JPH0459729A

JPH0459729A - 肝障害抑制剤

Info

Publication number: JPH0459729A
Application number: JP16848490A
Authority: JP
Inventors: Sadaji Uragami; 貞治浦上; Chieko Ito; 智恵子伊藤; Toshio Nagai; 永井　俊夫
Original assignee: Mitsubishi Gas Chemical Co Inc
Current assignee: Mitsubishi Gas Chemical Co Inc
Priority date: 1990-06-28
Filing date: 1990-06-28
Publication date: 1992-02-26

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、ピロロキノリンキノントリエステル類を有効
成分とする新規な肝障害抑制剤に関する。

〔従来の技術および問題点〕

肝臓は、生体における物質代謝とその調節の大部分を担
う重要な臓器であり、糖質、タンパク質、脂質、核酸、
ビタミン、ホルモンなどの代謝、ビリルビンの産生、胆
汁の分泌および内因性・外因性物質の酸化、還元、抱合
などによる解毒と胆汁内への排泄、あるいは水溶化して
尿−中への排泄を助けている。これらの機能は、毒物、
薬物、アルコール、放射線、ウィルスなどの原因により
障害を受け、薬物性肝疾患、アルコール性肝障害、ウィ
ルス性肝炎、脂肪肝、黄痕などの病気として現れ、障害
が長期にわたると肝硬変、肝癌に至る場合もある。

しかＱながら、これら肝障害に対する嶺効な薬剤は開発
されておらず、現在では食事療法および安静療法に頼ら
ざる得ない状態である。

一方、近年、酸化還元酵素の新しい補酵素として見出さ
れたピロロキノリンキノンあるいは”ピロロキノリンキ
ノン塩（これらを総称して以下　ＰＱＱ類と記す）が腹
腔投与において肝障害を抑制する作用を示す事が報告さ
れている（特開昭６３−１９２７１７）。

しかしながら、この活性は、経口投与では認められない
（渡辺ら、Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　
Ｒｅ５ｃａｒａｈ、第４４巻、第６号、第８９６〜９０
１頁（１９８８年））。

また、このＰＱＱは腎毒性を有することが近年明らかに
されている（渡辺ら、Ｈｉｒｏｓｈｉｍａ　Ｊ、Ｍｅｄ
。

Ｓｃｉ　、、第３８巻、第１号、第４９−５１頁（１９
８９年））。

そこで、毒性および腎毒性が低く、かつ膜透過性かよく
、腹腔投与ではもちろん、経口投与でも、肝障害を抑制
する薬剤の開発が望まれている◇〔問題を解決するため
の手段、作用〕肝障害になると、血液中のグルタミン酸−オキザロ酢酸
トランスアミナーゼ（以下ＧＯＴと略す）、グルタミン
酸−ビルピン酸トランスアミナーゼ゛（以下ＧＰＴと略
す）などの肝臓の酵素の増加、血清のビリルビンの上昇
、肝細胞の壊死など生化学的および組織学的に特徴ある
変化が現れる。肝障害の研究のために、実験的な肝炎の
モテルか開発されている。その中で、ラットを用いる四
塩化炭素あるいはＤ−ガラクトサミンによる肝障害モデ
ルがよく利用されている。

四塩化炭素による肝障害は、四塩化炭素かチトクローム
Ｐ−４５０によりフリーラジカル（・ＣＣ１３）に変換
し、このフリーラジカルが肝細胞膜蛋白に結合し、細胞
活性を抑制するため、および、膜脂質の過酸化反応を促
進し、膜構造を変化させることにより引き起こされると
考えられている。一方、Ｄ−ガラクトサミンによる肝障
害の発生機序はまだ明かではないが、ＵＤＰ−へキサジ
ンの形成およびＵＴＰの欠乏により引き起こされるとの
報告もある。

本発明者らは、ラットを用いる四塩化炭素あるいはＤ−
ガラクトサミンによる肝障害モデルを用いて、毒性が低
く、かつ膜透過性がよく、腹腔投与ではもちろん、経口
投与でも肝障害抑＄り作用を有する薬剤を開発すべく鋭
意研究を進めたところ、ＰＱＱ・トリエステル類が、毒
性が低く、かつ膜透過性がよく腹腔投与および経口投与
のいずれても肝障害によるＧＯＴ、ＧＰＴおよび総ビリ
ルビンの上昇を著しく抑制する事を見い出し、この知見
に基づいて本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、−殺伐Ｉで示されるピロロキノリ
ンキノントリエステルを有効成分とする肝障害抑制剤で
ある。

（Ｒは、低級アルキル、アルケニル。

あるいはヘンシル基）本発明において使用されるＰＱＱ・トリエステル類は、
ＰＱＱまたはＰＱＱ塩とアルコール類を常法により反応
させることにより容易に製造することが可能であり、−
殺伐ＩのＲの低級アルキル基としては、メチル、エチル
基なとか、アルケニル基としては、アリル基などがある
。

本発明のＰＱＱ・トリエステル類は、経口および非経口
投与のいずわの投与形態も可能である。

経口投与の場合は、カプセル剤、錠剤、粉剤などの通常
の方法で投与することができる。また非経口投与の場合
には、注射剤、液剤などて投与される。ざらに徐放剤も
効果的である。

本発明の有効成分を製剤化するには、界面活性剤、賦形
剤、着色料、保存料、コーティング助剤などを適宜使用
さ抗る。また、他の薬剤との併用も行うことが出来る。

（ＰＱＱおよびＰＱＱ・トリエステル類の反透過性試験
〕岩田修造編「水晶体、その生化学側（（メゾ“イカル葵
出版、Ｐ４３６〜４４０）記載の方法に従って、各物質
のウシ水晶体カプセルへの膜透過性を調べた。

膜透過定数測定装置に、１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ緩衝液に
溶解した各物質（ＰＱＱ・トリエステル類の場合は、１
％ＤＭＳＯを含む）を入れ３５℃で１６時間放置後、移
動した各物質量を紫外部吸収（ＰＱＱ・２Ｎａは２４３
ｎｍ、ＰＱＱ　・）リエステルは、２５５ｒ＋ｍ）で測
定し、膜透過定数を求めた。

第１表に示すように、ＰＱＱ・トリアリルエステルの膜
透過定数は、ＰＱＱ・２Ｎａの３〜４倍、ＰＱＱ・トリ
メチルエステルおよびＰＱＱ・トリエチルエステルの膜
透過定数は、ＰＱＱ・２Ｎａの約２倍であり、膜透過性
が著しく改善されていることがわかる。

第１表［ＰＱＱおよびＰＱＱ・トリエステル類の急性毒性およ
び腎毒性試験〕（１）急性毒性試験５ＰＦ−ＩＣＲマウス雄５週齢（日本チャールズリバー
■より購入）にＰＱＱ・２Ｎａ、ＰＱＱ・トリメチルエ
ステルおよびＰＱＱ・トリアリルエステルをマウス体重
１　ｋｇ当たり、４０．８０．１６０および２００ｍｇ
のそれぞれを腹腔投与し、１４日間、２５℃で飼育した
。なお、−群は、８匹とし、ＰＱＱ・２Ｎａは生理食塩
水で溶解し、ＰＱＱ・トリメチルエステルおよびＰＱＱ
・トリアリルエステルは、１％Ｔｗｅｅｎ８０含有生理
食塩水で懸濁して投与した。

その結果、Ｐ　ＱＱ　・２Ｎ　ａ　４０＋ｎｇ／ｋｇｖ
クス投与テハ、マウスは死亡しなかったが、８０ＩＩＩ
ｇ投与で５匹、１６０ｍｇ投与および２００　ｗａｇ投
与で８匹全部死亡した。一方、ＰＱＱ・トリメチルエス
テルおよびＰＱＱ・トリアリルエステル投与では、すべ
てのマウスが死亡しなかった。

これにより、ＰＱＱ・トリエステル類は、ＰＱＱに比べ
て毒性が著しく低下していることが判る。

（２）尿検査による腎毒性急性毒性試験と同様にして、ＰＱＱ・２Ｎａ、ＰＱＱ・
トリメチルエステルおよびＰＱＱ・トリアリルエステル
を投与し、マウスを飼育した。マウス体重１　ｋｇ当た
りの投与量は、ＰＱＱ・２Ｎａでは２０．４０．８０　
ｍｇとし、ＰＱＱ−トリエステル類では２０．４０．８
０．１６０．２００．４０ｏ、１ｏｏｏｍｇトシタ。毎
日、マウスの尿を採取し、臨床検査試薬（商品名：ウリ
ステックス■、マイルス・工具製）を用いてグルコース
濃度を調べた。

第２表に示すようにＰＱＱ・２Ｎａを投与したマウスの
尿からは糖が検出されたが、ＰＱＱ・トリメチルエステ
ルおよびＰＱＱ・トリアリルエステルを投与した全ての
マウスの尿からは、糖が検出されなかった。

すなわちＰＱＱは腎毒性が認められたが、ＰＱＱ・トリ
エステル類では腎毒性が認められなかった。

第２表り゛ルコースク゛ルコースグ゛ルコースクパルコースク”°ルコースク゛′ルコース検出されず０．１０　ｇ／改０．２５　ｇ／ＪＯ，５０ｇ／ａ１．００　ｇ／ｄ９２．００　ｇ／θ （３）血液検査による腎毒性（１）急性毒性試験と同様にして、ＰＱＱ・２ＮａおよびＰＱ
Ｑ・トリアリルエステルを投与し、マウスを飼育した。

投与１日後に絶食（水は与える）し、さらに１８時間後
に採血して血清を得た。血清中のグルコース、尿素態窒
素およびクレアチニン（Ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）を臨床
検査試薬（商品名：富士ドライケムスライド、富士フィ
ルム製）を用いて調べた。なお、各々の値は８匹の平均
値で示した。結果を第３表に示す。

ＰＱＱ・２Ｎａ投与では、グルコースの大幅な減少、尿
素およびクレアチニンの大幅な増加がみられ、腎毒性が
認められた。これに対してＰＱＱ・トリアリルエステル
投与では、グルコース、尿素およびクレアチニンのそれ
ぞれの含有量は、　「無投与Ｊの場合と大差はなく、腎
毒性は認められなかった。

第３表（４）血液検査による腎毒性（２）急性毒性試験と同様にして、ＰＱＱ・トリメチルエステ
ルを投与し、マウスを飼育した。なお、マウス体重１ｋ
ｇ当たりの投与量は１５０　、４００　Ｂおよび１１０
０ＯＩｌｌ１とした。

投与１日後に絶食（水は与える）し、さらに１５時間後
に採血して血清を得た。血清中のグルコース、尿素態窒
素およびクレアチニンを臨床検査試薬（商品名：富士ド
ライケムスライド、富士フィルム製）を用いて調べた。

なお、各々の値は８匹の平均値で示した。結果を第４表
に示す。

ＰＱＱ・トリメチルエステルを１０００　ｒｎｇ／ｋｇ
マウス投与しても、腎毒性は認められなかった。

第４表（以下余白）〔実施例〕以下に、本発明に係わるＰＱＱ・トリエステル類の肝障
害抑制効果を示した実施例を示すが１本発明はこれらの
実施例に限定されるものではない。

実施例１四塩化炭素（ＣＣＩ４）誘発肝障害に対するＰＱＱ・ト
リエステル類の薬理効果（１）ＳＤラット（雄、７週齢、体重的２２０ｇ、日本チャー
ルズリバー■より購入）を２０匹用意し、５匹づつ４群
（Ａ−Ｄ）に分けた。全てのラットを１６時間絶食させ
、６群にはＰＱＱ・トリメチルエステル１ｍｇ／−を含
む液を、Ｄ群にはＰＱＱ・トリアリルエステル１　ｍｇ
／−を含む液を、それぞれ１．１ｄラツトの腹腔内へ投
与し、さらに４０分後にそれぞれ同量のＰＱＱ・トリエ
ステル類を腹腔内へ投与した。

なお、ＰＱＱ・トリエステル類は１％のＴｗｅｅｎ　８
０を含む生理食塩水に懸濁したものを用いた。Ｂ群には
、生理食塩水１．１ｍｌをＰＱＱ・トリエステル類の代
わりに腹腔内へ投与した。さらに２０分後に、３〜０群
のラットに１０容量％の四塩化炭素（オリーブ油に溶解
）を胃内へ２．２−づつ投与した。ＡＷ−のラットには
、ＰＱＱ・トリエステル類および四塩化炭素を投与しな
かった。

四塩化炭素を投与してから２４時間後に、全てのラット
について腹大動脈から採血を行い、遠心分離により血清
を得た。

血清中のＧＰＴ、ＧＯＴおよび総ビリルビン量を臨床検
査試薬（商品名：富士ドライケムスライド、富士フィル
ム製）を用いて測定した。その結果を第５表に示す。な
お、それぞれの値は５匹のラットの平均値である。

、四塩化炭素投与により、増加したＧＰＴ、Ｇ。

Ｔおよび総ビリルビン量がＰＱＱ・トリエステル類投与
によりいずれも大幅に減少しており、ＰＱＱ・トリエス
テル類は肝障害抑制効果があることが分かる。

（以下余白）第５表実施例２四塩化炭素（ＣＣ１４）誘発肝障害に対するＰＱＱ・ト
リエステル類の薬理効果（２）ＳＤラット（雄、７週齢、体重的２６０ｇ、日本チャー
ルズリバー■より購入）を４０匹用意し、５匹づつ８群
（Ａ−Ｈ）に分けた。全てのラットを１８時間絶食させ
、Ｃ＃には、ＰＱＱ・トリメチルエステル２ｍｇ／−を
含む液を、Ｄ群には、ＰＱＱ・トリメチルエステル１０
ｍｇ／−を含む液を、Ｅ群には、Ｐ、ＱＱ・トリメチル
エステル２０ｍｇ／ｍＱを含む液を、Ｆ群には、ＰＱＱ
・トリアリルエステル２ｍｇ／ｍＱを含む液を、Ｇ群に
は、ＰＱＱ・トリアリルエステル１０！Ｉｇ／−を含む
液を、Ｈ群には、ＰＱＱ・トリアリルエステル２０ｍｇ
／−を含む液を、それぞれ１．３−ラットの腹腔内へ投
与し、さらに５０分後にそれぞれ同量のＰＱＱ・トリエ
ステル類を腹腔内へ投与した。なお、ＰＱＱ・トリエス
テル類は１％のＴｗｅｅｎ　８０を含む生理食塩水に懸
濁したものを用いた。Ｂ群には生理食塩水１．３−をＰ
ＱＱ−’−リエステル類の代わりに腹腔内へ投与した。

さらにＺＯ分後に、Ｂ−Ｈ群のラットに１２容量％の四
塩化炭素（オリーブ油に溶解）を腹腔内へ０．６−づつ
投与した。Ａ群のラットには、ＰＱＱ・トリエステル類
および四塩化炭素を投与しなかった。

血清中のＧＰＴ、ＧＯＴおよび総ビリルビン量を臨床検
査試薬（商品名：富士ドライケムスライド、富士フィル
ム製）を用いて測定した。その結果を第６表に示す。な
お、それぞれの値は５匹のラットの平均値である。

四塩化炭素投与により、増加したＧＰＴ、Ｇ。

Ｔおよび総ビリルビン量がＰＱＱ・トリエステル類によ
りいずれも大幅に減少しており、ＰＱＱ・トリエステル
類は肝障害抑制効果があることが分かる。

（以下余白）第６表実施例３Ｄ−ガラクトサミン誘発肝障害に対するＰＱＱ・トリエ
ステル類の薬理効果（１）ＳＤラット（雄、７週齢、体重的２４０ｇ、日本チャー
ルズリバー■より購入）を４０匹用意し、５匹づつ８群
（Ａ−Ｈ）に分けた。全てのラットを１６時間絶食させ
、Ｃ′＃には、ＰＱＱ・トリメチルエステル０．４ｍｇ
／ｄを含む液を、Ｄ群には、ＰＱＱ・トリメチルエステ
ル１．０ｍｇ／＋ｎＱを含む液を、Ｅ群には、ＰＱＱ・
トリメチルエステル２．０ｍｇ／ｄを含む液を、Ｆ群に
は、ＰＱＱ・トリアリルエステル０．４ｍｇ／ｍＱを含
む液を、Ｇ′！＃には、ＰＱＱ・トリアリルエステル１
．０　Ｂ／威を含む液を、Ｈ群には、ＰＱＱ・トリアリ
ルエステル２．０ｍｇ／ｍｉ２を含む液を、それぞれ１
．２−ラットの腹腔内へ投与し、さらに４０分後にそれ
ぞれ同量のＰＱＱ・トリエステル類を腹腔内へ投与した
。なお、ＰＱＱ・トリエステル類は１％Ｔｗｅｅｎ　８
０を含む生理食塩水に懸濁したものを用いた。Ｂ群には
生理食塩水］、２ＪをＰＱＱ・トリエステル類の代わり
に腹腔内へ投与した。さらに２０分後に、Ｂ−Ｈ群のラ
ットにＤ−ガラクトサミン２ｇを生理食塩水１０ｍＱに
溶解した液を、それぞれ１．２威づつ皮下投与した。Ａ
群のラットには、ＰＱＱ・トリエステル類およびＤ−ガ
ラクトサミンを投与しなかった。

Ｄ−ガラクトサミンを投与してから２３時間後に、全て
のラットについて腹大動脈から採血を行い、遠心分離に
より血清を得た。血清中のＧＰＴ、ＧＯＴおよび総ビリ
ルビン量を臨床検査試薬（商品名：富士ドライケムスラ
イド、富士フィルム製）を用いて測定した。その結果を
第７表に示す。なお、それぞれの値は５匹のラットの平
均値である。

Ｄ−ガラクトサミン投与により、増加したＧＰＴ、ＧＯ
Ｔおよび総ビリルビン量がＰＱＱ・トリエステル類によ
りいずれも大幅に減少しており、ＰＱＱ・トリエステル
類は肝障害抑制効果があることが分かる。

（以下余白）第７表実施例４Ｄ−ガラクトサミン誘発肝障害に対するＰＱＱ・トリエ
ステル類の薬理効果（２）ＳＤラット（雄、７週齢、体重的２６０ｇ、日本チャー
ルズリバー■より購入）を４０匹用意し、５匹づつ８群
（Ａ−Ｈ）に分けた。全てのラットを１８時間絶食させ
、０群には、ＰＱＱ・トリメチルエステル１ｍｇ／−を
含む液を、Ｄ＃には、ＰＱＱ・トリメチルエステル２ｍ
ｇ／ｄＱを含む液を、Ｅ群には、ＰＱＱ・トリメチルエ
ステル３ｍｇ／ｄを含む液を、Ｆ群には、ＰＱＱ・トリ
アリルエステル１ｍｇ／ｍＱを含む液を、Ｇ群には、Ｐ
ＱＱ・トリアリルエステル２　ｍｇ／赫を含む液を、Ｈ
群には、ＰＱＱ・トリアリルエステル３ｍｇ／ｄを含む
液を、それぞれ１．３ｎ＆をラットへ経口投与し、さら
に４０分後にそれぞれ同量のＰＱＱ・トリエステル類を
経口投与した。なお、ＰＱＱ・トリエステル類は１％Ｔ
ｗｅｅｎ　８０を含む生理食塩水に懸濁したものを用い
た。ＢｉＦ３には生理食塩水１．３−をＰＱＱ・トリエ
ステルの代わりに腹腔内へ投与した。さらに２０分後に
、Ｂ−Ｈ群のラットにＤ−ガラクトサミン２ｇを生理食
塩水１０−に溶解した液を、それぞれ１．３−づつ腹腔
内へ投与した。Ａ群には、ＰＱＱ・トリエステル類およ
びＤ−ガラクトサミンを投与しなかった。

Ｄ−ガラクトサミンを投与してから２３時間後に、全て
のラットについて腹大動脈から採血を行い、遠心分離に
より血清を得た。血清中のＧＰＴ、　ＧＯＴおよび総ビ
リルビン量を臨床検査試薬（商品名：富士ドライケムス
ライド、富士フィルム製）を用いて測定した。その結果
を第８表に示す。なお、それぞれの値は５匹のラットの
平均値である。

Ｄ−ガラクトサミン投与により、増加したＧＰＴ−ＧＯ
Ｔおよび総ビリルビン量がＰＱＱ・トリエステル類によ
りいず九も大幅に減少しており、ＰＱＱ・トリエステル
類は肝障害抑制効果があることが分かる。

第８表〔発明の効果〕ＰＱＱ・トリエステル類が、投与方法にかかわらず肝障害抑制作用を有することから、肝障害の予防および治療薬として利用される。

特許呂願人三菱瓦斯化学株式会社代表者四角４二代理人

Claims

【特許請求の範囲】一般式 I で示されるピロロキノリンキノントリエステ
ル類を有効成分とする肝障害抑制剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）（Ｒは、低級アルキル、アルケニル、あるいはベンジル
基）