JPH04507089A - 安定なアスコルビン酸組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 安定なアスコルビン酸組成物 発明の背景 本発明は、Ｌ−アスコルビン酸を含有し、皮膚への紫外線による障害を防止する 安定な局所的組成物に関する。特に、本発明は、約１％（Ｗ／Ｖ）以上のＬ−ア スコルビン酸濃度を提供し、ｐＨを約３．５以下に維持することにより水溶液中 で安定化された、Ｌ−アスコルビン酸（ビタミンＣ）を含有する局所的組成物に 関する。

紫外線（ＵＶ）の照射によりもたらされる皮膚の損傷を防止するための道を見つ けるために、かなりの努力が費やされてきた。防止手段は、それが皮膚に入り込 む前にＵＶ照射を物理的に阻止又は吸収することを含んでいる。この技術は有効 であるが、これらの従来の太陽光阻止剤又は吸収剤は、照射を受けるごとにその 前に適用しなければならず、また水で洗浄しなければならないため、面倒である 。こうして、例えば、泳ぐたびに再び適用しなければならない。更に、これらの 従来の組成物の多くの長期の副作用は知られていない。

Ｌ−アスコルビン酸は、酵素の補助因子からビタミンＥの欠乏に対する“代用剤 までの多くの公知の生物学的機能を有している。例えば、Ｅｎｇｌｉ！ｄ及びＳ ｅ百Ｉｅｒ著”Ｔｈｅ　ｂｏｉｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆＡ ｓｃｏｒｂｉｃ　Ａｃ１ｄ”　Ａｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｎｕｌｒｉ、６：３６５− ４０６．　（１９８６）　ＨＫｕｕ口及びＴａｐｐｔｌ著”Ｔｈｅ　Ｅｆｆｅｃ ｔ　ｏｌ　ＶｉｆａＩｌｉｎ　Ｃｏｎ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　Ｌｉｐｉｄ　Ｐｅｌ＋ ｏｘｉｄａｊｉｏｎ　ｉｎ　Ｇｕｉｎｅｘ　Ｐｉｇ＋ａｓ　Ｍｅｘｓｕｔｅｄ　 ｂ７　Ｐｅｌ１ｌｘｏｅ　ａｎｄ　Ｅｆｈｘｕ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ、−Ｌｉ ｐｉｄ＋１８：　２７１−７４　（１９８３）参照。後者の機能は、部分的にそ の“耐酸化性”状態に負っている。

更に、アスコルビン酸が、より高い濃度で超酸化物及びヒドロキシルラジカルと 反応することが知られている。超酸化物及びその結果発生した過酸化水素及び水 素ラジカルは、種々の、通常の及び病的な状態の下で、生体内で発生することが 知られている酸素含有遊離ラジカルである。全く単純に、これらのラジカルは、 サンバーンから老化までのすべての原因となるものと考えられていた。これらの ラジカルは、脂質膜を破壊し、ＤＮＡを切断し、酵素を不活性化する等を行う。

酸素ラジカルの有害な挙動を立証する多くの作業が、過去２０年間なされてきた 。この問題に関する幾つかの最近のテキストを以下に示す。

０ｘ７−＋ａｄｉｃａｌｉ　ｉｎ　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇ７　＆　 Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ、　Ｄ、Ｃｓ＋ｕｆｌｉ、１．　Ｆｒ１ｄｏｖｉｅｈ、１． 　ＭｃＣｏｒｄ、ｅｄ＋、、（Ａｌａｎ　Ｌｉ５ｓ、Ｉｎｃ。

Ｎｅｗ　Ｙｏｌｋ、１９８８）　； Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｒｏｌｅ　ｏｌ　Ｒｅａｃｔｉｖｅ　Ｏｘ７ｇｅｎ　５ ｐｅｓｉｅｓ　ｉｎ　５ｋｉｎ。

０、　ｌ１ｉｙａｉｓｈｉ、Ｓ、Ｉｎａｍｕ＋ａ、　Ｙ、　Ｍａ７ａｃｈｉ、ｅ ｄｓ、（ＥＩ＋ｒｖｉｅ＋。

Ｐｉｅｓ（Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、１９８７）　：Ｆｔｅｅｅ　Ｒａｄｉｃａｌｓ、 　Ａｇｉｎｇ　ａｎｄ　Ｄｅｇｅｎｅ＋ａｆｉｖｅ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｊ。

Ｅ、Ｊｏｈｎｉｏｎ、Ｊ＋、、　Ｒ，Ｗａｌ［ｏｒｄ、　Ｄ、　Ｂａｒｍｏｎ、 １．　Ｅ、　Ｍｉｑｕｅｌ。

ｃｄ＋、　（＾ｌ！ＩＩ　Ｌｉ５ｓ、　Ｉｎｃ、Ｎｅｗ　Ｙｏｌｋ、　１９８６ ）　；Ｆｒｅｅｅ　Ｉｔｘｄｉｃａｌ＋　ｉｎ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｍｅ ｄｉｃｉｎｅ、Ｂ、旧１ｉｗｅｌｌａｎｄ　Ｊ、Ｍ、Ｃ，Ｇｕｌｔｅ＋ｉｄｇｅ 、ｅｄｓ、　（Ｃｌａ＋ｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、０ｗ１ｏ＋ｄ、１９８５）　 ；及び ０ｘｉｄｒｔｉｖｔ　ＳＩ＋ｅｓｓ　ｌｌｅｌｍｕｔ　５ｉｅｓ、ｓｄ、（Ａｃ ａｄｔｍｉｃ　Ｐｕ５ｓ、１９８５）。

このテーマに向けられた幾つかのシンポジウムがあり、それらは、υｐｉｏｈｎ シンポジウム（１９８７年４月）からの議事録“酸素ラジカルと皮膚障害“及び Ｎ１目ｏｎｓｌ　Ｈｔｚ目、Ｌｕｎｇ　＆Ｂｌｏｏｄ　Ｉｎ５ｔｔｔｕｌｅ　（ Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｉｎ５ｌｉｊｕｌｅ　ｏｌ　Ｂｅａｌｔｈ、　Ｗａｓｈｉｎ ｇｌｏｎ、　Ｄ、Ｃ，１９８７年１２月）からの議事録“酸素フリーラジカル″ である。

アスコルビン酸は、生体内でのコラーゲンの生成の減少に関する病変のより良い 理解を提供する、生体内でのコラーゲン合成を刺激するものとして示されている 。例えば、Ｓ、　Ｒ，Ｐｉｎｎｅｌｌ、　”Ｒｅｇｕｌａｌｉｏｎ　ｏｉ　Ｃｏ ｌＣｏ１１ａ　Ｂｉｏｓ７ｎｌｈｅ＋ｉｓ　ｂｙ＾ｓｃｏ＋ｂｉｅ　Ａｃ１ｄ　 ：　Ａ　Ｒｅｖｉｅｗ　”　、　Ｙｘｌｅ　）−、Ｂｉｏｌ、　Ｍｅ、ｄ、　５ ８：　５５４−５９　（１９８５）参照。

長く、輝かしい歴史があるし一アスコルビン酸（ビタミンＣ）は、次の構造式を 有するα−ケト−ラクトンとして化学的に定義される。

第２及び３の炭素が二重結合であり、水中で酸をイオン化し得る水素（ｐｋ＝４ ．．２）を含有している。アスコルビン酸はまた、並の強さを待つ還元剤である 。アスコルビン酸の構造を不安定とするこれらの特性は、よく知られており、活 性なアスコルビン酸溶液を調製しようと試みる際に、薬剤師にとって極めて厄介 であった。このように、より高いｐＨではアスコルビン酸は、ますます不安定は アスコルビン酸陰イオンとなる。この不安定さは、以下のものに限定されないが 、幾つかの原因によるものである。

ａ）極性反発力による立体化学的歪み ２−ヒドロキシ基がイオン化するようなものであるならば、それは開環を助ける ２つの負の電荷（他はカルボキシル炭素上にある）を近接して置く。

ｂ）還元剤として作用するアスコルビン酸陰イオンの特性による酸化性劣化 １電子酸化生成物（脱水アスコルビン酸フリーラジカル）は、不均衡となる傾向 にあり、他のアスコルビン酸塩分子及び２電子酸化生成物である脱水アスコルビ ン酸塩を形成し、これは水溶液中では極めて不安定であり、分裂して最終的にＬ −トレオニン酸及びシュウ酸のような種を生成する。遷移金属イオンは、これら の反応に対し、触媒として作用する。

Ｃ）バルクの水の攻撃による劣化 より低いアスコルビン酸濃度又はイオン強度において、水はそれ自体アスコルビ ン酸分子と反応し、劣化させる。こｍｉｃ　Ｐｒｅ＋！、Ｌｏｎｄｏｎ、１９７ ６　）参照のこと。

これらの理由から、この分野で働く科学者は、化粧品の、皮膚科学の、又は眼科 の用途に有用なアスコルビン酸の安定名演液を調製する上で困難に遭遇している 。それにもかかわらず、アスコルビン酸に帰せられる多（の優れた薬学的効果の ため、これらの困難に打ち勝つための多くの試みがなされてきた。

こうして、文献は、非常に低い重量％のアスコルビン酸を用いることにより、又 はアスコルビン酸の誘導体を用いることにより、通常的４．０以上のｐＨの緩衝 液中で形成されたアスコルビン酸組成物について記載している。例えば、Ｔａｋ ａａｈｉｍｘ　ｅｊ　ａｔ、　”＾ｓｃｏ＋ｂｉｃ　Ａｃ１ｄ　Ｅｓｔｅｒｓ　 ａｎｄ　５ｋｉｎ　Ｐｉｇｍｅｎ＋ａｊｉｏｎ、’　八ｍ、Ｐｅｒｆｕｍｅｒ　 ＆　Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ　８６＋　２９　（１９７１年７月）（ヒドロキシル基 をエステル化してアスコルビン酸−３−ホスフェ−ｔ・を形成し、アルカリｐＨ を維持する）；　Ｃ１ｍ１ｎｕａ１　ａｎｄ　Ｗｉｔｃｏｘ、５ｌａｂｌｅ　Ａ ｓｃｏｒｂｉｃ　Ａｃ１ｄ　５ｏｌｕｔｉｏｎ　ｊｏｒ　Ｐａｒｅｎｌｅ＋ａｌ 　ｔｌｔｅ　”　、１．　Ａｍ、Ｐｈａｔｍ、　Ａｓ５ｏｃ、Ｓｅｉ、Ｅｄ、３ ５＋　３６３ｔ１９４６）　Ｌアルカリナトリウム塩で水溶液をバッファーする ）を参照のこと。また、モノチオグリセロールを加え、ｐＨを４〜７に維持する ことによりアスコルビン酸水溶液を安定化することを開示する米国特許第４．３ ６７、１５７号、アスコルビン酸をそのカルシウム又は亜鉛塩に変換し、好まし くはｐＨを７〜７．３に維持することによりアスコルビン酸を安定化することを 開示する米国特許第２．４００．１７１号、脂肪族チオカルボン酸を加え、ｐＨ を５，２〜５．６に維持することによりアスコルビン酸カルシウムを安定化する ことを開示する米国特許第２．４４２．４６］号、チオ糖類でアスコルビン酸を 安定化し、ｐＨを４．０〜６，５に維持することを開示する米国特許第２、５８ ５．５８０号、及び乾燥剤を用いることにより水を０．５重量％に実際に除去す ることを開示する米国特許第４．３７２．８７４号を参照のこと。多くの場合、 これらの方法は、安定な溶液を得る上で成功しているが、かなり高価であり、修 飾されない形のアスコルビン酸よりも望ましからぬ特性を有する生成物を生じた 。

発明の開示 本発明者らは、水中に約１重量％以上のし一アスコルビン酸、好ましくは約３〜 ２０重量％のＬ−アスコルビン酸、より好ましくは約５〜１０重量％のし一アス コルビン酸と、局部的適用のための担体とから基本的に構成される、新規な、経 済的な、安定な局部的に適用される組成物を見出だした。

約１重旦％以上のＬ−アスコルビン酸を含有するどのような組成物も優れた効果 を有するものと期待され、Ｌ−アスコルビン酸の濃度は、水／担体系におけるそ の溶解度により主として制限される。水と担体との比は、１：１以上、より好ま しくは２：１〜１０・１であり、組成物のｐＨは、約３〜３゜５以下、好ましく は約２．５以下である。そのような組成物は、皮膚への容易な浸透を許容するよ うに思われ、紫外線により生じた損傷を阻止する。

本発明を実施する上で有用な局部的適用のための担体としては、これに限定され ないが、アルキレングリコール、又はヒドロキシアルキルセルロースの１種以上 の誘導体との組合わせたアルキレングリコールがある。１つの態様では、アルキ レングリコールは、プロピレングリコールであり、ヒドロキシアルキルセルロー スはヒドロキシプロピルセルロースである。アルキレングリコールとヒドロキシ アルキルセルロースとの組合わせを用いる場合には、アルキレングリコールとヒ ドロキシアルキルセルロースの有用な比は約３０：１〜５゜１であり、特に有用 な比は、３０：１である。水と相溶性を有し、生物学的に許容し得る、当業者に 知られた他の担体が、制限されることなく、本発明の範囲内の等価な組成物を提 供するものと期待される。例えば、エタノール及びプロパツールのようなアルコ ール、ブチレン又はヘキシルギリコールのようなグリコール、ソルビトールのよ うなポリオールを採用してもよい。或いは、ポリエチレン又はポリプロピレング リコール、鉱浦、又はグリセロールを用いることが出来る。生物学的に許容し得 るヒドロキシアルキルセルロースも又、本発明により意図される。

当業者により理解されるように、アスコルビン酸は、Ｄ−イソアスコルビン酸の ようなアスコルビン酸の還元性類似体を加えることにより、又は多分、これに限 定されないが、グルタチオン、Ｌ−システアミン等のような他の少量の還元性組 成物を加えることにより、提供されてもよい。そのような形は、請求されている 組成物と等価な組成物を提供するものと期待される。

使用される水は、蒸留水又は脱イオン水が好ましいが、アスコルビン酸組成物の 安定性に影響を与えない汚染物質を含有しないどのような水を用いてもよい。純 度の変化のアスコルビン酸組成物の安定性に対する効果は、Ｍｅｕｃｃｉ　ｃｌ 　ａｌ、。

”　Ａｓｃｏｒｂｉｃ　Ａｃ１ｄ　５ｔａｂｉｌｉｔｙ　ｉｎ　Ａｑｕｅｏｕｓ 　５ｏｌｌｉｏｎｓ、”　ＡｃｌａＶｔｊｉｍｉｎｏｌ、Ｅ＋＋Ｂｍｏ１．　７ Ｄ−４）　：　１４７−５４　（１９８５）において議論されている。

ジエチレントリアミンペンタ酢酸（Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ）又はエチレンジアミンージ （０−ヒドロキシフェニル酢酸）（ＥＤＤＨＡ）のような金属キレート剤を少量 （０，００１％〜０．１％（ｗ／ｖｘ））添加することにより、特に低濃度で用 いたときに、アスコルビン酸に追加の安定性を提供することが出来る。

組成物の必要なｐＨは、２％以上のアスコルビン酸がプロトン化された、荷電さ れない形に維持されることを確保する。

理論により縛られることは望まないが、本発明者らは、本発明に使用されるアス コルビン酸のプロトン化された形が、幾つかの理由から皮膚科学的に重要である と考えている。第１に、この形は、２つの酸素基のイオン性反発を除去し、分子 を安定化する。第２に、アスコルビン酸のプロトン化された形は荷電されないの で、皮膚への侵入（それ自体的３−５のｐＨを有する）は促進されるべきである 。１１，５ｃｈａｅｆｅｒ　ｅｊ　ａｔ、、５ｋｉｎ　Ｐｅｒ＋１ｌｓａｂｉｌ Ｈ７７３９−４０［Ｓｐｒｉａｇｅｒ−Ｖ！ｒｌｘｇ　Ｃｏ、、Ｂｅｒｌｉｎ、 １９Ｂ２）を参照のこと。

図面の簡単な説明 第１図は、水性化粧料ビヒクル中の種々の濃度のし一アスコルビン酸の安定性を 示す図。

第２図は、Ｌ−アスコルビン酸の安定性に対するプロピレングリコール濃度の効 果を示す図。

第３図は、種々のｐＨにおける５％Ｌ−アスコルビン酸水溶液の安定性を示す図 。

第４図は、ｐＨ２，４の５％Ｌ−アスコルビン酸水溶液のスペクトル分析を示す 図。

第５図は、ｐＨ２，４の５％Ｌ−アスコルビン酸水溶液のスペクトル分析を示す 図。

第６図は、Ｌ−アスコルビン酸水性配合物で処理された紫外線照射された豚の皮 膚の顕微鏡写真図。

第７図は、家畜豚の急性のサンバーンに対する５％Ｌ−アスコルビン酸水性配合 物及びハイドロアルコールビヒクル中の５％Ｌ−アスコルビン酸の効果を示す図 。

第８図は、豚の急性サンバーン反応に対する５％Ｌ−アスコルビン酸水性配合物 の後照射適用の効果を示す図。

発明を実施するための最良の形態 以下の実施例は、例示の目的のみであり、本発明の範囲を何ら制限するものでは ない。シマズＵＶ−２６０シュアルビーム分光光度計を用いて、以下の条件で分 光分析がなされた。

アスコルビン酸のサンプルは、（特にことわらない限り）室温に維持され、頭部 空間の空気を変化させることにより、光から遮蔽された。種々の時間において、 それぞれのサンプルから分別し、分光光度計のサンプルビームにおける石英セル 内の水中に希釈された。参照セルは、水で希釈されたビヒクル又は水のみ（相違 は検出されなかった）のいずれかを収容Ｉ、でいた。次いて、２００〜４００ｎ ｍからスペクトルを採り、濃度を決定するために、（特にことわらない限り）最 大の吸収における光密度を用いた。

実施例Ｉ 実施例１は、本発明の組成物の製造及び安定性を示す。

８０ｍ１の蒸留、脱イオン水に１０ｇのＬ−アスコルビン酸（シグマ社から市販 ）を溶解し、この１００ｍ１にプロピレングリコール（アルドリッヒケミカル社 から購入した１゜２−プロパンジオール）を加えるすることにより、１０％のし 一アスコルビン酸（Ｗ／Ｖ）の濃縮溶液を調製した。任意に、１ｇのヒドロキシ プロピルセルロース（平均分子量３゜０１０００）を加えてもよい。最大の安定 性を１尋るためには、この溶液は、最小の頭部空間をもって及び／又は窒素でパ ージされて、約２２℃以下の温度で、光不透過性ボトル内に貯蔵すべきである。

実施例■では、８０％のＨ２０（Ｖ／ｖ）　、２０％のプロピレングリコール（ Ｖ／Ｖ）　、１％のヒドロキシプロピルセルロース（Ｗ／Ｖ）中の１−１０％の し一アスコルビン酸溶液を４種調製し、室温下、暗中で（約１０％の頭部空気空 間を有する）蓋をしたマイクロフユージチューブ内に保存した。

指定された時間に、分取した試料を取りだし、残留アスコルビン酸を分光分析に より決定した。その結果を第１図に示す。

実施例ＩＩ 実施例１１は、Ｌ−アスコルビン酸の安定性がプロピレングリコールの濃度によ り影響されないことを示す。種々の濃度のプロピレングリコールにおいて、２％ のＬ−アスコルビンＭ溶液を調製した。これらを室温下、暗中で約２０％の頭部 空気空間を有する蓋をしたマイクロフユージチューブ内に貯蔵した。４．５及び ８週間で、分取した試料を取りだし、残留アスコルビン酸を分光分析により決定 した。その結果を第２図に示す。

実施ｆｑＩ　Ｉ　＋ 実施例ＩＩ＋は、８０％のＨ２Ｏ（ｖ／ｖ）、２ｏの％プロピレングリコール（ Ｖ／Ｖ）　、１％のヒドロキシプロピルセルロース（Ｗ／Ｖ）中のＬ−アスコル ビン酸の安定性に対するｐＨの効果を示す。５％のアスコルビン酸溶液を種々の ｐＨ１：調整し、室温下、暗中で約２５％の頭部空気空間を有する蓋をしたマイ クロフユージチューブ内に保存した。６及び１２週間で、分取した試料を取りだ し、残留アスコルビン酸を分光分析により決定した。これらの結果を第３図に示 す。

比較的高いｐＨにおいてさえ、５％の濃度のアスコルビン酸は全く安定であるこ とが明らかである。

実施例１ｖ 実施例ＩＶは、例えアスコルビン酸が安定であっても、比較的高いｐＨで、８０ ％（７）Ｈ２Ｏ（Ｖ／Ｖ）　、２０％のプロピレングリコール（Ｖ／Ｖ）　、１ ％のヒドロキシプロピルセルロース（Ｗ／　Ｖ　）中の５％のＬ−アスコルビン 酸溶液にスペクトル変化が生じることを示している。実施例ＩＩ＋からのｐＨ２ ，４〜４．２の組成物を、調！！８！後直ちに、又は実施例ＩＩ＋におけるよう に１２週間後のいずれかにスキャンした。

そのスペクトルを第４図及び第５図に示す。これらの結果は、溶液の“黄ばみ” の増加により明らかなように、反応が、近紫外線への主要なピークのスペクトル の広がりに導＜ｐＨ４゜２で生じていることを示している。

実施例Ｖ 実施例Ｖは、蒸留、脱イオンＨ２０及び配合物（≧３％）で用いた高濃度のアス コルビン酸／アスコルビン酸塩を用いる事により、キレート剤がアスコルビン酸 塩を安定化するわずかな傾向を示すことを例示している。比較として、プロピレ ングリコール／エタノール／上２０ビヒクル中の１％のアスコルビン酸塩が、０ ．１ｍＭのＤＴＰＡと共に、又はそれなしに作られたとき、アスコルビン酸塩の 安定性に対するＤＴＰＡのわずかな保護効果が見出だされた。しかし、プロピ光 分析により、ＤＴＰＡはもはや保護効果を示さなかった。

そのデータを表工に示す。キレート剤の効果は、実施例Ｖで用いられているもの 、または成分のいずれかが金属イオンで汚染されているものより純粋でない水で 配合された組成物において増加することが期待される。

実施例Ｖｌ 実施例ｖ１は、８０％のＨ２Ｏ，２０％のプロピレングリコール、１％のヒドロ キシプロピルセルロースの化粧料調剤における、１％（Ｗ／　Ｖ　）及び１０％ （Ｗ／Ｖ）の濃度でのＮａ−アスコルビン酸塩の安定性に比較して、Ｌ−アスコ ルビン酸の安定性がより大きいことを示している。１％では、Ｌ−アスコルビン 酸は、Ｌ−アスコルビン酸のナトリウム塩よりも少し安定である。１０％の濃度 では、Ｌ−アスコルビン酸とアスコルビン酸のナトリウム塩の両方は、分光分析 により顕著な安定性を示している。しかし、アスコルビン酸のナトリウム塩は、 ２週間後に、両方の濃度で、かなりの黄色の着色を示しており、一方、Ｌ−アス コルビン酸は、７週間においてさえ、わずかな変化のみを示している。その結果 を表Ｉｔに示す。

実施例Ｖｌｌ 実施例Ｖｌｌは、Ｌ−アスコルビン酸の安定化した水性配合物の局所適用による 、紫外線障害からの皮膚の保護を示している。この実験では、ヨークシャ一種の 豚の背中をバリカンで刈り、その領域を８０％のＨ２０（Ｖ／ｖ）　、２０％の プロピレングリコール（ｖ／ｖ）、１％のヒドロキシプロピルセルロース（Ｗ／ Ｖ）中の１０％のＬ−アスコルビン酸溶液、又はビヒクルの参照試料により６日 で５回予備処理した。次いで、背中に約４インチの距離から１０分間、２つのウ ェスチングハウス社のＦＳ−４０サンランプの列で照射した（この照射量は、Ｍ ＥＤ　（最小エリセマル照射量）の約５倍に等しい。）。この領域を、引続き２ ４時間、２回後処理した。

２４時間で、それぞれの部位から５ｍｍのパンチのバイオプシーズを採取し、ヒ スドロジーのため準備した。典型的な結果を第６図の顕微鏡写真に示す。第６図 では、Ａ−Ｌ−アスコルビン酸による処理であり、Ｂ−ビヒクルによる処理であ る。ＵＶに応答しての、外皮における形成異常の基底細胞（サンパーン）の存在 は、皮膚の短波長ＵＶ障害の特徴である。Ｌ−アスコルビン酸により処理された 部位からの断面は、これらの細胞が殆どないことを染めしている。他の相違は、 皮膚の浮腫状の応答を示す全体のじみの強さに関するものである。全く典型的に は、処理されずに照射された皮膚のじみからの断面は、Ｌ−アスコルビン酸によ り処理された皮膚からの断面よりも、じみが少なく、防御された皮膚の浮腫状の 応答の減少を示す。

実施例Ｖｌｌ＋ 実施例Ｖｌｌ＋は、皮膚への紫外線障害に対するし一アスコルビン酸の保護の効 果を示す。実施例Ｖｌｌにおけると同様に処理された動物は、ＵＶ照射前４時間 、最終の予備処理を受けた。加えて、すべての処理された部位を、照射直前にぬ るま湯で洗浄し、サンブロックとして作用する残留溶液を除去した。このことは 、防御が、皮膚により取られたＬ−アスコルビン酸によるものであることを保証 している。これは、最適な性能のために、照射の直前に適用しなければならない 、局所的な、市販されているサンスクリーンとは反対である。

実施例ＩＸ 実施例ＩＸは、皮膚のひどい紫外線照射障害を緩和するためのＬ−アスコルビン 酸の局所的適用の可能性を示す。実施例ＩＸでは、試験動物は照射前に６日間で ５回、（水性配合物又は“ハイドロアルコース性”ビヒクルのいずれかの彰で） Ｌ−アスコルビン酸の５％配合物により予備処理された。６日で、処理された、 及び対照試料の領域を、２つのウエスチングハウス社のＦＳ−４０ランプの列で 照射しまた。照射量は、ＭＥＤの３０倍に等しい。照射後１１日で写真をとった が、この写真は、対照部位に対する、Ｌ−アスコルビン酸で処理された部位の外 観の改善を示している。

実施例Ｘ 実施例Ｘは、Ｌ−アスコルビン酸の水性配合物の局所適用は、ＵＶの照射後に適 用されてさえ、第８図の写真に示すように、優れた創傷治癒効果を有することを 確立している。実施例Ｘでは、実施例ＩＸにおけるように、試験動物が予備処理 され、照射された。この動物の１つの領域（第８図に示す底部列）は、予備処理 を受けなかった。照射後、部位は、後処理を受けないか、又は１日、２日、３日 、４日、５日又は７日に後処理を受けた。また７日については、ビヒクルのみで 後処理を受けた。Ｌ−アスコルビン酸溶液による３〜４日の後処理（第８図の１ 〜Ｊ）では、皮膚の外観は、ビヒクルのみで処理された又は処理されなかった領 域に比較して、皮膚の外観は改善された。

毒性の研究 公式の毒性の研究は行われていないが、１０％溶液（Ｗ／Ｖ）がヒトの顔に１日 につき１回、１週間で５回、３０週間、何ら逆反応なしに適用された。付加的に 、ペンシルバニア大学のＤｒ、　Ｌｏ＋＋ａｉｎｅ　Ｋｌｉｇｍｘｎにより行わ れた予備的研究では、無毛ネズミが、ｐｌ（’２．　１又は３で５％又は１．０ ％のし一アスコルビン酸溶液により、又はｐＨの対照試料により、１週間につき ５回、４週間処理された。これらの局所適用が、毒性又は刺激性を生ずる証拠（ 臨床的又は組織的）は認められなかった。

表１ 高濃度のアスコルビン酸塩の安定性に対する金属キレート剤の効果 残留アスコルビン酸塩％ 試料　２．５週間　３週間 １％アスコルビン酸塩　３１ １％アスコルビン酸塩 ＋０．１ｍＭ　ＤＴＰＡ　４１ ５％アスコルビン酸塩　７３ ５％アスコルビン酸塩 ＋０．１ｍＭ　ＤＴＰＡ　７３ １％のアスコルビン酸塩溶液は、水、プロピレングリコール、エタノール溶液（ １０：　６０　：　３０　；　ｖ／ｖ／ｖ）中で、５％のアスコルビン酸塩溶液 は、水、プロピレングリコール溶液（８０：　２０　；　ｖ／ｖ）中で、所定量 のＤＴＰＡを含んで、又は含むことなく作られた。試料を、蓋をしたチューブ（ 実質的な空気の頭部空間をもった）内に室温下で維持された。分取量を毎日、次 いで１週間採取し、残留アスコルビン酸塩を分光光度分析により測定した。

表１１ 高濃度のし一アスコルビン酸塩及びＮａ−アスコルビン酸塩の安定性の比較 残留量％ 試料　３週間　７週間 １％Ｎａアスコルビン酸塩　７９　６０】％Ｌ−アスコルビン酸　９３　７４ １０％Ｎａアスコルビン酸塩　９７．５１０％Ｌ−アスコルビン酸　１００ アスコルビン酸／アスコルビン酸塩溶液は、８０％水、２０％プロピレングリコ ール、１％ヒドロキシプロピルセルロース中で作られた。試料を、蓋をしたチュ ーブ（約１０％の空気の頭部空間をもった）内に室温下で維持された。分取試料 を指定された時間に採取し、残留アスコルビン酸／アスコルビン酸塩を分光光度 分析により測定した。

第１図 水性化粧料ビヒクル中のし一アスコルビン酸の種々の濃度の安定性 種々の濃度のし一アスコルビン酸を、８０％水、２０％プロピレングリコール、 １％ヒドロキシプロピルセルロースからなるビヒクル中で作り、（約１０％の空 気の頭部空間をもって）室温下で、光から遮蔽した。１日、３週間、７週間後に 、分取試料を石英セル中で希釈し、得られたスペクトルを２００〜４００ｎｍの 間をスキャンした。２６０−２６５ｎｍのピークの光学密度を、Ｌ−アスコルビ ン酸のより低い濃度について記録し、一方、２８０ｎｍにおける光学密度をＬ− アスコルビン酸のより高い濃度について記録した。

１：１％Ｌ−アスコルビン酸 ２：３％Ｌ−アスコルビン酸 ３：５％Ｌ−アスコルビン酸 ４：１０％Ｌ−アスコルビン酸 第２図 Ｌ−アスコルビン酸の安定性に対するプロピレングリコールの濃度の効果 種々の濃度のプロピレングリコールを含むし一アスコルビン酸の水溶液（２％ｗ ／ｖ）（約２０％の空気の頭部空間を有する）蓋をされたマイクロヒュージチュ ーブ内で、室温下で、暗中に維持した。４．５週間、８週間で、分取試料をそれ ぞれのサンプルから除去し、残留アスコルビン酸を図１に示すように記録した。

０：０％プロピレングリコール ロ：１０％プロピレングリコール Δ：２０％プロピレングリコール ★：４０％プロピレングリコール ◆：６０％プロピレングリコール 第３図 種々のｐＨにおけるし一アスコルビン酸の５％水溶液の安定性 ５％のＬ−アスコルビン酸溶液を、所定のｐＨで、８０％水、２０％０％プロピ レングリコール％ヒドロキシプロピルセルロースからなるビヒクル中で製造した 。試料を光がら遮蔽して（約２０％の空気の頭部空間をもって）、４℃で貯蔵し た。１日、６週間、１２週間後に、分取試料をそれぞれの試料から除去し、残留 アスコルビン酸を図１に示すように記録した。

１：ｐＨ２，４；　２　二　ｐＨ３，２；　３：ｐＨ４，２；４・ｐＨ４，５； 　５：ｐＨ５，１ 条件を第３図に示した。製造直後、及び１２週間の貯蔵後、スペクトルをとった 。

条件を第３図に示した。製造直後、及び１２週間の貯蔵後、スペクトルをとった 。

動物の背中の部位を、照射前６日に８回、アスコルビン酸又はビヒクル対照試料 で予備処理した。最後の予備処理は、照射前４時間である。照射は、２つのウェ スチング／Ｘウス社（７）Ｆ　Ｓ　−４０サンランプを用いて１ｏ分間行った。

４ｍｍのパンチバイオプシーを２４時間後にとり、通常の方法で固定し、（Ｈｅ ｍａｌｏｘｙｌｉｉｎ　ａｎｄ　Ｅｏｓｉｎ　）で染色した。矢印は、サンバー ン細胞をさしている。

第７図 家畜豚の急性のサンバーンに対する５％Ｌ−アスコルビン酸水酸水性物及びハイ ドロアルコールビヒクル中の５％Ｌ−アスコルビン酸の効果 ２種のアスコルビン酸溶液（又はそれらのビヒクルのみ）２を６日で５回、大量 に適用した。７日目に、動物に６０分間紫外線を照射した（４インチの距離で２ つのＦＳ−４０サンランプで）。照射後１１日に、写真をとった。

ＶＣ−Ｉ　−５％Ｌ−アスコルビン酸水酸水性物ＶＣ−１−Ｖ−ＶＣ−１１：’ ｌ：クルノみＣＢ−ハイドロアルコールビヒクル中の５％Ｌ−アスコルビン酸 ＣＢＶ−Ｍ−ハイドロアルコールビヒクルのみ第８図 豚の急性サンバーン反応に対する５％Ｌ−アスコルビン酸水酸水性物の後照射適 用の効果 先頭の列は、アスコルビン酸（Ａ−Ｆ）又はビヒクルの適用を、６日で５回、予 備照射を受けた。後部の列は、予備処理を受けなかった。先頭及び後部の列の選 択された部位は、後照射の期間を変化させてＬ−ＡＡ適用を受けた。

Ａ：更なる適用なし Ｂ：Ｌ−ＡＡ、１日 Ｃ：　Ｌ−ＡＡ、２日 Ｄ　：　Ｌ−ＡＡ、３日 Ｅ　：　Ｌ−ＡＡ、５日 Ｆ　：　Ｌ−ＡＡ、７日　後照射 Ｇ：Ｌ−ＡＡ、１日 Ｈ：　Ｌ−ＡＡ、２日 １　：　Ｌ−ＡＡ、３日 Ｊ　：　Ｌ−ＡＡ、４日 に：Ｌ−ＡＡ、５日 Ｌ　：　Ｌ−ＡＡ、７日　後照射 ビヒクル部位をＶＣ−Ｉビヒクルで処理し、７日後照射した。

ＦＩＧ　１ （す１場）１ Ｆ　Ｉ　Ｇ、２ ＦＩＧ、７ ＦＩＧ、８ 国際調査報告

Claims (38)

【特許請求の範囲】
1. １．水中に約１％（ｗ／ｖ）以上のＬ−アスコルビン酸と、局部的適用に適する 担体とから基本的に構成され、水と担体との比は１：１以上であり、約３．５以 下のｐＨを有する局所組成物。
2. ２．前記化粧担体は、アルキレングリコールを含む請求の範囲１に記載の組成物 。
3. ３．前記アルキレングリコールはプロピレングリコールである請求の範囲２に記 載の組成物。
4. ４．前記担体は、アルキレングリコールとヒドロキシアルキルセルロースとの組 合である請求の範囲１に記載の組成物。
5. ５．前記アルキレングリコールはプロピレングリコールとヒドロキシアルキルセ ルロースである請求の範囲４に記載の組成物。
6. ６．前記水と担体との比は約２：１〜約１０：１である請求の範囲１に記載の組 成物。
7. ７．前記水と担体との比は約２：１〜約１０：１である請求の範囲２に記載の組 成物。
8. ８．前記水と担体との比は約２：１〜約１０：１である請求の範囲３に記載の組 成物。
9. ９．３〜２０重重％（ｗ／ｖ）のＬ−アスコルビン酸と、８０〜９７％の水と、 局部的適用に適する適する担体とから基本的に構成され、水と担体との比は１： １以上であり、約３．５以下のｐＨを有する局所組成物。
10. １０．前記担体は、アルキレングリコールとヒドロキシアルキルセルロースとの 組合せである請求の範囲９に記載の組成物。
11. １１．前記アルキレングリコールとヒドロキシアルキルセルロースとの比は、３ ０：１〜５：１である請求の範囲１０に記載の組成物。
12. １２．前記アルキレングリコールはプロピレングリコールであり、前記ヒドロキ シアルキルセルロースはヒドロキシプロピルセルロースである請求の範囲１１に 記載の組成物。
13. １３．水中に約１％（ｗ／ｖ）以上のＬ−アスコルビン酸と、局部的適用に適す る担体とから基本的に構成され、水と担体との比は１：１以上であり、約３．５ 以下のｐＨを有する局所組成物を適用する工程を具備する、紫外線による皮膚の 損傷を阻止する方法。
14. １４．前記局所組成物は、３〜２０重量％（ｗ／ｖ）のＬ−アスコルビン酸と、 ８０〜９７％の水と、担体（ｖ／ｖ）とから基本的に構成される請求の範囲１３ に記載の方法。
15. １５．前記担体は、アルキレングリコールとヒドロキシアルキルセルロースとを 含む請求の範囲１４に記載の方法。
16. １６．前記アルキレングリコールはプロピレングリコールであり、前記ヒドロキ シアルキルセルロースはヒドロキシプロピルセルロースである請求の範囲１５に 記載の方法。
17. １７．前記水と担体との比は約２：１〜約１０：１である請求の範囲１５に記載 の方法。
18. １８．前記水と担体との比は約２：１〜約１０：１である請求の範囲１６に記載 の方法。
19. １９．水中に約１％（ｗ／ｖ）以上のＬ−アスコルビン酸と、局部的適用に適す る担体と、約０．０１〜０．１％の金属キレート剤とから基本的に構成され、水 と担体との比は１：１以上であり、約３．５以下のｐＨを有する局所組成物。
20. ２０．前記金属キレート剤は、ジエチレントリアミンペンタ酢酸、エチレンジア ミンジ（ｏ−ヒドロキシフェニル酢酸）、エチレングリコールビス（β−アミノ エチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸、及びそれらの組合わせか らなる群から選ばれたものである請求の範囲１９に記載の組成物。
21. ２１．皮膚に請求の範囲１，９又は１９に記載の組成物を適用することからなる 皮膚の異常を防止する方法。
22. ２２．皮膚に請求の範囲１，９又は１９に記載の組成物を適用することからなる 皮膚の異常を治療する方法。
23. ２３．前記皮膚の異常は、紫外線の照射により生ずる請求の範囲２１に記載の方 法。
24. ２４．前記皮膚の異常は、紫外線の照射により生ずる請求の範囲２１に記載の方 法。
25. ２５．前記皮膚の異常は、皮膚の炎症である請求の範囲２１に記載の方法。
26. ２６．前記皮膚の異常は、皮膚の炎症である請求の範囲２２に記載の方法。
27. ２７．創傷を受けた後、皮膚に請求の範囲１，９又は１９に記載の組成物を適用 することからなる創傷の治癒速度を増加させる方法。
28. ２８．皮膚に請求の範囲１，９又は１９に記載の組成物を適用することからなる 、皮膚の紫外線照射障害による皮膚の新生物の出現を減少させる方法。
29. ２９．ｐＨが約２．５以下である請求の範囲１，９又は１９に記載の組成物。
30. ３０．前記水は、蒸留水、脱イオン水、及び蒸留脱イオン水からなる群から選ば れたものである請求の範囲１に記載の組成物。
31. ３１．ｐＨが約２．５以下である請求の範囲３０に記載の組成物。
32. ３２．５〜１０重重％（ｗ／ｖ）のＬ−アスコルビン酸と、９０〜９５％の水と 、局部的適用に適する適する担体とから基本的に構成され、水と担体との比は１ ：１以上であり、約３．５以下のｐＨを有する局所組成物。
33. ３３．前記担体は、アルキレングリコールとヒドロキシアルキルセルロースとの 組合せである請求の範囲３２に記載の組成物。
34. ３４．前記アルキレングリコールとヒドロキシアルキルセルロースとの比は、３ ０：１〜５：１である請求の範囲３３に記載の組成物。
35. ３５．前記アルキレングリコールはプロピレングリコールであり、前記ヒドロキ シアルキルセルロースはヒドロキシプロビルセルロースである請求の範囲３４に 記載の組成物。
36. ３６．前記水は、蒸留水、脱イオン水、及び蒸留脱イオン水からなる群から選ば れたものである請求の範囲３２に記載の組成物。
37. ３７．前記組成物は皮膚用組成物であり、前記担体は皮膚用担体である請求の範 囲１，９又は１９に記載の組成物。
38. ３８．請求の範囲１，９又は１９に記載の組成物を目に適用することからなる目 の異常を治療する方法。