JPH0451900A - 大腸菌群検出用培地 - Google Patents
大腸菌群検出用培地Info
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Abstract
め要約のデータは記録されません。
Description
つ正確に検出することのできる大腸菌群検出用培地に関
する。
りによって、食品、医薬品、化粧品、飲料水、尿等中に
存在する大腸菌群を検出することが盛んになってきた。
キシコレート培地を用いて24時間培養した後、発育し
た菌のコロニー数を算出する方法、あるいはブリリアン
トグリーン乳糖ブイヨン(BGLB)、乳糖ブイヨン等
を用いて24〜48時間培養した後、ガスの産生が認め
られる試験管の本数を数えて菌数を算定する方法が知ら
れている。
に適合するためには迅速な検査法が望まれ、微生物が増
殖する際に変化する電気的抵抗を利用した迅速検出法や
、微生物のもつATPを測定する方法等が開発された。
しも満足できるものではなかった。
ラクトシド(4−MUG)を含む培地を使用して、大腸
菌群が産生ずるβ−ガラクトシダーゼによって4−Mt
lGを4−メチル−ウンベリフェロン(4−Mtl)に
変化させ、この4−Mtlの蛍光を測定する大腸菌群の
迅速検出法が報告された(特開昭56−84797号)
。しかし、この方法も、その蛍光を部屋を暗くしてt+
Vランプを用いて肉眼で観察するか、あるいは蛍光測定
リーダーを用いて測定しなければならず、操作が厄介で
あるという欠点があった。
トロフェニル)−5−フェニル−2Hテトラゾリウムク
ロライド[INT] 、3−(4,5−ジメチル−2−
チアゾリル)−2,5−ジフェニル−2Hテトラゾリウ
ムクロライド[MTT)又は2,3.5−)リフェニル
テトラゾリウムクロライド[TTCIを含む培地を使用
し、これらの化合物が微生物の細胞壁に取り込まれると
、微生物がもつ脱水素酵素によって赤色〜紫色のホルマ
ザンを生成することを利用して大腸菌群を検出する方法
が知られている。しかしながら、この方法も、脱水素酵
素をもつ微生物であれば着色を生ずるので選択性に欠け
ると共に、その着色の範囲はコロニーの大きさに限られ
るという欠点があった。
大腸菌群を検出する方法が望まれていた。
、上記目的にあった培地を得ることに成功した。
−3−インドリル−β−D−ガラクトシド(以下、Bl
ugalと称する)又は5−ブロモ−4クロロ−インド
リル−β−D−ガラクトシド′(以下、Xgalと称す
る)を添加したことを特徴とする大腸菌群検出用培地を
提供するものである。
する一群の微生物で、エシェリキャ属、サイトロバクタ
ー属、クレブシェラ属、エンテロバクタ−属、セラチャ
属に属するものである。
から用いられている上記微生物の増殖に適したものであ
ればどのような培地でもよいが、生育速度の高い培地、
例えばプレインハートインフュージョン寒天培地(BH
I)、トリプトソーヤ寒天培地(TSA)及び本発明者
によって新たに調製されたに3培地等が好ましい。
l及びXgalは培地中に10−3M 〜10−’M程
度添加するのが好ましい。
菌群の存在を検出するには、当該培地に被検体を加えて
約37℃で約18時間培養する。
る段階で特異的に酵素(β−ガラクトシダーゼ)を産生
じ、これと基質が反応して着色するので大腸菌群の存在
を確認することができる。
l x 10−’MXgal、 0.01%INTST
TC又はMTTを添加し、これに7種の大腸菌群を接種
し、37℃で18時間培養を行い、このときに形成され
たコロニーの染色斑の直径を実体顕微鏡を用いて測定し
た。その結果を表−1に示した。
lugalを添加し、これにそれぞれ7種の大腸菌群を
接種し、37℃で18時間培養を行い、このときに形成
されたコロニーの染色斑の直径を実体顕微鏡を用いて測
定した。なお、対照として従来から用いられているデシ
キシコレート培地(デソ)と比較した。その結果を表−
2に示した。
10g 塩化ナトリウム 5gリン酸−水素
カリウム 2gクエン酸鉄アンモニウム
2gデオキシコール酸ナトリウム 1
gニュートラルレッド 0.033g寒
天 15g 実施例3 大腸菌群の増殖に適した培地にI X 10−3MBl
ugalを添加し、これにそれぞれ7種の大腸菌群を接
種し、37℃で培養を行い、このときに形成されたコロ
ニーの染色斑の直径を実体顕微鏡を用いて経時的に測定
した。なお、対照として従来から用いられているデシキ
シコレート培地(デソ)と比較した。その結果を表−3
に示した。その結果、どの菌種においても本発明培地の
方がデソ培地に比べ、見かけ上のコロニーの大きさが同
一時間で大きいことが詔tられ、より早い時間からコロ
ニー計測が可能となった。
地ニ トリブチケースペプトン 10gフィトンペブ
トン 5g塩化ナトリウム
5g酵母エキス(Dirco)
5gリン酸−水素二カリウム 2.5g
ピルビン酸ナトリウム 1g硝酸カリウム
1gラウリル硫酸ナトリウム
0.1g寒天 3g 精製水 10(10d〔発明の
効果〕 本発明の大腸菌群検出用培地を使用すると、大腸菌群の
産生じた酵素が存在する範囲が全て着色し、寒天平板に
形成された実際のコロニーの太きさよりも太き(見える
ので、より早い時間に正確にコロニーの計測が可能であ
るという特長を有する 以上
Claims (1)
- 1、大腸菌群増殖用培地に5−ブロモ−3−インドリル
−β−D−ガラクトシド又は5−ブロモ−4−クロロ−
インドリル−β−D−ガラクトシドを添加したことを特
徴とする大腸菌群検出用培地。
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-
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- 1990-06-15 JP JP15706390A patent/JP2879698B2/ja not_active Expired - Lifetime
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