゾピロロキノリン類および
   ／またはその塩を有効成分とする肝障害抑制剤 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔Ｒは一般式Ｒ′−ＣＨ（ＮＨ＿２）−ＣＯＯＨで示さ
   れるα−アミノ酸のＲ′と同じ。〕